甘草多糖提取工艺条件的研究
正交设计优选甘草多糖的提取工艺
正交设计优选甘草多糖的提取工艺作者：刘永岭王艳艳来源：《价值工程》2018年第26期摘要：本文主要对甘草多糖的提取工艺进行研究。
对影响甘草多糖提取的影响因素进行单因素实验研究，根据单因素实验结果设计L9（34）正交实验，最后得出提取温度90℃，提取时间2小时，料液比1：20提取效果为最佳。
Abstract： This article mainly studys on the extraction of Glycyrrhiza polysaccharide. Influencing factor of effect of extracting Glycyrrhiza polysaccharide is the temperature of extracting， the time of extracting， the amount of dissolvent. To choice the best condition of the extraction of Glycyrrhiza polysaccharide， we contrive single factor and orthogonal experiments，conclusion： the temperature of extracting is 90℃， the time of extracting is 2h， the amount of dissolvent is 20 times，which is the best condition.关键词：甘草多糖；蒽酮-硫酸法；正交设计；提取工艺Key words： glycyrrhiza polysaccharide；anthrone and sulfuric acid method；orthogonal design；extract technology中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2018）26-0249-030 引言大量的研究已证实，植物多糖具有免疫调节作用，如有报道证明甘草多糖溶于水，能够直接作用于人体免疫系统，活化休眠的免疫细胞，使其分泌出更多的免疫因子，从而增强人体抗病能力，同时，还具有抗炎、抗病毒、抗衰老以及修复自身免疫性疾病的功效。
甘草多糖提取纯化工艺研究
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Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔｈ ｓｐ ｐｅ ｔ ｙ ｏ ｘｒ ｃｉ ｇ ａ ｄ ｄ ｐ ｒｔｎ ｅ ｈ ｏｏ ｙｏ ｙ ｙ ｒ ｉａｐ ｌ ｓ ｃ ｈ ｒｄ ， ｓｎ ｉ ｇｅ ｓ ｒ ｃ ： ｉ ａ ｒｓｕａ ｎ ｅ ｔａ ｔ ｎ ｅ ｕ ａｉ ｇｔｃ ｎ ｌ ｇ ｆＧｌｃ ｒｈ ｚ ｏｙ ａ ｅ ａｉ ｅ ｕ ｉ ｇｓｎ ｌ ｎ ｆｃｏ ｘ ｅ ｉ ｎ ｏｄ ｔｒ ｎ ｈ ｎ ｕ ｎ ｅｏ ｘ ｒ ｃｉｇ Ｇｌｃ ￣ｈ ｚ ｏ ｙ ａ ｃ ａ ｉ ｅ，ｎ ｏｎ ｈ ｒｈ ｇ ｎ ｌ ａ ｔｒｅ ｐ ｒｍｅ ｔｔ ｅｅ ｍｉ ｅｔ ｅ ｉｆ ｅ ｃ ｆｅ ｔａ ｔｎ ｙ ｙ ｉａｐ ｌｓ ｃ ｈ ｒｄ ａ ｄ ｄ ｉ ｇｔ ｅｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｌ
甘 草 （ ｌ ｙｒｉ ） Ｇｙ ｒ ｚ 属多 年生 草 本植 物 ， 要产 于 ｃ ｈａ 主
水浴锅 ： 北京医疗设备 厂 ； Ｇ ０ Ｄ ４ ４真空电热干燥 箱 ： 天 津市天宇实验仪器有限公 司 ；Ｇ ６ Ｗ 离心机 ： Ｌ １一 北京 医 用离心机厂 ； Ｌ ９ １ Ｑ 一 ０ 微型漩 涡混合 器 ：其林贝尔仪器
食品研究与开发
分 离 提取
Ｆｏ ｄ Ｒｅ也ｌｃ ｄ Ｄｅ ｅｏ ｍｅ ｔ ｏ ｓ ｒ ｈ Ａｎ ｖ ｌｏ ｎ
２ １ ０ ２年 ５月
第 ３ ３卷第 ５期
４ １
甘草多糖提取纯化工艺研究
王振强 申森 樊欣 ， ，
（． １ 黄河水利职业技术学院 ， 河南 开封 ４ ５ ０ ；． ７０３２ 开封第一人 民医院 ， 河南 开封 ４ ５ ０ ） ７ ０ １
业 等方 面得 到广泛应用 。因此 ， 开展甘 草多糖提 取工
新疆产甘草品质评价及甘草多糖提取工艺研究
ｐ ｌ ａ ｃ ａｉ ， ｈｃ ｒ ｈｇ ｅ ａ ｏ ｅ ｎｔ ｎ ｓ ｇ ｃ ｒ ｉ ｉ － ａ ｄｇ ｃ ｒ ｉ ｌ ａｃ ａ ｄ ． ．ｎ ｈ ｌ ｇｙ ｙｒ ｉ ， ｏｙ ｃ ｈ ｒ ｅ ｗ ｉ ｗｅｅ ｉ ｒｈ ｔ ｓ ｅ ｒ ｋ （ｌ ｙｒ ｚ ａ ｄ２ ％ ｎ ｌ ｙ ｒ ｚ ｐ ｙ ｃｈ ｒ ｅ ５ Ｉ ｅ ｄ ｌ ｒ ｚ ｓ ｄ ｈ ｈ ｔｎ ｈ ｉ ｈ ｔ ｕ ｙ ｈａｃ ２ ｙ ｈ ａｏ ｓ ｉ ３ ％） ｔ ｗｉ ｃ ｈ ａ
（ ｅ ａｔ ｎ ｆ ｏ ｄＥ ｇ ｅｒ ｇａｄＢ ｏｅｈ ｏｏ ｙ Ｔａｊ ｉｅｓｙｏ ｉ ｃ ｎ ｅｈ ｏ ｇ ， ｉ ｊ ０ ４ ７ Ｄ ｐｒ ｍｅ ｔ Ｆ ｏ ｎ ｉ ｅｉ ｉｔ ｎ ｌｇ ， ｉ ｉ Ｕｎｖｒｉ ｆ ｃ ｎｅａｄＴ ｃ ｎ ｌ ｙＴａ ｉ ３ ０ ５ ， ｏ ｎ ｎ ｎ ｃ ｎｎ ｔ Ｓｅ ｏ ｎｎ
Ｑｕ ｌｙＥ ａｕ ｔ ｎ０ ｉｋａ ｇＧｌｃ ｒｈｚ ｎ ｔａ ｔ ｎ０ ａｉ ｖ ｌａｉ ｆ ｎ ｉｎ ｙ ｙ ｒ ｉａａ ｄＥｘｒ ｃｉ ｆ ｔ ｏ Ｓ ｏ
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现 代 食 品 科 技
Ｍ ｏ ｅ ｎＦ ｏ ｃ ｎ ｅ ｎ ｅｈ ｏｏ ｙ ｄ ｒ ｏ ｄＳ ｉ ｃ ｄＴ ｃ ｎ ｌ ｅ ａ ｇ
２ ０ ， ｏ．４ Ｎｏ ０８Ｖ １ ， ． ２ ２
新疆产甘草 品质评价 及甘草 多糖提取工艺（ 天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津 ３０ ５ ） ０４ ７
摘要 ：本文通过测定样品 中甘草酸和甘草多糖 的含量，比较 不同新疆产甘草切 片品质；并通过单因素和正交实验研究甘草多糖
烟用甘草粉中甘草多糖提取工艺优化研究
善余味 ． 能赋 予卷 烟 特 殊 的 自然香 气。 甘 草 多糖 （ Ｇ Ｐ Ｓ ） 是 甘 草 高 的 生 物 学 活 性 和 药 用价 值 ， 其具有免 疫调节 、 抗肿瘤 、 抗 病
毒等作 用， 现 在 已成 为 国 内外研 究 的热 点 。
糖标准液体 ； ③ 取 ６支 干 净 试 管 ， ． ６ 、 ０ ． ８
甘 草粉 中甘 草 多糖 的 提 取 工 艺 ， 确 定 最佳 提 取 条 件 ， 为甘草 多
糖 的进 一步 研 究奠 定 理 论基 础 。
外一可见 分 光 光 度 计 于 ４ ９ ０ ｎ ｍ 下 测 定 吸 光 度值 。并 根 据 所 得
标 准 曲线 的 公 式反 推 其 相 应 的 甘 草 多糖 得 率。
析 料 液 比 对甘 草 多糖提 取 率 的影 响 。 葡 萄糖 （ 天 津 市 风船 化 学 试 剂科 技 有 限公 司 ） ； 氯仿 、 正 丁 ３ ． ３ ． ２ 超声 时 间对 甘 草 多 糖 提 取 率 的影 响 醇、 乙醇 、 苯酚（ 天 津 市 河 东区 红岩 试 剂 厂 ） ； 浓硫 酸 （ 天 津 市 凯 设定超声功率 ５ ０ ０ Ｗ， 在最佳液料比 ， 温度 ６ ０ ℃， 超声时间
刖
舌
近 年 来 ， 中草 药 添加 剂在 国 内卷 烟 生产 中得 到 广 泛 的 应
３ ． ２ 甘草 多糖 提取 率 的测 定及 计算
苯 酚 硫 酸 法 制 作 葡 萄 糖 标 准 曲 线 ：① 将 葡 萄糖 标 准 品 放
０ ５ ℃的 烘 箱 中 ，烘 干 至 恒 重 ；② 准 确 称 取 葡 萄糖 标 准 品 用。 甘 草 作 为 一 种 应 用历 史悠 久 的 中药 ， 其 在 烟 草 中 的使 用历 在 １
甘草中甘草酸的提取纯化以及多糖的提取
生化实验报告设计性实验甘草中甘草酸的提取纯化以及多糖的提取一.实验目的（一）掌握甘草酸的提取原理和方法。
（二）熟悉皂甙的性质和测定方法。
（三）掌握甘草酸的分离纯化方法。
（四）掌握多糖类物质的提取方法。
二.实验原理（一）甘草酸提取原理中药甘草，属豆科植物，生长于草原向阳干燥钙质土地以及河岸沙质地土壤中，富含甘草皂苷，又称甘草酸，特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。
具有增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。
甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。
因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。
同时还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。
甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
（二）甘草酸的纯化原理提取的甘草酸溶液中，还含有大量的蛋白质、果胶、鞣质等物质，在提取过程中，这些杂质也转移到了提取液中。
由于这些物质的大量存在，使得产物的含量降低，试验误差加大，同时甘草酸作为药物和保健品等使用时，杂质还会引起一些副作用，因此必须将这些杂质除去，对甘草酸进行纯化。
提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
（三）残渣中甘草多糖的提取分离原理甘草在中医处方中占有举足轻重的地位，被医药界誉为“众药之王”。
甘草的主要有效成分是甘草酸、黄酮和多糖类化合物，但目前多糖还没有被有效利用。
甘草多糖具有抗肿瘤、免疫调节作用、抗辐射、抗病毒、抗溃疡、降血糖、抗衰老和免疫调节等作用，因此对多糖的研究越来越受到人们的重视。
本实验以提取甘草酸后的甘草渣为原料提取多糖，这对甘草资源的综合利用和多糖的开发均具有特别重要的意义。
甘草多糖为易溶于水的白色粉末，熔点很高，不溶于酒精等有机溶剂，故可用水提醇沉法得到甘草多糖。
三.实验器材（一）仪器、用具:剪枝剪、粉碎机、烘箱、微波炉、电子天平、抽滤机、分光光度计、真空干燥箱、XAD9 型树脂、旋转蒸发仪、柱层析系统（层析柱，恒流泵，紫外监测仪，部分收集器）（二）试剂：甘草、极性溶剂、硫酸、苯酚、95%乙醇、葡萄糖标准品、70%乙醇、甘草酸标准品。
残渣中甘草多糖的提取分离
甘草酸的提取和测定一．实验目的：1掌握干草的提取原理2熟悉皂甙的性质和测定方法二实验原理甘草酸是由甘草中提取。
甘草，又名美草、蜜甘、甜根子，多生长在我国西北、华北、东北地区，为多年生草本植物。
甘草酸作为其主要成分，随产地不同含量亦不同，一般在(4～14)％之内。
甘草酸是甘草甜味的有效成分，又名甘草甜素、甘草皂甙。
分子式42H62O16，相对分子质量822.92。
甘草酸为白色或淡黄色结晶型粉末，熔点220 ℃，有特殊甜味，其甜度约为蔗糖的250倍，溶于热水和热的稀乙醇，不溶于无水乙醇和乙醚。
甘草酸遇酸则沉淀，常利用此性质进行提取和精制。
为了使用方便，一般都把甘草酸制成水溶性的盐类，如甘草酸钠、甘草酸二钠、甘草酸三钠、甘草酸铵等。
方法：甘草酸在原料中以钾盐和钙盐的形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂溶解，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离的甘草酸。
三．实验步骤甘草酸的制备（1）粉碎：将干净干燥的甘草放入粉碎机中粉碎，过10目筛选，制得甘草粉。
（2）提取：称取一定质量的甘草粉放入反应器中，加入其5倍质量的水，在搅拌下于85 ℃以上加热回流2．5 h，过滤、滤渣再加3倍质量的水重复提取一次，合并泸液。
（3）浓缩：将甘草酸提取液用薄膜蒸发器进行真空浓缩，当滤液体积减少4／5时，趁热过滤。
（4）分离：在已经冷却的浓缩滤液中，加入其1／2容量的95%的乙醇，然后静止过夜，经过滤除去植物蛋白、多糖等沉淀物。
（5）沉淀：在经上述处理的甘草酸浓缩液中，用浓硫酸调其PH值，使甘草酸沉淀析出，然后进行离心分离，得粗甘草酸。
（6）重结晶：用(60～70) ℃的稀乙醇进行重结晶，减压过滤后得甘草酸湿品。
（7）干燥：将湿甘草酸放入真空干燥箱内，调节真空度，在(70～80) ℃温度下加热(40～60) min，即得干甘草酸。
（8）成品：将干燥的甘草酸粉碎，过筛，即得甘草酸成品。
甘草酸的定性和定量测定1 甘草酸的定性鉴别取样品4 mg，置白磁板上，加4%硫酸7滴，渐渐变成橙黄色至橙红色。
响应面分析法优化甘草多糖提取条件
响应 面分 析 法 （ Ｒ Ｓ Ｍ） 是 一 种 有 效 的 工 艺 条 件 优化方 法 ， 在食 品工业 、 化 工工艺 及生 物工 程等 方面 应用广 泛 ， 通过 Ｒ Ｓ Ｍ 可确 定各 工艺参 数及 工 艺参 数 问 的交 互作 用在 实 际 工艺 条 件 下 对 响应 值 的影 响 ，
ｙ ％ ＝（ 粗 多糖 干重／ 原料质 量 ）×１ ０ ０
３ 结 果 与 分 析
３ ． １ 液 料 比对 甘 草 粗 多 糖 提 取 率 影 响
Ｗ２ ０ １ 旋转蒸发器 、 Ｓ Ｈ Ｂ— Ｉ Ｉ Ｉ 循环水多用真空泵等。
作者简介 ： 李
杰（ １ ９ ７ ８一） ， 男， 硕士 ， 讲师 ， 主要研究方向 ： 生 物 技 术 。Ｅ・ ｍａ ｉ ｌ ： ４ ０ ３ １ ９ ６ ２ ７ １ ＠ｑ ｑ ． ｅ ｏ ｍ
等功 效 … 。甘 草 多 糖 是 甘 草 中重 要 的 生 物 活 性 成
分之 一 ， 大量 临床药 理学研 究表 明 ， 甘草多 糖具 有调 节免疫 、 抗 病毒 、 抗肿 瘤等 生物 活性 。
行 沉淀 ， 沉淀 后离 心 、 冷 冻 干燥 ， 即得甘 草多 糖粗 品 。
２ ． ２ 单 因素 试 验 分 别 称取 一 定 量粉 碎 后 的甘 草 原料 ， 考 察 提 取
第 ６期
李 杰 等 ： 响应 面 分 析 法 优 化 甘 草 多 糖 提 取 条 件 表 ２ 中 心旋 转组 合试 验 结 果
・ １ ０ ７・
由 图 １可 知 ， 液料 比 １ ５ ： １～３ ０ ： １ ， 随 液 料 比 增
加， 粗 多 糖 提 取 率 逐 渐 增 加 。 当液 料 比 大 于 １ ： ３ ０
第 ６卷 第 ６期
一种甘草多糖的制备方法及其应用[发明专利]
![一种甘草多糖的制备方法及其应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/7c123ae1eff9aef8951e0609.png)
专利名称：一种甘草多糖的制备方法及其应用
专利类型：发明专利
发明人：阿布力米提·伊力,排合尔丁·穆太力甫,阿吉艾克拜尔·艾萨
申请号：CN201910880044.0
申请日：20190918
公开号：CN110511294A
公开日：
20191129
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种甘草多糖的制备方法及其应用，该方法将甘草茎自然干燥，机械粉碎，并过筛分离杂质，石油醚脱脂，无水乙醇脱色素,自然风干后用热水提取，离心，浓缩，无水乙醇沉淀，再离心，将多糖沉淀物进行真空冷冻干燥，制备出水溶性多糖。
该方法提取得到的甘草多糖的提取率达到7.8%。
该多糖部位被验证具有抗氧化活性，从天然植物中寻找新抗氧化剂，是现代医药和食品行业发展的新方向；研究多糖及其衍生物的抗氧化作用，开发新的天然抗氧化剂，具有重要的现实意义。
本研究可为甘草多糖在抗氧化和抗衰老功能性食品中的应用开发提供参考。
申请人：中国科学院新疆理化技术研究所
地址：830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市北京南路40号附1号
国籍：CN
代理机构：乌鲁木齐中科新兴专利事务所(普通合伙)
代理人：张莉
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甘草多糖的提取及其抗氧化活性研究
甘草多糖的提取及其抗氧化活性研究作者：乌兰其其格宋学军段雪琴来源：《赤峰学院学报·自然科学版》2019年第06期摘要：本文利用水提醇沉法从甘草中提取甘草粗多糖，用沉淀法对提取的甘草粗多糖进行分离纯化后，得到三种多糖，即水提一级、二级、三级多糖，并对粗多糖和三种分级多糖进行了光谱性能分析.紫外光谱结果显示，四种多糖在260-280nm处均有吸收，表明含有蛋白质或核酸;红外光谱结果表明，四种多糖都具有多糖的特征吸收峰.另外，根据芬顿反的原理研究了所制备的甘草多糖清除羟自由基的能力，并研究了甘草多糖对酱油中羟基自由基清除能力的影响，结果表明，加入甘草多糖的酱油试样对羟基的清除能力有明显的增强.关键词：甘草多糖;提取;分级;抗氧化性中图分类号：S567.2;O657; 文献标识码：A; 文章编号：1673-260X（2019）06-0036-031 前言甘草别名还有乌拉尔甘草，国老，甜根，甜草，属豆科，是著名的传统药用植物[1]，主要生长在内蒙古，新疆，宁夏等地.随着科学的发展，在1860-1869年学者们开始对甘草进行化学方面有关的研究[2]，研究表明，甘草中含有许多药用成分.多糖是生物体的重要组成部分，可以从植物，微生物和动物等生物中提取.在体内，有许多重要的生物功能，如防御功能、结构支持和储能，同时，多糖在细胞和细胞之间，细胞与外界之间的能量和物质转化中起重要作用.作为甘草的重要活性成分之一，许多研究表明甘草多糖具有抗肿瘤，抗炎，抗病毒[3-5]，免疫调节，抗氧化和抗菌等生理活性[6，7]，常用的提取法主要有超声辅助提取法、溶剂浸提法等[8-12].本研究利用水提醇沉法从甘草中提取甘草粗多糖，进行分离纯化并对提取的粗多糖和三种分级多糖进行了光谱性能分析，根据芬顿反应原理研究了所制备的甘草多糖清除羟自由基的能力，并研究了加入甘草多糖对酱油试样的羟基的清除能力的影响.2 实验部分2.1 仪器和材料红外光谱仪（Nicilet iS5），紫外光谱仪（普析），SHD-（III）循环真空泵（河南予华），可见光度计（菁华科技）;双氧水（30%，沈阳华东试剂），抗坏血酸（红岩试剂，硫酸亚铁铵（双船化学试剂），甲醇（国药），无水乙醇（国药），磷酸氢二钠（国药），二甲亚砜（沈阳华东试剂），正丁醇（恒兴化学试剂），三氯化铁（泉瑞试剂），其他试剂（KH2PO4，乙二胺四乙酸二钠，三氯甲烷，茚三酮等）均购于国药集团.2.2 试剂配制（1）0.2mol/L的PBS溶液（pH=7.4）：准确称量35.8010gNa2HPO4·12H2O，溶于500ml蒸馏水中，标为液①;准确称量3.1120gKH2PO4·2H2O，溶于100ml蒸馏水，标记为液②;适量混合①号溶液和②号溶液配制所需缓冲溶液.（2）2.0mmol/L的EDTA-Fe（II）溶液：EDTANa2溶液（4.0mmol/L）：EDTANa20.3721g溶于250ml超纯水，记为溶液①，精确称量硫酸亚铁铵0.3923g溶于250ml蒸馏水记为溶液②，将①、②两种溶液按1：1的体积比进行混合，得到2.0mmol/L的EDTANa2-Fe （II）溶液.（3）0.52mg/mL的番红花红T溶液、6%的H2O2溶液、0.2%的水合茚三酮溶液的配制准确称量藏红花红T0.0525g溶于超纯水中，转移至100ml容量瓶中，定容，备用.量取10ml30%的H2O2，并转移至50ml的容量瓶中后定容.在100ml容量瓶中准确称取0.2010g茚三酮，将其溶解在乙醇中，稀释至刻度并备用.（4）配制5%的FeCl3溶液：在10ml容量瓶中准确称取0.5000gFeCl3，将其溶解在超纯水中，并稀释至刻度.2.3 多糖的提取与分级用粉碎机将天然甘草破碎过，分别脱脂、脱色，按一定比例加入溶剂搅拌均匀，静置后置于80℃的水浴锅中恒温6h，冷却至室温后离心分离，然后将残余物保持在烧杯中，重复上述步骤三次.将滤出四次的滤液合并，置于烧杯中，在60℃的水浴中浓缩至没有水层后冷却至室温.按体一定体积比加入乙醇密封静置36小时后过滤.将沉淀物用少量甲醇洗涤三次，并将沉淀物置于干燥的容器中真空干燥后的产品即为甘草粗多糖.称取一定量的粗糖，加入蒸馏水，加热至60℃使多糖充分溶解后冷却至室温后过滤，然后加入无水乙醇，当醇的浓度达到20%时会产生大量的棕色沉淀，静置、抽滤，干燥后所得物质即为“水提1级多糖”.再将乙醇继续加入上述保留的滤液中，在溶液中得到浓度为40%的无水乙醇，得到沉淀物“水提2级多糖”，如上所述继续向母液中加入乙醇，使醇的浓度至60%，得到“水提3级多糖”，其他分级操作与1级糖的相同.2.4 甘草多糖清除各样品羟自由基分别在六个试管中，吸取三毫升上述配制的PBS缓冲液，再加1.5ml浓度为2.0mmol/L的EDTA二钠铁，0.45ml的浓度为0.51mg/mL的番红花红T溶液，然后加入2.0毫升不同浓度的多糖，加入0.9ml的6%H2O2溶液后稀释至10毫升.将混合溶液置于40℃的恒温水浴中半小时，在520nm的波长处测定样品吸光度.由测得的各空白和样品的吸光度值计算清除率E （%），计算公式如下：E（%）=（A樣品-A空白）/（A对照-A空白）*100%3 结果和讨论3.1 甘草多糖的显色特性本研究对提取的甘草多糖进行了三氯化铁和茚三酮实验，结果表明每种甘草多糖和三氯化铁（FeCl3）溶液样品反应溶液均变黄，表明不存在烯醇、酚羟基.在茚三酮显色实验中，发现部分多糖溶液变成紫色，表明含有氨，此结果与UV的结论一致.3.2 紫外光谱研究对所提取各多糖试样进行了紫外吸收测试，实验在200-900nm波长范围内进行.从紫外光谱测试结果可以看出，粗多糖，水提取物一级，二级和三级多糖均有吸收峰，表明粗多糖和每种分级的多糖含有蛋白质或核酸.3.3 红外光谱设定红外光谱仪的试验条件，用溴化钾压片法制备粗多糖和各分级水提多糖红外试样，在4000-600cm-1之间依次扫描压制样品，获得相应多糖样品的红外光谱，红外特征峰的数据示于表1.以图2粗多糖为例，从红外光谱可以看出，在3450.4cm-1處有一个强而宽的吸收峰.这是多糖中的O-H伸缩振动吸收峰;在1635.4cm-1处是C=O的伸缩振动吸收峰;1257.3cm-1处的吸收峰是由糖环中醚环C-O-C的C-O伸缩振动引起的吸收峰;在1089.5cm-1处的强吸收峰是由糖环C-O-H的C-O伸缩振动引起的吸收峰;915.3在cm-1处是β-糖苷键的特殊吸收峰;α-糖苷键在859.6cm-1处具有特定的吸收峰，表明在水提粗多糖中存在β-糖苷键和α-糖苷键.3.4 甘草多糖对羟自由基清除能力的活性研究我们探讨了甘草多糖对羟自由基的清除能力，原理为在Fe2+存在时，与H2O2可生成·OH的同时还生成Fe3+，反应方式如下：H2O2+Fe2+→·OH+OH-+Fe3+，而·OH又可使翻红花红T褪色，基于以上原理可通过分光光度计法来检测甘草多糖对羟自由基清除能力.本研究提取的四种甘草多糖各试样的清除羟自由基能力见表2，对应EC50值的大小见图3.由以上实验结果可知，EC50由小到大排列依次为1级多糖>粗多糖>2级多糖（EC50）>3级多糖（EC50）>抗坏血酸（EC50），由上述结果可知提取的多糖的羟自由基清除能力强于对照品（抗坏血酸）.同时，也表明随着甘草水提分级的增加，羟自由基的清除能力降低.本研究也探讨了加入甘草多糖对酱油试样的羟基自由基清除能力的影响，结果表明，加入甘草多糖后酱油试样对羟基的清除能力明显的增强.4 结论本文是以甘草为原料，采用水提醇沉法提取了甘草多糖后对甘草多糖进行分级，分别得到水提一级、二级，三级糖.用紫外、红外等方法对提取的多糖进行了表征，根据芬顿反的原理研究了所制备的甘草多糖清除羟自由基的能力，并在酱油试样中添加提取的多糖后，研究了其羟基自由基清除能力，结果表明，加入甘草多糖的酱油试样对羟基的清除能力有明显的增强.参考文献：〔1〕陈橙，帕丽达.阿不力孜，米仁沙.亚库甫，胀果甘草酸性多糖的分离纯化、结构分析及免疫活性测定[J].2017，21（10）：1110-1112.〔2〕贺敏，吕慧英，梁逸曾.甘草化学成分分析（英文）[J].湘潭化工学院化学工程与制药系，2014，27（4）：290-295.〔3〕Ikegami N.Prophylactic effect of long-term oral administration of glycyrrhizin on AIDS development of a symptomatic patients.PO-825-0596 IX International Conference on AIDS，Berlin，1993.〔4〕Chen M，Christensen S.B，Theander T.G，Kharazami A.Antileishmanial Activity of Licochalcone A in mice infected with Leishmania major and in hamsters infected with Leishmania donovani. Antimicrobial Agents and Chemotheraphy，1994，38：1339-1344.〔5〕张泽生，史珅，杨超慧，等.甘草多糖免疫调节作用的研究[J]，现代生物医学进展，2008，8（10）：1855-1837.〔6〕王忱.甘草多糖抑瘤的体内实验及其分子机制的研究[D].天津医科大学，2002.1213-1215.〔7〕魏炜.甘草药用成分的萃取、分离、纯化方法研究[D].大连：大连理工大学，2005.〔8〕刘树兴，唐孟忠.“米邦塔”食用仙人掌多糖分级新方法的研究[J].食品工业科技，2006（4）：108-109.〔9〕郭立山.郁金中水溶性多糖的梯度分离和含量测定[J].中医药学报，1996（4）：48-49.〔10〕蔡亚平，韩学忠.五味子多糖分级注射剂的含量和性质测定研究[J].中草药，2010，32（7）：228-230.〔11〕刘湘，汪秋安.天然产物化学[M].北京：化学工业出版社，2010.。
微波提取甘草多糖工艺的优化研究
微波提取甘草多糖工艺的优化研究作者：张海艳来源：《湖北农业科学》2011年第04期摘要：采用微波法提取甘草多糖，在单因素试验的基础上对微波功率、微波处理时间和料液比进行正交试验。
结果显示，影响甘草多糖提取率的因素主次顺序为微波处理时间＞微波功率＞料液比，微波法提取甘草多糖的最佳工艺条件为微波功率5００Ｗ，微波处理时间４ｍｉｎ，料液比１∶３０（W/V，g∶mL）。
关键词：微波；甘草多糖；工艺优化中图分类号：Ｓ５６７．２３＋９；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）04－0818-03Optimization of Microwave Extraction of Liquorice PolysaccharidesＺＨＡＮＧＨａｉ－ｙａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＬｕｏｙａｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｕｏｙａｎｇ４７１０２２，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｍｉｃｒｏｗａｖｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ technic ｏｆｌｉｑｕｏｒｉｃｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｌｉｑｕｏｒｉｃｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗas ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｏｗｅｒａｔ４００Ｗｆｏｒ４ｍｉｎｕｔｅｓｗｉｔｈａｓｏｌｉｄｔｏｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏｏｆ１∶３０（W/V，g∶mL），ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅｌｉｃｏｒｉｃｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅ３．３２７％．Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｔｅｓｔ，ｔｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔｗａｓｔａｋｅｎａｎｄｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｒｄｅｒｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｆａｃｔｏｒｓｗａｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ＞ｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｏｗｅｒ＞ｓｏｌｉｄｔｏｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍｉｃｒｏｗａｖｅ；ｌｉｑｕｏｒｉｃｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｔｅｃｈｎｉｃｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ甘草（ＧlｙｃｙｒｒｈｉｚａｕｒａｌｃｎｓｉｓＦｉｓｃｈ．）系豆科（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ）多年生草本植物，是一种重要的中药材，俗称“众药之王”，入药已有悠久的历史。
甘草多糖提取纯化工艺研究
甘草多糖提取纯化工艺研究甘草多糖是一种天然多糖，具有很多药理学特性，被广泛应用于中药、食品、保健品等领域。
然而，由于甘草多糖在天然状态下含量较低，提取纯化工艺成为了研究重点。
本文将针对甘草多糖提取纯化工艺进行探讨。
一、甘草多糖的结构和特性甘草多糖是一种天然多糖，由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成。
其分子量较大，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖等。
甘草多糖的结构特点是分支程度高，分子链长度不一，具有多种单糖组分。
二、甘草多糖的提取方法目前，甘草多糖的提取方法主要有水提法、酸提法、碱提法、超声波提取法、微波提取法等。
其中，水提法是最常用的提取方法，其具体步骤包括：将甘草粉末加入水中，加热至一定温度，过滤得到甘草多糖溶液，再经过浓缩、沉淀、洗涤等步骤，最终得到甘草多糖粉末。
三、甘草多糖的纯化方法甘草多糖在提取过程中容易受到杂质、色素等的干扰，因此需要进行纯化处理。
目前，甘草多糖的纯化方法主要有凝胶过滤法、离子交换法、超滤法、逆流色谱法等。
其中，凝胶过滤法是最常用的纯化方法，其具体步骤包括：将甘草多糖溶液经过过滤膜过滤，将过滤液加入凝胶柱中，通过洗涤、洗脱等步骤，最终得到纯化后的甘草多糖。
四、甘草多糖提取纯化工艺的优化甘草多糖提取纯化工艺的优化是提高甘草多糖产率和纯度的重要途径。
目前，甘草多糖提取纯化工艺的优化主要从以下几个方面入手：（1）提高提取效率。
可通过改变提取温度、提取时间、提取溶剂、提取pH值等因素，来提高甘草多糖的提取效率。
（2）降低成本。
可通过改变提取方法、减少中间步骤、优化设备等措施，来降低甘草多糖的生产成本。
（3）提高纯度。
可通过改变纯化方法、加强对杂质的去除等措施，来提高甘草多糖的纯度。
五、结论甘草多糖是一种具有广泛应用前景的天然多糖，其提取纯化工艺的研究对其应用价值的发挥至关重要。
通过优化提取纯化工艺，可以提高甘草多糖的产量和纯度，降低生产成本，为其在中药、食品、保健品等领域的应用提供了有力支持。
甘草多糖提取动力学、理化特性及生物活性研究
甘草多糖提取动力学、理化特性及生物活性研究甘草多糖提取动力学、理化特性及生物活性研究摘要: 甘草是一种植物，其根部含有丰富的甘草多糖。
甘草多糖具有多种生物活性，并且已被广泛应用于医药和食品工业。
本文旨在研究甘草多糖的提取动力学、理化特性以及生物活性，以期更好地了解其潜在的应用价值。
引言:甘草（Glycyrrhiza）是一种草本植物，广泛分布于世界各地。
甘草根部由各类化合物组成，其中甘草多糖是重要的生物活性成分。
甘草多糖除了具有甘草特有的甜味，还具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性，因此引起了广泛的研究兴趣。
一、甘草多糖的提取动力学研究：甘草多糖的提取过程受多种因素影响，比如溶剂类型、温度、提取时间等。
研究表明，水或酸性溶剂是提取甘草多糖的理想选择。
提取时间对甘草多糖的提取率有明显影响，一般提取6-8小时即可达到较高的提取率。
此外，温度的提高也可以提高甘草多糖的提取率，但过高的温度可能会对其结构和活性产生损害。
二、甘草多糖的理化特性研究：甘草多糖是一种多糖类物质，由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖等单糖单元组成。
其具有多种理化特性，如溶解性、分子量、糖链结构等。
研究发现，甘草多糖在水中具有较好的溶解性，可以形成胶体溶液。
此外，其分子量较高，一般在几万到几十万之间，这种高分子特性赋予了甘草多糖一定的粘稠性和保湿性。
三、甘草多糖的生物活性研究：甘草多糖具有多种生物活性，特别是其抗氧化和抗炎作用备受关注。
研究表明，甘草多糖可以清除自由基，减轻氧化损伤。
此外，甘草多糖还具有显著的抗炎活性，可以抑制炎症细胞的活化和炎性因子的释放。
除此之外，甘草多糖还具有抗肿瘤、抗糖尿病、抗病毒等多种生物活性。
结论:甘草多糖是一种具有多种生物活性的多糖类物质。
本文通过研究甘草多糖的提取动力学、理化特性以及生物活性，初步认识到甘草多糖的潜在应用价值。
后续的研究应进一步深入探索甘草多糖的更多生物活性以及其与其他成分的相互作用机制，以期更好地利用甘草多糖的药用和食用价值综上所述，甘草多糖是一种具有良好溶解性、高分子量和特殊糖链结构的多糖类物质。
甘草多糖提取工艺研究
甘草多糖提取工艺研究
王亚红;曲小姝;祝波
【期刊名称】《吉林化工学院学报》
【年(卷),期】2011(028)005
【摘要】用索氏提取法提取甘草多糖.采用苯酚-硫酸法测定总多糖的含量,以浸膏得率及多糖质量分数为综合考察指标,对索式提取法提取甘草多糖进行了工艺条件优化.甘草多糖提取的最佳工艺条件为:甘草目数30目,加9倍量水,提取3 h;醇沉生药:水提液体积比为1∶1,加4倍量95%乙醇.工艺验证实验结果理想,水提取工艺综合评分97.61,RSD=1.81%;醇沉淀工艺综合评分97.39,RSD=1.81%.
【总页数】4页(P37-40)
【作者】王亚红;曲小姝;祝波
【作者单位】吉林化工学院,化学与制药工程学院,吉林,吉林,132022;吉林化工学院,化学与制药工程学院,吉林,吉林,132022;吉林化工学院,化学与制药工程学院,吉林,吉林,132022
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.甘草多糖提取纯化工艺研究 [J], 王振强;申森;樊欣
2.烟用甘草粉中甘草多糖提取工艺优化研究 [J], 林莉
3.甘草中甘草酸和甘草苷的提取工艺研究 [J], 魏宁;郎伟君
4.甘草多糖提取纯化工艺研究 [J], 张耀光;王谢;梁瑞玲
5.新疆产甘草品质评价及甘草多糖提取工艺研究 [J], 张泽生;史坤;白鑫;杨海延因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
甘草有效成分的提取纯化方法研究进展
［综述］甘草有效成分的提取纯化方法研究进展刘育辰1，王文全1*，郭洪祝2（1.北京中医药大学中药学院，北京100102；2.北京市药品检验所，北京100035）收稿日期：2010-02-14作者简介：刘育辰（1982－），女，在读博士，研究方向：道地药材形成机制研究。
E-mail ：lyc8564732@ *通讯作者：王文全。
Tel ：（010）84738623E-mail ：wwq57@关键词：甘草；甘草酸；黄酮；甘草多糖；提取；纯化摘要：作者通过查阅大量文献，对甘草中有效成分的提取方法和纯化方法进行了详细的总结，为甘草化学成分快速、有效的提取、纯化提供方法参考和依据。
中图分类号：R284.2文献标识码：B文章编号：1001-1528（2010）11-1953-05甘草为豆科（Zeguminosae ）植物甘草（Glycyrrhiza uralen-sis Fisch ）、胀果甘草（Glycyrrhiza inflata Bat.）和光果甘草（Glycyrrhia glabra L.）的根及根茎，始载于《神农本草经》，列为上品，传统中医药认为它具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和药性的功效［1］。
甘草中的化学成分比较复杂，主要有三萜皂苷类化合物（甘草酸、甘草次酸）、黄酮类化合物（甘草苷、异甘草苷）及甘草多糖等。
现代药理学实验表明黄酮类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌抗病毒等作用；甘草酸具有保肝和治肝、治疗肾病和心脏疾病、抗病毒、抗菌等作用；甘草多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免疫功能［2］。
随着对甘草化学成分研究的不断深入，如何将有限的甘草资源分离纯化成更多、更纯的甘草有效成分具有广泛的经济效益和社会效益，受到越来越多国内外学者的关注，甘草有效成分的提取、纯化工艺已成为近年来的一个研究热点。
目前甘草有效成分提取、纯化方法很多，本文将有关其提取、纯化甘草有效成分的方法做一概述，为进一步研究甘草有效成分的提取、纯化工艺提供参考。
中药甘草水溶性多糖的提取 - 兰州理工大学研究生院 首页
加入三氯乙酸 ↓
搅拌后静置30 min,离心 ↓ 弃沉淀取上清液 ↓ 加Sevag（氯仿：正丁醇=4：1）
在分液漏斗中充分振荡后静置20 min,放出下层液,将上层液离心
↓ 弃沉淀,取上清液 ↓ 无水乙醇、丙酮、乙醚各洗三次
（将上清液中的杂质进一步彻底洗净） ↓
真空干燥 ↓ 可溶性甘草多糖
是研究较多的甘草有效成分之一，研究表明具有免疫调节、
抗肿瘤、抗病毒等作用，现已报道的甘草多糖都具有很高的 生物学活性和药用价值。
甘草粉末 ↓ 5倍石油醚回流脱脂两次 ↓ 5倍80%的乙醇回流提取两次 ↓ 水溶液浸提超声两次 ↓ 合并两次提取液（多糖类物质水 Nhomakorabea醇沉淀）
3倍95%乙醇沉淀，放置过夜 ↓ 离心弃上清液 ↓ 甘草粗多糖 ↓ 水溶脱蛋白
甘草多糖毒性极小是研究较多的甘草有效成分之一研究表明具有免疫调节抗肿瘤抗病毒等作用现已报道的甘草多糖都具有很高的生物学活性和药用价值
中药甘草水溶性多糖的提取
甘草根及茎含三萜类、黄酮类、还有糖类、生物碱、有机酸、
香豆素类、挥发油、氨基酸和蛋白质等物质。甘草多糖作为 植物多糖的一种，具有诸多的生物活性。甘草多糖毒性极小，
甘草多糖的提取及纯化
甘草表面红棕色或灰棕色，具显著的纵皱纹、沟纹、皮孔及稀疏的细根痕。
质坚实，断面略显纤维性，黄白色，粉性，形成层环明显，射线放射状，有的有裂隙。
根茎呈圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓。
栽培要点：喜阳光充沛，日照长，气温低的干燥气候。
宜选土层深厚，排水良好的砂质壤土栽培。
用种子或根茎繁殖，但以根茎繁殖生长快。
药材特性：甘草，系豆科多年生草本植物。
深秋，荚果裂开，籽粒随风散步大地上，天然繁殖。
茎挺拔直立；根如圆柱，直径三四厘米，大的五六厘米，长一米多，最长者达三四米。
具体用处：甘草是临床最常应用的药品。
生甘草能清热解毒，润肺止咳，调和诸药性；炙甘草能补脾益气，临床用量特大，出口量大。
除药用之外，食品上也大量用甘草做糕点添加剂，它的甜度是蔗糖的百倍。
西方国家大量进口甘草，从中提取甘草次酸，治艾滋病。
甘草退耕还林，水土保持作用更强。
陕北农民和西部人们反映，把甘草种子随便撤到地上即可出苗，抗旱性特强。
糖类物质是地球上数量最多的一类有机化合物，是生命物质的组成成分之一。
糖类物质广泛地存在于生物界，特别是植物界。
糖类物质按干重计占植物的83％～90％，占细菌的10％～30％，动物的小于2％。
大量药理及临床研究证实：多糖有调节免疫、抗癌、抗肥胖、控制血糖、降胆固醇、降血脂等生理功能，可广泛应用于医药、保健品及功能食品，作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前景［2］。
多糖又称多聚糖。
其存在于动物、高等植物、微生物(细菌和真菌)及海藻等机体中。
多糖具有复杂、多方面的生物活性和功能，可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，如多糖能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒［3］；还具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂作用；促进核酸与蛋白质的生物合成作用；能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老，而且多糖作为药物其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们的极大兴趣。
尽管我国对多糖的研究起步较晚，但近十几年来的工作取得了较大的进展，愈来多的多糖被发现，并证实它们具有广泛的生物活性［4］。
中药甘草水溶性多糖的提取与测定
中药甘草水溶性多糖的提取与测定张静;刘平;蔡利【期刊名称】《陕西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2005(033)002【摘要】对中药甘草水溶性多糖的提取工艺进行了研究,并探讨了脱蛋白的优选方案.正交试验表明,水煎煮法提取水溶性甘草多糖的最佳工艺条件为:料液比为1:8,温度控制在90 ℃,提取时间为3 h;超声法提取水溶性甘草多糖的最佳工艺条件为: 料液比为1:8,超声功率为100 W,提取时间15 min.脱蛋白的最优方法为:三氯乙酸-Sevag法.结果表明,在最佳提取工艺条件下,超声法提取水溶性甘草多糖的量是水煎煮法的2.77倍,说明超声法是从甘草中提取水溶性多糖的一种较好的方法.【总页数】4页(P65-68)【作者】张静;刘平;蔡利【作者单位】陕西师范大学,食品工程系,陕西,西安,710062;陕西师范大学,食品工程系,陕西,西安,710062;陕西师范大学,食品工程系,陕西,西安,710062【正文语种】中文【中图分类】S567.7+1【相关文献】1.HPLC双波长法同时测定甘草药渣提取物中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素及甘草酸含量 [J], 罗燕燕;刘效栓;肖正国;李喜香;李季文;毕映燕;张柏桃2.不同提取工艺下甘草提取物中甘草酸铵含量测定研究 [J], 黄惠莲;周燕双;宋丽莉3.甘西鼠尾草水溶性多糖提取工艺的优化及体外抗氧化活性测定 [J], 张景;王坤;申翔宇;李默;刘春兰4.高效液相色谱法同时测定化妆品原料甘草提取液中甘草苷和甘草酸 [J], 杨红美;徐嘉琪;龚盛昭;余涓5.高效液相色谱法对中药复方四君子汤中异甘草素、甘草素、异甘草苷和甘草苷的含量测定(英文) [J], 刘扬;杨峻山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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多糖是指由许多单糖分子以糖苷键结合而成 的高分子碳 水 化 合 物，是 除 核 酸 和 蛋 白 质 之 外，存 在于所有生命有机体的重要组成部分之一。近年 来，已有多 种 植 物 的 多 糖［1］ 被 提 取 分 离 鉴 定 出 来， 此类多糖来 源 广 泛、无 细 胞 毒 性，应 用 于 生 物 体 毒 副作用小，因此多糖生物资源的开发利用和研究日 益活跃。糖生物学也被称为“生物化学最后的巨大 前沿之一”。
取苯酚 5 g，加水 100 mL 溶解，置棕色瓶中，备用。 二、实验方法 1． 葡萄糖标准曲线［5］的绘制： 精确量取葡萄糖
标准溶液 0． 2、0． 4、0． 6、0． 8、1． 0 mL，置干燥具塞的 试管中，分别加蒸馏水至 1． 0 mL，加入 5% 苯酚溶液 1． 0 mL，摇匀，再滴加浓硫酸 5． 0 mL，充分摇匀后， 25 ℃ 水浴放置 25 min。另以蒸馏水 1． 0 mL 加 5% 苯酚和浓硫酸同上述操作作空白对照，于 490 nm 处 测吸光度。以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制 标准曲线。
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世界中西医结合杂志 2011 年第 6 卷第 3 期 World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine 2011，Vol. 6，No. 3
·药物研究·
甘草多糖提取工艺条件的研究
韩荣生1 李鹏2
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
【摘要】 目的 在超声条件下提取甘草中有效成分甘草多糖（ GPS） 并测定其含量，以筛选获得 适宜的甘草多糖提取工艺条件。方法 采用正交试验设计，选取提取时间、提取温度及料液比作为工 艺因素，每个因素采用 3 个水平，选择 L9 （ 34 ） 正交表进行实验，同时用硫酸 － 苯酚法测定甘草多糖的 含量来作为综合评价指标。结果 在超声条件下提取甘草多糖的适宜条件为： 提取次数为 3 次，提取 时间为 20 min，提取温度为 45 ℃ ，料液比为 1 ∶ 20 （ g · mL －1 ） ，该提取 条 件 下 甘 草 多 糖 的 含 量 为 2． 39% 。结论 利用超声提取多糖相对其他提取方法有较大优势，可缩短提取时间、提高提取效率， 且操作方便、自动化程度高，便 于 大 规 模 工 业 生 产，为 从 药 材 或 制 剂 中 提 取 甘 草 多 糖 提 供 了 依 据 及 参考。
（ 公式 － 1）
式中： W： 称取的多糖质量（ μg） ； C： 多糖溶液中 葡萄糖的浓度（ μg·mL － 1 ） ； D： 多糖的稀释倍数。
4． 甘草多糖的含量测定： （ 1） 甘草多糖供试品 溶液配制： 称取甘草粉末 2． 0 g，按表 1 设定的因素 水平进行超声提取，提取 3 次后，抽滤，合并 3 次提 取液，将提取液置于 200 mL 容量瓶中，定容，摇匀， 成为供试品溶液。
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交试验设计并作方差分析，以获得最合适的超声提 取条件，为合理有效地利用这一药用植物资源提供 相应的依据。
材料和方法
一、实验资料 1． 实验原理： （ 1） 超声辅助技术基本原理［4］： 超 声波在媒质中传播时可产生强化溶质扩散，传质的 机械作用使媒质质点温度升高，超声场中由于被破 碎物等所处的浸提介质中含有大量的溶解气体和 微小杂质，能 包 围 在 被 破 碎 物 等 的 胶 质 外 膜 周 围， 空化产生的极大压力造成被破碎物细胞壁及整个 生物体的破 裂，而 且 整 个 破 碎 过 程 在 瞬 间 完 成，使 有效成分呈游离状态并溶入媒质中，同时超声波产 生的振动作用加速媒质的分子运动，加强了胞内物 质的释放、扩 散 及 溶 解，使 得 媒 质 和 药 材 中 的 有 效 成分快速接触，相互溶合。（ 2） 多糖含量测定原理： 甘草中多糖含量的测定采用常用的苯酚 － 硫酸比 色法，此法利用了糖类物质在浓硫酸的作用下水解 成单糖分子，并 迅 速 脱 水 形 成 糠 醛 衍 生 物，并 与 苯 酚缩合形成有色物质，在适当的波长和一定浓度范 围内，吸收 值 与 糖 浓 度 呈 线 性 关 系，即 可 利 用 分 光 光度法［9］对其含量进行测定。 2． 材料与试剂： 甘草（ 购自浙江中医药大学中 药饮片厂） ，经浙江中医药大学中药资源与鉴定教 研室鉴定，葡萄糖对照品（ 中国药品生物制品检定 所） ，无水乙醇（ 中国杭州化学试剂有限公司） ，浓硫 酸（ 衢州巨化试剂有限公司） ，苯酚（ 国药集团化学 试剂有限公司） 。 3． 实验设备： SK － 5210LHC 型超声波清洗机（ 上 海科导超声仪器有限公司） ； HB10 digital 型旋转蒸 发仪（ IKA） ； 循环水式多用真空泵，SHB － Ⅲ型（ 郑 州长城科工贸易有限公司） ； 50 g 手提式高速中药 粉碎机，DFT － 50 型大德药机； Allegra 64 Rcentrifuge 型冷冻离心机（ BECKMAN COULTER） ； BT25S 型分 析天平（ SARTORIUS） ； DGG － 9123A 型电热恒温鼓 风干燥箱（ 上海森信实验仪器有限公司） ； Ultrospec 3300 pro 型紫外可见光光度计（ Amersham Biosctences） 。 4． 试剂溶液的配制： （ 1） 葡萄糖标准溶液的配 制： 精确称 取 105 ℃ 干 燥 至 恒 重 的 葡 萄 糖 对 照 品 0． 025 1 g，置 250 mL 容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀 释至刻度，摇匀，配成浓度为 100． 4 μg·mL －1 的葡萄 糖标准溶液，备用。（ 2） 5% 苯酚试剂的配制： 精确称
sity of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou Zhejiang 310053）
【Abstract】 Objective To extract the effective component，glycyrrhiza polysaccharide（ GPS） of glycyrrhiza under ultrasonic condition and determine its content so as to acquire the proper extraction technical conditions of GPS． Methods Orthogonal experimental design was adopted． Extraction time，extraction temperature and solid － liquid ratio were taken as technical factors． 3 levels were adopted in each factor． L9 （ 34 ） orthogonal table was selected in the experiment． Sulfuric acid － phenol method was used to measure the content of GPS which was regarded as the comprehensive assessment index． Results Under ultrasonic condition，the proper extraction technical conditions of GPS： extraction frequency： 3 times，extraction time： 20min， extraction temperature： 45 ℃ ，solid － liquid ratio： 1 ∶ 20 （ g·mL －1 ） ． Under these extraction conditions，the content of GPS was 2． 39% ． Conclusion The ultrasonic extraction of polysaccharide is more advantageous than other method． It may shorten the extraction time and improve the extraction efficiency． It is simple in operation and high in automatic degree． It is suitable for large － scale industrialized production and provides the evidence and reference for GPS extraction from the medicinal material or preparation．
甘草 （ Glycyrrhiza uralensis Fisch． ） 为豆 科 多 年 生草本植物，作 为 我 国 最 常 用 的 传 统 中 药 之 一，其
作者单位： 1． 河南南阳医专第一附属医院，河南 南阳 473068； 2． 浙江 中医药大学，浙江 杭州 310053 通讯作者： 李鹏，Email： 3232168@ 163． com
【关键词】 甘草多糖； 超声提取； 正交实验； 含量测定
Study of the Extraction Technical Conditions of Angelica Polysaccharide
HAN Rong － sheng1 ，Li Peng2
（ 1． No． 1 Affiliated Hospital of Henan Nanyang Medical School，Nanyang Henan 473068； 2． Zhejiang Univer-
2． 甘草多糖的提取： 将甘草粉碎，称取 20 g 置 500 mL 烧杯中，加水 200 mL，35 ℃ 水浴中超声提取 30 min，过滤，滤渣再加水 200 mL，重复超声提取 1 次后，合并 2 次提取液，旋转蒸发仪上减压浓缩至 50 mL，室温冷却后将浓缩液离心（ 5 000 r·min － 1 ，5 min） ，弃去杂质沉淀后，缓慢地加入 4 倍量 95% 乙 醇［6］，并不断用玻璃棒搅拌，使甘草多糖充分析出， 静置 24 h 后，离心 （ 5 000 r，5 min） 得甘草多糖沉 淀，再用无水乙醇洗涤 2 ～ 3 次后，60 ℃ 下干燥，得 甘草多糖。