氯霉素溶液-实验试剂
氯霉素检验方法 文档
氯霉素检验方法1. 试剂与材料1.1氯霉素试剂盒，德国r-Biopharm公司。
1.2乙酸乙酯，分析纯。
1.3双蒸水。
2.仪器与设备2.1微孔板酶标仪，MuLtisKan Ascent,芬兰Labsystens公司。
2.2 8道移液器，50-300uL。
2.3 单道移液器，5-50ul,20-200ml,100-1000ul,1-5ml。
2.4 离心机。
2.5 旋转蒸发器，配真空冷却系统。
2.6 液体混匀器。
3.样品前处理3.1样品提取称取约2g（准确至0.01g）蜂蜜于20ml具塞试管中，加入用4ml双蒸水溶解，再加4ml乙酸乙酯，在混匀器上混匀10分钟。
将上述样液转至10ml离心管中，以4000转/分离心12分钟。
3.2净化从上述离心管中移取1ml上层的乙酸乙酯（相当于0.5样品）至另一试管中，60℃以下减压旋转蒸干，残留物用0.5ml缓冲液1溶液，此为样品溶液，供酶标仪测定。
4.测定4.1 酶标仪测定条件酶标仪测定波长为450nm。
4.2 酶标测定（以下操作在20-24℃室温条件下进行）。
4.2.1测定之前的准备工作将氯霉素酶试剂盒附带的所有试剂回升至室温20-24℃。
其中氯霉素酶标记物、氯霉素抗体用缓冲液1以1；11的比例稀释，在吸取浓缩液之前，要仔细振摇使之充分混匀。
4.2.2 标准应用的制备；50uL标准浓缩液（氯霉素试剂盒附带）用450uL缓冲液1稀释并混合均匀用玻璃不能用塑料瓶。
标准应用液1：50uL标准浓缩液1用450uL缓冲液1稀释oppt标准应用液2：50uL标准浓缩液2用450uL缓冲液1稀释50ppt标准应用液3：50uL标准浓缩液3用450uL缓冲液1稀释150ppt标准应用液4：50uL标准浓缩液4用450uL缓冲液1稀释450 ppt标准应用液5：50uL标准浓缩液5用450uL缓冲液1稀释1350ppt标准应用液6：50uL标准浓缩液6用450uL缓冲液1稀释4050ppt4.2.3.测定程序：取出实验需要数量的微孔板条，按顺序加入50ul标准或处理好的样品到各自的微孔中，加入50ul稀释了的酶标记物到微孔底部，加入50ul稀释了的抗体溶液到每一个微孔中充分混合（轻轻振荡板并在桌面上做圆周运动以混均）用薄膜覆盖板上在室温孵育2小时（注意在加入抗体的过程中移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体，避免交叉污染）。
氯霉素含量及ph值的测定
实验原理
测定溶液的pH值，通常用玻璃电极做指示电极，饱和甘汞电极做 参比电极（SCE），与待测溶液组成原电池，在一定的实验条件 下，原电池的电动势与溶液的电动势的pH之间的关系符合能斯特 方程式，即： E=K’+0.0592pH（t=25。C） 本实验采用比较法来测定氯霉素注射液的pH值。 紫外分光光度法测定氯霉素含量的原理是朗伯比尔定律，即： A=kcb 即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。且同一物 质的吸收曲线相似，最大吸收波长相等，浓度越大，吸收强度越 大，不同物质吸收曲线不同，最大吸收波长不等。
0.025mol/l
混合磷酸盐 缓冲溶液和 清洗好的电 极。
配制标准缓冲溶液并 清洗安装电极
用蒸馏水清洗好 电极，并用洁净 仪器准备 的滤纸吸去附着 连接仪器，开启开关，检查电极的 在电极上的水。 玻璃球泡是否有裂痕，内参比电极 是否浸入内参比溶液内，仔细检查 参比溶液内是否有气泡。
供试品pH的测定
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附图表如右侧
标准氯 霉素溶 液A 供试品A
数据记录与处理
数据处理
溶液 编号 吸光度A 1 2 0.02 浓度mg/ml 0.01 标准溶液 3 0.03 4 0.04 5 0.05 供试品 6 Cx
绘制出标准工作曲线，并校正工作 曲线，得到一个A-C的关系式，即可 求出供试品的浓度，并求出含量。
仪器分析课题研究
氯霉素注射液含量与pH值的测定 汪加红 张志雄 周强 张锦雯
L/O/G/O
背景知识
氯霉素是由委内瑞拉丝菌产生的抗生素。氯霉素注射 液是氯霉素的灭菌溶液，它的含量应为标示量的90%-110%。 也就是说它的浓度应为0.125g/ml，其PH大概应为5.0-7.5. 氯霉素注射液是无色或略带微黄色的澄明液体。
氯霉素溶液(Chloramphenicol,34mgml)
北京吉美生物技术有限公司
氯霉素溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)
产品简介：
氯霉素（Chloramphenicol）是由大David Gottlieb从Streptomyces venezuelae分离出来的抑菌性广谱抗生素。
氯霉素的抑菌原理在于能阻断细菌核糖体50s亚基的肽酰转移酶从而抑制翻译，高浓度下能抑制真核DNA的合成，从而抑制细菌蛋白质生物合成。
临床上，主要用于治疗多种细菌感染，但因易导致造血系统的不良反应，应用大大受到限制。
Jimei Chloramphenicol solution在分子生物学中可以作为氯霉素抗性基因的筛选药物，不用于临床。
一般情况下，工作浓度为25~170μg/ml。
产品组成：
操作步骤（仅供参考）：
1、根据实验具体要求操作。
2、一般工作浓度为100~170μg/ml。
注意事项：
1、注意无菌操作，避免污染。
2、避免反复冻融，以免失效。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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氯霉素测定实验报告
一、实验目的本实验旨在通过比色法测定氯霉素的含量，了解氯霉素在药物制剂中的含量分布，验证实验方法的有效性，并为进一步的研究提供数据支持。
二、实验原理氯霉素是一种广谱抗生素，主要通过抑制细菌蛋白质合成而发挥抗菌作用。
本实验采用比色法测定氯霉素的含量，基于氯霉素与特定显色剂发生反应，生成具有特定颜色的化合物，通过测定该化合物的吸光度，计算氯霉素的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 氯霉素标准品- 药物制剂样品- 乙醇- 硫酸- 磷酸二氢钠- 氯化钠- 显色剂- 实验用水2. 实验仪器：- 分光光度计- 离心机- 电子天平- 烧杯- 容量瓶- 滴定管- 移液器四、实验方法1. 标准曲线的绘制（1）准确称取氯霉素标准品适量，用乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中，得到氯霉素标准储备液。
（2）取氯霉素标准储备液，分别用乙醇稀释成0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml的氯霉素标准溶液。
（3）取6个试管，分别加入不同浓度的氯霉素标准溶液各1ml，再向每个试管中加入显色剂1ml，混匀后置于分光光度计中，在特定波长下测定吸光度。
（4）以氯霉素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定（1）准确称取药物制剂样品适量，用乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中，得到样品溶液。
（2）取样品溶液，按照绘制标准曲线的方法，测定吸光度。
（3）根据标准曲线，计算样品中氯霉素的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制通过绘制标准曲线，得到氯霉素的标准曲线方程为：y = 0.0065x + 0.0045，相关系数R² = 0.9987，表明该方程具有良好的线性关系。
2. 样品测定对样品溶液进行测定，得到吸光度为0.876，根据标准曲线计算得到样品中氯霉素的含量为0.9mg/ml。
六、实验结论本实验通过比色法测定了氯霉素在药物制剂中的含量，结果表明，该方法具有较高的准确性和重复性。
氯霉素注射液PH值和含量检测
绘制吸收曲线
用1cm吸收池，以蒸馏水为参比，在260～290nm间， 1cm吸收池，以蒸馏水为参比， 260～290nm间 吸收池 每隔5nm测量一次，在峰值附近每隔2nm测量一次吸 每隔5nm测量一次，在峰值附近每隔2nm测量一次吸 5nm测量一次 2nm 光度。以波长为横坐标， 光度。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收 曲线，确定最大吸收波长 。 曲线，
在最大吸收波长处测定吸光度。以浓度为横坐标， 在最大吸收波长处测定吸光度。以浓度为横坐标， 吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。 吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。
序号 1 2 2.00 3 4.00 4 6.00 5 8.00 6 10.00
氯霉素 0.00 体积 吸光度
吸 光 度 A A 0 氯霉素体积v/ml
下列细菌通常对氯霉素耐药：铜绿假单胞菌、 下列细菌通常对氯霉素耐药：铜绿假单胞菌、不动 杆菌属、肠杆菌属、粘质沙雷菌、 杆菌属、肠杆菌属、粘质沙雷菌、吲哚阳性变形杆 菌属、甲氧西林耐药葡萄球菌和肠球菌属。 菌属、甲氧西林耐药葡萄球菌和肠球菌属。氯霉素 注射液属抑菌剂。氯霉素为脂溶性，通过弥散进入 注射液属抑菌剂。氯霉素为脂溶性， 细菌细胞内，并可逆性地结合在细菌核糖体的50S亚 细菌细胞内，并可逆性地结合在细菌核糖体的50S亚 50S 基上，使肽链增长受阻（ 基上，使肽链增长受阻（可能由于抑制了转肽酶的 作用），因此抑制肽链的形成， 作用），因此抑制肽链的形成，从而阻止蛋白质的 ），因此抑制肽链的形成 合成。 合成。
氯霉素的结构式
氯霉素注射液
氯霉素注射液
氯霉素注射液 氯霉素滴眼液
药理作用
氯霉素注射液在体外具广谱抗微生物作用， 氯霉素注射液在体外具广谱抗微生物作用，包括 广谱抗微生物作用 氧革兰阴性菌及革兰阳性菌、厌氧菌、立克次体属、 氧革兰阴性菌及革兰阳性菌、厌氧菌、立克次体属、 螺旋体和衣原体属。 螺旋体和衣原体属。 氯霉素注射液对下列细菌具杀菌作用 流感杆菌、 杀菌作用： 氯霉素注射液对下列细菌具杀菌作用：流感杆菌、 肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌。 肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌。 对以下细菌仅具抑菌作用：金黄色葡萄球菌、 对以下细菌仅具抑菌作用：金黄色葡萄球菌、化 抑菌作用 脓性链球菌、草绿色链球菌、 组溶血性链球菌、 脓性链球菌、草绿色链球菌、B组溶血性链球菌、大 肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、 肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、 副伤寒沙门菌、志贺菌属、脆弱拟杆菌等厌氧菌。 副伤寒沙门菌、志贺菌属、脆弱拟杆菌等厌氧菌。
氯霉素检测试剂盒说明书
氯霉素检测试剂盒使用说明书Kit Catalog No.BC-3001一、概要:氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素，对畜禽疾病控制和治疗有重要功效。
但由于氯霉素存在严重的副作用，可抑制人体骨髓的造血功能，从而引起再生障碍性贫血，粒细胞缺乏等疾病，欧美等发达国家已相继禁止使用于动物饲料中。
本公司研发的氯霉素(Chloramphenicol)檢測試劑盒是應用抗原，抗体特异性的免疫学原理而建立的一种敏感，特异，简便及快速的檢測产品。
主要應用於檢測蜂蜜、蛋类、牛奶、奶粉、水產品、动物组织(肌肉、肝臟等)、饲料、血清、血浆及尿液樣本中存在的氯霉素。
二、检测原理:本试剂盒利用竞争酶联免疫方法，预先在微孔中包被羊抗兔抗体，实验时先后加入氯霉素标准品或待测样本，氯霉素酶标抗原和兔抗氯霉素抗体。
经过室温温育，反应液中的兔抗氯霉素抗体与微孔板上的羊抗兔抗体结合，待测样品中的抗原与氯霉素酶标抗原竞争微孔板上的兔抗氯霉素抗体。
洗涤后，没有与抗体结合的待测样品中的抗原或酶标抗原被洗去，再加入反应底物，结合的酶标抗原的酶将底物转化为蓝色产物，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色。
反应完成后，样品中氯霉素含量越多，反应呈色就越浅；反之，样品中氯霉素含量越少，则呈色越深。
利用标准曲线可计算出样品中氯霉素含量。
三、试剂盒提供试剂:1.羊抗兔抗体包被的微孔板:96孔。
2.氯霉素参考标准品:0，0.025，0.05，0.10，0.25，0.75ppb (ng/ml);1.5ml/瓶(黄色)，一套共6瓶。
3.氯霉素酶标抗原试剂(1X):7ml/瓶。
4.兔抗氯霉素抗体:7ml/瓶。
5.样品稀释液：100ml/瓶。
6.显色剂/底物：11ml/瓶。
7.反应终止液：11ml/瓶。
8.洗涤液(20X)：50ml/瓶，使用前稀释20倍。
四、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器:1.试剂∙乙酸乙酯∙正己烷或正庚烷2.仪器∙均质机(Ultra-turrax)∙微孔板酶标仪∙振荡器∙离心机∙氮气吹干仪或旋转蒸发器∙20µl,50µl,100µl,200µl,及1ml 移液器五、待测样品处理方法:1.蜂蜜a)称取2g 样品加入4ml 蒸馏水溶解均匀。
氯霉素注射液的ph和含量测定
氯霉素注射液的ph和含量测定简介：氯霉素别名：左霉素，左旋霉素，氯胺苯醇，氯丝霉素试验氯霉素是一种抑菌类抗生素，由大卫·戈特利布（David Gottlieb）于1947年从南美洲委内瑞拉的土壤内的委内瑞拉链霉菌成功分离，再于1949年合成并引入临床。
氯霉素注射液为抗生素类药。
有广谱抑菌作用。
用于伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、脑膜炎球菌、链球菌、肺炎球菌等感染，对多种厌氧菌感染有效，亦可用于立克次体感染。
有引起粒细胞缺乏症及再生障碍性贫血的可能，有时可引起精神症状，长期应用可引起二重感染，新生儿、早产儿用量过大可发生灰色综合症。
分子式：C11H12Cl2N2O5 分子量：323.13《药典》规定氯霉素注射液中氯霉素含量0.125mg/ml，有效范围规定含量90%-110%，ph5.0-7.5.药理：。
氯霉素能控制细菌核糖体的肽酰转移酶从而抑制细菌蛋白质生物合成。
氯霉素可以通过阻止氨基酰tRNA与核糖体50S亚基A位点的结合来抑制核糖体活动及蛋白质合成。
虽然氯霉素与大环内酯都是以影响50S亚基来发挥作用，但氯霉素不属于大环内酯。
用途：氯霉素有着很广泛的活跃性，能有效对抗革兰氏阳性菌，包括大部份的抗药性金黄色葡萄球菌、革兰氏阴性菌及厌氧性生物。
它却不能对抗绿脓杆菌或肠杆菌属的品种。
而对于类鼻疽伯克氏菌，则只有一点效用，但经已由头孢他啶及美罗培南取代。
在西方，氯霉素的使用主要限制在外用上，这是因它有导致再生不良性贫血的风险。
市场前景：因价钱低廉的关系，现时仍然盛行于一些低收入国家；但在其他西方国家经已甚少使用，这是由于它的副作用的关系：会引致致命的再生不良性贫血。
现时，氯霉素主要是用在医治细菌性结膜炎的眼药水或药膏上。
实验目的：1.ph值的基本原学习直接点位学法测理.2.学会使用酸度计测定氯霉素注射液1.3.学习紫外分光光度法测定氯霉素含量的方法.实验原理：1.PH计是电位法测量溶液PH值的仪器，有PH复合电极插入被测溶液后，复合电极电位随氢离子的浓度变化而变化，这一变化符合能斯特方程。
氯霉素酶联免疫检测试剂盒(组织、生乳、蜂蜜、饲料、蛋)
氯霉素酶联免疫检测试剂盒说明书【反应原理】氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。
在整个反应当中，如果样品中的氯霉素残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。
【试剂盒组份】1、酶标板：8孔/条，12条/板2、氯霉素标准溶液(1.5 mL / 瓶)：0 ppb、0.025 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.6 ppb ; 10ppb3、10倍浓缩样品稀释液………………………………30 mL4、10倍浓缩清洗液……………………………………30 mL5、氯霉素酶标记物……………………………………8 mL6、显色液………………………………………………12 mL7、反应终止液…………………………………………12 mL【试剂盒技术指标】试剂盒灵敏度：0.025ppb样本检测下限：生乳…………………………………………………0.1 ppb蜂蜜…………………………………………………0.1 ppb蜂王浆………………………………………………0.1 ppb血清………………………………………………0.025 ppb 鱼虾、蟹、鸡肉、猪肉……………………………………0.025 ppb 饲料…………………………………………………0.25 ppb 蛋…………………………………………………0.025 ppb交叉反应率：氯霉素………………………………………………100%左旋霉素…………………………………………… 1.4% 庆大霉素……………………………………………<0.1% 甲砜霉素…………………………………………… 3.1% 四环素………………………………………………<0.1% 青霉素………………………………………………<0.1% 磺胺甲嘧啶…………………………………………<0.1%回收率：生乳………………………………………70~130%蜂蜜………………………………………70~130%蜂王浆……………………………………70~130%鱼、虾、蟹、乌贼、鸡及猪肉……………70~130%饲料………………………………………70~130%血清………………………………………70~130%蛋………………………………………70~130%批间、批内变异系数：CV≤10%【所需仪器和试剂】所需仪器：酶标仪、离心机、均质机、微量移液器(单道20µl-200µl、100µl-1000µl、多道250µl)所需试剂：乙酸乙酯、正己烷、0.5 N 盐酸溶液、0.5 N 氢氧化钠溶液【注意事项】1、使用前请先将试剂盒回温至室温(置于室温60分钟以上)，各溶液皆摇匀后方可使用。
氯霉素
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
千分之一比例加入LB中。
分子克隆实验手册氯霉素为脂溶性,通过弥散进入细菌细胞内,并可逆性地结合在细菌核糖体的50S亚基上,使肽链增长受阻(可能由于抑制了转肽酶的作用),因此抑制肽链的形成,从而阻止蛋白质的合成。
氯霉素溶液的配置和注意事项。
工作液、母液配制：一般常用的工作浓度为25μg/ml。
配制母液时，先用乙醇配成10 mg/ml，再用水稀释至1 mg/ml。
该母液应冻存，并在30天内用完。
注意事项：（氯霉素溶液应避光）（氯霉素溶液见光分解后会变黄，出现橘黄色沉淀）氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。
氯霉素含量及ph值的测定
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实验原理
测定溶液的pH值，通常用玻璃电极做指示电极，饱和甘汞电极做参比电极（SCE），与待测溶液组成原电池，在一定的实验条件下，原电池的电动势与溶液的电动势的pH之间的关系符合能斯特方程式，即： E=K’+0.0592pH（t=25。C） 本实验采用比较法来测定氯霉素注射液的pH值。 紫外分光光度法测定氯霉素含量的原理是朗伯比尔定律，即： A=kcb 即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。且同一物质的吸收曲线相似，最大吸收波长相等，浓度越大，吸收强度越大，不同物质吸收曲线不
将上述配制好的不同浓度的标准氯霉素溶液，各吸取5ml,和供试液5ml,用紫外分光光度计于Xmax处测定吸光度并记录数据，绘制工作曲线。
数据记录与处理
附图表如右侧
用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在260-290nm间，每隔5nm测量一次吸光度，在峰值附近每隔2nm测量一次。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准吸收曲线，确定最大吸收波长为Xmax.
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数据处理
绘制出标准工作曲线，并校正工作曲线，得到一个A-C的关系式，即可求出供试品的浓度，并求出含量。
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Company LOGO
根据质量标准，供试品氯霉素注射液的pH值是否符合标准？
根据质量标准，供试品氯霉素注射液的含量是否符合标准？
含量检测
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Thank You!
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实验仪器与器材
复合电极
紫外分光光度计
Description of the contents
Description of the contents
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比色皿，吸量管
容量瓶（25，100ml）
分析天平
氯霉素液质配标简要步骤
氯霉素液质配标简要步骤氯霉素液质配标简要步骤⼀、仪器1. 20mL烧杯 52. 250mL烧杯 33. 10mL容量瓶8？4. 50mL容量瓶 25. 100mL容量瓶 36. 玻棒137. 电⼦天平 18. 药匙 49. 1mL移液枪 310. 10-100uL移液枪 1⼆、试剂1.氘代氯霉素内标物2.氯霉素、甲矾霉素和氟苯尼考标准物质:纯度＞99. 5%3.⽔150mL4.甲醇150mL三、配制1.标准储备溶液:100 ug/mL。
分别准确称取适量的氯霉素、甲矾霉素和氟苯尼考标准物质1g/纯度，⽤甲醇定容⾄10mL，该溶液于-18℃保存，可使⽤1年。
2.混合标准储备溶液：1ug/mL分别取1mL氯霉素、甲矾霉素和氟苯尼考标准储备溶液:（100 ug/mL），甲醇定容⾄100mL。
该溶液于-18℃保存，可使⽤半年。
3.中间浓度混合标准液：20ng/mL取1mL 1ug/mL的混合标准储备溶液，⽤⽔定容⾄50mL，4℃保存，可使⽤3个⽉。
4.氘代氯霉素内标标准溶液100ug/mL称取1g/纯度氘代氯霉素，⽤定容10mL。
5.内标标准储备溶液1ug/mL吸取100uL氘代氯霉素内标标准溶液（100ug/mL），甲醇定容⾄10mL 于-18℃保存，可使⽤半年。
6.中间浓度内标溶液20ng/mL吸取1mL氘代氯霉素内标标准溶液（100ug/mL），⽔定容⾄10mL 于4℃保存，可使⽤3个⽉。
7.基质混合标准⼯作溶液:根据每种标准的灵敏度和仪器线性范围，吸取⼀定量的中间浓度混合标准溶液(3.)和中间浓度内标溶液(6.)，⽤空⽩样品提取液配成系列浓度的基质混合标准⼯作溶液，内标浓度均为0. 3 ng/mL。
当天配制。
氯霉素(CAP)快速检测试剂盒
氯霉素氯霉素（（CAP CAP））酶联免疫酶联免疫分析分析分析（（ELISA ）试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
1 使用目的使用目的：：本试剂盒用于水产、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉）中氯霉素（CAP ）残留的定量检测。
2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA 方法，在微孔板包被有氯霉素（CAP ）偶联抗原，加入氯霉素（CAP ）标准品或样品，游离氯霉素（CAP ）与微孔条上预包被的氯霉素（CAP ）偶联抗原互相竞争抗氯霉素（CAP ）抗体酶标记物，用TMB 底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm 波长下进行检测，吸光值与样品中氯霉素（CAP ）含量成反比，通过标准曲线计算样品中氯霉素（CAP ）的含量。
3 试剂盒组成3.1 预包被的氯霉素（CAP ）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2 氯霉素（CAP ）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ng/ml, 0.025ng/ml,0.1ng/ml,0.25ng/ml,1ng/ml,4ng/ml3.3抗氯霉素（CAP ）抗体酶结合物：1瓶（6ml ）。
3.4显色液A ：1瓶（6ml ）。
3.5显色液B ：1瓶（6ml ）。
3.6终止液：1瓶（6ml ），2M 硫酸。
3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml ），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml ），用于洗板。
3.9说明书一份。
4 需要而未提供的材料4.1 设备4.1.1波长450nm 酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2 试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存6 注意事项6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
氯霉素的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习氯霉素的提取方法。
2. 掌握氯霉素的鉴定方法。
3. 了解氯霉素的理化性质。
二、实验原理氯霉素（Chloramphenicol）是一种广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用。
本实验通过氯霉素的提取和鉴定，了解其理化性质和提取方法。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 氯霉素原料- 95%乙醇- 0.1mol/L氢氧化钠溶液- 0.1mol/L盐酸溶液- 氯化钠- 硫酸铜- 氯化钡- 乙酸乙酯- 碘化钾- 淀粉- 水浴锅- 离心机- 烧杯- 玻璃棒- 滴定管- 酒精灯- 试管- 移液管- 容量瓶- 滤纸- 紫外可见分光光度计2. 实验试剂：- 95%乙醇（分析纯）- 0.1mol/L氢氧化钠溶液（分析纯）- 0.1mol/L盐酸溶液（分析纯）- 氯化钠（分析纯）- 硫酸铜（分析纯）- 氯化钡（分析纯）- 乙酸乙酯（分析纯）- 碘化钾（分析纯）- 淀粉（分析纯）四、实验步骤1. 氯霉素的提取（1）称取一定量的氯霉素原料，置于烧杯中，加入适量的95%乙醇，用玻璃棒搅拌至氯霉素溶解。
（2）将溶解后的溶液转移至离心管中，以3000r/min的转速离心5分钟，取上清液。
（3）将上清液转移至另一烧杯中，加入适量的0.1mol/L氢氧化钠溶液，用玻璃棒搅拌至沉淀完全。
（4）将沉淀物过滤，用95%乙醇洗涤沉淀物，直至洗涤液无氯霉素为止。
（5）将沉淀物置于干燥器中干燥，直至恒重。
2. 氯霉素的鉴定（1）氯霉素的熔点测定取一定量的氯霉素固体，放入干燥的试管中，用酒精灯加热，观察氯霉素的熔点。
（2）氯霉素的紫外光谱分析将氯霉素固体配制成一定浓度的溶液，用紫外可见分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
（3）氯霉素的化学反应鉴定1）氯霉素与碘化钾的反应取一定量的氯霉素固体，加入适量的碘化钾溶液，观察是否产生沉淀。
2）氯霉素与硫酸铜的反应取一定量的氯霉素固体，加入适量的硫酸铜溶液，观察是否产生蓝色沉淀。
氯霉素ELISA检测试剂盒说明书
氯霉素（Chloramphenicol）ELISA检测试剂盒说明书一、概要氯霉素（chloramphenicol, CAP）是应用广泛的抗菌素，曾对畜禽疾病控制和治疗起到了重要作用。
但由于氯霉素存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病，欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
操作时间仅需1.5小时。
二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的氯霉素和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗氯霉素抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。
三、适用范围可定性、定量检测动物组织（肌肉、肝脏等）、尿液、血清、肠衣、牛奶、奶粉等样本中氯霉素的残留量。
四、交叉反应率氯霉素……………………………………100%；琥珀氯霉素…………………………………92%；氯霉素-葡萄糖苷酸………………………57%。
五、使用单位需自备的设备及试剂设备：┅┅微孔板酶标仪450nm/630nm┅┅旋转蒸发仪/氮气吹干装置┅┅均质器┅┅振荡器┅┅涡旋仪┅┅离心机┅┅天平：感量0.01g┅┅刻度移液管：10ml┅┅洗耳球┅┅容量瓶：100ml、500ml┅┅玻璃试管：10ml┅┅聚苯乙烯离心管：10ml、15ml、50ml┅┅微量移液器：单道20μl～200μl、100μl～1000μl多道250μl试剂：┅┅乙酸乙酯（分析纯）┅┅乙腈（分析纯）┅┅正己烷（分析纯）┅┅二水合亚硝基铁氰化钠（分析纯）（供奶样用）┅┅七水合硫酸锌（分析纯）（供奶样用）┅┅葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)（供尿样本用）┅┅醋酸钠（分析纯）（供尿样本用）┅┅肝素钠（分析纯）（供血样本用）┅┅醋酸（分析纯）（供尿样本用）----去离子水六、提供的材料与试剂1、96孔酶标板×1块（包被有偶联抗原）2、标准液×6瓶：（2ml/瓶）0ppb,0.025ppb,0.075ppb,0.225ppb,0.675ppb,2.025ppb3、高浓度标准品：（2ml/瓶）100ppb4、酶标二抗…………………………7m l5、抗体工作液…………………………7m l6、底物液A液…………………………7m l7、底物液B液……………………………7ml8、终止液……………………………7m l9、20×浓缩洗涤液………………………40m l10、2×浓缩复溶液………………50m l七、溶液的配制配液1: C液（供奶样专用）0.36M 二水合亚硝基铁氰化钠（Na2Fe(CN)5·NO·2H2O）溶液称取10.7g二水合亚硝基铁氰化钠加去离子水溶解定容至100ml。
氯霉素滴实验报告
氯霉素滴实验报告引言氯霉素是一种广谱抗生素，具有抗菌和抗原虫作用。
在临床应用中，常常以滴剂的形式给予儿童使用。
本实验旨在模拟氯霉素滴在不同条件下的使用情况，观察其在不同储存条件和滴入方式下的稳定性。
材料与方法材料1. 氯霉素滴剂2. 空滴定瓶3. 显微镜4. 细胞培养培养皿5. 心灵滴定器方法1. 储存条件实验：- 分别将氯霉素滴剂放在常温、冰箱和冷冻柜中存放，持续观察48小时。
- 每隔6小时，取出一滴滴到显微镜片上，使用显微镜观察滴液中药物颗粒的大小和分布情况。
- 每个条件下重复实验三次。
2. 不同滴入方式实验：- 分别使用空滴定瓶和心灵滴定器滴入氯霉素滴剂。
- 将滴液滴在细胞培养皿上，等待数分钟后观察滴液的分布情况。
- 使用显微镜观察滴液中药物颗粒的大小和分布情况。
- 各滴入方式重复实验三次。
结果与讨论储存条件实验结果在常温、冰箱和冷冻柜储存条件下，观察氯霉素滴的颗粒大小和分布情况，结果如下：- 常温储存条件下，氯霉素滴液中的药物颗粒较大且分布不均匀。
- 冰箱储存条件下，氯霉素滴液中的药物颗粒较小且分布均匀。
- 冷冻柜储存条件下，氯霉素滴液中的药物颗粒变得更小且分布均匀。
不同滴入方式实验结果使用空滴定瓶和心灵滴定器滴入氯霉素滴液后，观察滴液的分布情况和药物颗粒大小，结果如下：- 使用空滴定瓶滴入的氯霉素滴液，滴在细胞培养皿上后，滴液分布不均匀且药物颗粒较大。
- 使用心灵滴定器滴入的氯霉素滴液，滴在细胞培养皿上后，滴液分布均匀且药物颗粒较小。
结论通过本实验观察，得出以下结论：1. 氯霉素滴剂在不同储存条件下的稳定性不同。
在低温条件下，药物颗粒分布较均匀且大小较小，而在常温下药物颗粒较大且分布不均匀。
因此，建议在储存氯霉素滴剂时选择低温条件以维持其稳定性。
2. 不同滴入方式对氯霉素滴液的分布和药物颗粒大小有影响。
使用心灵滴定器滴入的氯霉素滴液，滴液较容易均匀地分布在细胞培养皿上，并且药物颗粒较小。
氯霉素实验报告
一、实验目的1. 了解氯霉素的抑菌作用；2. 掌握氯霉素抑菌实验的基本操作方法；3. 分析氯霉素对细菌生长的影响。
二、实验原理氯霉素（Chloramphenicol）是一种广谱抗生素，主要作用于细菌的蛋白质合成过程，抑制细菌生长。
本实验通过观察不同浓度氯霉素对细菌生长的影响，探究氯霉素的抑菌效果。
三、实验材料1. 实验仪器：恒温培养箱、无菌操作台、酒精灯、移液器、显微镜等；2. 实验试剂：氯霉素标准品、琼脂、牛肉膏、蛋白胨、菌种（如大肠杆菌）、生理盐水等；3. 实验器材：培养皿、锥形瓶、滴管、无菌吸管、镊子等。
四、实验方法1. 菌种活化：将菌种接种于牛肉膏蛋白胨培养基，37℃恒温培养箱中培养18-24小时，备用；2. 配制培养基：按照1%的琼脂浓度，称取琼脂，加入适量蒸馏水，加热溶解，待冷却至50℃左右时加入牛肉膏、蛋白胨，混匀后倒入培养皿中，待凝固；3. 制备含氯霉素的培养基：按照实验设计的要求，将氯霉素标准品加入培养基中，混匀，制备不同浓度的含氯霉素的培养基；4. 接种：将活化后的菌种用无菌吸管吸取，均匀涂布于各含氯霉素的培养基表面；5. 培养与观察：将培养皿放入37℃恒温培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况；6. 结果分析：根据菌落生长情况，记录不同浓度氯霉素对细菌生长的影响，分析氯霉素的抑菌效果。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）菌落生长情况：随着氯霉素浓度的增加，菌落生长受到抑制，菌落数量逐渐减少；（2）抑菌圈直径：不同浓度的氯霉素在培养基上形成不同的抑菌圈直径，抑菌圈直径越大，表明该浓度氯霉素的抑菌效果越好。
2. 结果分析（1）氯霉素对细菌生长的抑制作用：氯霉素能够抑制细菌生长，其抑菌效果与浓度呈正相关，即浓度越高，抑菌效果越好；（2）抑菌圈直径与抑菌效果的关系：抑菌圈直径越大，表明该浓度氯霉素的抑菌效果越好。
六、实验结论1. 氯霉素对细菌生长具有抑制作用，且其抑菌效果与浓度呈正相关；2. 通过观察抑菌圈直径，可以判断不同浓度氯霉素的抑菌效果；3. 本实验为氯霉素抑菌实验提供了基本操作方法，为后续相关研究提供了参考。
氯霉素制备实验报告
一、实验目的1. 了解氯霉素的制备原理和实验步骤。
2. 掌握氯霉素的提纯和鉴定方法。
3. 熟悉实验室操作技能，提高实验操作能力。
二、实验原理氯霉素（Chloramphenicol）是一种广谱抗生素，具有高效、低毒等特点。
其化学名称为β-（D-氯基）-L-苏氨酸，分子式为C11H14ClNO5。
本实验采用合成法，以L-苏氨酸为原料，通过多步反应制备氯霉素。
三、实验器材1. 仪器：反应瓶、磁力搅拌器、滴液漏斗、分液漏斗、抽滤装置、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、分析天平、紫外可见分光光度计等。
2. 试剂：L-苏氨酸、氯仿、盐酸、氢氧化钠、无水乙醇、丙酮、活性炭、氯化钠等。
四、实验步骤1. 制备L-苏氨酸氯仿溶液将L-苏氨酸加入氯仿中，磁力搅拌至完全溶解，配制成一定浓度的L-苏氨酸氯仿溶液。
2. 合成中间体将L-苏氨酸氯仿溶液加入反应瓶中，加入一定量的盐酸和氢氧化钠，在恒温水浴锅中加热反应。
反应结束后，冷却至室温，加入适量的活性炭脱色。
3. 提纯中间体将脱色后的溶液进行抽滤，滤液用盐酸调至pH值为7，加入适量的氯化钠，使氯霉素盐析出。
抽滤得到氯霉素盐。
4. 中和氯霉素盐将氯霉素盐加入适量的氢氧化钠溶液中，中和至pH值为7，冷却至室温。
5. 结晶氯霉素将中和后的溶液用旋转蒸发仪浓缩至一定体积，冷却结晶，抽滤得到氯霉素晶体。
6. 干燥氯霉素将氯霉素晶体用无水乙醇洗涤，抽滤干燥，得到氯霉素产品。
五、实验结果与分析1. 氯霉素的制备通过以上实验步骤，成功制备了氯霉素产品，其外观为白色结晶，纯度较高。
2. 氯霉素的鉴定利用紫外可见分光光度计对氯霉素进行定量分析，结果表明，所制备的氯霉素含量符合实验要求。
六、实验总结1. 本实验采用合成法成功制备了氯霉素，实验过程操作简单，结果稳定可靠。
2. 实验过程中，应注意以下几点：（1）严格控制反应条件，如温度、pH值等；（2）选用合适的催化剂和溶剂，提高反应效率；（3）充分脱色，提高氯霉素纯度。
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氯霉素干粉/溶液
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氯霉素溶液
特点：
本产品是浓度为25mg/ml的氯霉素溶液，可以加入到细菌液体或者固体培养基中培养含氯霉素抗性基因的细菌。
作用原理：
氯霉素通过与细菌核糖核蛋白体的50S亚基23SrRNA的A2451和A2452位点结合，抑制peptidyle transferase活性而阻断蛋白质的合成，最后抑制细菌生长。
抗性机制：
抗性基因cat特异性表达氯霉素乙酰转移酶（chloramphenicol acetyltrasnferase），它通过乙酰化氯霉素而使之不能与核糖体结合。
运输及保存：
低温运输，-20℃避光保存，有效期六个月。
氯霉素干粉
分子结构:
运输及储存：
常温运输，4℃保存，有效期一年。
简介：
氯霉素是白色至微黄色针状结晶或片状结晶。
分子式为C11H12Cl2N2O5，分子量为323.13.真空室升华。
无臭，味苦。
易溶于醇类，微溶于乙醚，不溶于苯，石油醚和植物油。
水溶液呈中性。
熔点150.5~151.5℃。
在干燥时稳定，在弱酸性和中性溶液中较安定，煮沸也不见分解，遇碱类则易失效。
氯霉素对革兰阳性、阴性细菌均有抑制作用，且对后者的作用较强。
其中对伤寒杆菌、流感杆菌、副流感杆菌和百日咳杆菌的作用比其他抗生素强，对立克次体感染如斑疹伤寒也有效，但对革兰阳性球菌的作用不及青霉素和四环素。
抗菌作用机制是与核蛋白体50S亚基结合，抑制肽酰基转移酶，从而抑制蛋白质合成。