生化基础物质检测—蛋白质检测

临床意义：婴幼儿及儿童比成人高； 升高：雌激素，低蛋白血症可使其含量升高； 降低：胰腺炎及前列腺癌时。
参考值：1.31-2.93g/L
（八）铜蓝蛋白(CER) 急性时相反应蛋白
结构： MW=12-16 万, 1046个aa残基构成的单链多肽，含 糖约１０％，每分子铜蓝蛋白可结合６～８个铜原子。
理化性质：肝合成,巨噬细胞和淋巴细胞合成少量；pI 值为 4.4， 具遗传基因多态性。
临床意义：第一个认定的急性时相反应蛋白,是急性时相反 应的一个敏感指标，在ＡＭＩ、创伤、感染、外科手术时含 量迅速升高，达到正常的2000倍。
参考值：＜ 8.0mg/L （血浆）
小结
急性时反应蛋 白的种类
【 生
急性时反应蛋
化 检
白的功能
验
的
项
目
】
主要蛋白质概述
教学目标
掌握：血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆
纤维蛋白原
醋酸纤维素薄膜
+-
Ø功能分类:
小结
血浆脂蛋白的
【 主
种类
要 蛋
白
质
血浆脂蛋白的
】
功能
蛋白质（前白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能。
熟悉：酶促反应动力学。 了解：其他蛋白质的来源和生理功能。
血浆蛋白质检验基本知识
机体主要的
机体蛋白质： 生物大分子 体液蛋白质的检测：
含量：人体固体成分的45%
种类：10万，3000~5000种/单细胞 功能：生长，代谢、血凝、运动、免 疫、信息传递等
疾病发生
测定方法：免疫化学（扩散或比浊）等
功能：具氧化酶活性且起抗氧化剂作用，铜的无毒代谢库
临床意义： 增加感染,创伤,肿瘤; 降低--营养不良，严重肝病及肾综;协助诊断Wilson 病
参考值：0.21-0.53g/L
（九）转铁蛋白(TRF) 急性时相反应蛋白
结构： MW=7.7 万,单链糖蛋白，含糖约６％。
功能：营养作用，载体功能（高亲和力），维持血浆渗透压和 正常pＨ值。
临床意义：合成受食物影响，敏感性较低。 降低:在营养不良，肝功不全，急慢性肝疾病时;
增高:少见,假性升高。
参考值：35-50 g/Ｌ
（三）α1-抗胰蛋白酶（AAT） 急性时相反应蛋白
结构：394个aa残基构成的单链多肽，含10％～12%的糖 MW=5.5 万。
急性时反应蛋白
教学目标
掌握：个别血浆蛋白质（前白蛋白、白蛋白） 的来源和生理功能。
熟悉：急性时相反应蛋白的概念和种类。
急性时相反应机制：
当机体受到损伤或炎症时释放小分子蛋白质导致肝细胞 中上述蛋白质的合成增加或减少。
急性时相反应的应用：
急性时相反应时,血浆蛋白质的变化和创伤的时间进程有关， 可用于鉴别急性、亚急性和慢性病理状态。
理化性质：pI值为4.8，占α1-球蛋白区带显色的90％。
测定方法：免疫化学法，电泳（酸性凝胶电泳或等电聚焦电 泳），利用蛋白酶抑制能力测定等。
功能：蛋白酶抑制物（具有90％的抑制蛋白酶活力）。如糜 蛋白酶，弹性蛋白酶，但此抑制作用有明显的pＨ依赖性。
临床意义： 降低：血浆AAT仅见于胎儿呼吸迫综合症。 升高：炎症、术后，某些激素治疗后。
理化性质： pI 值为5.7，淋巴细胞合成，存在细胞表面，特别 是淋巴和肿瘤细胞。释放入血循环。半衰期107 分钟，几乎由 肾小管回收。
测定方法：放射免疫化学等。
功能：分子量小，可自由通过肾小球滤过膜，在肾小管几 乎全部重吸收，可监测肾小管功能；是HLAβ链的轻链部 分。
临床意义：增高：肾功能衰竭，炎症及肿瘤时。
参考值： 200~400mg/L 。
（二）白蛋白（ALB） 急性时相反应蛋白
结构：585个aa残基构成的单链多肽， MW=66458，含17个 二硫键。
理化性质：pI=4－5.8，肝细胞合成但不储存，半衰期为15-19 天，占总蛋白的40%－60%，pＨ7.4时带负电。
测定方法：色素结合法:溴甲酚绿（BCG），溴甲酚紫（BCP）, 盐析等。
理化性质：肝细胞合成， pI 值为5.5-5.9,半寿期7 天，可逆结 合多价离子如Fe,Cu,Zn,Co 等，一分子TRF 可结合两个三价 铁。
测定方法：免疫扩散法，放免法和免疫比浊法等。
功能：运输铁。
临床意义：血TRF 浓度受铁供应调节，缺铁TRF 升，铁治疗 后恢复。可用于贫血的诊断和对治疗的监测。
参考值： 0.83－1.99g/L
（四）α1-酸性糖蛋白（AAG） 急性时相反应蛋白
结构：181个aa残基构成的单链多肽， MW=4万，含45%的 糖，其中唾液酸占11%－12%。
理化性质：pI 值2.7－3.5，肝合成，脓毒症时粒细胞和单核细 胞及某些肿瘤组织也可合成。 位于α1-球蛋白区带。
测定方法：免疫化学法（扩散,浊度）,化学法（间接法）， ELISA法等
体液蛋白质异常
血浆蛋白质的组成、功能及分类
要判断异常
首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能及分类及特点
种类：1000种
500种
200种
： 含量：μg
mg
g
来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂
①营养作用，修补组织蛋白; ②维持血浆胶体渗透压：白蛋白维持75%~80%的血浆渗透压； ③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质； ④作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体； ⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子； ⑥催化作用：酶的本质； ⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶； ⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除Ⅳ因子外均可
参考值：1.0 2.5 mg/L （血浆）
（十一）C-反应蛋白质(CRP) 急性时相反应蛋白
结构： MW11.5-14 万，分子含５个相同的亚基，亚基间靠 非共价键连接成圆盘状多聚体。 理化性质：肝合成， pI 值为6.2，电泳位于 r 区带。 测定方法：半定量沉淀法（早），免疫化学法。
功能：结合多糖，磷脂和核酸；激活补体，抗凝。
参考值：20-100μg/L(成人) < 5g/L(新生儿)
（六）结合珠蛋白(Hp) 急性时相反应蛋白
结构： 两对肽链形成四聚体，有变异体。 理化性质：肝合成， pI 值为4.1，电泳位a2 -球蛋白区带 测定方法：电泳法，免疫化学法（扩散,浊度）,化学法等
功能： 与红细胞中释出自由Hb 结合,防止Hb 从尿中丢失保存 铁, 急性溶血后一周再生恢复。 高效的过氧化物酶。 需铁细菌的天然抑菌剂。
临床意义： 升高：急性时相反应； 降低：血管内溶血时；雌激素作用。
参考值：0.5-2.2 g/L
（七）α2-巨球蛋白(AMG)
结构： MW=62～80 万,分子量最大，由四个相同的亚基组 成，含糖量约８％。
理化性质：肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，半寿期5 天。
测定方法：免疫化学等
功能：与多种分子和离子结合，影响蛋白水解酶活性（主要 的蛋白酶抑制剂具有选择性保护某些酶的作用）。
理化性质：pI 值４.7-４.8，在白蛋白和α1-球蛋白之间。胎儿 肝／卵黄囊合成，成人量微，升高由于肿瘤细胞合成。
测定方法：免疫化学法（扩散,火箭电泳）,ELISA等
功能：胎儿血浆主要蛋白质，调节肝细胞生长和脑细胞发育； 抑制细胞和体液的免疫反应；维持正常妊娠，防止母婴排斥。
临床意义：胎儿产前监测（羊水或母血） 增高：原发性肝癌患者诊断和鉴别（80%原发增高）， 其他 癌症也可见增高。
（一）前白蛋白（PA） 急性时相反应蛋白
结构： MW=54000，四个相同亚基构成的四聚体。 理化性质：pＩ＝4.7，肝细胞合成，半寿期12 小时。 测定方法：免疫比浊法／免疫扩散技术。
功能：营养指标，载体功能（甲状腺素／维生素Ａ）。
临床意义： 敏感性高的指标； 降低：营养不良，肝功不全， 急性炎症，恶性肿瘤， 肝硬 化及肾炎时。
降低:急性时相反应、慢性肝病、营养不良及蛋白丢失时； 升高：妊娠或雌激素会使其降低;缺铁性低色素贫血。
参考值： 2.5--4.3 g/L (成人) 1.30--2.75 g/L (新生儿)
（十）β2 －微球蛋白(BMG)
结构： MW=11800， 100个aa残基构成的单链多肽，分子中 含一对二硫键，不含糖。
功能：与免疫防御功能有关，机制不详；抑制血小板凝集影 响胶原纤维形成；参与脂类运输。
临床意义： 升高：急性炎症，组织损伤，风湿，肿瘤，AMI ，溃结时； 降低：营养不良降低, 严重肝损伤和雌激素作用。
参考值：０.25－2.0g/L 。
（五）甲胎蛋白(AFP)
结构：590个aa残基构成的单链多肽， MW=6.5万～７万，含 4%的糖。
： 依据来源、分离方法和生理功能 肝生成：绝大多数血浆蛋白质
其他组织细胞生成：免疫球蛋白和蛋白类激素
盐析法：白蛋白/球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液）
醋酸纤维素薄膜电泳：6种
分
电泳法： 琼脂糖凝胶电泳：13种
辨 率
Байду номын сангаас
聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种
增
SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种 高
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