大孔吸附树脂分离纯化冬凌草甲素
大孔树脂吸附法在中药分离_纯化中的应用
2009年1月摘要：大孔吸附树脂是70年代以来发展起来的有机高聚吸附剂，具有选择性吸附有机化合物的能力。
它的吸附作用是通过表面吸附、表面电性或形成氢键。
树脂吸附法是非常有效、工艺简单、生产成本较低的一种提取分离中药中有效成分或有效部位的方法。
但其吸附性能及解吸纯化条件参数受被吸附化合物的理化性质和其他条件的影响。
本文就在中药分离纯化中的应用以及影响其吸附能力的因素用作一概述。
关键词：大孔树脂；纯化；概述大孔树脂吸附法在中药分离、纯化中的应用白金刚*，**张典瑞*刘向荣**中图分类号：R284.2文献标识码：B 文章编号：1006-0979（2009）01-0089-02*山东大学药学院（２５００１２）**青岛国风药业股份有限公司（２６６５１０）２００８年１１月１１日收稿1在中草药有效成分的分离、纯化中的应用大孔树脂有在中草药分离中有着广泛的应用前景，尤其在水溶性成分的分离中显示出越来越重要的作用。
如对生物碱、黄酮、皂苷、香豆素及其他一些成分都有一定的吸附作用。
对糖类的吸附能力很差，对色素的吸附能力较强[1]。
其操作的基本程序大多是：中药提取液→通过大树脂→吸附上有效成分的树脂→洗脱→洗脱液→回收溶液→药液→干燥→半成品。
1.1苷类化合物分离纯化中的应用：大孔树脂在苷类的纯化中已得到广泛应用。
如从甜叶菊中提取甜味菊苷，从绞股蓝中提取绞股蓝皂苷、白芍总苷、刺人参苷、丝瓜皂苷等。
刘雄[2]考察D-101大孔吸附树脂对柴胡总皂苷的吸附性能和洗脱条件，以柴胡提取液15mL （0．2g 药材/mL ）上柱，70的乙醇洗脱，柴胡总皂苷洗脱率为71.83%，且除杂能力强。
蔡雄、刘中种[3-5]等人用D-101大孔树脂（天津）富集纯化人参总皂苷、三七总皂苷、毛冬青总苷，将提取液上柱，依次用100ml 蒸镏水和50ml 乙醇洗脱。
人参总皂苷洗脱率在90%以上，50%乙醇洗脱液干燥后总固物中人参总皂苷纯度可达71.1%；毛冬青总皂苷洗脱率达95%，50%乙醇洗脱液干燥后总固物中毛冬青总皂苷纯度可达57.5%。
冬凌草中冬凌草甲素、乙素的研究进展
冬凌草中冬凌草甲素、乙素抗肿瘤药效研究进展冬凌草又名冰凌草、六月令，得名于冬天全株结满薄如蝉翼的银白色冰凌片。
冬凌草为唇形科香茶菜属植物碎米桠Rabdos ia rubescens( H em s.l )H a ra 的地上草质部分, 产于我国河南、山西、四川、贵州等地。
冬凌草味苦, 性微寒, ，有广泛的生物活性，具有抗炎、降压、清热解毒、消炎止痛、健胃活血等多种药理作用。
河南民间用于治疗咽喉肿痛、食管癌等已有五十余年历史,临床报道其水及醇提取物对食管癌、贲门癌、肝癌、乳腺癌有一定疗效[1]。
近年来的药理研究充分证明, 冬凌草有良好的消炎、抗菌、镇痛作用, 可有效地抑制甲型、乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等, 从而提高机体的抵抗力, 研究证明二帖类中的冬凌草甲素和冬凌草乙素是抗肿瘤的有效成分[2]。
由于该植物及其主要活性成分良好的抗肿瘤作用和它们在毒性实验中显示的无明显毒性，冬凌草引起了国内外医药界学者的广泛关注。
近30 年来，国内外学者对冬凌草及其同属植物进行了多方面的研究。
1．冬凌草的化学成分冬凌草中的主要成分是贝壳杉烷二萜类化合物。
现已从各产地冬凌草中分得20 多个的此类化合物，主要为母核对映贝壳杉烯和螺断贝壳杉烯结构。
从冬凌草中分得三萜、甾体类成分α- 香树脂醇、β- 谷甾醇、2α- 羟基乌索酸、β- 胡萝卜甙、熊果酸等。
研究表明，从冬凌草茎叶精油中已分离鉴定了α- 蒎烯、β- 蒎烯、柠檬烯、1，8- 桉叶素、对- 聚伞花素、壬醛、癸醛、β- 榄香烯、棕榈酸、线蓟素、胡麻素和水杨酸。
冬凌草甲素、乙素是唇形科(Labiatae)香茶菜属(Rabdosia)植物中的2种重要活性二萜成分。
1.1冬凌草甲素冬凌草甲素分子式：C20H28O6，熔点248℃-250℃，微溶于水，溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮等。
冬凌草甲素对多种癌细胞具有很强的杀灭抑制作用，主要用于抗癌，抗菌、抗肿瘤、杀虫清热解毒、消炎止痛、健胃活血及等作用冬凌草甲素结构示意图1.2冬凌草乙素冬凌草乙素 C20H2606是从中草药冬凌草中提取出来的具有抗癌活性的天然有机物，为中成药冬凌草片和冬凌草糖浆的有效成分，其结式如图1所示，从图中可知，分子中存在1个a一亚基环戊酮结构，即A环区。
制备色谱纯化冬凌草活性成分冬凌草甲素
主鱼
浓缩 干燥 ， 冬 凌草 甲素 白色 粉末 。 得
３３ 制 备 样 品 的 质 量 分 数 测 定 ．
３ ／ ｎ 流动 相 的流速 。 ５ ｍＬ ｍｉ为
表 ２ 流 动相 的流 速 对 分 离 冬 凌 草 甲 素 的 影 响
流动 相 的流速 ／ 保 留时 间／ 分离 度／ 冬凌草 甲素 的质量分 数
试剂： 甲醇 ， 水 ， 纯 体积 分 数９ ％７ 醇 （ 为分析 件 下开 机 ， ５ ， 均 每次 进 样５ｍ 收 集相 应 的流 出液 ， 发 Ｌ， 蒸
６ 中国制药装备・０ １ ６ 第 ６ ２ １ 年 月・ 辑
Ｇｎ ｈ Ｇｎ ｉ ｅ ｉ三 ｏ ｃ ｌ 。 ｙ ｕｈ ｅ ｇ ｅ ｇ Ｓ ｂ ｌ ｇ ｙ
甲 素 经 反 相 制 备 色 谱 分 离 纯 化 ， 离 条 件 为 ： 谱 柱 （ ３ ０ ＇Ｔ， ａ ｎｉＣ１ ， 径 ２ ￣４ ｍ） 流 动 相 ： 醇一 水 分 色 Ｉ ×７ ０ＩＩ Ｄｉ Ｄ６ Ｄ Ｉ ｍｏ ｓ ＿ ｌ ８粒 ５ ０ ； 甲
（５４ ） 流速 ：５ｍＬ ｍｉ； ５ ：５ ； ３ ／ ｎ 检测波长 ：３ ｌ； ２ ９ｎ ｌ进样体积５ｍＬ 将 收集 到的洗 脱液蒸发浓缩干燥 ， Ｔ 。 得冬凌草 甲素粉末 。２ ｇ １０ 冬
Ｉ 程 艺 设 ◆ ｏｃｎＧ ｇＹＳ ｂ 工 工 与 备 Ｇ ｇｅ ｎｉ ｅ ｎｈｇｏｙｕｈｅ
制 备色谱纯化 冬凌草 活性成 分冬 凌草 甲素
赵 新燕 周建民 秦 学
（ Ｐ 万合 工 业制 造有 限公司 ， ｅ城 山东 聊城 ２ ２ ２ ） 醇 热 浸 取 法 保 温 回 流 ３ 冬 ５ ０ｍｉ， 滤 ， 取 液 经 浓 缩 得 到 粗 品 冬 凌 草 甲 素 浸 膏 。 粗 品冬 凌 草 ｎ过 提
大孔吸附树脂分离纯化冬凌草甲素条件的优化
大孔吸附树脂分离纯化冬凌草甲素条件的优化摘要：比较了大孔吸附树脂D-101、DM-130、AB-8和NKA-9对冬凌草甲素的吸附和解吸附能力。
结果表明，AB-8树脂对冬凌草甲素具有较好的吸附分离性能。
其最佳分离纯化工艺条件为，吸附时进料浓度0.486 mg/mL、流速2 BV/h、进样量4 BV；解吸附时体积分数80%的乙醇溶液作洗脱剂、流速1.5 BV/h、洗脱剂用量3 BV。
经AB-8树脂吸附与解吸附后，冬凌草甲素回收率为78.4%；用甲醇重结晶后纯度达到99.5%，回收率为54.3%。
关键词：大孔吸附树脂；冬凌草甲素；分离纯化；吸附；解吸附Optimization of Separation and Purification Conditions of Rubescensine A by Macroporous Adsorption ResinAbstract：The adsorption and desorption capacities of four kinds of macroporous adsorption resins，D-101，DM-130，AB-8 and NKA-9 were compared. The results showed that AB-8 resin had the best adsorption and desorption capability. And the optimum technology parameters for adsorption were feeding concentration 0.486 mg/mL，flow rate 2 BV/h and feeding volume 4 BV；for desorption were 80%（volume fraction）alcohol as elution solvent，flow rate 1.5 BV/h and elution volume 3 BV. After treated with AB-8，the yield of rubescensine A was 78.4%. And the purity of rubescensine A could be up to 99.5% if recrystallized by methanol，and the yield was 54.3%.Key words：macroporous adsorption resin；rubescensine A；separation and purification；adsorption；desorption收稿日期：2012-09-13冬凌草（Isodon rubescens）又名碎米桠，为唇形科香茶属多年生小灌木植物，广泛分布于我国中部和南部，主产于河南太行山南麓济源、焦作、鹤壁等地[1]。
中药有效部位分离纯化新技术-李庆国(广州中医药大学)
比上柱量：达吸附终点时，单位质量干树 脂吸附夹带成分的总和。用于评价树脂吸附、 承载能力。比上柱量越大，承载能力越强，是 确定树脂用量的关键参数。计算公式为：
S＝（M上－M残）／W
其中M上为上柱溶液中指标成分的质量（上 柱溶液体积×指标成分浓度）；或以上柱溶液 相当于药材质量表示，则为上柱溶液体积与单 位体积浸出液相当于药材质量的乘积。M残为 过柱流出液中指标成分的质量（过柱流出液体 积×指标成分浓度）。W为干树脂重量。
大孔树脂电镜照片
比表面积：大孔吸附树脂单位质量
的表面积即为比表面积，一般以m2／g 表示。比表面积一般可达500～1000m2 ／g，具有良好吸附性能。
孔容：也称孔体积，指单位质量大
孔树脂孔的总体积，以ml／g表示。大 孔吸附树脂的孔容一般为0.5～1.1ml／g。
孔径：大孔树脂的平均孔径。
2. 吸附原理与性能
大孔树脂吸附分离技术的核心是吸附树脂 的性能及其应用工艺。
1．组成与结构
大孔吸附树脂主要以苯乙烯、二乙烯苯等 为原料，在0.5％的明胶溶液中，加入一定比 例的致孔剂聚合而成。其中，苯乙烯为聚合单 体，二乙烯苯为交联剂，甲苯、二甲苯等作为 致孔剂，他们互相交联聚合形成了大孔吸附树 脂的多孔骨架结构。致孔剂有石蜡、溶剂汽油、 煤油、碳醇、聚乙烯醇等。
骨架材料是否带功能基团，可分为非极性、
中等极性、极性和强极性四种类型。
3．类型与规格
树脂极性 非极性
实例 聚苯乙烯、聚芳烃、聚乙基苯乙烯等
中极性
聚丙烯酸酯，聚甲基丙烯酸酯等；
极性
聚丙烯酰胺，聚丙烯，聚乙稀吡咯烷酮
强极性 聚乙烯吡啶，苯酚－甲醛－胺缩合物等
非极性大孔吸附树脂：一般是指电荷分 布均匀，在分子水平上不存在正负电荷相对 集中的极性基团的树脂，大部分为苯乙烯、 二乙烯苯聚合物。
天然药物化学实验教学过程中科研反哺教学的实践——以冬凌草甲素的提取、分离和结构鉴定为例
C U R R I C U L U M T E A C H I N G“天然药物化学”实验教学过程中科研反哺教学的实践—以冬凌草甲素的提取、分离和结构鉴定为例赵杰吕洁丽张涛刘兆敏(新乡医学院河南•新乡453003)摘要“天然药物化学”是药学专业中理论和实践并重的专业基础课。
针对实验课程教学现状和不足，提出在教学过程中实施科研反哺教学，将科研精神用于教学，将科研成果引入课堂及开展实验、科研课题等方式，以改进“天然药物化学”课程教学质量，培养学生综合素质。
本文以冬凌草甲素的提取、分离和结构鉴定为例，进行科研反哺教学的探索和实践。
关键词天然药物化学科研反哺教学冬凌萆甲素中图分类号:G424 文献标识码:A DOI:10.16400/ki.kjdkz.2021.02.040Practice of Research Feedback Teaching in Experimental Teachingof Natural Medicinal Chemistry-------Take the extraction, isolation and structure identification o f oridonin as an exam ple ZHAO Jie, LV Jieli, ZHANG Tao, LIU Zhaomin(Sanquan Medical College, Xinxiang, Henan 453003)Abstract "Natural medicinal chemistry"is a basic course which emphasizes both theory and practice in pharmacy.In view of the current situation and shortcomings of experimental teaching,this paper proposes to implement scientific research feedback teaching in the teaching process,apply scientific research spirit to teaching,introduce scientific research achievements into the classroom and carry out experiments and scientific research projects,so as to improve the teaching quality of natural medicinal chemistry and cultivate students'comprehensive quality.Taking the extraction, separation and structure identification of oridonin as an example,this paper explored and practiced the teaching of scientific research feedback.Keywords natural medicinal chemistry;scientific research nurtures teaching;oridonin天然药物化学就是运用现代科学理论与方法研究天然 药物中化学成分的一门学科。
冬凌草甲素提取工艺进一步纯化的研究
转动头部则眩晕加 重，伴恶心 ，曾呕吐苦水数 次，体沉嗜卧。
查其精神倦怠 ，舌质淡 ，苔 白微腻 ，脉滑 。辨证属痰浊 中阻型 眩晕 ， 以健脾和胃、 治 清热化痰 。 方选温胆汤加 味治疗 。 药用 ： 法半夏 １ ｇ ５ 、竹茹 １ｇ ５ 、菖蒲 １ｇ ５ 、茯神 ２ ｇ ５ 、陈皮 １ ｇ ５ 、枳实 １ｇ ５ 、焦三仙各 １ ｇ ５ 、甘草 ６ 。药进 ３ ，恶心、呕吐 、眩晕 ｇ 剂
显效 （ 症状体 征消失 ，半年 以上无复发者） ６例 ：有效 （ ３ 症 状 明显 改善 ； 或症状体征消失， 半年 内复 发， 治缓 解） ３ ； 经 １例
无 效 （ 状 体 征无 改善 者 ） 例 。 症 １
４ 典型病例 例 ｌ ：张某 ，男，４ Ｏ岁，患眩晕病 ｌ Ｏ余年 。２ ０ ０ ７年 １ Ｏ 月１ ７日就诊 。初诊时，自述 头晕 己三 四天 ，头沉如毛 巾所裹，
冬凌草 （ 购于 山东济宁医药药材有限公司） ；冬凌草 甲素
（ 陕西琳静 科工贸有 限公司 ，标示纯度 ９ ． ％ ；柱层析 硅胶 ８２ ） （０ ￣２ ０ 目，青 岛海洋化工厂 ） ｉ０ ０ ：活性炭 （ 天津市标准科技 有限公司） ；石油醚 （ 沸程 ６ ￣９ ０ ０℃，分析纯 ） ；丙酮 （ 天津 市恒兴科 技有限公司 ） 甲醇 （ ； 色谱纯， 山东禹王实业有 限公
３ 治 疗 结 果
随访半年未复发。
５ 体 会
临床上常见眩晕 ， 情有轻有 重，其病机虽颇复杂，但不 病 外痰 、瘀 、风 、火、虚此五方面。前贤认为本病 的发生是 由于 风火 。有 “ 风火 皆属阳 ，多为兼化 ，阳主乎动，两动相搏 ，则
为之 旋 转 ”之 说 ，在 治疗 上 认 为 “ 以治 虚 为 主 ” 当 。而 《 溪 丹
冬凌草甲素提纯与分离
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical 2017 年第 4 卷第 21 期2017 Vol.4 No.213972冬凌草甲素提纯与分离陈松（承德市食品药品检验检测中心，河北承德 067000）【摘要】冬凌草又称冰凌草，其中含有的冬凌草甲素的提纯与分离一直是业界较为关注的重点。
目前较为常用的冬凌草甲素的提纯法有实验室内常用的乙醇提取法，但由于提取中所使用的溶剂毒性较大，提取的纯度不高，因此未能大规模应用到工业化生产中。
而超临界CO2萃取工艺属于新工艺，该方法得出的结果提取效率高，适合大规模生产。
本文主要简述该两种提纯分离方式，进行对比并得出结论。
【关键词】冬凌草甲素；乙醇提取法；柱色谱法；超临界CO2萃取法【中图分类号】R284.2 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2017.21.3972.01冬凌草是一种唇形科香茶菜属的植物，在过去的研究中发现从冬凌草中提取的冬凌草甲素是一种贝壳杉烯二萜类的化合物，这是一种有抗癌功效的成分，能有效地靶向杀死食管癌109细胞、肝癌细胞BEL-7402、胃腺癌MGc80-3细胞，阻止多种植物性动物肿瘤如ARS，ECA，P388等的扩散，同时还能抑制食管上皮细胞的恶性增生。
目前在临床上，也多用于肝癌、食管癌和胰腺癌的治疗，具有强抗癌活性的冬凌草甲素可以说是医学界研究重点，因此如何能高效省时地提取纯度高的冬凌草甲素，也是研究的重心。
本文主要简述乙醇提取法及超临界CO2萃取工艺与柱色谱技术分离法两种提纯分离方式，进行对比并得出结论。
1 仪器与试剂多能式提取机组;工业用95%乙醇；粉状活性炭；甲醇（分析纯、色谱纯）；石油醚、丙酮、氯仿（分析纯）；冬凌草购自山东某药厂；冬凌草甲素对照品（含量98.3%）；柱层析硅胶；柱色谱硅胶、薄层色谱硅胶G；CO2（山东某气体有限公司）SFE-2000型超临界流体萃取装置；Agilent1100型高效液相色谱仪。
中压层析法分离纯化冬凌草中二萜类化合物冬凌草甲素的研究
学术论坛中压层析法分离纯化冬凌草中二萜类化合物冬凌草甲素的研究吴媛霞（安徽国家铜铅锌及制品质量监督检验中心，安徽 铜陵 244000）摘要：采用中压层析法从冬凌草中分离纯化二萜类化合物冬凌草甲素，得到了纯度99%（HPLC）以上的冬凌草甲素单体。
方法：采用乙醇超声浸提，分别用硅胶中压层析柱和C18中压层析柱进行提取和纯化，可得到高纯度冬凌草甲素。
实验结果表明，建立的分离纯化及制备方法快速、简便，得率高，可用于冬凌草甲素单体的制备。
关键词：冬凌草；冬凌草甲素；中压层析法；分离纯化；HPLC冬凌草(Rabdosiarubbescens(Hemsl.)Hara)系唇形科香茶菜属植物碎米亚的地上部分，由于其冬天全株结满薄如蝉翼的银白色冰凌片，又名冰凌草。
主产于河南济源太行山一带，味苦甘，性微寒，具有清热解毒、消炎止痛、健胃活血及抗肿瘤等作用[1-2]。
经动物实验证实，冬凌草对多种肿瘤疾病有效，对肺脉癌、肺鳞癌、食管癌、艾氏腹水癌、肝癌等多种常见肿瘤的抑瘤率高达41%，大大高于其他植物抗癌药，尤其对我国北方地区发病率较高的食管癌与胃腺癌为敏感[3-6]。
研究证明冬凌草中有大量的对映-贝壳杉烷类二萜化合物，主要有效成分为冬凌草甲素、冬凌草乙素和迷迭香酸3种主要活性成分，含量在冬凌草中高达千分之五，远远高于其他药用植物的活性成分含量，具有极强的抗菌消炎、消肿止痛和防癌、抗癌作用[7-8]。
目前，对冬凌草甲素分离纯化研究方法较少，本文首次建立了从冬凌草中快速分离纯化冬凌草甲素的中压色谱法，建立的分离纯化及制备方法快速、简便，得率高，可用于冬凌草甲素单体的制备。
1 实验部分[9-10]1.1 主要仪器与试剂仪器：TBD5010型梯度泵；TBD2005型梯度泵；UV500全波长紫外检测仪；中压玻璃法兰柱（26×460mm，15×460mm）；HPLC（上海伍丰科学仪器有限公司）。
试剂：乙醇；甲醇（色谱纯）；石油醚（分析纯）；丙酮（分析纯）；超纯水。
冬凌草甲素超声提取与纯化工艺
冬凌草甲素超声提取与纯化工艺
李菲;刘克;马秀丽;田景振
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2016(038)012
【摘要】目的优化冬凌草甲素超声提取工艺,并探讨其纯化工艺.方法 HPLC法测定冬凌草甲素含有量,Box-Behnken设计考察超声时间、超声温度和液料比对提取率的影响,硅胶柱层析结合重结晶法进行纯化.结果最佳条件为超声时间30 min,超声温度50℃,液料比25∶1,提取率为4.79 mg/g.石油醚-丙酮梯度洗脱结合重结晶法可得到含有量99.17％的冬凌草甲素.结论该方法提取率高,纯化效果好,可用于冬凌草甲素的超声提取和纯化.
【总页数】3页(P2710-2712)
【作者】李菲;刘克;马秀丽;田景振
【作者单位】山东中医药大学药学院,山东济南250355;泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016;泰山医学院药学院,山东泰安271016;山东中医药大学药学院,山东济南250355
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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冬凌 草含有 冬凌草 甲素 、 冬凌 草 乙素和迷 迭香 酸３ 种 酸 、 氢氧 化钠 、 酸铅 均 为分 析级 ； ３ ９ 大孔 吸 附 醋 （） 种 主 要 活性 成 分 ， 量 在 冬 凌草 中高 达 ５ １ ０ ， 远 树脂 ：Ｓ ４ Ｃ Ｌ － ０ Ｂ Ａ ８Ｌ Ｃ １０Ｌ － ０ ， Ｓ 含 ／ ０ 远 ０ Ｌ － ６ ， Ｓ ３ ０ ， Ｂ－ ， Ｓ 一 ０ ， Ｓ ３ ６Ｌ － 高于其他药用植物 的活性成分含 量 。 国药学界专 我
３ ３， 】 ０ Ｄ ０１， ＨＰＤ １ ０。 ０
家普遍认为 ， 冬凌草 的抗菌作用主要与迷迭香酸有关 ， 而另 外２ 成 分— —冬 凌 草 甲素 与 冬 凌草 乙素 则 具 ２ 实 验 方 法 种 有 抗癌 作用 。 冬凌草 甲素 （ ｒ ｏ ｉ Ｏ ｉ ｎｎ ｄ ）为 四环二萜类化
离纯化冬 凌草 甲素 的再 生使 用次数 为７ 。 次
关键词 ： 冬凌 草 甲素 ； 孔吸附树脂 ； 大 分离纯化
冬 凌 草Ｒ ｂ ｏｉ ｍｂｅ ｓ （ ａ ｔ７ ２ ， 名 冰 干 ； ５ ５ Ｌ＝角 瓶若干 、玻璃 漏斗 若 干 、５ｍＬ ａ ｄ ｓ ｓｎｔＨ ｍｓ，３ ） 又 ａ （） ０ｍ ２ 和
合 物 ， 多种癌 细胞 具有很 强 的杀灭抑 制作 用 ， 对 主要 ２１ 冬 凌草 甲素水 溶液制 备 ．
具 有抗 癌 ， 菌 、 肿 瘤 、 虫清 热 解毒 、 抗 抗 杀 消炎 止痛 、
健 胃活血等 作用 口。 ］ 冬 凌草 甲素 生产 目前主 要 由醇提 、 萃取 、 析 、 层
处理提 取液 ， 可达 到分离纯 化冬 凌草 甲素 的 目的。 液无 乙醇 味） 即得冬凌草 甲素水溶液 ； ６ Ｈ Ｌ 检测 ， （） Ｐ Ｃ 冬凌 草 甲素 水溶液 中有 效成分含 量 。
１ 仪 器 和 试 剂
２２ 大 孔 吸 附 树 脂 预 处 理 ．
取表 １ 种 大孔吸 附树脂 各 １ ， 中９ ０ 分别 装入直 径 ｇ
含量等 实验数据 ， 究相关 工艺条件 。结果 ： 终从９ 研 最 种大孔 树脂 中筛 选 出分 离纯化 冬凌草 甲素 的最佳 型号是Ｌ 一 ０ ， Ｓ ３ ６ 溶 液最佳上 柱浓度约 为 １ ／ Ｌ， ． ｍｇ ｍ 上样 量为３ Ｖ， 脱剂 乙醇 浓度 为９ ％， ２ ３Ｂ 洗 ０ 乙醇 使用量 为２５Ｂ 大孔 吸附树 脂Ｌ 一 ０ 分 ． Ｖ， Ｓ ３６
素含 量 ， 计算 解吸率 ， 以确 定洗脱 剂最佳洗 脱浓度 。
９
树脂 型号
ＬＳ一 Ｃ ４６
６ ７ ８
２６ 解 吸 实 验 ．
ＬＳ Ｏ Ｂ －３ Ｏ
ＡＢ一 ８
为验证 乙醇解吸 效果 ，取２０ Ｊ 孔树 Ｊ Ｌ 一 ０ ．ｇ ＜ ｉ Ｓ ３６ ￣ 置于 锥 形瓶 中 ， 加入３ Ｌ 凌草 甲素水 溶液 ， 声 ０ｍ 冬 超 振荡 吸附３ｈ 。过滤 ， 以纯化水 淋洗树 脂表面 ， 得 略 所 溶液 定容至 ５ ， Ｐ Ｃ 测冬 凌草 甲素含 量 。 ０ｍＬ Ｈ Ｌ 检
Ｇ ｇｅ ｎｉ ｅｉ 程 艺 设 － ｏｃ ｎＧ ｇＹＳ ｂ◆ 工 与 备 ｎｈｇｏｙｕｈｅ 工
大孔吸 附树脂 分离纯化冬 凌草 甲素
蒋 风 王 维 周建仁 胡雪颖
（ 杭州 华东 医 药集 团康 润 制药 有 限公 司 ， 浙江 湖 州 ３ ０ １ ） １０ １
摘
要： 目的： 对大孔吸 附树脂 分离纯化 冬凌草 甲素进行 研究 。方法 ： 根据 吸 附率、 解吸 率、 附量 、 吸 有效物 相对 百分
凌草 ， 冰凌花 ， 系唇 形科 香茶菜 属 植物碎 米桠 变种 多
１ 容量瓶 若干 、 ０ｍＬ 量筒 。
年生草本或 亚灌木 。冬凌草是２ 世纪末最新 发现 的 １２ 实 验 试 剂 ］ ０ ． 天然抗癌抑菌植物 ， 我国具有 丰富的冬凌草 药材 资源 。
（） 凌草 、 ５ １冬 ９ ％乙醇 （ 业纯 ） 纯 化 水 ； ２ 盐 工 、 （）
机电信息 ２ １ 年第 ２ ０１ ０期总第 ３２ ０ 期 １ ７
ｌ 程 艺 设 ◆ ｏｃｎＧｎｉ ｅ 工 工 与 备 Ｇｎｈｇｏｙｕｈｅ ｇｅ ｇｙＳ ｂ
表 １ 使 用 的 大 孔树 脂 型 号
编 号
１ ２ ３ ４ ５
树脂表 面 ， 吸液定 容至２ ， Ｐ Ｃ 解 ５ｍＬ Ｈ Ｌ 检测 冬凌草 甲
１１ 实 验 仪 器 ．
２ｃ ｍ长２ ０ｃ ｍ的玻璃层 析柱 中， ９ ％乙醇浸泡 ４ ［， 用 ５ ５ ｈ］
（） － ０ 旋转 蒸 发 仪 ， １Ｒ ５ １ 上海 申顺 生 物科 技 有 限 放 出 乙醇 ， ５ 以９ ％乙醇 淋 洗 ， 流 出液 加 ３ 水 不 变 至 倍
（） 凌 草 以９ ％乙醇 ６ １冬 ５ Ｏ℃浸 提 ３ 次 ， 次 浸 每 提 时 间为１ ， 次 乙醇用 量为 １１ Ｍ／ ； ２ 合并 每 ｈ ： ０（ Ｖ） （） 提 取液 减压 浓 缩 至提 取 液总 体积 的 １９ 右 ； ３ 浓 ／左 （）
结 晶等工序 完成 。 为了减轻层析柱 负荷 ， 心 ；４ 滤 液加 乙酸 铅混 （） 得 到纯度 较高的冬凌草 甲素 晶体 ， 利用 大孔吸 附树脂 匀静置后 离心 ；５ 滤液浓 缩至 乙醇 浓度低 于 １％（ （） ０ 溶
以纯化 水反 复冲洗 至基本 无醇 味后 ， 以纯化 水浸 公 司 ；２ Ｄ Ｆ ６ ５ 型恒温 干 燥箱 ， 海 精宏 实验 设 浑 。 （） Ｚ 一 ０ ０ 上
备 有 限 公 司 ；３ Ｋ 一 ５Ｄ 数 控 超 声 波 清 洗 器 ， （） Ｑ ２ ０ Ｅ 昆 泡 备用 ， 见表 １ ： 山市超 声 仪器 有 限 公司 ；４ ￣ ０ｉｎ层析 玻 璃 柱 若 （）ｂ ｌｌ ２ ｒ