人参亲环素蛋白原核表达及其抗真菌活性

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人参亲环素蛋白原核表达及其抗真菌活性
李帅军;才可新;张楠楠;孙天霞;赵雨;曲毅
【期刊名称】《长春中医药大学学报》
【年(卷),期】2016(0)3
【摘要】Objective We investigated the antifungal activity of panax ginseng cyclophilin(pgCyP) in vitro.Methods In this study,we amplified pgCyP gene by RT-PCR,constructed prokaryotic expression plasmid and trans-formed into E. Coli. Target protein was induced by IPTG and affinity purified. Disc diffusion method was used to verify the antifungal activity of target protein. Results The full length of pgCyP gene is 522 bp,which codes for a protein 174 amino acids in length. After purified,the target protein showed a single band in SDS-PAGE. Antifungal test showed that the recombinant protein can obviously inhibit the growth of the Phytophthora cactorum. Conclusion pgC-yP was successfully cloned,expressed and antifungal activity characterization,which provides foundation for further
re-search of pgCyP antifungal mechanism.%目的:研究人参亲环素蛋白(pgCyP)体外抗真菌活性。

方法采用 RT-PCR 技术,扩增人参 cyclo-philin (pgCyP)基因片段,构建原核表达质粒并转入大肠杆菌中,利用 IPTG 诱导表达目的蛋白,通过亲和纯化获得pgCyP 蛋白,纸片扩散法验证目的蛋白的抗菌活性。

结果人参 CyP 基因全长为522个碱基,编码174个氨基酸;目的蛋白经纯化后,SDS-PAGE 分析显示单一条带;抑菌试验表明该重组蛋白可明显抑制疫霉菌菌丝
的生长。

结论成功克隆并表达具有抗菌活性的 pgCyP 蛋白,为进一步研究pgCyP 在人参抗真菌中的作用机制奠定了基础。

【总页数】3页(P464-466)
【作者】李帅军;才可新;张楠楠;孙天霞;赵雨;曲毅
【作者单位】长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春 130117;长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春 130117;长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春 130117;长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春 130117;长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春 130117;长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春 130117; 吉林省食品药品安全监测中心,长春 130033
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.老年慢性心力衰竭患者血清中亲环素、内皮素-1、同型半胱氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的表达及意义 [J], 梁雪;张佩生;高瑜
2.马尾松亲环素基因全长cDNA的克隆与原核表达 [J], 王猛;曹福祥;龙绛雪
3.原核表达的天花粉蛋白和另外两种蛋白具有体外抗真菌活性 [J], 胡苹;安成才
4.茶树亲环素基因cDNA全长的分析鉴定与原核表达 [J], 张亚丽;赵丽萍;马春雷;陈亮
5.人参亲环素基因表达载体构建及其在拟南芥中的抗盐活性分析 [J], 马任佐;孙天霞;赵雨;季存蕊;孙伟义;李银清
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