植物细胞染色体制片及有丝分裂观察

实验报告

学生姓名： 学号： 专业: 年级、班级： 课程名称： 遗传学实验 实验项目：植物细胞染色体制片及有丝分裂观察

一、 实验目的

1.学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色体压片技术

2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化

二、 实验原理

1. 在有丝分裂过程中，细胞核内染色体能准确地复制，并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去，使子细胞遗传组成与母细胞完全一样，从而保证了性状的发育和遗传的稳定性。

2. 有丝分裂是一个连续的过程，可分为前期、中期、后期和末期。高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片等步骤，可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色体动态变化的装片。

三、 实验材料

无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、0.1N 盐酸、洋葱根尖

四、 实验步骤

材料培养 取材 预处理

固定 解离（酸解）

五、 实验结果

醋酸洋红染色 染色 改良品红染色 压片

镜检

图1 染色后低倍镜下洋葱根尖细胞全视野图图2 处于分裂间期的洋葱根尖细胞图3 处于有丝分裂前期的洋葱根尖细胞图4 处于有丝分裂中期的洋葱根尖细胞图5 处于有丝分裂后期的洋葱根尖细胞图6 处于有丝分裂末期的洋葱根尖细胞

六、 思考与分析

1. 根据你的实验情况总结出制备好一张优良的细胞分裂标本应注意哪些问题？

1. 预处理方面

由于正常情况下细胞分裂中期持续的时间很短，且分裂现象较少，因此在预处理时可采用化学或物理方法使细胞分裂停止于中期，从而获得更好的观察效果。

2. 解离方面

在酸解过程中一定要掌握好温度和时间，若解离不够，则压片不易分散，若解离过长则在下一步处理时由于材料过软而易将根尖丢失。

3.取材方面

⑴ 只取2mm ～3mm 长的分生区

⑵ 要细心区别根尖的前端和后端，若误取了根尖的后端，在观察时，则只会见到长方形的成熟区细胞，见不到方形的分生区细胞。材料经解离、冲洗后根尖前端分生区部分呈乳白色、比较圆滑，后端部分则较透明和粗糙（取根时不用剪刀而改用镊子夹取则更明显）。

4.染色方面

⑴使用醋酸洋红染色时，可以在酒精灯上稍加热，这样可以使材料更易着色和染色背景更清晰。

⑵媒染一定要充分，媒染后的水洗也要充分，洗不足时影响染色效果，并会在组织内外产生大量沉淀，制成的片子污浊。

图7 有丝分裂中期的洋葱根尖细胞绘制图（10x40） 图8 有丝分裂后期的洋葱根尖细胞绘制图（10x40）

5.压片方面

压片时将根尖放在载玻片中央，盖上盖玻片，用食指和拇指固定在盖玻片，再用镊子钝部或带有橡皮头的铅笔对准材料部位轻轻敲击盖玻片，使根尖细胞均匀地扩散成淡淡的云雾状，铺展呈单层，若压片不当，则会观察到根尖细胞不是铺展呈单层，而是有重叠或太密集。

2.常用染料的特点如何？

⑴本身是具有颜色的

⑵为碱性染剂，与染色体之间有亲和力