植物细胞染色体制片及有丝分裂观察
生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》实验报告
生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》实验报告实验目的:观察和了解植物细胞的有丝分裂过程,掌握有丝分裂的特点和步骤。
实验原理:有丝分裂是一种细胞分裂方式,指的是细胞在分裂过程中通过有丝分裂纺锤进行染色体的分离,从而形成两个完全相同的细胞。
有丝分裂包含有七个阶段:间期(I期)、早期前期(early prophase)、晚期前期(late prophase)、中期(metaphase)、晚期(anaphase)、晚期后期(late telophase)和细胞质分裂期(cytokinesis)。
其中,晚期前期至晚期是有丝分裂的关键阶段。
实验材料:1. 含有植物根尖的玻片制片。
2. 染色剂(如洋红)。
3. 显微镜。
实验步骤:1. 将待观察的植物根尖放置在玻片上。
2. 加入一滴染色剂(如洋红),待染色剂覆盖植物根尖。
3. 用草纸或玻片片尾轻轻压碎植物根尖,使细胞释放染色体。
4. 将载玻片放置于显微镜下,调节倍数使细胞可见。
5. 使用显微镜观察植物细胞的有丝分裂过程。
实验结果:通过显微镜观察,在实验中观察到了植物细胞的有丝分裂过程。
在晚期前期至晚期的关键阶段,我们观察到染色体逐渐缩短厚实,进入中期时染色体排列成单排线状,晚期时染色体分离到两侧,最终形成两组完全相同的细胞。
实验结论:通过观察植物细胞的有丝分裂过程,我们了解到有丝分裂的特点和步骤。
有丝分裂是一种重要的细胞分裂方式,通过有丝分裂纺锤的介导,使染色体得到准确分离,从而形成两个完全相同的细胞。
有丝分裂是细胞生物学中的关键过程,对于细胞发育和生长具有重要意义。
实验一-植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察
使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质,以保持活体的形态;
使组织内各种物质成分产生不同的折光率,便于观察和鉴定; 使不同组织成分对染料有不同的亲和力,便于染色; 防止细胞过度收缩或膨胀,失去原有的形态结构。
醋酸洋红
将洋红粉末1g倒入100mL45%醋酸溶液中,边煮边搅拌, 煮沸(沸腾时间不超过30s),然后悬入一生锈的小铁钉 于染液中,过1min取出,或加入1%~2%铁明矾水溶液 5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。静置 12h后,过滤于一棕色试剂瓶中,储存备用。
卡宝品红
配制方法: 先配成三种原液,再配成染色液 原液A: 3 g碱性品红溶于100 ml 70%酒精中. 原液B: 取原液A 10 ml加入到90 ml 5%石炭酸水溶液中. 原液C:. 取原液B 55 ml,加入6 ml 冰醋酸和6 ml福尔马林(38%的甲醛). (原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用). 染色液:取C液10—20 m1,加45%冰醋酸80~90 ml,再加山梨醇1.8 g,配成 10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则 着色能力差). 适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使 用2—3年不变质.山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨
6.镜检
• 压好的片先在低倍镜下镜检,找到分裂细胞后,再转换成 高倍镜观察染色体动态变化。 • 如果染色体分散良好,图像清晰,可以进行显微照相保存。
一个解离良好的材料,只要用镊子尖轻轻敲打盖玻片,分生组织细胞就可以铺 展成薄薄的一层,再用毛边纸把多余的染色液吸干,经显微镜检查后,选择理 想的分裂细胞,再在这个细胞附近轻轻敲打,使重叠的染色体渐渐分散,就能 得到理想的分裂相。
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得体会
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得
体会
观察植物细胞有丝分裂是高中时期生物学科的重要实验之一,在实验中能够让我们清楚地观察到植物细胞有丝分裂中不同时期展现
出来的特点,帮助提高我们对于有丝分裂的理解,提高生物学习兴趣。
本文分析了植物细胞有丝分裂实验的描述和体会,希望能够让植物细胞有丝分裂实验的变得更加完善和精准。
植物细胞的有丝分裂是把母细胞中的遗传物质,通过分裂的方式平均分配到两个字细胞中的过程。
母细胞的遗传物质主要是存在于细胞核的染色体上,在有丝分裂过程中,染色体形态并不是固定的,而是连续变化的,因此染色体的有丝分裂分为间期、前期、中期、后期等阶段,不同的是其中染色体的差别比较大,因此通过实验,能够让我们更加清晰的观察和理解植物细胞有丝分裂的变化过程。
实验材料选择
大蒜根尖培养。
想要看到染色体的行为变化,选择材料是最关键的一步,材料选择中需要考虑各种因素,例如说洋葱,生长容易受到季节的影响,同时染色体的体积较小,因此在这次试验中我选择了大蒜作为实验材料,大蒜的根尖细胞中染色体的体积比较大,便于观察,同时培养期比较短,不用受到季节的限制。
在室内温度 15-26C的环境中,大蒜根部生长速度较快,首先把蒜瓣用铁丝串号,放在装满水的韶破上,这趟能够让大蒜的底部接触到水面同时不会被水淹没,然后把烧杯放到 25C的恒温箱中,每隔六个小时就需要换睡衣次,不
到两天的时间,根部就会长出根尖。
必须要注意经常换水,否则容易因为阳气不足导致生长缓慢或者是腐烂。
实验二 植物根尖细胞有丝分裂及染色体制片技术
后期:每一条染色体的着丝粒分裂,两条染色单体彼
此分开形成两条子染色体,子染色体在纺锤丝的牵引下, 分别移向两极。 末期:移向两极的染色体逐渐松散成染色质,纺锤丝 逐渐消失,在赤道面上开始出现细胞板,把一个细胞分隔 成两个子细胞,核膜重新形成,核仁出现,逐渐进入间期 状态。
三 实验材料
洋葱(2n=16)的鳞茎
尖。 2 预处理
将剪取的洋葱根尖(0.5-1cm)放入0.1%秋水仙素溶液中
室温下处理3-4小时,然后用水冲洗几次。 3 固定 将经过预处理的根尖放入卡诺氏固定液中固定3-24小时。
4 解离
将固定液中的洋葱根尖取出,在蒸馏水中洗净,然后放 入1N的盐酸中,室温下处理10-15min。目的是使胞间层的果
四 实验器具及药品
药品:蒸馏水、卡诺氏固定液(无水乙醇:冰醋
酸=3:1)、45%醋酸、 1N盐酸、秋水仙素、改良
苯酚品红染色液或1%醋酸洋红染色液等。
用具:显微镜、刀片、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、酒精灯、吸水纸等。
五 实验步骤
1 根尖培养
将洋葱鳞茎下部浸入水中,当根长出1-2cm时,切下根
六 观察结果
七 实验作业 1 在上述实验过程中,固定、解离的作用是什么? 2 绘制出所观察到的有丝分裂各时期的染色体行 为图像。
胶物质解体,使细胞易于分散,便于压片。
5 软化 将解离好的根尖冲洗后,放入45%的醋酸中软化10min左 右。 6 染色 将洋葱根尖置于载玻片上,用小刀片将根冠和伸长区切 除,只留下1-2mm左右的生长区,然后滴一滴1%醋酸洋红染 色液或改良苯酚品红染色液,染色5-10min。
7 压片
加盖玻片,用手指垂直瞬间用力压片(切勿移动盖玻 片),这样得到的染色体才能在一个水平面上。为了使细 胞质透明增加染色效果,将载玻片在酒精灯上微微加热, 吸去多余的染液。最后用吸水纸将周围染色液吸干。 8 镜检 先在低倍镜下找到细胞,找到分裂相后再换成高倍 镜,仔细观察有丝分裂各个时期染色体的行为。
实验二植物染色体制片及有丝分裂观察
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ遗传学实验
植物染色体制片及有丝分裂观察
实验目的:
① 学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法; ② 观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色 体行为;
预习要求
实验目的
• 学习并掌握植物染色体玻片标 本的制作方法;
预习要求
流程: 材料要求,取材方法,实验 流程和各操作步骤实施原因 发根→预处理→固定→解离→ 低渗→ 软化→染色→压片→镜 检
解离的目的?如何判断解 离的效果?其他的解离方 法?
5 软化:将解离好的根尖冲洗后,放入45%醋酸 中软化10min左右。
请问解离与软化 的目的是什么?
6 染色:切取1-2mm的分生区,用改良苯酚品 红染液染色10-20min。
为保证染色的 充分要注意哪 些问题?
7 压片:盖上盖玻片,在酒精灯上烤片。然后 固定盖玻片,用铅笔垂直、用力敲击盖片几下,将 材料压成一层细胞。
取材时间?
• 2 预处理:将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶 液中室温下处理3-4h。
预处理的目的? 还有其他方法吗?
实验步骤:
3 固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲 洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理24h。水 洗放入70%乙醇中保存。
固定的作用?固定剂的组 成?对固定剂配制的要求?
4 解离:将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl 中, 60℃下处理8-10min(可视具体情况而定)。
实验材料
• 洋葱、大蒜的鳞茎,玉米、蚕豆的种子等。本实 验选用大蒜。
实验用品
• 用具:显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。 • 药品:蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水 仙素、改良苯酚品红染液等。
生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》实验报告
生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》实验报
告
实验目的:
观察植物细胞的有丝分裂过程,了解有丝分裂的特征和步骤。
实验器材和试剂:
1. 光学显微镜
2. 植物根尖切片
3. 甲醇
4. 乙醋酸
5. 蘸片
6. 封片胶
7. 甲基绿染液
实验步骤:
1. 准备植物根尖切片,切割植物的根尖,并用蘸片将根尖切片放置在甲醇中固定。
2. 沥干切片上的甲醇,加入少量的甲基绿染液,静置5-10分钟。
3. 将切片放置在乙醋酸中进行漂洗,去除多余的染料。
4. 将切片沥干,用封片胶将切片盖在玻片上。
5. 用橡皮筋将封片胶固定于玻片上,避免切片移动。
6. 使用光学显微镜将玻片放置在显微镜下,进入40倍或100倍镜头观察切片。
实验结果:
观察到细胞核变形,染色体逐渐凝聚成条状,有丝分裂纺锤体形成,染色体在纺锤体上对齐分布。
染色质开始分裂,染色体分成两个相同的姐妹染色单体,然后分别迁移到细胞两极,细胞质分裂成两个细胞。
实验结论:
植物细胞的有丝分裂包括纺锤体形成、染色体分裂、染色体排列和移动、细胞质分裂等步骤,通过这些步骤完成了细胞的复制和分裂过程。
有丝分裂是生物细胞常见的一种方式,能够保持染色体的遗传信息的稳定传递。
实验二植物细胞有丝分裂制片和观察
实验二植物细胞有丝分裂制片和观察一、实验目的与要求1.实验目的:理解植物有丝分裂各个时期规律性的变化;掌握植物细胞有丝分裂的制片技术;学会用显微镜观察植物细胞染色体在不同分裂时期的分裂相及其特点。
2.实验要求:必做实验。
二、实验类型本实验为验证型实验。
三、实验原理及说明生物在体细胞产生体细胞的过程中,主要采用有丝分裂方式。
母细胞将核内的染色体均等地分配给子细胞,母细胞的染色体数目与子细胞一致,因为分裂过程中可形成纺锤丝,故称为有丝分裂。
染色体在细胞分裂的间期、前期、中期、后期、末期具有不同的行为。
在此过程中,细胞核和细胞膜也呈规律性变化。
各种分裂旺盛的组织经过适当的取材处理,加以固定、离析、染色、压片,可以迅速将细胞分散在载片和盖片之间,进行有丝分裂和染色体观察。
四、实验仪器序号仪器名称台数1 显微镜202 培养箱 2五、实验内容和步骤1.准备(1)材料准备:将洋葱去皮后,放在盛满水的烧杯中25℃左右培养,每天换水一次,待长出根尖3-5厘米后,在上午10:50和下午5:20,细胞处于分裂高峰期,用刀片取下,放在广口瓶中,进行预处理。
图2-1 元葱的根尖培养(2)用具:眼科镊子,刀片,广口瓶,解剖针,盖玻片,大培养皿,小培养皿,立式染缸,染色板,酒精灯,量筒100毫升、10毫升。
(3)所需药品及配制:无水乙醇,二甲苯,醋酸洋红。
2.预处理:用0.05-0.2%秋水仙素处理根尖,2-4h。
3.固定:用Carnoy固定液(卡诺固定液,冰醋酸:95%酒精=1:3)固定2-24 h,再放在95%、85%、75%酒精中各0.5 h,最后在70%的酒精中保存2个月。
一般是新固定的材料为好。
保存在乙醇里的材料,在观察前最好用Carnoy固定液再固定1-2 h。
4.水解:将固定材料加一滴离析液(95%乙醇:浓盐酸=1:1)离析10 min,然后用水反复冲洗,材料为白色,用针易压碎。
5.染色:在载片上滴一滴醋酸洋红染色15 min左右,待根尖为暗红色时,将染色后的根尖放在一清洁的载片上,去除根冠和伸长区,再加少量染液染色。
观察染色体实验报告
一、实验目的1. 学习和掌握植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察方法。
2. 了解染色体的形态、结构及数目。
3. 掌握染色体标本的制作和观察技术。
二、实验原理染色体是生物遗传物质的载体,其结构、形态、功能是细胞遗传学中的核心内容。
通过观察染色体,可以了解细胞的遗传信息,研究生物的遗传规律。
本实验采用植物根尖细胞作为观察对象,利用染色剂对染色体进行染色,通过显微镜观察染色体的形态、结构及数目。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物根尖、卡诺氏固定液、盐酸、酒精、蒸馏水、醋酸洋红染色剂等。
2. 实验仪器:显微镜、解剖镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、滴管等。
四、实验步骤1. 取材:从植物根尖中剪取一定长度的根尖,放入盛有卡诺氏固定液的试管中固定。
2. 解离:将固定好的根尖放入盛有盐酸和酒精混合液(1:1)的试管中,在室温下解离30分钟。
3. 漂洗:用蒸馏水冲洗根尖,去除盐酸和酒精。
4. 染色:将根尖放入盛有醋酸洋红染色液的试管中,染色5-10分钟。
5. 制片:将染色后的根尖用镊子取出,放在载玻片上,用盖玻片轻轻压扁,制成临时装片。
6. 观察:将临时装片放在显微镜下,先用低倍镜观察,找到染色体清晰、分散良好的细胞,再换用高倍镜观察染色体的形态、结构及数目。
五、实验结果与分析1. 染色体形态:观察到的染色体呈棒状,两端钝圆,有明显的着丝粒。
2. 染色体结构:染色体由DNA和蛋白质组成,DNA呈双螺旋结构,蛋白质分布在DNA周围。
3. 染色体数目:观察到的染色体数目与理论值相符。
4. 染色体变异:未观察到染色体变异现象。
六、实验讨论1. 实验过程中,染色剂的选择对染色体的染色效果有很大影响。
本实验中,醋酸洋红染色剂染色效果较好。
2. 在观察染色体时,显微镜的放大倍数对观察效果有较大影响。
本实验中,先用低倍镜观察,找到染色体清晰、分散良好的细胞,再换用高倍镜观察。
3. 实验过程中,解离液的浓度和时间对染色体的形态和数目有较大影响。
“观察植物细胞的有丝分裂”实验解读
“观察植物细胞的有丝分裂”实验解读一、实验原理1.在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。
由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
2.染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的存在状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。
二、实验材料及其准备实验材料:洋葱根尖分生区。
因为根尖生长点属于分生组织,细胞分裂能力强,易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
洋葱根尖的培养:在室温为10℃~25℃条件下,实验前3~5天将洋葱鳞茎剥去一层外皮,用刀片切去鳞茎底部陈根或削去一薄层,露出新的细胞有利于洋葱鳞茎尽早生根。
将鳞茎放在盛满水的烧杯上,使其底部接触水面,放在温暖、向阳处。
每天换水,以免氧气不足导致根尖腐烂;温度过低会使细胞生长缓慢,影响细胞有丝分裂的观察。
三、实验步骤:解离→ 漂洗→ 染色→ 制片→ 观察四、思考与分析例1、用洋葱为实验材料,观察植物细胞的有丝分裂。
(1)培养洋葱根尖时,如果没有经常换水,常会出现烂根现象,原因是 。
(2)制作装片时,如果用质量分数为5%的盐酸在10℃下解离5min ,然后按正常要求进行漂洗、染色、制片。
结果在观察中,发现根尖细胞没有较好地分散开,原因是 。
(3)如果观察的某细胞在视野右上方,要把物像移到视野中央,应把玻片向 方移动。
解析:(1)在培养洋葱根尖过程中,不注意经常换水,水中氧气不充足,根尖细胞进行厌氧呼吸产生酒精可导致烂根。
(2)配制解离液应该是质量分数为10%的盐酸,题目中用的解离液不符合要求,原因是盐酸的质量分数太低;解离的时间太短,一般用10%盐酸在室温下要解离10~15min (3)因为显微镜视野中的物像是实物的倒像,要使右上方的物像沿左下移至视野中央,则应把玻片向右上方移动。
答案:(1)水中氧气不足,根尖细胞进行厌氧呼吸产生酒精,毒害细胞 (2)解离液不合要求,特别是盐酸的质量分数太低(应为10%),且解离的时间不够 (3)右上例2、在进行“观察植物细胞的有丝分裂”实验中,甲~戊五位同学在剪取洋葱根尖后立即进行的操作步骤如右表。
染色体标本制作与观察实验报告
染色体标本制作与观察实验报告实验报告:染色体标本制作与观察一、实验目的1.掌握染色体标本制作的基本原理和方法。
2.学习并掌握染色体观察的基本技巧和特点。
3.通过实验加深对遗传学基础知识的理解和应用。
二、实验原理染色体标本制作是生物学实验中的一项基本技术,其目的是将细胞中的染色体以一种可见且易观察的形式展现出来。
染色体观察有助于我们了解细胞分裂过程中染色体的行为和变化,进一步理解遗传物质的复制、分离和交换等基本过程。
本实验将通过植物根尖细胞的有丝分裂过程来制作染色体标本,并通过显微镜观察其形态和分布。
三、实验步骤1.准备试剂和器材:碱性染料(如龙胆紫溶液)、生理盐水、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2.选取植物根尖:选择新鲜的植物根尖,长度约为5-10mm。
3.预处理:将根尖放入冰箱冷藏(4℃)约24小时,然后放入25℃的温水中浸泡约6小时。
4.固定:用镊子将根尖取出,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时,然后转移到70%酒精中保存。
5.解离:将根尖放入1N的盐酸盐酸盐酸KOH溶液中,在60℃的水浴中解离10分钟。
6.漂洗:用镊子取出根尖,用清水冲洗3次,每次5分钟。
7.染色:将根尖放在载玻片上,用滴管吸取龙胆紫溶液滴在根尖上,染色3-5分钟。
8.制片:盖上盖玻片,避免产生气泡。
然后在显微镜下观察。
四、实验结果与讨论1.实验结果:通过显微镜观察到清晰的染色体形态,可以看到细胞分裂的不同阶段,如前期、中期和后期。
在中期可以看到染色体整齐地排列在赤道板上,而在后期则可以看到染色体的分离和移动。
这证明了实验方法的可行性。
2.结果讨论:实验中观察到的细胞分裂过程与教科书中的描述基本一致,说明我们的实验方法是有效的。
此外,通过观察不同阶段的细胞分裂,我们可以更好地理解细胞周期和遗传物质的复制、分配等过程。
然而,我们也注意到实验过程中存在一些问题。
例如,解离过程中可能会出现过度解离的情况,导致染色体形态不完整。
植物染色体制片与观察实验报告
植物染色体制片与观察实验报告(洋葱组)同组成员:曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞一、中文摘要:染色体(Chromosome),是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,又叫染色质。
其本质是脱氧核甘酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是基因的载体。
这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。
二、关键词:染色体洋葱压片法三、引言:洋葱(onion)是百合科(Liliaceae)葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的2年生草本植物,其学名为Allium cepa L,染色体数为2n=2x=16。
由表1和图1可见,洋葱的8对染色体中,有7对(第1~7对)染色体,臂比在1·01~1·70之间,为中部着丝点染色体,1对(第8对),臂比为4·74,为近端部着丝点且带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。
100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一,现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图,因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义,陈瑞阳教授历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数目进行了报道,完成了1045种植物的核型分析,积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。
研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系,国际对染色体的化学成分,DNA含量,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料,总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。
国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面,在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对洋葱的C带显示法进行过研究,田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。
植物染色体标本的制备和观察
植物染色体标本的制备和观察摘要:目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本的基本原理和方法;2、学会观察和统计植物细胞的染色体数目;3、了解和学习去壁低渗法进行植物染色体制片的基本原理和方法。
方法大蒜的根尖是分裂比较旺盛的,我们可以利用秋水仙素处理根尖使得大蒜根尖的细胞分裂处于分裂中期,然后经固定染色等处理将染色体染色固定,以便观察。
结果大蒜的染色体有16条,都被染色成红色的条状或细丝状物质。
结论大蒜染色体有16条。
关键词:植物染色体;大蒜;秋水仙素前言染色体是遗传物质的载体,本实验便是观察染色体的形态和数目。
植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。
常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法。
其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤,即可观察到较多的、处于有丝分裂中期的细胞和染色体。
由于现在洋葱发根较难,我们采用的是大蒜根尖进行相关实验。
材料与方法1.实验材料大蒜根尖、白姜花的根尖、野百合的根尖等。
2.实验试剂:0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸,浓盐酸:95%乙醇(1:1)解离液。
3. 实验用具显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、吸水纸、滴管、载玻片、盖玻片。
4.实验植物和试剂大蒜根尖、 0.02%秋水仙素;改良苯酚品红染液;卡诺氏固定液,1N盐酸;70%酒精;95%乙醇;85%乙醇;蒸馏水5.实验方法和步骤5.1 取材先将大蒜浸泡若干小时,然后转入一个垫有湿润滤纸的培养皿中,置25℃恒温培养箱中萌发,待幼根长至1~2cm时,于上午9~11时剪下根尖。
5.2 预处理将剪下的根尖放进装有0.02%秋水仙素溶液的烧杯中,浸泡处理3~4小时。
5.3 固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液中固定(固定液的量约为材料的10倍,要求一个容器中所装的材料不能太多,温度不能太高)。
固定2~24h后分别在95%和85%乙醇中各30min ,再转入70%酒精中,于4℃冰箱内保存,保存时间最好不超过二个月。
实验二 植物染色体压片技术及有丝分裂的观察
实验二植物染色体压片技术及有丝分裂的观察一、实验目的1 学习植物染色体制片技术,观察有丝分裂过程中不同时期的染色体形态;2 明确遗传的细胞学基础;3 掌握植物染色体玻片标本的制作方法。
二、实验材料洋葱根尖,三、实验步骤1 取材待根长至2cm时,上午9时摘下根尖,0.02%和0.1%的秋水仙素分别浸泡3~4小时。
2 固定经前处理的根尖放到固定液中,固定24 h,转入70%乙醇中待用。
3 解离酸解,从固定液中取出根尖,用蒸馏水漂洗,放入酸解液(浓盐酸:95%酒精=1:1)中,60度水浴解离10分钟,用蒸馏水漂洗后,放在培养皿中。
4 压片把根尖放在载玻片上,用解剖针把伸长区部分截去,加少量染液(几滴),染色10-20分钟,盖上盖玻片。
用镊子轻轻敲打,使分生组织细胞展成薄薄一层。
5 显微镜观察先在低倍镜下寻找具分裂相的细胞,然后依次转换到高倍镜,观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。
四、实验作业1. 制作具有丝分裂图象的细胞学片子2-3张。
2. 绘制2种不同的有丝分裂分裂相。
3. 洋葱究竟有几条染色体?4. 讨论与分析,要学会应用书本的理论来解释自己观察到的实验现象。
五、讨论与分析1、经实验观察,洋葱有16条染色体。
2、显微镜下观察到的洋葱细胞大多处于细胞分裂间期,原因为细胞分离周期中间期时间维持时间最长,所以固定细胞时处在间期的细胞最多。
3、由于压片角度不同,处于分裂中期的细胞纺锤丝较难观察,染色体表现为充满整个细胞。
分裂前期细胞染色体呈丝状,非棒状,充满整个细胞。
处于分裂后期及末期的细胞染色体或染色质明显分成两部分。
4、显微镜下观察到的某些细胞核中有两种不同颜色,为染色不均匀造成,而非处于细胞分裂的后期。
植物细胞有丝分裂染色体制片及观察
三、实验材料
洋葱(Allium cepa)及蚕豆(Vicia faba) 等
四、实验用具及药品
1.用具:显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、 刀片、载玻片、盖玻片、酒精灯等。 2.药品:无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、 饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、 0.1N盐酸。
五、实验步骤
酸解: 取材 固定 解离 酶解 染色 压片 镜检
六、制作永久玻片
冷冻脱片封片法 酒精一叔丁醇脱水封片法 酒精—二甲苯脱片封片法
七、作业及思考题
1.根据你的实验情况总结出制备好一张优 良的细胞分裂标本应注意哪些问题? 2.常用染料的特点如何? 3.绘制2~3个有丝分裂典型时期简图。
实验一 植物细胞有丝分裂染色 体制片及观察
一、实验目的
学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色 体压片技术;观察有丝分裂过程中染色 体的形态特征和动态变化。
二、实验原理
有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式。在有 丝分裂过程中,细胞核内染色体能准确地复制, 并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去,使 子细胞遗传组成与母细胞完全一样,从而保证 了性状的发育和遗传的稳定性。 有丝分裂是一个连续的过程,可分为前期、中 期、后期和末期。高等植物的有丝ห้องสมุดไป่ตู้裂主要发 生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经 过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片 等步骤,可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色 体动态变化的装片。以进行有丝分裂和染色体 动态的观察。
观察植物细胞的有丝分裂.
观察植物细胞的有丝分裂1.实验原理:在植物体中,有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞;细胞核内的染色体容易被碱性染料(如龙胆紫、醋酸洋红)溶液着色。
取材:洋葱根尖2—3mm(含分生区细胞)15%的盐酸和体积分数为95%酒精(1:1)[①使组织细胞相互分离酥软为宜②杀死细胞固定各时期]用清水漂洗10min [去酸—防止干扰碱性染料染色]0.01—0.02g/ml龙胆紫(或醋酸洋红)[使染色体着色][使细胞分散开来]低倍镜观察:找出分生区细胞[正方形,排列紧密,有的正在分裂](先.把物像调中..再换高倍物镜)高倍镜观察:先找中期细胞,再找其他各期[间期最多?]绘图:绘有丝分裂各个时期染色体变化简图观察植物细胞的质壁分离和复原实验原理:当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。
当细胞校的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液中,使原生质层慢慢地恢复原状,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
制作洋葱表皮临时装片(紫色—有紫色的大液泡)显微镜观察:①紫色大液泡②质壁紧贴在一起滴、吸0.3g/ml的蔗糖溶液(充分浸泡)显微镜观察:质壁分离滴、吸清水显微镜观察:质壁分离复原[注:①鉴定细胞死活;②测定细胞液浓度等]2、验证类实验(1)生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定(2)叶绿体中色素的提取和分离生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定(1[原理:CHO+Cu(HO)22O 砖红色]取材:含糖量较高的白色或近于白色的组织(排除色素对显色的干扰)取2ml组织样液加入试管中加2ml刚配好的斐林试剂(用前混匀,加入溶液时呈蓝色)隔水加热煮沸2 min溶液中出现(砖红色)(2)脂肪的鉴定:苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)[原理:脂肪橘黄色(红色)]制作花生子叶切片染色:滴加苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)染液2—3滴洗去浮色:滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴(溶解有机物)显微镜观察:有橘黄色(或红色)的脂肪微粒(3)蛋白质的鉴定:[原理:-CO-NH- (类似双缩尿H2NOC-NH-CONH2结构)与Cu2+作用形成紫色络合物——双缩尿反应]制备组织样液:黄豆组织样液或鸡蛋白稀液取样液2ml加入试管加入双缩尿试剂A [0.1g/mlNaOH] 2ml [创设碱性条件]再加入双缩尿试剂B [0.1g/mlCuSO4] 3—4滴[提供Cu2+]溶液变紫色叶绿体中色素的提取和分离实验原理:提取原理:叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂,所以,可以在叶片被磨碎以后用乙醇提取叶绿体中的色素分离原理:叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
实验七植物有丝分裂过程中染色体行为的观察
实验七植物有丝分裂过程中染色体行为的观察一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。
2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化,了解有丝分裂全过程。
二、实验原理有丝分裂也叫体细胞分裂。
高等生物个体的生长发育是通过细胞的有丝分裂增殖而形成的。
有丝分裂中,细胞质和细胞核都发生很大变化,但最明显的是核,特别是核内的染色体。
根据细胞核分裂变化的特征,有丝分裂过程可分为前、中、后、末四个时期。
两次细胞分裂之间的时期称为间期。
有丝分裂的结果是产生了两个相同的子细胞核,每个子细胞精确地含有和亲代细胞一样数目的染色体,从而使遗传物质在物种内及亲子代间保持稳定。
用于有丝分裂制片的组织一般是处于活跃分裂状态的动植物组织,如动物的红骨髓、外周血细胞,植物的根尖、茎尖以及通过组织培养得到的愈伤组织等。
制片方法多采用压片法,就是将经过处理的动植物材料放在载玻片与盖玻片之间,施加一定的压力使材料分散开来。
此方法大体包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片几个步骤。
三、实验材料大蒜根尖(染色体数2n=16)四、实验步骤1.取材:将大蒜瓣掰开,大头朝下置于白瓷盘中,加上少许水,3-4天后根长到1cm左右,将根剪下,用蒸馏水洗几次。
2.预处理:根尖用0.05%的秋水仙素溶液或0.002mol/L8-羟基喹啉水溶液处理4h左右。
目的是抑制纺锤丝的形成,收集更多中期分裂相,同时使染色体缩短,在细胞质内更加分散。
3.固定:预处理过的根尖用蒸馏水洗几次,在卡诺固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)中固定2~24h,之后用95%酒精冲洗,再转入70%酒精中,可于4℃冰箱保存。
固定的目的是迅速杀死活细胞,同时使染色体的蛋白变性,保持其固有的形态,4.解离:固定后的根尖用蒸馏水冲洗,加入解离液(1mol/L HCl)于60℃解离10分钟。
之后用自来水换洗3次,每次5分钟,将解离液彻底洗净。
解离的目的是将细胞分散开来,使组织软化,易于压片。
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实验报告
学生姓名: 学号: 专业: 年级、班级: 课程名称: 遗传学实验 实验项目:植物细胞染色体制片及有丝分裂观察
一、 实验目的
1.学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色体压片技术
2.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化
二、 实验原理
1. 在有丝分裂过程中,细胞核内染色体能准确地复制,并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去,使子细胞遗传组成与母细胞完全一样,从而保证了性状的发育和遗传的稳定性。
2. 有丝分裂是一个连续的过程,可分为前期、中期、后期和末期。
高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。
经过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片等步骤,可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色体动态变化的装片。
三、 实验材料
无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、0.1N 盐酸、洋葱根尖
四、 实验步骤
材料培养 取材 预处理
固定 解离(酸解)
五、 实验结果
醋酸洋红染色 染色 改良品红染色 压片
镜检
图1 染色后低倍镜下洋葱根尖细胞全视野图图2 处于分裂间期的洋葱根尖细胞图3 处于有丝分裂前期的洋葱根尖细胞图4 处于有丝分裂中期的洋葱根尖细胞图5 处于有丝分裂后期的洋葱根尖细胞图6 处于有丝分裂末期的洋葱根尖细胞
六、 思考与分析
1. 根据你的实验情况总结出制备好一张优良的细胞分裂标本应注意哪些问题?
1. 预处理方面
由于正常情况下细胞分裂中期持续的时间很短,且分裂现象较少,因此在预处理时可采用化学或物理方法使细胞分裂停止于中期,从而获得更好的观察效果。
2. 解离方面
在酸解过程中一定要掌握好温度和时间,若解离不够,则压片不易分散,若解离过长则在下一步处理时由于材料过软而易将根尖丢失。
3.取材方面
⑴ 只取2mm ~3mm 长的分生区
⑵ 要细心区别根尖的前端和后端,若误取了根尖的后端,在观察时,则只会见到长方形的成熟区细胞,见不到方形的分生区细胞。
材料经解离、冲洗后根尖前端分生区部分呈乳白色、比较圆滑,后端部分则较透明和粗糙(取根时不用剪刀而改用镊子夹取则更明显)。
4.染色方面
⑴使用醋酸洋红染色时,可以在酒精灯上稍加热,这样可以使材料更易着色和染色背景更清晰。
⑵媒染一定要充分,媒染后的水洗也要充分,洗不足时影响染色效果,并会在组织内外产生大量沉淀,制成的片子污浊。
图7 有丝分裂中期的洋葱根尖细胞绘制图(10x40) 图8 有丝分裂后期的洋葱根尖细胞绘制图(10x40)
5.压片方面
压片时将根尖放在载玻片中央,盖上盖玻片,用食指和拇指固定在盖玻片,再用镊子钝部或带有橡皮头的铅笔对准材料部位轻轻敲击盖玻片,使根尖细胞均匀地扩散成淡淡的云雾状,铺展呈单层,若压片不当,则会观察到根尖细胞不是铺展呈单层,而是有重叠或太密集。
2.常用染料的特点如何?
⑴本身是具有颜色的
⑵为碱性染剂,与染色体之间有亲和力。