(薄层色谱法) 食品中糖精钠的测定
实验十一饮料中糖精钠的测定
实验十一饮料中糖精钠的测定（薄层色谱法定性及半定量）一、实验目的1．掌握硅胶粘合薄板的制备方法及薄层分析的操作技术。
2．了解薄层层析法在混合样品分离、鉴定中的应用。
二、实验原理在酸性条件下，食品中的糖精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色谱分离、与标准比较，进行定性和半定量测定。
S NCNa OO O 2H2SNCHOO O+ 2H2O + NaCl三、仪器和试剂（一）仪器薄层板：20×5 cm或20×10 cm，薄层展开槽，微量移液管或微量注射器，干燥箱，干燥器，253.7 nm紫外灯，5 ml具塞比色管，125 ml分液漏斗。
（二）试剂（1）1:1 HCl（A. R）；无水硫酸钠；乙醚（不含过氧化物）；无水乙醇及95%乙醇；4%氢氧化钠。
（2）糖精钠标准溶液：精密称取0.0851 g以120℃干燥4 h后的糖精钠，加乙醇溶解，移入100 ml容量瓶中，加95%乙醇稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于 1 mg糖精钠（C6H4CONNaSO2⋅2H2O）。
使用时将此溶液稀释成每毫升含糖精钠0.3 mg。
（3）展开剂：苯-乙酸乙酯-36%乙酸（24:14:2）。
四、实验步骤1. 薄层板的制备称取市售硅胶G 3~5g，加3 ml水，于研钵中研磨片刻，调成糊状，涂成0.25～0.3 mm 厚，20⨯5 cm的薄层板，稍干后，于110℃活化l h．取出后置于干燥器内备用。
放置一周后要重新活化。
2. 样品提取准确量取10.00 ml均匀试样（如样品中含有二氧化碳，先加热除去。
如样品中含有酒精，加4%氢氧化钠溶液使其呈碱性，在沸水浴中加热除去。
）置于100 m1分液漏斗中，加2 ml 1:1盐酸，用30、20、10 ml乙醚依次提取3次，合并乙醚提取液，用5 ml盐酸酸化水洗涤一次，弃去水层。
乙醚通过无水硫酸钠脱水后，挥发乙醚，取2 ml 乙醇溶解残渣，密塞保存，备用。
3．点样在薄层板下端2 cm 处，用微量注射器10 μl 和20 μl 样液点两个样品点，再取10 μl 和20 μl 标液点两个标准点（相当糖精钠3.0和6.0 g ，要求样点直径<3 mm ，而且圆点大小应尽量一致）。
(薄层色谱法) 食品中糖精钠的测定
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微量注射器。 紫外光灯：波长253.7nm。
薄层板：10cm×20cm或 20cm×20cm 。 展开槽。
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六、实验步骤
1、样品处理 取10.0mL均匀试样（如试样 中含有二氧化碳，先加热除去。 如试样中含有酒精，加4%氢氧化 钠溶液使其呈碱性，在沸水浴中 加热除去），置于100mL分液漏斗 中，加2mL盐酸（1+1），用30、 20、20mL乙醚提取三次，合并乙
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醚提取液，用5mL盐酸酸化的水洗 涤一次，弃去水层。乙醚层通过
无水硫酸钠脱水后，挥发乙醚，
加2.0mL乙醇溶解残留物，密塞保 存，备用。
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2、薄层板的制备 聚酰胺粉板：称取3.2g聚酰胺 粉，加0.8g可溶性淀粉，加约 12mL 水，研磨3min～5min，立即 涂成0.25～0.30mm 厚10cm×20cm 的薄层板，室温干燥后，在80℃ 下干燥1h。置于干燥器中保存。 硅胶板：称取3.2g硅胶J，加 0.8gCMC，加约12mL 水，研磨 3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板， 室温干燥后，在80℃下干燥1h。 置于干燥器中保存。
识到要做好一次实验必须要在实
验之前了解好实验的原理及详细
的步骤，这样才能准确的做好每
一个实验，让在实验过程中的误
差降低，让实验准确无误的做好，
这就是我们在本次失败的实验中
得出的结论，希望在下一次实验中
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我们能吸取教训，把以后的每一
个实验都做到完善。
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食品中糖精钠的气相色谱测定法
食品中糖精钠的气相色谱测定法糖精钠是食品加工过程中添加的一种添加剂，它可以提供丰富的味道和口感，在食品中有重要的作用。
随着糖精钠在食品中的广泛应用，其残留量也显得越来越重要。
而要确定其含量，则需要采用一种可靠的测定方法。
气相色谱具有分离、测定、快速等优点，能够有效的测定糖精钠的含量。
因此，本文旨在介绍以气相色谱分析法测定食品中糖精钠含量的原理、设备及操作流程。
二、原理糖精钠主要有三种形式：钠糖、钙糖和锌糖三种形式。
气相色谱分析法可用于区分和测定这种复杂组合中的糖精钠。
气相色谱仪包括色谱柱、检测仪和电脑控制系统三部分组成，它们之间建立起紧密的通讯和控制，通过添加曲线中的校正点来使色谱仪的重现性得到提高。
色谱柱上的层析材料被用来和高温的溶剂混合，产生的气体将经过检测仪，并发出特定的光谱，经由程序的处理和添加校正点，以计算出糖精钠的含量。
三、设备及操作分析1.设备气相色谱分析仪是一种测定食品中糖精钠含量的专业仪器，它由色谱柱、检测仪和电脑控制系统三部分组成。
A.色谱柱:色谱柱是一种特殊的分析柱，由层析材料组成，其中固体树脂准备里包含着吸附性分子，使得物质容易地通过质量分析仪而被检测。
B.检测仪：检测仪通常由紫外可见光检测器、红外检测器及激发源组成，当物质通过紫外可见光检测器时，会发出特定的光谱，从而可以得到糖精钠的含量大小。
C.脑控制系统：电脑控制系统用于实现自动化控制和添加校正点，协助进行数据处理，以确定糖精钠的含量。
2.操作步骤（1）将样本加入至实验室，然后通过离心机进行离心，其中注意温度控制在恒定温度下。
（2）将离心液放入比色皿中，在有温度控制的情况下加入氧化剂和碱。
（3）将比色液在恒定的温度和压力下，经过色谱分析仪进行检测，用光谱图表示出检测值，并经由计算机添加校正点，以计算出糖精钠的含量。
（4）比较测定值和规定的食品标准，以合格标准为准。
四、结论气相色谱测定法是一种有效的测定食品中糖精钠的方法，其设备简单、操作简便，分析精确。
糖精钠的检测共9页文档
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB /T5009.29-2019，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2019，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-2019和GB/T5009.29-2019 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-2019使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液，9.5 0mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。
食品中糖精钠的测定方法
食品中糖精钠的测定方法1主题内容与适用范围本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。
本标准适用于食品中糖精钠的测定。
最低检出量：高效液相色谱法取样量为10g，进样量为IOUL时，最低检出量为1.5ng0第一篇高效液相色谱法（第一法）2原理样品加温除去二氧化碳和乙醇，调PH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
取样量为10g,进样量为IOUL时最低检出量为1.5ng0 3试剂3.1 甲醇：经滤膜（0.5μm）过滤。
3.2 氨水（1+1）：氨水加等体积水混合。
3.3 乙酸铉溶液（0.02mol∕L）：称取L54g乙酸铁，加水至IoOOmL溶解，经滤膜（0.45Pm）过滤。
3.4 糖精钠标准储备溶液：准确称取0.0851g经120C烘干4h后的糖精钠（C6H4C0NNaS02∙2H20）,加水溶解定容至100.OmL0糖精钠含量LonIg∕mL,作为储备溶液。
3.5 糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储备液10.OnlL放入IOOmL容量瓶中，加水至刻度。
经滤膜（0.45μm）过滤。
该溶液每亳升相当于0.1Omg的糖精钠。
4仪器高效液相色谱仪，紫外检测器。
5分析步骤5.1 样品处理5.1.1 汽水：称取5.00〜10.00g,放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调PH约7。
加水定容至适当的体积，经滤膜（0.45μm）过滤。
5.1.2 果汁类：称取5.00〜10.00g,用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。
5.1.3 配制酒类：称取10.0g,放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至20ml,经滤膜（0.45μm）过滤。
5.2 高效液相色谱参考条件5. 2.1色谱柱：YwG-CI84.6mmX250mml0um不锈钢柱。
6. 2.2流动相：甲醇：乙酸铉溶液（0.02mol∕L）（5+95）°7. 2.3流速：lmL∕minβ5. 2.4检测器：紫外检测器，波长230nm,灵敏度0.2AUFS。
果汁中糖精钠的薄层层析实验结果与分析
果汁中糖精钠的薄层层析实验结果与分析本实验是用果汁做对照，而后测得了样品中的糖精钠含量。
我们要通过多次测定结合对比的方法来得出最终的数据。
由于用到了高效液相色谱法和薄层层析这两种方法，所以我认为只有一个样品的话，是不能够很好地说明问题的。
故选取了四组平行的不同的水果做了一系列的测试，并且都留下了空白样。
20xx 年4月26日，首先将所有的准备工作就绪之后开始进行检测了。
此外，在我校的实验室里面还购置了一台层析柱。
这是因为当你买回来新鲜的水果之后再加入食盐或者白砂糖的时候会影响到结
果的稳定性。
因为食盐具有吸附作用，可以使一些杂质吸附到食盐上去，从而导致实验结果产生偏差。
现在，让我们来看看所获得的实验结果：1、20xx 年4月27日20xx 年5月2日20xx 年6月12日，分别对测定过程中所获得的色谱图进行了解读，并找到各组中存在的主要区别。
20xx 年3月11日和20xx 年10月22日，又分别重复了同样的操作步骤。
每次操作完成后就在显微镜下观察是否与之前保持着一致。
同时我们也知道，一般来讲在进行层析时颜色越深，则被萃取物质所占的百分率越大。
而层析图中紫红色部分表示有机溶剂，其它颜色表示无机离子，淡蓝色则代表的是高分子化合物。
那么既然这些无机离子才是造成果汁中糖精钠的残余的主要原因。
但是由于我们没有使用更为灵敏的检测器，如电子鼻等来检测这些无机离子，这就使得这个假设不能成立。
即：即使所有的成分都已经消失掉了，但是糖精
钠依旧存在。
但是虽然该实验的研究结果仍未达到预期目标。
食品中糖精钠测定方法的研究
食品中糖精钠测定方法的研究文章建立了两种食品中糖精钠的测定方法，研究了食品中糖精钠的荧光分光光度测定方法，最后对这两种方法的准确度进行了比较。
标签：糖精钠；荧光光度法；亚甲基蓝糖精钠，是最古老的甜味剂。
在各种食品生产过程中都很稳定[1]。
但糖精的安全性一直存在争议。
1977年，加拿大的一项多代大鼠喂养实验发现，大量的糖精可导致雄性大鼠膀胱癌。
但是糖精至今在我国和许多国家仍广泛用作食品和药物制剂中的人工非营养甜味添加剂，为了避免过量使用，许多国家已先后设置了容许限量。
因此研究其可靠、方便的检测方法，对于打击假冒、伪劣食品和药品，保护消费者的权益和健康，为食品、药品生产厂家和各级产品质量监督机构等部门提供科学、可靠、方便的检测方法，具有广泛的实际意义。
糖精钠的测定方法有多种，本次研究中主要研究了荧光分光光度法和次甲基蓝法，并对其各自的回收率，精密度及某些影响因素进行了测定，并对这两种方法的精密度进行了比较。
1 材料1.1 荧光光度法测定饮料中糖精钠含量1.1.1 仪器及试剂仪器：荧光分光光度计主要试剂：糖精钠标准溶液、0.03mol/L碳酸钠溶液其他试剂如无水乙醚、盐酸、磷酸、氯化钠等均为分析纯。
1.2 次甲基蓝分光光度法1.2.1 仪器及工作条件723-分光光度计1.2.2 主要试剂糖精钠标准溶液、次甲基蓝溶液：4×10-3mol/L、硫酸溶液：0.2mol/L、氯仿。
以上试剂均为分析纯，试验用水为蒸馏水。
2 结果与分析2.1 荧光光度法2.1.1 荧光配合物的激发与发射波长的选择和确定荧光光度法是基于糖精钠能碳酸钠形成荧光配合物而设计的[2]。
启动荧光分光光度计，对糖精（钠）与碳酸钠所形成的荧光配合物进行激发与发射光谱扫描，其结果是：激发波长为251nm，发射波长为500.8nm；起始波长分别为250～300nm和300～500nm。
2.1.2 标准曲线的绘制从50μg/mL的荧光配合物溶液中分别移取0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0mL于10mL容量瓶中，依次测定其荧光强度，绘制标准曲线其结果见图1。
食品中糖精钠含量快速分析方法的探讨
食品中糖精钠含量快速分析方法的探讨近年来随着人们生活水平日益提高，对于食品安全性也越来越重视。
各种食品添加剂被广泛使用，特别是人工合成的添加剂越来越受到人们的关注，食品添加剂中的糖精钠作为甜味剂是用来增强食品的感官性状。
适当使用是允许的，但要求使用量应控制在最低有效量的水平，否则会给食品带来毒性，影响食品安全，危害人体健康。
糖精（2-benziso thiazol-3(2H)-one-1,1-dioxide）为白色粉末，化学名称为邻苯甲酰磺酸亚胺，其钠盐称做糖精钠或可溶性糖精，易溶于水，稀水溶液的甜味约为蔗糖的400-500倍，无营养价值。
目前，国内研究报告报道的我国食品中糖精钠检验方法的主要技术路线是高效液相色谱法、气相色谱法、薄层层析法，目前已有的高效液相色谱特异性较强，仪器多不普及加之分析方法繁琐、费时并耗用大量有机溶剂，使其应用受到限制。
所以在实际工作中我们引进应用次甲基蓝快速测定糖精钠地方法，该法的试剂、操作方法和实验条件简便，可以广泛用于基层在食品中的糖精钠的测定，而且操作简单、快速、灵敏度高。
1 材料与方法1.1 原理糖精钠在酸性缓冲溶液中可与次甲基蓝生成蓝色缔合物,被有机溶剂萃取进行定量测定。
1.2 仪器和试剂分光光度计;60ml 分液漏斗;磷酸氢二钠—柠檬酸缓冲溶液;0.01%次甲基蓝溶液;糖精钠标准溶液:准确称取1.0000g干燥纯糖精钠,溶解后加水至100ml ,临用时稀释成使用液;分析纯氯仿。
1.3 检测方法根据检样适当取量5～10ml（测定前除去二氧化碳、酒精等气体）于60ml分液漏斗中;②另取标准使用液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml入分液漏斗中各加水至10ml;③于样品和标准系列中各加入缓冲溶液5ml 摇匀,加次甲基蓝溶液2ml摇匀,再各加氯仿10ml 振摇萃取,静止分层,氯仿层通过0.5g无水硫酸钠脱水,于722型分光光度计650nm波长,2cm比色皿,以零管调节零点,测定标准和样品的吸光度。
食品中糖精钠的测定
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五、所用仪器和试剂
1、试剂 乙醚：不含过氧化物。 无水硫酸钠。 无水乙醇及乙醇（95%）。 聚酰胺粉：过200目筛。 盐酸（1+1）：取100mL盐酸，加 水稀释至200mL。
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展开剂：正丁醇-氨水-无水乙醇
（7+1+2）；异丙醇-氨水-无水乙醇 （7+1+2）。 显色剂：溴甲酚紫溶（0.4g/L）。
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醚提取液，用5mL盐酸酸化的 水洗涤一次，弃去水层。乙 醚层通过 无水硫酸钠脱水后，挥发乙 醚，加2.0mL乙醇溶解残留 物，密塞保 存，备用。
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2、薄层板的制备 聚酰胺粉板：称取3.2g聚酰胺粉， 加0.8g可溶性淀粉，加约12mL 水， 研磨3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板，室 温干燥后，在80℃下干燥1h。置于 干燥器中保存。 硅胶板：称取3.2g硅胶J，加 0.8gCMC，加约12mL 水，研磨 3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板，室 温干燥后，在80℃下干燥1h。置于 干燥器中保存。
食品中糖精钠 的测定
一、实验目的与意义
糖精钠俗称糖精，是广泛使用 的一种人工甜味剂常用食品如酱菜、 冰淇淋、蜜饯、糕点、饼干、面包 等，均可以糖精钠作甜味剂来提高 其甜度。糖精钠的定量分析方法有 高效液相色谱法、薄层色谱法、离 子选择电极法及紫外分光光度法等。 目前使用较多的是高效液相色谱法。 本次实验所使用的方法是薄层色谱 法。
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二、实验原理
在酸性条件下，食品中的糖 精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色 谱分离、显色后，与标准比较， 进行定性和半定量测定。
重要3食品中糖精钠的次甲基蓝萃取光度测定法
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对空白溶液进行１１次测定，其标准偏差（Ｓｂ）为 １．６２×１０一，工作曲线斜率（ｋ）为４．４５，则检出限为：
ＤＬ＝３
Ｓｂ／ｋ＝３×１．６２×１０一／４．４５＝１．１×１０—３（ｍｇ／ｌＯ ｍ１）＝Ｏ．１１ ｔ培／ｌＯ
ｍｌ
２．６干扰离子的影响取０．１ ｒａｇ／１０“糖精钠溶液进行测定， 当相对误差控制在±５％以内时，下列离子（ｍｇ）：Ｃ１一，Ｎａ＋、Ｋ＋
１０２２
《麴些墨鳇垦》２Ｑ堕笙！旦差２１鲞苤！翅Ｑ垡鱼旦坠卫Ｑ盟趔Ｑ堕ｊ丛曼堕ｙ！！：！！№：！巡Ｙ！麴§
０００
现配。④砷和汞标准贮备液：浓度分别为１ 汞标准使用液：浓度分别为１
００
ｔ，ｇ／ｍ］。⑤砷和
２结果与讨论 ２．１精密度实验取浓度为０．０２０、０．０６０、０．１００、０．１５０、０．２００ ｔ，ｅｃ＇ｍｌ的砷和汞标准液进行精密度实验，其变异系数在２．１％ 以下。 ２．２准确度实验
１．试剂空白（水作参比）；２．缔合物（试剂空白参比） 图１吸收光谱
按试验方法测得吸光度。从工作曲线上查得糖精钠含量。并用 加标回收率法对回收率进行测定。 用本方法测定了汽水，冰棒冷饮样品中糖精钠含量及回收 率，结果见表１。 表１冷饮中糖精钠含量及回收率
试样≮苎嚣镒删蚴Ｌ，酱
汽水１ 汽水：
０．１８ Ｏ．１８ ０．２０ ０．２０ ０．２０ ０．３０ Ｏ．２０ ０．３０ Ｏ．２０ Ｏ．３０ Ｏ．２０ Ｏ．３０ ０．３６１ ０．４７０ ９５ ９８ １０４
１．４．２砷和汞标准曲线的绘制
分别取砷和汞标准应用液
（１ ｔＪｅ，／ｍ１）０．００、０．５０、２．００、６．００、１０．００、１５．００、２０．００、２５．００ ｒｎｌ于
１０一５％抗坏血酸混合液，用３
食品中糖精钠的测定
我国食品中糖精钠的使用范围及最 大使用量
食品名称／分类
熟制豆类（五香豆、炒豆） 带壳烘焙／炒制坚果与籽类 脱壳烘焙／炒制坚果与籽类 面包 糕点 饼干 复合调味料 饮料类（包装饮用水类除外）
配制酒
最大使 备 注
用量
/(g/kg)
1.0
以糖精计
1.2
以糖精计
1.0
以糖精计
0.15 以糖精计
0.15 以糖精计
• 3．在酸性溶液中以糖精的形式存在，出峰较早；在 碱性溶液中以糖精钠的形式存在，出峰较晚。因此加入 少量氨水使其缓冲液的pH在7.5左右，这样出峰顺序为 苯甲酸、山梨酸、糖精钠，分离效果好。值得注意的是， 一般色谱柱的最高允许pH为8，所以加入氨水的量不宜 太多，以免损坏柱子。根据不同的柱子和柱子在不同的 使用时期选择不同的比例，调节缓冲液的pH非常重要。
0.2AUFS。
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注
• 1．波长的选择：有时实验要求同时测定苯甲酸、山梨 酸和糖精钠，山梨酸的灵敏测定波长为254 nm，但在此 波长下糖精钠和苯甲酸的灵敏度降低，为了照顾三者的 灵敏度，本方法采用测定波长为230 nm。
• 2．流动相和色谱柱的选择：测定糖精钠也可采用氨 基柱，流动相也可采用甲醇、水。本方法采用的柱子和 流动相系统均和测定合成色素的条件一致，更便于同时 测定糖精钠和合成色素。
0.15 以糖精计
0.15 以糖精计
0.15 以糖精计，固体饮料按冲 调倍数增加使用量
0.15 以糖精计
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二、 (GB/T 5009.28-2003)食品中糖 精钠的测定
• 1 范围 • 本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。 • 本标准适用于食品中糖精钠的测定。 • 本方法检出限：高效液相色谱法为取样
食品中苯甲酸山梨酸和糖精钠的测定-标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定1 范围本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定方法。
本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定；第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。
第一法液相色谱法2原理样品经处理后，用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。
3试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1氨水（NH3•H2O）。
3.1.2氢氧化钠（NaOH）。
3.1.3硫酸（H2SO4）。
3.1.4亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6•3H2O）。
3.1.5乙酸锌（Zn(CH3COO)2•2H2O）。
3.1.6氯化钠（NaCl）。
3.1.7酒石酸（C4H6O6）。
3.1.8硅酮树脂。
3.1.9磷酸二氢钠（NaH2PO4•12H2O）。
3.1.10磷酸二氢钾（KH2PO4）。
3.1.11中性氧化铝。
3.1.12甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.1.13乙酸铵（CH3COONH4）。
3.2 试剂配制3.2.1 氨水（1+1）：氨水与水等体积混合，经微孔滤膜过滤后备用。
3.2.2 氢氧化钠溶液（4 g/L）：称取4 g氢氧化钠，溶于水并稀释至1000 mL。
3.2.3硫酸溶液（0.5 mol/L）：移取30 mL浓硫酸（约70%）边搅拌边慢慢加入至500 mL水中，冷却至室温后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
3.2.4亚铁氰化钾溶液（92 g/L）：称取106 g亚铁氰化钾加水至1000 mL。
3.2.5 乙酸锌溶液（183 g/L）：称取220 g乙酸锌溶于少量水中，加入30 mL冰乙酸，加水稀释至1000 mL。
3.2.6 酒石酸溶液（15%）：称取15 g酒石酸，用水定容100 mL。
3.2.7的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）：分别称取16.72 g磷酸二氢钠和2.72 g磷酸二氢钾，用水溶解后定容至1000 mL，经微孔滤膜过滤后备用。
分光光度法快速测定食品中糖精钠含量
分光光度法快速测定食品中糖精钠含量宣亚文;谢东坡;尹文星;武文【摘要】基于在硫酸介质中,次甲基蓝与糖精钠反应生成憎水型离子缔合物,且该缔合物可被氯仿定量萃取,提出了分光光度法测定食品中糖精钠含量.在室温下,当0.2 mol·L~(-1)硫酸用量为2.5 mL,0.04 mol·L~(-1)次甲级蓝溶液用量为2 mL时,糖精钠的质量浓度在15 mg·L~(-1)范围内与其吸光度呈线性关系,检出限(3s/k)为0.11 mg·L~(-1).用此法测定几种食品中糖精钠含量,回收率在100.1%～114.0%之间,相对标准偏差(n=6)均小于5.0%.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)001【总页数】3页(P57-58,61)【关键词】糖精钠;次甲基蓝;分光光度法【作者】宣亚文;谢东坡;尹文星;武文【作者单位】河南周口师范学院化学系,周口,466001;河南周口师范学院化学系,周口,466001;河南周口师范学院化学系,周口,466001;河南周口师范学院化学系,周口,466001【正文语种】中文【中图分类】O657.31糖精钠学名邻磺酰苯酰亚胺钠,分子式为C7 H4 O3 NSNa·2 H2 O,通俗名又叫甜精、糖精、可溶性糖精,它是一种最广泛的人工甜味剂[14]。
由于它可能具有潜在的致癌性,因此考虑安全性问题,各国都严格控制糖精钠的使用范围和使用量,所以准确测定糖精钠的含量,对维护食品安全,人们的身体健康有重要意义。
目前测定糖精钠的方法有荧光分光光度法、紫外分光光度法、薄层层析法、酚磺钛比色法、高效液相色谱法、水滴定法、液膜电极法等。
荧光光度法[59]的优点是不含苯甲酸和山梨酸时,具有较高准确度,当含有苯甲酸或山梨酸时,在酸性条件下,它们与碳酸钠形成的荧光配合物产生荧光熄灭效应,方法灵敏度下降,回收率低。
国家标准方法(GB 5009.28-1985)[10]规定的食品中糖精钠的测定方法是薄层层析法、酚磺钛比色法、紫外分光光度法3种,但繁杂的样品提取和分离过程,易受食品成分等因素影响,从而使重现性和回收率较差。
快速检测食品中的山梨酸、苯甲酸和糖精钠的HPLC方法研究 雷学梅
快速检测食品中的山梨酸、苯甲酸和糖精钠的HPLC方法研究雷学梅摘要：本文提供一种食品中多种添加剂含量的快速测定方法，通过对HPLC的色谱条件的优化，建立了一种快速检测食品中的山梨酸、苯甲酸和糖精钠的HPLC方法，并用于实际样品的检测。
采用本文的方法，快速、准确，提高了检测效率，降低了检测成本。
关键词：HPLC；食品；食品添加剂1、概述食品添加剂是指为改善食品色、香、味以及为防腐和加工工艺的需要而加入到食品中的化学合成物质或天然物质。
目前，随着食品添加剂的种类和使用不断增加，其安全性受到广泛关注。
经常食用添加剂超标的食品，会对人体消化道造成刺激，严重者还会损伤肝脏，造成食物中毒，所以要严格控制其使用量。
苯甲酸、山梨酸和糖精钠是常用的食品添加剂，国家卫生标准严格规定了它们的使用限量。
目前，食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的常用测定方法有气相色谱法(GC)、薄层色谱法(TLC) 和高效液相色谱法(HPLC)；糖精钠的测定有GC 法、TLC 法和离子选择电极法(ISE)。
TLC 法操作复杂，仅可半定量分析；ISE法需特殊设备；HPLC 法应用广泛，可同时对3 种添加剂进行测定。
国标GB/T23495-2009 就是采用高效液相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量。
但是，国标方法在实际工作中检测时间较长。
2、色谱条件优化根据国家标准，当甲醇与乙酸铵比例为5∶95 时，苯甲酸的保留时间为10.315min，山梨酸的保留时间为14.282min，糖精钠的保留时间为18.382min，为了缩短检测时间，提高检测效率，选择调整2 种溶剂的比例。
当流动相甲醇与乙酸铵的比例(V/V) 从5∶95 改变至55∶45 时，发现流动相中甲醇的体积直接影响分析物的出峰时间，甲醇体积增加，所有分析物的保留时间都缩短，其中以糖精钠尤为明显。
当调整流动相甲醇与乙酸铵的比例(V/V) 为40∶60 时，在5min内可以完成检测，各组分均得到较好的分离，色谱峰分离度达到3.0 以上，拖尾因子小，色谱峰型尖锐。
糖精钠的测定
实验七、甜味剂--糖精钠的测定－薄层色谱法GB/T 5009.28-2003糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，它的化学名是邻磺酰苯亚胺（O-sulfobenzolc acidimide）,分子式为C7H5SO3N,白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，在水中溶解度极小，味极甜。
糖精钠进入人体后不分解，不供给热能，无营养价值，随尿排除体外。
我国《食品添加剂使用卫生标准》规定，糖精钠用于饮料、酱菜类、复合调味料、蜜饯、雪糕、配制酒、冰棒、糕点、饼干、面包等食品，最大使用量(以糖精计)为0.15g／kg；高糖果汁(果味)饮料按稀释倍数的80 %加入，瓜子的最大使用量为1.2g／kg；话梅、陈皮等的最大使用量为5.0g／kg。
测定糖精的方法较多，有薄层色谱法、纳氏比色法、硫代二苯胺比色法及紫外分光光度法等。
一、紫外分光光度法1. 原理样品经处理后，在酸性条件下用乙醚提取食品中的糖精钠，经薄层分离后，溶于碳酸氢钠溶液中，于波长270nm处测定吸光度，与标准液比较定量。
2. 试剂与仪器(1) 2 %碳酸氢钠溶液(2) 4 %氢氧化钠溶液(3) 6 mol/L HCl溶液(4) 乙醚（不含过氧化物）(5) 10 %硫酸铜(6) 无水硫酸钠(7) 0.02 mol/L氢氧化钠(8) 硅胶GF254(9) 聚酰胺，200目(10) 糖精钠标准溶液：准确称取0.0851 g经120 ℃干燥4 h后的糖精钠，加乙醇溶解，移入100 mL容量瓶中，加乙醇（95 %）稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1 mg糖精钠（C6H4CONNaSO2.2H2O）。
(11) 展开剂：苯-乙酸乙酯-乙酸（12:7:3），硅胶薄层用。
(12) 展开剂：正丁醇-浓氨水-无水乙醇（7:1:2），聚酰胺薄层用(13) 显色剂：0.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调至PH值为8(14) 紫外光灯(波长253.7nm),紫外分光光度计(15) 薄层板10×20cm；展开槽(16) 微量注射器3.测定方法(1)样品提取1)饮料、冰棍、汽水类：取10 ml均样置100 ml分液漏斗中，加2 ml 6mol/L盐酸，用30、20、20 ml乙醚提取三次。
糖精钠检验操作规程
目的：建立一个糖精钠检验标准操作规程。
范围：适用于糖精钠原料检验责任者：QA负责人、QC化验员。
规程：本规程引自糖精钠质量标准QS－022－011.分子式及分子量C7H4NNaO3S·H2O 241.192.性状：本品为无色结晶或白色结晶性粉末。
无臭或微有香气，味浓甜，甜带苦，易风化。
本品在水中易深，在乙醇中略溶。
3.鉴别：3.1.仪器：TG328A万分之一分析天平、5ml量筒、25ml烧杯、洗涤瓶、DH64电热恒温干燥箱、毛细管、3#波砂漏斗、500ml抽滤瓶、真空泵、WRS －1数字溶点测定仪、试管、酒精灯、铂丝、25ml容量瓶、1ml移液管、红外分光光度计。
3.2.试剂：盐酸、间苯二酚、硫酸、氢氧化钠试液、钠盐。
3.3.操作方法：3.3.1.取本品约0.3g，加水5ml，溶解后，加盐酸1 ml，即析出结晶，滤过，沉淀用水洗净后，在105℃干燥2小时，依法测定（SOP—QC—），熔点为226—230℃。
3.3.2.取本品约20mg，置试管中，加间苯二酚约40mg，混合后加硫酸0.5ml，用不火加热至显深绿色，放冷，加水10ml，与过量的氢氧化钠试液，即显绿荧光。
3.3.3.本品炽灼后，残渣显钠盐的鉴别反应按（SOP—QC—）进行。
4.检查：4.1.酸碱度：4.1.1.仪器：TG328A万分之一分析天平、试管、10ml量筒、滴管。
4.1.2.试剂：酚酞指示液、水。
4.1.3.操作方法：取本品1.0g，加水10ml溶解后，对石蕊试纸显中性或碱性反应，但遇酚酞指示液不得显红色。
4.2.铵盐；4.2.1.仪器：TG328A万分之一分析天平、25ml量筒、0.5ml刻度吸管、25ml比色管。
4.2.2.试剂：无氨蒸馏水、碘化汞钾试液、氯化铵溶液。
4.2.3.操作方法：取本品0.4g，加无氨蒸馏水20ml溶解后，加碱性碘化汞钾试液1ml，摇匀，静置5分钟，如显色，与标准氯化铵溶液（取氯化铵在105℃干燥至恒重后，精密称取0.2966g，加无氨蒸馏水溶解后1000ml）0.10ml，用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.0025%）。
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本方法适用于食品中糖精钠的 测定。
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五、所用仪器和试剂
1、试剂 乙醚：不含过氧化物。 无水硫酸钠。 无水乙醇及乙醇（95%）。 聚酰胺粉：过200目筛。 盐酸（1+1）：取100mL盐酸，加 水稀释至200mL。
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展开剂：正丁醇-氨水-无水乙醇 （7+1+2）；异丙醇-氨水-无水乙 醇（7+1+2）。 显色剂：溴甲酚紫溶（0.4g/L）。 称取0.04g溴甲酚紫，用乙醇（50% ）溶解，加氢氧化钠溶液（4g/L）
识到要做好一次实验必须要在实
验之前了解好实验的原理及详细
的步骤，这样才能准确的做好每
一个实验，让在实验过程中的误
差降低，让实验准确无误的做好，
这就是我们在本次失败的实验中
得出的结论，希望在下一次实验中
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我们能吸取教训，把以后的每一
个实验都做到完善。
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谢谢观看！
先已达到饱和状态。展开至10cm，
取出薄层板，挥干，喷显色剂，斑
点显黄色，根据试样点和标准点的
比移值进行定性，根据斑点颜色深
浅进行半定量测定。
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七、数据处理
m1 1000 X V2 m2 V1 1000
X—样品中糖精钠的含量，g/kg（g/L） m1—测定用样液中糖精钠的质量，mg; m2—样品质量（体积），g（mL）； V1—样品提取液残留物加入乙醇的体积， mL； V2—点板液体积，mL。
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八、实验讨论
本次试验总的来说没有实验 成功，所以最终没有得到正确结 果，所以在数据处理上面没有数 据记录，通过讨论，此次实验失 败的原因是多方面的，有我们自 身对实验过程及操作不熟悉的原 因，也有在实验过程中我们的配
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溶液或是在制作板方面出现错
误，通过此次实验我们深刻的意
食品中糖精钠的测定
（薄层色谱法）
实验目的与意义 实验原理
所能使用的方法 适用范围
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05 06 07 08
所用仪器和试剂 实验步骤
05
数据处理 实验讨论
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一、实验目的与意义
糖精钠俗称糖精，是广泛使用 的一种人工甜味剂常用食品如酱菜、 冰淇淋、蜜饯、糕点、饼干、面包 等，均可以糖精钠作甜味剂来提高 其甜度。糖精钠的定量分析方法有 高效液相色谱法、薄层色谱法、离 子选择电极法及紫外分光光度法等。 目前使用较多的是高效液相色谱法。 本次实验所使用的方法是薄层色谱 法。
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醚提取液，用5mL盐酸酸化的水洗 涤一次，弃去水层。乙醚层通过
无水硫酸钠脱水后，挥发乙醚，
加2.0mL乙醇溶解残留物，密塞保 存，备用。
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2、薄层板的制备 聚酰胺粉板：称取3.2g聚酰胺 粉，加0.8g可溶性淀粉，加约 12mL 水，研磨3min～5min，立即 涂成0.25～0.30mm 厚10cm×20cm 的薄层板，室温干燥后，在80℃ 下干燥1h。置于干燥器中保存。 硅胶板：称取3.2g硅胶J，加 0.8gCMC，加约12mL 水，研磨 3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板， 室温干燥后，在80℃下干燥1h。 置于干燥器中保存。
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3、点样 在薄层板下端2cm 处，用微量 注射器点10μL和20μL的样液两 个点，同时点3.0、5.0、7.0、 10.0μL糖精钠标准溶液，各点间 距1.5cm。
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4、展开与显色
将点好的薄层板放入盛有展开
剂（3.6.1 或3.6.2）的展开槽
中，展开剂液层约0.5cm，并预
。此溶液每1mL相当于1mg糖精钠。 2、仪器 玻璃纸。 玻璃喷雾器。
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微量注射器。 紫外光灯：波长253.7nm。
薄层板：10cm×20cm或 20cm×20cm 。 展开槽。
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六、实验步骤
1、样品处理 取10.0mL均匀试样（如试样 中含有二氧化碳，先加热除去。 如试样中含有酒精，加4%氢氧化 钠溶液使其呈碱性，在沸水浴中 加热除去），置于100mL分液漏斗 中，加2mL盐酸（1+1），用30、 20、20mL乙醚提取三次，合并乙
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二、实验原理
在酸性条件下，食品中的糖 精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色 谱分离、显色后，与标准比较， 进行定性和半定量测定。
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三、所能使用的方法
糖精钠的定量分析方法有高 效液相色谱法、薄层色谱法、离 子选择电极法及紫外分光光度法 等。目前使用较多的是高效液相 色谱法。
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四、适用范围
1.1mL调节pH为8，定容至100mL。
硫酸铜溶液（100g/L）：称取10g硫
酸铜，用水溶解并稀释到100mL。
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氢氧化钠溶液（0.8g/L，40g/L）。 糖精钠标准溶液：准确称取0.0851g 经120摄氏度烘干4小时 候的糖精钠，加无水乙醇溶解移入
100mL容量瓶中加乙醇稀释至刻度