白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究
银屑病样模型的研究进展
银屑病样模型的研究进展
作者：陈琼
来源：《医学信息》2017年第18期
摘要：银屑病是一种常见并易复发的慢性炎症性皮肤病。迄今为止，银屑病真正的发病原因及其机制国内外研究者均未能完全阐明。本文就多年来各种银屑病模型的研究进行整理分析，为新模型的发展方向提供参考。发现虽然各种模型在一定程度上为银屑病的药物开发及机制研究提供了新思路新方法，但是均只能在短期内局限性的模仿银屑病的部分生理病理特点，并没有真正意义上反映人类银屑病的实际发病情况。因此，银屑病模型的完善还需我们从分子水平到遗传环境等各个因素出发，更深入更全面的研究。
关键词：银屑病；动物模型；细胞模型；发病机制
中图分类号：R758.63 文献标识码：A 文章编号：1006-1959（2017）18-0038-03
银屑病俗称“牛皮癣”，是一种常见并易复发的慢性炎症性皮肤病。红斑、白色鳞屑、薄膜现象、点状出血现象是本病主要临床特征，部分患者伴有关节病变。组织病理学主要表现为角质增厚，主要是角化不全、乳头部的血管扭曲扩张、真皮上部有炎细胞浸润[1]。银屑病已成为皮肤科领域重点研究的疾病之一。迄今为止，银屑病真正的发病原因及其机制国内外研究者都未能完全阐明。本文就多年来各种银屑病模型的研究进行整理分析，了解各种模型的作用特点及限制，为新模型的发展方向提供参考。
1 自发性动物模型
该种动物模型是指实验动物在长期的进化过程中未经任何外部的人工处置，在自然情况下发生的疾病模型，该种动物模型自发突变且产生银屑病样病变，其组织病理主要表现为表皮过度增生，主要是棘层肥厚、中性粒细胞巨噬细胞和肥大细胞浸润、真皮血管扩张及新生等。
改良型银屑病小鼠模型的建立
改良型银屑病小鼠模型的建立
银屑病是一种常见的自身免疫性疾病，其特征是慢性皮肤红斑、脱屑和鳞屑形成，常伴有关节痛、红肿和关节强度等全身症状。银屑病的发病机制复杂，目前尚不完全清晰。然而，建立合适的银屑病动物模型有助于深入研究该病的病理生理机制和治疗手段。
早期，研究人体银屑病的方法主要是基于临床病例和解剖组织病理学观察，无法进行足够的实验来验证某些假说，限制深度研究银屑病的发病机制和治疗方法。因此，建立银屑病的动物模型具有重要意义，可促进银屑病研究的发展。
目前，最常用的银屑病动物模型是人工诱导病理状态的小鼠模型。早期建立的银屑病小鼠模型主要是通过物理、化学致病物和基因操作等方法诱导，如角质蛋白K1的过表达或基因缺失等。这些模型多存在局限性，如操作复杂、易造成伤害和不易从发病机制方面解释。因此，改良型银屑病小鼠模型的建立具有极大的意义。
近年，研究者开始尝试建立更符合银屑病自然病理特征和机制的小鼠模型。其中，T 细胞介导的银屑病小鼠模型最具有前景。这种模型能够模拟银屑病的T细胞介导的免疫反应，通过该模型可以研究重要的疾病发生机制，同时非常适合预测某些药物的疗效。这些模型是基于通用免疫识别分子，如MHCII，来激活CD4+T细胞。
CD4+T细胞介导的银屑病小鼠模型的建立主要包括以下步骤：
1. 提取小鼠CD4+T细胞并用笛卡尔的某种类DONOR细胞线提供的MHC II基因合成人类MHC类II分子。
2. 将MHCII分子及银屑病相关肽片段合成的多肽通过逆转录并PCR扩增方式合成，完成这一步之后可以进行银屑病细胞因子 mRNA 水平检测。
中药白疕合剂治疗银屑病作用机制实验研究
中药白疕合剂治疗银屑病作用机制实验研究
陈洪艳;李忻红
【摘要】目的观察中药白疕合剂对银屑病小鼠T淋巴细胞凋亡及阴道上皮角质形成细胞增殖核抗原表达的影响,并探讨其可能的机制.方法 72只银屑病模型小鼠随机分为6组,连续用药灌胃4周后,透射电镜下观察各组小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡情况,SP免疫组化法(链霉卵白素-过氧化物酶连结法)检测各组小鼠细胞增殖核抗原PCNA的情况.结果 (1)造模后小鼠与空白对照组比较,自疕合剂高中低组均出现凋亡小体,消银颗粒见少量凋亡小体；(2)与空白对照组比较,白疕合剂高中低组模型均着色深,消银颗粒组着色较深.结论白疕合剂可通过诱导T淋巴细胞凋亡,抑制人角质形成细胞(KC)细胞增殖核抗原PCNA的作用机制发挥其治疗银屑病的作用.%Objective To observe the influence of herbal white mange mixture on mice psoriasis T fine apoptosis and vaginal epithelium keratinocyte proliferating nuclear antigen, and to explore its possible mechanism. Methods 72 psoriasis model mice were randomly divided into six groups, continuous intragastric administration after four weeks, under transmission electron microscope to observed the mice spleen T lymphocyte apoptosis situation, use SP immunohistochemical method (chain mildew avidin a peroxide enzyme link method) to detected the mice proliferation cell nuclear antigen PCNA situation. Results (l)The model group compared to the normal group, the apoptosis bodies in white mange mixture group were much more than Xiaoyinkeli group. (2) The model group compared to the normal group, white mange mixture group had a strong color, while the Xiaoyinkeli group had a light color. Conclusion White mange mixture
白疕(寻常性银屑病)诊疗方案
白疕(寻常性银屑病)诊疗方案
一、概述：银屑病是一种以皮肤斑，表面覆盖多层银白色鳞屑为特征的慢性皮肤病。本病属中医“白疕”范畴，古代文献又有“干廯”之称。
二、诊断
(一)疾病诊断
1、中医诊断标准：参照中华人民共和国中医药行业标准《中医病证诊断疗效标准》(ZY／T001.2—94)。
(1)皮损初为针尖至扁豆大的炎性红色丘疹，常呈点滴状分布，迅速增大，表面覆盖银白色多层性鳞屑，状如云母。鳞屑剥离后，可见薄膜现象及筛状出血，基底浸润，可有同形反应。陈旧皮疹可呈钱币状、盘状、地图状等。
(2)好发于头皮、四肢伸侧，以肘关节面多见，常泛发全身。
(3)部分病人可见指甲病变，轻者呈点状凹陷，重者甲板增厚，光泽消失。或可见于口腔、阴部粘膜。发于头皮者可见束状毛发。
(4)起病缓慢，易于复发。有明显季节性，一般冬重夏轻。
(5)可有家族史。
(6)组织病理检查示表皮角化过度、角化不全。角层内有中性多形核白细胞堆积棘层增厚。表皮突呈规则性向下延伸，真皮乳头水肿呈棒状，乳头内血管扩张，}血管周围有炎性细胞浸润。
2、西医诊断标准：参照《临床诊疗指南一皮肤病与性病分册》(中华医学会编著，人民卫生出版社，2006年)。
(1)多青壮年发病。部分发病或加重常由扁桃体炎或上呼吸道感染诱发。
(2)好发于头皮、躯干和四肢伸侧，常对称分布，亦有仅局限与某一部位者。
(3)典型皮疹为粟粒至绿豆大红色丘疹、斑丘疹或斑块，可融合成片，边界清楚周围有炎性红晕，浸润显著，表面覆盖厚积的银白色鳞屑。轻轻刮除鳞屑，可见一层淡红色半透明薄膜(薄膜现象)；刮除薄膜后出现点状出血(Auspitz 征)。白色鳞屑、薄膜现象和点状出血是本病的临床特征。皮疹形态多样，可为点滴状、钱币状、地图状、蛎壳状等。
银屑病动物模型的研究进展
银屑病动物模型的研究进展
杨素清;李东东;闫景东
【期刊名称】《长春中医药大学学报》
【年(卷),期】2017(33)6
【摘要】总结当前银屑病动物模型,以及分析其各自原理、特点、优势和局限性发现:自发性突变鼠模型在研究中极少使用;生物医学型动物模型广泛应用于药物疗效评价;药物诱发性动物模型适宜在普通实验室推广应用;基因工程动物模型适合有条件的工作者选用;复合动物模型有利于研究银屑病发病机制的复合机制;异体移植动物模型因客观条件限制了推广应用;中医特定证型银屑病动物模型为中医工作者的研究提供了理想的模型.银屑病动物模型种类较多,但各自特点突出,因此研究者需要根据研究目的恰当选取实验模型.%Psoriasis is a chronic recurrent inflammatory dermatosis involved in genetic, immune, infection and other factorse, which etiology and pathogenesis is not yet fully clear. In clinical studies, animal models are widely used.Through reviewing the related papers and summarizing the current psoriasis animal models with analyzing their respective principles, characteristics, advantages and limitations, we get the conclusion that spontaneous mutant rat models are rarely used in research; biomedical animal models are widely used in the evaluation of drug efficacy;drug-induced animal models are suitable for general laboratories; genetic engineering animal models are suitable for conditional workers. Allogeneic animal model is limited by the objective conditions to promote the application;TCM syndrome type psoriasis-like
白疕——精选推荐
⽩疕
⽩疕
英⽂名为：White mange，⼜称松⽪癣，系指以红斑、鳞屑为主要⽪损，抓损之处可见⼩的出⾎点，以丘疹、红斑等反复出现多层银⽩⾊⼲燥鳞屑为特征的慢性复发性⽪肤病。男⼥⽼幼皆可患病，但以青壮年为多，男性略多于⼥性，具有⼀定的遗传倾向，多于冬季发病或加重，夏季则有减轻。
现代医学称之为：银屑病，与遗传因素（先天禀赋）、免疫失衡（阴阳正⽓）、代谢紊乱（痰、瘀）、环境毒素（邪毒⼊侵）等等，是其发病原因。
祖国医学对此病早有记载，有：“⼲癣”、“顽癣”、“松⽪癣”、“⽩疕 ”、“⽩疕风”、“蛇风等病名。
《诸病源候论》:⼲癣,但有匡郭,枯索,痒,搔之⽩屑出是也。皆因风湿邪⽓，客于腠理，复值寒湿，与⾎⽓相搏所⽣。若其风毒偏胜盛，湿⽓少，故风沉⼊深，则⽆汁，为⼲癣也。这是祖国医学关于本病的较早记载；
《⼭海经》中也可见到关于“癣”的较早记载：(渠之⼭)其中多豪鱼,状如鲔,⾚喙尾⾚⽻,可以医治“⽩癣”；
《外科启⽞》则提出了“⽩壳疮”这⼀病名,“⽩壳疮者,即癣也，……皆因⽑孔受风湿之邪所⽣”；
《外科正宗》在“顽癣”病因病机分析和治疗⽤药⽅⾯,基本上都继承了《窦⽒外科全书》的认识,认为“顽癣,乃风、热、湿、⾍等为患。……此等总皆⾎燥风毒克于脾、肺⼆经所致”；
《外科⼤成》⾸次提出“⽩疕”的病名，“⽩疕,肤如疹疥,⾊⽩⽽痒,搔起⽩屑,俗呼蛇风；
《医宗⾦鉴外科⼼法要诀》记载：此症俗名蛇虱，⽣于⽪肤，形如疹疥，⾊⽩⽽痒，搔起⽩⽪，由风邪客于⽪肤，⾎燥不能容养所致；
《外科证治全书》记载：⽩疕亦名疕风，⽪肤燥痒，起如疹疥⽽⾊⽩，搔之屑起，渐⾄肢体枯燥，坼裂⾎出痛楚……
改良型银屑病小鼠模型的建立
改良型银屑病小鼠模型的建立
银屑病是一种非传染性的慢性皮肤病，主要特征是皮肤表面出现厚鳞皮或鳞屑斑块，并伴随有红斑、瘙痒和发炎。目前，银屑病的发病机制尚不清楚，因此建立一个合理的银屑病动物模型对于深入研究该疾病的发病机理和开发新的治疗策略至关重要。
传统的银屑病小鼠模型是通过使用化学物质诱导小鼠出现皮肤病变。使用丙酮或丙二醇对小鼠进行刺激，模拟银屑病的发病过程。这种模型存在一些局限性，如刺激物浓度和作用时间的不确定性，以及适用于小鼠的刺激物并不能完全模拟人类银屑病的病理特征。
为了克服传统模型的局限性，一些改良型银屑病小鼠模型被提出。其中一种是使用先天性或自适应免疫系统缺陷的小鼠。由于银屑病被认为是一种免疫介导的疾病，因此研究人员尝试通过引入免疫缺陷小鼠来建立相关的模型。将小鼠的T细胞或CD4+细胞删除或抑制，观察是否出现类似银屑病的病变。这种模型能够更好地模拟银屑病的免疫学特征，但仍存在一些局限性，如缺乏瘙痒和发炎等症状。
另一种改良型模型是使用转基因小鼠。通过基因突变或基因敲除等方法，研究人员能够模拟银屑病的发病机制。敲除小鼠中特定的信号通路相关基因，如IL-23、IL-17和
IL-22等，观察其是否引发银屑病样病变。这种模型能够更准确地模拟银屑病的免疫学和炎症特征，并且能够更好地用于研究新的治疗策略。
除了改良型银屑病小鼠模型，一些研究人员也尝试使用其他动物模型来模拟银屑病。使用豚鼠模型，该模型是使用特定基因组合的豚鼠制作，能够呈现银屑病的特征。还有一些非哺乳动物模型，如鸟类和爬行动物模型，可以用来研究银屑病的进化和发病机制。
银屑病动物模型研究进展
银屑病动物模型研究进展
杨建强;李伟;郑敏
【摘要】The establishment of an animal model of psoriasis plays an important role in understanding pathogenesis and drug research of psoriasis.In this article,the types of animal model of psoriasis including model induced by propranolol,imiquimod,sodium dodecyl sulfate and cytokines and the limitations of these models are reviewed.%构建理想的银屑病动物模型是银屑病发病机制和开展药物治疗研究的关键,本文就银屑病模型的诱导,包括普萘洛尔诱导、咪喹莫特诱导、十二烷基硫酸钠诱导及细胞因子注射诱导和模型特点及局限性进行综述.
【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》
【年(卷),期】2017(033)009
【总页数】3页(P560-562)
【关键词】银屑病;动物模型;咪喹莫特;普萘洛尔
【作者】杨建强;李伟;郑敏
【作者单位】湖州师范学院附属第一医院皮肤科,浙江湖州,313000;浙江大学医学院附属第二医院皮肤科,浙江杭州,310009;浙江大学医学院附属第二医院皮肤科,浙江杭州,310009;浙江大学医学院附属第二医院皮肤科,浙江杭州,310009
改良型银屑病小鼠模型的建立
改良型银屑病小鼠模型的建立
银屑病是一种免疫介导的慢性皮肤病，主要特征是皮肤表面覆盖有红斑、脱屑和鳞屑。目前，银屑病的研究主要依赖于小鼠模型，但现有的模型存在一些缺陷。为了改良现有的
银屑病小鼠模型，我们提出了以下建议。
我们可以采用免疫诱导方法建立银屑病小鼠模型。目前常用的方法是注射外源性抗原
或抗原样物质，以刺激小鼠的免疫系统。这种方法存在很多限制，例如刺激剂的选择和浓度、注射剂量、注射频率等。我们建议尝试其他免疫诱导方法，例如使用DNA疫苗或复合
佐剂，以提高诱导银屑病的效果。
我们可以考虑将人类银屑病患者的皮肤组织移植到小鼠体内，建立人源性银屑病小鼠
模型。这种模型能更好地模拟银屑病的发病机制和病理变化，有助于研究银屑病的致病因
子和免疫调节机制。我们可以使用基因编辑技术，将人类银屑病患者相关基因导入小鼠体内，进一步研究这些基因在银屑病发展中的作用。
我们可以加入雄性激素的干扰素治疗模型，以研究银屑病中雄性激素的作用。雄性激
素在银屑病的发病中起到一定的调节作用，可以通过抑制免疫细胞的活性来减轻银屑病症状。在小鼠模型中加入雄性激素的干扰素治疗，有助于研究银屑病发展过程中雄性激素的
作用机制。
为了更好地研究银屑病的治疗策略，我们可以建立一个复发型银屑病小鼠模型。目前
的银屑病小鼠模型往往只能模拟银屑病的急性发作阶段，缺乏复发性的特征。通过连续刺
激小鼠的免疫系统，可以建立一个更接近银屑病复发的模型，有助于研究银屑病的复发机
制和寻找更有效的治疗方法。
改良型银屑病小鼠模型的建立
改良型银屑病小鼠模型的建立
银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病，临床特征为皮肤表面出现红色斑块，并伴有痛痒、脱屑等症状。目前已经建立了多种银屑病小鼠模型，但由于模拟程度不高、疾病发展过程较长等问题，仍然需要对现有模型进行改良。
为了建立一种更逼近银屑病病理过程的小鼠模型，可以从以下几个方面进行改良：
1. 小鼠品系的选择：银屑病往往与免疫调节失衡有关，因此可以选择易受到免疫调节影响的小鼠品系作为模型动物，如IL-23引发的Th17细胞增多和炎症反应所致的小鼠模型。还可以选择易感银屑病的小鼠品系，如SKG小鼠等。
2. 免疫刺激的方式：可以采用免疫刺激来诱导银屑病小鼠模型的建立。传统的方法是使用新陈代谢失调剂量较大的制剂，如鱼雷致红毛细胞素（IMQ），通过外用或注射途径刺激小鼠免疫系统，从而诱导出银屑病样的炎症反应。改良可以在使用免疫刺激前加入药物预处理，以提高模型的稳定性和可重复性。
3. 病变评估指标的选择：银屑病的病理特征包括表皮层的过度增殖、炎症反应等，因此可以选择适当的指标来评估模型的建立情况。可以通过采集小鼠皮肤组织进行病理学检查，观察表皮层的增厚和角质层的增加情况；还可以通过ELISA或免疫组织化学等方法检测炎症因子的水平变化。
4. 干预治疗的应用：借鉴临床上的治疗方法，可以在模拟银屑病小鼠模型的建立同时进行干预治疗的应用。可以给予免疫抑制剂、免疫调节剂或局部使用光疗、激光治疗等干预措施，观察其对病理过程的影响，从而更好地模拟临床治疗策略。
改良型银屑病小鼠模型的建立可以通过精确选择小鼠品系、优化免疫刺激的方式、选择合适的病变评估指标以及引入临床治疗干预等手段进行。这样可以更好地模拟银屑病的病理过程，为研究银屑病的发病机制和药物治疗提供更有效的实验基础。
银屑病小鼠药效评价方法
银屑病小鼠药效评价方法
银屑病小鼠药效评价方法是通过使用小鼠模型来评估治疗银屑病的药物的疗效。下面是常见的一些评价方法：
1. PAS染色法：使用Periodic acid-Schiff（PAS）染色方法，观察药物对银屑病小鼠皮肤组织中角质层增厚程度的影响。该方法可通过显微镜观察到角质层的厚度变化，并评估药物的抗角质过度生成作用。
2. 炎症指标评估：通过检测银屑病小鼠皮肤组织中炎症指标的变化来评估药物的抗炎作用。常用的指标包括炎性细胞浸润程度、炎性因子（如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17等）水平的检测。
3. 组织病理学评估：通过对银屑病小鼠皮肤组织进行病理学检查，观察药物对银屑病病理改变的影响。常用的评估指标包括表皮增厚程度、表皮下炎细胞浸润情况等。
4. 临床评分法：根据银屑病小鼠的皮肤病变情况，使用临床评分系统对药物的疗效进行评估。常用的评分系统包括Psoriasis Area and Severity Index（PASI）、Scoring of Atopic Dermatitis（SCORAD）等。
5. 免疫组化检测：通过免疫组化方法检测银屑病小鼠皮肤组织中相关蛋白的表达水平，评估药物对病理过程的影响。常用的标记物包括角质形成相关蛋白（如角质蛋白1、角质蛋白10等）、炎症因子（如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17等）等。
需要注意的是，以上方法仅供参考，具体的药效评价方法应根据实验目的、药物特性和实验条件等因素进行选择和调整。在进行动物实验时，应遵守相关的伦理规定，并确保实验设计科学合理、结果可靠。
银屑病药效学动物模型及其在中药新药研究中应用的思考
006111
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栏目中药药物评价>>非临床安全性和有效性评价
标题银屑病药效学动物模型及其在中药新药研究中应用的思考
作者韩玲
部门
正文内容
审评一部韩玲
摘要：本文综述了银屑病药效学动物模型的进展，对治疗银屑病中药新药
药效学研究方面存在的问题进行了分析，提出了应结合银屑病发病机制的
研究进展完善药效学方法学研究的建议。
银屑病是一种慢性复发性皮肤病，其发病机制复杂，至今尚未明了。可能是一种具有基因遗传特性的疾病，也与感染、内分泌机能障碍、免疫功
能紊乱等有关。中医学认为以风湿毒邪内侵为标，血虚、血燥为根源，血
热、血虚、血瘀是本病的基本病机，故清热解毒、凉血、活血化瘀、祛风
除湿成为治疗本病的基本法。
银屑病的组织病理学主要表现为角质形成细胞过度增生、炎症细胞聚集和真皮乳头部血管增生扩张三大特征，从而出现角化过度、角化不全、颗
粒层消失、棘细胞层增厚等。尽管许多不同的动物模型能复制银屑病的某
个方面的病理特征，并能解释部分病因，但长期以来仍缺乏一种能够研究
所有有关的潜在因素的动物模型。即-缺乏理想的动物模型。
一、银屑病药效学动物模型
银屑病动物模型是根据银屑病的特征，人为建立的一种与之相似的模型。
有人总结了银屑病动物模型的建立过程，包括以下4个不断完善的阶段：
1．诱发性动物模型
该模型是通过工方法在动物，如豚鼠、大鼠等皮肤上诱发银屑病样增生。
其方法包括紫外线照射、化学刺激剂外涂或药物外涂、缺乏必须脂肪酸的饲料喂养等。这些方法均为过度增殖模型，可引起表皮增生加快。但这些方法仅是针对表皮损伤的一种迟发反应，持续时间较短。
改良型银屑病小鼠模型的建立
改良型银屑病小鼠模型的建立
银屑病是一种慢性免疫介导的皮肤疾病，它通常表现为皮肤表面一层薄薄的鳞屑，严
重影响患者的生活质量。在银屑病的病理生理过程中，炎症介质的释放和免疫细胞的活化
发挥着重要作用。建立一个良好的银屑病动物模型对于研究该疾病的发病机制和寻找新的
治疗方法是非常重要的。
在目前的学术界，关于银屑病模型的研究已经有了一些进展，但是现有的银屑病动物
模型仍然存在一些不足之处，需要进一步改进。本文将介绍一种改良型的银屑病小鼠模型
的建立方法，希望能为银屑病模型的研究和临床治疗提供新的思路。
我们需要选择合适的小鼠品系。在建立银屑病小鼠模型时，我们通常选择易患皮肤炎
症的小鼠品系，比如C57BL/6小鼠。这种小鼠品系具有较强的自身免疫性和皮肤局部炎症
反应，非常适合用于模拟银屑病的发病过程。
我们需要选择合适的诱导因子。目前常用的诱导因子包括免疫刺激剂、各种药物和细
菌等。我们可以选择一种或多种诱导因子来刺激小鼠皮肤，观察其对皮肤炎症反应的影响。在这里，我们选择使用Imiquimod（IMQ）来诱导小鼠模拟银屑病。IMQ是一种强力的TLR7激动剂，可以刺激皮肤炎症反应，并诱导银屑病样皮肤病变。我们还可以结合其他诱导因子，比如细菌菌株和不同的刺激剂来构建更加全面的银屑病小鼠模型。
接着，我们需要建立小鼠的银屑病评估指标。通常，我们可以通过观察小鼠的皮肤病
变程度、测量皮肤厚度、检测炎症细胞浸润和炎症介质的表达来评估银屑病的病理生理过程。我们还可以利用免疫组织化学染色、免疫荧光染色和分子生物学方法来进一步分析小
白疕方及其组成药物提取液对HaCaT细胞增殖的影响_陶春蓉
白疕软膏是成都中医药大学附属医院皮肤科治疗银屑病的外用院内中药制剂，因疗效显著、剌激性轻微、可长期使用，深受患者欢迎。本研究采用四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法检测白疕软膏处方（简称白疕方）提取液及白疕方主要组成药物大黄、黄柏、黄精、苦参提取液对角质形成细胞系HaCaT细胞增殖的影响。通过体外细胞培养探讨白疕软膏治疗银屑病的作用机理。1材料与方法
1.1细胞株及试剂细胞株：HaCaT细胞株来源于武汉大学中国典型培养物保藏中心，由四川大学华西基础与法医学院感染免疫研究室保存。主要试剂：DMEM培养基：Gibco公司。胎牛血清：Sigma公司。胰蛋白酶：Gibco公司。MTT：Sigma公司。二甲基亚砜（DMSO）：Sigma公司。
1.2药物制备
1.2.1白疕方提取液的制备（1）取白疕方药物52.5g（黄精15g除外），精密称定，粉碎，过80目筛；置具塞锥形瓶中，加8倍量70%乙醇超声提取2次，第1次提取30min，第2次提取20min；过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加4倍量水，冷藏24h。取上清液，残渣用水洗涤3次；合并洗液和滤液，3000r/min 离心10min，取上清液，减压回收溶剂至适量。（2）取黄精45g，精密称定，粉碎，过80目筛；置具塞锥形瓶中，加10倍量水煮提取2次，第1次提取45min，第2次提取30min；过滤，合并滤液，回收水至1∶1.2，加4倍量乙醇，冷藏24h。再反复处理2次，合并上清液，3000r/min离心10min，取上清液，回收乙醇至无醇味，减压回收溶剂至45mL。（3）取（1）项下全部样品和（2）项下样品15mL，合并，定容至67.5mL，即得白疕方提取液，药物质量浓度为1g/mL。
银屑病小鼠模型建立的新方法
银屑病小鼠模型建立的新方法
为了建立有效的银屑病小鼠模型，研究人员必须考虑许多因素，包括
使用合适的药物、犬类抗原蛋白、以及适当的配方。生物化学和遗传
学实验室应该采用全面的有关实验方法，以帮助在进行研究时选择合
适的抗体，以便在设计银屑病小鼠模型时满足抗氧化剂的分析要求。
1、药物：为了分析这些犬类抗原功能，使用的药物应当与银屑病相关，包括清炼类、抑制腈化学细胞和抗炎药物来促进健康小鼠血液中抗氧
化剂浓度的增加。另外，有些证据表明，尼古丁酸胺或其他促炎症药
物可能有助于控制银屑病的发生。
2、犬类抗原蛋白：在创建银屑病小鼠模型时，研究人员需要使用足够
强大的抗原蛋白，以便能够有效抵抗人类银屑病抗原蛋白。然而，使
用太强的抗原蛋白可能会导致免疫反应或过度的炎症反应，这会使小
鼠处于不健康或不适状态。
3、合适配方：在使用抗原蛋白以及药物时，还需要考虑采用合适的配方，比如对小鼠饲养后需要采取什么样的营养改善，以及处理过程中
需要做出哪些改变。比如，银屑病小鼠可能会失去体重，因此，有必
要使用高脂配方来补充营养。同时，考虑使用抗生素治疗，以预防小
鼠体内可能存在的细菌感染。
进行银屑病小鼠模型的实验时，应当密切关注这些因素，以确保小鼠处于良好的状态，从而达到可靠的结果。另外，研究人员还应当了解不同细胞类型的关键的炎症性变化，这些信息有助于精确控制小鼠炎症，从而建立有效的银屑病小鼠模型。
银屑病转基因动物模型研究进展
来越来越 多的研 究者致力 于通过 转基 因动物模 型来研 究银 屑病 的发病 机制及 开发 治疗银 屑病 的新 药 。本 文就 银屑病 转基 因动物模 型的研究进展进行综述 。
收 稿 １期 ：０ １— ７— ０， 回 日期 ：０ １— ９一 ６ ３ ２１ ０ ２ 修 ２ １ ０ Ｏ
基金项 目： 东莞市 高等 院校科研机构研发项 目（ ｏ２０ １８ ０ ０７ Ｎ ０ ８０ １１ ３ ） 作者简介 ： 王 娅 （ ９ ８一） １８ ，女 ， 硕士生 ， ｍａ ： ａｇａ５ ３ ２ Ｅ． ｉ ｗ ｎｙ０ ０ ＠１６ ｌ
多功 能生长因子 ， 属于转化生 长因子一 （ Ｇ － 家族成员 之 ｐ Ｔ Ｆ ）
一
，
在结构和功 能 方面 与 Ｔ Ｆ Ｂ相 似。Ｂ － 靶 细胞 上 Ｇ— ＭＰ６与
的受体结合后 产生各种 生物学活性 ， 其功能可能是引发终 末 分化 ， 干扰表皮 内环 境 的 自稳状 态 。为 了分 析 Ｂ 一 体 ＭＰ６在
中 国药 理 学 通报
Ｃ ｉ ｓ Ｐ ａｍ ｃｌ ｉ ｌ ｕｌｉ ２ １ ａ ；８ １ ：３— ｈｎ ｅ ｈ ｒ ａｏ ｇｃ ｌｔ ０ ２Ｊｎ２ （ ） １ ６ ｅ ｏ ａ Ｂ ｅｎ
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白疕软膏对豚鼠银屑病样模型影响的研究
杨川
1
陈明岭
1
陶春蓉
2
(1.成都中医药大学，四川成都610075;2.成都市第二人民医院，四川成都610061)
摘
要:目的:探讨白疕软膏治疗银屑病的药效及作用机理。方法:采用5%心得安乳剂建立豚鼠银
屑病样模型，观察白疕软膏对豚鼠银屑病样模型组织病理改变的影响;采用放射免疫法检测豚鼠银屑病样
模型皮损中细胞因子IL-2、IL-6、IL-8的水平，观察白疕软膏对豚鼠银屑病样模型皮损中细胞因子的影响。结果:白疕软膏对豚鼠银屑病样模型组织病理改变有治疗作用。结论:白疕软膏对豚鼠银屑病样模型的治疗作用机理可能是通过对角质形成细胞增殖的抑制及对细胞因子的调节而发挥作用。白疕软膏是治疗
银屑病的有效外用制剂，值得进一步研究和推广。
关键词:银屑病;白疕软膏;豚鼠银屑病样模型;角质形成细胞;细胞因子
中图分类号:R285.5;R758.63文献标识码:A 文章编号:1004-
0668(2011)01-0055-03基金项目:成都中医药大学科技发展基金资助项目
作者简介:杨川，男，1972年生，讲师，研究方向:中医外科学基础与临床;通讯作者:陈明岭，男，1967年生，教授，
研究方向:中医药防治皮肤病基础与临床。
Effect of Baibi Ointment to Psoriasis Guinea Pig Model
YANG Chuan ，CHEN Ming-ling ，TAO Chun-rong
(Chengdu University of Traditional Chinese Medicine ，Chengdu ，610075)
［Abstract ］Objective :The aim of this study is to investigate the effects and mechanisms of Baibi ointment for treating Psoriasis.Methods :5%propranolol emulsion was applied externally on the back of a guinea pig＇s ear to produce the poriasis-like der-matitis model to observe the effects of Baibi ointment on the histopathological changes of the model.Radioimmunoassay was used to ob-serve the levels of cytokines like IL-2、IL-6and IL-8，and the effects of the ointment to the cytokines.Results :Baibi ointment has therapeutical effects on the histopathological changes of the models of poriasis-like dermatitis in guinea pigs.The mechanism is proba-bly by inhibiting the multiplication of the Malpighian cell and regulating the cytokines.Thus ，Baibi ointment is an effective external preparation to treat psoriasis ，and is worthy of deeper reasearch and generalization.
［Key words ］:Psoriasis ;Baibi ointment ;psoriasis-like dermatitis models of guinea pig ;malpighian cell ;cytokine
银屑病是一种临床常见的病因不明的有特征性
红斑、丘疹及鳞屑的慢性复发性炎症性皮肤病。在其治疗过程中，外治占有相当重要的地位。白疕软膏是我院皮肤科治疗银屑病的外用院内中药制剂，疗效显著、剌激性轻微、可长期使用。本课题研究的目的拟通过豚鼠银屑病样模型及细胞培养，探讨白疕软膏治疗银屑病的疗效及作用机理。1材料与方法
1.1动物
健康成年豚鼠40只，体重350 400g ，雌雄不限，雌雄分养，由成都中医药大学实验动物中心提供。豚鼠标准颗粒饲料喂养，并每日供给足量新鲜蔬菜。40只豚鼠随机分成4组，每组10只。1组空白对照组，2组模型组，3组白疕软膏组，4组喜树碱软膏组。1.2
主要试剂及器材
成都中医药大学学报2011年第34卷
5%心得安乳剂:纯心得安粉剂，由西安制药厂提供;乳剂基质由成都市日用化工厂提供，取纯心得安粉剂加入乳剂基质中，并按同一方向随加随搅拌均匀均匀而成;白疕软膏由成都中医药大学药剂科配制;喜树碱软膏由成都鹤鸣山制药有限责任公司生产，药品批准文号:国药准字H20054000，生产批号:060304;AP280-123型包埋机购自德国MICROM公司，HM335E型切片机购自德国MI-CROM公司，XSZ-H型光学显微镜购自日本奥林巴斯公司;IL-2试剂盒购自北京福瑞生物工程公司; IL-6试剂盒购自北京福瑞生物工程公司;IL-8试剂盒购自北京福瑞生物工程公司。
1.3方法
1.3.1造模
将豚鼠适应性喂养3d后，将配制好的5%心得安乳剂均匀涂于2、3、4组豚鼠双侧耳廓背部，厚度约1.0mm，每日3次，连续2周。
1.3.2治疗
造模2周后，停止外涂5%心得安乳剂，开始治疗。空白组:治疗期间，正常饲养，不给予任何药物。模型组:治疗期间，正常饲养，不给予任何药物。白疕软膏组:双侧耳背外涂白疕软膏，每日1次，连续2周;喜树碱软膏组:双侧耳背外涂喜树碱软膏，每日1次，连续2周。
1.3.3检测指标:
(1)肉眼观察:包括一般情况和豚鼠双耳形态。
(2)豚鼠左耳组织病理学观察:用药2周后，手术切取各组豚鼠左侧耳部标本，置10%福尔马林溶液中固定，石蜡包埋，切片，常规HE染色，光镜下逐一观察耳部皮肤病理变化，参照Baker评分进行组织学积分评估。
(3)皮损IL-2测定:用药2周后，手术切取各组豚鼠右侧耳部标本，用生理盐水冲洗，除尽杂质，拭干，切取300 400mg，放入有1mL生理盐水的小试管内，以10000r/min匀浆两次，每次10sec，匀浆后以4ħ3000r/min离心10min，留取上清液，置于－20ħ冰箱保存备用。测定前冷水复融，4ħ3000r/min离心10min，取上清液，按试剂盒说明检测IL-2含量。皮损IL-6测定同上。皮损IL-8测定同上。
1.4统计学处理方法
采用SPSS12.0软件，实验测定数据均以均数ʃ标准差表示，采用单因素方差分析。
2结果2.1一般情况
造模1周后，除空白对照组外，2、3、4组实验动物均出现精神差，反应迟缓，搔抓耳廓，饮食减少，大、小便量减少，皮毛失去光泽，易脱落。造模2周后2、3、4组动物上述症状加重。空白对照组动物精神佳，反应灵敏，被毛密，有光泽，紧贴身体，饮食、二便正常。经治疗2周后3、4组实验动物精神明显好转，饮食增加，二便量增加，搔抓耳廓现象消失，3、4组皮毛脱落减少，但3组实验动物毛发呈青黑色，外观略显污秽，4组实验动物毛发恢复光泽，外观较清洁;2组实验动物上述症状无明显变化。
2.2豚鼠双耳形态
动物造模1周后，耳部涂药处毛发全部脱落，局部皮肤红肿，触之皮温高，并覆有少量细小银白色鳞屑，并见少许抓痕。2周后红肿有所减轻，鳞屑稍有增多，部分豚鼠耳廓出现糜烂面及结痂。空白对照组动物双耳毛发正常无脱落，局部皮肤无红肿，皮温不高。用药2周后3、4组红肿基本消失，鳞屑减少，糜烂面已愈合，见新生毛发。2组红肿、鳞屑无明显变化，仍有少许结痂，未见新生毛发。
2.3豚鼠左耳HE切片观察
空白对照组豚鼠耳廓皮肤可见菲薄的角质层，颗粒层1 3层，棘细胞层3 7层，呈多角形，基底层为单层柱状细胞，真表皮交界呈波浪形，真皮内有散在少量单一核细胞浸润。模型组见广泛角化过度及灶状角化不全，并见Munro微脓疡，颗粒层变薄或消失，棘层肥厚，表皮突延伸呈棒状，真皮乳头上伸杵状变，毛细血管扩展，血管周围可见较多单一核及多形核细胞浸润。治疗后角化过度减轻，角化不全消失，棘层变薄，表皮突延伸、乳突上伸、毛细血管扩展及炎症细胞均明显减轻，其组织学评分见表1。
表1治疗组与模型组组织学评分(珋xʃs)
组别n组织学评分
空白组100.65ʃ0.34
模型组10 6.20ʃ1.42＊
白疕软膏组10 2.70ʃ0.67▽▼
喜树碱软膏组10 3.00ʃ0.58▽
与空白组比较，P＜0.05，与模型组比较，P＜0.05，喜树碱组比较，P＞0.05
单因素方差分析结果表明，模型组与空白组组织学评分差异有显著性(P＜0.05)，说明造模是成功的，白疕软膏组、喜树碱组与模型组组织学评分差异有显著性(P＜0.)疕软膏组与喜树碱组
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