植物多倍体诱发及细胞学鉴定概要

合集下载

多倍体诱发与鉴定

4 冲洗：用70%酒精冲洗三次，保存在70%酒精中
备用。 5 解离：固定好的材料转入解离液中，解离10分钟。解离好的材料用蒸馏水冲洗2—3次。 6 染色：染色前一定要先将材料捣碎，染色时最好还要边捣边染，用改良石炭酸品红溶液染色10mih，使组织染色充分。 7 压片：盖上盖玻片后，用带橡皮头的铅笔轻轻敲打，使细胞均匀分散。 8 镜检：经镜检挑选染色体分散良好的细胞拍照。
四、实验方法（步骤1-4需课前准备好） 1 设置对照组：用清水培养大蒜3-5天，待根长至约0.5厘米长后再在室温下连续培养72小时，然后再放入4摄氏度的培养箱中24小时作取材前处理。 2 诱导物理法：用清水培养大蒜3-5天，待根长至约0.5厘米长时，分别放入0℃、4℃、8℃的培养箱中培养24小时取出，在室温条件下继续培养48小时，最后再放入4℃的培养箱中24小时作取材前处理。化学法：用清水培养大蒜3-5天，待根长至约0.5厘米长时转入 0.1%秋水仙素溶液中培养24小时取出，再转入清水中继续培养48小时，然后用0.1%秋水仙素溶液处理3小时作取材前处理，直到根尖膨大为止，诱导后细胞为多倍体细胞。 3 固定：切取已做好前处理的大蒜的膨大根尖，水洗后投入卡诺氏固定液中固定，固定时间以2小时为宜。
黑麦：观察根尖形态是否发生变化，若发生变化及时记录变化情况。
2、绘制显微镜下观察的二倍体和四倍体图像。
实验一、植物多倍体诱发与鉴定
一、实验目的 1、掌握人工诱导多倍体的原理，及其在遗传育种中的意义。
2、掌握用物理法（不同温度处理）和化学法（秋水
仙素）诱发多倍体的方法
二、实验材料：大蒜根尖（2n=16）
三、实验试剂： 70%酒精、0.1%秋水仙素、卡诺氏固定液（无水乙醇3份、冰乙酸1份混合配制即成）、解离液（95%乙醇3份、浓盐酸1份混合配制即成）、改良品红改良苯酚品红染液的配制：原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中（可长期保存）。原液B：取A液10毫升加入90毫升5%苯酚水溶液中(2周内使用)。原液C：取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。染色液：取C液10-20毫升，加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。配成的 10％～20％的石炭酸品红液，放置2周后使用，染色效果显著，该染色液的浓度可根据需要而变更，淡染或长时间染色可用 2～10％的浓度，浓染可用 30％浓度，再用 45％乙酸分色。（可普遍用于植物组织的压片法和涂片法，使用23年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用。如果没有山梨醇，也能染色，但效果稍差。实验用具：标签、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、培养皿、显微镜、试剂瓶、酒精灯、吸水纸、培养箱、带橡皮的铅笔。

豌豆多倍体诱导实验报告

一、实验目的1. 掌握化学诱导植物多倍体的原理和方法。

2. 学习利用秋水仙素诱导豌豆产生多倍体的实验操作。

3. 通过细胞学方法观察鉴定多倍体的特点，以及诱导染色体加倍后的细胞学表现。

二、实验原理1. 多倍体是指细胞中具有三个或三个以上染色体组的生物体。

在植物育种中，多倍体可以提高作物的经济性状，克服远缘杂交障碍等。

2. 秋水仙素是一种常用的化学诱导剂，能够抑制纺锤体的形成，导致染色体数目加倍，从而诱导植物产生多倍体。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：豌豆种子、秋水仙素、蒸馏水、培养皿、镊子、剪刀、显微镜等。

2. 实验仪器：电子天平、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜等。

四、实验步骤1. 种子处理：将豌豆种子浸泡在1%的氢氧化钠溶液中，室温下浸泡24小时，然后用蒸馏水冲洗干净。

2. 秋水仙素处理：将浸泡好的豌豆种子放入培养皿中，加入适量的秋水仙素溶液，使种子充分浸泡。

根据实验要求，调整秋水仙素浓度和浸泡时间。

3. 培养与观察：将处理过的豌豆种子放入恒温培养箱中，培养条件为温度25℃、光照12小时/天。

每隔一定时间观察种子发芽情况，记录数据。

4. 细胞学观察：选取长出的幼苗，用蒸馏水冲洗干净，取根尖分生组织区，制成临时装片。

5. 显微镜观察：在显微镜下观察细胞染色体的形态、数目等特征，分析多倍体诱导效果。

五、实验结果与分析1. 发芽情况：经过秋水仙素处理的豌豆种子，发芽率明显低于对照组。

随着秋水仙素浓度和浸泡时间的增加，发芽率逐渐降低。

2. 细胞学观察：在显微镜下观察发现，经秋水仙素处理的豌豆幼苗根尖分生组织区细胞染色体数目明显增多，部分细胞染色体数目为4倍体（二倍体细胞染色体数目为2倍）。

3. 多倍体诱导效果：秋水仙素处理对豌豆多倍体诱导效果明显，诱导出多倍体细胞。

六、实验结论1. 秋水仙素能够有效诱导豌豆产生多倍体。

2. 通过调整秋水仙素浓度和浸泡时间，可以控制豌豆多倍体诱导效果。

3. 细胞学观察结果表明，秋水仙素处理可以导致豌豆细胞染色体数目加倍，形成多倍体。

多倍体鉴定实验报告

一、实验目的1. 掌握化学诱导植物多倍体的原理和方法。

2. 学习利用秋水仙素诱导植物多倍体的一般方法及多倍体诱导在植物育种上的意义。

3. 学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点及诱导染色体加倍后的细胞学表现。

4. 利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。

二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的基本特征之一。

多倍体是指细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

在植物育种上，利用多倍体可以改良作物的经济性状，同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。

秋水仙素是一种常用的化学诱导剂，可以抑制细胞有丝分裂过程中纺锤体的形成，使子染色体不能移向两极，从而诱导植物产生多倍体。

在适宜浓度的秋水仙素作用下，细胞经一定时期后仍可恢复正常，继续分裂，只是染色体数目加倍成为多倍性细胞。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：大蒜根尖分生组织区2. 试剂：0.2%秋水仙素溶液、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、盐酸酒精溶液3. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、滴管、酒精灯、烧杯、剪刀、镊子、培养皿四、实验步骤1. 将大蒜根尖分生组织区剪取约0.5cm，放入装有0.2%秋水仙素溶液的培养皿中，处理48小时。

2. 将处理后的根尖用蒸馏水清洗3次，放入装有卡诺氏液的培养皿中固定30分钟。

3. 将固定后的根尖用蒸馏水清洗3次，放入装有盐酸酒精溶液的培养皿中解离10分钟。

4. 将解离后的根尖用蒸馏水清洗3次，放入装有改良苯酚品红染液的培养皿中染色10分钟。

5. 将染色后的根尖用蒸馏水清洗3次，制成临时装片。

6. 在显微镜下观察染色体的形态和数目，记录观察结果。

7. 将观察结果进行统计分析，判断多倍体诱导率。

五、实验结果与分析1. 实验结果在显微镜下观察，部分大蒜根尖细胞染色体数目加倍，形成多倍体细胞。

染色体数目加倍现象主要出现在有丝分裂中期。

2. 分析通过实验，我们成功利用秋水仙素诱导了大蒜根尖分生组织区的多倍体。

植物多倍体的诱发和鉴定

植物多倍体的诱发和鉴定一、实验目的通过实验，进一步了解人工诱导多倍体的原理，并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法及细胞学鉴定。

二、实验原理染色体是遗传物质的主要载体。

每一个物种都具有特定的形态特征。

各个物种细胞内染色体的数目都是相对恒定的，这是一个重要的生物学特征。

染色体数目和结构的改变，将会导致生物性状的改变。

遗传学中把二倍体生物配子中所具有的染色体成为一个染色体组，通常用n来表示。

而一个染色体组中包含的染色体数目成为染色体基数，用x表示。

同一个染色体组的各个染色体的形态、结构和连锁基因群都彼此不同，但它们构成一个完整而协调的体系。

细胞中染色体数目的变异类型有两类：整倍体变异和非整倍体变异。

整倍体变异指体细胞中染色体数目按染色体组的基数（x）成倍数增加或减少的现象。

具有两套染色体组的生物体成为二倍体，体细胞中含有三个或三个以上染色体组的整倍体为多倍体。

多倍体按其来源可以分为：同源多倍体和异源多倍体，同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体：异源多倍体是体细胞中含有两个以上不同类型染色体组的多倍体。

自然界中的多倍体主要存在于植物中，动物中的多倍体很少。

多倍体可以在自然条件卞产生，也可以人工诱导形成。

人工诱导多倍体通常采用物理方法和化学方法。

物理方法有高温、低温、超声波、嫁接和切断等，化学方法是使用秋水仙素、异生长素、蔡骈乙烷来诱导多倍体。

在诱导多倍体的方法中，以应用化学药剂更为有效，其中以秋水仙素效果最好，使用广泛。

秋水仙素阻碍有丝分裂中细胞纺锤体的形成，这样细胞不能分离，产生染色体加倍的核。

本实验用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖，待根尖膨人后制片观察，可诱发多倍体。

三、实验材料大蒜根尖四、实验方法与步骤（一）根尖多倍体的诱发将人蒜去掉老根，置于盛水的培养皿上，25°C条件卞培养发根，待不定根长出1cm时取出洗净，把水晾干后移到0.1%秋水仙素溶液中，根尖朝下，使根部浸没在药液中，于10°C 培养箱中低温培养，直到根尖膨大为止。

实验五植物多倍体的诱导和鉴定

五.作业
1.分别绘出2n=16和2n=32洋葱中期分裂相细胞。
2.阐述秋水仙素诱导植物细胞染色体数目加倍的机制。
四．步骤方法
4.保存液中取根尖，纯水漂洗2次，1mol/L盐酸60℃水解根
尖10分钟，再纯水漂洗2次
5.将两种根尖分别置于干净载玻片上，
均切下分生区，加一滴染液，用镊子捣碎根尖染色3-5分钟
四．步骤方法
6.加盖玻片，进行压片
7.显微观察
四．步骤方法
1.剥去洋葱干茎片，整理干净根盘，泡水3-4天 2.不定根长出约2cm，部分洋葱转入0.05%秋水仙素溶液处理2天 3.分别取经过秋水仙素溶液处理后膨大的根尖和不处理的根尖进行固定4-6h，95%酒精冲洗及70%酒精保存 4.保存液中取根尖，纯水漂洗2次，1mol/L盐酸60℃水解根尖10分钟，再纯水漂洗2次 5.将两种根尖分别置于干净载玻片上，均切下分生区，加一滴染液，用镊子捣碎根尖染色3-5分钟 6.加盖玻片，进行压片 7.显微观察
人工诱导多倍体也是培育植物新品种的主要途径之一。
4nx2n 3仙
郁金香
小麦
三．供试材料洋葱鳞茎
四．步骤方法
1.剥去洋葱干茎片，整理干净根盘，泡水3-4天 2.不定根长出约2cm，部分洋葱转入0.05%秋水仙素溶液处
理2 天
3.分别取经过秋水仙素溶液处理后膨大的根尖和不处理的根尖进行固定4-6h，95%酒精冲洗及70%酒精保存
实验五
一．目的要求
植物多倍体的诱导和鉴定
了解人工诱导多倍体植物的原理；学习使用秋水仙素诱发多倍体植物的方法；掌握鉴别植物多倍体的实验操作。
二．预备知识具有3个或以上基本染色体组的植物称为多
倍体植物。多倍体有同源多倍体和异源多倍体。人工诱导多倍体可以采用物理和化学药剂处理的方法进行操作。

植物多倍体诱导及其细胞学鉴定PPT课件

• X：基数，指一个染色体组内含有的染色体数目。 • n：配子中的染色体数目。
玉米： 2n=2X=20，X=10，n=10，n=X；普通小麦：2n=6X=42，X=7，n=21，n=3X 可见：n既可以等于X ，也可以是X的倍数。
3
染色体倍性
• 一倍体(monoploid)：体细胞中只具有一个染
导多倍体的有效方法。秋水仙素是从百合科秋水仙属植物秋水仙(Colchicum autumnale)
的有种剧子毒及，故器使官用中时提要取特出别来注的意一，种切生勿物使碱药，液其进分入子眼式内为或C2口2H中25N。O6，因秋水仙素诱导作用在于阻止有丝分裂细胞中纺锤丝的形成，而
对染色体的结构和复制无显著影响。若浓度适合，药剂在细胞中扩散后，不致发生严重的毒害，这样纵列为二的染色体不能向两极分开，因而便产生了染色体加倍的重组核。当药剂的作用消除后，由于多倍体细胞继续分裂，便得到多倍体组织，以后则产生新的多倍体植株。
9
４．固定将恢复后的种子从根尖顶端切下1cm长的幼根放入广口瓶中，以卡诺氏固定液 (Carnoy‘s Fluid) （冰醋酸：乙醇=1:3）进行固定2-24h后，保存于70%乙醇溶液中, 4℃ 冰箱保存。
5. 切取分生组织蒸馏水浸洗固定好的幼根两次，吸水纸吸净蒸馏水，置于载玻片上，切取乳白色分生组织1mm左右。
10. 观察多倍体细胞染色体的形态并统计其染色体数目。
10
六、实验结果与分析 1. 统计100个中期细胞，计算多倍体细胞的
出现率； 2. 绘制观察到的蚕豆二倍体、多倍体的中期
分裂相图。
11
12
注意事项
• 秋水仙素处理时间应根据供试材料的细胞周期而定，当处
理时间介于供试材料细胞周期的一倍到两倍之间时，可观察到细胞由二倍体变为四倍体，当处理时间多于供试材料细胞周期的两倍以上时，供试材料的细胞可从四倍体变为八倍体。因此，在培养多倍体细胞时，应注意用秋水仙素的处理时间；此外，秋水仙素的浓度对处理效果也有影响，应注意掌握。（蚕豆根尖在19℃条件下，一个细胞周期约为19.3小时）

园艺植物多倍体的诱导和鉴定李腾飞

园艺植物多倍体的诱导和鉴定中荷1001 李腾飞一、多倍体的诱导：物理方法温度骤变、机械创伤、辐射处理等都有可能诱发多倍体的产生。

化学方法主要是利用秋水仙素诱导多倍体。

生物方法：有性杂交获得多倍体组织培养获得多倍体1、秋水仙素诱导多倍体：秋水仙素是从百合科植物秋水仙的器官和种子中提取出来的一种剧毒的植物碱。

纯品为无色或淡黄色针状结晶，熔点155℃，有苦味，易溶于冷水、酒精、氯仿和甲醛。

通常用水或酒精作溶媒。

秋水仙素诱导多倍体的原理：秋水仙素与正在分裂的细胞接触后，可抑制微管的聚合过程，不能形成纺锤丝，使染色体无法分向两极，从而产生染色体加倍的核。

适宜浓度的秋水仙素溶液，能阻碍纺锤丝的形成，但对染色体结构无明显影响。

处理的细胞在一定时间内可恢复正常，重新进行分裂。

诱导方法：①浸渍法：可用溶液浸渍幼苗、新梢、插条、接穗、种子及球根类蔬菜、花卉等材料。

为避免蒸发，宜加盖，避光。

一般发芽种子处理数小时至3d或多至10d左右。

秋水仙碱能阻碍根系的发育，处理后要用清水洗净后再播种。

发芽种子的胚根，处理后往往受到抑制，发根较慢，为利于根的生长，可在药液中添加适当生长素。

处理插条、接穗一般1-2d。

处理幼苗时，为避免根系受害，可将盆钵架起来倒置，使茎端生长点浸入秋水仙碱溶液中。

②涂抹法把秋水仙碱按一定浓度配成乳剂，涂抹在幼苗或枝条的顶端，处理部位要适当遮盖，以减少蒸发和避免雨水冲洗。

③滴液法对较大植株的顶芽、腋芽处理时可采用此法。

常用的水溶液浓度为0.1%~0.4%，每日滴一至数次，反复处理数日，使溶液透过表皮渗入组织内部。

如溶液在上面停不住时，可将小片脱脂棉包裹幼芽，再滴加溶液，浸湿棉花。

④套罩法保留新梢的顶芽，除去顶芽下面的几片叶，套上一个防水的胶囊，内盛有含1%秋水仙碱的0.65%的琼脂，经24h即可去掉胶囊。

这种方法的优点是不需加甘油，可避免甘油引起药害。

⑤毛细管法将植株的顶芽、腋芽用脱脂棉或纱布包裹后，将脱脂棉与纱布的另一端浸在盛有秋水仙碱溶液的小瓶中，小瓶置于植株旁，利用毛细管吸水作用逐渐把芽浸透，此法一般多用于大植株上芽的处理。

实验五植物多倍体的诱导及细胞学鉴定

实验五植物多倍体的诱导及细胞学鉴定一、实验目的（1）掌握人工诱导多倍体的方法和技术，观察多倍体的特点及染色体加倍后的细胞学表现。

（2）了解染色体数目变异的鉴定方法二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，但在特定的条件下，染色体的数目变异可分为整倍体变异和非整倍体变异，以体细胞中的染色体数（2n）为基础增减了个别染色体就是非整倍体变异，如单体2n-1、缺体2n-2（1）、三体2n+1、双三体2n+1+1、四体2n+2（1）等。

以染色体组或组内染色体基数（x）为基础成倍地增减，这是整倍体变异，如一倍体x、二倍体2x、三倍体3x四倍体4x等。

三倍体以上的生物体统称多倍体。

多倍体又可分为同源多倍体和异源多倍体。

同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体，其增加的染色体组来自同一物种，一般是由二倍体的染色体直接加倍产生的。

异源多倍体是指增加的染色体组来自不同物种，一般是由不同种属间的杂交种通过染色体加倍而形成。

自然界有许多植物是多倍体，是变异发生的重要途径之一。

多倍体可自然发生，也可人工诱导。

人工诱导多倍体可以采用物理方法(如高温、低温和射线等处理)和化学方法(如秋水仙碱、植物激素等处理)。

其中，应用最广泛的是秋水仙碱处理。

秋水仙碱处理的有效质量浓度为0.1~4g/L，常用2g/L秋水仙碱溶液浸泡、涂抹或点滴等方式处理植物的分生组织。

不同植物材料的最适处理质量浓度和时间不同，需通过试验来确定。

多倍体的鉴定方法主要有细胞学鉴定和形态学鉴定。

细胞学鉴定是观测根尖、茎尖分生组织或花粉母细胞的染色体数目，是一种直接的鉴定方法；形态学鉴定是观测叶片气孔保卫细胞的大小及其叶绿体数目，花、果实、种子的形态，花粉粒的大小和姓等性状的变异，是一种间接的鉴定方法。

通常多倍体植物的气孔、花器、花粉种子，果实等明显变大，气孔数目减少而密度变稀，同源多倍体可形成部分畸形的不育花粉粒，育性有一定的降低。

三、实验材料洋葱（2n= 16）、小麦（ 2n= 42）、玉米（2n=40）、水稻（2n=24）、蚕豆（2n=12）等植物的种子均可作为实验材料。

实验二十一多倍体的人工诱发和鉴定

实验二十一多倍体的人工诱发和鉴定【实验目的】1、通过实验掌握诱导植物多倍体的方法和技术，观察多倍体的特点及染色体加倍后的细胞学表现；2、学习植物材料的固定方法和常规压片技术；3、利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。

【实验原理】各种生物细胞中的染色体数目一般是恒定的，在自然因素和人工诱变因素（物理的、化学的）作用下，生物体细胞中的染色体数目也会发生变异，从而导致生物性状、育性、生活力等一系列改变。

多倍体是指具有了三套或三套以上完整染色体组的个体，分为三类。

同源多倍体（autoploid）：是指增加的染色体组来自同一物种（如水稻的同源三倍体、同源四倍体等）。

异源多倍体：是指增加的染色体组来自不同的物种（如普通栽培小麦）。

同源异源多倍体；是指使异源多倍体的染色体数再加倍所得个体，如人工合成的八倍体小粒野生稻。

自然发生多倍体的概率很低，如水稻中发生同源三倍体的频率为1/50000~1/30000。

利用一些诱发因素可以人工诱变植物产生多倍体，这些因素包括物理的温度剧变、机械损伤、各种射线处理等，还有化学因素，如植物碱、麻醉剂、植物生长激素等处理方法。

其中，秋水仙素（colchicine）是诱导多倍体形成最为有效和常用的药品之一。

它是从百合科植物秋水仙属秋水仙（Colchicum autumnale）的种子和鳞茎中提炼出来的一种植物碱，对植物种子、幼芽、花蕾、花粉、嫩枝等都可产生诱变作用，其分子式C22H25NO6。

商品秋水仙素为淡黄色粉末，易溶于冷水、酒精、氯仿和甲醛，但在热水中溶解度较低，不易溶于苯和乙醚。

毒性极强，可导致眼睛暂时失明及使中枢神经系统麻痹而导致呼吸困难。

使用时要注意安全并需做好药品管理工作。

一般认为，秋水仙素的主要作用是抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体不能向两极移动而被阻止在中期，染色体数目加倍，当秋水仙素处理停止后，细胞继续分裂，就形成多倍体的组织。

若多倍体组织分化产生的是性细胞，则所产生的配子也是多倍性的，因而可以通过有性生殖途径把多倍体特性遗传下去。

植物多倍体诱发和鉴定

实验材料、器具与试剂
（一）实验材料
洋葱根尖，大蒜（Aillum sativum）根尖
（二）实验器具显微镜、培养箱、恒温水浴锅、温度计、镊子、刀片、载玻片、
盖玻片、烧杯、 1.5ml离心管、滴瓶、玻片、大培养皿、吸水纸、铅笔、移液枪。（三）药品试剂
卡诺氏固定液（无水乙醇3份，冰醋酸1份）、改良苯酚品红染色液、1N HCl、45%醋酸。
• 2.你观察到的被鉴定物种的染色体数目是多少？处理后得到了哪些染色体数目变异类型的细胞？
实验方法
（五）染色、压片将解离后的根尖用蒸馏水冲洗后，放入45%醋酸中软化5min左右，制片时，取一根尖放在洁净的载玻片上，用刀片切取1mm左右的生长区，其余部分弃掉，滴加改良苯酚品红染色液染色15分钟左右。用刀片在材料的上方轻压几下，使生长区的细胞分散开来，再将多余的染料用吸水纸吸走，加盖玻片。用铅笔上的橡皮头敲击根尖部位，重复几次，力一次比一次大，以盖玻片不破裂为准。
植物多倍体诱发和鉴定
实验目的
•1.了解人工诱导多倍体的原理
•2.学习用秋水仙碱诱发多倍体植物的方法
二、实验原理
秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂，它的主要作用是抑制纺锤丝微管的形成，因而抑制了染色体移向两极的运动，使细胞停滞在中期状态而不能分裂成二个新的子细胞，而秋水仙碱对染色体结构并无明显的影响，对细胞也不产生严重毒害，细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常生长分裂，因而出现细胞含有多个染色体组的情况，亦即构成了多倍体细胞。如果用秋水仙素处理植物的根尖，则在根尖分生区内可检测到大量染色体加倍的细胞
实验方法
（一）材料准备选取大蒜瓣去皮，用透明
胶带固定放在盛有清水的培养皿中，使根部与清水接触，在 20～25℃光照条件下培养2 天左右。待根尖长到0.5～1cm时，将清水换成含0.1%秋水仙素的水溶液中，置阴暗处培养1～2天，至根尖膨大为止。

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计

不同植物同源多倍体的诱发与鉴定实验设计实验设计：诱发和鉴定不同植物同源多倍体的实验设计主要包括以下几个步骤：准备材料、诱发多倍体、鉴定多倍体。

一、准备材料1. 植物种子或试管苗：选择需要研究的植物种子或试管苗作为实验材料。

2. 培养基：根据植物的需求配制适宜的培养基，通常包括基本培养基、诱导培养基等。

3. 生长室：提供适宜的光照、温度和湿度条件以促进植物生长。

二、诱发多倍体多倍体的诱导通常通过植物组织培养技术实现。

1. 无菌处理：将植物种子或试管苗表面进行消毒处理，以去除外源菌。

2. 初代培养：将消毒后的种子或试管苗分别接种到适宜的基本培养基上，培养至生长健壮的愈伤组织形成。

3. 诱导多倍体：将愈伤组织转移到适宜的诱导培养基上，添加适当的植物生长调节剂（如激素和抗生素），促使植物细胞发生有丝分裂异常或无丝分裂，从而诱导多倍体形成。

4. 多倍体分化：将诱导成功的多倍体组织进行分化培养，使其分化为正常形态的植株。

三、鉴定多倍体鉴定多倍体可以通过形态学观察、流式细胞术和染色体分析等方法进行。

1. 形态学观察：对诱导得到的植株进行形态学特征的观察，如株高、叶片大小和形状等与对照（二倍体）进行比较，多倍体往往具有较大的特征。

2. 流式细胞术：通过流式细胞仪对植物细胞进行染色体数量的测定，多倍体的染色体数量通常是对照的两倍或多倍。

3. 染色体分析：通过染色体制备和染色，使用显微镜观察染色体数量和形状，根据染色体的形态、大小和数量来判定多倍体。

四、数据统计与分析根据实验结果进行数据统计和分析，可以计算出多倍体的诱导率和鉴定率，并与对照进行比较分析，以评估实验的效果和可靠性。

总结：诱发和鉴定不同植物同源多倍体的实验设计主要包括准备材料、诱发多倍体和鉴定多倍体三个步骤。

在进行实验前，需要准备好实验所需材料和环境条件，包括植物种子、培养基和生长室等。

实验过程中，通过植物组织培养技术诱导多倍体的形成，并使用形态学观察、流式细胞术和染色体分析等方法对多倍体进行鉴定。

实验六植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定

实验六植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定实验六植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定实验六植物多倍体诱导和细胞学鉴定一、实验目的通过实验掌握植物多倍体的方法和技术，观察多倍体的特点和染色体加倍后的细胞学表现。

染色体分析用于准确判断多倍体细胞。

2、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的基本特征之一。

多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

自然界中有许多植物是多倍体，也是变异发生的重要途径之一。

多倍体在形态较二倍体植物个体大，叶片上的气孔也很大，较易辩认。

多倍体研究在育种具有重要的意义。

利用一些诱发因素可以人工诱导植物产生多倍体。

这些因素包括物理的因素、化学因素等。

其中最为有效是化学药品是秋水仙素，秋水仙素colchicine（c22h25o6n）是1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。

能够抑制细胞有丝分裂时形成的纺锤体，染色体虽然完成了复制，但是不能形成两个子细胞，因而使染色体的数目加倍。

含加倍的染色体的体细胞再分裂出来的子细胞，染色体数目都比原来的体细胞增加了一倍，就形成了一个多倍体植株。

三、实验试剂和用具秋水仙碱：浓度分别为0.02%、0.05%、0.1%。

卡诺固定液：3份95％酒精与1份冰醋酸配制而成。

龙胆紫溶液：将0.5g龙胆紫溶解于100ml和2%醋酸溶液中，制备0.5%龙胆紫溶液。

乙酸品红溶液：将1g品红与100ml冰醋酸混合，煮沸。

煮沸时，加入一颗生锈的钉子。

1%醋酸品红染料中加入少量铁，可提高染色效果。

搪瓷盘、镊子、剪刀、烧杯、培养皿、恒温水浴锅、纱布、试管。

四、实验材料促进发芽的玉米种子、幼苗等。

5、实验方法（一）玉米种子的处理和检测（1）玉米种子处理：浸种发芽的水稻种子秋水仙碱浓度分别为0.02%、0.05%和0.1%，浸种时间分别为12h、24h和48h。

浸泡后，用蒸馏水冲洗三次，并在皮氏培养皿中继续培养一周。

（2）、多倍体检测：剪取根尖（或胚芽）2-3mm,投入盛有10%hcl的培养皿中解离10min，再清水漂系2次。

植物的多倍体诱导及其观察实验报告

植物多倍体的诱导及其鉴定一、实验目的1、通过实验，掌握化学诱导植物多倍体的原理以及方法，学习利用秋水仙素诱导植物多倍体的一般方法及多倍体诱导在植物育种上的意义。

2.学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点以及诱导染色体加倍后的细胞学表现，利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。

二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的基本特征之一。

多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

在植物育种上，利用多倍体可以改良作物的经济性状，同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。

利用一些化学因素诱导植物产生多倍体，秋水仙素是诱导多倍体形成最有效和常用的药品之一，利用秋水仙素处理正在进行有丝分裂的细胞，可以抑制纺锤丝的形成，使细胞有丝分裂中期纺锤丝断裂或纺锤体形成受抑制，有丝分裂后期，复制的染色体无法移向两级，细胞内的染色体加倍，形成多倍体。

因此在适宜浓度的秋水仙素作用下，它既可以有效的阻止纺锤体的形成，又不至于对细胞发生较大的毒害，因此，细胞经一定时期后仍可恢复正常，继续分裂，只是染色体数目加倍成为多倍性细胞，并在此基础上进一步发育成为多倍体植物。

将秋水仙素处理的植物根尖，制成临时装片，利用显微镜观察根尖分生区细胞中的染色体数目而确定是否形成染色体。

三、实验材料、器具及试剂1、实验材料：发芽的蚕豆，蚕豆幼苗2、实验器具：显微镜、解剖针、小试管、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、试管、培养皿、烧杯。

3、实验试剂：秋水仙素： 0.1%浓度。

卡诺固定液：3份95％酒精与1份冰醋酸配制而成。

1mol/l盐酸，45%醋酸，改良苯酚品红，70%酒精。

四、实验步骤1、取材：将种子消毒，并于无菌水中浸泡24小时后，将蚕豆种子（2n=16）培养在培养皿内的湿滤纸上，室温或28℃发芽，待胚根长达1~2cm时，取出萌发的种子，用自来水洗2~3次，备用。

2、预处理：将胚根长到1~2cm的蚕豆种子移到盛有0.1%秋水仙素的润湿的的吸水纸的培养皿内，室温下处理48h,待观察到根部有膨大时取出固定，与在水中进行培养的蚕豆种子（一般植物生长周期为17~18h）做对照。

植物多倍体的诱发与鉴定实验报告

植物多倍体的诱发与鉴定实验报告下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!实验报告：植物多倍体的诱发与鉴定一、实验目的：1. 掌握植物多倍体的诱发方法。

实验十三植物多倍体诱发与鉴定

3.细胞学观察
• 用根尖压片法制成染色体玻片标本，在显微镜下认真观察和染色体计数，与对照进行对比。
• 洋葱根尖细胞染色体（染色体加倍）
• 洋葱根尖细胞染色体（正常二倍体细胞）
六、作业及思考题
• 1.与对照植物相比，处理后的多倍体植物有哪些不同特征？
• 2.你观察到的被鉴定物种的染色体数目是多少？处理后得到了哪些染色体数目变异类型的细胞？
• 2.药品试剂：秋水仙碱、改良品红染色液、无水酒精、冰醋酸、1N盐酸。
五、实验步骤
1.多倍体的诱发
• 可处理萌动种子，幼苗或植株生长点，浓度以0.01～0.4%为宜；在以实验室观察为目的的情况下，可以处理根尖。
2.植株形态特征的观察
• 整个植株、或组织、器官、细胞都可以看到增大，其中气孔，保卫细胞表现尤为明显。
三、实验材料
• 洋葱(Allium cepa,2n=16)、蚕豆(Vicia faba,2n=12)、西瓜(Citrullus vulgaris ,2n=22) 等作物的种子、根尖、花蕾或幼苗。
四、实验用具药品
• 1.用具：显微镜、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、刀片、解剖针、纱布、吸水纸等。
实验十三植物多倍体诱发和鉴定
一、实验目的
• 了解人工诱导多倍体的原理，学习用秋水仙碱诱发多倍体植物的方法，学习识别多倍体植物的形态特征及其细胞学特点。
二、实验原理
• 秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂，它的主要作用是抑制纺锤丝微管的形成，因而抑制了染色体移向两极的运动，使细胞停滞在中期状态而不能分裂成二个新的子细胞，而秋水仙碱对染色体结构并无明显的影响，对细胞也不产生严重毒害，细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常生长分裂，因而出现细胞含有多个染色体组的情况，亦即构成了多倍体细胞。如果用秋水仙素处理植物的根尖，则在根尖分生区内可检测到大量染色体加倍的细胞，若处理植物幼苗的芽，则可以得到染色体加倍的植株。

多倍体诱发及细胞学鉴定

姓名系年级学号日期科目遗传学实验题目多倍体诱发及细胞学鉴定多倍体诱发及细胞学鉴定摘要：细胞中的一组非同源染色体，它们在形态和功能上各不相同，但是携带着控制一种生物生长发育、遗传和变异的全部信息，这样的一组染色体，叫做一个染色体组。

一个染色体组内每个染色体的形态和功能各不相同，但又互相协调，共同控制生物的生长、发育、遗传和变异。

本次实验意在了解人工诱发多倍体植物的原理、方法、技术及其在植物育种上的意义，并且能够利用染色体分析的方法对多倍体细胞做出准确鉴定。

秋水仙素可抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体不走向两极而被阻止在分裂中期，这样细胞不能继续分裂，从而产生染色体数目加倍的核。

本次实验通过秋水仙素的诱导，我们从大蒜根尖分生区细胞中成功观察到了四倍体，甚至八倍体的细胞核。

引言多倍体的形成有2种方式，一种是本身由于某种未知原因，染色体复制之后细胞不随之分裂，结果细胞中染色体成倍增加，形成同源多倍体（autopolyploid）；另一种是由不同物种杂交产生的多倍体，称为异源多倍体（allopolyploid）。

通过实验，可以人为地培育出同源多倍体植株。

除了自然界存在的多倍体物种之外，又可采用高温、低温X射线照射、嫁接和切断等物理方法人工诱发多倍体植物。

在诱发多倍体方法中，以应用化学药剂最为有效。

如秋水仙素、萘嵌戊烷，异生长素和富民农等，都可诱发多倍体，其中以秋水仙素效果最好，使用最为广泛。

细胞核内染色体组加倍以后，常带来一些形态和生理上的变化，如巨大性，抗逆性增强等。

一般多倍体细胞的体积，气孔保卫细胞都比二倍体大，叶子、果实、花和种子的大小也随加倍而递增。

从内部代谢来看，由于基因剂量加大，一些生理生化过程也随之加强，某些代谢物的产量比二倍体增多。

多倍体已成功地应用于植物育种，用人工方法诱导的多倍体，可以得到一般二倍体所没有的优良经济性状，如粒大、穗长、抗病性强等。

由于多倍体植物带有巨大性，不育性、代谢物增多和抗逆性加强等特点，给生产、生活带来了很大的经济价值。

植物多倍体的诱发与鉴定

植物多倍体的诱发与鉴定张延杰山东大学生命科学学院09级四班200900140178摘要通过对大蒜根尖的秋水仙素处理，将根尖进行多倍体诱导，了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。

初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的实验技术和多倍体的鉴定方法。

引言多倍体广泛地存在于植物界，目前已知被子植物中有三分之一以上的物种是多倍体，如普通小麦是异源六倍体，棉花是四倍体，此外还有烟草等，这些部是自然界存在的多倍体。

多倍体产生的途径除自然发生外。

也可以采用高温、低温、嫁接、切断和射线处理等物理方法和化学药剂处理方法，在这些方法中以化学药剂处理最为有效，如秋水仙素，萘嵌戊烷、异生长素、植物激素、富民隆等，都可诱发多倍体，其中应用最广泛、效果最好的是秋水仙素。

秋水仙素是由百合科秋水仙属的秋种番红花一一秋水仙素(Colchicum autumnale)的种子和器官中提炼出来的一种生物碱。

化学分子式为。

它具有麻醉作用，对植物的种子、幼芽、花蕾、花粉、嫩枝等可产生诱变作用，它的作用机理是抑制细胞分裂时纺缍体的形成，使复制后的染色体不能拉向两极，细胞不能继续分裂形成两个子细胞，从而导致染色体加倍，形成多倍体细胞，在此基础上进一步发育成多倍体植物，多倍体植物可以通过有性繁殖进行繁殖下去。

用人工方法诱导的多倍体，可以得到一般二倍体没有的优良性状，如大粒、大穗、内含物量增加、抗病性强等。

人工培育的三倍体西瓜、三倍体甜菜、八倍体小黑麦已在生严上厂泛应用。

对多倍体的鉴定，除了检查染色体数目变化外，形态特征的变异也是一个重要方面。

多倍体植物的气孔、花器、花粉粒、种子、果实等部分明显变大，气孔数目减少而密度变稀，同源多倍体育性有一定的降低，所以同源多倍体中有部分畸形的不育花粉粒。

实验材料：1、活体材料大蒜。

2、实验器具显微镜、剪刀、培养皿、载玻片、盖玻片、吸水纸、培养箱、镊子、解剖镜、镊子、解剖针、培养皿等。

3、药品改良苯酚品红染液、固定液、1mol／L HCl、冰醋酸、无水乙醇、医用乙醇（75%）等。