针康法对脑缺血大鼠Caspase-3mRNA和蛋白表达的影响

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甲钴胺对大鼠缺血-再灌注损伤神经细胞凋亡及Caspase-3 mRNA表达的影响

甲钴胺对大鼠缺血-再灌注损伤神经细胞凋亡及Caspase-3mRNA表达的影响∗苏建华;陈玉芳;唐金荣;丁新生;肖杭【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2016(35)6【摘要】Objective To investigate the effects of methycobal on the expression of Caspase-3 in brain tissue after cerebral ischemia reperfusion in rats. Methods Rats were randomly divided into sham-operation group, model control group, nimodipine group and low-dose methycobal group, high-dose methycobal group(n=30 in each group).Rats in the sham-operation group and model control group were administered intragastrically with 0.9% sodium chloride solution, rats in the nimodipine group were treated with 1 mg . kg-1 . d-1 of nimodipine, rats in the low- and high-dose of methycobal groups were given 50 and 100 μg.kg-1 .d-1 of methycobal, respectively. The rat model of cerebral ischemia reperfusion was established by middle cerebral artery occlusion with suture method for 3 h.Neurological deficit scores were evaluated 24 h after reperfusion.The apoptosis of perifocal cortex cells was detected by TUNEL method and the expression of Caspase-3 was analyzed by RT-PCR 6, 12 and 24 h after reperfusion. Results Neurological deficit scores in model control group, nimodipine group, low-dose methycobal group and high-dose methycobal group were 2.70±0.52, 1.30±0.51, 2.20±0.75 and 1.30±0.81,pared with model control group, neurological deficit scores were significantly different in the nimodipine group, low-dose methycobal group and high-dose methycobal group(P<0.05 orP<0.01).There were no significant differences between the high-dose methycobal group and nimodipine group ( P>0. 05 ) . There was a significant difference between the high-dose methycobal group and low-dose methycobal group( P<0. 05 ) . The results of apoptosis by TUNEL were as follows: compared with model control group, the apoptosis decreased obvsiouly in the nimodipine group, low-dose methycobal group, and high-dose methycobal group at each time point.There was significant difference between the high-dose methycobal group and nimodipine group at the end of the 24th hours (P<0.01).Compared with low-dose methycobal group, there were significant differences in the high-dose methycobal group at the end of 6th, 12th and 24th hours(P<0.01 or P<0.05).The results of RT-PCR were as follows: there was expression of caspase-3 mRNA in the perifocal cortex of all groups, with weak expression in the sham-operation pared with the sham-operation group, the expression of caspase-3 mRNA was increased significantly in the model control group(P<0.01).The expression of caspase-3 mRNA was reduced significantly in the nimodipine group, the low-dose methycobal group and high-dose methycobal group as compared with model control group at each time point( P<0.05 or P<0.01) , but it was not significantly different in the low-dose methycobal group and high-dose methycobal group as compared with that of the nimodipine group(P>0.05).There weresignificant differences between the high-dose methycobal group and low-dose methycobal group at the end of 24 h(P<0.05). Conclusion Methycobal can protect the brain cells from injury after cerebral ischemia reperfusion by adjusting the expression of Caspase-3m RNA, and the high-dose methycobal is more effective.%目的：探讨甲钴胺对缺血-再灌注大鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3( Caspase-3) mRNA表达的影响。

运动干预调控缺血性脑卒中细胞凋亡的研究进展

运动干预调控缺血性脑卒中细胞凋亡的研究进展作者：杨灵超刘雪晴赵莉娟裴奇王念宏来源：《上海医药》2024年第11期摘要缺血性脑卒中后细胞凋亡是神经损伤和肢体功能障碍的重要原因，而改善缺血性脑卒中损伤的关键靶点之一是调控脑缺血半影区的细胞凋亡。

近年来许多研究发现运动疗法在调控细胞凋亡方面有积极作用，且该疗法在临床上应用广泛。

本文对运动干预脑缺血后细胞凋亡的相关研究进展进行综述。

关键词缺血性脑卒中细胞凋亡运动干预中图分类号：R455； R743.33 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2024）11-0078-06引用本文杨灵超，刘雪晴，赵莉娟，等. 运动干预调控缺血性脑卒中细胞凋亡的研究进展[J]. 上海医药， 2024， 45（11）： 78-83.基金项目：国家自然科学基金资助项目（82174496、82374574）；国家中医药管理局国家临床研究基地专项科研课题（JDZX201923、JDZX201915）Progress of exercise intervention in regulating apoptosis in ischaemic strokeYANG Lingchao1，2， LIU Xueqing1， ZHAO Lijuan2，3， PEI Qi1，2， WANG Nianhong1，2，3（1. Shanghai University of Sport， Shanghai 200438， China； 2. Department of Rehabilitation Medicine， Huashan Hospital， Fudan University， Shanghai 200040， China； 3. Shanghai University of Traditional Chinese Medicine， Shanghai 201203， China）ABSTRACT Apoptosis serves as a significant contributor to neurological damage and limb dysfunction following ischemic stroke. Regulating apoptosis within the ischemic penumbra represents a pivotal therapeutic target for mitigating the sequelae of this condition. Recently， numerous studies have elucidated the positive impact of exercise therapy on modulating apoptosis， leading to its widespread adoption in clinical practice. This article aims to comprehensively review the progress in research pertaining to the exercise-based intervention for apoptosis following ischemic stroke.KEY WORDS ischemic stroke； apoptosis； exercise intervention細胞凋亡是维持细胞稳态的自然过程，是受基因调控或外界刺激情况下，激活凋亡相关因子消除衰老和异常细胞发生的程序性死亡，该过程异常或过度激活将引起靶器官损伤[1]。

苯甲酸雌二醇对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用及对caspase-3蛋白表达的影响

ｔｎｉｏｒｍａｏｙｍａｏｐｒｉｔｎｔｉｌｉｒｌｔｎＪ．Ｊｒｓｔｎｆｏｐｒｘｓｌｔｅｓｓｔｒａｂｉａｉ［］ＡｍａｉｅａｆｌｏＣａｄｏ，０８１２５：７．ｒｉｌ０，０（）３２５
已有研究发现长期饮酒患者的ＨＶ、压力感受器敏感性下Ｒ降，这些指标与心脏不良事件相关。急性饮酒对健康人群以及动
后两组叉分为再灌注６、２、４、７，每组８。４ｈ８ｈｈ２ｈ只１实验动物模型制备：正常组，不做任何处理；Ｉ组只通过．２Ｒ升压装置提高前房眼压制备缺血再灌注模型；（：Ｉ处理组Ｅ＋Ｒ）
毒。电解质紊乱能影响细胞膜稳定性，产生异位冲动。引起心律
失常。
由于本研究观察样本少，未观察到饮酒后发生心房纤颤以及
Ｄｐｎ，０，９１：．ｅｅｄ０７（）２８２
【】ＧｅｒｅＡ，ｉｕｒｄＭ．ｃｈｌｎｒｙｈａ：ｏｒｈｎｉｅ５ｏｇＦｇｅｅｏＶＡｌｏｄａｒｔｍｉａｃｍｐｅｅｓｖｏａｈｓ
【摘要】目的：探讨外源性雌激素对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。方法：取７只雄性Ｓ２Ｄ大鼠随机分为正常组，缺血
再灌注组（Ｒ），苯甲酸雌二醇处理组（ＩＩＥ＋Ｒ）。其中后两组又分为再灌注后６ｈ４ｈ８ｈ２ｈ（、２、４，７组每组８）。对视网膜进行只

针刺对脑缺血损伤大鼠海马区Caspase-3蛋白表达的影响

马惠芳，林彩霞，秀君，娅，任图郭长青，王朝阳
（京中医药大学，京ｌ０２）北北００９摘要：目的：察针刺对脑缺血损伤大鼠大脑海马区Ｃｓａｅ观ａｐｓ一３蛋白表达及神经行为学的影响。方
法：雄性ｓＤ大鼠，随机分为空白对照组、脑缺血模型组、刺治疗组，组ｌ，用化学刺激诱导血栓针每０只采
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血中的治疗作用研究［］中华医学杂志，０，（５：５一Ｏ０Ｊ．２６８１）１７ｌ６０６０
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收稿日期：０８０７２０ —１ —２
针刺对脑缺血损伤大鼠海马区Ｃｓａｅａｐｓ一３蛋达的影响白表
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［］谭新杰，７胡长林．氧诱导因子一ｌ基因在成年大鼠局灶性脑缺缺ａ
嘶ｓ０［］ＴｉｇＪ．ＩＭｌｄｙ舶凼０［］ｓ３咖
，０ｌ７３５３０２０，： — ５４

电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的研究进展

电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的研究进展（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目前，电针对脑缺血模型大鼠海马细胞影响的研究报道很多，对海马与学习记忆关系的研究已成为国内研究的重点。

本文就电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的研究作简要综述。

【关键词】电针海马物质海马的生理功能目前仍在探讨之中.大量的动物模型研究表明，海马与学习记忆有关。

当脑缺血等致海马受损时，可引起学习记忆功能的严重障碍。

电针刺特定穴位可影响脑功能障碍大鼠海马物质的表达。

现就目前电针对脑功能障碍大鼠海马物质影响的研究作一综述。

1 电针对海马细胞凋亡相关蛋白表达的影响1.1 Bcl2是功能最为明确的细胞凋亡拮抗基因Bcl2蛋白基本生物学功能为延长细胞的生命期限、增加细胞对多种凋亡刺激因素的抗性。

Bax与Bcl2作用相反，能够促进凋亡，Bcl2表达水平较高时，形成Bcl2／Bcl2同源二聚体，抑制细胞凋亡；Bax表达水平较高时，形成Bax／Bax同源二聚体，加速细胞凋亡；Bcl2和Bax水平相当时，则形成Bcl2／Bax异源二聚体，终止细胞凋亡。

近年的研究提示Bcl2与Bax调节细胞凋亡，不仅取决于自身表达的高低，还与Bax／Bcl2比率有关，当比率增大时，细胞趋于凋亡［1］。

caspase3激活是触发凋亡的关键(有“分子开关”之称)，是凋亡的最终执行蛋白。

Bc12家族基因在调节线粒体通透性上发挥重要作用，Bcl2或其他抗凋亡Bcl2家族成员下调，或促凋亡Bcl2家族成员如Bax在线粒体膜上过度表达和移位，均导致线粒体通透性增加，使细胞色素C 从线粒体释放入胞浆，与Apaf1、dADP形成复合体，再与胞浆中的caspase9前体形成凋亡小体，导致caspase9被裂解激活，随后再裂解caspase家族其他成员包括caspase3，引发凋亡。

赵建新等［2］报告电针刺激脑缺血小鼠“肾俞”“膈腧”“百会”，各观察时点均可上调小鼠海马细胞Bc12表达，下调Bax表达，降低凋亡率。

眼针疗法对脑缺血再灌注大鼠脑源性神经营养因子表达的影响

眼针疗法对脑缺血再灌注大鼠脑源性神经营养因子表达的影响高原;王哲;王健;于丹;王守岩;孙宏伟;张立德;关洪全【摘要】Objective:To observe the effects of eye acupuncture on brain-deprived neurotrophic factor (BDNF)expression in the cerebral cortex of rats after ischemia-reperfusion injury,in order to investigate the therapeutic function of eye acupuncture against cerebral ischemia-reperfusion injury. Methods:Rats established by suture method were randomly divided into the control group ,the sham operation group, the model group and the eye acupuncture group. After reperfusion 24h,the neurophysical behaviours were accessed by ZeaLonga neurophysical impairment marks ; the expression of ischemic cerebral cortex BDNF mRNA was measured by RT-PCR method; the expression of ischemic cerebral cortex BDNF protein was detected by immunohistochemistry and Western blot technology. Results:After reperfusion 24h,compared with the model group,the neurologic impairment marks of the eyeacupuncture group were decreased obviously; The expressions of BDNF mRNA and protein in rat cerebral cortex after the eye acupuncture therapy were obviously decreased. Conclusion:The eye acupuncture therapy can induce the expression of BDNF in rat cerebral cortex with ischemia-reperfusion injury. It is beneficial for protection of brain neurons.%目的观察眼针疗法对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨眼针在脑缺血再灌注损伤中的治疗作用.方法线栓法制备SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)再灌注模型.将SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、眼针组.于再灌注24h后采用ZeaLonga评分法进行大鼠神经功能评分;采用实时定量PCR方法检测缺血脑皮质BDNF mRNA的表达;采用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法检测缺血脑皮质BDNF的表达.结果缺血再灌注24h后,眼针组大鼠神经行为评分显著低于模型组;眼针组大鼠脑皮质BDNF mRNA的表达和蛋白的表达较模型组均有明显减少.结论眼针疗法能诱导大鼠缺血再灌注后脑皮质BDNF表达水平,有利于缺血再灌注损伤后神经元损伤的保护.【期刊名称】《中国中医急症》【年(卷),期】2011(020)006【总页数】3页(P904-905,919)【关键词】缺血再灌注;脑源性神经营养子;眼针疗法;脑皮质【作者】高原;王哲;王健;于丹;王守岩;孙宏伟;张立德;关洪全【作者单位】辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847;辽宁中医药大学,辽宁沈阳,110847【正文语种】中文【中图分类】R245脑梗死占脑血管病发病率80%左右，病死率、复发率和致残率均高。

葛根素在大鼠脑缺血再灌注后对神经元凋亡和Caspase-3与C-myc蛋白表达的影响

葛根素在大鼠脑缺血再灌注后对神经元凋亡及Ｃａｓｐａｓｅ－３与ｃ—Ｍｙｃ蛋白表达的影响华中科技大学同济医学院附属同济医院研究生导师刘书山杨光田摘要目的通过观察葛根素对脑缺血再灌注后海马ＣＡ－区存活神经元数目，原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）阳性细胞数目，Ｃａｓｐａｓｅ一３与ｃ—Ｍｙｃ蛋白表达的影响，探讨葛根素对脑缺血再灌注损伤保护作用的机制。

防法采用ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。

实验分三组：假手术组、脑缺血再灌注组、葛根素治疗组。

假手术组只分离第一颈椎两侧翼小孔，不电凝两侧椎动脉：只分离两侧颈总动脉，但不夹闭它。

脑缺血再灌注组和葛根素治疗组在麻醉下电凝两侧椎动脉并夹闭双侧颈总动脉１０分钟后局部缝合，分别再灌注１２小时、２４小时、４８小时；脑缺血再灌注组和葛根素治疗组分别于夹闭前半小时及再灌注后每６小时分别予葛根素（Ｐｕｅｒａｆｉｎ）１００ｍｇ／Ｋｇ和等量的生理盐水腹腔内注射（ｉｐ．）：假手术组每６小时予等量的生理盐水腹腔内注射。

各组动物于相应时间点横断脊髓，即速处死动物，取材，分离海马部脑组织，分离的海马组织置于１０％福尔马林液中固定。

常规石蜡包埋，制成石蜡切片。

切片分别通过ＨＥ染色、ＴＵＮＥＬ染色、免疫组织化学染色测定海马ＣＡｌ区存活神经元数目，原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）阳性细胞数目，Ｃａｓｐａｓｅ一３与ｃ．Ｍｙｃ蛋白表达的阳性细胞数目。

结果（１）ＨＥ染色的切片在光镜下可见，脑缺血再灌注组海马ＣＡｌ区存活神经元较假手术组明显减少。

应用葛根素可以减少各时间点海马ＣＡｌ区神经元的丢失，提高ＣＡｌ区神经元存活数目，与脑缺血再灌注组比较有极显著差异ｆＰ＜０．０１）。

（２）ＴＵＮＥＬ染色的切片在光镜下可见，假手术组偶见ＴＵＮＥＬ阳性细胞，脑缺血再灌注组及葛根素治疗组均可见大量ＴＵＮＥＬ阳性细胞，且随时间延长，阳性细胞数增加。

葛根素治疗组较脑缺血再灌注组阳性细胞有所减少，两组间比较有极显著差异（Ｐ＜０．０１）。

经鞘内注射pLXSN—bcl-2对缺血再灌注大鼠脑梗死体积及caspase-3蛋白的影响

【中圈分类号］４Ｒ７３
【文献标识码ＩＢ
【章编号】０６１５（ＯＯ）２０Ｏ — ０文ｌ０ — ９９２１１ — １４１
脑缺血再灌注后神经细胞发生坏死和凋亡，血周围（暗带区）缺半的细胞发生延迟性死亡即凋亡，此，少凋亡成为治疗本病的关键。因减Ｃｓａｅ３凋亡的重要执行者，ｅ２抗凋亡基因。本实验旨在寻ａｐｓ－是ｂｌ是一找一条有效的，创伤小的途径使ｂＩｃ一２到达缺血周围区，大程度发挥抗最凋亡作用。１材料和方法１１动物及分组：．健康ｗｉａ大鼠，重２０３０，中国医科大ｓｒｔ体５— ０ｇ由学实验动物中心提供，随机方法分为生理盐水组、ＰＸＳＰＸＮ— 按ＬＮ、ＬＳｂｌ，２ｃ一２各０只。每组分为ＩＲ２ｈ７ｈ组。／４、２１２主要试剂：粒ＰＸＮ及ＰｘＮ—ｂｌ．质ＬＳＬｓｃ一２由中国人民解放军第二军医大学东方肝胆外科医院钱其军博士惠赠。１３质粒鉴定提取及扩增：照何志义等报道的方法提取质粒ｌ然．按＿１Ｊ后用紫外分光光度法测定提取的质粒ＰＸＳ及ＰｘＮ—ｂｌ２度分ＬＮＬｓｃ一浓
Ｂｃ一２组与生理盐水组相比 ’Ｐｏ０空质粒组与生理盐水组～Ｐｌ＜．５，

缺血后处理对脑缺血再灌注损伤后Caspase-3、Caspase-9激活和细胞色素C释放的影响

脑中动脉闭塞再灌注模型。缺血再灌注２４ｈ后留取大脑组织，采用原位末端标记法检测脑内神经细胞凋亡情况，采用酶活性测定、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和免疫组化等方法检测Ｃａｓｐａｓｅ－３、Ｃａｓｐａｓｅ一９及ＣｙｔＣ含量。结果缺血再灌注组、缺ｍ后处理组较假手
［ＤｏＩ］１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００２．３４２９．２０１３．０８．０３２
ＥｆｅｃｔｓｏｆＩｓｃｈｅｍｉｃＰｏｓｔｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｎＡｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＣａｓｐａｓｅ－３ａｎｄＣａｓｐａｓｅ－９ａｎｄＲｅｌｅａｓｅｏｆＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣｉｎＲｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎＩｎｊｕ —
假于术组外漏明显，而缺血后处理组ＣｙｔＣ漏出较缺血再灌注组明显减少，差异均有统训’ 学意义（Ｐ＜０．０５）。结论缺血后
处理町以减轻脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡，抑制Ｃａｓｐａｓｅ一３、Ｃａｓｐａｓｅ－９的激活和ＣｙｔＣ的释放。
ｒｙａｆｔｅｒＣｅｒｅｂｒａｌＩｓｃｈｅｍｉａＸＩＮＧＢｉａｎ— ｚｈｉ “ ，ＣＨＥＮＨｕｉ “

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase—3表达的影响

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase—3表达的影响作者：洪妙玲等来源：《中国医学创新》2013年第02期【摘要】目的：观察δ-阿片受体激动剂DADLE（[D-Ala2，D-Leu5]enkephali）对大鼠急性全脑缺血再灌注后海马区神经元ERK信号通路和Caspase-3表达的影响。

方法：将50只SD 大鼠随机分为5组：假手术组（Sham）、模型组（I/R）、DADLE处理组（根据不同剂量可分为2 mg/kg[A]、3 mg/kg[B]、5 mg/kg[C]）。

采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型。

于缺血15 min后经颈外静脉注射DADLE并于再灌注120 min后处死。

开颅取其新鲜海马组织，采用western blot检测海马组织Caspase-3的表达，以及采用免疫组织化学法检测非磷酸化ERK与磷酸化ERK（P-ERK）的表达状况。

结果：Sham组ERK和P-ERK蛋白表达水平显著低于其他各组（P【关键词】 DADLE；全脑缺血再灌注； ERK； Caspase-3近来有研究证实，δ-阿片受体（δ-opioid receptor，DOR）对缺血缺氧神经元有保护作用，其中DOR激动剂（[D-Ala2，D-Leu5]enkephalin，DADLE）是目前研究的最为具体、清楚的，且大多数认为其具有明确的脑保护作用[1]。

胞外信号调控激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）调控多种重要的细胞生物学过程，包括细胞增殖、分化和凋亡等，而Caspase-3是凋亡过程中的关键蛋白酶，其含量增加，可引发细胞凋亡。

因此，本研究旨在通过观察不同剂量的DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤后海马神经元ERK信号通路和Caspase-3表达的影响，探讨其保护作用的可能分子生物学机制，为DADLE防治急性全脑缺血再灌注损伤的临床应用提供理论依据。

保护素D1对大鼠全脑缺血再灌注损伤海马Caspase-3表达及神经元凋亡的影响

型。Ｐ组于再灌注即刻经侧脑室注入ＰＤ１１００ｎｇ，Ｓ组和ＩＲ组注入等容量生理盐水。各组分别于再灌注２、６、１２、
２４、４８、７２ｈ（Ｔ～Ｔ６）随机取６只大鼠处死，取海马组织，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法和ＲＴ－ＰＣＲ法检测海马Ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白和Ｃａｓｐａｓｅ－３ｍＲＮＡ表达，采用流式细胞仪检测海马神经元凋亡情况。结果与ｓ组比较，ＩＲ组、Ｐ组海马Ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白和Ｃａｓｐａｓｅ－３ｍＲＮＡ表达均上调（Ｐ＜０．０５）；与ＩＲ组比较，Ｐ组海马Ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白和Ｃａｓｐａｓｅ－３ｍＲＮＡ表达均下调（Ｐ＜Ｏ．０５）。Ｓ组各时点均未见神经元凋亡，ＩＲ组和Ｐ组于Ｔ。时凋亡率开始上升，Ｔ时达峰值，Ｔｓ时开始下降，且Ｐ组各时点凋亡率均明显低于ＩＲ组（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论ＰＤ１可抑制大鼠全脑缺血再灌注损伤海马神经元凋亡，其机制可能与下调Ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白和Ｃａｓｐａｓｅ－３ｍＲＮＡ表达有关。
ＬｉｂｅｒａｔｉｏｎＡｒｍｙ，Ｑｕａｎｚｈｏｕ３６２０００，Ｃｈｉｎａ）

眼针运动疗法对脑缺血再灌注大鼠脑缺血半暗带区VEGF蛋白及VEGFmRNA表达的影响

眼针运动疗法对脑缺血再灌注大鼠脑缺血半暗带区VEGF蛋白及VEGFmRNA表达的影响邵妍;王鹏琴;王树东;李超华【摘要】目的:观察眼针运动疗法对脑缺血再灌注(MCAO)模型大鼠大脑缺血半暗带区域脑组织内VEGF、VEGFR1、VEGFR2表达的影响.方法:采用随机数字表法将SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、假手术组、模型复制组.对模型复制组大鼠采用线栓法进行脑缺血再灌注模型复制,再将模型复制组按随机数字表法分为模型对照组、眼针组、眼针加运动组,分别进行眼针、眼针运动疗法干预治疗,采用RT-PCR及western-blot法对各组大鼠脑组织中VEGF、VEGFR1/2基因及蛋白表达水平进行检测.结果:与空白对照组比较,模型对照组、眼针组及眼针运动疗法组大鼠脑缺血半暗带区域组织中VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白表达水平显著升高;与模型对照组比较,眼针组及眼针运动疗法组大鼠脑缺血半暗带组织中VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白表达水平显著升高;眼针运动疗法组大鼠脑组织中VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白表达水平高于眼针组.结论:眼针运动疗法能够促进脑缺血再灌注损伤后脑内缺血半暗带区域内VEGF、VEGFR1、VEGFR2 mRNA及蛋白的表达,从而促进半暗带组织中血管的新生,加快侧枝循环的建立,实现其脑保护作用.【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2015(021)004【总页数】4页(P445-448)【关键词】眼针疗法;眼针运动疗法;脑缺血再灌注;血管内皮生长因子;侧枝循环【作者】邵妍;王鹏琴;王树东;李超华【作者单位】辽宁中医药大学,沈阳 110032;辽宁中医药大学附属医院,沈阳110033;辽宁中医药大学附属医院,沈阳 110033;辽宁中医药大学,沈阳 110032;辽宁中医药大学,沈阳 110032【正文语种】中文【中图分类】R246.82脑卒中是严重威胁人类健康的疾病，占脑血管病发病率80%左右，其病死率、复发率、致残率在我国死亡率中仅次于恶性肿瘤，严重危害人类健康［1-2］。

电针对脑缺血再灌注大鼠E-选择素mRNA和蛋白表达及白细胞浸润影响的实验研究

１２局灶性脑缺血再灌注大鼠模型的建立及组织．
制备参照Ｌｎａ的改良的方法制作大鼠局灶性脑缺ｏｇ血再灌注模型。１￣水合氯醛（３ｍｇＫ）腔麻醉，０／／ｏ３０／ｇ腹消
法ｌｎｍｉ。非穴位针刺组：取双侧胁下２个固定非穴点，选用平补平泻捻转手法】ｉ。通以Ｇ６Ｏ一Ｉ电针治疗ａｒｎ８５Ｉ型
仪，率为４１Ｈｚ波形为断续疏密波，激强度为２频～６，刺Ｖ。持续时问为１ｒｉ。０ｎａ治疗时机：／后３、２组于脑缺血即刻、灌ＩＲｌ１ｈ针刺１再注即刻、灌注相应时间点分别进行电针治疗；／４、再ＩＲ２ｈ
择素ｍＲＮＡ和蛋白的表达，制粘附分子介导的内皮细胞与中性白细胞的粘抑
附浸润，而防治脑缺血再灌注炎性损伤。
主题词：脑缺血／灸疗法针
再灌注
Ｅ选择素／～代谢大鼠
２分，走时向偏瘫侧转圈；行３分，偏瘫侧倾倒；向４分，不
足量腹腔麻醉大鼠，４多聚甲醛（ ℃ ，ｐ．４Ｈ７４含Ｏ１．
离暴露出右侧颈总动脉（Ｃ、外动脉（Ｃ和颈内ＣＡ）颈ＥＡ）
动脉（Ａ）ＩＣ。在右侧颈总动脉接近分叉处以眼科剪剪一 “ 形小口，头端用火焰烧成光滑球面（径为２５Ｖ” 将直．～２８－ｍｍ）４０单股尼龙线从小口缓慢插入，颈总动脉的－经

针康法对局灶性脑缺血大鼠前肢运动功能及缺血区突触素和生长相关蛋白-43表达的影响

ｆｒｌｔｒｕｃｉｎａｄｅｐｅｓｎｏｙａｔｐｙｉａｄｇｏｔ—ｓｏｉｅｒｔｉＧＰ４）ｉａｆｒｆｃｌｅｅｒｌｓｈｍｉ．ｏｅｍｂｍｏｏｎｔｎｘｒｓｉｆｓｎｐｏｈｓｎｒｗｈａｓｃａｄｐｏｅｉｆｏｏｎｔｎ（Ａ一３ｎｒｔａｅｏａｃｒｂａｉｅａｓｔｃ
细胞数量在造模后７ｄ１优于模型组、康复组和针刺组（＜．）结论针康法可促进局灶性脑缺血大鼠前肢运动功能的恢和４ｄＰ００。５复，其机制可能与增强脑缺血区周围皮质突触素和Ｇ一３的表达有关。ＡＰ４
Ｐ１ＴｅｅｏｄｆｌｔｄｓｉｌｆｉｎｉｎｎｖｒｉＣｉｅｅｄｃｅＨａｂｎ１００，ｉｎｊｎ，ｈｎｆ．ｈｃｎＡｆｉｅＨｏｐｔＨｅｏｇｉｇＵｉｓｙｏｈｎｓｉｎ，ｒｉ５０１ＨｅｏｇｉｇＣｉａａＳｉａａｏｌａｅｔｆＭｅｉｌａ
Ｉ关键词１针康法；脑缺血；前肢运动功能；突触素；生长相关蛋白一３４；大鼠
ＥｆｅｔｆＣｌｔｒＮｅｌｎｇｏｃｐｃｆｃｓｏｕｓｅｅｄｉｆＳａｌＡｕｐｕｎｃｕｒｍｂｉｄｉｈＲｅｔｅＣｏｎｅｗｔｈａｂｌｔｉｌＦｏｒｌｍｂｏｔｒＦｕｎｃｉｎｎｄＥｘｐｒｓｉｉｉａｔｏｎＯｉｅｉＭｏｔｏａｅｓｏｎｏｆ
Ｍｅｈｄｎｏｂｌ．（Ｔ１ａｓｄｔｄｃｃｌｅｅｒｌｓｈｍｉｍｏｅｉｔｗｉｒｌｙｆｎｔｎＴｅａｓｒｎｏｙｔｏｓＥｄｔｅｉ１Ｅ－ｎｗｓｕｅｉｕｅｆａｃｒｂａｉｅａｄｌｎｒｓｔｆｅｍｂｄｓｃｉ．ｈｔｗｅｅｒｄｍｌｏｎｏｃａｈｏｉｕｏｒａ

Caspase-3在缺血性脑损伤中的作用

Caspase-3在缺血性脑损伤中的作用摘要】脑血管疾病是当今人类三大死亡原因之一,目前仍然缺乏有效的治疗手段,因此需要进一步探讨发病过程中的分子机制,为预防及治疗提供新的理论依据。

近来许多研究发现由半胱氨酸蛋白酶家族介导的细胞凋亡在缺血性脑损伤中起到了重要的作用，而半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)被认为是细胞凋亡执行阶段的关键蛋白酶，且通过干预caspase-3 表达可减轻脑缺血的损伤程度[1]。

【关键词】缺血性脑损伤凋亡半胱氨酸蛋白酶-3前言：缺血性脑损伤是缺血性脑血管疾病中必经的病理过程，在此过程中细胞凋亡占有重要的比重。

在机体凋亡与抗凋亡过程，Caspase-3属于关键步骤；故在此对细胞凋亡、Caspase-3在缺血性脑损伤中的作用做简要综述。

1、细胞凋亡凋亡是一个基因调控的程序性细胞死亡过程，形态学特征是细胞核和细胞质发生浓缩，染色质发生断裂，不伴有炎症反应。

在这个过程中大量的基因被激活，蛋白质表达增加。

其在体内稳态平衡、神经发育、机体防疫、老化及许多疾病的发生过程中发挥重要作用，如帕金森病、老年性痴呆等神经退行性疾病与神经细胞过度凋亡有关。

依据细胞凋亡机制可将凋亡分为caspase依赖的、非caspase依赖的凋亡，其中以前者为主。

caspase依赖的途径主要有线粒体/细胞色素C通路、死亡受体通路和内质网通路[2]。

1）线粒体/细胞色素C通路：由理化因素导致的DNA损伤、生长因子缺乏、氧化应激、毒物药物等刺激信号激活。

细胞色素C作为一种促凋亡因子从线粒体膜释放入胞浆后，与胞浆中的凋亡激活因子-1（Apaf-1）的C末端及ATP结合，促使caspase-9蛋白酶家族呈“瀑布式”层层激活(caspase-9→caspase-3、6、7)，引起细胞形态学上的改变使细胞最终发生凋亡[3]；2）死亡受体(Fas-associated death domain，FADD)通路：由配体如TNF、Fas或TRAIL同其受体结合引起，配体受体结合后激活caspase-8,进一步激活caspase-3、caspase-6、capase-7；3）内质网通路：主要由Ca2+介导，胞内钙超载，影响内质网对钙的摄取和释放，造成内质网的应激，内质网应激诱导caspase-12表达，激活的caspase-12可进一步激活caspase-3而引发细胞凋亡。

大鼠短暂脑缺血后海马区c-fos mRNA和FOS蛋白表达的时间规律

【关键词】ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡＦＯＳ蛋白脑缺血海马区动物模型【中固分类号ＪＲ３９２【文献标识码】Ａ【文章编号】１００７—０４７８（２００３）０３—０１３１—０５
ｍｔｉｍｅｐａｔｔｅｒｎｏｆｃ－ｌｏｓｍＲＮＡａｎｄＦＯＳｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｒｅｇｉｏｎｉｎｒａｔｍｏｄｅｌｓｏｆｅ．ｅｒｅ－
Ｓｔｒｏｋ—ｅａｎｄＮｅｒｖｏｕｓＤｉｓｅａｓｅｓ，ｊｕｎ２００３，Ｖｏ—ｌ１０１Ｎ—ｏ．—３
中，待分别下沉；（４）冰冻切片机冠状连续切片，切片厚度２０ｂｔｍ；（５）切片贴附于载玻片；（６）保鲜膜密闭片盒，置于一２０℃保存。１．６免疫组化步骤（１）用ＰＢＳ—Ｔｘ洗３次，每次５ｍｉｎ；（２）滴加正常血清封闭液，室温１ｈ；（３）依次加人第一抗体（羊抗大鼠ｃ—ｆｏｓ１：１００稀释），过夜；（４）ＰＢＳ—ＴＸ洗３次，每次５ｒａｉｎ；（５）加入生物素化免抗山羊ＬｇＧ（Ｈ十Ｌ）（１：２００稀释），搴温２ｈ。（６）ＰＢＳＴＸ洗３次，每次５ｒａｉｎ；（７）加入辣根酶标记链亲台素，室温１ｈ；（８）ＤＡＢ显色：１ｍＬ
万方数据
卒中与神经疾病２００３年６月第１０卷第３期
·１３３
近年研究表明【“，ｃ—ｆｏｓ基因在正常情况下参与细胞生长、分化、信息传递、学习和记忆等生理过程，而在病理情况下ｃ。ｌｏｓ基因表达及调控变化与多种疾病的发生和发展有关［“，ｃ－ｌｏｓ基因为早期反应基因，能对外界刺激在数十分钟内作出反应，在
基金项ｄ：崮家长江学者奖励计划基金资助项目作者单位：１００７００北京中医药大学东直门医院老年病科（田金蝌时晶尹军祥）；中国医学科学院基础医学研究所免疫室（高扬林嘉友）；中国中医研究院（王永炎）

脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3mRNA表达的影响

鼠雄性６０只，按照体质量随机分为６组，即脑心康片高剂量组、脑心康片中剂量组、尼莫地平组、银杏叶片组、模型组
和假手术组，每组ｌ０只。分别给等体积生理盐水，各组均连续灌胃给药５ｄ后，采用大鼠大脑中动脉线栓法脑心康片对脑缺血后脑组织Ｃｓａｅ３ｍＮＲ．Ｃａｐｓ一ＲＡ表达的影响。结果：脑心康片能明显抑制ＣｓａｅＲＡ的表达。结论：脑心康片对脑缺血具有保护作用，ａｐｓ一ｍＮ３其机理可能与脑心康片通过抑制凋亡相关基因
的表达，而抑制神经元细胞凋亡有关。进
［关键词］脑心康片；脑缺血；再灌注损伤；细胞凋亡；ａｐｓ－Ｃｓａｅ３［中图分类号］Ｒ４；２５５７３Ｒ８．［文献标志码］Ａ［文章编号］１７７８（０８００ｌ０６１— ７３２０）６— ５３— ２
Ｅｆｅｔｏｘｅｓｏｓｓ－ＲＮＡｆｃｒｂｒｌｉｃｅｉｆｃｆｅｐｒｓｉｎＣａｐａｅ３ｍｏｅｅａｓｈｍａ
ｒｐｒｕｉｎｉｊｒａｓｏＡＭＤｅｅｆｓｕｙｉｒｔｆＰｏｎｎ
ＪＩ，ＳＨｕ，ＤＵＡＮＧＢｏＵｉ一ｉｎｑａｇ，Ｓｕ — ｎＵＹｎｍｉｇ
脑血管疾病是神经系统的常见病、多发病，目是
前引起人类死亡的三大疾病之一。缺血性脑卒中是多种原因引起的一种临床病理状态，脑组织损害其
脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其作用机制。

电针对MCAO大鼠脑内GAP-43和突触囊泡蛋白表达的影响

电针对ＭＣＡＯ大鼠脑内ＧＡＰ－43和突触囊泡蛋白表达的影响［摘要］方法：将实验大鼠分为假手术组、缺血再灌组和缺血再灌＋电针组，大脑中动脉线栓［Abstract］Purpose To observe the effect of electroacupuncture 切片入0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS，pH7.2～7.4) 漂洗3次，每次5 min。

然后入含有10%正常羊血清和0.2% Triton X-100 PBS 液中，37℃孵育1h。

将切片放入稀释后的第1抗体(GAP-43：小鼠抗大鼠单克隆抗体1∶800 Sigma产品；Snaptophysin：小鼠抗大鼠单克隆抗体1∶20DAKO产品) 中，37℃孵育2h，移入4 ℃冰箱孵育48～72h。

然后经PBS漂洗3次，切片入生物素标记的第2抗体(Biotin马抗小鼠IgG 1∶200 Vector产品)，37 ℃孵育1h，PBS漂洗3次，入AB peroxidase complex液，37℃孵育1 h，PBS漂洗3次，再用0.1mol/L Tris-HCl 缓冲液洗5min。

切片挑入0.05%DAB+0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液，加3%过氧化氢1～2滴显色，显微镜下观察监控呈色反应。

切片入0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液终止反应，洗去非特异性着色，贴片，晾干，透明，封片，镜下观察。

对照实验：以正常马血清和PBS代替第1抗体，同步进行上述免疫组织化学染色，结果为阴性。

1.5细胞计数光镜下(100×)对假手术组一侧前脑半球以及缺血再灌组及电针组缺血侧纹状体和皮层的免疫阳性细胞进行细胞计数。

每只大鼠取3张相同缺血部位脑片，每一脑片在皮层随机取10个视野，求其算术平均值。

1.6统计测定结果均以平均值±标准差表示，进行组间的ANOV A分析。

2实验结果GAP-43免疫阳性细胞主要分布在双侧大脑半球的皮质和下丘脑，在大脑皮质Ⅲ和Ⅴ层尤其明显。

高压氧预处理对神经系统保护作用的研究进展(综述)

高压氧预处理对神经系统保护作用的研究进展(综述)孙行;江腾【摘要】近年来研究发现,高压氧预处理所产生的神经保护作用,可以有效减轻神经系统由于缺血、出血、放射线等原因造成的损伤.该文收集近年来国内外部分研究文献,探讨高压氧预处理神经保护作用的机制及其在临床实践中的应用.【期刊名称】《安徽卫生职业技术学院学报》【年(卷),期】2017(016)004【总页数】3页(P36-37,39)【关键词】高压氧预处理;神经系统;保护【作者】孙行;江腾【作者单位】安徽省第二人民医院安徽合肥 230041;安徽省第二人民医院安徽合肥 230041【正文语种】中文【中图分类】R659.6预处理的概念是1986年由Murray提出的，最早给予实验动物一定时间的缺血处理以增加其缺氧耐受能力。

虽然缺血预处理（HPC）在某些条件下与高压氧预处理（HBOPC）产生的效应相同，但是二者的机制有完全的不同。

1996年Wada等首次发现了高压氧预处理可减轻沙鼠CA1区神经元细胞缺血后凋亡现象，并发现HBOPC处理动物体内热休克蛋白-72表达的增加，近年来的一项研究充分证明了两者之间的密切关系[1]。

后期深入研究的学者认为高压氧预处理诱导脑缺血耐受的机制有以下几个方面：1.1 提高抗氧化水平 HBOPC能上调大鼠体内内源性过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，并且使丙二醛(MDA)表达水平下调，能有效减少MCAO模型大鼠的死亡率，减少神经元的损伤，改善神经功能，故HBO预处理能提高抗氧化酶的活性从而应对脑缺血耐受。

Yi Z发现[2]高压氧通过增加过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及其高亲和力配体15-脱氧前列腺素J2（15-DPGJ2）的途径来增加下游抗氧化酶的活性。

Zhai X等研究[3]证明HBOPC在脑内同样可以上调Nrf2的表达水平。

以上发现充分证明，高压氧预处理可以通过多种途径进行神经保护。

1.2 抗炎作用 Hirata T等[4]对HBOPC神经保护作用做了基因层面的研究，发现在HBOPC后，大鼠体内7个标记基因（p75NTR, C/EBPδ,CD74, Edg2,Trip10,Nrp1,Igf2）出现显著性变化，其中以p75NTR, C/EBPδ,CD74最为明显。