天然药物化学基础第二章第三节PPT课件

制板： 硅胶CMC板：用羧甲基纤维素纳作为粘合剂铺成的薄 层板。 取硅胶加适量0.5%CMC水溶液[1：3左右（g/ml）]， 将硅胶调成糊状，倒合适的量在大小适宜的玻璃板上， 控制铺板厚度在2.5mm左右，转动或借助玻棒使其分 布于整个玻板表面，振动使之为均一平面，放于水平 处在空气中晾干，或于105℃活化1小时后待用。一般 情况薄层越薄分离效果越好。
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步骤：制板→点样→展开→显色→Rf值计算
点样： 先用铅笔在距薄层板一端1cm处 轻轻划一横线作为基线，然后用 毛细管吸取样品，在起始线上小 心点样，斑点直径一般不超过 2mm。 点样要轻，不可刺破薄层。
可通过活化或者去活化得到不同活度级别的氧 化铝。通常在400℃左右加热6小时，可得I~II级 氧化铝。
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色谱用氧化铝类型
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2.硅胶 吸附能力决定于硅羟基数，吸附活性取决于含水量。
OH
O
OH
Si O O
OH
Si O O
OH
Si O O
OH
Si O O
Si
O
Si O O
Si O O
Si O O
Si O O
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基本概念： 活化：在一定温度下加热去除吸附剂中的水分，
使其吸附能力提高，活性增强的过程。 去活化：向吸附剂中加入一定量水分，使其吸附
能力降低，活性减弱的过程。 液相色谱：流动相为液体的称为液相色谱。 气相色谱：流动相为气体的称为气象色谱。
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色谱法的分类：
色谱法
吸附色谱法 分配色谱法 聚酰胺色谱法 离子交换色谱法 凝胶色谱法
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①把含有A、B两组 分的混合样品加到 色谱柱顶端，A、B 均被吸附到固定相 上。（Ⅰ号柱）
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②用适当的流动相 冲洗色谱柱，当流 动相流过时，已被 吸附在固定相上的 两种组分又溶解于 流动相中，而被解 吸附，并随流动相 向前移进。（Ⅱ号 柱）
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④如此，随着流动相 的不断冲洗，在色谱 柱上不断地发生吸附、 解吸附、再吸附、再 解吸附……的过程。 （Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ号 柱）
适用范围： 中性及酸性成分：黄酮、蒽醌、强心苷、皂苷、
有机酸、酚酸、氨基酸、挥发油。 *不适用于碱性成分的分离。
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市售硅胶
硅胶G（加入粘合剂煅石膏14%~22%） 硅胶H（不含粘合剂） 硅胶F（加入了紫外光下能产生荧光的物质） 硅胶S（含淀粉） 硅胶GF（含粘合剂和荧光物质） 硅胶HF（不含粘合剂，含有荧光物质）
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色谱法早在1903年由俄国植物学家茨维特分离植物 色素时采用。
他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃 取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油 醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各 种不同颜色的谱带。这种方法因此得名为色谱法。以 后此法逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字虽 已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。
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（三）溶剂（流动相） ①由一种或几种溶剂混合组成。 ②解吸附：把物质从固定相上洗脱下来。
选择原则：相似相溶
常用的流动相极性顺序： 水>甲醇>乙醇>丙酮>正丁醇>乙酸乙酯>三氯
甲烷>乙醚>苯>四氯化碳>环己烷>石油醚
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极性 水
大 亲水性有机溶剂
甲醇>乙醇>丙酮
弱亲脂性有机溶剂： 小 亲脂性有机溶剂 正丁醇>乙酸乙酯
（二）吸附剂（固定相）
选择合适的吸附剂是吸附色谱法成功的关键。 良好的吸附剂应具备： ①不与样品及流动相发生化学反应 ②不溶于流动相 ③具有较大的表面积和一定的吸附能力。 ④具有一定的细度，颗粒要均匀。
极性吸附剂：氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅藻土、硅酸镁 非极性吸附剂：活性炭
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1.氧化铝 ①是一种吸附力很强的极性吸附剂。 ②含水量越高，吸附能力越弱。 ③根据含水量的多少，分为I~V级。
色谱法是一种现代化的物理化学分离、分析方法。
优点：三高一快 ①选择性பைடு நூலகம்：可将性质相似，结构相近的组分分开。 ②分离效率高：能一次分离多种组分。 ③检测灵敏度高：能分析10-11~10-13g的物质，适于微
量和痕量分析。 ④分析速度快：几分钟、十几分钟、几十分钟完成
分离，一次 可以测多种样品 ⑤应用范围广：气体、固体、液体
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➢固定相——CaCO3颗粒 ➢流动相——石油醚
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基本概念： 固定相：在色谱分离中固定不动，对化学成分产
生保留的一相。（固体或液体） 流动相：色谱过程中与固定相处于平衡状态，携
带待测组分向前移动的物质称为流动相。（气 体或液体）
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色谱法： 是利用混合物中各成
分在流动相和固定相之 间的作用力和亲和力 （吸附，分配，离子交 换、分子筛）的不同， 在两相中作相对移动时， 混合物中各种成分随流 动相运动速度不同，从 而达到相互分离的方法。
强亲脂性有机溶剂： 三氯甲烷>乙醚>苯>石油醚
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（三）溶剂（流动相） 流动相的选择：
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（四）被分离化学成分 ①极性大 ②碳原子数目少 ③双键和共轭双键多 ④取代基的极性基团多
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（五）操作技术 1.薄层色谱法 步骤：制板→点样→展开→显色→Rf值计算
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步骤：制板→点样→展开→显色→Rf值计算
O O
Si O O
O
Si O O
Si O O
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2.硅胶 ①吸附力比氧化铝弱。 ②吸附能力与游离硅醇基的数量和含水量有关。 ③含水量>17%则失去吸附能力，不可做吸附剂。 硅胶的活化： 将含水硅胶在100~110℃温度下加热30min。 温度超过500℃硅胶将失去活性。
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2.硅胶 特点： 吸附容量大；机械强度好；分离范围广
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⑤结果使吸附能力弱 的B组分先从色谱柱 中留出。（Ⅷ、Ⅸ号 柱）
⑥吸附能力强的A组 分后从色谱柱中留出。 （Ⅹ、Ⅺ号柱）
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●适用于分离中等分子量（<1000)的脂溶性成分。
吸附色谱法的分离效果，取决于: ①吸附剂（固定相）(硅胶、氧化铝、活性炭） ②溶剂（流动相） ③被分离化合物的性质
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液-固色谱法：流动相——液体 固定相——固体
操作形式：薄层色谱、柱色谱。
解吸附作用 吸附作用
（一）基本原理 ①固定相对混合物中各成分吸附能力以及流动相对
各成分的解吸附能力不同； ②吸附强的成分不易被流动相解吸附，移动速度慢； ③吸附弱的成分易被流动相解吸附，移动速度快； *最终因为化学成分移动速度的不同而达到分离。