丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的氧化应激及腹膜间皮细胞凋亡因子表达的影响

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丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP诱导人肝癌细胞凋亡的研究

丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP诱导人肝癌细胞凋亡的研究目的：探讨丹参酮ⅡA对肝癌细胞中凋亡抑制蛋白XIAP的影响。

方法：通过MTT实验、流式细胞术、细胞形态观察检测丹参酮ⅡA对细胞增殖和凋亡的影响，通过蛋白免疫印迹的方法检测丹参酮ⅡA对细胞中凋亡抑制蛋白XIAP、凋亡蛋白caspase-3以及PARP蛋白的影响。

结果：MTT、细胞形态结果显示丹参酮ⅡA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用成时间和剂量依赖性，免疫印迹结果显示，0.5 μg/mL丹参酮ⅡA作用肝癌细胞24 h后，caspase-3前体、凋亡抑制蛋白XIAP表达明显下调，活化的caspase-3、剪切形式的PARP含量显著增加。

结论：丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP，活化caspase-3，促进PARP剪切诱导肝癌细胞凋亡。

肝癌属世界上的较为常见的恶性肿瘤之一，在成人中发病率较高，约占80%左右，数据显示，其5年存活率在7%左右，每年约60万人死于肝癌，严重影响人们的健康。

近年来，中药治疗肿瘤，尤其是在诱导肿瘤细胞凋亡方面的研究，成为医学研究的重点方向。

寻求诱导肿瘤细胞凋亡的中药提取物逐步成为当前肿瘤治疗的热点和重点。

丹参酮ⅡA是中药丹参中提取出来的有效成分，在抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞分化、促进细胞凋亡方面有着很好的效果，从而达到抗癌的效果[1]，但是其具体作用机制仍然不清楚。

X相关凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）是细胞中重要的凋亡抑制因子，其过度表达往往导致肿瘤的发生[2]。

近年来研究表明，XIAP在肝癌细胞中表达明显升高，并且与肝癌转移、耐药以及复发密切相关[3]。

因此，XIAP已经成为肝癌治疗的靶点分子。

本研究工作中，笔者探讨丹参酮ⅡA诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的过程中对XIAP蛋白的影响，为丹参酮ⅡA用于临床治疗肝癌提供实验依据和理论基础，现报告如下。

丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠心肌肝细胞生长因子表达的影响

（ｎ＝８），Ｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ（ｎ＝７），Ｃａｐｔｏｐｉｒｌｒｇｏｕｐ（ｎ＝７），ＳＴＳ－Ｈｇｒｏｕｐ（ｎ＝７）ａｎｄＳＴＳ－Ｌｒｇｏｕｐ（ｎ＝８）．８ｗｅｅｋｓａｆｔｅｒ
中国心血管病研究２０１５年６月第１３卷第６期
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎｌａｏｆＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＲｅｓｅｒｃａｈ，Ｊｕｅｎ２０１５，Ｖｏ１．１３，Ｎｏ．６
ｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ｌｅｆｔｖｅｎｔｒｉｅｕｌａｒｍａｓｓｉｎｄｅｘｅｓｏｆｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ，ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｍｙｏｃａｒｄｉｕｍｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄ，ｔｈｅｃｏｌｌａｇｅｎｖｏｌｕｍｅｆｒａｃｔｉｏｎｓａｎｄｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄ，ｔｈｅ
积，碱水法检测羟脯氨酸（ＨＹＰ）含量，免疫组化分析ＨＧＦ、基质金属蛋白酶９（ＭＭＰ９）和组织金属蛋白酶抑制剂１（ＴｌＭＰ１）的表达。结果与Ｍｏｄｅｌ组比较，Ｃａｐｔｏｐｉｆｌ组、ＳＴＳ — Ｈ组和ＳＴＳ — Ｌ组ＬＶＭＩ、心肌ＨＹＰ含量、ＣＶＦ

丹参酮ⅡA对人A549／CDDP细胞凋亡和耐药蛋白表达的作用

作用，同样是ＡＢ优于ＡＥＡ。提示ＡＢ具有更强的镇痛作用。ＣＩ型观察显示，小鼠自发性Ｃ模疼痛和诱发性疼痛程度相似，模型一致性较好。进一步利用Ｃ模型，考察ＡＢ对神经病理性ＣＩ疼痛的镇痛作用，结果表明，ＡＢ连续给药７，可以显著抑制ＣＩ鼠产生的自发性疼痛和诱天Ｃ小
中国药理通讯２１第二十七卷第三期００年
抗肿瘤作用进行了考察。体外抗肿瘤实验结果显示，Ａｗ、ＡＥ、ＡＥＡ、ＡＢ对以上５种人源肿瘤细胞均有较强的生长抑制作用。体内抗肿瘤实验结果显示，ＡＷ、ＡＥ连续灌胃给药７天，可以显著抑制小鼠移植性肿瘤Ｓ８１０的生长，且对荷瘤小鼠的免疫器官没有影响，提示ＡＷ、ＡＥ具有良好的抗肿瘤作用，且不产生环磷酰胺样免疫抑制。应用醋酸所致小鼠扭体模型、热板致痛模型及小鼠坐骨神经慢性压迫模型（Ｃ）对Ａ、ＣＩｗ
２６
中国药理通讯２１４／ＤＤ２，肺癌耐药蛋白（Ｒ）的荧光亮度明显低于非药物作用组。结论Ｔａ Ⅱ ＬＰｎ
Ａ诱导Ａ５９ＣＰ细胞凋亡并抑制其增殖作用；通过下调ｓｒｉｉ因表达和上调ｂｘ基因表４／ＤＤｕｖｖｎ基ａ达来诱导Ａ５９ＣＤ４／ＤＰ细胞凋亡；降低耐药蛋白（ＰＩ）表达。
发性疼痛。还考察了连续７天给予ＡＢ对小鼠痛阈的影响，结果显示，ＡＢ组小鼠的痛阈在给药

丹参酮ⅡA对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡的影响

丹参酮ⅡA对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡的影响史维刚;廖鲜艳;翁新楚【摘要】以人自发性永生化角质形成细胞系(HaCaT)细胞为材料,通过CCK8和蛋白印迹法分别测定不同剂量长波紫外线(ultraviolet A, UVA)、不同浓度丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA, TSⅡA),以及UVA和TSⅡA共同作用下的细胞活力和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路蛋白(p38, JNK和Erk)磷酸化水平。

结果表明：在10 J/cm2的UVA照射下,细胞活力为对照组的70%左右,在20 J/cm2的UVA照射下,细胞活力仅为对照组的55%左右；低浓度的TSⅡA在正常情况下对细胞活力无影响,高浓度(85µmol/L) TSⅡA 处理组的细胞活力约为对照组的70%左右。

与TSⅡA或UVA单独处理相比,二者共同作用下细胞活力大大降低且差异极其显著。

UVA照射提高了MAPK信号通路中的p38和JNK磷酸化水平,但是对Erk磷酸化水平没有影响；而TSⅡA可以显著提高低辐射剂量(2 J/cm2)UVA诱导下的p38和JNK的磷酸化水平。

这说明UVA促进HaCaT细胞凋亡是通过提高p38和JNK磷酸化水平来实现的；而TSⅡA可以提高p38和JNK磷酸化水平,进一步加速UVA诱导的HaCaT细胞凋亡。

%Human immortalized keratinocytes (HaCaT) were used as materials and effects of ultraviolet A (UVA), tanshinone ⅡA (TS ⅡA), and combination of UVA and TS ⅡA on cell viability and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling protein phospho-rylation were studied using CCK8 and Western blot respectively. The results showed that UVA at 10 J/cm2 lowered cell viability to about 70%of that of control, while 20J/cm2 dose led to further reduction to about 55%. Low concentrationTSⅡA had no impact on cell viability, and high concentration TSⅡA (85µmol/L) could decrease cell viability to 75%. When combined together, UVA and TSⅡA significantly exhibited together inhibitory ef-fect on cell viability compared to their individual effects. UVA irradiation elevated the phosphorylation level of p38 and JNK in MAPK cascade, but had no effect on phospho-rylation of Erk. TS ⅡA could promote phosphorylation of p38 and JNK induced by lowdose UVA (2 J/cm2). The above results indicate that UVA induces HaCaT apoptosis by promoting phosphorylation of p38 and JNK, and in turn, TS ⅡA further promotes its phosphorylation and accelerated HaCaT apoptosis.【期刊名称】《上海大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】9页(P757-765)【关键词】丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA, TSⅡA);长波紫外线(ultraviolet A, UVA);HaCaT;促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK);凋亡【作者】史维刚;廖鲜艳;翁新楚【作者单位】上海大学生命科学学院，上海200444;上海大学生命科学学院，上海200444;上海大学生命科学学院，上海200444【正文语种】中文【中图分类】R285皮肤癌是目前世界范围内十分普遍的疾病，严重威胁人类的健康.据报道，6个美国人中就有1个在一生中可能患皮肤癌［1］.非黑素性皮肤癌患者在皮肤癌患者中的比例超过了1/3，并且以每年大约6 000 000的人数增长［2］.中国的皮肤癌发病率，男性为0.3%～0.4%，女性约为0.3%，其中较大的人口基数意味着绝对新发病例数目同样不容忽视［3］.皮肤癌的主要诱因是紫外线［4］.紫外线按波长可分为短波紫外线（ultraviolet C，UVC），波长为200～290 nm；中波紫外线（ultraviolet B，UVB），波长为290～320 nm；长波紫外线（ultraviolet A，UVA），波长为320～400 nm.地球上空的臭氧层可以吸收的紫外线波长最大到310 nm，所以照射到皮肤上的紫外线以UVA居多［5］.角质形成细胞是皮肤表层最主要的细胞，其健康程度直接影响着其他皮肤细胞的功能和状态.UVA对角质形成细胞的影响在国外研究较多.一般认为UVA的致癌作用，一方面是因为其在细胞中产生的单线氧（1O2）和氧自由基（reactive oxygen species，ROS）引起的核酸氧化损伤、蛋白质的氧化和脂质过氧化；另一方面，UVA可以激活多种膜受体，并引发癌变或凋亡相关信号通路的转导.郭坤等［6］报道了UVA对HaCaT细胞的氧化损伤作用，发现经过UVA照射后细胞中的ROS含量明显上升，导致超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）活性下降.陈斌等［7］研究了UVA和UVB对细胞骨架的影响，发现经UVA/UVB 照射后5种角蛋白（keratin）中的K7，K8，K13，K18和K19发生变化，这些骨架蛋白的变化不仅与皮肤细胞形态有关，还可能进一步参与细胞凋亡及癌变.TSⅡA是从传统中药丹参根中提取的菲醌类衍生物，分子式为C19O3H20［8］，经常用于心绞痛的治疗，能改善胸闷和缺氧后引起的心肌代谢紊乱［9］.国内的有关研究表明，TSⅡA可以抑制肝癌细胞的增殖［10］，诱导乳腺癌细胞的凋亡［11］.韩国的Jang等［12］发现TSⅡA在小鼠巨噬细胞RAW264.7中通过NF-κB诱导激酶—IκB激酶途径和MAPK信号通路降低NF-κB的活性，具有一定的抗炎作用.日本的Dai等［13］研究发现，TSⅡA可以提高肝癌细胞BEL-7402胞内的钙离子水平，并通过钙离子依赖的信号通路诱导癌细胞凋亡.然而，TSⅡA在皮肤癌治疗方面的应用鲜有报道.本研究拟通过比较在UVA和TSⅡA单独作用，以及二者共同作用下HaCaT细胞的凋亡水平和凋亡信号通路相关蛋白磷酸化水平，探究TSⅡA促进UVA诱导的细胞凋亡机制.1.1 材料1.1.1 试剂TSⅡA（中国药品生物制品检定所）；DMEM（dulbecco's modified eagle medium）培养基、胎牛血清（Gibco公司）；细胞增殖-毒性检测试剂盒（CCK8，同仁化学）；细胞裂解液（Sigma公司）；BCA蛋白浓度测定试剂盒（Pierce）；预制胶（Bio-Rad公司）；PVDF预制膜（Bio-Rad公司）；显色剂（Bio-Rad公司）；蛋白印迹膜再生液（Thermo Meter）；磷酸化p38、磷酸化JNK、磷酸化Erk（P-p38，P-JNK，P-Erk）及总p38、总JNK、总Erk抗体及其对应的二抗（辣根过氧化酶标记羊抗兔IgG抗体，Cell Signaling公司）；β-actin抗体及其对应的二抗（辣根过氧化酶标记羊抗鼠IgG抗体，Cell Signaling公司）.1.1.2 仪器紫外辐照仪CL-1000（灯管波长为365 nm）及辐照强度计（美国UVP公司）；酶标仪（Tecan Safire 2）；生物分子成像仪（GE ImageQuant LAS 500）；垂直电泳仪（Mini-Protean Tetra）、蛋白转印系统（Trans-Blot Turbo）均购于美国Bio-Rad公司.1.1.3 细胞HaCaT细胞购于武汉原生原代（PriCells）生物医药科技有限公司.1.2 方法1.2.1 细胞培养及分组HaCaT细胞培养在DMEM完全培养基（DMEM加10%灭活胎牛血清、100U/mL青霉素和100µg/mL链霉素）于37◦C，5%CO2条件下常规培养，细胞以0.25%胰酶消化并按1∶3传代.HaCaT细胞接种于12孔板，待细胞完全融合时进行实验并随机分组，每组做3个重复.在测定UVA对细胞活力和MAPK信号通路蛋白影响的实验中按UVA剂量分组；在评价TSⅡA对细胞活力影响的实验中按浓度分组；在TSⅡA和UVA共同对细胞活力影响的实验中，分为对照组、仅TSⅡA处理组、仅UVA照射组、TSⅡA和UVA共同处理组来研究细胞活力水平及p38和JNK的磷酸化水平.1.2.2 UVA照射照射时弃去培养基，用DPBS（dulbecco phosphate-buffered saline）冲洗2次并弃去DPBS；重新向所有孔中加入0.5 mL DPBS.细胞培养板距紫外灯管15 cm，并置于紫外辐照仪内部中央.紫外强度（J/cm2）=单位面积瓦特值（W/cm2）×时间（s）.照射时，对照组和仅TSⅡA处理组用锡箔纸盖住，照射后DPBS由常规完全培养基或者加有TSⅡA的完全培养基替换并继续培养.1.2.3 TSⅡA处理将TSⅡA溶于二甲基亚砜，用DMEM完全培养基稀释到所需浓度.HaCaT细胞常规完全培养基更换为含有不同浓度TSⅡA的完全培养基，继续在37◦C，5%CO2的条件下培养24 h.在测定细胞活力的实验中，TSⅡA在UVA照射后加入对应细胞组；在测定MAPK信号通路蛋白水平的实验中，TSⅡA在UVA照射前24 h加入对应细胞组.1.2.4 细胞活力的测定细胞活力由CCK8（cell counting kit-8）测定.处理后的细胞经过常规培养24 h 后，用DPBS冲洗2次并弃去DPBS，每个孔加入0.5 mL混有CCK8的完全培养基（m（CCK8）∶m（DMEM）=1∶10）于37◦C，5%CO2条件下常规培养.2 h 后每个孔吸取100µL上清至96孔板，在450 nm的波长下读取吸光值，以对照组为100%细胞活力计算相对细胞活力.1.2.5 蛋白质印迹法检测磷酸化水平及总MAPK信号通路蛋白检测UVA对MAPK信号通路蛋白磷酸化影响：①不同剂量UVA照射后30 min，用预冷的DPBS冲洗3次并弃去DPBS，然后每个孔加入300µL的细胞裂解液摇晃15 min，并用细胞刮刀刮下置于1.5 mL的离心管内，以12 000r/min的速度离心15 min，收集上清；②用蛋白浓度测定试剂盒测样品蛋白质浓度，在预制胶上每孔上样20µg蛋白质，10% SDS-PAGE（sodium dodecyl sulfate polyarcylamide gel electropheresis）电泳，蛋白质转移至PVDF （polyvinylidene fluoride）膜；③PVDF膜用封闭液TBST（tris buffered saline with tween）（1×TBS，0.1%Tween 20）+5%牛血清室温封闭1 h，加入P-p38，P-JNK和P-Erk抗体（1∶1 000）4◦C孵育过夜，TBST洗3次，每次5 min，加入对应的羊抗兔二抗（1∶2 000）室温孵育1 h；④PVDF膜用TBST洗3次，每次5 min，加显色剂反应3 min后置于生物分子成像仪上显色；⑤PVDF膜用TBST洗3次，并用蛋白印迹膜再生液浸泡15 min.重复③和④，其中步骤③加入总p38、总JNK和总Erk抗体及其对应的羊抗兔二抗或β-actin抗体及其对应的羊抗鼠二抗.显色图像采用Image J软件分析灰度值，并用P-p38/β-actin，P-JNK/β-actin和P-Er k/β-actin衡量其磷酸化水平.检测TSⅡA和UVA共同对MAPK通路蛋白中P-p38和P-JNK表达水平的影响：仅在TSⅡA处理组、TSⅡA和UVA共同处理组中分别加入含有不同浓度TSⅡA的完全培养基培养24 h后，用2 J/cm2UVA照射细胞；照射后30 min，分别提取总蛋白并检测目标蛋白的表达水平.除不加入P-Erk和总Erk抗体及其对应二抗外，其余步骤同上.1.2.6 数据处理采用统计软件JMP 11.0（美国SAS研究所）进行统计学分析.所有数据均用mean±SE表示，两组间均数比较通过方差分析（anlysis of variance，ANOVA）进行，两两间均数比较通过Dunnett和Tukey校正进行，分别与对照组和任意处理组进行对比，其中P＜0.05表示差异具有显著性，P＜0.01表示差异性极显著. 2.1 UVA对HaCaT细胞活力的影响HaCaT细胞经受不同剂量UVA照射后继续培养24 h，用CCK8测定细胞活力.UVA对HaCaT细胞活力的影响如图1所示.可以发现，细胞活力表现出较大的差异且与UVA剂量相关，其中较低剂量（1～5 J/cm2）的UVA使细胞活力下降不明显，较高剂量的UVA使细胞活力下降较大.当UVA的剂量为10 J/cm2和20 J/cm2时，细胞活力分别是对照组的70%左右和55%左右.这说明UVA对HaCaT 细胞具有一定的杀伤力，且随着剂量的加大，杀伤力逐渐增强.2.2 TSⅡA对HaCaT细胞活力的影响将HaCaT细胞用含有不同浓度TSⅡA的培养基培养24 h，用CCK8测定细胞活力. TSⅡA对HaCaT细胞活力的影响如图2所示.由图2可知，低浓度（8.5～34µmol/L）的TSⅡA对细胞活力几乎无影响，随着TSⅡA浓度的提高，细胞活力逐渐降低；42.5µmol/L的TSⅡA可使细胞活力轻微下降；高浓度（85.0µmol/L）的TSⅡA对细胞活力影响较大，细胞活力约为对照组的70%.2.3 TSⅡA和UVA共同对HaCaT细胞活力的影响HaCaT细胞分别经过20 J/cm2和2 J/cm2的UVA照射后，用含有不同浓度TSⅡA的完全培养基继续培养24 h，用CCK8测定细胞活力.TSⅡA对UVA诱导的HaCaT细胞活力的影响如图3所示.由图3（a）可知，在20 J/cm2的UVA作用后添加TSⅡA的细胞，与仅UVA照射的细胞相比，细胞活力显著降低且随着TSⅡA浓度的升高而下降.添加了8.5，17.0，34.0µmol/L TSⅡA的细胞，其活力分别约为仅UVA照射细胞的66%，56%和40%.而由图2可知，低浓度的TSⅡA对细胞活力无明显影响，这说明高浓度TSⅡA加剧了UVA照射后细胞活力的下降.由图3（b）可知，2 J/cm2UVA对HaCaT细胞活力的影响情况与20 J/cm2UVA 类似：TSⅡA均可以加剧UVA诱导的细胞活力的下降，且其程度与TSⅡA浓度相关.与仅UVA照射的细胞相比，经8.5µmol/L TSⅡA处理过的细胞，其活力没有显著变化；经17.0µmol/L TSⅡA处理过的细胞，其活力下降了20%；经34.0µmol/L TSⅡA处理过的细胞，其活力更是下降了33%.综上所述，无论是经高剂量还是低剂量UVA照射，TSⅡA都可以进一步使细胞活力下降，二者具有叠加效应.2.4 UVA对MAPK通路蛋白表达水平的影响HaCaT细胞经不同剂量的UVA照射后30 min提取总蛋白，并用蛋白印迹法测定目标蛋白表达水平，结果如图4所示.可以看出，细胞经UVA照射后P-p38和P-JNK的表达水平显著上升，且二者的表达水平与照射剂量呈正相关.在2 J/cm2的UVA作用下，P-p38/βactin约为2.3，P-JNK/β-actin约为3.0；在20 J/cm2的UVA作用下，P-p38/β-actin约为3.3，P-JNK/β-actin约为3.8.不同剂量的UVA照射对HaCaT细胞的P-Erk表达没有显著影响，这与文献［14］中的报道一致，即总p38、总JNK和总Erk在细胞经不同剂量的UVA照射后均无明显变化.2.5 TSⅡA和UVA共同对MAPK通路蛋白中P-p38和P-JNK表达水平的影响HaCaT细胞经不同浓度TSⅡA处理24 h后，部分组细胞用2 J/cm2的UVA照射，30min后对所有组细胞提取总蛋白，并用蛋白印迹法测定目标蛋白表达水平.TSⅡA和UVA共同作用对P-p38和P-JNK表达水平的影响如表1所示.由表1可以看出，HaCaT细胞在用不同浓度TSⅡA培养24 h而未经UVA照射的情况下，其P-p38和P-JNK的表达水平无明显变化，总p38和总JNK基本不变.这说明TSⅡA在正常情况下不会引起p38和JNK的激活，不会介导HaCaT细胞的凋亡.TSⅡA的预处理使照射UVA的细胞中P-p38和P-JNK的表达水平均有不同程度的提高，其中P-p38表达水平随着TSⅡA浓度的提高而上升，而P-JNK表达水平则在较高的TSⅡA浓度下急剧上升.当TSⅡA和UVA共同处理组中TSⅡA的浓度达到34.0µmol/L时，通路蛋白中P-p38和P-JNK的表达水平均较高，其中P-p38/β-actin和P-JNK/β-actin分别为4.4和38.8，与仅UVA照射组（P-p38/β-actin和P-JNK/β-actin分别为2.0和8.8）相比，二者的表达水平分别提高约2.2和4.4倍.UVA使HaCaT细胞活力下降是因为其诱导了细胞凋亡，原因有以下几点：①UVA的辐射引起DNA的损伤，导致Fas上调和FasL（fas ligand）表达增加，其机制可能与JNK相关.Fas是一种死亡受体，通过结合配体FasL而激发细胞凋亡［15］.②UVA刺激产生的ROS（reactive oxygon species）可以直接激活MAPK信号通路［16］.③UVA可以直接激活细胞膜上的生长因子受体和死亡受体，激活的受体可以进一步介导下游的癌变或凋亡通路，最主要的是MAPK信号通路［17］.低浓度的TSⅡA在正常情况下对细胞活力无影响，只有达到一定浓度（85µmol/L）时才会对细胞活力产生影响，这表明在一定浓度范围内，TSⅡA添加到皮肤保护用品中对皮肤是比较安全的.TSⅡA加剧了UVA诱导的HaCaT细胞活力下降可能是因为其促进了UVA诱导的细胞凋亡.MAPK信号通路是真核生物信号传导网络中的重要途径之一，其主要有3个亚族：p38，JNK和Erk，它们分别或共同对细胞的增殖和凋亡产生作用.Erk包括p42和p44两个亚基（见图4（c）），主要被生长和分化因子刺激而激活；JNK包括p46和p54两个亚基（见图4（b）），除了生长因子外，外界的刺激也会使其激活，比如紫外线和炎症因子；p38主要被外界的刺激所激活［18］.一些学者在P-12细胞株中发现凋亡过程与MAPK信号通路密切相关，p38和JNK被磷酸化而激活会导致细胞的凋亡，而Erk的激活则不会导致细胞凋亡，反而会使细胞存活下来［19］.激活后的P-p38和P-JNK由胞质转位到核内分别介导转录因子Max，CREB（cAMP-response element binding protein）和c-jun的活化，共同介导转录因子ATF2（activating transoription factor 2），Elk1的活化，最终引起细胞的凋亡［20］.被UVA损伤但没有凋亡的细胞会有很大可能转变为恶性细胞，促进UVA损伤的细胞凋亡可能是治疗皮肤癌的有效手段之一.本研究结果表明，UVA作为外界刺激，可以有效地提高p38和JNK磷酸化水平，但不会导致MAPK通路蛋白总量的增加或减少.因此可以推断，在MAPK通路蛋白总量不变的情况下，UVA的照射导致细胞活力下降是由于UVA诱导细胞凋亡导致的直接结果［21］.TSⅡA使照射UVA的HaCaT细胞进一步凋亡，并致使细胞中的p38和JNK磷酸化水平大大提高，这说明TSⅡA促进UVA诱导的HaCaT细胞凋亡是通过p38和JNK及其下游信号通路介导实现的.已有研究表明，TSⅡA诱导胃癌细胞MKN-45凋亡可能是通过抑制bcl-2的表达和促进p53的表达来实现的［22］.何金涛等［23］也发现TSⅡA可以通过上调p53，p21的表达及下调CDKN2（cyclin dependent kinase inhivitor）的表达来抑制人肺腺癌细胞株SPCA-1增殖.这些抑癌基因和促进凋亡基因的表达也严格受p38和JNK的调控.此机制的发现对TSⅡA关于肿瘤的治疗作用具有重要意义，但是TSⅡA作用于损伤或者癌变细胞的初始靶点需要在MAPK信号通路上游继续寻找.本研究为TSⅡA用于皮肤癌的治疗提供了新方法和一定的理论依据.虽然TSⅡA可以进一步提高UVA诱导的p38和JNK的磷酸化水平，但是尚不能完全确认MAPK通路是TSⅡA促进UVA诱导角质形成细胞凋亡的介导信号，还需要用通路抑制/敲除实验来进一步验证.【相关文献】［1］Diepgen T L，Mahler V.The epidemiology of skin cancer［J］.British Journal of Dermatology，2002，146（S61）：1-6.［2］Silverberg E，Boring C C，SQuires T S.Cancer statistics，1990［J］.CA：A Cancer Journal for Clinicians，1990，40（1）：9-26.［3］Armstrong B K，Kricker A.The epidemiology of UV induced skin cancer［J］.Journal of Photochemistry and Photobiology B：Biology，2001，63（1/2/3）：8-18.［4］Kwa R E，Campana K，Moy R L.Biology of cutaneous squamous cell carcinoma ［J］.Journal of the American Academy of Dermatology，1992，26（1）：1-26.［5］Maverakis E，Miyamura Y，Bowen M P，et al.Light，including ultraviolet［J］.Journal of Autoimmunity，2010，34（3）：J247-J257.［6］郭坤，赵刚，武志峰，等.UVA对人角质形成细胞的氧化损伤作用［J］.齐鲁医学杂志，2003，18（3）：239-240.［7］陈斌，毕志刚.紫外线辐射对皮肤细胞骨架影响的蛋白质组学研究［J］.临床皮肤科杂志，2009，38（4）：141-144.［8］Cao E H，Liu X Q，Wang J J，et al.Effect of natural antioxidant tanshinoneⅡ-A on DNA damage by lipid peroxidation in liver cells［J］.Free Radical Biology and Medicine，1996，20（6）：801-806.［9］Jiang W，Zhao Y，Zhao B，et al.Studies on the scavenging effect of tanshinone on lipid free radical of cardiac sarcoplasmic reticulum during peroxidation［J］.Acta Biophysica Sinica，1994，10（4）：685-689.［10］Yuan S L，Wei Y Q，Wang X J，et al.Growth inhibition and apoptosis induction of tanshinoneⅡ-A on human hepatocellular carcinoma cells［J］.World Journal of Gastroenterology，2004，10（14）：2024-2028.［11］Wang X，Wei Y，Yuan S，et al.Potential anticancer activity of tanshinoneⅡA against human breast cancer［J］.International Journal of Cancer，2005，116（5）：799-807.［12］Jang S I，Kim H J，Kim Y J，et al.TanshinoneⅡA inhibits LPS-induced NF-kB activation in RAW 264.7 cells：possible involvement of the NIK—IKK，ERK1/2，p38 and JNK pathways［J］. 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丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用

ＣＨＯＰｍＲＮＡ在给以Ａｇ１培养４８ｈ表达较正常培养细胞显著增加，而同时给以０．５／，ｇ／ｍＬＴＳＡ可以抑制表达增加（Ｐ＜Ｏ．０５），
当ＴＳＡ为１“ ｇ／ｍＬ时可以抑制ＡｇⅡ诱导的心肌细胞系Ｈ９ｃ２的凋亡，以及ＡｇⅡ诱导
等等。
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１．２细胞培养大鼠心肌细胞系Ｈ９ｃ２在含有１Ｏ胎牛血清，１００Ｕ／ｍＬ青霉素和１００ｇ／ｍＬ四环素的ＤＭＥＭ培养基中培
丹参是传统中药中重要的活血化瘀药物之一，各种丹参制剂在中国广泛地应用于治疗心绞痛、心肌梗死及其他心血管疾病，并且取得了很好的疗效。几十年来，中国科学家们在临床和基础医学方面对丹参进行了大量的研究，丹参及其组分具有扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、清除缺血性心肌疾病中的自由基
Ｈ９ｃ２在ＣＯ２孵箱３７
口Ｃ常规培养，同步化后进行实验。细胞分为４组。正常对照组。Ａｇ１１组：１０ｍｏｌ／Ｌ的ＡｇⅡ孵育４８ｈ。ＡｇⅡ＋Ｏ．５￣ｇ／ｍＬＴＳＡ组同时加入１０一ｍｏｌ／Ｌ的ＡｇⅡ和０．５＞ｇ／ｍＬＴＳＡ培养４８ｈ。Ａｇ Ⅱ＋１／￣ｇ／ｍＬＴＳＡ组同时加入１０ｍｏｌ／Ｌ的Ａｇ Ⅱ和１／，ｇ／ｍＬ

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的安全性评价

万方数据万方数据·４７６·匡堂婴塞生堂握呈Ｑ！Ｑ生！旦箜堑鲞筮！塑』丛鲤里！！§圈堕：！丛：垫：丛旦：主：丛型：垫！Ｑ图１耳缘静脉病理切片（ＨＥｘ１０）ＦｉｇｕｒｅｌＰａｔｈｏｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｏｆｅａｒｖｅｉｎ（ＨＥ×１０）Ａ、Ｂ、Ｃ：为给药侧近心端１．３、２．６和４．０ｅｍ；Ｄ、Ｅ、Ｆ：为对照侧近心端１．３、２．６和４．０ｃｍ２．３肌肉刺激试验兔股四头肌分别注射丹参酮Ⅱ。

磺酸钠注射液和等渗氯化钠溶液２４ｈ后，肉眼观察及镜检４例受试侧和对照侧无明显差异，注射处及周围血管均无扩张，充血及出血水肿，肌肉未见变性和坏死，肌肉细胞间未见炎性浸润。

４只新西兰兔给药侧肌肉反应级之和为０，总和＜１０，最大值和最小值的差值＜２。

２．４过敏试验丹参酮Ⅱ。

磺酸钠注射液致敏后第１４天和第２ｌ天激发，观察３０ｍｉｎ受试动物未见任何异常反应，阴性对照组亦未见任何异常，阳性对照组所有动物均出现呼吸困难，痉挛，抽搐直至死亡等严重过敏反应，表明在本试验条件下丹参酮Ⅱ。

磺酸钠注射液（４ｍｇ／ｍ１）不引起豚鼠全身主动过敏反应。

３讨论丹参酮Ⅱ。

及其钠盐临床主要用于心脑血管系统，神经系统，抗肿瘤，抗菌治疗以及烧伤创面治疗，抑制疤痕增生等，药理作用已有广泛报道【５娟Ｊ，但对其安全眭的报道不多，加上近年来中药注射剂的不良反应报道较多，特别是过敏反应，所以我们对丹参酮Ⅱ。

磺酸钠注射液的溶血、刺激、过敏性进行研究。

过敏实验中我们选用最敏感的壮龄豚鼠…，结果表明丹参酮Ⅱ．磺酸钠注射液在临床使用浓度下（１ｍｒ，／ｍ１）为等渗等张溶液，不引起溶血或红细胞凝集；以等效剂量（４ｍｇ／ｋｇ）每天１次静脉注射，连续３ｄ，对兔耳缘静脉无明显刺激性改变；对兔股四头肌注射局部无刺激作用；不引起豚鼠全身过敏反应，表明丹参酮Ⅱ。

磺酸钠注射液符合注射液的安全性要求，可供临床注射使用。

【参考文献】［１］钱名垄，杨保津，顾文华，等．丹参有效成份的研究［Ｊ］．化学学报，１９７８，３６（３）：２０５．［２］陈奇．中药药理研究方法学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９９６：１６８—１６９．［３］钱之玉．药理学实验与指导［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，２００３：１５３．［４］徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［Ｍ］．第２版，北京：人民卫生出版社，１９９１：２２４．［５］蔡辉，赵智明，修春英，等．丹参酮Ⅱ。

腹膜透析相关性腹膜纤维化机制的研究进展

腹膜透析相关性腹膜纤维化机制的研究进展叶寅寅;赵洪静;徐海红【摘要】At present,peritoneal dialysis has been widely promoted in clinical,and peritoneal dialysis-related perito-neal fibrosis is the most important reason for the withdrawal of peritoneal dialysis in patients with end-stage renal disease, therefore,it is important to study the mechanism of peritoneal dialysis-associated peritoneal fibrosis. The pathogenesis of peritoneal fibrosis involves renin-angiotensin-aldosteronesystem,abnormal expression of transforming growth factor β, vas-cular endothelial growth factor and connective tissue growth factor,abnormal aggregation of extracellular matrix, peritoneal dialysate high glucose toxicity and epithelial-mesenchymal transition,therefore the effective prevention and treatment can improve the quality of life,increase peritoneal dialysis efficiency and has great clinical significance.%目前腹膜透析已在临床上广泛推广,腹膜透析相关性腹膜纤维化是终末期肾病患者退出腹膜透析最重要的原因,因此研究腹膜透析相关性腹膜纤维化的机制具有重要意义.腹膜纤维化发病机制涉及肾素-血管紧张素-醛固酮系统,转化生长因子β、血管内皮生长因子和结缔组织生长因子异常表达,细胞外基质异常聚集,腹膜透析液的高糖毒性以及上皮间质转化等多个途径,对其有效防治能改善该类患者的生活质量、提高腹膜透析效能具有重要临床意义.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)021【总页数】5页(P4262-4266)【关键词】腹膜透析;腹膜纤维化;上皮间质转化【作者】叶寅寅;赵洪静;徐海红【作者单位】皖南医学院弋矶山医院肾内科,安徽芜湖241000;皖南医学院弋矶山医院肾内科,安徽芜湖241000;皖南医学院弋矶山医院肾内科,安徽芜湖241000【正文语种】中文【中图分类】R459.5随着慢性肾脏病发病率的逐年升高，腹膜透析已在临床上广泛推广，腹膜透析依赖于人体腹膜的半透膜特性，通过弥散、对流和超滤分别对溶质和水分加以清除[1]。

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞转分化及致纤维化因子表达的影响

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２・０
医学研究生学报２１０２年１第２月５卷第１期
ＪＭｅｏｇａＶ１２，ｏ１Ｊｎａｙ２１ｄＰｓｒ，ｏ．５Ｎ．，ａｕｒ，０２酮ＨＡ对腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞转分化
２００，ｉｎｓ，ｈｎ）１０８ＪａｇｕＣｉａ
［ｂｔｃ］ＯｊｔｅＰｒｎａｆｒｉｉａｃｍｏｏｐｃｔｎｏｌｇｅｅｔｅｌｉｙｓ（ＤｓｅｓｈＡｓａｔｒｂｃｖｅｔｅｌｂｏｓｓｏｍｎｃｌａｏｆｏ —ｒｐｒｏａｄｌｉＰ）ａｗｌａｔｅｉｉｏｓｉｍｉｉｎｔｍｉｎａｓｌｅ
ＥｅｔｏａｓｉｏｅＩＡｏｐｔｅａ－ｏｂｏｌｓａｓｉｅｅｔｔｎａｄｆｒｇｎｃｃｔｋｎｘｒｓｆｃｓｆｎｈｎｎＩｎｅｉｌｌＴｈｉｍｙｆｒｂａｔｔｎｄｆｒｎｉｉｎｂｏｅｉｙｏｉｅｅｐｅ－ｉｒａｏｉｓｎｏｕｎｐｒｏｅｌｓｔｅａｅｌｉｄｃｄｂｅｉｎａｉｌｓｕｄｉｆｈｍａｅｉｎａｏｈｌｌｌｕｅｙｐｒｔｅｌａｉｆｉｏｔｍｅｉｃｓｎｏｄｙｓｌ
ｄａｓｕｄＰＦ诱导下体外培养的人腹膜间皮细胞（ｕａｅｔｎａｍｓｔｅａｃｌ，ＭＣ）ｉｙｉｆｉ，Ｄ）ｌｓｌｈｍｎｐｒｏｅｌｅｏｈｌｌｅｓＨＰｓ纤维化及其相关因子表达ｉｉｌ
的影响。方法
选择非尿毒症、非糖尿病择期手术患者的大网膜作为ＨＭＣＰｓ的来源，将培养的细胞随机分成４组：照组、对

丹参酮ⅡA对腹膜透析大鼠模型伴发腹膜纤维化的预防干预作用

Ｌ）、组高剂量丹参酮 Ⅱ （Ａ丹参酮 Ⅱ Ａ终浓度为１０ｍ・）４组（０ｇＬ组每组各１例）０进行干预。８周后处死
大鼠，并将其腹膜组织样本收集后进行观察分析。运用免疫组织化学检测转化生长因子。ＴＦ／）结卢（Ｇ－和３
ｐｅｓｎｏｔｎｆｍｎｏｔｃｒ１ＴＦ）ａｄｃｎｅｔｅｔｓｅｇｏｔｃｒ（ＴＦｎｐｒｔｌｅｉｎ — ｒｓｏｆｒｓｒｉｇｇｗｈｆｔ ‘ （Ｇ一１ｎｏｎｃｖｓｕｗｈｆｔＣＧ）ｉａｉａｐｒｏｅｉａｏｒａｏ卢ｉｉｒａｏｅｔ
ｇｏｐ．Ｅｇｔｅｋｔ，ｈｔｗｒｓｃｆｅｎｅｔｎａｔｓｅｓｍｌｓｅｅｃｌｃｄｆｎｌｓ．Ｔｅｅ— ｒｕ）ｉｅｓａｒｔｒｓｅｅａｒｃｄａｄｐｒｏｅｌｉｕａｐｅｒｏｅｔｒａｉｈｘｈｗｌｅｅａｉｉｉｓｗｌｅｏａｙｓ
［ｓｒｃ］ＯｂｅｔｅｏｉｖｓｇｔｔｅｅｅｔｏｔｓｉｎＡｏｅｔｅｌｆｒｉｉａｐｒｏｅｉｌｉＡｂｔａｔｊｃｉ：ＴｎｅｔａｈｆｃｆａｈｎｅＩｎｐｒｏａｂｏｓｎｅｔａｄａｓｖｉｅｆｓｎｏＩｉｎｓｉｎｌｙｓ
缔组织生长因子（ＴＦ在壁层腹膜中的表达。同时通过逆转录聚合酶链反应、疫印迹法对大网膜上达进行检测。结果：Ｇ一。ＴＦｍＮ丹参酮 Ⅱ Ａ明显抑制了含４２％葡萄糖的ＰＦ引起．５Ｄ

丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及TGF-β_1表达的影响

［ｂｔａｔＡｓｃ］ＯｂｅｔｅＴｖｓｇｔｔｅｅｅｔｏｎｈｎｎＡｏｅａｅｔｎｒｈｌｙａｄｔｅｅｐｅ— ｒｊｃｉ：ｏｉｅｔａｅｈｆｃｓｆａｓｉｅＨｎｔｌｒｉｓｉｍｏｏｇｎｘｒｓｖｎｉｆｔｏｈｔａｏｎｐｏｈｓｎｏｔｓｒｉｇｇｗｈｆｃｒＴＦ一１ｆｅｔｅｅｂａｅｔｏｅｏｅｔｅｉｙｉｉｆｒｆｍｎｒｔｔ（Ｇ）ｐｒｏａｍｍｒｓｎａａｍｄｌｆｒｏａｄａｓ．Ｍｅｈｄ：ｏａｏｎｏａｏｏｐｉｎｌｎｉｒｐｉｎｌｌｓｔｏｓ
１０２０ｍｇＬ的４２％的ＰＳ腹腔注射２。于实验第３０、０・．５Ｄ０ｍｌ０天，壁层腹膜行光镜检查，用免疫组织取并化学的方法检测壁层腹膜ＴＦ的表达情况。结果：ＥＭａｓｎ染色显示，ＰＳ干预下腹膜厚度显著增Ｇ－Ｈ、ｓｏ在Ｄ厚，原沉积显著增多。与ＰＳ组比较，胶Ｄ丹参酮各组有不同程度腹膜厚度减少，原沉积减少。腹膜间皮细胶胞在ＰＳ干预下分泌ＴＦ卢较对照组显著增加，ＤＧ。丹参酮各组ＴＦ卢分泌与ＰＳ组比较均有显著下降。结Ｇ一Ｄ
ｅｃｒｕｎｅｄｉｔａｓｌｔｎｖｌｍｆ０ｍｅｊｃｏｒ０ｄｙ．Ｔｅ，ｉｏｇａａａｙｅ，ｎａｈｇｐｎｈｓｌｉｎｓｓｉ— ｏｌｎｉａｏｕ２ｐｉｉｏ３ｔｏｃｌｌ

丹参酮ⅡA诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的作用及机制

丹参酮ⅡA诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的作用及机制丹参酮ⅡA诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的作用及机制【引言】卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率逐年上升，给女性健康带来了严重威胁。

因此，寻找有效的治疗手段成为亟待解决的问题之一。

近年来，传统中药在肿瘤治疗中的应用逐渐受到关注，其中丹参酮ⅡA作为一种有效成分，其抗癌效果备受关注。

【作用】研究表明，丹参酮ⅡA在人卵巢癌A2780细胞系中能够诱导细胞凋亡，起到抗癌的作用。

实验发现，在给予一定浓度的丹参酮ⅡA后，A2780细胞出现了明显的凋亡现象，包括细胞核凝聚、染色体断裂和细胞膜破裂等。

此外，丹参酮ⅡA还通过调节细胞周期和促进细胞凋亡相关蛋白的表达，从而抑制了A2780细胞的生长和增殖。

【机制】1. 丹参酮ⅡA通过调节细胞周期促进细胞凋亡。

丹参酮ⅡA能够抑制A2780细胞的G0/G1期进程，并诱导细胞进入S期和G2/M期，从而加速细胞凋亡进程。

研究发现，丹参酮ⅡA通过抑制细胞周期相关蛋白的表达，如cyclin D1、CDK4等，调控了细胞周期的进程，从而促使细胞凋亡的发生。

2. 丹参酮ⅡA调节细胞凋亡相关蛋白的表达。

丹参酮ⅡA 能够抑制细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2、Bcl-xl和Bcl-w的表达，同时促进细胞凋亡促进蛋白Bax和caspase-3的表达。

Bcl-2蛋白家族在调控细胞凋亡中起到关键作用，抑制Bcl-2蛋白家族的表达能够促进细胞凋亡的发生。

丹参酮ⅡA还可以通过激活caspase-3，促进凋亡的进行。

3. 丹参酮ⅡA抑制细胞血管生成。

研究发现，丹参酮ⅡA 能够抑制A2780细胞的血管生成，从而阻断营养物质的供应，抑制肿瘤生长。

丹参酮ⅡA通过下调血管生成相关因子VEGF 和bFGF的表达，减少肿瘤血管的生成，从而达到抑制肿瘤生长的作用。

【结论】综上所述，丹参酮ⅡA能够通过调节细胞周期、调节细胞凋亡相关蛋白的表达和抑制细胞血管生成等方式，诱导人卵巢癌A2780细胞的凋亡。

丹参酮ⅡA对Adriam诱导的人肾小球系膜细胞凋亡的保护作用

丹参酮ⅡA对Adriam诱导的人肾小球系膜细胞凋亡的保护作用李伟;张莹涛;高娜【摘要】目的探究丹参酮ⅡA(TSⅡA)对阿霉素(Adriam)诱导的肾小球系膜细胞HMCL凋亡的作用.方法用不同浓度的TSⅡA处理HMCL细胞,确定安全用药范围;将细胞随机分为HMCL组、Adriamycin组、Adriam+TSⅡA(5μM)组、Adriam+TSⅡA(10μM)组和Adriam+TSⅡA(20μM)组.除HMCL组外,其余组均用Adriamycin处理细胞,Adriam+TSⅡA(5,10,20μM)组同时加入5、10、20μM 的TSⅡA处理细胞,用CCK8法检测细胞增殖,流式和Hoechst染色检测细胞凋亡,Western blot检测Caspase-3和Caspase-9的表达.结果与HMCL组比较,Adriamycin组细胞增殖速度明显降低;与Adriamycin组比较,Adriam+TSⅡA(5,10,20μM)组细胞增殖速度明显升高;同时,Adriamycin组细胞凋亡率与HMCL组比较明显升高,Adriam+TSⅡA(5,10,20μM)组细胞凋亡率明显低于Adriamycin组;此外,Adriam能显著促进HMCL细胞Caspase-3和Caspase-9表达,TSⅡA能显著减弱Adriam促进Caspase-3和Caspase-9表达的作用.结论TSⅡA能通过抑制凋亡相关蛋白的表达抑制Adriam诱导的肾小管系膜细胞凋亡.【期刊名称】《局解手术学杂志》【年(卷),期】2018(027)009【总页数】5页(P629-633)【关键词】丹参酮IIA;肾小球系膜细胞;凋亡;阿霉素【作者】李伟;张莹涛;高娜【作者单位】延安市人民医院肾内科,陕西延安716000;延安市人民医院肾内科,陕西延安716000;延安市人民医院肾内科,陕西延安716000【正文语种】中文【中图分类】R692慢性肾病是一类肾功能进行性退化的疾病[1-2]。

丹参酮ⅡA磺酸钠通过增强腹膜纤溶系统活性降低大鼠术后腹膜粘连发生

丹参酮ⅡA磺酸钠通过增强腹膜纤溶系统活性降低大鼠术后腹膜粘连发生林思;秦飞;宋路瑶;侯楚祺;侯连兵【摘要】目的评价丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对实验性大鼠术后腹膜粘连的防治作用并探讨其发生机制.方法构建大鼠术后腹膜粘连模型.75只大鼠随机分为模型组、STS高剂量组、中剂量组、低剂量组和空白组,每组15只;STS高、中、低组给药剂量分别为20、10、5 mg/kg STS,模型对照组给予等体积生理盐水,腹腔注射给药,连续7d.各组大鼠7d后处死,粘连分级评价,ELISA检测组织中tPA/PAI-1的水平,发色底物法检测腹腔液中tPA活性,IHC半定量检测腹膜组织中TGF-β1和Collgen-I的表达;伤口愈合强度实验考察STS是否影响伤口愈合.结果与模型组相比,STS高、中、低剂量组均降低腹膜粘连的发生;腹腔液中tPA活性显著提高,组织中tPA/PAI-1蛋白水平显著上升,TGF-β1和Collgen-I蛋白表达量显著降低.同时腹腔注射STS不会影响伤口愈合.结论腹腔注射STS可有效防治术后粘连的发生,其作用机制可能通过降低TGF-βl表达,下调其对TGF-β/Smads通路激活,降低下游PAI-1水平,从而上调腹膜纤溶系统活性实现的.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2016(036)002【总页数】5页(P260-264)【关键词】丹参酮ⅡA磺酸钠;术后腹膜粘连;tPA活性;tPA/PAI-1【作者】林思;秦飞;宋路瑶;侯楚祺;侯连兵【作者单位】南方医科大学南方医院药学部,广东广州 510515;南方医科大学南方医院药学部,广东广州 510515;南方医科大学南方医院药学部,广东广州 510515;南方医科大学药学院,广东广州 510515;南方医科大学南方医院药学部,广东广州510515【正文语种】中文腹、盆腔疾病术后粘连是临床剖腹术后常见并发症，其发生率高达90%以上［1］，是腹部慢性疼痛、腹胀、女性不孕和肠梗阻等的主要原因［2］。

腹膜透析液添加丹参酮对大鼠氧化应激状态的影响

腹膜透析液添加丹参酮对大鼠氧化应激状态的影响黄珮【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2010(023)008【摘要】目的近期研究发现,晚期糖基化终产物(advanced glycation end products, AGE)参与了腹膜透析(peritoneal dialysis, PD)相关性腹膜损伤的过程.文中探讨在PD液中添加丹参酮注射液对PD大鼠腹膜局部保护作用及全身氧化应激状态的影响.方法 30只SD雄性大鼠(180-2008)随机分为对照组、PD组、丹参酮组.于实验第30天测定3组大鼠其透出液及血清中的AGE水平,同时测定并比较氧化应激指标谷胱甘肽(glutathione,GSH),丙二醛(malondialdehyde,MDA),总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutas,T-SOD).结果 PD液中添加丹参酮注射液可减缓单纯PD导致的透析液及血清中AGE、MDA水平的升高及GSH、T-SOD水平的降低(P<0.05).结论通过在PD液中添加丹参酮可以改善大鼠PD腹腔局部及全身的氧化应激状态.【总页数】4页(P818-821)【作者】黄珮【作者单位】210001,南京,南京大学医学院南京市红十字医院【正文语种】中文【中图分类】R656.4【相关文献】1.丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的氧化应激及腹膜间皮细胞凋亡因子表达的影响[J], 夏阳阳;蒋春明;孙琤;于立杰;张苗2.丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及TGF-β1表达的影响 [J], 蒋春明;陶娜娜;孙琤;张苗3.丹参酮IIA对腹膜透析液诱导的大鼠腹膜组织学变化及CTGF表达的影响 [J], 陶娜娜;蒋春明;张苗;孙琤4.腹膜透析液中添加丹参酮对大鼠氧化应激状态的影响 [J], 张莉;田野;于心珂5.腹膜透析液添加葛根素对氧化应激状态的影响 [J], 孙琤;张苗;蒋春明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

丹参酮ⅡA对脂多糖引起腹膜间皮细胞损伤的保护作用

丹参酮ⅡA对脂多糖引起腹膜间皮细胞损伤的保护作用张慧;宋宇【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2016(28)3【摘要】本研究探讨了丹参酮ⅡA对脂多糖诱导大鼠腹膜间皮细胞(rat peritoneal mesothelial cells,RPMCs)炎症反应、氧化应激及其损伤的影响.采用原代培养大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs),分为正常对照组、5 mg/L LPS作用RPMC 24 h组、5 mg/L LPS分别与40、80和160 μmol/L丹参酮ⅡA共同作用24 h 组.MTT测定各组RPMCs增值率.ELISA法检测细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达.流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)表达.RT-PCR法检测各组FN、COL Ⅰ、Bcl-2和Bax mRNA的表达.研究发现丹参酮ⅡA+LPS组的RPMCs的增殖率明显高于LPS组(P＜0.05).丹参酮ⅡA可降低LPS刺激下RPMCs中IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS和MDA的表达,同时FN、COLⅠ、Bax mRNA表达也明显下降.但SOD水平和Bcl-2 mRNA表达明显升高,与LPS组相比.实验结果显示,丹参酮ⅡA具有抑制LPS所致的氧化应激及炎性反应,减少细胞凋亡及抑制纤维化的作用,进而起到对RPMCs的保护作用.【总页数】5页(P420-423,340)【作者】张慧;宋宇【作者单位】新乡医学院药学院药理学教研室,新乡453000;新乡医学院药学院药理学教研室,新乡453000【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.脑缺血再灌注损伤引起的线粒体功能障碍及丹参酮ⅡA的保护作用研究 [J], 支文煜2.阿魏酸钠对脂多糖引起的大鼠海马损伤的保护作用的信号传导机制 [J], 闫恩志;范莹;隋海娟;刘婉珠;刘卓3.白芍总苷对卡介苗加脂多糖引起的小鼠免疫性肝损伤的保护作用 [J], 王华;魏伟;岳莉;汪倪萍;桂双英;吴丽;孙妩弋;徐叔云4.丹参酮ⅡA磺酸钠注射液改善脂多糖-高糖腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞损伤的实验研究 [J], 周瑶;高坤;夏平;李蔚;周占威;孙敏捷;孙伟;王立军;何伟明5.外源性硫化氢对高糖诱导人腹膜间皮细胞氧化应激损伤的保护作用 [J], 陈晶晶;吴银锋;石梅兰;李永贵;谭华清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液改善脂多糖-高糖腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞损伤的实验研究

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液改善脂多糖-高糖腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞损伤的实验研究周瑶;高坤;夏平;李蔚;周占威;孙敏捷;孙伟;王立军;何伟明【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2017(033)006【摘要】OBJECTIVE To study the effect and mechanism of sulfotanshinone ⅡA sodium(STS)in human peritoneal mesothelial cells(HPMCs)injury and peritoneal fibrosis caused by lipopolysaccharide-peritoneal dialysis solution(LPS-PDS). METHODS HPMCs was primary cultured from patients undergoing peritoneal surgery.The cells were incubated with LPS-PDS to mimic the peritoneal dialysis conditions in vitro.After treatment of cells with STS,cellular viability was tested and mRNA were collected and subjected to RT-PCR to evaluated the level of TGF-β1,TIMP-1 and MMP-9.RESULTS Incubation HPMCs with LPS-PDS elicited cell injury.STS attenuated LPS-PDS-induced cell injury by improvement of cellular viability. Furthermore,STS inhibited HPMCs fibrosis as evidenced by suppression of TGF-β1 and TIMP1 induced by LPS-PDS and in-creasing MMP-9 mRNA level.CONCLUSION STS protects HPMCs against LPS-PDS-induced cell injury.Moreover,STS re-tards HPMCs fibrosis by decreasing TGF-β1 and TIMP1 mRNA level and increasing MMP-9 mRNA.%目的评估丹参酮ⅡA磺酸钠注射液(STS)减轻脂多糖-高糖腹膜透析液(LPS-PDS)诱导的人腹膜间皮细胞(HPMCs)损伤以及抑制腹膜纤维化的作用.方法 HPMCs 来自腹腔外科手术患者腹膜细胞的原代培养.以 LPS-PDS 诱导的HPMCs损伤为模型,通过观察 STS对HPMCs增殖活性、转化生长因子-β(TGF-β1)分泌、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP1)等的影响,阐明 STS对 HPMCs的保护作用及抗腹膜纤维化的机理.结果 LPS-PDS可造成 HPMCs损伤,表现为活性下降,STS可明显减轻LPS-PDS对 HPMCs的毒性,改善其造成的细胞活性下降,减轻LPS-PDS诱导的TGF-β1、TIMP1 mRNA上调和MMP-9 mRNA表达下降.结论STS可以减轻LPS-PDS诱导的 HPMCs损伤,可能是通过调节TGF-β1、TIMP1、MMP-9等蛋白的表达,发挥保护腹膜细胞和拮抗腹膜纤维化的作用.【总页数】5页(P603-607)【作者】周瑶;高坤;夏平;李蔚;周占威;孙敏捷;孙伟;王立军;何伟明【作者单位】南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京 210023;南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029;南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京 210023;南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京 210023;中国药科大学药学院,江苏南京 210011;中国药科大学药学院,江苏南京 210011;南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029;中国中医科学院广安门医院,北京 100055;南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.黄芪甲苷对高糖腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞表达致纤维化因子的影响 [J],杨劲松;李正红;张旭;盛梅笑2.丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的氧化应激及腹膜间皮细胞凋亡因子表达的影响[J], 夏阳阳;蒋春明;孙琤;于立杰;张苗3.丹参酮ⅡA对腹膜透析液诱导的人腹膜间皮细胞转分化及致纤维化因子表达的影响 [J], 邵秋媛;蒋春明;孙琤;于立杰;张苗4.甲泼尼龙对高糖腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞表达纤维化相关细胞因子的影响[J], 蔡家驹;戴卫波;吴惠妃;叶秋明;萧俊祺5.丹参酮ⅡA磺酸钠预处理对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞fractalkine表达的影响 [J], 周平;曾得康;李法琦;张彬;殷菱因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

丹参酮ⅡA通过调节自噬小体对ox-LDL诱导内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

丹参酮ⅡA通过调节自噬小体对ox-LDL诱导内皮细胞氧化应激损伤的保护作用张妮;曹慧敏;宋囡;杨关林;贾连群;张哲【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2017(25)3【摘要】目的基于自噬小体形成信号通路探讨丹参酮ⅡA对ox-LDL诱导内皮细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。

方法体外培养EA.hy926细胞,随机分为正常组、模型组、丹参酮ⅡA组、丹参酮ⅡA+模型组、3-MA组、模型+3-MA组、丹参酮ⅡA+模型+3-MA组。

比色法检测各组细胞氧化应激损伤丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western blot技术检测细胞自噬小体形成信号通路相关蛋白表达情况。

结果与正常组比较,模型组MDA含量增高(P<0.01),SOD活力降低(P<0.01),LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量增多(P<0.01);3-MA组LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量无明显变化(P>0.05)。

与模型组比较,丹参酮ⅡA+模型组细胞中MDA含量降低(P<0.01),SOD活力增高(P<0.01),LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量增多(P<0.01);模型+3-MA组MDA含量增高(P<0.01),SOD活力降低(P<0.01),LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量减少(P<0.01)。

与丹参酮ⅡA+模型组比较,丹参酮ⅡA+模型+3-MA组MDA含量增高(P<0.01),SOD活力降低(P<0.01),LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ蛋白含量减少(P<0.01)。

与正常组比较,模型组Atg3、Atg4b、Atg7蛋白表达水平明显增高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,丹参酮ⅡA+模型组Atg3、Atg7、Atg5-Atg12蛋白表达水平明显增高(P<0.05,P<0.01);与丹参酮ⅡA+模型组比较,丹参酮ⅡA+模型+3-MA组Atg3、Atg7、Atg5-Atg12蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。

丹参酮ⅡA 对高糖透析诱导小鼠腹膜纤维化的影响

丹参酮ⅡA 对高糖透析诱导小鼠腹膜纤维化的影响方琼如;王芳;卢耀文;卢天彩【期刊名称】《海峡药学》【年(卷),期】2014(000)011【摘要】OBJECTIVE To study the effect of tanshinone ⅡA ( TⅡA ) on peritoneal fibrosis ( PF ) in mice.METHODS50micewererandomlydividedinto5groups:blankcontrolgroup,modelgroup,T ⅡAlowdos-age group,TⅡA medium dosage group,TⅡA high dosage group(n=10 in each group).Intraperitoneal injection of peritoneal dialysate were performed in model group and TⅡA groups for 30d.TⅡA groups were also administered with various dosages of tanshioneⅡA sulfonic Sodium.Afterwards,peritoneal tissue,serum and dialysis fluid were collect-ed to detect the contents of hydroxyproline,the glucose concentration ratio of dialysis fluid that dialysed for 1hr to the inital dialysis fluid ( D1/D0 GLU) ,and the concentration ratio of dialysate to serum urea ( D/P BUN).At last,com-pare the difference between groups.RESULTS Compared with blank group, the model groups had the higher hydroxyproline content,the significantly higher D/P BUN and the lower D1/D0 GLU ( P <0.01 ) Comparison of groups indicated that the preparation of PF model was successful.TⅡA medium dosage and TⅡA high dosage group had lower hydroxyproline content than the model group(P<0.01),but there were no significant difference with the blank group( P>0.05).TⅡA medium dosageand TⅡA high dosage group were higher D1/D0 GLU than the model group ( P<0.01 ).Although TⅡA groups were lower D/P BUN than the model group, there were no significant difference in TⅡA groups and model group ( P>0.05 ).Thus tanshinoneⅡA can improve the function of peritoneum and reduce the effect of collagen deposition.CONCLUSIONTⅡA is the active constituent of Salvia Miltiorrhiza for PF prevention.%目的：研究中药丹参化学成分丹参酮ⅡA（TanshinoneⅡA，TⅡA）对小鼠腹膜纤维化模型的影响。

丹参酮ⅡA对LPS等诱导的肝细胞损伤及枯否细胞释放细胞因子的作用

丹参酮ⅡA对LPS等诱导的肝细胞损伤及枯否细胞释放细胞因子的作用胡咏武;王胜春;李哲【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2005(21)12【摘要】目的研究丹参酮ⅡA(TSH ⅡA)对枯否细胞(kupffer cell,KC)释放细胞因子致肝细胞损伤的影响,以探讨丹参治疗慢性肝病的机制.方法分离肝细胞和KC并建立D-GlaN、LPS损伤肝细胞模型,测定培养上清中ALT、MAO、LDH-L、GSH-ST、MDA, LPS作用KC释放细胞因子同时放免法测定TNF-α、IL-6、IL-8,HE染色观察细胞形态,免疫组化法观察TNF-α、CD14、iNOS、eNOS在细胞内表达,双层小室培养观察LPS刺激KC 释放细胞因子对肝细胞的损伤.结果 TSh ⅡA能修复D-GlaN和LPS 诱导损伤的肝细胞,反映肝细胞损伤的酶水平和MDA 明显低于D-GlaN和LPS组, 能明显抑制LPS诱导KC分泌TNF-α、IL-8,100ng·L-1升高IL-6作用.TSh ⅡA尚能抑制KC表达TNF-α、CD14、iNOS、eNOS,并有效地抑制KC释放过量的细胞因子损伤肝细胞,但对细胞因子所致肝细胞损伤无直接保护作用.结论TSh ⅡA抑制D-GlaN、LPS损伤肝细胞作用机制与有效抑制KC释放过量的细胞因子参与肝损伤有关.【总页数】5页(P1482-1486)【作者】胡咏武;王胜春;李哲【作者单位】第四军医大学西京医院药剂科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院药剂科,陕西,西安,710032;第四军医大学西京医院药剂科,陕西,西安,710032【正文语种】中文【中图分类】R-332;R282.71;R284.1;R322.47;R329.24;R392.12【相关文献】1.IRF3基因干扰对LPS刺激原代枯否细胞早期细胞因子分泌动态变化的影响 [J], 朱彤;涂文娟;谈志丽;刘亮明2.LPS刺激诱导大鼠原代枯否细胞基因表达谱变化分析 [J], 谈志丽;朱彤;涂文娟;刘亮明3.Toll样受体在高迁移率族蛋白B1诱导严重烧伤后枯否细胞分泌促炎性细胞因子中的作用 [J], 陈旭林;孙立;郭峰;王飞;刘晟;梁勋;王仁素;王永杰;孙业祥4.五灵胶囊对LPS诱导枯否细胞释放细胞因子的影响 [J], 王胜春;张英志;胡咏武;李晓玮;田卫斌5.大鼠枯否细胞的分离、鉴定以及LPS刺激诱导TNF-α的表达 [J], 叶长根;梁冬雨;赵亮;于芳苹;孙水林;张吉翔;刘亮明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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