消毒剂的应用及效力验证
消毒剂消毒效果及有效期验证方案
目录1.概述2.验证范围3.验证目的4.验证参考文件5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容8.结论与评价9.再验证周期1. 概述1.1. 本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3种消毒剂分别进行验证试验。
1.2. 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期见下表：1.3. 作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
1.4. 为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C级洁净区）、灌装间(A/B级洁净区)、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5. A/B级洁净区使用的消毒剂需经0.22μm除菌过滤。
2. 验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3. 验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4. 验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010年版）；《药品GMP指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5. 验证小组名单6. 验证小组职责7. 验证内容7.1. 验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
消毒液消毒效力及有效期验证
第3、4、5组有相似菌落数生长，其每组间菌落数误差率不超过15%，计算公式如下：第1组无菌生长或仅有少数试验菌菌落生长第2组菌落数比第1组菌落数多，但比第3、4、5组菌落数少，且符合下表要求表 3第1组平板平均菌落数第1组平板平均菌落数0＞5x＞(X+5)y＞(y+0.5y)以上条件均符合要求时，判断所选中和剂及其浓度合格。
2)定量悬浮试验试验目的：通过浸泡或液封消毒的消毒剂应通过定量悬浮试验，确定其消毒效力是否符合要求。
操作：将含菌量为1×108~5×108cfu/ml的菌悬液0.5ml加入到10ml的消毒剂溶液中，作用5分钟、10分钟、15分钟、20分钟后，取消毒剂与细菌混合样品0.5ml，接种于4.5ml中和剂中，中和10分钟后，10倍稀释稀释至10-4，取各稀释级1ml分别接种于平皿中，每个浓度平行2个平板。
阳性对照以0.9%氯化钠溶液代替消毒液，同法操作。
样品培养：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌于30～35℃培养3天，白色念珠菌于20～25℃培养5天，培养结束后点计菌落数。
结果计算：计算试验组和对照组的活菌浓度(cfu/ml)，并换算为对数值(N)，并按下式计算杀灭对照值杀灭对数值(KL) = 对照组平均活菌浓度的对数值(NO)－试验组活菌浓度对数值(NX)可接受标准：杀灭对数值(KL)应不低于3~5个对数单位。
3)表面试验法试验目的：通过擦拭消毒的消毒剂应通过表面试验法，确定其消毒效力是否符合要求。
染菌不锈钢载片制备将经灭菌的载片平铺于无菌平皿内，滴加金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌，含菌量为1×108~5×108cfu/ml的菌悬液0.1ml，并均匀涂布于整个载体表面。
滴染菌液后，载片置超净工作台晾干后备用，每种菌平行制备两个染菌不锈钢载片。
染菌玻璃载片制备因培养皿的材质为玻璃，故用培养皿代替玻璃载片进行染菌试验。
消毒剂消毒效果验证
消毒剂（75%、新洁尔灭）消毒效果验证方案编制/日期：审核/日期：批准/日期：洁净室消毒剂消毒效果验证方案一、目的公司对于洁净室的消毒采用：洁净室操作台、设备表面、器具及净化室墙壁、地面、门窗等消毒，用0.2％（1:500）新洁尔灭溶液、1.25％ 84消毒液擦拭消毒；洁净室人员手部消毒用75％乙醇溶液，0.2％（1:500）新洁尔灭溶液品种每月更换一次消毒液品种。
此次消毒验证主要为针对公司所用消毒液进行消毒有效性的试验，以确保生产环境得以控制。
洁净室的清洁和灭菌是清除微生物的主要手段，但必须保障灭菌的有效性、彻底性，因此必须对洁净室的消毒、灭菌效果进行验证。
洁净室消毒效果的验证是以物理、化学、及微生物方法考察洁净室人员的手部、操作间、器具应用相应消毒剂消毒后消毒效果，确保消毒剂使用的有效性，为生产合格产品提供无菌环境保障。
本公司生产用洁净室分别采用空气杀菌和消毒液消毒。
因此本验证方案分别对各种消毒液进行消毒效果验证。
二、范围1. 洁净室操作间（工作台、设备表面、墙壁、地板、门窗）、器具所使用的各种消毒液的消毒效果验证。
涉及消毒剂有：0.2％新洁尔灭溶液、1.25％84消毒液、75％乙醇溶液。
2. 洁净室人员手部消毒液使用过程中不同时间的消毒效果验证。
涉及的消毒液有：0.2％新洁尔灭溶液、75％乙醇溶液。
三、验证小组成员四、试验用品4.1、待验证消毒剂按照本公司消毒液配制操作细则分别配制：0.2％新洁尔灭溶液、1.25％84消毒液、75％乙醇溶液。
五、验证方法5.1. 洁净室消毒液消毒效果验证5.1.1 可接受标准：GB/T 15980-1995 一次性使用卫生用品卫生标准YY 0033-2000 无菌医疗器具生产管理规范5.1.2 洁净室清洁消毒按照公司《洁净室工艺卫生管理制度》，分别清洁、消毒洁净工作区百级、万级、十万级操作间的工作台面、设备表面、地板、墙面和门窗等。
5.1.3 洁净室采样选取制品暴露时间最长、设备及操作人员最多，无菌要求最高的装配及包装车间作为验证测试重点。
消毒剂的消毒效果验证方案
消毒剂的消毒效果验证方案目录1. 目的 (2)2. 范围 (2)3. 参考文件 (2)4. 职责 (2)5. 验证计划 (2)6. 验证内容 (2)7. 验证实施 (2)8. 验证周期 (4)9. 验证结论 (4)1.目的通过对消毒剂的选择及消毒效果进行验证，以确定消毒剂的消毒效果和更换周期，使消毒效果始终保持有效性和稳定性。
2.范围本方案适用于洁净车间、检验室无菌操作人员用于手部消毒的消毒剂型。
3.参考文件3.1.GB15979-2002消毒与灭菌效果的评价方法与标准。
3.2.《中国药典》2020年版四部通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法。
4.职责4.1.管理者代表：负责验证方案和报告的批准。
4.2.质量部负责人：负责验证方案的审核，协调验证过程，保证验证顺利完成，对验证进行总结和评价。
4.3.生产员：负责方案的实施。
4.4.检验员：负责验证方案起草，质量控制和检测，出具相关记录和报告，验证用耗材、试剂、表单等的准备工作。
5.验证计划5.1.75%酒精溶液消毒效果确认，实施日期：XXXX年XX月XX日-XXXX年XX月XX日。
5.2.0.2%新洁尔灭溶液消毒效果确认，实施日期：XXXX年XX月XX日-XXXX年XX月XX日。
6.验证内容6.1.75%酒精溶液消毒后手部细菌数；6.2.0.2% 新洁尔灭溶液消毒后手部细菌数。
7.验证实施7.1.验证前准备工作操作人员按照洁净区7步洗手法将手洗干净，再将手烘干后取样；再使用喷壶喷出消毒液，双手均匀搓开，晾干后再次取样。
7.1.1.检验器具、试剂：立式压力蒸汽灭菌器、生化培养箱、可调移液器、微生物限度过滤系统、微孔过滤膜(0.45μm)、培养皿、培养基、PBS缓冲液。
7.1.2.实验用品准备培养基的配制：见《培养基配制记录》实验用品处理：将微生物限度仪泵头、移液枪头、镊子，放入不锈钢灭菌盒或用牛皮纸包扎好。
与洁净服一起放入灭菌锅，经高压蒸汽121℃灭菌30min。
消毒剂及消毒剂效力验证
消毒剂&消毒效果验证消毒相关定义常见消毒剂种类消毒剂的选择消毒剂效果验证消毒后效果评价0403020105消毒相关定义•消毒剂Disinfectant应用于表面可以杀灭细菌、真菌、病毒，但是并不一定能够杀灭它们的孢子。
消毒剂常被分为高效、中效、低效消毒剂。
•灭菌剂Sterilant（杀孢子剂）可以杀灭所有形式的微生物，包括细菌、真菌、病毒及它们的孢子。
•Germicide 杀菌剂•Disinfectant 消毒剂•Sanitizer 消毒剂制药行业常见消毒剂种类过氧化氢H2O2杀孢子（6%）高效消毒剂局限：•对软金属有腐蚀性•需要进行稀释•需要预先清洁•对温度敏感•对眼睛和皮肤有腐蚀性•超过8%为危化品，需要特殊运输–快速、广谱活性，可杀孢子–同效果相当的氧化剂相比腐蚀性小–对人员较安全–可自灭菌–局限:•对软金属有腐蚀性•需要预先清洁•对温度敏感•刺激性气味●主要成分Components过氧化氢Hydrogen Peroxide 1.0% 过氧乙酸Peracetic acid 0.08%醋酸Acetic acid <10%◆优点Benefit即用，省时省力，无需验证配制过程可以作为灭菌剂或消毒剂使用可以自灭菌（booklet）无菌0.2um滤芯过滤◆材质兼容性（可提供材质兼容性测试报告）不锈钢，环氧地面，PVC，HDPE，LDPE等大多数洁净室材质 腐蚀铜，铝等软金属◆吸入毒性✓致死吸入浓度为13,439mg/m3✓结论：按照说明使用不会对人员造成伤害✓更多信息可参考毒性报告（MSDS）◆有效期（开瓶效期研究报告） 货架期+开瓶效期◆使用频率每周或环境有超标趋势时–广谱活性–阴离子/中性表面活性剂可具有良好的清洁能力–具有碱性或酸性配方–局限：不能杀孢子有残留使用不兼容化学品后活性受影响邻苄基对氯苯酚邻苯基苯酚磷酸异丙醇二甲苯磺酸钠苯磺酸，C10-16-烷基衍生物邻苯基苯酚氢氧化钾异丙醇二甲苯磺酸钠苯磺酸，C10-16-烷基衍生物◆特点5um过滤，去除颗粒双层包装并伽马射线灭菌（无菌包装）高度浓缩，经济清洁、消毒和除臭一步完成在硬水和5%牛血清存在的情况下仍然有效 低毒广谱，多种标准菌及环境分离菌有效◆材质兼容性与大多数洁净室材质兼容◆有效期A ---货架期B ---开瓶效期C ---稀释液稳定性效期◆毒性LD50（经皮肤）酸性苯酚LpH III st>5000mg/kg碱性苯酚Vesphene III st>5000mg/kg星期一酸酚（LpH III）1:128 或碱酚（Vesphene III）1:128 保持湿润10分钟星期二酸酚（LpH III）1:128 或碱酚（Vesphene III）1:128 保持湿润10分钟星期三酸酚（LpH III）1:128 或碱酚（Vesphene III）1:128 保持湿润10分钟星期四酸酚（LpH III）1:128 或碱酚（Vesphene III）1:128 保持湿润10分钟星期五酸酚（LpH III）1:128 或碱酚（Vesphene III）1:128 保持湿润10分钟星期六酸酚（LpH III）1:128 或碱酚（Vesphene III）1:128 保持湿润10分钟星期日杀孢子剂（Spor-Klenz RTU）保持湿润10分钟remain wet for 10 min酸碱酚每个月轮换一次（不会耐药文献）Rotation of the two Phenolic disinfectant every month–广谱活性–阳离子表面活性剂可具有非常好的清洁效果–局限：不能杀孢子有残留使用不兼容化学品后活性受影响双链长链季铵盐●Process NPD二癸基/二辛基二甲基氯化铵 苯扎氯铵乙醇胺乙醇壬基酚聚氧乙烯醚●Vesta Syde SQ st& Vesta Syde SQ 双十烷基二甲基氯化铵乙醇胺正丙醇N-氧代-N，N-二甲基-1-辛胺二羧甲基丙氨酸三钠乙醇◆特点5um过滤，去除颗粒双层包装并伽马射线灭菌（无菌包装）高度浓缩，经济清洁、消毒和除臭一步完成在硬水和5%牛血清存在的情况下仍然有效 低毒广谱，多种标准菌及环境分离菌有效◆材质兼容性与大多数洁净室材质兼容◆有效期A ---货架期B ---开瓶效期C ---稀释液稳定性效期◆毒性LD50（经皮肤）Process NPD >1100mg/kg Vesta Syde SQ >5000mg/kg无残留 广谱容易挥发局限：•清洁效果差•可燃•接触时间有限•有机物挥发•IPA (TLV 200ppm)•不能杀孢子(Threshold Limit Values)值是指毒性气体对人体的危害指标。
消毒剂消毒效果及有效期验证方案
消毒剂消毒效果及有效期验证方案This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020目录1.概述2.验证范围3.验证目的4.验证参考文件5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容8.结论与评价9.再验证周期1. 概述. 本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3种消毒剂分别进行验证试验。
. 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期见下表：. 作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
. 为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C级洁净区）、灌装间(A/B级洁净区)、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
. A/B级洁净区使用的消毒剂需经μm除菌过滤。
2. 验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3. 验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4. 验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010年版）；《药品GMP指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
消毒剂消毒效果验证方案
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法与步骤4 异常情况与偏差处理5. 验证结果评价与建议6、再验证周期1.前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
1.1验证的目的本验证的目的在于制定方法与可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
1.3验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O21.4验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责2.1验证小组成员：2.2职责2.3验证进度3. 验证方法与步骤3.1实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
3.3.3 稀释液：1%蛋白胨-0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂：0.1%卵磷脂+1%吐温80 溶液；0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿(90mm)3.3.7消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O23.3.8移液器与配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul3.2中和剂效力确认①中和剂效力与毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物与其数量。
消毒剂消毒效果的验证报告
消毒剂消毒效果的验证组长：***组员：*** ****** ****** ****** ******编号：201412151135版次：2014 年第 1 版目录1．概述 (3)1.1消毒剂 (3)1.2消毒剂使用说明 (3)2．验证目的 (3)3．验证内容 (4)4．验证组织 (4)4.1验证小组 (4)4.2验证委员会 (4)5．验证实施步骤 (5)5.1验证前准备 (5)5.2验证所需文件资料 (5)5.3悬液法定量杀灭试验 (6)5.4对裸手消毒效果试验 (7)5.5消毒剂对佩戴手套后的消毒效果验证 (9)5.6消毒剂对物体表面消毒效果验证 (11)5.7消毒剂消毒效果验证结论 (15)6．验证主要依据 (15)7．验证合格标准 (15)7.1判断标准 (15)7.2现场考察试验合格标准 (15)8. 再验证周期 (15)附录 (16)附录一验证方案会审记录 (16)附录二验证方案修改申请及批准书 (17)附录三漏项和偏差处理记录 (18)附录四悬液法定量杀灭试验记录 (19)附录五消毒剂对佩戴手套后人员手现场试验记录 (22)1．概述1.1 消毒剂消毒剂的作用原理：破坏细胞膜类，阻断细胞食物摄取和废物排泄，钝化关键酶。
以下是几种常用的消毒剂：（1）新洁尔灭(苯扎溴铵)：是一种常用的季铵盐类消毒剂，在浓度较低时即可有抑菌的作用；当浓度较高时，可以杀灭多种细菌繁殖体和部分的病毒，但是不能杀灭细菌芽孢，属于低效消毒剂。
（2）75%乙醇：适用于一般物体表面消毒以及手和皮肤的消毒，它无法杀灭细菌芽孢和病毒。
（3）优洁：属于长效、强效、广谱杀菌剂，是一种新型消毒剂，其有效成分为复合季铵盐和六亚甲基四胺，可有效快速地杀灭细菌繁殖体、芽孢、真菌和部分病毒等，各种微生物对其均无抗药性，抑菌时间较长，可用于一般物体表面消毒，稳定性好，无腐蚀性，无毒无害，并且由于杀菌时不受蛋白质及有机物的干扰，故使用衰减周期长，可循环使用，相对使用成本低。
消毒剂的应用及效力验证 精品
广谱性，可杀孢子 无腐蚀性 醛类主要被用作气雾型消毒剂
醛类化合物
局限性：
需要升温 要求接触时间较长 气体和液体状的甲醛均有毒
过氧化氢
特点：
快速，广谱性 分解成氢气和水 没有残留物 当浓度高于6%时，即能杀死细菌芽孢
过氧化氢
局限性：
当浓度高于6%时，才能杀死细菌芽孢
酚类化合物
局限性：
酚类化合物对芽孢的杀伤力不强
季铵盐类化合物
特点：
表面活性剂能提供良好的除味和清洁能力。 液态下很稳定。 是许多阳离子型去污剂的主要成分。只有阳离子 型和兼性去污剂才具有杀菌效力。
季铵盐类化合物
局限性：
抑菌谱很窄 不能杀孢子 和其他化学试剂反应
二氧化氯（clo2 ）
特点：
抗菌剂： 用来杀死或降低微生物的数量。 溶剂：把抗菌剂（活性成分）稀释到所需要的有效浓度。 螯合剂（络合剂）：软化水并利于除垢。 氧化剂：增强杀菌活力。 表面活性剂：协助清洁，通过乳化和弥散去污。 酸：酸度的来源，使水软化。 碱：碱度的来源，除垢、皂化
消毒剂的效力等级
依微生物的类型确定消毒剂的效力等级： 高效消毒剂 中效消毒剂 低效消毒剂
广谱性，在高浓度下可杀孢子
作用效果快（在宽的pH范围内，最低有效浓度 0.1ppm)。 反应后的副产物亚氯酸盐对人物重大危害。
二氧化氯
局限性:
需要活化，增加了操作步骤，不稳定 此类产品会破坏酚类化合物 具有腐蚀性和刺激气味 反应活性极强，不能大批量配制
醛类化合物
特点：
过氧乙酸
消毒液消毒效力及有效期验证
1%的卵磷脂+0.1%吐温80配制方法：卵磷脂1g,吐温800.1ml加蒸馏水至100ml,121C高压灭菌15分钟，即可。
1.5%硫代硫酸钠配制方法：取硫代硫酸钠1.5g,加纯化水稀释至100ml,121C高压灭菌15分钟，即
于平皿中，做活菌培养计数。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌用TSA培养基；白色念珠
菌用SDA培养基。
•第2组
目的：观察残留消毒剂被中和后受到消毒剂作用后的试验菌是否恢复生长。
操作方法：吸取消毒剂4.5ml于试管中，加0.5ml菌悬液，混匀，作用10分钟，吸此样液0.5ml，加
于含4.5ml中和剂溶液管中，作用10分钟，吸此样液0.5ml至含有4.5ml稀释液试管中混匀，吸取
序号
材料名称
备注
1
金黄色葡萄球菌
2
大肠埃希菌
3
枯草芽孢杆菌
4
白色念珠菌
设备
表2设备清单
序号
设备名称
设备型号
设备编号
1
生化培养箱
SHP-08
0
2
霉菌培养箱
MJP-15
0
1
2
3
4
5
6
7
7.1
7.2
实用标准文案
8验证程序
8.1为了确认消毒剂的消毒效力，通过定量悬浮试验法和表面实验法进行验证试验。
1）中和剂的选择：通过该试验，确认所用的中和剂对对应的消毒剂有良好的中和作用，对试验用菌及其恢 复期培养是否有害或不良影响。
钟后，10倍稀释稀释至10-4，取各稀释级1ml分别接种于平皿中，每个浓度平行2个平板。阳性对照 以0.9%氯化钠溶液代替消毒液，同法操作。
(完整版)消毒剂消毒效果及有效期验证方案
目录1. 概述2. 验证范围3. 验证目的4. 验证参考文件5. 验证小组名单6. 验证小组职责7. 验证内容8. 结论与评价9. 再验证周期1. 概述1.1. 本公司的洁净区分为A 级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3 种消毒剂分别进行验证试验。
1.2. 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期见下表：1.3. 作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10 分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5 分钟。
1.4. 为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C 级洁净区）、灌装间（A/B 级洁净区）、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5. A/B 级洁净区使用的消毒剂需经0.22 μm除菌过滤。
2. 验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3. 验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4. 验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010 年版）；《药品GMP 指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5. 验证小组名单6. 验证小组职责7. 验证内容7.1. 验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
消毒剂消毒效果验证方案
消毒剂消毒效果验证方案验证编码起草人起草日期审核人审核日期批准人批准日期目录1. 引言 (3)1.1 概述 (3)1.2 验证目的 (3)1.3验证项目小组成员及职责 (3)略1.引言1.1概述消毒是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。
通常用化学的方法来达到消毒的作用。
用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
洁净车间包括操作室和设备及生产用器具均应进行消毒，消毒效果是否彻底直接影响到产品的质量，生产前必须验证消毒方法的适应性和消毒效果。
本公司车间洁净区分为十万级、万级、万级下的局部百级，所使用的消毒剂种类及使用对象如下图所示：消毒剂名称所使用对象75%乙醇直接接触药品的设备表面、手部。
0.2%新洁尔溶液地漏、地面、墙面、操作台、设备外表面、手部。
1.2验证目的确保洁净区按照规定的清洁、消毒程序进行清洁消毒后，能够达到防止交叉污染的目的，并在消毒有效期内能确保达到生产工艺所需要的效果。
1.3 验证项目小组成员及职责1.3.1验证小组成员1.3.2职责1.3.2.1验证委员会职责1.3.2.1.1负责验证方案的审批；1.3.2.1.2负责协调验证的各项工作，保证本方案规定的项目能够顺利实施；1.3.2.1.3负责验证数据及方法审核；1.3.2.1.4负责验证报告的审批；1.3.2.1.3负责再验证周期的制定；1.3.2.1.6负责发放验证证书。
1.3.2.2生产管理部职责1.3.2.2.1制定验证方案；1.3.2.2.2组织协调验证活动，确保验证进度；1.3.2.2.3组织验证工作的实施并作好记录，收集、归纳并评估结果。
1.3.2.3质量管理部职责1.3.2.3.1制订验证确认检测项目；1.3.2.3.2负责取样、检验并出据检验报告；1.3.2.3.3确定验证周期。
1.3.2.4物资管理部负责按生产要求提供符合标准的消毒剂。
2. 相关文件序号文件名称检查情况存放部门1 生产洁净区管理规程2 清洁剂、消毒剂管理规程3 清场管理规程4 消毒剂配制使用标准操作规程5 生产用工具、容器清洁标准操作规程6 清洁用具清洁标准操作规程7 洁净区操作室清洁标准操作规程8 人员进出洁净区标准操作规程9 物料进出洁净区标准操作规程10 洁净区环境监控标准操作规程备注检查人复核人日期日期3. 验证方法3.1 操作方法待生产结束后按操作室和设备及生产用的器具清洁规程进行清洁、消毒，对操作室和设备及生产用的器具进行清洁、消毒后分别以无菌棉签采样，接种后培养24～48小时观察结果，以确定消毒的效果。
方案-消毒剂消毒效果验证
消毒剂消毒效果验证方案福建省福抗药业股份有限公司目录1.文件批准 (3)1.1.文件准备和批准 (3)2.概述 (4)2.1消毒剂特点及使用范围 (4)2.2.再验证原则 (4)3.验证目的 (4)4.验证的范围 (4)5.方案实施责任与要求 (5)5.1.方案实施责任者 (5)5.2.方案实施要求 (5)6.验证项目 (6)6.1.消毒剂的消毒效果实验室确认 (6)6.1.1.实验准备 (6)6.1.2.培养基、中和剂配制方法 (7)6.1.3.中和剂效力、毒性确认 (7)6.2.消毒剂的消毒效果现场考察 (10)6.2.1.消毒剂对物体表面消毒模拟现场鉴定试验 (10)7.方案偏差报告范例 (13)7.1偏差和修正一览表（样张） (13)7.2.偏差报告（样张） (14)8.方案修改记录范例 (15)9.评价与建议 (15)10.参考文献 (15)1.文件批准1.1.文件准备和批准验证方案已由下列人员审查并批准：2.概述消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①70%异丙醇、②PROCESS LpHst无菌酚类消毒剂、③PROCESS VESPHENE lls无菌酚类杀菌剂、④SPOR-KLENZ即用型低温杀孢子剂共4种消毒剂（④为灭菌剂）进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
2.1消毒剂特点及使用范围2.2.再验证原则当环境监控的结果出现偏差时，应重新评估目前使用的消毒剂，必要时更换消毒剂的品种以及调整消毒剂的使用周期。
新消毒剂使用前均需经效果验证后方可使用。
3.验证目的以利于对无菌生产区域的微生物进行有效的控制。
本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
4.验证的范围4.1.消毒剂的消毒效果验证包括实验室确认和现场考察。
消毒剂消毒效力及有效期验证方案
消毒剂的选用原则：目的：确认各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒、防止污染的目的，并在消毒剂有效期内能确保其消毒效力能符合要求。
范围：本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
1. 参考文件1.1. 《医疗器械生产质量管理规范》1.2. 《中国药典》2015版第4部微生物限度检查法2. 概述2.1. 本公司的洁净区为D级，拟定用于洁净区表面消毒的有五种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、0.2%新洁尔灭溶液、0.5%醋酸氯己定溶液、0.1%醋酸氯己定溶液。
本次验证方案将选用以上5种消毒剂分别进行验证试验。
作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期2.2. 为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
其中，用定量悬浮试验法和表面实验法进行实验室考察试验部分。
洁净区设施表面材质基本都是不锈钢和玻璃两种，故表面试验法选用不锈钢载片和玻璃裁片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
两种试验方法作用的消毒剂见表。
现场考察试验部分选择车间(D 级)的配液间、灌装间设备表面消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
3. 确认前准备 3.1. 验证用试剂与材料 3.1.1. 菌种3.1.2.培养基3.1.3. 消毒液拟定选用的中和剂3.1.4. 稀释液0.9%无菌氯化钠溶液（NS）3.1.5. 器具及设备3.2. 验证用试剂与材料记录见附录1。
4. 消毒剂消毒效力试验4.1. 中和剂鉴定试验4.1.1. 试验目的通过该试验，确认所用的中和剂对对应的消毒剂有良好的中和作用，对试验用菌剂及其恢复期培养示范有害或不良影响。
消毒剂抑菌效力验证方案
消毒剂抑菌效力及有效期验证方案评估日期：页次：第 页 共 页目录1 目的: (4)2 使用范围 .............................................................................................................................. 2 3责任者 (2)质量检验部经理、主管、检验员 ................................................................................................. 2 验证小组成员 .............................................................................................................................. 2 4正文 ..................................................................................................................................... 2 4.1 概述: ........................................................................................................................ 2 4.2 验证用试剂与材料 ................................................................................................... 3 4.3 消毒剂消毒效力实验 ............................................................................................... 5 4.4 消毒剂有效期确认试验 .......................................................................................... 12 4.5 注意事项 (12)5 相关文件 ............................................................................................................................136 附件 ...................................................................................................................................137 文件变更历史.....................................................................................................................13 8参考文献 (13)1 目的：2 确认各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒、防止污染的目的, 并在消毒剂有效期内能确保其消毒效力能符合要求。
消毒剂的使用及效力验证_课件
一、消毒剂与灭菌剂的划分
（一）、卫生处理与卫生洗涤剂
卫生处理（sanitization）是指用化学试剂减少活 性微生物数量的过程。用于卫生处理的化学试剂称为 卫生洗涤剂（sanitizers）。
普通微生物细胞
30s
5个对数单位 （ 99.999% ） 3个对数单位 （ 99.9% ）
致病微生物细胞
（三）、阻断食物摄取和废物排泄
某些杀菌剂，如季铵盐类化合物，它们在水溶液 中带正电荷，能把自己附着在细胞膜上的某个特殊 位置，攻击细胞上带负电荷的部分，最终的结果是 季铵盐基团阻断了营养物质运输到细胞内，并阻止 了堆积在细胞内的废物向外排泄。实际效果是，细 胞饥饿死亡和被细胞内堆积的废物毒死。
（四）、钝化关键酶类
(四) 表面活性剂和金属离子
大分子聚合物和非离子表面活性剂可以降低对羟基甲酸 脂类和季铵盐类消毒剂的作用，在有吐温存在时，需要加大 消毒剂的浓度。阴离子表面活性剂可以降低季铵盐类和洗必 太的消毒作用，因此应注意不能将新洁尔灭等消毒剂与肥皂 及阴离子洗涤剂合用。 金属离子的存在对消毒效果也有一定的影响，可以降低 或增加消毒作用。在存在低浓度二价阳离子时，阴离子表面 活性剂对葡萄球菌的抗菌作用加强，在存在Mg2+、Ca2+、 Ba2+离子时，长链脂肪酸的杀菌作用大大降低。由于Mg2+、 Ca2+离子对一些消毒剂的消毒效果有影响，所以目前在消毒 学试验中广泛使用硬水，以便使研究的消毒剂在硬水地区也 能使用。
三、 消毒剂的效力等级与消毒效力评价
根据消毒 剂对不同类 别的微生物 的杀灭效果， 可将消毒剂 分为三个级 别：
高效消毒剂（HLD），可以杀灭一切 细菌繁殖体(包括结核分枝杆菌)、 病毒、真菌及其孢子等各种微生物， 对细菌芽孢杀灭达到消毒效果的消 毒剂； 中效消毒剂（ILD），可以杀灭和去 除细菌芽孢以外的各种病原微生物 的消毒剂，包括碘类消毒剂； 低效消毒剂（LLD），只能杀灭细菌 繁殖体和亲脂病毒的消毒剂，包括 单链季铵盐类(苯扎溴铵等)、双胍 类消毒剂如氯己定等。 (碘伏、碘酊等)、醇类、
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实验室考察
通常是参照美国政府农业化学师学会制 定的消毒剂效力测定法。 可增加一些试验菌，如控制性环境中的 主要分离菌。
实验室消毒剂效力测试的几种方法
载体试验法 表面试验法 工作液直接接种法
实验室消毒剂效力测试（载体测试法）
确定试验菌种 中和剂效力测试 消毒剂的效力测试 测试过程简述 消毒剂的效力测试合格标准 载体测试法优缺点
确认时需要考虑的因素
在消毒剂确认试验的准备过程中，企业应 考虑以下几个方面的问题：
基于消毒剂本身的消毒能力进行评价 选择合适的实验方案（与平常使用方法一致） 审计生产/ 审计生产/供应商
消毒剂的效力包括两项考察
现场考察 实验室考察
现场考察
评估消毒剂对相应设施的实际消毒效力 通过监测清洁/ 通过监测清洁/消毒前、后的环境微生物 学质量进行的。经历一段时间的积累后 才能用以评估消毒和清洁程序的数据 （建议至少三次试验）。 在最差条件下（如预防性维修之后）检 测环境的污染状况。
酒精类
特点：
在潮湿环境中浓度高于40%的酒精溶液（体积比） 在潮湿环境中浓度高于40%的酒精溶液（体积比） 具有清洁卫生的效果。 对干燥表面消毒时，酒精的杀菌效果在体积比为 60~70%时为最强。 60~70%时为最强。 酒精易挥发且易燃，需按易燃易爆物品的保管要 求予以保存。
酒精类
优点：
以酒精为基质的化合物蒸发后没有任何残留。
中和剂效力测试
毒性试验：证明中和剂不会影响微生物 的生长。 效力试验：证明中和剂能消除消毒剂的 抑菌性，具有足够的中和效力。
表面测试法的优缺点
完全模仿真实的清洁/ 完全模仿真实的清洁/消毒程序 能够定量测定微生物的数量下降程度 工作量大，需要很好的协调合作 硬面含菌量检验方法的有效性验证困难 试验结果的重复性不够好
常规的消毒剂包括以下组份：
抗菌剂： 抗菌剂： 用来杀死或降低微生物的数量。 溶剂：把抗菌剂（活性成分）稀释到所需要的有效浓度。 溶剂：把抗菌剂（活性成分）稀释到所需要的有效浓度。 螯合剂（络合剂） 螯合剂（络合剂）：软化水并利于除垢。 氧化剂：增强杀菌活力。 氧化剂：增强杀菌活力。 表面活性剂：协助清洁，通过乳化和弥散去污。 表面活性剂：协助清洁，通过乳化和弥散去污。 酸：酸度的来源，使水软化。 碱：碱度的来源，除垢、皂化
消毒剂的效力等级
依微生物的类型确定消毒剂的效力等级： 高效消毒剂 中效消毒剂 低效消毒剂
依微生物的类型确定消毒剂的效力等级
效力级别 细菌芽孢 低 中 高 细菌性营养细胞 真菌 ± + +
+ -（某些能杀灭）+ +（需延长时
间）
- 表示几乎没有或没有杀灭效果 + 表示有相当的杀菌效果 ± 表示杀灭效果较温和
季铵盐类化合物
特点：
表面活性剂能提供良好的除味和清洁能力。 液态下很稳定。 是许多阳离子型去污剂的主要成分。只有阳离子 型和兼性去污剂才具有杀菌效力。
季铵盐类化合物
局限性：
抑菌谱很窄 不能杀孢子 和其他化学试剂反应
二氧化氯（clo 二氧化氯（clo2 ）
特点：
广谱性，在高浓度下可杀孢子
作用效果快（在宽的pH范围内，最低有效浓度 作用效果快（在宽的pH范围内，最低有效浓度 0.1ppm)。 0.1ppm)。 反应后的副产物亚氯酸盐对人物重大危害。
+
消毒剂的选择和交替使用
选择消毒剂是务必要考虑的因素：
消毒表面与消毒剂的适应性 产品的完整性 人员的安全性 环境中微生物的菌群 消毒剂的使用方法和使用频率 消毒剂的交替使用
制药工业常用的消毒剂
酒精类 酚类 季铵盐类 液体灭菌剂和杀孢子剂，如：次氯酸钠、
二氧化氯、过氧化氢、戊二醛、甲醛和过氧乙 酸
PH 温度 水 有机物
消毒剂作用原理
破坏细胞膜类 阻断细胞食物摄取和废物排泄 钝化关键酶
细菌对消毒剂有耐受性
具耐受性的细菌和不能完全致死的消毒 剂剂量 生物膜的形成 清洁剂之间的交互作用 消毒溶液的剂量
消毒剂的效力确认
确认时需要考虑的因素 消毒剂的效力确认包括两项考察 实验室消毒剂效力测试的几种方法 消毒剂的效力测试（硬面测试法）
二氧化氯
局限性: 局限性:
需要活化，增加了操作步骤，不稳定 此类产品会破坏酚类化合物 具有腐蚀性和刺激气味 反应活性极强，不能大批量配制
醛类化合物
特点：
广谱性，可杀孢子 无腐蚀性 醛类主要被用作气雾型消毒剂
醛类化合物
局限性：
需要升温 要求接触时间较长 气体和液体状的甲醛均有毒
过氧化氢
特点：
快速，广谱性 分解成氢气和水 没有残留物 当浓度高于6%时，即能杀死细菌芽孢 当浓度高于6%时，即能杀死细菌芽孢
消毒剂的应用及效力验证
质量部
消毒剂的使用目的
消除或抑制微生物污染
控制用试剂的分类
卫生洗涤剂 消毒剂及抗毒:是指用化学性试剂杀灭致病微生物 的过程. 的过程.消毒时所用的化学试剂称为消毒 剂。 灭菌剂：指能够杀灭包括芽孢在内的污 染性微生物的试剂。
消毒剂的组成
过氧化氢和过氧乙酸的混合物
特点：
快速，广谱，可杀孢子 相比氧化剂腐蚀性较小
局限性：
对软物质有腐蚀作用 有刺激性气味 对温度敏感
次氯酸钠
特点：
广谱，可杀孢子 高浓度可快速杀菌
局限性：
易受pH值、有机物、紫外线和热的影响 易受pH值、有机物、紫外线和热的影响 有一定的腐蚀性
影响消毒剂效力的主要因素
局限性: 局限性:
杀菌能力有限 在洁净室内，酒精类化合物仅能用作卫生洗 涤剂或清洁剂，因为它们无法杀灭细菌芽孢。
酚类化合物
特点: 特点:
抑菌谱很广 它们对人体的毒性较低并且对多数材料的腐 蚀性相对很小 酚类化合物对有机物具有较好的耐受性 酚类消毒剂会产生残留物，但能被生物降解
酚类化合物
局限性：
酚类化合物对芽孢的杀伤力不强
过氧化氢
局限性：
当浓度高于6%时，才能杀死细菌芽孢 当浓度高于6%时，才能杀死细菌芽孢
过氧乙酸
特点：
过氧化合物的杀菌谱非常广，杀菌能力高于 过氧化氢，低温下亦有很强的杀菌能力且无 任何有毒残留物。
局限性：
气态过氧乙酸（VPPA） 气态过氧乙酸（VPPA）易挥发并且有刺激 性气体 对土壤/ 对土壤/尘土无耐受能力，并且对某些金属 具有腐蚀作用