香樟精油的体外抑菌活性

科技 创 新与应 用 ｌ ２ ０ １ ４ 年 第２ ４ 期
科 技 创 新
香樟精油 的体外抑菌活性
秦 海 燕 刘如沁 ｚ 黄爱玲 ｚ 索志荣 ｚ
（ １ 、 西南科技大学生命科 学与工程 学院， 四川 绵阳 ６ ２ １ ０ １ ０ ２ 、 西 南科技大学分析 测试 中心， 四川 绵 阳 ６ ２ １ ０ １ ０ ）
＋ ” 表示培养基有菌落生长， “ 一 ” 表示培养基未出现茵落。 从表 １ 、 ２ 看 出， 不同浓度香樟精油对金黄色葡萄球 菌抑菌活性 不 同 。纯精 油 对 金 黄 色 葡 萄球 菌 的抑 菌 圈 最 大 ， 为 １ ３ ． １ ｍ ｍ， 在 １ ０ — １ ５ ｍ ｍ之 间 ， 属 中敏 。精 油 抑菌 圈 的直 径 随体 积 分 数 的增 大 而 增 强 。 最小抑菌浓度 ＭＩ Ｃ值是测定抗菌物质抗菌活性大小 的指标 。 当浓度 降到到 １ ２ ． ５ ％时平板 中没有检 出菌落 ， ６ ． ２ ５ ％时平板 中检出少量菌 落， 当香 樟精 油 的 浓度 大 于 １ ２ ． ５ ％时 ， 可 完全 抑制 金 黄 色 葡 萄 球 菌 的生长 ， 故 其 对 金黄 色 葡萄 球 菌 的 ＭＩ Ｃ为 １ ２ ． ５ ％。 ３结束 语 该 实 验 表 明 香 樟 精 油 对 金 黄 色 葡 萄 球 菌 的 抑 菌 圈 直 径 为 １ ３ ． １ ｍ ｍ， 金黄色葡萄球菌对香樟精 油中度敏感。 马英姿 、 李爱 民 等 的实验结果也发现香樟精油对金黄色葡萄球菌有 明显的抑菌效果 。 香樟油主要成分为樟脑 、 Ｂ 一 芳樟 醇（ ２ ４ ． ０ ９ ％） 、 桉 油醇 （ １ ５ ． ７ ２ ％） 、 一 松油醇（ １ １ ． ２ ０ ％） 、 蛇床一 ６ 一 烯一 ４ 一 醇（ ５ ． ７ ２ ４ ％） ［ ９ １ ， 其中， 芳樟醇具有抗 细菌 、 抗真菌和抗病毒作用 ， 是樟树叶精油中的主要抗菌成分 。香 樟是我 国亚热带绿阔叶林 的主要树种之一 ， 资源丰富 ， 加快其抑 菌 活性 及 机理 的研 究 有 利于 开 发香 樟 油 的开 发 和利 用 。
摘 要： 采 用抑 菌 圈 实验 和二 倍 稀释 法研 究 了香樟 精 油 对金 黄 色 葡萄球 菌 的抑 菌 活性 、 最低 抑 菌浓度 （ ｉＩ Ｃ ） 。 结果 表 明 ： 香 樟精 油 对金 黄 色葡 萄球 菌抑 菌 活性 显著 ， 当香樟 精 油 的 浓度 大 于 １ ２ ． ５ ％时 ， 可 完全抑 制 金 黄 色 葡萄球 菌的 生 长 。 关键 词 ： 香樟； 精油； 抑菌 香樟（ Ｃ ｉ ｎ ａ ｍ ｏ ｍ ｕ ｍ Ｃ ａ ｍ ｐ ｈ ｏ ｒ ａ（ Ｌ ｉ ｎ ｎ ． ） Ｐ ｒ ｅ ｓ １ ） 系 樟 树 属 的 常 绿 乔 木植物 ， 其根 、 木材 、 枝 和 叶均 可 提 取 香 樟 精油 ， 它 们 不仅 是 医 药 上 樟脑 、 龙脑 的主要原料 ， 还具有净化有毒空气的能力及抗 癌功效＿ ｌ ＿ 。 近 年 的许 多 研究 发 现 ， 精油 具 有 强烈 的抑 制 或杀 死 真 菌等 微 生 物 的 特性ｌ ２ ． ３ １ 。 当今在 动 植物 病 原 菌对 化学 杀 菌 剂产 生 抗药 性 日渐加 剧 的 形势下 ， 精 油 因具 有 自然 挥 发 的特 性 ， 可 作 为 一 种 有 待 开 发 的 新 型 杀 菌 物质 进 行研 究 ［ ４ １ 。本实 验 采 用试 管 二 倍 稀 释法 联 合琼 脂 平 板 法 对香樟精油对金黄色葡萄球菌的抑菌效果进行了研究和探讨 ， 以便 为进 一 步 开发 治疗 呼 吸 道疾 病 新 的抗 茵 药物 提 供 理论 依 据 ， 也 为 开 发 香 樟 精油 在 天然 消 毒杀 菌 产 品利 用方 面提 供科 学 依据 。 １材 料 与 方法 １ ． １材 料与 试 剂 供试 菌 种 金黄 色 葡萄 球 菌 （ Ｓ ｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ａ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ Ａ Ｔ Ｃ Ｃ ２ ６ １ １ ２ ） ， 购于 中 国 医学菌 种保 藏 中心 。香 樟油 由西南 科技 大 学天 然 药物 化学 实验 室提 供 。 １ ． ２ 实 验方 法 １ ． ２ ． １香 樟 精 油稀 释液 的制 备 香樟精油不溶于水 ， 以丙酮作为稀释剂。精确量取 ５ ｍ ｌ 香樟精 油， 加入 ５ ｍ ｌ 丙酮 ， 震荡摇匀 ， 配置 成 ５ ０ ％的溶 液 ， 装 入 棕 色瓶 作 为 母 液， 二倍 稀 释法 配 制一 系 列浓 度 梯 度 的精 油溶 液 。 １ ． ２ ． ２ 菌悬 液 的制 备 将 供试 菌 种 在斜 面 培养 基 上 活 化 ２ 代后 ， 用 接 种 环从 斜 面 上轻 刮菌苔一环 ， 收 集 到 内盛 ｌ Ｏ ｍ Ｌ无 菌 水 的三 角 瓶 中 ， 配 成 终 浓 度 为 １ ０ ６ Ｃ Ｆ Ｕ ／ ｍ Ｌ的菌悬液 ， 备用。 １ ． ２ － ３香樟 油 的 抑 菌活 性测 定 待 培 养皿 中培 养基 凝 固后 ， 在无 菌条 件 下 ， 取０ ． ２ ｍ ｌ 菌 悬液 涂 布 到 培 养 皿 上 。将 Ｄ ＝ ６ ｍ ｍ 的 无 菌滤 纸 片在 香 樟 油 中浸泡 ２小 时 ， 沥 干 ，平 铺 在 培 养 皿 上 ，每 平 板 铺 ２片 。 以丙 酮 作 为 空 白 对 照 ， 以 １ ． ０ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ 氨苄青霉素作为阳性对照 ， 于３ ７ ￣ Ｃ 恒温箱 内培养 ２ ４ ｈ 后观 察， 并测定抑菌圈的直径。平行实验 ３ 次 。抑菌圈试验判定标准： 滤 纸片直径为 ６ ｍ ｍ时 ， 抑菌圈直径大于 ２ ０ ａ ｒ ｍ， 极敏 ； １ ５ ～ ２ ０ ａ ｒ ｍ， 高敏 ； １ ０ ～ １ ５ ｍ ｍ， 中敏 ； ７ － ９ ａｍ， ｒ 低敏 ； 小于 ７ ａ ｒ ｍ， 不 敏感 。 １ ． ２ ． ４ 最 小抑 菌 浓度 （ ＭＩ ｃ ） 的测 定【 将 不 同浓 度梯 度 的香 樟 精 油溶 液 各 ｌ ｍＬ加 入 融化 的 固体 培 养 基 中混 合 均 匀 ， 待 培 养 基 凝 固后 ， 即 得 含各 浓 度 香 樟 油 的 供 试 样 品 的平 板 。在平 板 上 画线 接 种菌 液 ， ３ ７ ℃培养 １ ｄ 。观 察菌 体 生长 情 况 ， 生 长 菌 体 为 阳性 （ ＋ ） ， 不生 长 菌 体 为 阴 性 （ 一 ） ， 以 不生 长 菌 的试 验 样 品 的最低 浓 度 为香 樟 油最 低 抑 菌浓 度 （ Ｍ Ｉ Ｃ） ， 以丙 酮作 为 阴性 对 照 。 重 复 ２次 。 ２ 结果 与 分析 香 樟精 油 对金 黄 色 葡萄 球 菌抑 菌 活性 测 定结 果 表 １不 同浓 度 香樟 精 油作 用下金 黄 色葡 萄球 菌 的抑 菌 圈直 径 表 ２ 香樟 精 油 对金 黄 色葡 萄球 菌最 小抑 菌浓度 的测 定