动物生理学血液学实验
动物生理学实验报告
实验日期：年月日室温：大气压：实验序号：一实验名称：动物生理学实验基础知识介绍一、实验目的掌握生理学实验的基本方法和技术，了解是生理学实验设计的基本原则，培养科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风，通过书写实验报告，提高分析、归纳问题及文字表达能力。
二、实验原理生理学是建立在实验和观察基础上的学科，生理学实验是生理学理论知识的依据与来源。
生理学实验方法一般可分为离体实验法和在体实验法两类。
在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。
生理学实验仪器一般由刺激系统、探测系统、信号调节系统和记录系统四大部分组成。
三、主要仪器、试剂、材料及装置图1、手术器械：手术刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、止血钳、玻璃分针等2、生理仪器：生物信息采集系统、刺激器、示波器、传感器、肌槽、蛙心夹等3、试剂：任氏液、台氏液、乙酰胆碱、肾上腺素等四、实验步骤、现象及记录1、教师提出生理学实验的要求2、讲解生理学的常规实验方法3、展示生理学仪器和器械，并简单讲解用途五、实验结果及数据处理六、实验讨论及思考题解答1、生理学实验的重要性在于何地？生理学实验有什么具体的要求和规则？答：生理学实验的重要性在于学习生理学的实验方法及科学的思维方法，有助于提高学生的实验能力、分析能力、创新能力和科学素养。
生理学实验要求：实验前认真预习实验指导，复习相关理论知识；实验中，认真听讲，按要求进行各项实验操作，仔细认真求实的记录实验数据；实验后，整理实验台面，处理实验废弃物和实验动物，检查实验设备及器械，认真分析实验数据，撰写实验报告。
2、生理学实验报告的一般格式、内容和要求是什么？答：格式与内容参照楚雄师院化生系化学与生命科学实验室实验报告的标准格式内容。
填写实验报告要求数据真实，不允许编造数据，认真分析总结实验中的问题。
3、举例5种常用手术器械的名称、持握方法和用途。
4、举例3种生理学实验常用仪器设备的性能和主要用途。
实验日期：年月日室温：大气压：实验序号：二实验名称：神经与肌肉的生理活动观察一、实验目的1、掌握两栖类动物神经肌肉标本制备技术2、掌握肌肉收缩种类及其刺激条件3、学习电刺激器、生理信号放大器和计算机处理系统的使用方法。
动物生理学实验三 鱼类血液涂片制作与血细胞计数
重要的作用，比如细菌感染、病毒感染以及血液寄生虫疾
病的检测。目前该技术已成为水产技术从业人员的必备技 能，也是执业资格考试的重点内容。
涂片经瑞氏-吉姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈 现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。一般细 胞的细胞核嗜碱性，能被碱性燃料染成蓝色，而细胞质基
质嗜酸性，能被酸性燃料染成红色。
实验三 鱼类血液涂片制作与血细胞计数
血液：是一种由血浆和血细胞组成的流体组织，由心脏 搏动推动在心血管系统中不断循环流动，具有运输、防御和
免疫、维持内环境的相对稳定和参与体液调节等多种功能。
血液具有维持生物体内环境稳态的作用，正常情况下血 液中的的各项生理指标处于相对稳定的状态，同时各项指标 也能够反映一个生物个体的健康程度，因而血液检测已成为
血细胞计数法是将小量待测样品血液的悬浮液置于一 种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称细胞计 数板），于显微镜下直接计数，根据血液稀释的倍数，
进一步推算出血液中血细胞数的一种方法。
鱼类麻醉前后对比示意图
2、血液的采集 将准备好的2mL注射器，抽动活塞用肝
素钠溶液将注射器内湿润，为血液的采集做好准备工作。血
，再用伊红复染1分钟，用蒸馏水冲洗，待干后镜检。
涂片干燥后加吉姆萨染液染色5分钟
冲洗后滴加少量伊红，染色1分钟
直接流水冲洗1分钟
（切勿先倒掉染液） 涂片经水洗干燥后镜检
二、血细胞计数
血细胞计数板的结构 XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格 。0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室 面积是1mm2 ，分为400个小格，每小格面积是1/400mm2。
胞悬液混合不均匀，需重新将细胞悬液进行混合，再重新
动物生理学实验指导书
动物生理学实验指导书生理学实验指导目录实验一神经生理实验1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备1.2 神经干动作电位引导 1.3 神经传导速度的测定实验二血液生理实验2.1 红细胞计数 2.2 红细胞渗透脆性试验实验三循环生理实验之蛙心起搏点及心肌特性3.1 蛙心起搏点 3.2 心肌特性实验四循环生理实验之蛙心灌流 4.1 蛙心灌流实验五循环生理实验之动脉血压的直接测定及其影响因素5.1 动脉血压的直接测定及其影响因素实验六消化生理实验7.1 胃肠运动的直接观察 7.2 小肠吸收和渗透压的关系 7.3 离体肠段运动描记实验七泌尿生理实验8.1 尿的分泌及其影响与调节实验八泌尿、循环、呼吸生理综合实验（综合计划 07级）实验九肌肉生理实验9.1 阈刺激、阈上刺激与最大刺激 9.2 肌肉的单收缩9.3 肌肉的强直收缩和收缩总和实验一神经生理实验年月日星期1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备目的和原理：蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，它的离体组织所需要的生活条件又比较简单，易于控制和掌握，因此在实验中常用蟾蜍或蛙坐骨神经腓肠肌标本来研究神经肌肉的一般生理，如：神经干动作电位引导、神经传导速度测定、肌肉收缩的机能等。
实验对象：蟾蜍或蛙实验器材和药品：中式剪子，眼科剪，眼科镊，蛙板，玻璃分针（玻璃勾），探针，锌铜弓，培养皿，大头针，棉花，线，任氏液，纱布等。
实验方法：1、破坏脑脊髓取一只蟾蜍或蛙，用自来水冲洗干净。
保定好，用探针从枕骨大孔垂直刺入，然后向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织，再向后刺入脊椎管捣毁脊髓。
此时蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表示脑脊髓破坏完全。
2、剪除躯干上部及内脏，提起蟾蜍的背部，在骶髂关节水平以上0.5-1.0厘米处剪断脊柱（见图），用左手捏住蟾蜍骶髂关节以下的脊柱，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持中式剪刀，沿脊柱两侧剪除皮肤肌肉和一切内脏（注意勿损伤坐骨神经），仅留骶尾联合以下的后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。
《人体及动物生理学实验》教学大纲
《人体及动物生理学实验》教学大纲一、课程基本信息课程编码：0905127B课程名称：人体及动物生理学实验英文名称：Animal Physiology Experiments课程类别：专业核心课总学时：33总学分：1适用专业：生物科学（检验与检测方向）二、实验课程的性质、目标与任务(一)实验性质人体及动物生理学实验是高等院校生物教育专业主要专业课之一，也是生物科学专业的一门重要的专业基础课程，普通生物学、生物化学是本课程的先修课程。
该实验课与人体及动物生理学理论课程同步进行，主要学习在人体及动物体上进行实际实验的方法和技术，包括解剖和生理两方面的内容，其中组织解剖是基础，生理功能是重点。
（二）实验目标与任务课程教学目标在于通过实验动手操作，使学生掌握生理学实验的基本理论、方法和技能；从实验中观察到的生理现象或效应，可加深对人体及动物生理学理论知识的直观理解，为后续学习专业基础课程、掌握临床操作技能和开展科学研究等打下坚实的基础。
通过课堂教学等环节培养学生扎实的人体及动物生理学实验技能和创新思维与意识，支撑专业学习成果中相应指标点的达成。
三、实验课程教学基本要求主要以活体动物或具有生物学活性的材料为研究对象，采取急性离体和在体实验的实验方法，主要利用急性分离、离体灌流等实验技术设计动物生理学的实验内容，用以验证动物生理学的基本理论。
大部分实验是以学生自己设计、动手操作为主，发挥学生的主观能动性，在实践中培养学生掌握科学实验的基本方法及操作技能，培养科学的思维方法及严谨的科学态度，培养动手能力及独立解决问题的能力。
其次，通过计算机对实验结果的处理、统计以及对实验结果进行分析讨论，书写规范的实验报告，使学生初步掌握撰写科技论文的基本方法。
四、实验教学内容及要求实验一用显微镜观察四种基本组织【实验类型】演示性【目的与要求】联系机能了解被覆上皮组织的结构特点及分布；观察并了解结缔组织的共同特征，并联系机能了解结缔组织的结构特点及分布；比较观察平滑肌、骨骼肌和心肌三种肌纤维的结构特点；观察神经元的结构特点及尼氏体的形态与分布；观察有髓神经纤维的的形态结构；识别并比较观察各种血细胞与血小板的形态特征。
实验报告血液凝固及其影响因素
实验五：血液凝固及其影响因素实验人：同组人：【实验目的】1．学习血液凝固的基本过程2．了解加速或延缓血液凝固的一些因素【实验原理】血液凝固是一个酶的有限水解激活过程，在此过程中有多种凝血因子参与。
根据凝血过程起动时激活因子来源不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。
内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
【实验材料和用具】家兔清洁小试管7个、小烧杯2个、竹签、秒表、试管架、哺乳动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、线、棉花、水浴槽、冰盒液状石蜡、肝素、草酸钾1~2mg、脑匀浆液、生理盐水【实验过程】1、动物麻醉及颈部手术（此部由助教老师操作）取一只动物，称重。
按1g/kg体重的剂量将乌拉坦（氨基甲酸乙酯）由耳缘静脉缓慢注入，观察动物肌张力、呼吸与角膜反射的变化。
动物麻醉后背位固定于兔手术台上。
剪去颈部手术野的毛，沿颈正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一5～7cm的皮肤切口。
分离皮下组织及肌肉。
2、颈总动脉插管（此部由助教老师操作）在气管两侧辨别并分离颈总动脉，颈总动脉下方穿两条线备用。
在左侧颈总动脉的近心端夹一动脉夹，在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。
用小剪刀在结扎线的近侧（结扎线与动脉夹之间）沿向心方向剪一小斜口（约占管径的一半），向心脏方向插入动脉插管，由备用的线结扎固定。
取血时将动脉夹松开即可。
3、血液凝固的加速和延缓观察1.打开兔颈总动脉夹，血液从动脉插管流出，弃去第一份1mL动脉血后，向每个试管中注入1mL兔动脉血，并摇匀。
2.自血液流出动脉插管开始计时。
除第1管外，其他各管每隔15秒钟将试管倾斜一次，观察液面是否倾斜即血液是否流动，直到试管内血液不再流动为止，记录凝血时间。
3.当第2管已经凝固时，再倾斜第1管看血液是否凝固，若尚未凝固则按上述方法每隔15秒钟倾斜一次，直到血液凝固为止，记录凝血时间，即为该兔血的凝固时间。
动物医学-动物生理学《血液》课件
被网状内皮系统吞噬
白细胞的形态和数目
破坏 通过消化、呼吸、泌尿道排出体外 白细胞的功能
与被破坏的组织残片和细菌一 起形成脓液
白细胞的生成和破坏
血液生理
循环血液中的血小板是无色透明、 无细胞核、园盘形或杆形小体。
血小板的形态和数目 血小板的生理功能 血小板的生成和破坏
血液生理
红细胞的主要功能是运输O2和 CO2，这项功能是由红细胞所含的血 红蛋白来实现的。红细胞含有大量血 红蛋白（haemoglobin,HB）
——珠蛋白+亚铁血红素
动画
红细胞的形态和数目 红细胞的生理特性 红细胞的功能 红细胞的生成和破坏
血液生理
红细胞的形态和数目 红细胞的生理特性 红细胞的功能 红细胞的生成和破坏
生理特性——
粘附、聚集、释放反应、 收缩
血小板的形态和数目 血小板的生理功能 血小板的生成和破坏
血液生理
血液生理
功 能——
1、参与凝血 2、参与生理性止血 3、维持血管内皮完整性
血小板的形态和数目 血小板的生理功能 血小板的生成和破坏
血液生理
干细胞 巨核定向细胞 巨核细胞
血小板的存 活时间很短，衰 老血小板绝大部 分是在脾、肝和 骨髓内被网状内 皮细胞所吞噬。
血液生理
三、血细胞及其功能:
红细胞生理 白细胞生理 血小板
血液生理
哺乳动物——无核、双凹圆盘形细胞。 骆驼和鹿——呈椭圆形。 禽类——有核的椭圆形细胞。
红细胞是血细胞中数目最多的 一种（1012个/升）。同种动物的红 细胞数目常随品种、年龄、性别、 生活条件等的不同而有差异。
红细胞的形态和数目 红细胞的生理特性 红细胞的功能 红细胞的生成和破坏
兽医重要知识点总结
兽医重要知识点总结一、基础知识1. 动物生理学：兽医需要了解动物的生理结构、生理功能和生理调节等方面的知识，以便能够正确诊断和治疗疾病。
2. 动物病理学：兽医需要掌握动物疾病的病因、病理变化、临床表现、诊断方法和治疗原则等知识，以便能够及时有效地治疗动物疾病。
3. 兽医药理学：兽医需要掌握各种动物用药的作用机理、用药原则、剂量计算、药物相互作用等知识，以便能够正确地使用药物治疗动物疾病。
4. 动物行为学：兽医需要了解动物的行为特点和行为表现，以便能够正确处理和照顾动物，同时也有助于动物诊断和治疗。
5. 动物营养学：兽医需要了解动物的营养需求和饲养管理，以便能够正确地进行动物饲养管理和营养调理。
6. 兽医微生物学：兽医需要了解动物身体内常见的微生物，包括病原微生物和正常微生物，以便能够正确预防和控制微生物引起的疾病。
7. 兽医流行病学：兽医需要了解动物疾病的流行规律、传播途径、预防控制措施等知识，以便能够及时预防和控制疾病的传播。
二、诊断技术1. 兽医临床检查：兽医需要掌握动物的临床检查方法，包括观察、触诊、听诊、打针、抽血、化验等技术，以便能够准确地诊断动物疾病。
2. 兽医影像学：兽医需要了解动物的X光、超声波、CT等影像检查技术，以便能够准确地诊断和治疗骨折、器官病变等疾病。
3. 兽医实验室检查：兽医需要了解动物的生物化学检查、血液学检查、微生物学检查等实验室技术，以便能够准确地诊断和治疗动物疾病。
4. 兽医遗传学：兽医需要了解动物的遗传学知识，包括遗传病的诊断和治疗、遗传疾病的预防等技术，以便能够正确地进行动物遗传病的处理。
5. 兽医技术：兽医需要掌握各种动物手术和治疗技术，包括麻醉、手术、康复等技术，以便能够正确地进行动物手术和治疗。
三、预防控制1. 兽医病防控管理：兽医需要了解动物疾病的预防控制方法，包括疫苗接种、环境卫生、饲养管理、患病动物的隔离等技术，以便能够及时预防和控制疾病的传播。
动物生理学4血液
动物生理学4血液动物生理学：血液血液，作为动物体内重要的生理液体之一，承担着多种重要的功能。
它由血浆和血细胞组成，可以在动物体内循环运输氧气、营养物质和代谢废物，调节体温和酸碱平衡，并参与免疫和凝血等生理过程。
本文将对动物血液的组成、功能和生理调节等方面进行详细介绍。
首先，我们先来看血液的组成。
血液由血浆和血细胞两部分组成，其中血浆是血液的液体基质，占据血液总体积的55%左右，主要包括水、蛋白质、糖类和脂类等成分。
血细胞又分为红细胞、白细胞和血小板三种，红细胞负责携氧，白细胞参与免疫和抗炎过程，血小板则主要参与血液凝固的过程。
血液的主要功能之一是运输氧气和营养物质。
红细胞携带的血红蛋白能与氧气结合，在肺部从气体中将氧气吸收，并在全身循环中将氧气输送至组织和细胞，供其进行有氧呼吸。
同时，血液中的营养物质如葡萄糖、脂肪酸、氨基酸等也可以被吸收并运输至细胞，供能和合成新的物质。
血液还能够帮助维持体温和酸碱平衡。
血液循环能够将体温分布到全身，使得机体各部位保持适宜的温度范围。
同时，血液还可以通过碳酸氢盐体系调节细胞外液的酸碱平衡，保持血液pH值的稳定，维持正常的生理功能。
此外，血液也参与免疫和凝血过程。
白细胞是机体的免疫细胞，能够识别和攻击入侵的病原体，维护机体免受感染。
血小板则可在血液受伤时迅速聚集，形成血栓，阻止血液的流失。
凝血过程中的一系列反应依赖于血浆中的凝血因子，形成凝血酶，最终使伤口形成坚实的血栓，帮助伤口愈合。
血液的生理调节具有相当的复杂性。
例如，当体内发生出血状况时，机体会通过肾上腺素、血小板激活因子和其他途径激发血液凝固的过程，起到止血的作用。
另外，在高温或剧烈运动等情况下，机体会通过扩张毛细血管调节血液的流通量，以防止体温过高和体力透支。
总结起来，血液作为动物体内重要的生理液体，承担着多种重要的功能。
它不仅能够运输氧气和营养物质，维持机体的基本代谢需要，还能够调节体温和酸碱平衡，参与免疫和凝血过程等。
动物生理学第四章 血液
第二节 血细胞生理
一、红细胞（RBC） 1. 红细胞的形态、数量
1.1 形态
正常人成熟红细胞无细胞核和其它细胞器， 胞质中主要成分是血红蛋白（hemoglobin Hb），呈双凹圆盘状。
1.2 数量
♂ 450－550万个/mm3 ♀ 350－460万个/mm3
2. 红细胞的生理特性
2.1 红细胞膜对物质通透的选择性 O2和CO2—单纯扩散；氨基酸和葡萄糖 等—易化扩散；一价负离子（Cl-、HCO3-） 较易通过； 二价负离子与正离子均 难于通 过。 2.2 红细胞的可塑性变形 红细胞在全身血管中循环运行，常要 挤过口径比它小的毛细血管和血窦孔隙。这 时红细胞将发生变形，通过后又恢复原状。 这种变形能力称之。
正常人血液中含血 小板10-30万/mm3。
过多（>100） 血栓 出血 过少（<5）
2. 血小板生理特性
粘附 聚集
当血管内膜受损伤暴露出胶原组织 时，血小板便会粘附在胶原组织上。 可逆和不可逆聚集，
生理性致聚剂：ADP、TXA2、胶原、凝血 酶。 病理性致聚剂：细菌、病毒、药物。
释放
复习思考题
1. 晶体渗透压和胶体渗透压各有什么作用？ 2. 简述血浆和血清的区别。 3. 血小板在生理性凝血过程中起何作用？ 4. 简述血液凝固的基本过程，并指出内源性凝血与外源性凝血的主 要异同点。 6. 什么叫血型？说明输血的基本原则。为何同型血相输还要做交叉 配血试验？ 7. 将红细胞置于0.9%NaCl和5%葡萄糖的混合液中，其形态与功能 有无改变？为什么？ 8. 一次失误将500mL的蒸馏水输给了病人，会引起何后果？为什 么？ 9. 已知某人血型为A型或B型，能否鉴定他人血型？
2.3 红细胞的渗透脆性和溶血
观察小鱼尾鳍的血液流动
观察小鱼尾鳍的血液流动生物体内必须有血液循环来将氧气和养分带到细胞，同时带走废物和二氧化碳。
鱼类是脊椎动物中的一类，它们的血液循环与哺乳动物略有不同。
鱼类的血液循环中只有一个心脏，从心脏出来的血液需经过鳃器才能氧合。
此外，鱼类血液中的血细胞中红细胞数量也相对较少。
实验目的通过观察小鱼的尾鳍，探究鱼类血液循环的基本流程和特点。
实验材料•一只完好的小鱼•一个显微镜•盐水实验步骤1.将小鱼放到盐水中，以便观察时鱼体细胞不受过度伤害。
2.将小鱼的尾鳍静止在显微镜视野内。
3.从静脉端插入一小针在血管内（可采用一头图钉），注射一到两滴血液在血管内，并尽量有节制地注射。
这里应注意不能损伤鱼的生命健康。
4.等待血液开始流动，用显微镜观察血液流动变化的过程。
实验结果通过观察，我们可以看到小鱼尾鳍血液在血管内的流动情况。
由于鱼类血液循环不同于其他动物，其尾鳍血管呈现网格状，分成多个分支，在分支交叉处密集连接，血液可以快速地从一个部位流入另一个部位。
通过进一步观察，我们还可以发现血液中的红细胞数量相对较少，而血浆中含有丰富的稀释半胱氨酸等营养物质，这些物质可以向机体内的器官传送必要的养分和氧气，同时带走废物和二氧化碳。
与意义本实验通过观察小鱼尾鳍血液的流动过程，探究了鱼类血液循环的基本特点。
另外，通过本实验中的注射操作，我们还可以掌握基本的动物生理学实验技能。
对于生物学研究者而言，掌握动物的生理学知识是必不可少的一部分，这些知识有助于我们深入了解生物体内的物质分布规律，为我们研究生命机理提供更为详实的参考。
动物生理学-血液
血浆晶体渗透压与胶体渗透压
有机体细胞质的渗透压与血浆的渗透
压相等，渗透压与细胞质和血浆的渗透压 相等的溶液，叫做等渗溶液。154 mmol/L （0.9%）的NaCl溶液和278 mmol/L（5%） 的葡萄糖溶液的渗透压与血浆渗透压大致 相等，故把0.9%的NaCl溶液称为等渗溶液， 或称为生理盐水。低ຫໍສະໝຸດ 溶液高渗溶液等渗溶液
哺乳动物等渗溶液：0.9％的NaCl溶液（生理盐水）
5％的葡萄糖溶液
两栖动物等渗溶液：0.67％的NaCl溶液
（四）酸碱性
哺乳动物血液的pH值约为7.35～7.45，呈弱 碱性。各种畜禽的血浆平均pH 值种间差别较小， 如马为7.40、牛为7.50、绵羊为7.49、猪为7.47、 犬为7.40、猫为7.50、鸡为7.54。静脉血内含碳 酸较多，因而pH值比动脉血的稍低，但变化幅度 一般不会超过平均pH值的±0.05。
一、 血液的组成 二、 血量 三、 血液的理化特性
血液由液体成分的血浆和悬浮其中的有 形成分—血细胞所组成。血液的组成及主 要成分所占百分比如下：
血 细胞
血量(blood volume):动物体内的血液总量,是 血浆量和血细胞量的总和。
循环血量:在安静状态下，大部分血液在心 血管内循环流动，这部分血液量叫… 储备血量:血液另有一部分血液则滞留在肝、 肺、脾、皮下静脉丛和皮肤等处，这些流动 缓慢，红细胞比容较高的血液量叫…或贮血 量。因此，把肝等器官称为贮血库。
一名健康的公民一生可以献多少血？
按照《中华人民共和国献血法》的规定，献 血年龄为18－55周岁，两次献血间隔为六个月以 上，每次献血量为200－400毫升。如果一名符合 献血标准的健康人按每六个月献血一次，每次献 血400毫升计算，那么，一个人一生可献血74次， 累计献血量3万毫升。
老鼠采血实验报告
一、实验目的1. 掌握动物采血的基本操作方法。
2. 了解血液生理指标与动物生理状态之间的关系。
3. 培养实验操作技能和科学严谨的态度。
二、实验原理采血是研究动物生理学、病理学、遗传学等领域的重要实验手段。
通过采血可以获取动物的血液样本，分析血液中的各种生理指标，从而了解动物的生理状态和健康状况。
本实验采用股动脉采血法，通过手术操作获取动物的血液样本。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：成年雄性SD大鼠（体重约200g）。
2. 实验器材：手术器械、注射器、剪刀、镊子、酒精棉球、碘伏、生理盐水、解剖显微镜、实验台等。
四、实验步骤1. 实验动物准备：将实验动物置于实验台上，固定好四肢，充分暴露股动脉部位。
2. 手术操作：a. 用碘伏消毒实验动物股动脉部位，并铺上无菌手术巾。
b. 用手术刀在股动脉部位切开皮肤，暴露股动脉。
c. 用镊子轻轻提起股动脉，用剪刀剪断股动脉，使血液流出。
d. 用注射器吸取血液，记录采血量。
3. 实验动物恢复：将采血后的实验动物放回实验笼中，观察其恢复情况。
4. 血液样本处理：a. 将采集到的血液样本分为两部分，一部分用于生理指标检测，另一部分用于血型鉴定。
b. 将生理指标检测部分的血液样本置于离心机中，离心5分钟，取上清液备用。
c. 将血型鉴定部分的血液样本按照实验室要求进行血型鉴定。
五、实验结果与分析1. 生理指标检测结果：a. 通过检测血液样本中的红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度等指标，了解实验动物的红细胞生成、白细胞生成和携氧能力。
b. 分析实验结果，判断实验动物的生理状态是否正常。
2. 血型鉴定结果：a. 根据血型鉴定结果，了解实验动物的血型类型。
b. 分析实验结果，判断实验动物是否具有某种血型特异性。
六、实验讨论1. 本实验采用股动脉采血法，操作过程中需注意无菌操作，避免感染。
2. 实验动物在采血过程中可能出现应激反应，需观察实验动物恢复情况，确保实验动物的健康。
3. 实验结果受多种因素影响，如实验动物的年龄、性别、体重等，需在实验报告中详细记录实验条件。
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实验报告
课程名称：动物生理学指导老师：实验名称：血液学实验
一、实验目的和要求
1.掌握实验用兔颈动脉采血的方法
2.了解红细胞比容及其测定方法
3.血液凝固的基本过程及影响血凝的一些因素
装
二、实验内容和原理
订
将抗凝血放在特制有刻度的玻璃管(温氏分血管)中，经过离心沉淀，使血细胞线
与血浆分离。
红细胞下沉，彼此压紧而又不改变每个血细胞的正常形态。
根据玻璃管刻度的读数，可以计算出红细胞在全血中所占的容积百分比——即红细胞比容。
血液凝固可分为三个主要步骤:
第Ⅰ阶段是凝血因子FX激活成FXa并形成凝血酶原复合物（凝血酶原激活物）第Ⅱ阶段是凝血酶原（Prothrombin，FⅡ）激活成为凝血酶（thrombin，FⅡa）第Ⅲ阶段是纤维蛋白原（FI）转变成纤维蛋白（filbrin，FIa）
在这三个主要步骤中都需要Ca离子的参与
三、主要仪器设备
大兔一只，兔手术保定台，
烧杯（500ml，50ml），常用手术器械（手术刀、毛剪、手术剪、止血钳），线动脉套管，动脉夹
温氏分血管，长颈滴管，5毫升试管，离心机，天平，5ml 注射器
试管，试管架，吸管
2％戊巴比妥钠，3.8％柠檬酸钠，肝素，1％氯化钙，5％草酸钾，液体石蜡，带有开叉橡皮管的玻棒等。
四、操作方法和实验步骤
手术操作
2％戊巴比妥钠按1ml/kg的剂量从耳缘静脉注入实验用兔
麻醉后仰卧固定于手术台上（同时准备实验用试管等）
剪去颈部术野的被毛，切开皮肤，找出两侧颈动脉
将颈动脉剥离2厘米左右，然后在颈动脉下面穿两条线。
将一侧颈动脉在远心端用线结扎，再于近心端用动脉夹夹住。
结扎处与动脉夹之间最好不少于 1.5厘米
用眼科剪刀在这段动脉上靠近结扎处1／4的地方，斜向近心方向剪一小口，将动脉套管插入，用线扎好，以免滑脱，待用（需采集血样时打开动脉夹即可）
比容的测定：（1）用配有长注射针的注射器吸取含肝素的抗凝血，然后将注射针插入温氏分血管的底部，缓缓地将滴管内的血液注入分血管内(不得有气泡)，使血液正确地装到刻度10处。
（2）离心：将温氏分血管放入离心机中，以每分钟3000转的速度离心30分钟。
取出分血管，观察红细胞所占的容积并记录其数值(不包括白细胞和血小板沉积所形成的灰白色薄层)。
然后再以3000转速度离心5分钟，如红细胞的容积与上次记录相同，表明红细胞已被压紧，读数即为红细胞的比容(如读数为4. 0，
即表示100毫升血液中，红细胞容积占40毫升)。
影响血凝的物理因素
a 取试管3支，一支管内加少量棉花，一支管内壁涂少许液体石蜡，一支不作任何处理，为对照。
b 将以上三支试管分别加入新鲜血液2毫升，每30秒轻轻地倾斜试管一次，分别记录三支试管的凝血时间。
温度对血凝的影响
取试管两支，分别加入新鲜血液2毫升。
一管置于常温或37℃水浴中，一管放在低温或冰箱内，记录两支试管的凝血时间。
钙离子对血凝的影响
1．取试管3支，一支放入3.8％柠檬酸钠3滴，一支加入5％草酸钾3滴，一支不作任何处理，为对照(与1共用)。
然后，再向各管分别加入1毫升新鲜血液，混合后观察并记录血凝情况。
2．将加入柠檬酸钠管和草酸钾管分别再加1％CaCl2 1—2滴后，观察并记录血凝情况。
肝素的作用
取一支试管放肝素8单位，再加入新鲜血液1毫升，摇匀后，观察其结果。
取新鲜血液50毫升，放入烧杯中用带有开叉橡皮管的玻棒搅动，以除去其中的纤维蛋白；将除去纤维蛋白的血液静置之，观察其能否凝固。
五、实验结果与处理
六、实验分析与讨论
实验数据分析与讨论：
第一组实验：从理论教学书中查阅得，兔的血液比容为35~45ml/100ml,实验数据符合理论值
第二组实验对比：通过对比试验发现，棉花会促进凝血作用，而石蜡削弱了凝
血作用。
1.棉花给血液凝固提供了一个粗糙的表面，容易使血小板发生黏
着，聚集，然后方冉生解体，释放许多凝血因子和血小板因子；
另外棉花含有许多负电荷和植物纤维，也能够激活FXII，启
动内源性凝血途径，因此加快了凝血速率
2.石蜡是表面光滑，不易引起血小板黏着，无法发挥凝血作用，
并且石蜡为绝缘体，把试管表面所带负电荷覆盖，不利于FXII
的激活，所以相比正常对照组要慢
第三组实验对比：试验中发现单单草酸钾或者柠檬酸的情况下，血液都未发生
凝血作用，而加入氯化钙后，凝血作用较为迅速。
1.凝血中Ca2+是重要的凝血因子，在是试管中加入了草酸钾以后，
草酸钾与钙离子发生反应，生成草酸钙沉淀，血液中没有钙离
子，故血液难以发生凝固
2.柠檬酸与钙离子结合则成可溶性络合物，同样可以起到抗凝血作用
第四组实验对比：实验发现37℃下凝血作用较快，而4℃下则很慢，其原因分析如下：
1.血液凝固的过程中有许多蛋白质酶的参与，所以当温度降低的
时候，酶的活性降低，因此放置在冰水中的试管长时间不凝固 2.室温大致低于体内温度，所以将血液放于37℃的时候恰好
到达酶活性最高的状态，因此加速了血液的凝固
第五组实验：肝素具有抗凝血作用，与抗凝血酶III结合，可使抗凝血酶III 与凝血酶的亲和力增强
第六组实验：橡皮管在搅拌过程中，将形成的纤维蛋白收集到橡皮管上，没有纤维蛋白网罗作用的血液无法凝固，同时橡皮管上缠绕上了
白色丝状的物质
实验结论：
1.血液凝固过程可分为三个相互联系的主要阶段，其中任何一个阶段被破坏，
血液凝固过程都会终止，血液凝固的过程实际上是纤维蛋白的形成过程
2.血液凝固手接触面、温度、钙离子等理化因素的影响，血液接触面粗糙，能
加速血液凝固，而血液接触面光滑，降低温度则使血凝减慢，此外加肝素等抗凝剂，加草酸钾出去血液中的钙离子等课延缓血液凝固
试验中部分操作失误之处：
1.实验中加入草酸钾溶液后再加入氯化钙，发现血液未发生凝血，经过排查发
现使用的试管在之前使用时使用过肝素，由于未清洗赶紧，可能导致血液无法发生凝结。
2.实验开始时可能由于操作不当或者操作幅度过大等原因惊吓到了兔子致使兔
子两次尿液失禁。
在参阅其他实验资料以后还发现有2种其他的采血方法：
1、心脏采血法
将兔仰卧固定在手术台上，把左侧胸部相当于心脏的部位的被毛剪去，用碘伏、酒精消毒皮肤。
实验者用左手触摸左侧第3-4肋间，选择心跳最明显处作穿刺。
一般由胸骨左缘外3mm处将注射针头插入第三肋间隙。
穿刺时最好用左手触诊心跳，在触诊的配合下穿刺。
经6-7天后，可以重复进行心脏穿刺术。
家兔一次可采取全血量的1/6-1/5。
2、耳缘静脉采血法
穿刺采血法：是家兔最常用的采血方法。
具体方法同耳缘静脉注射给药。
此法一次可采血5～lOml，可多次重复使用。
针头不可连接注射器，直接让血液滴在有抗凝剂的试管内。
切割采血法：当兔耳部血管被充分扩张后，可用刀片割破耳缘静脉，或用注射针刺破耳缘静脉，让血液自然流出。
采血穿刺和注射穿刺方向不同。
采血穿刺逆血流方向行针，采血量越大，越要靠近根部行针。
个人认为上述两种方法较本实验中的颈动脉采血法的优点在于兔子无需处死，可以多次取血。
心脏采血法不容易控制，不能很准确得将针头插入心脏中。