无菌检查用培养基适用性验证报告

无菌检查用培养基

适用性验证报告

1.验证目的：为证明硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基适合于细菌，真菌的无菌检查，总结本验证报告。

2.参照标准：《中国药典》 2010版二部附录XI H无菌检查法。

3.验证项目：

硫乙醇酸盐流体培养基、营养肉汤、改良马丁培养基适用性检查。

品名：硫乙醇酸盐流体培养基

生产厂家：批号：规格：

品名：营养肉汤培养基规格：

批号：生产厂家：

品名：改良马丁培养基

生产厂家：规格：批号：

仪器设备：4.2.

编号： 4.2.1. 压力蒸汽灭菌器：型号：双人净化工作台：4.2.2. 编号：型号：

电热鼓风干燥箱：型号：编号： 4.2.3. ～生化培养箱4.2.4. (2328：型号：) 编号：℃ )℃35(30恒温培养箱

4.2.

5.～型号：编号：稀释剂：4.3. 无菌氯化钠溶液 0.9%

5.菌液制备：小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉24取经培养5.1.18～的ml倍稀释至小于100cfu∕1ml加入到9ml 0.9%无菌氯

化钠溶液中，10汤新鲜培养物菌悬液备用。无菌氯9ml 0.9%1ml加入到取经培养24～48小时的白色念珠菌的改良马丁培养物5.2. ml的菌悬液备用。100cfu 化钠溶液中，10倍稀释至小于∕ 2个平皿）6.菌液计数：（每种菌液接种加入培养皿，枯草芽孢杆菌各1ml分别取上述制备的金黄色葡萄糖球菌、铜绿假单胞菌、℃培养箱3530～，置皿，注入不超过45℃营养琼脂培养基15～20ml每种菌液平行做2皿，注入不超过21ml加入培养皿，平行做培养二天，取上项制备的白色念珠菌菌液℃培养箱培养三天。23，置～281545℃的玫瑰红钠琼脂培养基约～20ml 无菌培养基的无菌性检查7. 7.1培养基的配制蒸馏水，加热1L29.25g硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基，加。15min℃灭菌121，12ml 煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量

营养肉汤培养基的配制：取营养肉汤培养基18g，加1L蒸馏水，加热搅拌使其

完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121℃灭菌15min。

改良马丁培养基的配制：取改良马丁培养基28.5g，加1L蒸馏水，加热搅拌使

其完全溶解，摇匀分装到到试管中，每只试管装量9ml，121℃灭菌15min。

7.2培养基的培养

硫乙醇酸盐流体培养基和营养肉汤培养基5支，置于30～35℃的培养箱中培养

14天；改良马丁培养基5支，置于23～28℃的培养箱中培养14天℃，逐日观察情况。

”为不生长”为生长，“-注：“+7.培养基灵敏度检查次独立的平行试验。硫乙醇酸盐流体培养基等灵敏度检查至少应进行7.1.3 7.2培养基的配制蒸馏水，加热

1L，加29.25g硫乙醇酸盐流体培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基

煮沸使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121℃灭菌15min。营养肉汤培养基的配制：取硫乙醇酸盐流体培养基18g，加1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到试管中，每只试管装量12ml，121℃灭菌15min。改良马丁培养基的配制：取改良马丁培养基28.5g，加1L蒸馏水，加热搅拌使其完全溶解，摇匀分装到到试管中，每只试管装量9ml，121℃灭菌15min。

7.3.培养基接种

取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu/ml的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养3天；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种小于100cfu/ml的白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天。逐日观察结果。

7.4.结果判断

空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。

注：“+”为生长，“-”为不生长

验证周期：同种培养基的不同批号，不同生产厂家均应进行适用性验证。 8 9结论：

无菌培养基的适用性检查记录培养基：1. 硫乙醇酸盐流体培养基批号：_______________ 检验日期：

2. 营养肉汤培养基批号：_______________ 检验日期：

3. 改良马丁培养基批号：_______________ 检验日期：

一、培养基的无菌性检查

培养温度：硫乙醇酸盐流体培养基℃改良马丁培养基℃

注：“+”为生长，“-”为不生长

二、培养基的灵敏度检查

1. 菌液制备：

（1）金黄色葡萄球菌0.9%无菌NaCl溶液至含菌量 CFU/ml 第___代[CMCC(B)26003]

（2）枯草芽孢杆菌0.9%无菌NaCl溶液至含菌量 CFU/ml 代[CMCC(B)63501] 第（3）铜绿假单胞菌0.9%无菌NaCl溶液至含菌量 CFU/ml 第 [CMCC(B) 10104]

___代（4）生孢梭菌[CMCC(B)64941] 0.9%无菌NaCl溶液至含菌量 CFU/ml

代第___（5）白色念珠菌0.9%无菌NaCl溶液至含菌量 CFU/ml [CMCC(F)98001] 第代（6）黑曲霉0.9%无菌NaCl溶液至含菌量 CFU/ml 代第

[CMCC(F)98003]

2. 检查结果

细菌培养温度____℃ 3天霉菌及酵母菌培养温度____℃ 5天

-“”为生长，+注：“”为不生长附录无菌检查法培养基的适用性检查，《中华人民共和国药典》本品按三、结论：年版2010（二部）结果_______________。日期：/复核人

日期：/检查人