固定液
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7、常用固定剂的种类和配方是什么?
(1)4%多聚甲醛磷酸缓冲液pH7.4(多聚甲醛40g,0.1mol/LPBS液pH7.4500ml,两者混
合加热至60℃,搅拌并滴加1NNaOH至清晰为止,冷却后加PBS液至总量1000ml)。
(2)10%中性缓冲福尔马林液(浓甲甲醛10ml,0.01mol/lpH7.4PBS90ml)。
(3)100%冰丙酮。
(4)戊二醛-甲醛液(戊二醛1ml,浓甲醛10ml,蒸馏水加至100ml)。
(5)甲醛升汞固定液(即B5固定液。浓甲醛10ml,氯化汞6g,醋酸钠1.25g,蒸馏水90 ml)。
(6)醋酸-甲醛液(浓甲醛10ml,冰醋酸3ml,生理盐水加至100ml)。
(7)Bouin’s液。
(8)Zamboni’s液。采用2.5%多聚甲醛和30%饱和苦味酸,更可增加对组织穿透力和固定效果,以保存更多的组织抗原。
(9)PLP液(过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液)。
(10)碳化二亚胺(1-ethyl-3(3-dimethyl-aminopropyl)cardodiimi-HCI)液:2g溶于100 ml0.01mol/L,pH7.4PBS中。此液宜用于标记多肽类激素的组织,对标记IgA、IgG效果不佳。
(11)碳二亚胺-戊二醛液(ECD-G液)。
(12)Zenker’s液(重铬酸钾2.5g,氯化汞5g,硫酸钠1g,蒸馏水100ml,混合溶解后,临用时加水醋酸5ml)。
(13)Clarke氏改良剂(100%酒精95ml,冰醋酸5ml),用于冰冻切片的后固定。
(14)乙醚(或氯仿)与乙醇等量混合液。
(15)AAF液:95%-100%酒精85ml,冰醋酸5ml,浓甲醛10ml。
(16)Carnoy氏液:100%酒精60ml,氯仿30ml,冰醋酸10ml,混合后4℃保存备用。
(17)Methacarn氏液:甲醇60ml,氯仿30ml,冰醋酸10ml,混合后4℃保存备用。
丙酮的组织穿透性和脱水性更强,常用于冰冻切片及细胞涂片的后固定,保存抗原性较好,平时4℃低温保存备用,临用时,只需将涂片或冰冻切片插入冷丙酮内5-10min,取出后自然干燥,贮存于低温冰箱备用。