固定液
常用固定液的配制
常用固定液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
固定液总结
固定液总结什么是固定液？固定液是一种化学试剂，主要用于固定组织或细胞以保持其形态和结构。
固定液可以阻止生物材料的腐败和变性，防止其在处理和染色过程中失去结构和功能。
固定液在组织学、细胞学和病理学等领域中广泛应用，有助于观察和研究生物组织和细胞的形态、结构和功能。
常见的固定液福尔马林（Formalin）福尔马林是一种常见的固定液，广泛用于组织学研究和病理学诊断中。
它是一种含有37%甲醛的溶液，能够固定组织并保持其形态和结构。
福尔马林固定的组织可用于组织切片制备、免疫组化染色等进一步的实验。
福尔马林固定组织的优点是固定效果好、保存时间长，能够保存大部分的组织结构和抗原表达情况。
然而，福尔马林固定液会对细胞核和某些蛋白质产生交联作用，可能导致染色效果差，同时还有潜在的致癌风险，因此在使用福尔马林固定液时需要注意安全操作和废液处理。
乙醛（Glutaraldehyde）乙醛是一种常用的电子显微镜固定液，主要用于固定细胞和亚细胞结构以进行电子显微镜观察。
与福尔马林不同，乙醛固定液能够更好地保持细胞和细胞器的形态和结构，有利于观察细胞内部的细节。
乙醛固定液的使用需要注意浓度和固定时间的控制，过高的浓度和过长的固定时间可能会导致组织和细胞的变性和损伤。
此外，乙醛固定液对某些酶和蛋白质具有灭活作用，因此在使用乙醛固定液时需要根据实验需要选择合适的条件。
缓冲盐水（Buffered Saline）缓冲盐水是一种用于固定组织和细胞的温和固定液。
它通常由含有适当浓度的盐水和缓冲剂混合而成，能够保持组织和细胞的形态和结构，并且对某些抗原和酶具有较好的保存效果。
缓冲盐水固定液的优点是温和、安全、易于制备和使用，适用于一些对固定条件要求较宽松的实验。
然而，由于其固定效果不如福尔马林和乙醛固定液，保存时间较短，因此在实验设计时需要根据实验目的和需求来选择合适的固定液。
固定液的使用注意事项使用固定液需要注意以下几个方面：1.安全操作：固定液常常含有有害化学物质，使用时需要佩戴防护手套、口罩等个人防护装备，避免直接接触和吸入液体或气体，注意实验室通风。
病理组织常用固定液的配制
病理组织常用固定液的配制（免疫组化）一、常规固定液的配制（1）10%甲醛液浓甲醛 10ml蒸馏水 90ml(2 ) 缓冲中性甲醛液浓甲醛10mlPBS缓冲液（Ph7.2）90ml(3 ) 10%中性甲醛液浓甲醛10ml蒸馏水90ml碳酸钙加至饱和(4 ) Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75 ml甲醛2 ml冰醋酸5 ml该固定液中的冰醋酸，对胶原纤维等组织有膨胀作用，而甲醛对组织有收缩作用，两种试剂的混合使用，用以抵消彼此间的副作用，使组织固定达到优良的固定水平。
（5）醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水，后加入甲醛。
该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好，组织固定后，做冰冻切片，再给予显示。
当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。
从免疫组织化学的角度来说，甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测，据多人认为，它对lgA ，lgM，J链，K 链和λ链的标记效果较好，且背景清晰。
但美中不足的是：经它固定的组织，可与蛋白形成醛交联蛋白，这种醛键可封闭抗原。
固此，在免疫组化实际检测中，应根据不同的要求和需要，采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的方法，以便破坏醛键重新暴露抗原。
（6）Zenker氏固定液：重铬酸钾25g升汞50g蒸馏水1000ml冰醋酸50ml先将重铬酸钾和升汞溶于水中，尢其是重铬酸钾，应用热水或加温的方法将其溶解，然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中，如暴露于空气中，该溶液将会被慢慢氧化而便颜色加深，导致失效。
临用时，取贮存液950ml，加入50ml的冰醋酸，即可使用。
应用该固定液固定的组织，一般不要超过24h，取出组织，流水冲冼12小时以上，然后保存于75%-80%的酒精中，在切片染色前，必须用碘除去汞盐的沉着。
应用该固定液的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示骨骼肌的横纹时，应用本液可获得满意的结果，但由于其含有醋酸，故不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。
色谱分析中常用的固定液
苏州市莱顿科学仪器有限公司 TEL：*************
色谱分析中常用的固定液
一、非极性
1、100%Dimethyl polysiloxane，100%聚二甲基硅氧烷，商品名：AC1，OV-101，OV-1，DB-1，SE-30，HP-1，RTX-1，BP-1
二、弱极性
2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基(95%)二甲基聚硅氧烷，商品名：AC5，SE-52，
3、5% Phenyl 1%vinyl dimethylpolysiloxane，5%二苯基1%乙烯基(94%)二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-5，DB-5，SE-54，HP-5，RTX-5，BP-5<BR><BR>注：2、3常无严格区分，通常混称。
三、中等极性
4、50%Phenyl dimethyl polysiloxane, 50%二苯基(50%)二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-17，HP-50，RTX-50
5、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane, 14%氰丙基苯基(其中7%氰丙基7%苯基)(86%)二甲基聚硅氧烷，商品名：AC10，OV-1701，DB-1701，RTX-1701
6、50% Cyanopropyl phenyl polysiloxane，50%氰丙基苯基(其中25%氰丙基25%苯基)(50%)二甲基聚硅氧烷，商品名：AC225，OV-225，BP-225，DB-225，HP-225，RTX-225
四、强极性
7、polyethylene glycol,聚乙二醇，商品名：AC20，PEG20M，HP-INNOWAX(FFAP是其与2-硝基对苯二甲酸的反应产物)
第1页共1页。
固定液的选择原则
固定液的选择原则固定液的选择原则如下：1. 根据待分离组分的性质选择。
（1）分离非极性物质时，一般选用非极性固定液。
（2）分离极性物质时，一般选用极性固定液。
（3）分离极性和非极性物质时，一般选用极性或氢键型固定液。
（4）分离能形成氢键的物质时，一般选用氢键型固定液。
（5）分离具有不同程度极性或氢键的物质时，一般选用能形成氢键型的混合固定液。
2. 根据流动相的性质选择。
（1）当流动相极性小于固定相极性时，对非极性物质具有良好的分离效果。
（2）当流动相极性大于固定相极性时，对极性物质具有良好的分离效果。
（3）当流动相中含有亲水性的离子或粒子时，对极性物质具有良好的分离效果。
（4）当流动相中含有亲油性的分子或粒子时，对非极性物质具有良好的分离效果。
3. 根据分离模式选择。
（1）正相色谱：一般选用极性或氢键型固定液，对于极性较大的组分，可选用非极性固定液。
（2）反相色谱：一般选用非极性或中等极性的固定液，对于某些极性较大的组分，也可选用极性或氢键型固定液。
（3）离子色谱：一般选用离子交换型的固定液，根据所带电荷的性质选择合适的固定液。
（4）分子排阻色谱：一般选用凝胶型的固定液，根据分子尺寸的大小选择合适的固定液。
（5）疏水作用色谱：一般选用疏水型的固定液，根据疏水作用的强弱选择合适的固定液。
4. 根据实验条件和要求选择。
（1）对于需要高分辨率的分离，一般选用选择性较高的固定液。
（2）对于需要在较短时间内完成分离的，一般选用速度较快的固定液。
（3）对于需要在较高温度下进行分离的，一般选用高温稳定的固定液。
（4）对于需要痕量分析的分离，一般选用灵敏度较高的固定液。
5. 注意保护环境：选择环保型的固定液，避免使用对环境不友好的有机溶剂作为固定液。
总之，在选择固定液时，需要根据待分离组分的性质、流动相的性质、分离模式、实验条件和要求以及环保因素综合考虑，以得到最优的分离效果。
组织固定液的类型
组织固定液的类型
组织固定液的类型有很多，主要包括以下几种：
1.福尔马林固定液：福尔马林是一种广泛使用的固定剂，可以固定细胞和组织的结构，同时起到杀菌的作用。
2.酒精固定液：酒精固定液是一种常用的组织固定液。
酒精具有良好的杀菌作用，可以使组织保持良好的形态结构。
3.缓冲福尔马林固定液：缓冲福尔马林固定液是在福尔马林固定液中添加缓冲剂，使其pH值接近细胞内液，更适合某些特定的实验和研究。
4.寡聚肽固定液：寡聚肽固定液是一种对蛋白质固定效果较好的固定液，可以保持细胞和组织的蛋白质结构。
5.甲醛固定液：甲醛是一种常用的固定剂，可以使细胞和组织固定并保持其形态结构。
它有很好的杀菌作用，并且可以使细胞和组织保持较好的染色性能。
以上是几种常见的组织固定液类型，不同类型的固定液具有不同的特点和适用范围，根据不同的实验目的和要求选择合适的固定液非常重要。
固定液的要求
固定液在气相色谱、液相色谱以及组织学等领域中有着重要的作用，其主要要求如下：
1. 挥发性低：在操作温度下，固定液的蒸气压应尽可能低，以减少在分析过程中固定液的流失，确保色谱柱的稳定性和使用寿命。
2. 热稳定性好：在工作温度范围内，固定液必须具有良好的化学和热稳定性，避免因受热分解而影响分析结果或损坏色谱柱。
3. 适宜的粘度：固定液的粘度不宜过高，较低的粘度可以加快样品组分在两相之间的传质速度，提高色谱柱的分离效率。
高粘度会降低分子扩散速率，从而降低柱效。
4. 选择性匹配：对于不同的样品类型和分析目标，应选择具有合适选择性的固定液。
固定液的选择性决定了它对不同极性、沸点相近的物质的保留能力差异，以便有效分离复杂混合物中的各组分。
5. 溶解性能：固定液需要有足够的溶解能力来溶解待测样品的部分或全部组分，同时又不能与样品发生不可逆反应。
6. 无毒或低毒：尤其在生物样品分析时，所选用的固定液应尽量无毒或低毒，不会对人体健康和环境造成危害。
7. 兼容性：固定液需与色谱柱填料（载体）、载气及样品兼容，不产生不良反应。
总结来说，选择合适的固定液是保证色谱分析准确、高效的关键步骤之一，需要综合考虑多种因素，确保满足实验需求。
固定液的分类和选择原则
固定液的分类和选择原则以固定液的分类和选择原则为标题，我们来探讨一下固定液的相关知识。
一、固定液的分类固定液是一种用于固定生物组织或细胞的溶液，根据不同的固定目的和化学成分，可以将固定液分为以下几类：1. 醇类固定液：如乙醇、甲醇等。
这类固定液常用于快速固定和保存细胞和组织的形态结构，同时具有很好的保护作用，适用于常规组织学检查。
2. 酸类固定液：如酸性酒精、酸性硫酸铜等。
这类固定液主要用于固定某些特定的细胞或组织结构，例如染色体或胶原纤维等。
酸类固定液对脂质物质的固定效果较差，因此不适用于脂质含量较高的样本。
3. 中性缓冲液：如PBS（磷酸盐缓冲液）、Hank's液等。
这类固定液主要用于固定细胞和组织的生物学活性，能够较好地保持细胞和组织的形态和功能，适用于免疫组化和分子生物学实验。
4. 有机溶剂固定液：如乙酸、乙酸乙酯等。
这类固定液在固定过程中对细胞和组织的脂质物质和溶胀性物质具有较好的固定效果，适用于脂质或溶胀性物质含量较高的样本。
二、固定液的选择原则在选择固定液时，我们需要考虑以下几个原则：1. 根据固定目的选择：不同的实验目的需要选择不同的固定液。
例如，要观察细胞形态结构，可以选择醇类固定液；要进行免疫组化实验，可以选择中性缓冲液。
2. 根据样本性质选择：不同的样本性质对固定液的选择有所差异。
例如，脂质含量较高的样本适合选择有机溶剂固定液；而含有胶原纤维的样本可以选择酸类固定液。
3. 考虑固定液的渗透性：固定液的渗透性对于固定效果至关重要。
一般来说，较强的渗透性可以提高固定效果，但同时也可能对细胞或组织的形态和功能产生一定影响。
因此，需要根据具体实验要求选择合适的固定液。
4. 考虑固定液的毒性和安全性：固定液中可能含有一些有毒物质，因此在选择固定液时，需要考虑其对实验人员和环境的安全性。
同时，在实验过程中也要注意安全操作，避免接触到固定液。
总结：固定液的分类和选择原则是进行组织学和细胞学研究中非常重要的一环。
卡诺氏液
北京雷根生物技术有限公司
卡诺氏液
简介：
卡诺氏液、Carn oy 固定液(Carnoy's Fluid)又称卡诺氏固定液，主要由乙醇、乙酸等混合而成。
适用于一般动植物组织和细胞的固定，常用于动植物压片及石蜡切片等，有极快的渗透力，固定最多不超24h 。
其特点是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
推荐用于RNA 和DNA 染色的组织固定，亦可用于糖原染色的组织固定，能够使糖原呈细微颗粒状。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 一般小块组织固定30～40min 。
2、 稍大块组织2～4h 。
3、 如果组织块大，可适当延长固定时间，但不宜超过24h 。
注意事项：
1、 Carnoy 固定液对人体有一定的损害，请小心操作。
不宜用于固定脂类染色的组织。
2、 组织取材的厚度不同，固定时间也不同。
3、 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DF0019 DF0019 Storage Carnoy Fluid 100ml 500ml RT 避光
使用说明书 1份。
一些固定液及方法介绍
一些固定液及方法介绍一、酸1.盐酸：化学式为HCl，是一种无色透明液体，具有强酸性。
可用于清洁金属表面、去除锈迹、清洗石材等。
2.硝酸：化学式为HNO3，呈无色、无臭的液体，具有很强的腐蚀性。
可用于制备氮肥、金属表面处理等。
3.硫酸：化学式为H2SO4，呈无色、透明的粘稠液体，是一种常用的强酸。
可用于蓄电池的电解液、制造肥皂等。
4.醋酸：化学式为CH3COOH，是一种透明液体，有刺激性气味，常称为醋。
可用于食品调味、清洁光学镜片等。
二、碱1.氢氧化钠：化学式为NaOH，是一种固体碱，也称为苛性钠，具有很强的腐蚀性。
可用于清洁管道、去除堵塞、制作皂基等。
2.氢氧化钾：化学式为KOH，是一种固体碱，也称为烧碱。
可用于制作肥皂、脱水、脱污等。
3.氨水：化学式为NH3·H2O，是水溶液中含有氨气的液体，有刺激性气味。
可用于制作玻璃、染料、洗涤剂等。
4.碳酸氢钠：化学式为NaHCO3，常称为小苏打，是一种白色结晶固体。
可用于调节土壤酸碱度，中和胃酸等。
三、溶剂1.水：是最常见的溶剂，广泛应用于日常生活和工业生产中。
可用于冲洗、清洁、稀释等。
2.乙醇：化学式为C2H5OH，常称为酒精，是一种常用的有机溶剂，具有良好的溶解性。
可用于清洗光学器材、制备药品等。
3.苯：化学式为C6H6，是一种无色透明的液体，具有较强的挥发性和溶解性。
可用于有机合成、洗涤、提取等。
4.二甲基亚砜：化学式为(CH3)2SO，呈无色透明液体，是一种极性有机溶剂。
可用于溶解高分子化合物、提取药物等。
四、其它液体1.油漆：常见的有油性漆、水性漆等，可以涂刷在物体表面起到保护和美化的作用。
2.染料：可以用于织物、纸张、皮革等材料的着色，给其带来丰富的色彩。
3.清洁剂：包括家居清洁剂、工业清洁剂等，可用于清洁家具、地板、机器设备等。
总之，以上介绍了一些常见的固定液体及其应用方法，这些液体在各个领域中发挥着重要的作用，我们在使用时应注意安全，合理使用。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
固定液主要成分
固定液主要成分
固定液的种类很多，根据配制成分可分为简单型与混合型。
1. 切片标本以一种化学药品配制的固定液叫做简单固定液。
常用的简单固定液有：酒精（乙醇）、福尔马林（甲醛）和醋酸。
其中，酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内，高浓度酒精有使材料收缩的作用。
福尔马林固定液一般不单独作固定，而与其他液体混合使用。
醋酸以与水和酒精配成各种比例的溶液，所用浓度为0.2～5％，也常与其他固定剂配合使用。
醋酸穿透性很强，单独使用，有使原生质膨胀的作用，故常与酒精，甲醛等合用，醋酸为固定染色体的优良固定液，因此固定染色体的固定液中，几乎都含有醋酸。
2. 手术标本固定液成分包括：缓冲剂、醛固定剂。
此外，还有一种特殊类型的固定液叫做卡诺氏液，又名卡诺氏固定液，是1886年由比利时细胞学家让·巴蒂斯特·卡诺伊发明的一种固定液。
它是一种由乙醇和乙酸（也可以加入三氯甲烷，即氯仿）配制而成的非水相固定剂，需现配现用。
卡诺氏液主要适用于一般植物组织和细胞的固定，也可以用于手术切除角化囊肿后的局部治疗。
如需了解更多关于固定液的成分，建议咨询专业化学家或查阅化学书籍。
大体标本常用的固定液
大体标本常用的固定液
固定液是生物组织或细胞学研究中不可或缺的一部分，它可以帮助保存和稳定组织和细胞，使它们能够在后续的样品处理和分析中保持完整。
一般来说，固定液包括多种化学成分，不同的固定液适用于不同的组织和细胞类型。
以下是最常用的固定液：
1. 10% 福尔马林（Formaldehyde）
福尔马林是最常用的固定液之一，它可以作为一种信标分子，标记细胞蛋白。
福尔马林具有良好的渗透性，能够迅速渗透到组织中，提供良好的固定效果。
2. 十二烷基硫酸钠-10%EDTA浸液（SDS-EDTA Buffer）
SDS-EDTA浸液是常用的细胞质微管结构和线粒体固定液。
该固定液是一种离子池化学固定液，能够特异性地固定蛋白质，适用于研究细胞骨架和线粒体。
3. Bouin液
Bouin液是一种精细的组织学固定液，不过使用比较少。
该固定液包括福尔马林、酯化醛和乙酸，可以用于特异性地固定肝脏和其他含脂肪的组织。
4. Carnoy液
Carnoy液是一种比较强的组织学固定液，由95%的乙醇、氯仿和冰醋酸组成。
该固定液可以用于稳定核质和细胞膜，适用于肝脏和小肠等组织。
5. 4%多聚甲醛（Paraformaldehyde）
4%多聚甲醛是一种可以在室温下固定细胞和组织的固定液，可以优先固定蛋白质和核酸。
多聚甲醛很便宜，但其固定效果不及福尔马林。
需要注意的是，不同的固定液会对研究结果产生不同的影响。
因此，选择固定液前需考虑组织或细胞类型、后续的实验目的和预期结果等因素，才能选择最合适的固定液。
同时，固定液使用时需要注意安全，防止吸入和接触固定液。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛（formal dehyd e）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formal in）。
用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。
3 中性甲醛液（混合固定液）甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。
此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。
4 AF液（混合固定液）95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。
也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:（1）10%甲醛：对组织渗透性强，固定均匀。
对组织膨胀约5%，经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪，不能沉淀核蛋白及白蛋白，长期用其固定的组织使组织变为酸性，不利于染色，特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后，可以使其酸碱中和，并减少结晶。
（2）4%多聚甲醛：对组织穿透性好，组织收缩小，对大多数抗原物质保存较好，特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
固定液的种类和功能
固定液的种类和功能1．单纯固定液(1)4％中性福尔马林固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是，中性福尔马林是以pH7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％福尔马林固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
福尔马林(40%)100ml无水磷酸氢二钠6.5g磷酸二氢钠4.0g蒸馏水900ml(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性福尔马林，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多聚福尔马林：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液(1)乙醇一福尔马林(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
福尔马林(40％)100ml95％乙醇900ml(2)B5(醋酸钠一升汞一福尔马林)固定液：多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠1.25g升汞6.0g蒸馏水90ml使用前加入福尔马林10ml(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60ml氯仿30ml冰醋酸10ml(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞5.0g重铬酸钾2.5g硫酸钠1.0g蒸馏水(加至)100ml。
licent固定液固定原理
licent固定液固定原理
固定液是一种在生物学和组织学实验中常用的试剂，用于固定细胞和组织样本，以保持其形态结构和化学组成的稳定性。
固定液的固定原理主要涉及以下几个方面：
1. 交联作用，固定液中的化学物质（如甲醛、戊二醛等）能够与细胞和组织中的蛋白质、核酸等分子发生交联反应，形成稳定的化学键，从而固定细胞和组织的结构。
2. 蛋白质沉淀，固定液中的某些成分（如醋酸、乙醇等）能够沉淀蛋白质，使其在细胞和组织中形成固定的沉淀物，从而保持其形态结构。
3. 细胞膜透性改变，固定液中的某些成分（如甲醛）能够改变细胞膜的透性，使得细胞内外的分子无法自由交换，从而固定细胞内的分子组成。
4. 防止腐败和降解，固定液中的一些成分（如甲醛）具有杀菌和防腐作用，可以抑制细胞和组织的腐败和降解，保持其原有的形态和结构。
需要注意的是，不同的固定液具有不同的固定原理和适用范围。
选择适合的固定液需要考虑样本类型、实验目的以及后续实验的要
求等因素。
此外，在使用固定液进行样本固定时，需要控制固定液
的浓度、固定时间和温度等条件，以确保固定效果的稳定和可靠性。
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例是根据所需固定的组织的大小和类型来确定的。
一般而言，常用的固定液和组织的比例是10:1，即10部分的固定液与1部分的组织混合。
然而，不同的组织类型可能需要不同的比例。
以下是一些常用的组织固定液比例：
1. 大体组织：对于较大的器官或动物组织，通常使用10%缓冲福尔马林溶液（10% buffered formalin）固定。
这意味着将10部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的组织混合。
2. 细胞和细胞簇：对于大部分细胞和细胞簇的固定，一般使用4%缓冲福尔马林溶液。
这意味着将4部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的细胞或细胞簇混合。
3. 骨骼组织：对于骨骼组织的固定，常用的固定液是10%缓冲福尔马林溶液或中性缓冲福尔马林溶液。
需要较长的固定时间。
除了以上常用的固定液比例外，还有其他特殊组织和细胞类型可能需要不同的固定液比例。
此外，固定时间和固定温度也会影响固定效果，需要根据具体实验要求进行调整。
因此，最好根据实验需要和参考相关文献确定合适的固定液和组织比例。
(七)固定液和保存液
(七)固定液和保存液）固定液和保存液定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等，能保存组织内细胞的形态、结构及其组成，尽量使它近于生活状液一般有防腐和保存的作用，分为单纯固定液和混合固定液。
单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味、重铬酸钾、升汞等，前两种固定液是中学生物实验室常用的。
单纯固定液的优点是简便，缺点是有一定的局限性到理想的固定要求。
混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成，使各自的优缺点相互补充，成为较完美。
这种固定液的制备虽比较麻烦，但是效果比较好。
常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液固定液等。
的保存液大致跟固定液相同，主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。
有时按特需要，再保存液中增加某些药品（如原生标本的保存液）。
尔马林马林在固定组织标本时杀菌能力强，所以防腐性强，渗透力大，固定得快。
永福尔马林固定精细的解剖标本时，要酒精、石炭酸等混合使用。
液常用的浓度是5～10%（根据材料的大小、性质和数量而定）。
液常用的浓度是5～10%。
用福尔马林作保存液，效果好且价格低廉。
制福尔马林溶液（固定液或保存液）时，应将37～40%的甲醛作为整个溶质来配。
例如配制5%福尔马林是取市售37～溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。
实际上甲醛含量只有1.9～2%，这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
事项：福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸，可适量的加入碳酸钙（）或碳酸镁（）等碱性物质进行中和。
福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低，并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛，使浸液变浊，影所以，根据一定保存期的情况，可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液，以防标本变坏。
其中如有白色沉淀物，使它溶解。
市售的福尔马林液常带有酸性，能腐蚀石灰质，因此，最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。
精（乙醇）也是常用的固定液，它有强烈的杀菌作用，对组织材料的渗透力较大，固定的快。
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求摘要：一、福尔马林固定液的作用二、10% 标本福尔马林固定液的成分要求1.福尔马林2.缓冲液3.防腐剂三、固定液的配制方法四、固定液的注意事项正文：福尔马林固定液是一种广泛应用于生物学、医学和化学实验室的固定剂，主要用于标本的防腐、固定和保存。
在病理学、细胞学、遗传学等生物医学领域，福尔马林固定液对于标本的保存具有至关重要的作用。
本文将重点介绍10% 标本福尔马林固定液的成分要求及配制方法。
首先，我们来了解10% 标本福尔马林固定液的成分要求。
福尔马林即甲醛溶液，是固定液的主要成分，通常浓度为37%~40%。
甲醛具有强烈的固定作用，能够使蛋白质发生变性，从而固定标本中的组织结构和细胞形态。
在配制10% 标本福尔马林固定液时，需要将福尔马林与适量的缓冲液和防腐剂混合。
缓冲液可以中和福尔马林的酸性，稳定pH 值，防止福尔马林挥发。
防腐剂则能抑制微生物的生长，延长固定液的使用寿命。
接下来，我们来学习10% 标本福尔马林固定液的配制方法。
首先，将一定量的福尔马林倒入容器中，然后加入适量的缓冲液，搅拌均匀。
接着，再加入适量的防腐剂，再次搅拌均匀，直至防腐剂完全溶解。
最后，将10% 标本福尔马林固定液倒入密封容器中，妥善保存。
在使用10% 标本福尔马林固定液时，需要注意以下几点：1.佩戴防护设备，如口罩、眼镜和手套，避免直接接触福尔马林，因其具有较强的刺激性和毒性。
2.严格遵循配制比例，确保固定液的浓度准确。
3.使用过程中，避免阳光直射和高温环境，防止福尔马林挥发。
4.固定液具有一定的保质期，注意观察其颜色和气味，如有异常，应及时更换。
总之，10% 标本福尔马林固定液在生物医学领域具有广泛的应用，掌握其成分要求和配制方法对于实验室工作具有重要意义。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
7、常用固定剂的种类和配方是什么？
（1）4%多聚甲醛磷酸缓冲液pH7.4（多聚甲醛40g，0.1mol/LPBS液pH7.4500ml，两者混
合加热至60℃，搅拌并滴加1NNaOH至清晰为止，冷却后加PBS液至总量1000ml）。
（2）10%中性缓冲福尔马林液（浓甲甲醛10ml，0.01mol/lpH7.4PBS90ml）。
（3）100%冰丙酮。
（4）戊二醛-甲醛液（戊二醛1ml，浓甲醛10ml，蒸馏水加至100ml）。
（5）甲醛升汞固定液（即B5固定液。
浓甲醛10ml，氯化汞6g，醋酸钠1.25g，蒸馏水90 ml）。
（6）醋酸-甲醛液（浓甲醛10ml，冰醋酸3ml，生理盐水加至100ml）。
（7）Bouin’s液。
（8）Zamboni’s液。
采用2.5%多聚甲醛和30%饱和苦味酸，更可增加对组织穿透力和固定效果，以保存更多的组织抗原。
（9）PLP液（过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液）。
（10）碳化二亚胺（1-ethyl-3（3-dimethyl-aminopropyl）cardodiimi-HCI）液：2g溶于100 ml0.01mol/L，pH7.4PBS中。
此液宜用于标记多肽类激素的组织，对标记IgA、IgG效果不佳。
（11）碳二亚胺-戊二醛液（ECD-G液）。
（12）Zenker’s液（重铬酸钾2.5g，氯化汞5g，硫酸钠1g，蒸馏水100ml，混合溶解后，临用时加水醋酸5ml）。
（13）Clarke氏改良剂（100%酒精95ml，冰醋酸5ml），用于冰冻切片的后固定。
（14）乙醚（或氯仿）与乙醇等量混合液。
（15）AAF液：95%-100%酒精85ml，冰醋酸5ml，浓甲醛10ml。
（16）Carnoy氏液：100%酒精60ml，氯仿30ml，冰醋酸10ml，混合后4℃保存备用。
（17）Methacarn氏液：甲醇60ml，氯仿30ml，冰醋酸10ml，混合后4℃保存备用。
丙酮的组织穿透性和脱水性更强，常用于冰冻切片及细胞涂片的后固定，保存抗原性较好，平时4℃低温保存备用，临用时，只需将涂片或冰冻切片插入冷丙酮内5-10min，取出后自然干燥，贮存于低温冰箱备用。