丙酮酸(pyruvic acid PA)含量测定试剂盒说明书

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Elabscience

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®丙酮酸比色法测试盒Pyruvic Acid Colorimetric Assay Kit产品货号：E-BC-K130-S产品规格：50 assays(48 samples)/100 assays(96 samples)检测仪器：紫外-可见光分光光度计（505 nm）使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测血清(浆)、动植物组织中的丙酮酸含量。

检测原理丙酮酸与显色剂反应，反应产物在碱性溶液中呈红棕色，颜色的深浅与丙酮酸含量成正比，通过比色可以计算出丙酮酸的含量。

本试剂盒检测组织样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法(货号：E-BC-K318-M)。

提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器：紫外-可见光分光光度计（505 nm）试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl）或PBS(0.01 M，pH 7.4)试剂准备①检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。

②0.2 μmol/mL丙酮酸钠标准品应用液的配制：按试剂四：双蒸水为1:9的体积比混匀，现用现配，2-8℃可保存7天。

样本准备①样本处理血清血浆样本：可直接测定。

组织样本：取0.020-1.0 g新鲜组织块，按照重量（g）：体积（mL）=1:9的比例加入生理盐水（0.9% NaCl）或PBS(0.01 M，pH 7.4)，进行匀浆，4℃，10000×g离心10 min，取上清置于冰上待测。

丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)

丙酮酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)简介：丙酮酸(Pyruvic acid)又称2-氧代丙酸，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一，可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。

丙酮酸是糖无氧代谢的产物，科研工作者常将丙酮酸和乳酸一起研究，并用二者的比值推算循环衰竭的程度。

丙酮酸检测可采用酶催化法，该发是使用乳酸脱氢酶(LDH)催化丙酮酸氧化，生成乳酸和NAD +，通过分光光度法或荧光光度法测定NADH 的减少量，进而计算出丙酮酸含量。

通过分光光度比色法(自动分析仪或分光光度计)测定340nm 处吸光度的下降速率，据此通过比色分析就可以计算出PA 水平。

该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的丙酮酸含量。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：① 血浆、血清、尿液及其他体液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。

② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于PA 的检测。

③ 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的PA ，可以使用原有的裂解液或PBS 等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。

2、配制标准品工作液：，即为标准品工作液-丙酮酸标准(0.5mmol/L)。

4℃避光保存24h编号名称TC0755 50T Storage试剂(A): 丙酮酸标准(25mmol/L) 1ml 4℃ 避光试剂(B): 丙酮酸标准稀释液 5ml RT 试剂(C): PA 显色液C1: PA Assay buffer90ml4℃ 避光临用前，按C1:C2=30ml:1支的比例混合，即为PA 显色液。

试剂(D): LDH solution 0.4ml-20℃ 避光使用说明书1份有效。

丙酮酸激酶（PK）活性检测试剂盒说明书

丙酮酸激酶（PK ）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0545规格：100T/96S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶-20℃保存试剂三液体20μL ×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前在试剂二瓶中加入17mL 试剂一和1mL 蒸馏水充分溶解，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴5分钟，现配现用；2、试剂三：液体置于试剂瓶内EP 管中。

临用前根据用量按照试剂三:蒸馏水为17:1000的体积比例充分混匀，冰上放置备用，现用现配。

产品说明：PK （EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP 的关键酶之一，因此测定PK 活性具有重要意义。

PK 催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP 生成ATP 和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH 和丙酮酸生成乳酸和NAD +，在340nm 下测定NADH 下降速率，即可反映PK 活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV 板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）提取液体积（mL ）为500-1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或者200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究丙酮酸（英文：propanoicacid）称丁酸，是一种无色、液体或固体气味，常用于食物加工、医药工业和化学工业中。

由于丙酮酸溶解度很大，一般采用气相色谱-质谱或高效液相色谱（HPLC）技术来进行检测。

HPLC方法是一种测定发酵液中丙酮酸的有效方法。

HPLC技术是高效液相色谱液体色谱定性和定量技术的简称，用于测定发酵液中的丙酮酸含量。

它利用了凝胶的分离能力和吸附能力，将物质分离形成混合物，然后通过色谱分析技术在指定的条件下分离和分析混合物的组成，最终测定发酵液中的丙酮酸含量。

主要技术条件：HPLC技术是一种高效的发酵液中丙酮酸检测方法，需要使用色谱仪和配套软件。

HPLC技术需要调节色谱柱、溶剂、流速、流量等条件，确保HPLC技术正确测定发酵液中的丙酮酸含量。

样品的处理：在发酵液中检测丙酮酸，需要在发酵液中加入少量还原剂，将游离丙酮酸转变为丙酮酸盐，以确保正确测定发酵液中丙酮酸含量。

样品处理后，可以直接使用HPLC技术测定发酵液中丙酮酸含量。

样品分析：HPLC技术在指定条件下分析样品，利用质量流动控制器和色谱柱调节游离丙酮酸含量，然后进行定量分析，得到发酵液中丙酮酸含量的实时数据。

此外，HPLC也可以用于检测其他指标，如发酵度、游离糖含量等。

数据处理：HPLC技术可以根据测定结果自动计算发酵液中丙酮酸含量，并分析数据，实时反馈发酵过程中参数指标的变化。

结论：HPLC技术是一种有效的，可靠的发酵液中丙酮酸检测方法，可以获得实时的测试数据，且可以根据发酵过程的变化自动跟踪分析。

此外，HPLC技术还可以用来测定发酵液中其他指标，为发酵过程的研究和控制提供有效的参考数据。

丙酮酸检测丙酮酸性能检测

丙酮酸检测丙酮酸成分检测
一：丙酮酸（003）
原称焦性葡萄酸，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一。

丙酮酸可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，因此，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。

二：丙酮酸的主要化学性质
在空气中颜色变暗。

加热时缓慢聚合，富有反应性，容易与氮化物、醛、卤化物、磷化物等反应，参与生物体的糖代谢、胶质、氨基酸、蛋白质等的生化合成、代谢、醇的发酵等。

当用力时，在肌肉中被还原为乳酸，休息时再次氧化并部分转变为糖原。

丙酮酸是人体的一种成分，在人体内主要参与糖、脂肪等的代谢，也是碳水化合物代谢的中间产物之一。

三：丙酮酸的主要检测
1.定性测定的结果：在测定一批样品前，先确定ELISA对照的吸收值，大于该值者为阳性，小于该值者为阴性。

2.定量测定的结果：测定标准浓度的抗原ELISA反应的光密度绘制标准曲线。

测得待测样品ELISA反应的光密度，从而查得抗原量。

在标记抗原竞争法中，定酶标记抗原的酶活性为100%，在加入作为标准样品的未标记抗原后，以酶活性降低的百分率绘制曲线，从曲线上查得待测抗原的量。

至于对抗体的定量，则要绘制出竞争抵制曲线。

在制作标准曲线时，需进行空白对照测定，进行校正。

或者在测定时，将对照液作为零点测定点。

科标能源检测中心专业提供丙酮酸检测、丙酮酸成分检测、丙酮酸含量测定、丙酮酸性能检测等相关检测项目（3.12）。

丙酮酸(PYR)测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求北京赛诺浦

丙酮酸（PYR）测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清或血浆中丙酮酸的含量。

1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×15mL，试剂2：1×5mL；试剂1：2×30mL，试剂2：2×10mL。

试剂1：2×54mL，试剂2：2×18mL；试剂1：3×45mL，试剂2：3×15mL；试剂1：4×54mL，试剂2：4×18mL；试剂1：2×300mL，试剂2：1×200mL；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L。

校准品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。

质控品（选配）：2×0.5mL，2×1mL（2水平）。

1.2 试剂盒主要组成成分注：校准品和质控品存在批特异性，具体浓度见对应批次产品标签。

2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色澄清液体。

校准品：无色至淡黄色澄清液体。

质控品：无色至淡黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于0.5。

2.4 分析灵敏度测定浓度在200µmol/L附近的样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.02。

2.5 线性在（30，1200）µmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.990。

在(150，1200）µmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（30，150]µmol/L时线性绝对偏差不大于±15µmol/L。

2.6 重复性重复测试高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于8%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。

2.8 准确度与已上市产品进行比对试验，在（30，1200）µmol/L范围内，与比对系统的相关系数r不小于0.975；在（100，1200）µmol/L区间内与比对系统的相对偏差应不大于±15%，（30，100] µmol/L区间内与比对系统的绝对偏差应不大于±15µmol/L。

丙酮酸质量标准

丙酮酸质量标准
丙酮酸（Pyruvic acid）是一种有机酸，化学式为C3H4O3，分子量为88.06 g/mol。

它是一种无色、有刺激性气味的液体，在工业和生物领域具有广泛的应用。

丙酮酸的质量标准涉及以下几个方面：
1. 外观：丙酮酸应为无色透明液体，允许略有黄色或绿色，但不得有沉淀、悬浮物或杂质。

2. 酸度：丙酮酸的酸度（以H+浓度表示）应符合相关产品和应用场景的要求。

例如，在某些应用中，丙酮酸的酸度可能要求在0.1~1.0 mmol/L范围内。

3. 纯度：丙酮酸的纯度应符合相关产品和行业的要求。

一般而言，丙酮酸的纯度应不低于99.0%。

4. 水分：丙酮酸中的水分含量应控制在一定范围内，以防止产品因水分过多而出现质量问题。

通常，丙酮酸的水分含量应不超过0.5%。

5. 灼烧残渣：丙酮酸的灼烧残渣应符合相关产品和行业的要求。

一般而言，丙酮酸的灼烧残渣应不超过0.1%。

6. 重金属含量：丙酮酸中的重金属含量应符合相关产品和行业的要求。

例如，在某些应用中，丙酮酸的重金属含量可能要求不超过10 mg/L。

7. 砷含量：丙酮酸中的砷含量应符合相关产品和行业的要求。

例如，在某些应用中，丙酮酸的砷含量可能要求不超过1 mg/L。

8. 溶液稳定性：丙酮酸在储存和使用过程中应保持稳定，不得发生分解、聚合或沉淀等现象。

9. 气味：丙酮酸具有一定的刺激性气味，但应符合相关产品和行业的要求，不得有过强的异味。

10. 包装和储存：丙酮酸的包装和储存应符合相关产品和行业的要求，以确保产品质量和安全。

一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用[发明专利]

专利名称：一种丙酮酸测定试剂盒及其制备方法和应用专利类型：发明专利
发明人：王飞,刘安娜,张强
申请号：CN201811001155.1
申请日：20180830
公开号：CN109212176A
公开日：
20190115
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种丙酮酸测定试剂盒，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；试剂R1中含有以下成分：还原型辅酶Ⅰ（NADH）、三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、表面活性剂、EDTA‑Na2、防腐剂；试剂R2：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、乳酸脱氢酶（LDH）、表面活性剂、稳定剂、防腐剂。

本发明同时提供了该试剂盒的制备方法和应用，该试剂盒是一种稳定性强，准确度高，重复性好的液体试剂盒。

申请人：中拓生物有限公司
地址：276000 山东省临沂市罗庄区创新大厦A座
国籍：CN
代理机构：济南泉城专利商标事务所
代理人：王翠翠
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酮体含量检测试剂盒(血清、血浆、尿液等)说明书__ 紫外分光光度法UPLC-MS-6025

酮体含量检测试剂盒（血清、血浆、尿液等）说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-6025规格：50T/48S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一A液液体55mL×1瓶4℃保存试剂一B液液体55mL×1瓶4℃保存试剂二A液粉剂×2支-20℃保存试剂二B液粉剂×2支-20℃保存试剂三粉剂×3支-20℃保存标准品1粉剂×1支4℃保存标准品2粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1、试剂二A液：临用前取一支加入1.2mL蒸馏水，充分溶解。

用不完的试剂分装后-20℃可保存3周。

避免反复冻融；2、试剂二B液：临用前取一支加入600μL蒸馏水，充分溶解。

用不完的试剂分装后-20℃可保存3周。

避免反复冻融；3、试剂三：临用前取一支加入400μL蒸馏水，充分溶解。

用不完的试剂分装后-20℃保存，可以保存3周。

避免反复冻融；4、标准品1：8mg3-羟基丁酸钠。

临用前加入0.98mL蒸馏水，充分溶解，即8mg/mL3-羟基丁酸钠标准溶液，4℃可以保存4周。

临用前根据试验所需量用蒸馏水稀释成0.2mg/mL标准溶液待用，即为标准溶液1；5、标准品2：8mg乙酰乙酸锂。

临用前加入0.95mL蒸馏水，充分溶解，即8mg/mL乙酰乙酸锂标准溶液，-20℃可以保存4周。

临用前根据试验所需量用蒸馏水稀释成0.05mg/mL标准溶液待用，即标准溶液2；6、BOH工作液配制：临用前根据试验所需量将试剂一A液、试剂二A液、试剂三按照850μL:40μL:10μL（共900μL，1T的量）的比例配成工作液，充分混匀，置于37℃保温15min（此步骤不可省略），现用现配，工作液在4h内用完；7、AcAc工作液配制：临用前根据试验所需量将试剂一B液、试剂二B液、试剂三按照870μL:20μL:10μL（共900μL，1T的量）的比例配成工作液，充分混匀，置于37℃保温15min（此步骤不可省略），现用现配，工作液在4h内用完。

丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求jiuqiang

丙酮酸测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中丙酮酸（PYR）的含量，临床主要用于糖尿病引起的酮症酸中毒的辅助诊断。

1.1包装规格包装规格见表1表1 包装规格1.2主要组成成分主要组成成分见表2。

表2 主要组成成分注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异，具体赋值详见靶值单。

2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。

2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。

2.3 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.5000。

2.4 准确度回收试验：在临床样本中加入一定体积的校准品溶液，进行测定，回收率在90%～110%之间。

2.5 分析灵敏度样品浓度为200 µmol/L时，其吸光度变化在0.0400～0.1200之间。

2.6 线性区间在[30，1000]µmol/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[30，150]µmol/L区间内绝对偏差应不超过±15µm ol/L，在(150，1000]µmol/L区间内相对偏差应不超过±10%。

2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的同一血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。

2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。

2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。

在试剂盒有效期满后一个月以内，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。

2.9 校准品溯源性按GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所有产品校准的来源、赋值过程以及测量不确定度，试剂盒校准品溯源至Sigma公司。

丙酮酸含量测定定1

1
2 3
0
0.2 0.4
3.0
2.8 2.6
0
12 24
0
OD1 OD2
4
5 6 样品提取液
0.6
0.8 1.0
2.4
2.2 2.0
36
48 60
OD3
1
5
OD4 OD5
1取
① 取 1.5g大蒜于研钵中，加少许石英砂及2ml三氯乙酸充分研磨成匀浆。
生物化学实验
2010、4、30
实
验
八
植物组织中丙酮酸含量的测定
学时：3
丙酮酸是糖类代谢的重要中间产物。
多糖乙醇
无氧
单糖
糖酵解
能量
丙酮酸
无氧
有氧
TCA
乳酸
丙酮酸的生物功能
丙酮酸能促进减体重,特别是减体脂有重要作用增加肌肉耐力和增强运动能力。
抑制自由基生成和抗疲劳等方面有明显的效果.
在改善心血管功能上也可能有一定的作用.
② 用5ml三氯乙酸分三次冲洗研钵，转入25ml容量瓶中，用三氯乙酸定容至刻度，振荡摇匀。 ③ 室温下静置 15min 。取约 10ml 匀浆液离心 10000 r/min 10min 。
3、组织液中丙酮酸的测定
取 1. 0ml 上清液于一刻度试管中，加 2ml 8 ％三氯乙酸，加 1.0ml 0 . 1 ％ 2 ， 4 －二硝基苯肼液，摇匀，再加 5 . 0ml 1 . 5mol/1 NaOH 溶液，摇匀显色，在 520 nm 波长下比色，记录吸光度，在标准曲线上查得测定管的丙酮酸含量。
二、实验原理:
CH3 | C O | COOH
NH— CH3 | C N | COOH

丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求baiding

丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中丙酮酸的含量。

1.1规格校准品(选配)：1×1mL；质控品(选配)：水平1：1×1mL，水平2：1×1mL。

1.2组成：注：校准品靶值、质控品质控范围详见包装标签。

2.1 外观2.1.1试剂1：无色液体，无浑浊，无不溶物。

2.1.2试剂2：无色液体。

2.1.3校准品：无色至淡黄色液体。

2.1.4质控品：无色至淡黄色液体。

2.1.5包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。

2.2 净含量液体试剂的净含量不低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度≥0.5。

2.4 分析灵敏度样本浓度为200 μmol/L时，△A≥0.02。

2.5 线性区间在[30，1000] μmol/L范围内，线性相关系数r≥0.990；测试浓度在[30，100] μmol/L时，绝对偏差不超过±10 μmol/L，测试浓度在（100，1000] μmol/L时，相对偏差应不超过±10%。

2.6 精密度2.6.1 批內精密度用高、中、低3个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于10%。

2.6.2批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。

2.7 准确度回收率在85%-115%范围内。

2.8 质控品赋值有效性测试结果在质控范围内。

2.9 瓶内均匀性校准品和质控品瓶内均匀性（CV）应不大于10%。

2.10 量值溯源校准品量值溯源至公司内部工作校准品，并与北京九强生物技术股份有限公司生产的丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)比对验证。

2.11 稳定性2.11.1校准品开瓶稳定性校准品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。

稳定期过后4小时内进行测试，测试结果与靶值的相对偏差不超过±10%。

2.11.2质控品开瓶稳定性质控品开瓶后2℃～8℃避光保存可稳定3天。

丙酮酸激酶(Pyruvate kinase, PK) 试剂盒使用说明

丙酮酸激酶（Pyruvate kinase,PK）试剂盒使用说明产品简介：PK（EC2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH 和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。

试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水产品内容：提取液：60mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体15mL×3瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×3支，-20℃保存；试剂三：粉剂×3支，-20℃保存；试剂四：粉剂×3支，-20℃保存；临用前每支加入500µL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；试剂五：液体×3支，4℃保存；临用前每支加入300µL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍4℃保存；PK工作液的配制：取试剂一、试剂二和试剂三各一支，将试剂二和试剂三依次转移至试剂一中，充分溶解待用，这样可以分三批测定，防止试剂失效。

操作步骤：一、样品的前处理：(1)细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400µL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率200W，工作3s，间歇10s，工作35次），8000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。

(2)组织处理：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g，4℃，离心10min，取上清，置冰上待测。

(3)血清(浆)样品：直接检测二、测定操作表：试剂名称（µL）测定管PK工作液900试剂四30试剂五15充分混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴5分钟样本30将上述试剂按顺序加入1mL石英比色皿中，加样本的同时开始计时，在340nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1，比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴中准确反应2分钟；迅速取出比色皿并擦干，340nm下比色，记录2分20秒时的吸光度A2，计算∆A=A1-A2。

丙酮酸测定试剂盒(乳酸脱氢酶法)产品技术要求zhongshengbeikong

丙酮酸测定试剂盒（乳酸脱氢酶法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中的丙酮酸含量。

1.1规格液体双剂型试剂1（R1)：60mL×2, 试剂2（R2)：15mL×2；试剂1（R1)：60mL×1, 试剂2（R2)：15mL×1；试剂1（R1)：40mL×1, 试剂2（R2)：10mL×1；选配校准品：1mL×1；选配质控品（2个水平）：1mL×2。

1.2 规格划分说明根据净含量划分规格。

1.3 主要组成成分试剂盒由试剂1（R1）液体、试剂2（R2）液体、校准品液体（选配）和质控品液体（选配）组成。

1.3.1 试剂1（R1）主要组分：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液 100mmol/L还原型辅酶（NADH） 0.35mmol/L1.3.2 试剂2（R2）主要组分：乳酸脱氢酶(LDH) 300U/L1.3.3 校准品主要组分（水基质）：丙酮酸 150～250μmol/L（每批定值）1.3.4 质控品主要组分（水基质）：丙酮酸定值范围：水平1：60～180μmol/L，水平2：180～380μmol/L（每批定值）。

2.1 外观a) 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b) 试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；c) 校准品应为无色或淡黄色澄清液体，无混浊，无未溶解物，外包装完整无破损；d) 质控品应为无色或淡黄色澄清液体，无混浊，无未溶解物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长340nm（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≥0.5。

2.4 准确度测定丙酮酸纯品,回收率在80%～120%范围内。

2.5 分析灵敏度对应于浓度为200μmol/L的丙酮酸所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.05～0.3的范围内。

丙酮酸127-17-3

6.2 环境预防措施
如能确保安全，可采取措施防止进一步的泄漏或溢出。不要让产品进入下水道。
6.3 抑制和清除溢出物的方法和材料
围堵溢出，用防电真空清洁器或湿刷子将溢出物收集起来，并放置到容器中去,根据当地规定处理(见第13 部分)。放入合适的封闭的容器中待处理。
7 安全操作与储存
7.1 安全操作的注意事项
避免吸入蒸气或雾滴。切勿靠近火源。－严禁烟火。采取措施防止静电积聚。
7.2 安全储存的条件,包括任何不兼容性
贮存在阴凉处。使容器保持密闭，储存在干燥通风处。打开了的容器必须仔细重新封口并保持竖放位置以防止泄漏。建议的贮存温度2-8°C充气保存
7.3 特定用途
无数据资料
8 接触控制/个体防护
8.1 暴露控制
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代码代码 P363 P405 P501 RS Hazard symbol(s) R-phrase(s) S-phrase(s)
GHS05:腐蚀性物质; 【危险】
引起严重的皮肤灼伤,以及眼睛损伤。
在处理后要彻底清洗双手或 … 。戴防护手套/防护服/护眼/防护面具。
如误吞咽：漱口。不得诱导呕吐。如沾染皮肤或头发?：立即去除/脱掉所有污染的衣服。用水清洗皮肤/淋浴。无数据资料无数据资料被污染的衣物洗涤后方可重新使用。存放处须加锁。根据…来处理容量/容器。
i) 可燃性(固体,气体) 无数据资料
j) 高的/低的燃烧性或爆炸性限度无数据资料
k) 蒸气压
无数据资料
l) 相对蒸气密度
无数据资料
m) 相对密度
1.267 g/cm3 在 25 °C
n) 溶解性 / 水溶性无数据资料

丙酮酸激酶测定试剂盒使用说明

丙酮酸激酶测定试剂盒使用说明分光光度法货号:BC0540规格:50管/48样产品内容：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体45mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1支，-20℃保存；试剂三：粉剂×1支，-20℃保存；临用前每支加入 1.5mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍4℃保存一周；试剂四：液体×1支，4℃保存；临用前每支加入900µL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂仍4℃保存一周。

产品说明：PK（EC2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK 活性具有重要意义。

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本的前处理1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或者200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、血清（浆）样品：直接检测。

二、测定步骤及加样表：1.分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2.工作液的配置：临用前将试剂二转移至试剂一中，充分溶解待用；现配现用。

丙酮酸脱羧酶(PDC)检测试剂盒(丙酮酸比色法)

加入物(ml) ADH Lysis buffer 待测样品 PDC Lysis buffer 工作液 NADH-ADH 工作液
对照管(备选) 0.025 — 1.6 0.2
测定管 —
0.025 1.6 0.2
5、 PDC 测定：加入 PDC 启动剂，立即以分光光度计(1cm 光径比色杯)测定吸光度(记为 A0)并同时计时，每隔 30s 测定一次吸光度，其中至 1min 时 3 吸光度记为 A1，记录其变化。Leagene 建议加入 PDC 启动剂后立即检测，加样时间越短越好，其反应基本在 1-3min 内，其后反应趋于平缓。
北京雷根生物技术有限公司
式中：ΔA=A0−A1(如有必要，可再减去对照最初 1min 的吸光度变化量) 0.01=每分钟 NADH 氧化吸光度变化 0.01 为 1 个酶活力单位 t=1=检测时间(min) 0.025=待测样品体积(ml)
组织样品 PDC(U/g·min)=ΔA/(0.01×t×W) 式中：ΔA=A0−A1(如有必要，可再减去对照最初 1min 的吸光度变化量)
组成：
编号名称试剂(A): PDC Lysis buffer 试剂(B): PMSF 试剂(C): ADH Assay buffer 试剂(D): NADH 试剂(E): ADH 使用说明书
TE0483 50T
Storage
250ml 4℃ 避光
1ml -20℃
100ml 4℃
1 支 -20℃
1 支 -20℃
Leagene 丙酮酸脱羧酶(PDC)检测试剂盒(丙酮酸比色法)检测原理是在弱酸条件下，以丙酮酸为底物，催化 ADH 生成乙醛和 CO2，乙醛在 ADH 催化下被 NADH 还原为乙醇， ADH 每催化 1 分子乙醛消耗 1 分子 NADH，通过分光光度比色法(分光光度计)测定吸光度的变化，计算出 NADH 的消耗速率进一步推算出丙酮酸脱羧酶活性水平。该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中丙酮酸脱羧酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。