试剂盒使用说明书
一步法RT-PCR试剂盒使用说明书
一步法RT-PCR 检测试剂盒 (一步法RT-PCR 扩增试剂盒)(目录号HS0612-2)产品包装保存条件-20℃产品简介本试剂盒是专为一步法RT-PCR 实验研制,逆转录和PCR 在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。
本试剂盒包括全新高效逆转录酶、快速热启动DNA 聚合酶,同时包含适用于逆转录和PCR 扩增的反应缓冲液和实验中所必需的反应组分。
经过重组表达的SuperRT 逆转录酶RNase H 活性缺失,减少了逆转录反应中RNA 的降解,更容易获得全长的cDNA 。
该逆转酶逆转录效率高,可对少量 RNA 模板进行良好的逆转录反应。
SuperRT 逆转录酶与RNA 亲合性高,能通读GC 含量高,二级结构复杂的RNA 模板,获得高产量的cDNA 。
PCR 反应使用的DNA 聚合酶具有扩增效率高、延伸速度快的优良性能。
独特的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。
使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录和PCR 扩增反应。
使用本试剂盒扩增得到的目的产物3′端附有一个″A ″碱基,可直接用于T/A 克隆。
北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 效率高,可以高效转录GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。
2. 耐热性及稳定性强。
3. 操作简单迅速,最大限度的避免污染。
4. 独特的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。
使用方法1)一般PCR实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,退火时间一般为20 ~ 30秒,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间根据所扩增的片段大小设定,本产品中所包含的DNA Polymerase的扩增效率为1 kb/30s。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。
AxyPrep PCR 清洁试剂盒说明书
AxyPrep PCR清洁试剂盒本试剂盒适合从PCR、酶促反应、测序反应的反应液中提取多至8 μg DNA(大于75bp),回收率为70-90%。
纯化的DNA不含引物、酶蛋白及单核苷酸。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性Cat. No. AP-PCR-4 AP-PCR-50 AP-PCR-250制备次数 4 preps 50 preps 250 prepsPCR制备管 4 50 2501.5 ml离心管 4 50 2502 ml离心管 4 50 250Buffer PCR-A 2 ml 20 ml 100 mlBuffer W2 concentrate 2.4 ml 24 ml 2×72 mlEluent 1 ml 5 ml 25 ml说明书 1 1 1Buffer PCR-A:DNA结合溶液。
室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。
使用前,按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%无水乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH8.5,室温密闭贮存。
二、注意事项1. Buffer PCR-A含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。
若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
2. DNA分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH8.5洗脱液中保存。
三、实验准备1. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip头、离心管。
2. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
3. 使用前,检查Buffer PCR-A是否出现沉淀,若出现沉淀,应于65°C温浴加热至沉淀完全溶解并冷却至室温后再使用。
4. 将Eluent或去离子水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。
四、操作步骤用户可以选择负压法或离心法。
生物素标记试剂盒使用说明书
生物素标记试剂盒使用说明书货号: EBLK0002产品介绍:Elabscience生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂,用于含有氨基(NH2-)抗体的标记。
生物素已经活化,可直接使用,每个试剂盒足以完成3次标记,每次可标记0.2-2mg。
试剂盒中包括6个用于抗体标记脱盐的Filtration tube,不用透析,操作简便,熟练操作90min可完成整个标记过程。
产品特点:试剂全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。
快速:整个过程仅需90min。
方便:通过Filtration tube即可脱盐,无需透析或者凝胶过滤。
使用灵活:既可用于微量标记又可大量标记,每次可标记0.2-2mg。
理想的标记效果:已经优化确定了最适的标记比例,降低标记不足或由于过度标记而失活的可能性。
产品组成:标记过程需要仪器:1. 10ul,50ul,200ul,1000ul可调高精度移液器2. 恒温箱(37℃)3. 离心机(离心力可达到12,000×g)储存条件:本试剂盒未开封前在2-8℃可稳定保存一年生物素标记反应原理:NH2-Reactive Biotin专一地与伯胺反应(N-末端及赖氨酸残基侧链)形成稳定的酰胺键生物素标记NH2-Reactive Biotin使用量的计算:每个反应中生物素试剂的使用量取决于待标记蛋白质的量和浓度。
通过优化,我们确定了标记2mg/ml的抗体(IgG ,150KD),使用生物素和抗体的分子比为20:1能达到较理想的标记效果。
1、标记2mg/ml的抗体,使用生物素和抗体的分子比为20:1时,应加入生物素量的计算方法:ml蛋白×2mg蛋白ml蛋白×1mmolIgG150,000mgIgG×20mmol生物素mmol蛋白= mmol生物素2、对于10mmol的生物素溶液,应加入反应中该生物素体积的计算方法:mmol生物素×1,000,000μLL ×L10mmol= ul生物素计算示例:对于0.5ml 2mg/ml的IgG(分子量为150,000)溶液,需加入10mM的生物素溶液13.3ul。
爱德基游离DNA提取试剂盒使用说明书
游离DNA提取试剂盒使用说明书【产品名称】通用名称:游离DNA提取试剂盒英文名称:Cell Free DNA Extraction Kit【包装规格】24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。
其处理后的产物用于临床体外检测使用。
【实验原理】本试剂盒采用具有分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统,在特定的盐离子浓度和pH值条件下,磁珠特异的吸附小片段的游离DNA,不吸附基因组DNA。
能够更好的适用于产前无创诊断和癌症基因分析诊断。
【主要组成成分】另需要准备的试剂及注意事项无水乙醇(分析纯)、超纯水或去离子水。
【储存条件及有效期】试剂盒储存在常温,有效期12个月。
【适用仪器】高速冷冻离心机、真空负压装置及真空泵【样品要求】1用装有EDTA抗凝剂的采血管取病人或孕妇(孕12-24周)5 mL全血,上下颠倒混匀,4℃运输。
2 在离心机中3000 rpm 的转速下,离心10min 分离血清。
按2mL/支收集血清,直接进入下一步实验或-20℃储存。
●使用前用无水乙醇稀释漂洗液,做好标记√。
●现配制80%乙醇:取20mL超纯水,加入80mL的无水乙醇,上下颠倒混匀。
【实验步骤】1. 血清/血浆样本预处理取1mL血清/血浆12000rpm 离心10 min,收集上清,用于游离核酸的提取。
注意:也可将血清/血浆样本在6000×g下离心30min以去除剩余的血细胞和细胞碎片。
2.蛋白酶K处理2.1 按照下表指示顺序,添加试剂到15mL离心管:试剂体积血浆/血清体积1mL 2mL 4mL 10ml蛋白酶K(20mg/mL) 20μL 40μL 80μL 200µL20%SDS 130μL 260μL 520μL 1040µLtotal 1.15mL 2.30mL 4.60mL 11.24 ml注意:不要将SDS直接加到蛋白酶K中,以避免蛋白酶K失去活性。
抗原检测试剂盒使用说明
抗原检测试剂盒使用说明
抗原检测试剂盒使用说明
一、适用范围:
本试剂盒专为检测抗原提供的试剂,用于实验室研究、样本检测和抗原检测项目的结构及性能分析。
二、原理:
本试剂盒采用免疫双抗血清方法,即采用抗原抗体免疫反应的原理,检测抗原的浓度,以间接检测抗原浓度的方法分辨抗原的存在与否。
三、主要材料及试剂:
1、主要试剂:免疫双抗血清
2、其他试剂:抗原检测试剂盒,包括抗原抗体、标准抗原、测定液、冰冻试剂和培养基等;
3、试剂设备:试管、温度计、pH计、洗涤器、滴定管、冰箱、凝固仪等。
四、使用方法:
1、抗原检测试剂盒使用前,请先清洗所有试剂设备,然后再按说明书上所示,将各试剂稀释或配制至实验室评定值;
2、抗原检测试剂中的抗原抗体( antibody )和抗原将按照相应的比例混合,充分混合后,转移至试管内;
3、在室温下反应30分钟,并将反应液放入凝固仪中冷凝20分钟,以便开始检测;
4、按说明书上所述,根据检测到的抗原的数量,进行抗原检测。
五、注意事项:
1、请勿将未使用的试剂放入试剂室;
2、每次实验完毕,务必及时清洗所有试剂设备;
3、使用时请穿实验衣和手套,并注意避免接触皮肤;
4、试剂使用完毕,请及时将其妥善存放;
5、请勿将废弃物倒入下水口,应妥善处理;
6、请勿将试剂盒接触酸性物质或温度过高的物质;
7、请勿将检测液接触空气,实验过程中应加以封闭。
新冠核酸检测试剂盒产品说明书
新冠核酸检测试剂盒产品说明书1. 引言新冠病毒(COVID-19)自2019年末在全球范围内爆发以来,已经造成了严重的公共卫生危机。
为了及时、准确地检测新冠病毒的感染情况,本公司开发了新冠核酸检测试剂盒产品,并特此出具本产品说明书。
2. 产品概述新冠核酸检测试剂盒是一种用于检测新冠病毒感染的重要工具。
该产品基于核酸检测技术,通过检测样本中的病毒核酸片段来确定是否感染了新冠病毒。
该产品具有以下特点: - 高灵敏度:能够在感染初期及时发现新冠病毒感染。
- 高特异性:能够准确识别新冠病毒并排除其他相关病毒感染。
- 快速检测:样本处理简便,检测时间短,结果快速可靠。
3. 适用范围本产品适用于医疗机构、公共卫生部门以及相关科研机构等场所进行新冠病毒感染的检测。
它可以用于急诊筛查、病例诊断、流行病学调查等用途。
4. 产品组成新冠核酸检测试剂盒由以下组成部分组成: 1. 核酸提取试剂盒:用于从样本中提取病毒核酸。
2. 核酸扩增试剂盒:用于扩增提取到的病毒核酸片段。
3. 荧光染料:用于标记扩增产物,并进行荧光信号检测。
4. 标准控制品:用于质控和检测结果的验证。
5. 检测步骤5.1 样本采集:采集患者咽拭子、鼻拭子或痰液样本,并将样本置于采集管中。
5.2 核酸提取:使用核酸提取试剂盒,按照说明书中的步骤进行核酸提取。
5.3 核酸扩增:将提取到的核酸样本加入核酸扩增试剂盒中,放入PCR仪中进行扩增反应。
5.4 荧光信号检测:将扩增产物与荧光染料混合,放入荧光检测仪中,测量样品中的荧光信号。
5.5 结果分析:根据荧光信号的强度判断样品中是否存在新冠病毒。
6. 结果解读本产品根据荧光信号的强度来判断样品中是否存在新冠病毒,具体结果如下: - 阳性结果:荧光信号强烈,说明样品中存在新冠病毒感染。
- 阴性结果:荧光信号弱或未检测到,说明样品中不存在新冠病毒感染。
- 无效结果:无论荧光信号强弱,均无法判断样品中是否存在新冠病毒感染,需重新检测。
新冠抗原检测试剂盒使用说明书
新冠抗原检测试剂盒使用说明书全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:新冠抗原检测试剂盒使用说明书一、检测试剂盒概述新冠抗原检测试剂盒是用于快速检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗原的一种便携式医疗设备。
该检测试剂盒采用免疫层析法,通过检测样本中的SARS-CoV-2抗原来判断被检测者是否感染新冠病毒。
该检测试剂盒具有快速、准确、便捷的特点,可广泛应用于各类医疗机构、边防口岸、社区防疫等场所,为防控疫情提供重要支持。
二、检测步骤1.准备工作- 打开检测试剂盒包装,取出所有需要的试剂盒、吸管、吸头和样本采集棒等物品。
- 将样本采集棒插入患者鼻腔或咽喉进行采样,确保采集到足够的样本。
2.操作步骤- 打开试剂盒,将样本采集棒放入样本溶解液中,反复挤压样本采集棒,确保样本完全溶解。
- 使用吸管吸取样本溶解液,滴入试剂盒中指定的孔里。
- 等待约15-20分钟,观察结果。
阳性结果为对应的孔出现两道线,阴性结果为仅出现一道线,无效结果为未出现任何线。
三、注意事项1.操作过程中需穿戴好口罩、手套等防护用具,避免交叉感染。
2.操作过程中要避免在不洁净的环境下进行,确保操作台面清洁。
3.请勿将试剂盒暴露在高温、潮湿、阳光直射等条件下,以免影响检测结果准确性。
4.请勿重复使用试剂盒或混用不同品牌的试剂盒,以免造成检测结果错误。
5.请按照操作说明进行操作,避免操作失误导致检测结果不准确。
四、结果解读1.阳性结果:指试剂盒检测出样本中存在SARS-CoV-2抗原,即被检测者可能已感染新冠病毒,应立即报告相关部门进行隔离治疗。
2.阴性结果:指试剂盒未检测出样本中存在SARS-CoV-2抗原,即被检测者目前未感染新冠病毒,但可能存在假阴性情况,需谨慎对待。
3.无效结果:指试剂盒未显示出任何结果,可能是操作失误或试剂盒受损导致,需重新进行检测。
五、贮存与运输1.试剂盒应存放在阴凉干燥处,避免高温、潮湿、日光直射等条件。
2.试剂盒在运输过程中需轻拿轻放,避免碰撞损坏。
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒 Mini Plasmid Kit(目录号:HS0101)产品包装(注意:使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀,2 ~ 8℃保存)保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。
若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。
加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存,可稳定保存6个月。
产品简介本试剂盒用于质粒DNA 的小量制备与纯化。
菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。
通过漂洗液PW 的清洗可去除杂质,在低盐、高pH 条件下洗脱,最后得到纯度较高的质粒DNA 。
使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml 过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug 的高纯度质粒DNA ,在30 min 之内完成提取任务。
所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR 、测序等各种常规分子生物学操作。
北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 快速:步骤少,操作简便,节约时间。
2. 简便:离心吸附柱不需要预平衡,漂洗液不需要另加乙醇,即开即用。
3. 高质:OD260/280在1.7 ~ 1.9之间。
4. 稳定:正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。
操作步骤1. 取1 ~ 5 ml过夜培养的菌液,室温12,000 rpm离心1 min,尽量将上清去除干净。
(注意:根据菌液的浓度决定取液量,浓度高时取1 ml菌液离心即可,浓度低时可多收集一次)2. 加入250 ul Buffer P1,用枪头充分吹打使菌体重悬均匀。
(注意:是否将RNase A溶液加到Buffer P1中并混合均匀;菌体沉淀是否悬浮充分,如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解,导致提取的质粒浓度及纯度降低)3. 加入250 ul Buffer P2,温和颠倒混匀6 ~ 8次,直到溶液变得清亮粘稠。
体外转录试剂盒说明书
体外转录试剂盒说明书使⽤试剂盒时所有的试剂要放置在冰上转录反应步骤和孵育1.解冻冷冻的试剂把RNA聚合酶混合物放置在冰上,它在⽢油中保存,没有被保存在-20。
vortex10×reaction buffer和2×NTP/CAP⾄完全溶解,⼀旦解冻,反应过程中把2×NTP/CAP 放在冰上,10×reaction buffer保存在室温,所有的试剂在打开之前都应该短暂的微微离⼼,以防丢失或污染到离⼼管边缘的物质。
2.室温下转录反应如果反应在冰上进⾏,10×reaction buffer中的亚精胺可以与模板中的DNA共沉淀,离⼼管中加⼊⽔和核苷酸后再加⼊10×reaction buffer。
以下是⼀个20ul的反应体系,可按需要放⼤或缩⼩。
当RNA长度为300base-5kb时采⽤以下反应体系(⽤0.1-0.2ug PCR产物模板或0-1ug线性质粒模板)对于更长或更短的转录,参考20页的“Optimizing yield of long transcripts’’和“Optimizing yield of short transcripts”部分。
当合成转录的长度⼤于5或6KB时,限制GTP⽣成率,会导致产量降低、过早终⽌转录。
为了避免这种情况,可能需要补充额外的GTP⽀持反应。
下⾯是添加特定体积的GTP对普通转录反应的影响。
(对于T7和T3试剂盒,提供的GTP为30mM。
对于SP6,为20mM.)应该添加多少额外的GTP?对于5-8KB的长度,我们建议最初测试加⼊1ul的GTP,对于更长的模板应该试试滴定额外的GTP确定所需的最⼩值。
添加GTP将减少转录合成加帽的⽐例,但将引起产量升⾼。
加帽转录的⽐例与反应中GTP中CAP的模拟物的⽐率成正⽐。
RNA产量与良好的加帽效率之间的平衡在⽹织红细胞溶解物中,我们测试了GTP不同⽐例的CAP模拟物对转录反应的RNA产量和产⽣RNA的翻译效率的影响。
试剂盒使用说明书
大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
1使用目的:本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),药物、血清和尿样中大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)残留的定量检测。
2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法,在微孔板包被有大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)偶联抗原,加入大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)标准品或样品,游离大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)与微孔条上预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)偶联抗原互相竞争抗大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)抗体酶标记物,用TMB底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波长下进行检测,吸光值与样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)含量成反比,通过标准曲线计算样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)的含量。
3试剂盒组成3.1预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12孔×8条)。
3.2大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)标准品:6瓶(1ml/瓶),含量分别是:0ug/ml, 0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml3.3抗大肠杆菌菌体蛋白残留量(E.coli DH-5α)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。
3.4显色液A:1瓶(6ml)。
3.5显色液B:1瓶(6ml)。
3.6终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
3.7样本稀释液:1瓶(10×,6ml),用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
3.9说明书一份。
4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。
SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书
SDS-PAGE配胶试剂盒使用说明书Cat.No:Lot No:原理:本技术中,待分离的样品在有SDS-PAGE和还原剂的存在下通过加热而变性并被去污剂所包被。
SDS可使蛋白质带上大量的负电荷,其带电荷的多少正好与多肽的长度成正比。
聚丙烯酰胺凝胶上样后,在高电压的作用下,蛋白组分向正极(阳极)迁移。
由于所有的蛋白所带的负电荷与其分子大小成正比,因而蛋白就仅仅根据其分子量的大小不同而被分离—凝胶的分子筛效应。
蛋白质的分子量就可以通过与标准蛋白的凝胶迁移率进行比对而得到。
凝胶电泳后,特定的凝胶条带可以通过染色而观察到,并且可通过被动扩散或电洗脱从凝胶上进行回收。
两种最常用的染色方法是考马斯亮蓝法和银染法,这两种方法的蛋白条带检测灵敏度可分别达到50ng和5ng。
由于考马斯亮蓝法使用简便,并可以对收集的蛋白带作进一步分析,因而较为常用。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳应用范围:1)蛋白质纯度的分析;2)蛋白质分子量的测定;3)蛋白质浓度的测定;4)蛋白质水解的分析;5)免疫沉淀蛋白的鉴定;6)免疫印迹的第一步;7)蛋白质修饰的鉴定;8)分离和浓缩用于产生抗体的抗体的抗原;9)分离放射性标记的蛋白质。
试剂盒组成:1.30%预制聚丙烯酰胺胶(4℃保存)200ml2.1.5M TrisCl(PH=8.8)200ml3.1.0M TrisCl(PH=6.8)50ml4.10%SDS 30ml5.10%过硫酸铵(4℃保存)30ml6.去离子水250ml7.TEMED(4℃闭光保存!)1ml8.5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液250 ml9.考马斯亮蓝染色剂50ml10. 考马斯亮蓝脱色剂250ml5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液用时以去离子水1:4稀释,配成1×-甘氨酸电泳缓冲液工作液。
凝胶的配制:(1)将玻璃板安装固定好切误把玻璃弄坏(2)进行分离胶的配制(3)加入TEMED后立即混匀内容物倒入到固定好的玻璃板中,同时留出灌注浓缩胶所需空间(梳子的齿长再加0.5cm)再在胶液面上小心注入一层水(约2—3mm高)以排除气泡和阻止氧气进入凝胶溶液。
核酸提取试剂盒说明书
核酸提取试剂盒说明书标题:核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒,能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。
广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。
二、产品组成1. 核酸提取液A:用于裂解细胞和溶解核酸。
2. 核酸提取液B:用于去除蛋白质等杂质。
3. 洗涤液:用于洗涤核酸。
4. 乙醇溶液:用于沉淀核酸。
5. RNA酶抑制剂:防止RNA降解。
6. DNA/RNA分离柱:用于核酸的吸附和洗脱。
三、操作步骤1. 样本处理:根据样本类型进行相应的前处理。
2. 核酸提取:将处理后的样本加入到核酸提取液A中,涡旋混合后静置,然后加入核酸提取液B,再次涡旋混合并静置。
3. 细胞破碎与核酸释放:将混合液离心,取上清液转移到新的离心管中。
4. 去除杂质:向上述上清液中加入洗涤液,涡旋混合后离心。
5. 核酸吸附:将上清液转移到DNA/RNA分离柱中,离心吸附核酸。
6. 洗涤核酸:使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤,以去除剩余的杂质。
7. 核酸洗脱:加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中,离心洗脱核酸。
8. 核酸保存:将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。
四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。
2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶,以防交叉污染。
3. 提取后的核酸应尽快使用,长期保存时要避免反复冻融。
4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。
五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制,如有任何质量问题,请联系我们的客户服务部。
六、联系方式感谢您选择我们的产品,如有任何问题或需要进一步的信息,请随时联系我们。
甲型乙型抗原检测试剂盒使用说明书
甲型乙型抗原检测试剂盒使用说明书甲型乙型流感病毒抗原检测试剂盒是一种用于检测甲型和乙型流感病毒抗原的体外诊断试剂。
以下是该试剂盒的使用说明书:一、产品名称甲型乙型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金法)二、适用范围本试剂盒用于体外定性检测人鼻咽拭子或唾液样本中甲型和乙型流感病毒抗原。
三、使用方法1. 打开试剂盒,取出采样拭子,伸入鼻腔或口腔采集样本,并放入配套的洗脱液中旋转混合均匀。
2. 取出检测卡,将混合好的洗脱液滴入检测卡的加样孔中,注意不要超过MAX线。
3. 等待15分钟,观察检测卡的反应结果。
4. 根据结果判断是否感染甲型或乙型流感病毒。
四、结果解释若检测卡上仅C线显示红色,表示未感染甲型或乙型流感病毒;若C线和T 线均显示红色,表示感染甲型或乙型流感病毒。
本试剂盒灵敏度高,可有效检出甲型和乙型流感病毒抗原。
但请注意,该试剂盒仅用于体外诊断,不能替代专业医疗机构的诊断结果。
如有疑虑,请及时就医。
五、注意事项1. 本试剂盒仅供一次性使用,用后请销毁。
2. 采样时应避免污染,以免影响检测结果。
3. 试剂盒应存放在2~30℃干燥处,避免阳光直射和潮湿环境。
4. 本试剂盒为体外诊断试剂,不能替代专业医疗机构的诊断结果。
如有疑虑,请及时就医。
5. 不同批次的产品可能存在差异,请按照产品说明书的指引正确使用。
6. 如有任何疑问或需要技术支持,请联系我们的客户服务部门。
以上为甲型乙型流感病毒抗原检测试剂盒的使用说明书,供您参考。
如有任何疑问或需要更多信息,请咨询专业医疗人员或查看产品附带的使用说明书。
新冠试剂盒说明书
新冠试剂盒说明书随着新冠肺炎疫情的爆发,新冠病毒检测已成为重要的防控手段之一。
新冠试剂盒是一种用于检测新冠病毒的工具,是目前新冠病毒检测的重要装备之一。
本文将详细介绍新冠试剂盒的说明书。
一、产品概述试剂盒类型:一次性新冠病毒抗体快速检测试剂盒产品规格:25T/盒试剂盒订货号:XXX 保质期:18个月呈现方式:抗体/抗原检测试纸条二、试剂盒原理试剂盒采用免疫层析法,检测人体血清中的新冠病毒抗体。
检测原理:通过血清中的新冠病毒抗体与试剂盒中特定抗原发生反应,产生特定的颜色反应。
其中,IgM抗体为本次感染时出现的抗体,IgG抗体则是在感染后逐渐生成的抗体。
三、试剂盒使用方法1、采集血样:抽取手指端的血,利用外科消毒棉球在手指处消毒。
然后使用专用采血针(如抽血针)采集足够的血液,并用小吸管吸收1滴血液,并直接滴在检测试纸上。
2、滴加检验液:将小瓶检验液中的滴头压在检测试纸的样品孔上方,挤出1-2滴液体进行检测。
3、等待时间:在摆正的检测试纸表面上密封1滴清水样品,开始进行反应观察。
阅读时间参考如下:IgM+IgG: 10分钟 IgM: 15分钟 IgG: 15分钟四、试剂盒结果分析1、病毒抗体检测结果解释(1)阴性:样品中没有检测到新冠病毒抗体(2)弱阳性:仅检测到IgM阳性,IgG 阴性(3)阳性:样品中检测到IgM和/或IgG阳性2、病毒抗体检测故障及解决方案(1)无检测线(T线)出现:检测试纸没有模板反应解决方案:重新进行检测,更换试剂盒(2)无控制线(C线)出现:检测出错解决方案:重新进行检测,更换试剂盒(3)C线出现,T线没有出现:样品中没有检测到病毒抗体解决方案:重新进行检测,注意血液搜集(4)IgM线出现,IgG线没有出现:样品中有新冠病毒抗体IgM解决方案:如果已经确诊新冠病毒感染,则无需进一步检查;如果没有确诊,隔离检查(5)IgM和IgG线同时出现:样品中有新冠病毒抗体IgM和IgG解决方案:如果已经确诊新冠病毒感染,则无需进一步检查;如果没有确诊,隔离检查。
ELISA 检测试剂盒 说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断小鼠小鼠((MouseMouse))肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ(TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒使用说明
*质粒小量提取试剂盒产品说明:■本产品采用经典的硅胶膜及碱裂法技术,硅胶膜柱可以在高盐、低pH值情况下高效可逆的结合DNA, 而蛋白及其它杂质不被结合而被除去,被结合的核酸在低盐、高pH值情况下可被洗脱出来.该试剂盒具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需半个小时便可完成。
使用本试剂盒可从1~5 ml的过夜培养的菌液中纯化得到1~40μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8~2.0),此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。
试剂盒组成:产品编号GS001-1 GS001-2 GS001-3试剂盒组成纯化次数50次100次200次RNaseA(10mg/ml)150μl 300μl 600μl溶液Ⅰ15ml 30ml 60ml溶液Ⅱ15ml 30ml 60ml溶液Ⅲ20ml 40ml 80ml溶液PB 30ml 50ml 100ml溶液W 30ml 2×30ml3×40ml溶液Eluent 5ml 10ml 20mlDNA纯化柱50个100个200个溶液W初次使用前用无水乙醇按1:1.5稀释,即含60%乙醇。
用途:提取用于酶切、转化、测序、PCR等试验用质粒。
保存:初次使用本试剂盒时,请将RNase A全部加入到溶液Ⅰ中,均匀混合后4℃保存。
溶液Ⅱ:室温保存,若出现沉淀,请于37℃保温溶解,待恢复至室温后使用。
其他试剂:室温保存。
操作步骤:1.用1.5 ml离心管收集1.5-5ml菌液,12000rpm离心60秒,弃上清。
(应根据所培养的菌液的浓度确定收集的菌液量)2. 加入250µl溶液Ⅰ/RNase A混合液,漩涡振荡使菌液完全重新悬浮。
(菌液重新悬浮对于获得高产量是非常重要的,为使RNA被RNase A充分降解,让悬浮菌液静置1-2分钟3. 250µl溶液Ⅱ,温和反复颠倒混匀4-10次,室温放置1-2分钟,以获得澄清的裂解液。
试剂盒使用说明书
人Toll样受体9(TLR9)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中TLR9含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中TLR9水平。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入TLR9抗原、生物素化的抗人TLR9抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的TLR9呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10000pg/mL,做系列倍比稀释后,分别稀释成10000pg/mL,5000pg/mL,2500pg/mL,1250pg/mL,625pg/mL,312.5pg/mL,156pg/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/mL,临用前15分钟内配制。
如配制5000pg/mL标准品:取0.5ml10000pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
抗原检测试剂盒使用说明书
抗原检测试剂盒使用说明书
一、产品简介
本抗原检测试剂盒是一种用于检测抗原的专用试剂盒。
它可以检测
样品中的抗原,并将检测结果反馈到实验室,帮助诊断师进行有效的
鉴别诊断。
本试剂盒包含多种实验材料,可以快速检测样品中的抗原,以准确,灵活地检测抗原,为临床诊断提供重要支持。
二、使用目的
本抗原检测试剂盒用于实验室将样品中的抗原快速,准确地检测出来,临床医生拿到抗原检测结果,可以根据需要选择治疗方案,快速
恢复病人的健康状态。
三、产品组件
1.主检测液:用于定性或定量检测一种或多种抗原的标准液;
2.标准物质:用于定性或定量检测抗原的参照物;
3.样品处理试剂:用于抗原检测的样品处理和固定液;
4.样品调节剂:用于调整样品的体积。
四、操作步骤
1、将主检测液,标准物质和样品均匀混合;
2、将混合物中的抗原用均质液均质;
3、在室温下进行反应,检测活性抗原表位;
4、将活性抗原表位与标准物质进行适当比例的混合,得出抗原比例值;
5、根据抗原比例值进行临床分析。
五、注意事项
1、请在实验室内正确使用本抗原检测试剂盒;
2、使用前要先熟悉使用说明书,并遵守相关操作规程;
3、请勿将主检测液中的化学物质和抗原接触到皮肤上;
4、操作过程中请穿戴手套,并确保操作区域通风良好;
5、检测完成后,请将试剂盒放置在实验室定期处理的区域内。
试剂盒使用说明书
牛气肿疽(symptoinatic anthrax)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)水平。
用纯化的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入牛气肿疽(symptoinatic anthrax),再与HRP标记的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:1800pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
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牛气肿疽(symptoinatic anthrax)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)水平。
用纯化的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入牛气肿疽(symptoinatic anthrax),再与HRP标记的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:1800pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200pg/ml,800pg/ml,400pg/ml,200pg/ml,100pg/ml)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:50pg/ml-1500pg/ml保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月Bovine symptoinatic anthraxFOR RESEARCH USE ONLYDrug NamesGeneric Name :Bovine symptoinatic anthrax anthraxELISA ELISA Kit Kit..PurposeThis kit allows for the determination of symptoinatic anthrax in Bovine serum,blood plasma,and other biological fluids.Principle of the assayT he kit assay Bovine symptoinatic anthraxlevel in the sample ,use Purified Bovinesymptoinatic anthrax antibody to coat microtiter plate wells,make solid-phase antibody,then add symptoinatic anthrax to wells,Combined symptoinatic anthrax antibody which With HRP labeled ,become antibody -antigen -enzyme-antibody complex,after washing Completely,Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed,reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450nm.The concentration of symptoinatic anthrax in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Materials provided with the k itMaterials provided withthe kit48determinations96determinations Storage User manual11Closure plate membrane22Sealed bags11Microelisa stripplate112-8℃Standard:1800pg/ml0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standard diluent 1.5ml×1bottle 1.5ml×1bottle2-8℃HRP-Conjugate reagent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Sample diluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Chromogen Solution A3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Chromogen Solution B3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Stop Solution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃wash solution (20ml×20fold)×1bottle(20ml×30fold)×1bottle2-8℃Specimen requirements1.serumserum--coagulation at room temperature10-20mins,centrifugation20-min at the speed of 2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.2.plasmaplasma--use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix10-20 mins,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.3.Urine-collect sue a sterile container,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.4.cell culture supernatant-detect secretory components,collect sue a sterile container,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,detect the composition of cells,Dilut cell suspension with PBS(PH7.2-7.4),Cell concentration reached1million/ml,repeated freeze-thaw cycles,damage cells and release of intracellular components,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.5.Tissue samples-After cutting samples,check the weight,add PBS(PH7.2-7.4),Rapidlyfrozen with liquid nitrogen,maintain samples at2-8℃after melting,add PBS(PH7.4), Homogenized by hand or Grinders,centrifugation20-min at the speed of2000-3000r.p.m.remove supernatant.6.extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevantliterature,and should be experiment as soon as possible after the extraction.If it can’t, specimen can be kept in-20℃to preserve,Avoid repeated freeze-thaw cycles.7.Can’t detect the sample which contain NaN3,because NaN3inhibits HRP active.Assay procedure1.Dilute and add sample to Standard:set10Standard wells on the ELISA plates coated,add Standard100μl to the first and the second well,then add Standard dilution50μl to the first and the second well,mix;take out100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separately.then add Standard dilution50μl to the third and the forth well,mix;then take out50μl from the third and the forth well discard,add50μl to the fifth and the sixth well,then add Standard dilution50μl to the fifth and the sixth well,mix;take out50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well,then add Standard dilution50μl to the seventh and the eighth well,mix;take out50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well,add Standard dilution50μl to the ninth and the tenth well,mix,take out50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample50μl to each well after Diluting,(density:1200pg/ml,800pg/ml,400pg/ml,200pg/ml,100pg/ml)2.add sample:Set blank wells separately(blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent,other each step operation is same).testing sample well.add Sample dilution40μl to testing sample well,then add testing sample10μl(sample final dilution is 5-fold),add sample to wells,don’t touch the well wall as far as possible,and Gently mix.3.Incubate:After closing plate with Closure plate membrane,incubate for30min at37℃.4.Configurate liquid:30-fold(or20-fold)wash solution diluted30-fold(or20-fold)with distilled water and reserve.5.washing:Uncover Closure plate membrane,discard Liquid,dry by swing,add washing buffer to every well,still for30s then drain,repeat5times,dry by pat.6.add enzyme:Add HRP-Conjugate reagent50μl to each well,except blank well.7.incubate:Operation with3.8.washing:Operation with5.9.color:Add Chromogen Solution A50ul and Chromogen Solution B to each well,evade the light preservation for15min at37℃10.Stop the reaction:Add Stop Solution50μl to each well,Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11.assay:take blank well as zero,Read absorbance at450nm after Adding Stop Solution and within15min.Important notes1.The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced15-30minutes inthe room temperature,ELISA plates coated if has not use up after opened,the plate should be stored in Sealed bag.2.washing buffer will Crystallization separation,it can be heated the water helps dissolvewhen dilute.Washing does not affect the result.3.add Sample with sampler Each step,And proofread its accuracy frequently,avoids theexperimental error.add sample within5mins,if the number of sample is much, recommend to use Volley.4.if the testing material content is excessively higher(The sample OD is bigger than the firststandard well),please dilute Sample(n-fold),Please diluente and multiplied by the dilution factor.(×n×5).5.Closure plate membrane only limits the disposable use,to avoid cross-contamination.6.The substrate evade the light preservation.7.Please according to use instruction strictly,The test result determination must take themicrotiter plate reader as a standard.8.All samples,washing buffer and each kind of reject should according to infective materialprocess.9.Do not mix reagents with those from other lots.CalculateAssay range50pg/ml -1500pg/mlStorage and validity1.Storage :2-8℃.2.validity :six months.Take the standard density as the horizontal,the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper,Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve,multiplied by the dilution multiple,or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation,calculate the sample density,multiplied by the dilution factor,the result is the sample actual density.This chart for reference only。