ADP含量试剂盒使用说明
辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒使用说明
取上清液冰上保存供测定 NADPH 含量。
二、测定步骤(在 1.5mLEP 管中按下表依次加样):
试剂名称
测定孔(μL)
样本
50
双蒸水
试剂一
250
试剂二
75
试剂三
75
试剂四
75
试剂五
35
对照管可以只做一个,不需每一个样品都做一个对照。充分混匀后,室温避光静置 40min
2、组织中 NADP 和 NADPH 的提取:
称取约 0.1g 组织,加入 0.9mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min,冰浴中冷却后,10000g
4℃离心 10min,取上清液至另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,10000g
4℃离心 10min,取上清液冰上保存供测定 NADP+含量。
辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒使用说明
产品简介:
NADP+和 NADPH 含量测定可以计算 NADP(NADPH + NADP+)含量和 NADPH/NADP+比值,其变化与
磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原
态的主要标志之一,而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP+和 NADPH。NADPH 通过 PMS 的递氢作用,使氧化型
噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm 下检测吸光值,从而测定 NADPH 含量。利用 6-磷酸葡萄
糖脱氢酶还原 NADP+为 NADPH,从而检测 NADP+含量。
血小板聚集功能(ADP及AA途径)检测试剂盒(粘度测定法)产品技术要求lepu
血小板聚集功能(ADP及AA途径)检测试剂盒(粘度测定法)
适用范围:本试剂盒与血栓弹力图仪配套使用,体外检测人全血的血块强度(MA)指标,通过MA计算抑制率,用于评价患者服用阿司匹林及噻吩并吡啶类药物后的血小板聚集功能。
1.1 包装规格
1人份/盒、5人份/盒。
1.2 产品主要组成成分
2.1 外观
试剂盒外观整洁,标识清晰。
试剂盒内的各液体组分应澄清透明,无沉淀或絮状物,无漏液。
样品测定杯无破损,无变形。
2.2 准确性
2.2.1用本试剂盒同Haemoneticse公司血小板聚集功能检测试剂盒对40例临床样本进行对照检测,各自测得的抑制率进行相关性分析,应满足r≥0.975。
2.2.2用本试剂盒测定正常人群抗凝全血样本,应满足表1的要求
表1 正常人群抗凝全血样本ADP及AA途径MA值测试结果范围
2.3 批内精密度
用同批试剂盒的普通杯检测同一份枸橼酸钠抗凝全血5次,计算血块强度(MA)的变异系数(CV),应小于15%。
用同批试剂盒的巴曲酶杯、二磷酸腺苷杯及花生四烯酸杯分别检测同一份肝素钠抗凝全血各5次,计算各自的血块强度(MA)的变异系数(CV),均应小于15%。
2.4批间精密度
用不同三批试剂盒每一批的普通杯检测同一份枸橼酸钠抗凝全血各5次,计算血块强度(MA)的变异系数(CV),应小于15%。
用不同三批试剂盒每一批的巴曲酶杯、二磷酸腺苷杯及花生四烯酸杯分别检测同一份肝素钠抗凝全血5次,计算各自的血块强度(MA)的变异系数(CV),均应小于15%。
2.5 稳定性
将试剂盒置于2℃~8℃,保存12个月之后对试剂盒进行检测,其结果应符合2.1、2.2.2、2.3的要求。
磷酸葡萄糖脱氢酶活性检测试剂盒说明书
6-磷酸葡萄糖脱氢酶(微量法货号:BC0265规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体20 mL×1瓶4℃保存(切忌放-20℃)试剂二粉剂×1支4℃保存试剂三粉剂×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂二:用时每支加250 μL双蒸水充分溶解备用;2、试剂三:用时每支加250 μL双蒸水充分溶解备用。
3、工作液配制:临用前将试剂一、试剂二、试剂三以15:0.2:0.2比例混合。
产品说明:G6PDH(EC 1.1.1.49)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是磷酸戊糖途径的关键酶,催化6-磷酸葡萄糖氧化为6-磷酸葡萄糖酸内酯,同时将NADP+还原为NADPH,供生物合成及维持细胞内的还原状态用。
因此6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性的高低可以从一定程度上反映出生物体的生物合成和抗氧化能力。
G6PDH催化NADP+还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌、细胞或组织样本的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清,按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
ATP含量试剂盒使用说明
ATP含量试剂盒使用说明一、试剂盒的组成1.ATP酶:可催化ATP与啶酮核苷酸底物反应,产生荧光发射。
2.底物液:包含啶酮核苷酸底物、辅酶CoA、磷酸化底物和缓冲液等成分。
3.酶反应终止液:用于停止ATP酶的活性,停止荧光信号的产生。
4.荧光标准品:已知浓度的ATP溶液,用于绘制标准曲线。
5.读取缓冲液:用于在荧光分析仪上读取荧光信号。
二、使用步骤1.试剂室温平衡:将试剂盒中的所有试剂恢复到室温,并确保所有试剂充分均匀混合。
2.样品预处理:根据实验需要,选择合适的方法提取细胞或组织中的ATP,并计算样品的蛋白质含量。
3.准备标准曲线:取不同浓度的荧光标准品,并用读取缓冲液稀释到一系列已知浓度的溶液。
每个浓度至少重复3次。
将这些标准品稀释到试管中。
4.样品处理:将不同待测样品分别加入到试管中,各样品至少重复3次。
同时加入空白对照组,只加读取缓冲液而无待测样品。
5.加入试剂:将相应体积的底物液加入到每个试管中,充分混合。
立即向每个试管中加入适量的ATP酶,同时进行混合。
6.反应:将试管密封,并在37℃下孵育一段时间,一般为10-30分钟。
7.停止反应:向每个试管中加入相应体积的酶反应终止液,停止ATP酶的活性,停止荧光信号的产生。
8.读取荧光:将每个试管置于荧光分析仪上,使用适当的激发波长和发射波长对荧光信号进行测量,记录下荧光单位值。
9.绘制标准曲线:将标准曲线上的荧光单位值与标准品的ATP浓度进行对应,绘制标准曲线。
10.计算样品ATP含量:根据样品荧光单位值和标准曲线,计算出样品中的ATP含量。
三、注意事项1.所有试剂的操作应按照试剂盒说明进行,不同品牌可能有些许差异,应严格按照相应说明进行操作。
2.手术操作时应采取无菌操作,避免对样品的污染。
3.混合试剂时需充分振荡,确保试剂均匀混合。
4.在实验过程中,所有试管、吸头等实验用具应标注清楚,避免混淆和误操作。
5.反应时间会影响结果,不同实验目的可根据需要进行时间的调整,一般30分钟内可得到稳定的信号。
细胞ATPADPAMP含量高效液相色谱法HPLC定量检测
细胞ATP/ADP/AMP含量高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞A TP/ADP/AMP含量高效液相色谱法(HPLC)定量检测试剂是一种旨在通过高氯酸酸性处理,碱性中和后,在高效液相色谱仪和紫外光度仪下(254nm波长)检测分析,分离出ATP、ADP或AMP波峰,以定量测定样品中腺嘌呤核苷酸含量的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种动物或人体细胞裂解样品中A TP、ADP、AMP的含量检测。
产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景腺嘌呤核苷酸(adenine nucleotides),简称腺苷,包括单磷酸腺苷、二磷酸腺苷和三磷酸腺苷,是一种单体单位,为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)的组成成分,并提供化学能量,在能量代谢通路中维护诸如肌肉、胞膜等组织细胞结构的生化和生理功能,调节细胞糖酵解、三羧酸循环、电子传递系统、氧化磷酸化活动。
腺嘌呤核苷酸在细胞中浓度低,且不稳定,通常通过其类型不同、浓度差异、分布状况,来评价细胞的代谢情况和能量状态。
单磷酸腺苷(Adenosine monophosphate;AMP),又称为5'-腺嘌呤核苷酸或腺苷酸(5'-adenylic acid),是一种在(脱氧)核糖核酸中发现的核苷酸。
它是一种磷酸及核苷腺苷的酯,并由磷酸基团、戊糖核酸糖及碱基腺嘌呤所组成。
分子式为C10H14N5O7P,分子量347。
AMP可以通过腺苷酸激酶(adenylate kinase)催化2分子ADP生成,或通过ATP以及ADP水解产生。
AMP常以腺苷-3',5'-环化一磷酸(cAMP)形式存在于细胞中。
AMP与A TP之比反映细胞ATP生成状况以及脂肪酸氧化程度。
二磷酸腺苷(adenosine diphosphate;ADP),参与ADP-ATP循环,提供热能转换和动态平衡,尤其在线粒体需氧呼吸、光合成等实现。
大鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒说明书
大鼠脂联素(ADP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂联素(ADP)水平。
用纯化的大鼠脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP标记的脂联素(ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠脂联素(ADP)浓度。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
大鼠脂联素(ADP)酶联免疫吸附测定试剂盒 说明书
大鼠脂联素(ADP)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:E0605r本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体中ADP 含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中ADP水平。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被有固相抗体的微孔中依次加入ADP抗原、生物素化的抗ADP抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的ADP呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 ng/mL,做系列倍比稀释后,分别稀释成100 ng/mL,50 ng/mL,25 ng/mL,12.5 ng/mL,6.25 ng/mL,3.12 ng/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/mL,临用前15分钟内配制。
如配制100 ng/mL标准品:取0.5ml 200 ng/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
小鼠脂联素(ADP)说明书
小鼠脂联素(ADP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书南京金益柏ELISA试剂仅供研究使用目的:南京金益柏ELISA试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)的含量。
实验原理:南京金益柏ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脂联素(ADP)水平。
用纯化的小鼠脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP标记的脂联素(ADP)抗体结合南京金益柏ELISA试剂盒,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,南京金益柏ELISA试剂盒并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。
南京金益柏ELISA试剂盒用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠脂联素(ADP)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 南京金益柏ELISA试剂盒血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.南京金益柏ELISA试剂盒尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
ATP含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明
ATP含量检测试剂盒(可见分光光度法)使用说明注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0300规格:100T/48S产品内容:组分规格保存试剂一底物液Ⅰ粉剂×1瓶室温保存底物液Ⅰ配制:用时加10mL煮沸双蒸水溶解,并沸水浴使溶解完全;临用前观察如有结晶,可沸水浴溶解后置于37℃保存待测。
试剂二底物液Ⅱ20mL×1瓶4℃保存试剂三促进剂粉剂×2支-20℃保存稀释液760μL×2瓶4℃保存试剂三应用液(促进剂)配制:临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中,充分溶解备用。
试剂四沉淀剂液体 5.5mL×1瓶4℃保存试剂五显色剂甲液7mL×4瓶4℃保存乙液6mL×4瓶4℃保存显色应用液的配制:用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中,充分混匀4℃待用,现用现配。
试剂六终止剂50mL×1瓶室温保存试剂七ATP标准品粉剂×2支4℃保存5mmol/L ATP标准品贮备液配制:用时加双蒸水定容至1mL,制备5mmol/L ATP标准品贮备液。
1mmol/L ATP标准品应用液配制:将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释,即5倍稀释。
产品说明:三磷酸腺苷(adenosine5'-triphosphate,ATP)是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。
ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。
ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。
通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。
通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。
ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。
自备仪器和用品:分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。
ADP-ATP比例生物发光分析试剂盒-Qwbio
ADP/ATP比例生物发光分析试剂盒-Qwbio产品名称:ADP/ATP Ratio Bioluminescence Assay Kit产品货号:K255-200产品规格:200 assays产品综述:试剂盒概要:检测方法——光度计或者计数仪。
样品类型——细胞和组织裂解物、培养基、尿液、土壤、污泥、血浆和血清,以及其他多种生物体液。
物种——哺乳动物产品应用——ADP和ATP水平的生物发光检测,适用于快速地筛查哺乳动物细胞的凋亡、坏死、生长停滞和细胞增殖。
特色和优势:简易一步式操作;仅需30分钟。
快速和方便。
ADP/ATP比例分析提供高度一致性结果,并与其他凋亡标记(比如,TUNEL水平分析和半胱天冬酶分析)密切相关。
另外,该分析具有全自动高通量(10秒/样品){启维益成公司提供该产品}和高灵敏性(检测10-100个细胞/孔)。
试剂盒组分:Nucleotide Releasing BufferATP Monitoring EnzymeADP Converting EnzymeEnzyme Reconstitution Buffer产品描述:ADP/ATP比例的改变,已经被用来区分细胞死亡和活性的不同模式。
ATP水平的增加和ADP 水平的下降,已经被认为是增殖性细胞{启维益成公司提供该产品}。
反之,ATP水平的下降和ADP水平的增加,被认为是凋亡性细胞。
坏死细胞的ATP下降量和ADP增加量,比凋亡细胞更加显著。
ApoSENSOR ADP/ATP比例分析试剂盒(ApoSENSOR TM ADP/ATP Ratio Assay kit)利用生物发光检测ADP和ATP水平,适用于快速地同时筛查哺乳动物细胞的凋亡、坏死、生长停滞和细胞增殖。
该分析利用萤光素酶催化ATP和萤光素发光,并且光能够被光度计或者计数仪检测。
ADP水平的检测,是通过转化成ATP,随后使用上述相同的反应检测。
该分析具有全自动高通量和高灵敏性(检测100个哺乳动物细胞/孔)。
ADP检测流程
判断检测结果:深蓝色为阴性(合格);淡蓝色为弱阳性(合格),需要重新做一次对照检测;白色为强阳性(不合格)。
如有疑问,请拔打电话:400 0769 069
广东安盾实业投资有限公司ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ诚为你服务!
AD-16P型便携式农药残留快速检测仪
操作流程图:
将速测仪接上电源,打开上盖。
仪器自检后,主机面板显示10分钟倒计时
将农药速测卡片沿虚线对折后,撕掉薄膜,插入通道内的卡槽里(注白色面在下、红色在上)。
用滴管取待测菜样溶液,滴两滴到农药速测卡的白色药膜上(使其溶液完全覆盖白色卡片)。
按下启动键“START”,进入检测倒计时(10分钟)
ADP含量试剂盒说明书
ADP含量试剂盒说明书货号:BC1014产品简介:ADP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ADP 含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
ADP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。
试验中所需的仪器和试剂:高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水产品内容:试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周;试剂四:ADP标准品5mg×1支,-20℃保存。
临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL溶液,配好后-20℃可保存1周;操作步骤:一、实验前的准备工作:1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。
(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。
2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。
3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。
将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。
二、ADP的提取:1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取ADP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。
艾美捷QuicKey-人脂联素(ADP Acrp30)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)QuicKey-人脂联素(ADP/Acrp30)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书QuicKey Human ADP/Acrp30(Adiponectin) ELISA Kit产品货号:E-TSEL-H002096T/48T/24T使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
QuicKey系列与传统ELISA试剂盒相比,在实验时间节省至少1小时的同时,获得更加灵敏和精确的实验结果。
Elabscience 自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。
用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆中ADP浓度。
其它相关生物液体请咨询技术支持。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:0.18ng/mL。
●检测范围:0.39-25ng/mL。
●特异性:可检测样本中的人ADP,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
背景介绍脂联素(Acrp30/ADP)是一种仅由脂肪细胞分泌的激素,参与调节体内能量平衡和糖脂代谢。
人体内的脂联素由244个氨基酸组成,分子量为30KDa,是apM1基因的表达产物,在结构上与Ⅷ、Ⅹ型胶原和补体C1q高度同源。
脂联素单体聚合形成多种可影响生物活性的复合物结构,包括三聚体(低分子量)、六聚体(中分子量)和更高阶的寡聚结构(高分子量)。
脂联素是脂肪细胞来源蛋白质,调节炎症和新陈代谢的旁分泌及内分泌,它可促进脂肪细胞分化、脂肪酸分解代谢和胰岛素敏感。
研究表明,脂联素与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、高血脂病、高血压、动脉粥样硬化和肾脏疾病等密切相关。
检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
小鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒简介说明
小鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒简介说明小鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被脂联素(ADP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、5、10、20、40、80ng/mL 试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
CellBiolabs聚ADP核糖ELISA试剂盒
CellBiolabs聚ADP核糖ELISA试剂盒聚ADP核糖基化(PAR)是将几个ADP核糖基团添加到蛋白质中,是真核细胞中的一种翻译后修饰,可调节修饰蛋白质和蛋白质的活性。
这种修饰是由聚ADP核糖聚合酶介导的。
使用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)作为基底ADP核糖基化可被聚(ADP核糖)等PAR 降解酶逆转糖水解酶(PARG)和ADP核糖水解酶3(ARH3)。
聚ADP核糖基化参与不同的生物学功能,如致癌、分化细胞死亡。
ADP 核糖基化活性的失调与糖尿病的发病机制有关癌症、病毒感染和神经退行性变等疾病。
ADPRISBUTION最被研究的角色之一是响应DNA 损伤产生PAR链。
DNA修复过程非常复杂最近,有几种抑制剂PARP 家族成员在治疗某些癌症方面表现出了希望。
Cell Biolabs 聚(ADP核糖)ELISA试剂盒是一种用于快速检测的酶免疫分析方法和细胞或组织样品中PAR水平的定量。
通过将其吸光度与已知标准曲线的吸光度进行比较来确定。
这个套件有一个检测灵敏度限为20 pM。
每个试剂盒提供足够的试剂,可进行多达96次分析,包括标准曲线和未知样本。
该试剂盒是一种用于PAR定量测定的夹心ELISA。
首先将样品或PAR标准添加到单克隆抗PAR抗体涂布的微孔板中。
短暂孵育后,加入抗PAR多克隆检测抗体,然后加入HRP结合二级抗体。
添加基质后,会发生比色反应,可以用比色平板阅读器测量。
未知样品中PAR 含量由将该吸光度与PAR聚合物标准曲线进行比较。
1.MET-5014:NAD+/NADH分析试剂盒(比色法)2.MET-5030:NAD+/NADH检测试剂盒(荧光法)3.STA-320:选择™ 氧化DNA损伤ELISA试剂盒(8-OHdG定量)4.STA-321:选择™ DNA双链断裂(DSB)染色试剂盒5.STA-322:选择™ 紫外线诱导DNA损伤ELISA试剂盒(CPD定量)6.STA-323:选择™ 紫外线诱导DNA损伤ELISA试剂盒(6-4PP定量)7.STA-350:选择™ 彗星分析试剂盒(3孔玻片)8.STA-355:选择™ 96孔彗星检测试剂盒文献引用:1. Li, H. et al. (2021). Striatal oxidative damages and neuroinflammation correlate with progression and survival of Lewy body and Alzheimer diseases. Neural Regen Res. 17(4):867-874. doi:10.4103/1673-5374.322463.2. Yu, Y. et al. (2021). Parp mutations protect from mitochondrial toxicity in Alzheimer's disease.Cell Death Dis. 12(7):651. doi: 10.1038/s41419-021-03926-y.。
ATP含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法
ATP含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法ATP含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0300规格:50T/48S产品内容:提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加入7mL蒸馏水充分溶解,可加热促进溶解;试剂三:液体8mL×1瓶,4℃保存;试剂四:粉剂×2支,-20℃保存。
临用前每支加入0.4mL蒸馏水溶解,可分装后-20℃保存,避免反复冻融;试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加入3.2mL蒸馏水;试剂六:粉剂×2支,-20℃保存。
临用前加入0.5mL蒸馏水备用,可分装后-20℃保存,避免反复冻融;标准品:粉剂×1支,-20℃保存。
5mg ATP,临用前加入0.826mL蒸馏水配成10μmol/mL的ATP标准溶液。
产品说明:ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰,NADPH和ATP含量成正比,以此反应ATP含量。
自备仪器和用品:紫外分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水和氯仿。
操作步骤:一、ATP的提取:1、血清(浆)中ATP的提取:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议取约0.1mL血清(浆),加入1mL提取液),充分震荡,10000g,4℃离心10min;取上清液至另一EP管中,加入500μL的氯仿充分震荡混匀,10000g4℃离心3min,取上清,置冰上待测(不可用于蛋白质含量测定)。
腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶活性测定试剂盒说明书
腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase,AGP)活性测定试剂盒说明书(货号:G0536F分光法48样)一、产品简介:ADPG焦磷酸化酶(AGP,EC2.7.7.27)是植物淀粉合成过程中起关键性调节作用的酶,催化l-磷酸葡萄糖(G-1-P)与三磷酸腺苷(ATP)反应形成淀粉合成的直接前体腺苷二磷酸葡萄糖(ADPG),在植物中,主要存在于贮藏器官和叶片中。
AGP催化的逆向反应生成G1P,在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下测定NADPH增加速率,即可计算AGP活性。
二、测试盒组成和配制:试剂名称规格保存要求备注提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一粉体mg×1支-20℃保存临用前甩几下使粉体落入底部,再加1.1mL蒸馏水溶解,仍-20℃保存。
试剂二粉体mg×1支4℃保存临用前甩几下使粉体落入底部,再加1.1mL蒸馏水溶解。
仍4℃保存。
试剂三液体32mL×1瓶4℃保存试剂四粉体mg×1支-20℃保存临用前甩几下使粉体落入底部,再加2.1mL蒸馏水溶解,仍-20℃保存。
【注】:粉剂量在mg级别,使用前用手甩几次或者进行离心,打开直接加入要求的试剂即可。
三、所需的仪器和用品:可见分光光度计、1ml石英比色皿(光径1cm)、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
四、腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGP)活性测定:建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!1、样本制备:①组织样本:称取约0.1g组织(水分充足的样本可取0.2g),加1mL提取液,进行冰浴匀浆,12000rpm,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
【注意】若样本颜色较深(如较深颜色的植物叶片),可引起起始值A1值较大如超过1.5,可在样本制备过程中增加除色素步骤:取约0.1g组织(水分充足的样本可取0.5g),加入80%乙醇冰浴匀浆,12000rpm,4℃离心10min,弃掉色素较深的上清液;以上除色素步骤重复2次。
【试剂制备】CellBiolabs多聚ADP-核糖ELISA检测试剂盒
【试剂制备】CellBiolabs多聚ADP-核糖ELISA检测试剂盒主题:多聚ADP-核糖ELISA检测试剂盒参数如下:cat# XDN-5114名称 Poly (ADP-Ribose) ELISA Kit样本细胞或组织样本检测限 20 pM存储将收到的聚(ADP核糖)标准品储存在-80ºC。
将抗体储存在-20ºC。
它是建议制作等份,以避免多次冻融循环。
将所有其他组件存储在4摄氏度。
原理该试剂盒基于双抗夹心ELSIA的检测原理,试剂盒中提供包被有PAR抗体的微孔板,加入样本或者标准品后,样本或者标准品中的PAR被固定在板底,加入PAR检测抗体,然后加入HRP标记的二抗,在显色底物的作用下,发生显色。
通过标准品得到的标准曲线,最终计算得到样本中PAR的含量。
检测结果:多聚ADP-核糖ELISA检测试剂盒,试剂的制备:·1倍洗涤缓冲液:用去离子水将10倍洗涤缓冲液稀释至1倍。
搅拌均匀。
·抗聚(ADP核糖)检测抗体和二级抗体,HRP结合物(1000X):使用前,立即用试液稀释检测抗体和二级抗体1:1000稀释剂。
不要储存稀释溶液。
·抗聚(ADP核糖)抗体涂层板:注:反聚(ADP核糖)涂层孔不稳定,应在24小时内使用涂层后。
仅涂抹立即使用的井数。
建议用户在阻断抗聚(ADP核糖)抗体期间制备标准品和样品镀膜板。
1.使用前,立即将抗聚(ADP核糖)涂层抗体1:500稀释至1X公共广播公司。
示例:向4.990 mL 1X PBS中添加10μL。
彻底地旋转。
2.向每个待测试的孔中添加100μL混合物,并在4ºC下培养过夜。
移除混合物反聚(ADP核糖)涂层溶液,并在纸巾上吸干盘子以去除多余的水分液体3.向每个待测孔中添加200μL分析稀释剂,并在室温下封闭2小时。
取出溶液,用200μL 1X PBS清洗孔三次,并将板吸干用纸巾清除多余的液体。
在最后一次PBS清洗后立即使用该板。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
ADP含量试剂盒使用说明
产品简介:
ADP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定ADP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
ADP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。
试验中所需的仪器和试剂:
高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水
产品内容:
试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周;
试剂四:ADP标准品5mg×1支,-20℃保存。
临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL溶液,配好后-20℃可保存1周;
操作步骤:
一、实验前的准备工作:
1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。
(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。
2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。
3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。
将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。
二、ADP的提取:
1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取ADP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。
2、细胞处理:收集约30mL细胞,离心菌体经干燥后,加入1mL试剂一,超声破壁细胞(950 W,30%,15min,工作1s间隔2s),4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。
三、ADP含量测定操作步骤:
1.开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开empower软件,在方法组中设置进样量20μL,流速1mL/min,保留时间10min,检测波长254nm,设置完毕保存方法组。
2.用100%的甲醇、10%的甲醇、双蒸水按甲醇浓度从大到小的顺序洗色谱柱30min。
3.用流动相洗柱子,待基线稳定后开始加样。
4.加入标准品20μL,在10min内可分离ADP,ADP的保留时间在4min左右(柱子不同,保留时间有差异),计算不同浓度的ADP标准品的峰面积。
5.加入样品20μL,在相应保留时间处检测ADP的峰面积。
ADP含量的计算:
将5mg/ml的ADP标准品用双蒸水分别稀释成100μg/ml、80μg/ml、60μg/ml、40μg/ml和20μg/ml的ADP标准品溶液,以标准品浓度(μg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标分别计算ADP标准曲线。
注:标准品的稀释倍数要根据样品中ADP浓度确定,样品中ADP的峰面积必须落在不同浓度的ADP标准品的峰面积之内,该标准品稀释倍数只是一个参考。