细胞工程考试总结
细胞工程考试整理
细胞工程学是以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学生长素类:2,4-D 、IAA、NAA、IBA植物的组织和细胞培养(tissue culture)是指通过无菌操作,把植物体的器官、组织或细胞(即外植体)接种于人工配制的培养基上,在人工控制的环境条件下培养,使其细胞分裂、增殖、分化、发育直至形成完整植株的技术与方法。
意义与应用:组织分化与形态建成快速繁殖与去病毒花药培养与单倍体育种幼胚培养与试管受精抗性突变体的筛选与体细胞无性系变异悬浮细胞培养与次生物质生产以及超低温种质保存等愈伤组织(callus)在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。
植物组织和细胞培养过程:离体的植物组织、器官、细胞(脱分化:用到细胞分裂素,生长素)-------愈伤组织(再分化)-----芽、根--------植物体条件:含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。
植物细胞的全能性(totipotent):植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性,在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
脱分化(dedifferentiation):将来自于已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性。
再分化(redifferentiation):经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
体细胞胚或胚状体:离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物(不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞)。
离体无性繁殖程序:无菌培养物的制备培养物的增值生根培养;炼苗和移栽再生植株的鉴定组培苗的定义:利用适宜的植物材料(外植体),通过组织培养的途径,使之分生出新的植株个体,即为组培苗。
这种繁殖方式称为微体繁殖或离体繁殖或快繁(简称微繁或快繁)。
专题2__细胞工程知识点总结
生物选修3专题2 细胞工程知识点总结(一)植物细胞工程1.理论基础(原理):细胞全能性全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞2.植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
3.植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。
化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
(3)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。
(二)动物细胞工程1. 动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
(4)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。
此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常需加入血清、血浆等天然成分。
③温度:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。
④气体环境:95%空气+5%CO2。
O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
细胞工程总结
一、名词解释:细胞工程(cell engineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。
1.脱分化:脱分化:具有特异结构和功能的细胞转化成没有特异结构和功能的细胞的过程称为脱分化。
(如根、茎、叶)2.饲喂培养:将饲喂的细胞用培养基作平板,此平板称饲喂层,用X射线或紫外线照射,使核失活但细胞存活,然后将原生质体以液体浅层培养或平板技术铺在饲喂层上。
3.核重编成:使在体细胞中被关闭,而在正常胚胎发育中表达的基因重新被激活的过程。
4.细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain5.热力灭菌:主要是利用高温使菌体变性或凝固,酶失去活性,而使细菌死亡。
6.人工种子:是将植物立体培养产生的体细胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜的条件下发芽出苗7.植板率:每个平板接种细胞总数中形成细胞团的百分率。
植板率=每平板形成的细胞团数/每平板接种的细胞总数8.胚胎移植: 是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术。
9.体细胞无性系:以单体细胞为材料,采用无性繁殖法繁殖的品种(品系)称无性系品种(品系),简称无性系10.过滤灭菌:过滤灭菌法,即用筛除或滤材吸附等物理方式除去微生物仓鼠细胞Hamster cells 白细胞抑制因子leukocyte inhibitory factor, LIF 干细胞Stem cells二、简答1.细胞活力鉴定方法:取纯化后的植物原生质体悬浮液0.5ml置于小试管中,加入含2mg/L 的FDA的丙酮溶液,使最终浓度为0.01%,混匀,放置5分钟,荧光显微镜观察(激发光滤光片QB-24,压制滤光片JB-8),有活力原生质体发绿色荧光,不产生荧光为无活力。
细胞工程考试总结
细胞工程考试总结细胞工程是近年来兴起的一个研究领域,其涉及分子生物学、细胞生物学、生物化工等多个学科的交叉与融合。
细胞工程在医药、食品、能源等领域有着广泛的应用。
考试是检验学习成果的一个重要方式,通过总结细胞工程考试可以更好地发现自己的不足,提高学习水平。
一、考试形式细胞工程考试通常采用笔试形式,试卷包括选择题、填空题和简答题。
选择题占比较大,通常是单选题和多选题,试题涵盖了细胞工程的基本概念、实验技术和应用等方面。
填空题考察对实验数据的分析和理解能力,而简答题则需要考生掌握基本理论知识并能够结合实际进行分析和解决问题。
二、考试知识点1. 细胞基础知识:细胞生物学基础知识、细胞培养、细胞的生理和代谢等方面。
2. 分子生物学:DNA结构与功能、基因调控、基因克隆等。
3. 技术与方法:基因工程、PCR、蛋白质纯化、细胞流式分析等。
4. 细胞工程应用:生物药物、生物制品、生物能源等。
三、注意事项1. 模拟考试:在考试前可以进行模拟考试,模拟考试可以让我们更好地感受到考试的难度,同时也可以预测自己的得分情况,对知识掌握情况有一个比较清晰的了解。
2. 补充知识:细胞工程的内容比较广泛,考试可能会涉及到一些我们没学过或者没有掌握的知识,那么考试之前需要对一些基础知识进行巩固,同时也可以通过阅读相关的文献、视频或者向老师请教等方式来补充知识。
3. 做好笔记:在学习过程中,应尽可能的记录下自己的笔记,对于一些重要的知识点、公式、实验名称等也要做好标注,这有助于我们在考试时快速找到相关知识点,减少遗漏。
4. 做好时间规划:在考试时,应该根据试卷题目难易程度、所占分值大小、自己的掌握程度来做好时间规划,尽可能地把握好答题时间,并避免在最后没有时间答题的情况出现。
总之,细胞工程考试虽然难度较大,但只要我们掌握好基本知识并紧密结合实践,认真备考,制定好合理的考试策略,突破自我,就可以取得优良的成绩。
细胞工程考试总结
细胞工程考试总结一.细胞工程(Cell Engineering):(定义)是应用细胞生物学与分子生物学方法,借助工程学的实验方法或者技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性与生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或者新生物体的有关理论与技术方法的学科。
分类(包含):(填空)植物细胞工程与动物细胞工程植物细胞工程:(定义)以植物细胞组织为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或者人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或者制造新物种,或者加速繁殖植物新个体,或者获得有用物质的过程。
动物细胞工程:(定义)是根据细胞生物学及工程学原理,定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或者特种细胞产品的一门技术。
二.(填空)细胞学说的提出:施旺,施莱登(1838年)三.1902年,H aberlandt提出了细胞全能性学说。
第一章基本技术一.湿热灭菌:103-137kPa(121-126°C),15-30min.二.干热灭菌:利用烘箱加热到位60-180°C三.培养基基本成分:无机盐(大量元素,微量元素),有机成分(激素,植物生长调节剂),水常用有机成分:糖类(蔗糖),维生素,肌醇,腺嘌呤,氨基酸激素:生长素(根),细胞分裂素(芽),赤霉素(细胞伸长)四.基本培养基种类:MS,B5,N6,White(P26)(1)高盐平衡培养基:MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基与ER培养基。
特点:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性;营养丰富;微量元素种类全,浓度高。
(2)高硝态氮培养基:B5培养基,N6培养基及SH培养基等。
特点:硝酸钾的含量高,氨态氮的含量低,含有较高的盐酸硫胺素。
(3)中盐培养基:H培养基、Nitsch培养基、Miller培养基与Blaydes培养基。
特点:大量元素无机盐约为MS的通常,微量元素种类减少而含量增高,维生素种类比MS多。
大学《细胞工程》期末考试复习重点、考点总结
细胞工程期末复习(必考)细胞工程:研究真核细胞的核—质关系以及细胞器、细胞质基因转移的技术。
组织工程:研究开发用于修复或改善人体病损组织或器官的结构、功能的生物活性替代物的一门科学。
染色体工程:是按照一定的设计,有计划的消减添加或替换同种或异种染色体从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。
细胞连接:使细胞间的联系结构。
细胞表面的特化结构或特化区域,是细胞间建立长期组织上联系的结构基础。
涉及细胞外基质蛋白、跨膜蛋白、胞质溶胶蛋白、细胞骨架蛋白等。
细胞全能性:指分化细胞保留着全部的核基因组,具有生物个体成长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能。
细胞分化:指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。
包括时间和空间上的分化。
脱分化:又称去分化,指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。
即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
再分化:是指在离体条件下,无序生长的脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。
细胞培养:指从体内组织分离细胞,模拟体内环境,在无菌适当的条件使其生长繁殖的技术。
人工种子:又称合成种子或体细胞种子,指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。
植物胚胎培养:指对植物的胚及胚器官进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。
试管受精:指在无菌条件下离体培养未受精子房或胚珠和花粉萌发产生的花粉管进入胚珠从而完成受精过程。
细胞核移植:一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。
体外受精:指使哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
胚胎移植:指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵但为配种的受体母畜输卵管或子宫的技术。
人工受精:指将采集的精子注入人发情处理的母体内完成受精过程。
试管婴儿:指将卵子与精子取出在体外受精,培养发育成早期胚胎,再植回母体子宫内发育出生的婴儿,也就是采用体外受惊联合胚胎移植技术培育的婴儿。
细胞工程知识点总结
细胞工程知识点总结细胞工程的知识点主要涵盖细胞生物学、生物医学工程、材料科学、化学等多个领域的内容,下面将对一些重要的知识点进行总结和介绍。
一、细胞生物学1. 细胞结构和功能:细胞是生物体的基本单位,包括细胞质、细胞核、细胞膜等结构组成,具有营养吸收、代谢、生长繁殖、分化等功能。
2. 细胞信号传导:细胞通过受体、信号分子等进行信号传导,调控生物功能和代谢活动。
3. 细胞分化:在不同环境条件下,细胞可以分化成不同类型的细胞,如干细胞可以分化成心肌细胞、神经细胞等。
4. 细胞凋亡和增殖:细胞在受到损伤或者环境刺激时,会发生凋亡或者增殖,维持细胞组织的稳态。
二、生物医学工程1. 细胞培养技术:包括细胞分离、培养基配制、细胞传代、细胞冻存等技术,用于大规模的生物制品的生产。
2. 细胞毒性和安全性评价:评估材料或者药物对细胞的毒性和安全性,保证产品的安全性和有效性。
3. 细胞治疗和干细胞技术:通过干细胞移植、基因修复等技术,用于治疗各种疾病和损伤。
4. 人工器官和组织工程:将细胞和生物材料结合,构建人工器官和组织,用于替代受损的组织和器官。
三、材料科学1. 生物材料的设计和制备:设计和制备适合细胞生长的生物材料,如生物降解材料、生物亲和材料等。
2. 生物材料的表征和评价:通过表面形貌、力学性能、生物相容性等评价生物材料的性能。
3. 细胞-材料相互作用:研究细胞和材料之间的相互作用机制,改善生物材料的生物相容性和使用性能。
四、化学1. 细胞药物递送系统:设计纳米级的载体或者纳米颗粒,用于细胞内的靶向递送和释放药物。
2. 细胞标记和成像技术:利用高灵敏度的成像设备和生物标记物,在活细胞和组织中进行细胞成像和追踪。
3. 细胞信号调控:通过合成化学的方法来调控和干预细胞信号传导系统,研究细胞功能和代谢途径。
细胞工程的发展趋势主要包括以下几个方向:1. “定制化医疗”:根据个体的基因组信息和生理状态,设计和生产个性化的治疗产品和医疗器械,提高治疗效果。
高三生物细胞工程知识点总结笔记
高三生物细胞工程知识点总结笔记细胞工程作为生物学领域的一个新兴学科,研究的是如何利用生物体内的微生物、细胞等进行工程化的技术应用。
本文将从细胞工程的基本概念入手,介绍一些常见的细胞工程技术和应用,以及细胞工程带来的发展前景。
一、细胞工程的基本概念细胞工程是指将细胞作为工程器具,利用现代生物技术改造和利用细胞的过程。
它包括三个方面的内容:细胞培养技术、细胞操作技术和细胞提取技术。
细胞工程的基本原理是通过对细胞的处理和加工,改变其性能和功能,使其在生产、医学和环境等方面发挥重要作用。
二、常见的细胞工程技术1. 基因工程技术基因工程技术是指对细胞的遗传物质进行改造的技术。
常见的基因工程技术有基因克隆、基因转导、基因敲除等。
通过这些技术,可以改变细胞内的基因组成,进而改变细胞的性状和功能。
2. 细胞培养技术细胞培养技术是指利用人工培养基和特定条件,使细胞在体外进行繁殖和增殖的技术。
细胞培养技术主要包括细胞的分离、培养和保存等步骤。
通过细胞培养技术,可以大量生产细胞用于药物研究或生物制品的生产。
3. 细胞信号转导技术细胞信号转导技术是指利用细胞内信号传递分子进行细胞功能调控的技术。
常见的细胞信号转导技术有蛋白激酶酶活性检测、细胞凋亡检测和细胞周期分析等。
通过这些技术,可以研究细胞内的信号传递机制,进一步了解细胞的生命周期和功能。
三、细胞工程的应用1. 医学领域细胞工程在医学领域的应用非常广泛。
通过细胞工程技术,可以培育人工皮肤、修复组织和器官等。
此外,细胞工程还能用于肿瘤的诊断和治疗,例如通过基因工程技术制备靶向抗肿瘤药物。
2. 环境领域细胞工程在环境领域的应用主要包括环境污染物的检测和处理。
例如,利用细胞工程技术可以研究水体中的微生物污染和细菌降解污染物的能力,进而制定相应的环境保护政策和措施。
3. 生物制药领域细胞工程在生物制药领域的应用非常重要。
通过基因工程技术,可以将目标基因导入细胞中,使其产生特定的蛋白质,进而用于药物的生产。
细胞工程的总结题
1、单克隆抗体的特性是什么?单克隆抗体通常应用在哪几方面?特异性和同质性作为亲和层析的配体作为生物治疗的导向武器作为免疫抑制剂作为增强抗原免疫原性作为医学检验试剂2、细胞计数的操作方法?细胞计数(cell counting)计数悬浮液中细胞的形态及浓度,以判断消化或稀释程度(亦用于培养液中细胞浓度的检查)1 染色:在干净的离心管中加入9滴细胞悬液,再加入1滴0.4%台盼蓝,混匀,静置2~3min;2 充池:在计数板盖片边缘加入1~2滴染色的细胞悬液,使之完全充满计数板与盖玻片间的空间(无气泡或溢出)3 计数:在显微镜下记录计数板四角四个大方格中的活细胞(不染色细胞)总数。
一团细胞按一个细胞计数。
压线细胞,数上不数下,数左不数右。
4 计算:细胞悬液浓度(细胞个数/ml)=(4大格细胞总数/4)×104×稀释倍数注意:如细胞团数超过10%,说明消化不充分。
3、细胞培养的常规检查包括哪些内容?细胞的生长形态、培养液的ph、细胞是否污染、细胞活力4、造血干细胞的生物学特性?主要存在于红骨髓内,是从胚胎卵黄囊上的血岛细胞增殖、分化并迁移而来。
(一)造血干细胞生物学特性1 高度自我复制能力2 多向分化能力3 不均一性什么是干细胞?是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,它可以分化成多种功能细胞。
4、什么是细胞培养?将动物的组织细胞分散成单个细胞,在模拟机体内的生长环境条件下使其在体外环境继续生长增殖的过程。
5、什么是生物技术?生物技术是以生命科学为基础,利用生物个体或生物器官、组织、细胞的特性和功能,设计构建具有预期性状的新物种或新品系(包括细胞系),以及与工程原理相结合,进行产品加工生产的综合性技术体系。
6、7、什么是染色体工程?是人们按照一定的设计,有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体,从而达到定向改变遗传性状和选育新品种的一种技术。
8、什么是细胞工程?指应用细胞生物学和分子生物学的原理,通过类似工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质,以获得新型生物的一门综合性科学技术9、什么是胚胎工程概念?在胚胎发育过程中,对其进行某种人为操作,以达到定向控制、改造或创造新的遗传形状的技术10 .根据干细胞分化潜能的大小通常将干细胞分为几大类?各有什么特点?单能干细胞:指只能分化为单一类型细胞的干细胞,如表皮干细胞只能分化为角化表皮细胞多能干细胞:指能分化为两种或两种以上类型细胞的干细胞,如骨髓造血干细胞可以分化为红细胞、巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞、淋巴细胞等多种类型细胞全能干细胞:指具有无限分化潜能的干细胞,如胚胎干细胞11 .什么是细胞系?永久细胞系的有哪些基本特性?细胞系:*指从原代培养物经传代培养后得来的一群特征专一、类型均匀的细胞,可以长期连续传代。
细胞工程知识点总结
细胞工程知识点总结
1、细胞的全能性:
(1)概念:已经分化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能.
(2)原因: 已分化的细胞具有本物种全套的遗传物质
(3)千细胞: 动物和人体内保留着少量具有和分化能力的细胞
2、细胞全能性的证明实例
(1)植物组织培养证明了植物细胞具有全能性
(2)克隆动物证明了高度分化的动物细胞核也具有发育的潜能.3、可作为证明细胞全能性的实例必须同时满足以下三个条件:
O起点: 具有细胞核的细胞;@终点: 形成完整的个体;@外部条件: 离体、营养物质等
注:种子发育成植株不叫全能性
4、细胞分化程度与全能性的关系:分化程度越低的细胞全能性越高
5、细胞全能性比较
(1)动物与植物:植物细胞>动物细胞
(2)同一个体:受精卵>生殖细胞>体细胞
(3)同一细胞: 刚产生的细胞>成熟细胞>衰老细胞。
12细胞工程作业总总结
细胞工程作业1(第一、三、五章)一、名解:1.细胞工程:以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的的利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
2.细胞全能性:每一个活细胞都包含植物生长发育所必需的全部基因,都具有再生成一个完全的有机体的潜力。
3.愈伤组织:由脱分化的细胞经过分裂产生的无组织结构无明显极性的松散细胞团,它具有再分化成为完整植物体的潜能。
4.外植体:植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料,可以是器官、组织、细胞和原生质体等。
5.脱分化:又称去分化,是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程,即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
6.原生质体:植物细胞工程中脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体。
7.胚胎培养:指对植物的胚及胚器官(如子房、胚珠)进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。
8.成熟胚培养:一般是指子叶期至发育成熟的胚的培养。
9.幼胚培养:是指胚龄处于早期原胚、球形期胚、心形期胚、鱼雷期胚的培养。
10.胚乳培养:指处于细胞期的胚乳组织的离体培养,它的功能是为胚发育和种子萌发提供营养。
11.胚珠培养:是指未受精或受精后的胚珠离体培养。
12.子房培养:是指授粉和未授粉的子房培养。
13.人工种子:将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮形成的类似种子的颗粒。
14.植物脱毒:利用物理、化学或生物学方法脱除植物所感染的病毒,在无菌条件下培养不带病毒的植株,进行快速繁育无病毒种苗的技术。
二、问答题:1、细胞培养有哪些主要设备及途?超净工作台,压力蒸汽消毒器,电热干燥箱,CO2培养箱,倒置显微镜,酶标仪、液氮罐、滤器,自动双重纯水蒸馏器,纯水仪等。
自动双重纯水蒸馏器和纯水仪是水处理设备,细胞培养对水的要求较高,至少是使用双蒸水,最好使用三蒸水或超纯水。
超净工作台为细胞操作提供无菌环境。
细胞工程大题总结
1.利用固定化技术的优点为:(1)反应器内细胞浓度高,代谢产物产率相应提高;(2)细胞可以长时间重复.使用;(3)反应器结构简单,细胞抗剪切应力能力提高;(4)细胞间接触良好,细胞分化适宜,有利于次生代谢产物的合成;(5)减少植物细胞的遗传不稳定性2.大规模培养的特点:(1)代谢产物的生产完全在人工控制条件下进行,可以通过改变培养条件和选择优良培养体系得到超整株植物产量的代谢产物;(2)培养在无菌条件下进行,可排除病菌和虫害侵扰;(3)可以进行特定的生物转化反应;(4)可以探索新的合成路线和获得新的有用物质等。
3. 植物细胞的大规模培养技术:悬浮细胞培养: 机械搅拌式生物反应器气升循环式生物反应器旋转式生物反应器固定化培养植物器官培养4. 植物细胞大规模培养的影响因素:1. 外植体的选择2. 环境因子的影响: 光、温、振荡频率3. 培养基的选择5.细胞培养的现实意义:生物技术上:生产各种生技术产品如:狂犬病、小儿麻痹症等病毒疫苗,表皮生长因子及干扰素、白细胞介素等生长因子及单克隆抗体等。
科学研究上:在病毒学、免疫学、遗传学、肿瘤学等方面。
临床医学上:胎儿的遗传性疾病分析,药物筛选及某些疾病的治疗等5. 培养细胞生命期:是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。
包括原代培养期、传代培养期及衰退期。
原代培养(Primary Culture)期:特点:细胞呈活跃移动,可见细胞分裂,但不旺盛。
与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。
传代期:在全生命期中此期的持续时间最长,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型衰退期:特点:此期细胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖,最后衰退凋亡。
6. 单克隆抗体的应用:a.单克隆抗体具有高度的特异性与灵敏性,可以广泛地由于临床医学的疾病诊断,以提高疾病诊断的准确性。
b.利用单克隆抗体技术可以生产各种免疫疫苗,这不仅能大大降低生产成本,同时也增加了疫苗的安全性。
c.单克隆抗体还有可能用于某些肿瘤的治疗,是人类战胜癌症十分有望的潜在技术d. 单克隆抗体技术还可广泛用于各种基础医学研究,从而推动现代医学的不7. 常用的杂种细胞筛选方法:◆基于酶缺陷型细胞和药物抗性所建立的杂种筛选◆基于营养缺陷型细胞所建立的杂种筛选◆由温度敏感型细胞组成的杂种细胞的筛选◆具有所需性状杂种细胞的筛选8.什么是胚胎移植?有什么意义?所谓胚胎移植(embryo transfer)也称受精卵移植,是指将良种母畜配种后,从其生殖道(输卵管或子宫角)取出受精卵或早期胚胎,移植到同种生理状态相同的母畜体内,使之继续发育成为新个体技术,所以也称为“借腹怀胎”。
细胞工程总结
细胞工程考点总结名词解释:细胞工程:是指以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传特性,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
细胞周期:通常将通过细胞分裂产生的新细胞的生长开始到下一次细胞分裂形成子细胞结束为止所经历的过程称为细胞周期。
细胞全能性:细胞具有该个体全部遗传的可能性,在一定条件下如受精卵一样,有发育成完整个体的固有潜在能力。
两层含义:细胞无论是体细胞还是生殖细胞,均具有该物种全部的遗传信息;每个细胞均具有发育成完整个体的潜在能力。
细胞分化:指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,,包括时间上和空间上的分化。
实质是基因的差异表达。
细胞脱分化:又称去分化,是指分化的细胞失去特有的结构和功能变成具有未分化细胞特性的过程,即分化细胞在适当的条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
可采用人工诱导技术诱导体细胞脱分化。
细胞再分化:指在离体条件下,无序生长的脱分化细胞在适当的条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。
事实上是基因选择性表达与修饰的人工调控的过程。
植物组织培养:是将植物器官,组织,细胞和原生质体等外植体在离体无菌条件下培养在人工培养基上,在适当的条件下诱发长成完整植株的一种技术。
植物激素:是植物自然状态下产生的对生长发育有显著作用的微量有机物,包括生长素家族、细胞分裂素家族、赤霉素、乙烯和脱落酸。
愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞。
植物组培中,指脱分化后的细胞经过细胞分裂,产生无组织结构,无明显极性的松散的细胞团。
体细胞胚:又叫胚状体,是指离体条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。
其发生途径是指体细胞在离体培养的过程中经历了胚胎发育过程,起源于非合子细胞。
发生实质是细胞再分化。
人工种子:含义为将植物离体培养产生的体细胞胚或芽包埋在含有营养成分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体,即人工种子。
生物专业细胞工程重点总结
细胞学说:一切细胞从单细胞到高等动植物都是由细胞组成的,细胞是生物体结构和功能组成单位。
细胞周期:从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程Go期细胞:暂时脱离细胞周期,不进行增殖,在适当刺激下可以重新进入细胞周期终端分化细胞:不可逆的脱离细胞周期,丧失分裂能力,但保持生理机械活动的细胞连续分裂细胞:在细胞周期中连续运转的细胞细胞分化:细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。
持家基因:微生物生存所必须的基因组织特异性基因:组织中专一性表达的基因脱分化:细胞脱离原状态,恢复到分生状态再分化:脱分化细胞在特定条件下再次开始新的分化发育过程,最终形成组织器官个体胚状体:体细胞胚离体条件下,没有经过受精过程,但经过胚胎发育过程所形成的胚的离似物植物体细胞杂交:又称植物原生质体杂交,是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生形成新的物种的技术贴壁细胞:是机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式,有机体的多数细胞在体外培养时必须贴附在培养瓶等支持物上才能生长悬浮性细胞:血液中的淋巴细胞、白细胞及某些肿瘤细胞等在体外培养时不需要贴附在支持物上,而需要悬浮状态原代培养:从供体获得细胞后的首次培养传代培养:由原培养瓶中分离稀释后传到新的培养瓶的过程接触抑制:在体外培养的贴壁细胞中,当两个细胞由于移动而相互靠近发生接触时由细胞接触而抑制细胞运动的现象密度抑制:细胞接触汇合后,虽发生接触抑制,但只要营养充足,仍然能够进行增殖分裂,但当细胞密度进一步增大,培养液中营养成分减少代谢产物增多时,则发生密度抑制导致细胞分裂停止细胞株:经单细胞增殖而成的,具有特殊性质和标志物的细胞群细胞系:原代培养物开始第一次传代培养后的细胞群体干细胞:一类能自我更新和有分化潜能的细胞多克隆抗体:由同一抗原的多种抗原决定簇刺激机体产生多种混杂在一起的单克隆抗体单克隆抗体:由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该刺激产生的抗体胞质体:去除了细胞核后的由膜包裹的无核细胞微细胞:由一条或几条染色体,外裹一薄层细胞质,由完整细胞包被的微小细胞1、粗面内质网:结合核糖体光面内质网:合成脂类3、细胞分化的基本特征:①分化过程不可逆②分化水平决定其生理状态③分化水平越高,其分化潜力越窄4、细胞分化的原因:①基因的选择性表达②细胞质的决定作用③细胞间的相互作用④环境对细胞分化的影响5、细胞全能性:①每个植物细胞都有其母体的全部遗传特性②每个细胞都可在特定条件下发育成与母体一样的植株6、多倍体育种:优点:根茎叶花果实较大,抗逆性强,产量高,代谢旺盛缺点:高度不育→减数分裂紊乱7、克隆方式:①胚胎细胞核移植②胚胎干细胞移植③胎儿成纤维细胞核移植④体细胞核移植8植物组织快速无性繁殖:①优势:快、无性②定义:利用离体培养技术,将来自优良植株的茎尖,叶芽、叶片、鳞片等器官组织和细胞进行离体培养在短期内获得大量遗传性状一致的植株③植物组织快速无性繁殖的途径:a、芽途径:顶芽或腋芽→完整植株b、器官发生途径:直接:外植体→不定芽或根→完整植株间接:外植体→愈伤组织→不定芽或根→完整植株c、胚状体途径:经过分化阶段区别:①区别于自然情况下所形成的无融合生殖胚,利于胚囊中的反足细胞,助细胞,珠心细胞形成的不定胚②区别于没有经过离体培养的合子胚,没有经过受精过程③一定经过胚胎发育过程,区别于器官发生途径直接途径:外植体→胚状体→完整植株间接途径:外植体→愈伤组织→胚状体→完整植株d、原球茎途径:外植体→兰球径→完整植株④快速无性繁殖的优势:a、保持杂合植株的优良特性b、可挽救濒临植物c、加速濒危植物的繁衍d、便于优秀种质材料的交换和贮运e、和植物脱病毒技术结合起来,可为生产上提供健康无毒植株9、植物脱病毒技术:脱毒方式原则:既能杀毒,又不损伤植物材料生物法:a、茎尖分生组织培养法①茎尖无维管素,胞间连丝不发达②茎尖组织进行细胞分裂,抑制病毒复制③植物激素的存在,抑制病毒复制b、珠心胚法:珠心胚不属于体细胞胚,不在离体条件下10、植物细胞的大规模培养:①培养方式:1悬浮细胞:成批培养、连续培养、半连续培养2固体培养:易将细胞核培养基分离(包埋法、吸附法)②意义:a、次生代谢产物的生产:药物、香料、色素中的酚类、生物碱、甾类、例如人参皂苷、长春花碱、紫草宁b、转基因植物细胞大规模培养以得药用蛋白质表皮生长因子、生长激素、干扰素11、原生质体的融合:①化学法:a、盐融合法b高钙高PH值法c、PEG法②物理法:电融合法12、多倍体育种方法:①生物法:a、远缘杂交b、体细胞杂交②物理法:a、温度休克法:略高于冷致死温度或略低于热致死温度处理材料,诱导产生多倍体的方法b、水静压法:较高水静压处理材料,抑制第一次或第二次卵裂中第二极体的放出c、化学法:秋水仙素抑制纺锤体的形成13、同源多倍体:无籽西瓜二倍体西瓜→(秋水仙素)四倍体*二倍体→三倍体14、为什么单倍体育种(单倍体优势):单倍体育种优点:①单倍体植物只有一套染色体,染色体上的每个基因都能显示相应的形状,是进行遗传分析的理想材料②单倍体植物细胞只有一套染色体,如将其染色体加倍即可获得纯合二倍体,可代替杂交育种过程中多次自交产生纯合品系过程,缩短育种年限缺点:①较二倍体植株各方面小②高度不育15、孤雄生殖:由精核在卵细胞内单独发育成单倍体①方式:a、花粉培养b、花药培养②过程:外植体的选择和消毒→组织培养单倍体植株→植株的鉴定→人工染色体加倍→组织培养→鉴定③花粉培养:优点:所得植株为单倍体植株缺点:组织培养难度大④花药培养:优点组织培养难度小缺点:花药壁、花丝干扰单倍体植株形成16、孤雌生殖:雌雄配子未经融合,由雌配子单独发育成种子的无性融合生殖①方式:a、物理法:高温、低温、射线b、化学法:马来酰肼苯乙酸二甲基亚砜c、生物法:延迟受粉异源花粉授粉②过程:外植体的选择消毒→组织培养单倍体植株→植物的鉴定→人工染色体加倍→组织培养→鉴定③单倍体鉴定:标记性状鉴定法标记在雄配子上没有标记17、外源基因导入受体方式:载体①农杆菌转化法:根瘤农杆菌的细胞中含有Ti质粒,Ti质粒上有一段DNA。
细胞工程--总结归纳
骨
红细胞
血小板
成骨细胞
骨细胞 骨髓脂肪细胞
骨骼肌肉干细胞 肝细胞干细胞
造血干细胞
• 骨髓移植捐献实际上就是移植捐献造血干细胞
• 20世纪五十年代,临床上开始用骨髓移植法来治疗血液 系统疾病供者要进行全麻,或者在他的骨上凿几个洞 • 八十年代末,自体外周血干细胞移植技术逐渐推广,能 提高治疗有效率和缩短疗程,效果令人满意 • 再次在脐带中直接采集胎儿的造血干细胞,与前两者相 比,脐血干细胞移植对HLA配型要求不高,不易受病毒或 肿瘤的污染
动物细胞工程
1.动物细胞培养技术
动物细胞培养基模拟体内什么环境?
动 物 细 胞 培 养 技 术
思考:
1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基 有何独特之处? 主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有:1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞 培养材料? 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞? 成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个 体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的 动物个体
单抗隆抗体的应用
①作为诊断试剂
用于体外诊断人类和动植物疾病及病原鉴定,纯度高、 特异性强,具有准确、高效、简易、快速的优点。
②定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病
利用同位素标记单抗,在特定组织成像
③用于治疗疾病和运载药物
制成生物导弹,将药物定向带到癌细胞所在的位置, 在原位杀死癌细胞,疗效高、副作用小。
免疫 经过免疫的 注射抗原 B淋巴细胞
细胞工程知识点总结 [2021年高考生物细胞与细胞工程知识点]
细胞工程知识点总结 [2021年高考生物细胞与细胞工程知识点] 2021年高考生物细胞与细胞工程知识点一
一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物,高
等植物与高等动物则是多细胞生物。
细胞可分为原核细胞、真核细胞两类,但也有人提出
应分为三类,即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。
研究细胞的
学科称为细胞生物学。
细胞体形极微,在显微镜下始能窥见,形状多种多样。
主要由细胞核与细胞质构成,
表面有细胞膜。
高等植物细胞膜外有细胞壁,细胞质中常有质体,体内有叶绿体和液泡,
还有线粒体。
动物细胞无细胞壁,细胞质中常有中心体,而高等植物细胞中则无。
细胞有
运动、营养和繁殖等机能。
细胞工程是生物工程的一个重要方面。
总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学
的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞
和组织培养。
当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染
色体操作及基因转移等方面。
通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株,并可以产生新的物种或品系。
2021年高考生物细胞与细胞工程知识点二
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绪论一.细胞工程(Cell Engineering):(定义)是应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的实验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。
分类(包括):(填空)植物细胞工程和动物细胞工程植物细胞工程:(定义)以植物细胞组织为基本单位,在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而改良品种或创造新物种,或加速繁殖植物新个体,或获得有用物质的过程。
动物细胞工程:(定义)是根据细胞生物学及工程学原理,定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或特种细胞产品的一门技术。
二.(填空)细胞学说的提出:施旺,施莱登(1838年)三.1902年,H aberlandt提出了细胞全能性学说。
第一章基本技术一.湿热灭菌:103-137kPa(121-126°C),15-30min.二.干热灭菌:利用烘箱加热到位60-180°C三.培养基基本成分:无机盐(大量元素,微量元素),有机成分(激素,植物生长调节剂),水常用有机成分:糖类(蔗糖),维生素,肌醇,腺嘌呤,氨基酸激素:生长素(根),细胞分裂素(芽),赤霉素(细胞伸长)四.基本培养基种类:MS,B5,N6,White(P26)(1)高盐平衡培养基:MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基和ER培养基。
特点:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性;营养丰富;微量元素种类全,浓度高。
(2)高硝态氮培养基:B5培养基,N6培养基及SH培养基等。
特点:硝酸钾的含量高,氨态氮的含量低,含有较高的盐酸硫胺素。
(3)中盐培养基:H培养基、Nitsch培养基、Miller培养基和Blaydes培养基。
特点:大量元素无机盐约为MS的一般,微量元素种类减少而含量增高,维生素种类比MS多。
(4)低盐培养基:White培养基、WS培养基、HE培养基、改良Nitsch培养基及HB培养基等。
特点:无机盐含量低,有机成分含量相对也很低。
五.培养基配制:1000ml母液需100ml大量元素(10*),10ml微量元素(100*)……1 培养基母液配制无机盐按大量元素、微量元素和铁盐3部分分别配制。
大量元素一般配制成(10-20)×母液,微量元素和铁盐则配制成(100-200)×母液。
有机成分最好单独配制。
配好的母液需贮存于2-4℃冰箱中。
植物激素使用的浓度很低,因此,一般分别配制成0.1-1mg/L浓度的溶液。
2 培养基制备制备培养基时是根据实际需要配制,首先按大量元素、微量元素、铁盐及有机成分的顺序,依次吸取各母液的需要量,加入一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中,再加入适当体积的蒸馏水,并称取相应量的蔗糖放入其中溶解,调节pH值,加入琼脂,加热使其完全融化,最后用蒸馏水定容并分装。
六.外植体:指用于离体培养的活的植物组织,器官等材料。
三种来源:1.生长在自然环境下的植物 2.在温室控制环境条件下生长的植物 3.无菌环境下培养的植物(最优)。
第二章细胞全能性与形态发生一.细胞全能性:(定义)一个细胞所具有的产生完整个体的固有能力称之为细胞的全能性。
细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的,在大多数情况下,脱分化是细胞全能性表达的前提,再分化是细胞全能性表达的最终体现。
二.细胞脱分化(cell dedifferentiation ):(定义)培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。
分化细胞脱分化分生细胞再分化分化细胞静止细胞启动分裂是分化细胞成功脱分化的重要标志。
蛋白体的出现和细胞质密度增加被认为是细胞开始脱分化的标志。
三.细胞分化(Differentiation):(定义)是指导致细胞形成不同结构,引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。
四.极性(polarity):(定义)是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。
五.激素是离体培养条件下调控细胞脱分化和再分化的主要因素。
先用生长素处理,后用细胞分裂素处理,有利于细胞分裂而不利于细胞分化;反之,则有利于细胞分化。
如果两者同时处理,则可促使分化频率的提高。
六.(简答)植物的离体器官发生:是指培养条件下的组织或细胞团(愈伤组织)分化形成不定根、不定芽等器官的过程。
不定根、不定芽:是指在一些非正常发生部位形成的根或芽,离体培养中通常是指从愈伤组织上发生的根或芽。
器官发生方式:1)先芽后根:先分化芽,芽形成后,在芽的基部长出根进而形成完整植株。
2)先根后芽:先分化根,再在根上产生不定芽进而形成完整植株。
3)在愈伤组织的不同部位形成芽和根,再通过维管组织的联系形成完整植株。
七.愈伤组织:实质上是一团无序生长的细胞,这些细胞大多处于随机分裂的状态。
(器官、组织培养时细胞分裂首先发生在伤口部位)八.体细胞胚或胚状体(定义):离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物(不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞),统称为体细胞胚或胚状体。
界定:1)体细胞胚是离体培养的产物,只限于离体培养范围使用,以区别于无融合生殖胚。
2)体细胞胚起源于非合子细胞,以区别于合子胚。
3)体细胞经过了胚胎发育过程,以区别于离体培养中器官发生形成个体的途径。
研究体细胞胚的模式植物:胡萝卜。
九.体细胞胚的形成途径:(简答)1.体细胞胚从外植体上直接发生:诱导阶段;胚胎发育阶段2.间接发生:A.经过愈伤组织的体细胞胚的形成:诱导愈伤组织的形成→诱导愈伤组织胚性化→体细胞胚的形成 2,4-D(浓度高)2,4-D(浓度低) 2,4-D(浓度更低)B.经过悬浮细胞的体细胞胚的形成:诱导愈伤组织的形成→诱导愈伤组织胚性化→悬浮培养的胚性细胞团→体细胞胚的形成。
十.植株再生的两种方式:器官发生,体细胞胚发生。
第三章体细胞遗传变异一.体细胞无性系:由任何形式的细胞培养所产生的植株统称为体细胞无性系。
体细胞无性系变异:由体细胞无性系表现出来的变异。
从对生物遗传的影响而言,细胞工程技术本身即包含了双重性:遗传稳定性和变异性。
二.离体培养中的遗传与变异特点:遗传稳定性;变异的普遍性;变异的局限性;嵌合性三.非遗传变异四.体细胞无性系变异的诱导与选择:(愈伤组织>再生植株(变异))诱变起始材料的选择原则:目标性状的可行性;试验植物的细胞培养技术水平;适当的细胞类型七.设计实验:培养抗纹枯病的水稻——突变体的选择:(1)直接选择(2)间接选择:第四章 植物组织细胞培养外遗传变异 生理适应性变异基因表达 (生长素自养型变)一.植物脱毒:利用植物组织培养技术脱出植物细胞中侵染的病毒,生产健康的繁殖材料。
二.脱毒基本原理:病毒在植物体内的分布具有不均匀性。
三.脱毒苗制备流程:索取材料的病毒检测外植体的选择及预处理茎尖分生组织培养再生植株脱毒效果检测脱毒苗的保存与繁殖四.(填空、简答)培养物的增殖方式:1.腋芽增殖2.不定芽增殖3.体细胞胚增殖4.愈伤组织增殖五.花药培养(定义):把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程。
从培养类型来讲,花药培养仍然属于器官培养的范畴。
花粉培养(定义):又叫小孢子培养,是从花药中分离除花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程。
花粉培养属于细胞培养的范畴。
花粉培养取材时期:四分体小孢子时期;花药培养取材时期:单核晚期,双核早期。
六.花药培养的基本程序:外植体选择—外植体预处理—外植体消毒—剥取花药—接种—诱导培养—分化培养。
七.花粉分离方法:(1)机械分离法:将花药置于盛有少量液体培养基或与培养基等渗的蔗糖溶液的培养皿中,用平头的玻璃棒或注射器内管轻轻挤压花药,使其散出花粉。
(2)花药漂浮培养自然释放法:将经过一定时间低温处理的花药,接种于液体培养基中,培养数天后,花药开裂,释放出花粉粒。
(3)磁拌法:将花药接种于含有液体培养基的三角瓶中,然后放入一根磁棒,置于磁力搅拌器上,低速转至花药呈透明状。
八.根据在培养中所取的外植体的部位不同,植物胚胎培养包括:胚培养,胚乳培养,胚珠培养,子房培养。
九.幼胚培养的关键技术:取材时期:多为球形胚至鱼雷形胚阶段。
十.幼胚离体培养的常见的生长发育方式:胚性发育,早熟萌发,愈伤组织。
十一.悬浮培养:是细胞培养的基本方法,是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
应用:1.愈伤组织诱导:要求:松散性好、增殖快、再生能力强。
其外观一般是色泽鲜艳的乳白或淡黄色,呈细小颗粒状,疏松易碎。
诱导愈伤组织选择适宜的外植体:幼胚、胚轴、子叶是最常使用的外植体。
诱导愈伤组织选择适宜的培养基:较高浓度激素浓度;必要的附加物质。
2.悬浮系的建立与继代培养:一个成功的悬浮细胞培养体系必须满足三个条件(简答):A.悬浮培养物分散性良好,细胞团较小,一般在30-50个细胞以下,在实际培养中很少会有完全由单细胞组成的植物细胞悬浮体系。
B.均一性好,细胞形状和细胞团大小大致相同。
悬浮体系外观为大小均一的小颗粒,培养基清澈透亮,细胞色泽呈鲜艳的乳白色或淡黄色。
C.细胞生长迅速,悬浮细胞的生长量一般2-3天甚至更短时间便可增加一倍。
3.悬浮细胞的生长动态:P89图5-6 (填空——五个时期)延滞期,对数生长期,直线生长期,减慢期,静止期。
(在减慢期进行继代培养)4.悬浮培养细胞的同步化:细胞同步化:同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
(填空)同步化的方法:分选法;饥饿法;抑制剂法;低温法P91十二。
单细胞培养方法:1、平板培养 2、看护培养 3、微室培养 4、双层滤纸植板培养5、悬浮培养(简答)P86十三。
培养条件下的植物细胞次生产物积累特性:1.生长偶联型:产物合成与细胞生长成正比。
如长春花碱、烟碱的合成 2.中间型:产物仅在细胞生长下降时合成,细胞处于指数生长期或停止生长产物都不合成。
如蒽醌类物质合成的植物细胞 3.非生长偶联型:产物合成在细胞生长停止以后。
如紫草宁的合成。
第五章原生质体培养及杂交一.原生质体(protoplast):除去细胞壁的裸露细胞。
二.原生质体的纯化方法:(填空)1、沉降法:甘露醇作渗透压调节剂,低速离心,原生质体沉降于管底。
2、漂浮法:蔗糖作渗透压调节剂,离心,原生质体漂浮于溶液表面。
3、梯度离心法:利用比重不同的溶液,离心,原生质体处在两液相的界面之间。
三.原生质体培养方法:(P118)1。
液体浅层培养2。
固体平板培养3。
固液双层培养4.琼脂糖珠培养(摇床震荡)5.悬滴培养法:在培养皿盖上滴悬浮液,皿底加入培养液,皿盖翻过来盖于皿底上,封口培养。