菠萝蛋白酶

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菠萝蛋白酶分离方法(精)

• 工艺流程如图所示。超滤法生产工艺和操作比较复杂，且设备一次性投资大。超滤浓缩后的浓缩液若再用高岭土吸附法或者单宁沉淀法提取，可大大节约其他辅助原料的用量，总生产成本减少，且产品质量好，纯度高，酶活力高，酶活总回收率高，经济效益明显比传统工艺好。超滤浓缩后的浓缩液用有机溶剂沉淀法提取精酶，由于需要低温使生产成本上升，但产品质量、纯度、酶活都优于前者，是菠萝蛋白酶升级换代的新工艺。
菠萝蛋白酶制备方法及比较
工业生产上对菠萝蛋白酶的制备主要是从菠萝的下脚料中提取，制备工艺有高岭土吸附法、单宁沉淀法、盐析法和超滤法等。
• 比较:高岭土吸附法获得的菠萝蛋白酶虽然纯度较高，酶活力在410×10 U／g以上，但工艺流程长，原料消耗多，酶活总回收率低，会对环境有污染； • 单宁沉淀法比高岭土法简单，原料消耗少，酶活回收率较低，产品酶活力在315×10 －410×10 U／g，会对环境造成污染； • 盐析法获得的菠萝蛋白酶活性较低，纯度与药用要求相差甚远
• 超滤法能有效分离提取菠萝蛋白酶。从超滤法提取菠萝蛋白酶的工艺流程上看，其操作步骤简单，并且该法具有无相变、低温、能耗少、活力损失小、操作简单等特点，应用于菠萝蛋白酶的浓缩和分离，不仅能保护其活性，降低生产成本，使用的有机溶剂可回收再生产，基本上没有废物排放，而且超滤透过液还可用作饮料添加剂，可以达到清洁生产的要求；另外，超滤法分离得到的菠萝蛋白酶质量好，纯度高，能达到医药级水平。
菠萝蛋白酶的提取：称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r ／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、 0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r ／min。离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将 1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以

菠萝蛋白酶

菠萝蛋白酶的应用
三、菠萝蛋白酶的应用前景
菠萝蛋白酶的应用已有很长的历史,其安全性已受到时间的考验,对当前危害人类健康的疾病,如心血管疾病、癌症等,菠萝蛋白酶已表现出其应用潜力。值得一提的是,菠萝蛋白酶制品大多数是各种成分的混合物,而且,其组成会因不同的品种、产地及提取方法而产生一定的差异,因此,有必要进一步确定真正起作用的具体成份,选择适当的提取工艺,得到专一性更强的药物。此外,菠萝蛋白酶作为生物活性物质,易受有关因素的影响而失活,如何在生产、储存、运输中保存所需酶的活性,如何提高菠萝蛋白酶的生物利用度,这些都是需要进一步研究的课题。
菠萝蛋白酶的应用
一些含菠萝蛋白酶的药物
菠萝蛋白酶的应用
二、菠萝蛋白酶在食品领域的应用
在食品工业中菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂, 能分解蛋白质、肽、酯和酰胺等, 可用于肉质嫩化、水解蛋白、啤酒澄清、干酪生产等。菠萝蛋白酶对含酪氨酸较多的蛋白质有很强的水解能力, 用于牛肉加工中的嫩化过程, 抑制血小板聚集,加速纤维蛋白原的分解菠萝蛋白酶能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风,缓解心绞痛症状,缓和动脉收缩,加速纤维蛋白原的分解。因此,它作为蛋白水解酶对心血管疾病的防治也是有益的。Metzig等(1999)研究结果表明,菠萝蛋白酶在体外可以减少人体血小板聚集,减少血小板在牛内皮细胞的吸附和大鼠体内血栓的形成。这些结果解释了临床上使用菠萝蛋白酶治疗血栓及相关疾病的效果。
菠萝蛋白酶常见的工业提取方法
3.超滤法浓缩有机溶剂提取工艺流程：
菠萝蛋白酶常见的工业提取方法
超滤法浓缩有机溶剂提取生产工艺和操作比上述两种方法复杂,超滤膜的使用、清洗、保护操作技术含量高,对工人素质要求高;设备一次性投资大, 生产成本上升。但超滤透过液可作饮料添加剂,有机溶剂可回收再生产,基本上没有废物排放,可以达到清洁生产的要求;加上酶质量好、纯度高、回收率高、产品酶活力高,达到医药级,综合经济效益分析与高岭土吸附法相当,但酶质量远优于后者。

菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶

• 常用方法 ①吸附——利用固体吸附剂将酶吸附在其表面 ②载体交联——采用双功能试剂使酶分子之间或酶分子与固相载体之间发生交联作用 ③包埋法——将酶或含酶菌体包埋在多孔载体中
三、菠萝酶和木瓜酶的市场现状
木瓜蛋白酶的生产和销售相对来说有较长的历史和较多的经验，而菠萝蛋白酶的生产则起步较晚，两者都有很大的发展空间。
国内酶应用水平低，销售的大部分是粗制酶，精制酶大部分销往国外，国外市场潜力较大。
该类企业存在的问题 ➢ 规模较小，资金有限 ➢ 生产企业精品意识差，核心竞争力低 ➢ 国际市场劲敌多，如印度、泰国，其蛋白酶产量大
，品质好，品牌较响，市场份额大。
四、国内产业分布与发展情况
• 木瓜和菠萝在我国主要分布于广东、海南、广西、云南与福建等热带省区，而木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的厂家主要集中在广东和广西。
• 但超滤法浓缩有机溶剂提取生产工艺和操作比上述两种方法复杂
• 因此，建议：若超滤浓缩液不用有机溶剂提取工艺, 而采用高岭土法或单宁法提取, 可大大节约其他辅助原料, 总生产成本减少, 且产品酶活力提高, 酶活总回收率也有所提高 ; 对环境造成污染程度减小，经济效益明显比传统工艺好。
菠萝蛋白酶的提取新工艺
广西集中于南宁地区，生产经验较为丰富，销售渠道较为成熟资源优势使其成为全国产量最大的地区，约占60%市场份额
广东
蛋白酶工厂起步较晚，发展却比较迅速，主要集中在徐闻和广州。徐闻菠萝产量大，但经济不发达，主要生产粗酶广州酶工厂设立于郊区，交通便利，经济发达，销售渠道广
五、工厂发展方向
一、增加技术投资和设备投资，提高酶的纯化技术和固定化、微胶囊化技术，以高质量的酶产品占领市场先机。
• [2]王平诸孙君社李魁. 菠萝蛋白酶三种生产工艺的比较 [J].河南化工， 2002(7)：1-3

菠萝蛋白酶

四、前景

菠萝蛋白酶的应用已有很长的历史，随着提取纯化技术的进步，它将有更广泛的应用。我国菠萝资源丰富，年产菠萝100万吨以上，每年都有大量的菠萝皮、茎被浪费掉。同时，我同对菠萝蛋白酶的需求量逐年增多，特别是高活性的菠萝蛋白酶。因而，对菠萝蛋白酶分离纯化技术进行深入研究，提取高质量的菠萝蛋白酶具有重要的实用价值。
三、菠萝蛋白酶在食品加工中的应用

肉类：菠萝蛋白酶将肉类蛋白质的大分子蛋白质水解为易吸收的小分子氨基酸和蛋白质，令肌肉肌丝和筋腰丝断裂，使肉类变得嫩滑，使人体食用后易于消化吸收,可广泛地应用于肉制品的精加工。

酸豆乳:利用菠萝蛋白酶的蛋白水解活性，将豆乳中的蛋白质部分水解成为功能性多肽，再添加发酵剂制成酸豆乳。顾仁勇等采用正交实验法，以蛋白质水解度为评价指标，确定最佳酶解条件为：菠萝汁用量15％；pH=7.0；温度45℃；时间70min。
2.菠萝蛋白酶的理化性质

菠萝蛋白酶的分子量为30000～33000，酶液的最大吸收波长为280nm，0.051%浓度的酶液在280nm的光吸收值达0.984%。分子中有4个 N-乙酰化的氨基己糖，含糖 2.1%，分子中含有285个氨基酸残基，含氮量为15.88%。一般认为，菠萝蛋白酶无毒、无副作用，少数人会对菠萝蛋白酶起过敏反应及轻微的肠胃反应。

溶解：将粗酶放入溶解罐中，加入10倍水。用 NaOH溶液调pH值至7.0～7.5，搅拌使其溶解，过滤除杂，收集滤液。沉淀、干燥：在搅拌下用1:3的盐酸凋节上述滤液的pH值至4.0，静置1小时使酶析出，用离心机分离出沉淀物，冷冻真空干燥或减压干燥即得菠萝蛋白酶精品。
2、单宁沉淀法

菠萝蛋白酶结构

菠萝蛋白酶结构
【实用版】
目录
1.菠萝蛋白酶的概述
2.菠萝蛋白酶的结构
3.菠萝蛋白酶的应用领域
4.菠萝蛋白酶的使用方法
5.菠萝蛋白酶的安全性和注意事项
正文
菠萝蛋白酶是一种从菠萝植物中提取的蛋白质水解酶，其分子量为33000，等电点为 9.55。

这种酶广泛存在于菠萝果实、芽、叶、茎中，并最早在 1957 年作为一种治疗性成分被发现。

菠萝蛋白酶不仅具有蛋白水解酶系，还含有磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。

菠萝蛋白酶的结构是由分子质量 33000 酪素、血红蛋白、baee 的最佳 ph 值为 68，而明胶则为 50。

重金属可以抑制酶的活性。

在水中稍溶，在乙醇，丙酮，氯仿和乙醚中不溶。

其在碱基或芳香族氨基酸的羧基侧优先水解肽链，选择性水解纤维蛋白，可分解肌纤维，但对纤维蛋白原不敏感。

菠萝蛋白酶的应用领域包括啤酒澄清、药效助消化、消炎消肿等。

在食品、医药及生物等行业都有广泛的应用。

使用方法为将菠萝蛋白酶添加到需要澄清的啤酒中，酶解蛋白质，使啤酒澄清。

对于助消化方面，菠萝蛋白酶可在胃里分解蛋白质，帮助人体对蛋白质食物的消化和吸收。

对于消炎消肿方面，菠萝蛋白酶可以抑制炎症反应，缓解肿胀。

使用菠萝蛋白酶时需要注意其安全性。

虽然菠萝蛋白酶是一种天然的、
无毒、无副作用的酶，但是在使用时仍需注意其用量，过量使用可能会引起不适。

菠萝蛋白酶最佳温度

菠萝蛋白酶最佳温度菠萝蛋白酶是一种存在于菠萝中的酶，它在菠萝成熟过程中发挥着重要的作用。

菠萝蛋白酶最佳温度是指在哪个温度下，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。

菠萝蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶，其存在于菠萝的果肉和果汁中。

菠萝蛋白酶主要由两种蛋白质组成，分别是菠萝蛋白酶A和菠萝蛋白酶B。

这两种酶在酸性条件下最为活跃，而在碱性条件下则会失去活性。

菠萝蛋白酶的最佳温度一般在50-60摄氏度之间。

在这个温度范围内，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。

当温度低于50摄氏度时，菠萝蛋白酶的活性会显著降低，酶的催化效率也会明显下降。

而当温度超过60摄氏度时，菠萝蛋白酶的蛋白结构会发生变性，使其失去催化活性。

菠萝蛋白酶的最佳温度与菠萝生长环境有关。

菠萝生长在热带和亚热带地区，这些地区的气温较高，因此菠萝蛋白酶的最佳温度也相对较高。

菠萝在生长过程中，果实会经历成熟的过程，而菠萝蛋白酶在果实成熟过程中发挥着重要的作用。

菠萝蛋白酶在果实成熟过程中的作用是将果肉中的蛋白质水解为小分子肽和氨基酸，使果肉变得更加软化和甜美。

这个过程中，菠萝蛋白酶的最佳温度能够保证酶的催化效率最高，使果肉的变软和甜味的形成达到最佳状态。

菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关。

菠萝蛋白酶的结构中含有许多氨基酸残基，这些氨基酸残基的空间构型和电荷状态对酶的活性起着关键作用。

在最佳温度下，菠萝蛋白酶的氨基酸残基的构型和电荷状态能够达到最佳状态，从而使酶的催化效率最高。

除了最佳温度外，菠萝蛋白酶的活性还受到其他因素的影响，比如pH值、金属离子和抑制剂等。

在不同的pH值下，菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所不同。

在不同的金属离子存在下，菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所变化。

而一些特定的抑制剂则可以抑制菠萝蛋白酶的活性。

总结起来，菠萝蛋白酶的最佳温度是在50-60摄氏度之间。

这个温度范围内，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高，果肉变得更加软化和甜美。

菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关，同时也受到其他因素的影响。

菠萝蛋白酶

菠萝蛋白酶
酶和微生物制剂
01 化合物简介
03 安全信息 05 药典标准
目录
02 生产方法 04 应用 06 化合物相关药品说明
菠萝蛋白酶又称菠萝酶。由菠萝汁、皮等提取的巯基蛋白酶。浅黄色无定形粉末，微有特异臭。分子量。对酪蛋白、血红蛋白、BAEE的最适pH值是6～8，对明胶是pH值5.0。酶活性受重金属抑制。略溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿和乙醚。它优先水解碱性氨基酸(例如精氨酸)或芳香族氨基酸(例如苯丙氨酸、酪氨酸)的羧基侧上的肽链，选择性水解纤维蛋白，可分解肌纤维，而对纤维蛋白原作用微弱。可用于啤酒澄清、药用助消化和抗炎消肿。
精密量取供试品溶液1.0ml，置具塞试管(15mm×130mm)中，于(37±0.5)℃水浴预热5分钟，精密加入 (37±0.5)℃预热的底物溶液(取硅胶干燥器中干燥至恒重的酪蛋白0.6g，精密称定，置烧杯中，加0.05mol/L磷酸氢二钠溶液80ml，水浴中加热溶解，放冷，用1mol/L盐酸调节pH值至7.0，转移到100ml量瓶中，加水至刻度，临用新配)5.0ml，立即振摇，置(37±0.5)℃水浴中准确反应10分钟后，加三氯醋酸溶液(取三氯醋酸1.8g，无水醋酸钠2.99g，冰醋酸液1.9ml，加水使溶解并稀释至100ml)5.0ml，振摇，于(37±0.5)℃水浴中准确放置40 分钟，用干燥滤纸滤过，取续滤液，在2小时内，照分光光度法(中国药典2015年版二部附录Ⅳ A)，以水为空白，在275nm的波长处测定吸收度A，再精密量取供试品溶液1.0ml，加上述三氯醋酸溶液5.0ml，振摇，精密加入底物溶液5.0ml，同法操作，测定吸收度A。
化合物简介
基本信息物化性质
毒性化学性质
中文名称:菠萝蛋白酶中文别名：菠萝蛋白酶;菠萝酶;菠罗蛋白酶;菠萝蛋白酶 20万单位;BROME LAINE菠萝蛋白酶英文名称: Bromelain 英文别名： STEM BROMELAIN;3.4.22.32;BROMELAIN;BROMELAIN PINEAPPLE;BROMELIN;EC 3.4.22.1;EC 3.4.22.32;EC 3.4.22.4 CAS号: 9001-00-7 分子量:约 EINECS号:253-387-5

菠萝蛋白酶提取

菠萝蛋白酶提取一、实验目的：1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取技术二、实验原理：菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000 ，等电点为9.55 。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

结果表明。

提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0．2％，提取时最适pH值为6．5～8．5左右，而最适提取温度为60℃。

菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化，啤酒澄清，还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中小面积深度烧伤的治疗。

三、实验步骤操作要点：菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。

上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。

虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r／min。

离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。

分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以4 000 r／min离心7 min，倒掉上清废液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。

把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中，加0．5％乙酸锌溶液20 min，搅拌均匀，静止5 min，加0．06％抗坏血酸溶液30 ml，搅匀，静止5 rain，加1．5％氯化钠溶液20 ml，搅匀，静止5 min，最后再加0．5％EDTA溶液20 ml，搅匀，静止5min，以4 000 r／min离心7 min，把上清废液倒掉，得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。

菠萝蛋白酶

医药、保健品业的应用
抑制肿瘤细胞的生长对心血管疾病的防治用于烧伤脱痂消炎作用增进药物吸收预防和治疗单胃动物的腹泻
美容化妆品业的应用
菠萝蛋白酶具有嫩肤、美白去斑的优异功效。基本作用原理：菠萝蛋白酶可作用于人体皮肤上的老化角质层，促使其退化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减少因日晒引起的皮肤色深现象。使皮肤保养呈现良好的白嫩状态。
作用条件
最佳温度：失活温度：最佳PH值：失活PH值：推荐用量: 温度范围：作用PH值: 53±1℃ ≥65℃ 5.0～8.0 小于3.0和大与9.5 0.05～0.1%对蛋白质计 50～60℃ 6.0～9.0
提取工艺
目前，菠萝蛋白酶主要从菠萝皮及果实中提取。常用方法有高岭土吸附法、单宁沉淀法和超滤法等。
饲料业的应用
将菠萝蛋白酶加入饲料配方或直接混合在饲料中，可以大大提高蛋白质的利用率和转化率，并能开发更广的蛋白源，从而降低饲料成本。
结语
菠萝蛋白酶在各个行业的应用越来越受到重视,尤其在食品工业、医药上尤显示其重要性。但就日前,国内菠萝蛋白酶的生产还未能满足巨大的需求量。因而,对菠萝蛋白酶分离纯化技术进行深入研究,提取高质量的菠萝蛋白酶具有重要的实用价值。
结果处理及分析
得率w的计算：
菠萝下脚料的质量M1
干酶的质量M2 W=M2/M1×100%
注意事项
高岭土预处理需适宜，温度约为7080℃，偏酸性。提取粗酶过程中应保持温度适宜，防止酶失活。实验过程中酸碱调节应准确，准确度越高，提取酶的浓度越高。盐析尽量完全，否则提取酶中杂质较多。
溶解：将粗品放入溶解罐中，加入10倍量
的自来水，用16%的氢氧化钠溶液调节pH值至7.0-7.5，搅拌使其溶解，然后过滤，出去杂质，收集滤液。

菠萝中提取蛋白酶

菠萝中提取菠萝蛋白酶
分离纯化第二组
背景知识菠萝蛋白酶是从菠萝皮和菠萝肉中提取到的一种蛋白酶，菠萝蛋白酶的生产可解决菠萝产业中大量废料被丢弃造成的环境污染和资源浪费问题，还可使菠萝产品高值化利用。由于菠萝蛋白酶对环境条件的敏感性，在其生产过程中活性易失，使得生产效率降低。
实验所需材料与仪器
实验用菠萝采自超市,以7～9分成熟为标准菠萝肉各部分分别经打碎、榨汁、纱布粗滤、离心(4 000 r/ min ,10 min) 后得澄清液,存放于冰箱中备用 5%柠檬酸钠维生素c 单宁 0.1%EDTA溶液 1.5%氯化钠溶液 1%酪蛋白溶液 1mol/L氢氧化钠溶液 0.05mol/L磷酸缓冲液（溶解磷酸二氢钾，加氢氧化钾调PH至7.0）激活剂（PH7.0，0.05mol/L磷酸缓冲液，内含 15mmol/L硫代硫酸钠和6mmol/LEDTA-2Na,现配现用）榨汁机、离心机、分光光度计、水浴锅
注意事项
菠萝蛋白酶易受热失活，应低温短时生产，一般在0℃左右进行。某些化学药品和金属离子易引起菠萝蛋白酶失活，生产过程忌碱、忌强酸作用，勿与铁、铜等重金属接触。菠萝蛋白酶是一种胶体，生产过程中易产生气泡造成损失，所以生产过程应注意操作。
THE END 谢谢欣赏！
7 1.0 0 0 4 0.582
8 0 1.0 0 4 0.140 （稀释5 倍）
磷酸缓冲液 1.0 考马斯亮蓝吸光度A 0 4
以吸光度为纵坐标，以吸光度为纵坐标，标准蛋白质量为横坐标作图
菠萝蛋白酶活力的测定
1 试管号 2 3 4 5 1、取酶制品溶解于0.05mol/L磷酸缓冲液（PH7.0)至10ml,离心得上清液； 2、取5支试管，分别标号1、2、3、 4、5，各加1ml溶液酶和0.9m激活剂； 3、另取5支试管，分别对应标号A、 B、C、D、E，各加1ml缓冲液和 0.9ml激活剂； 4、将10支试管置于37℃水浴； 5、然后按左表操作

菠萝中的菠萝蛋白酶

菠萝中的菠萝蛋白酶菠萝中的菠萝蛋白酶1、抑制血小板聚集；2、溶解纤维蛋白；3、消炎；4、抗肿瘤；5、调节细胞因子和免疫；6、对皮肤清创的特性；7、促进其它药物的吸收；8、溶解粘液；9、助消化；1、0促进伤口愈合；11、改善心血管循环系统。

菠萝蛋白酶口服易于吸收，有可靠的证据表明大剂量给药可以提高治疗效果。

虽然所有的相关机理还没有完全搞清楚，但菠萝蛋白酶已被证明是一种安全有效的药物。

在大鼠试验中，服用一定剂量的菠萝蛋白酶会降低血清纤维蛋白原水平，高浓度的菠萝蛋白酶维可明显延长凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血酶时间(APTT)。

一定剂量下的菠萝蛋白酶通过刺激ADP、肾上腺素、前列腺素前体，可加强抑制血小板聚集的作用。

在体内和体外，菠萝蛋白酶都是一种有效的纤维蛋白溶解剂在消炎试验中，菠萝蛋白酶和强的松有相似的消炎作用。

具有免疫刺激作用曾有专利认为菠萝蛋白酶的某一组分可用于治疗免疫系统受抑制的病症或作为疫苗佐剂。

菠萝蛋白酶具有免疫刺激作用，血液中丙种球蛋白缺乏症病人的吞噬细胞表现出对这种刺激特别敏感。

体内外的研究表明，通过对辅助细胞的刺激作用和对T细胞的直接抑制反应，菠萝蛋白酶可以增强和抑制T细胞的免疫反应。

抑制毒素分泌实验证明菠萝蛋白酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素、霍乱毒素及热稳定毒素的分泌效应。

用于烧伤脱痂菠萝蛋白酶能选择性地除去死皮，使新皮移植得以尽早进行。

动物实验证明，菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。

局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶的效果。

用其制备的菠萝蛋白酶脱痂制剂治疗深2度和3度烧伤，可在3-4小时完成脱痂。

全过程无需麻醉，脱痂十分彻底，对于功能部位的烧伤治疗具有更重要的意义。

消炎作用菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿（包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤），能在体外激活鼠巨噬细胞和自然杀伤（NK）细胞。

因此，对于免疫缺失的个体，菠萝蛋白酶具有激活炎症反应的潜力。

菠萝蛋白酶生产工艺

菠萝蛋白酶生产工艺
菠萝蛋白酶是一种能够降解蛋白质的酶，广泛应用于食品、酒类、制酶等行业中。

下面我将介绍菠萝蛋白酶的生产工艺。

菠萝蛋白酶的生产工艺主要包括以下几个步骤：原料准备、发酵、分离提纯和产品包装。

首先是原料准备。

菠萝蛋白酶的原料主要是新鲜菠萝。

首先将新鲜菠萝去皮、去核，然后用搅拌机将其搅碎成糊状物。

得到的菠萝糊经浸泡蛋白酶活性稳定剂，以提高蛋白酶的活性和稳定性。

接下来是发酵。

将经过处理的菠萝糊加入到发酵罐中，并加入适量的发酵基质，如糖、氨基酸等。

在适当的温度和pH条件下，接种适量的菌种，进行发酵培养。

发酵过程中需要控制好温度、pH值和搅拌速度等参数，以促进菌种生长和蛋白酶的产生。

发酵完成后，进行分离提纯。

首先对发酵液进行离心，分离出菠萝蛋白酶。

然后采用酒精沉淀、超滤、析出等一系列分离纯化工艺，去除杂质并提高蛋白酶的纯度。

最后是产品包装。

将提纯后的菠萝蛋白酶经过过滤、浓缩等处理，最终得到浓缩度适宜的酶液。

将酶液灌装到容器中，然后进行杀菌、封装等工序，最终得到成品。

总的来说，菠萝蛋白酶的生产工艺是一个较为复杂的过程，需
要进行原料处理、发酵、分离提纯和产品包装等多个步骤。

不同的厂家和工艺流程可能有所不同，但一般都遵循以上的基本流程。

通过科学合理的工艺控制，可以获得高活性和纯度的菠萝蛋白酶产品。

菠萝蛋白酶

时, 酶反应速度下降分别不超过4% 和12% 。
菠萝蛋白酶的性质：
综上所述，菠萝蛋白酶有一个较高的最适的反应温度，较广的酶反应pH，一般金属盐NaCl、kCl对酶的反应影响不大,MgCl、 CaCl在高浓度下对酶有一定程度的抑制作用，在低浓度下影响不明显。
菠萝蛋白酶的提取方法：
1、高岭土吸附法
抑制血小板聚集加速纤维蛋白原的分解：
对心血管疾病的防治：菠萝蛋白酶能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风，缓解心绞痛症状，缓和动脉收缩，加速纤维蛋白原的分解。
抑制毒素分泌作用：
试验结果证明，菠萝蛋白酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素(LI)、霍乱毒素(CT)及热稳定毒素(ST)的分泌效应。
预防和治疗动物腹泻：
仔猪大肠杆菌性腹泻是养猪场最常见的疾病之一，而肠毒源性大肠杆是引起仔猪腹泻的主要病菌之一。菠萝蛋白酶防治仔猪腹泻可能通过以下几个方面实现：(1) 抗炎作用；(2) 抑制细菌毒素分泌作用；(3) 增加抗生素吸收作用； (4) 细胞因子和免疫Βιβλιοθήκη 节作用；(5)促进伤口愈合作用。
菠萝蛋白酶的提取及医药运用
主要内容
菠萝蛋白酶的简介菠萝蛋白酶的性质
菠萝蛋白酶的提取方法
菠萝蛋白酶在医药中的应用应用前景
简介
菠萝蛋酶:(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
简介
于在1975年，发现菠萝蛋白酶可作为一种治疗性成分。它的纯品是一种糖蛋白，其糖分子结构有以下两种：
菠萝蛋白酶的性质是什么呢？
1.温度的影响菠萝蛋白酶有一个较高的最适反应温度, 介于55～60℃, 温度再升高, 酶的热失活增强, 2.反应速度下降 pH的影响菠萝蛋白酶的最适pH 在6.5～7.5, 在7. 1 附近达到最大值。在酸性环境下酶反应速度直线下 3金属离子的影响滑, 在碱性环境下则有一个较广的应用区间。金属离子(如NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2 ) 对酶当pH由5.6升到7.1时, 酶反应速度提高了14.6%，反应均有影响。随着浓度的增加, NaCl、KCl对酶较稳定的pH 在3.5～4.5, 在3.9附近效果最佳酶反应影响不大,而MgCl2 和CaCl2 对酶有一定 (章佩芬等, 2003)。菠萝蛋白酶的最适pH为7.1。程度的抑制作用。但是, 当盐浓度不超过0.001 N

菠萝蛋白酶的含量测定

菠萝蛋白酶的来源与应用菠萝蛋白酶主要来自于菠萝的茎叶皮儿。菠萝蛋白酶的应用：一、菠萝蛋白酶在食品加工业的应用 1、焙烤食品：将菠萝蛋白酶加入生面团中，可使面筋降解，生面团被软化后易于加工。并能提高饼干与面包的口感与品质。
2、干酪：用于干酪素的凝结。
3、肉类的嫩化：菠萝蛋白酶将肉类蛋白质的大分子蛋白质水解为易吸收的小分子氨基酸和蛋白质。可广泛地应用于肉制品的精加工。 4、菠萝蛋白酶在其它食品加工业中的应用，有人已经用菠萝蛋白酶来增加豆饼和豆粉的PDI值和NSI值，从而生产出可溶性蛋白制品及含豆粉的早餐、谷类食物和饮料。其它还有生产脱水豆类、婴儿食品和人造黄油；澄清苹果汁；制造软糖；为病人提供可消化的食品；给
操作步骤
1.选取菠萝一个榨汁，用四层纱布过滤得果汁；
2.取果汁，加5%柠檬酸钠10ml，搅拌均匀； 3.4000r/min离心7min取上清液；
4.在上清液中加0.2%的单宁30ml，边加边搅拌15min，可见澄清析出，
静置40min； 5.除去上清液，以4000r/min离心5min丢掉上清液； 6.把提取的蛋白酶糊倒入烧杯中，加0.1%EDTA溶液100ml搅匀，再把 1.5%氯化钠溶液200ml倒入烧杯中搅匀，以4000r/min离心7min，倒掉上清液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。
四、菠萝蛋白酶制剂在饲料中的应用
将菠萝蛋白酶加入饲料配方或直接混合在饲料中，可以大大提高蛋白质的利用率和转化率，并能开发更广的蛋白源，从而降低饲料成本。
提取工艺
压榨菠萝下脚料
去杂质
加稳定剂稳定液
加单宁单宁沉淀物溶液弃去
汁液残渣（弃去）干燥酶制品
澄清液
沉淀物（弃去）
洗脱滤液

菠萝里面有白点是怎么回事

菠萝里面有白点是怎么回事很多人在吃菠萝的时候吃着吃着会突然的发现菠萝上面有白色的点点，如果菠萝里面有白色点点的话很多人就会担心这个菠萝是坏掉了，所以说不敢吃，看到这个菠萝里面的白点就想将里面的白点及时的去掉，因为担心白点点对身体的伤害，菠萝上面的白点点其实是有原因的，那么下面让我们来看看菠萝里面有白点到底是怎么回事?菠萝中间有白点。

这个是菠萝蛋白酶。

菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000，等电点为9.55。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

可以食用。

菠萝蛋白酶是用于食品添加剂。

菠萝的作用菠萝全身药用价值丰富，菠萝皮中就富含一种菠萝酶，长期食用菠萝皮，可有效降低心脑血管疾病、糖尿病、高血压以及癌症等疾病的发病率。

菠萝味甘性温，具有解暑止渴、消食止泻的功效，可清热生津、利于小便，有着与西瓜一样的解渴功效，为夏季不可多得的时令水果之一。

菠萝富含丰富的维生素B，能有效促进肌肤亮丽滋润，有一定的美容功效，还可以减肥呢!除了上述功效，其还可以提高人体免疫力，抵抗病毒入侵。

菠萝具有消炎的作用，能促进血液循环及伤口愈合。

菠萝还能够减轻咳嗽的症状，对于因为感冒导致的喉咙疾病，有着明显的治疗效果。

菠萝里面如果有白点的话，那么首先不要担心，要考虑是这些正常的因素所引起的，菠萝里面有白点到底是为什么，上面我们已经给大家介绍得很详细了，如果发现菠萝里面有白点的话可以不将这个白点消除，白点也是可以吃的，很多菠萝过度成熟了都是会有白点的发生。

菠萝蛋白酶（菠萝酶）

菠萝蛋白酶（菠萝酶）菠萝蛋白酶编辑词条B 添加义项 ?菠萝蛋白酶是从菠萝水果皮、茎、芯等部分经生物技术制得的一种纯天然植物蛋白酶，其分子量为33000，等电点为9.55，属于疏基蛋白酶，其活动中心为疏基（-SH），能进行蛋白质水解等各种生化反应，菠萝蛋白酶是一种天然的、无毒无害，卫生安全的蛋白酶，它可广泛应用食品、医药及生物等行业。

目录1基本介绍2组成结构3理化性质4制备方法5价值应用6注意事项折叠编辑本段基本介绍菠萝蛋白酶(Bromelain），简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤111梨酵素。

是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000，等电点为9.55。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

折叠编辑本段组成结构菠萝蛋白酶是由多种不同分子量和分子结构的酶所组成的酶系，其中至少包含了5种蛋白水解酶。

除此之外，有的还含磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。

菠萝蛋白酶是一种糖蛋白，分子结构中含有一个寡糖分子，由木糖（xylose，xy1）、岩藻糖（fucose，Fuc）、甘露糖（mannose，Man）和N—乙酰葡糖胺（N—aceltylglu2cosamine，GlcNAc）组成，共价连接在肽链上，Ishihara和Yasuda等人分别推测出了糖分子的结构。

折叠编辑本段理化性质菠萝蛋白酶的分子量为30000－33000，等电点为9155，酶液的最大吸收波长为280nm。

因其由多种酶分子构成，故在催化底物上具有多样性。

它能分解蛋白质、肽、脂和酰胺，其水解蛋白的活性较木瓜蛋白酶高10倍以上。

菠萝蛋白酶催化的必需基团不是糖分子，而是所含肽链中的巯基；另外，菠萝蛋白酶分子结构中的羧基和羟基亦与酶活性无关。

菠萝蛋白酶的催化活性易受到pH、温度、金属离子、EDT A 及还原剂等的影响。

菠萝蛋白酶

我国菠萝资源丰富，年产菠萝100万吨以上，仅有30%左右用于加工，大多是直接以水果出售，每年都有大量的菠萝皮、茎被浪费掉，如能进行综合利用，不仅可减少环境污染，而且还能生产出高价值的产品，这将带来良好的社会效益和经济效益。同时，我酶的市场价约为 800元/千克，我国年需菠萝蛋白酶千吨以上，而国内生产量不足 10%，因此，菠萝蛋白酶的市场前景广阔，有强劲的开发潜力。
工艺要求
1.原料的预处理 2. 果汁过滤 3.去除重金属离子 4.浓缩 5.层析 6.脱盐 7.干燥
生产工艺
物料计算
物料菠萝渣苯甲酸钠 EDTA-2Na 硫酸铵每天 156.25t 0.03906t 0.03906t 0.459t 每年 31250t 7.8125t 7.8125t 91.8t
湛江经济技术开发区（简称湛江开发区）是湛江经济技术开发区（简称湛江开发区） 1984年11月29日经国务院批准成立的全国年月日经国务院批准成立的全国首批14个沿海经济技术开发区之一个沿海经济技术开发区之一，首批个沿海经济技术开发区之一，是实行类似特区的优惠政策和新型管理体制的经济技术功能区，是湛江市未来发展的中心区域。技术功能区，是湛江市未来发展的中心区域。湛江市具有独特的地缘区位优势：湛江市具有独特的地缘区位优势：一是中国沿海通往非洲、中东、欧洲、东南亚、沿海通往非洲、中东、欧洲、东南亚、大洋洲航程最短的口岸；洲航程最短的口岸；二是中国大西南经济腹地进出口的重要咽喉；地进出口的重要咽喉；三是中国进军东盟各国市场最佳的“桥头堡” 国市场最佳的“桥头堡”，也是东盟各国进入中国大陆市场最佳的“登陆点” 入中国大陆市场最佳的“登陆点”。独特的区位优势使湛江经济技术开发区在泛珠三角经济合作圈、环北部湾经济圈、中国—东盟经济合作圈、环北部湾经济圈、中国东盟自由贸易区、自由贸易区、亚太经济圈中处于重要的战略地位，地位，成为中国大陆最适宜外来投资者投资经营的地区之一。经营的地区之一。

菠萝蛋白酶的制备及活性测定

菠萝蛋白酶的制备及活性测定背景菠萝蛋白酶(Bromelain)，别名菠萝酶，是存在于菠萝(Anana COmOSl2S)植株中的蛋白质水解酶，为浅黄色无定形粉末，微有异臭。

菠萝的果、茎、柄和叶片中都含有菠萝蛋白酶。

一般从菠萝果中提取的称为果菠萝蛋白酶，从菠萝皮、茎中提取的为茎菠萝蛋白酶。

八成熟的菠萝果汁含有约0．4％的菠萝蛋白酶，成熟的菠萝果汁含有O．3％左右的菠萝蛋白酶，茎汁含8．7％的菠萝蛋白酶(Murachi，et a1．，1964)。

1981年，Marcano首先发现菠萝汁中含有蛋白水解酶，随后Willstatter，Bergmann和Martin相继指出，菠萝蛋白酶存在于果、皮和茎部中，存在于茎部的称为茎酶(Stembromelain E．C．3．4．22．4)，存在于果汁中的酶称为果酶(Fruit bromelainE．C．3．4．22．5)。

Murachi和Neurath、E1．G harbawi和Whitaker采取层析法分离提取了菠萝蛋白酶并研究了它的活性成分。

结构特性研究表明，果菠萝蛋白酶是酸性酶，等电点为pH4．6，茎菠，约为33，000，等电点为pH9．5，其活性中心的氨基酸顺序和催化机理与木瓜蛋白酶相似，并确定茎菠萝蛋白酶为糖蛋白。

Ota S et aL研究指出，茎菠萝酶分子量为36000，末端氨基酸残基是丙氨酸，果酶分子量为30000，末端氨基酸残基也为丙氨酸，碳水化合物分析与Muraclli 的分析结果相似。

1988年，T．L．迈诺特等由十二烷基硫酸钠．聚丙烯胺凝胶电泳(SDS．PAGE)测定果菠萝蛋白酶分子量22200．25080，等电点3．8~4．8。

菠萝蛋白酶是各种酶的混合物，已知菠萝蛋白酶粗品中包含至少五种蛋白水解酶，也包含非蛋白水解酶，包括酸性磷酸酶和过氧化物酶，并含有淀粉酶和纤维素酶活性，还存在其他成分。

菠萝蛋白酶成分的复杂性，限制了其在生产中的应用，特别是医药领域对功能成分的要求上，因此对菠萝蛋白酶的成分和各成分的具体功能的分析研究具有重要意义。

菠萝蛋白酶

菠萝蛋白酶的提取纯化及化学修饰对其活性的影响一、实验目的1、掌握菠萝蛋白酶的提取纯化方法2、了解菠萝蛋白酶的活力测定方法3、了解化学修饰的方法并探究对其活力的影响。

4、探究菠萝蛋白酶的稳定性二、实验原理菠萝蛋白酶是典型的巯基蛋白质, 广泛存在于菠萝果实、芽、叶、茎中, 分子量为33 000, 能分解蛋白质和酰胺等。

它的水解活性较木瓜酶高10 倍以上。

因此有广泛的用途。

它作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化、啤酒澄清. 还用于胶、水解蛋白的生产, 在医药上它可在生物体内溶解纤维蛋白及血凝块。

因此可以治疗水肿及多种炎症, 它能迅速溶痂。

对正常组织无害, 不影响植皮, 适用于中小面积深度烧伤的治疗。

•菠萝蛋白酶的理化条性质•最佳温度：53±1℃•失活温度：≥65℃•最佳PH值： 5.0～8.0•失活PH值：小于3.0和大与9.5•推荐用量:0.05～0.1%对蛋白质计•温度范围：50～60℃作用PH值: 6.0～9.0提取菠萝蛋白酶的传统工艺是高岭土吸附法和单宁沉淀法。

高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂,原材料消耗多,所需设备也多,酶活总回收率低,但产品质量较好,纯度较高,单宁沉淀法工艺和操作比高岭土法简单,原材料消耗少,所需设备少,但酶活回收率低。

超滤法使菠萝蛋白酶产品更纯,而且酶粉得率比传统工艺高,但超滤法生产工艺和和操作比上述两种方法复杂,工人素质要求高,且设备一次性投资大。

本实验采用单宁沉淀法提取菠萝蛋白酶。

活性测定方法是以酪蛋白水解释放的氨基酸在275nm的吸收值为基础。

酶活单位定义为在37℃，pH7.0的条件下，每分钟水解酪蛋白所产生的酪氨酸的微克数为一个菠萝蛋白酶单位。

pH 值对酶活力有很大的影响,大多数的酶在酸性条件下活力最强,最适合菠萝蛋白酶的pH 为7. 4 ,在碱性条件下就会失活,在操作过程中应注意pH 值的变化。

实验材料1、材料：新鲜的成熟菠萝2、仪器：榨汁机、离心机、紫外分光光度计、恒温水浴锅、氯化钙的干燥器、CMSepharose FF 凝胶（1.1cm×30.0cm）、研钵、滴管（大、小）、烧杯（大、中、小）、试管、具塞试管、白瓷板、温度计、PH计、搅拌棒3、试剂：0.2%单宁、5 %苯甲酸钠溶液、0. 1 %/0.5%EDTA 溶液、1. 5%氯化钠溶液、0. 5%乙酸锌溶液、0.06 %抗坏血酸溶液、0. 5%硫代硫酸钠、1 %L - 半胱氨酸溶液、20mM pH4.0 的醋酸缓冲液、1MNaCl~20mM pH4.0 醋酸缓冲液（含0.01%EDTA）、双缩脲试剂、pH7.0 的干酪素溶液、酶液激活液（pH4.5 ，L-cys 和EDTA-2Na 配制）、三氯乙酸溶液、标准酪蛋白试剂、0.1M盐酸、0.1M氢氧化钠、50%乙二醇、50%甘露醇、50%葡萄糖、50%甘油、O．1mol/L柠檬酸盐缓冲液(pH 3．0)、NEM1、实验材料新鲜菠萝(下脚料）、0.1mg/ml牛血清蛋白2、实验试剂①柠檬酸钠②维生素C ③单宁④0.1%EDTA溶液⑤1.5%氯化钠溶液⑥1%酪蛋白溶液⑦1mol/L氢氧化钠溶液⑧0.05mol/L磷酸缓冲液（溶解磷酸二氢钾，加氢氧化钾调PH至7.0）⑨激活剂（PH7.0，0.05mol/L磷酸缓冲液，内含15mmol/L硫代硫酸钠和6mmol/LEDTA-2Na,现配现用）1、榨汁机；2、离心机；3、紫外可见分光光度计（1cm石英比色皿）；4、恒温水浴锅（37℃）；5、试管、试管架；6、烧杯、容量瓶；7、移液管；三、实验步骤1、菠萝蛋白酶的提取提取：菠萝洗净榨汁。