游离放散试验

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游离和放散实验流程

游离和放散实验流程

游离和放散实验流程The dissociation and diffusion experimental procedures involve several crucial steps. Initially, the samples under investigation are carefully prepared, ensuring their purity and suitability for the experiment. This preparation stage is essential to eliminate any confounding factors that could skew the results.接下来,实验进入关键阶段,即游离过程。

在此过程中,我们利用特定的技术手段,如化学试剂或物理方法,促使样品中的目标成分从原有结构中游离出来。

这一步骤要求精确控制实验条件,如温度、pH值等,以确保游离过程的顺利进行。

Once the dissociation stage is completed, the diffusion process begins. Here, the dissociated components are allowed to disperse freely within a controlled environment. This diffusion is monitored closely, as it provides valuable insights into the interaction and behavior of the components under study.在扩散过程中,我们利用先进的实验设备和技术手段,精确测量和记录扩散的速度、方向和范围。

这些数据对于后续的数据分析和结果解读至关重要。

Finally, the collected data is thoroughly analyzed to extract meaningful information about the dissociation and diffusion behaviors of the samples. This analysis involves statistical techniques and comparison with known standards or previous studies.最终,我们对收集到的数据进行深入分析,以提取关于样品游离和扩散行为的有意义信息。

游离试验和放散实验阳性

游离试验和放散实验阳性

游离试验和放散实验阳性
自由游离试验和放散实验阳性:
1. 自由游离试验:
自由游离试验也称作“自由应力模拟晕动试验”或“不可控晕动试验”,它是一种用来测试材料、机械零件及在特定环境下所承受力学载荷的材料强度和可靠性分析方法,模拟了实际应用情况下的温度梯度和周边应力作用。

它是一种针对快速变形载荷作用的试验,可以模拟未确定的、不可预测的振动环境对对象的影响,经常用于疲劳性能、材料结构、局部支撑及加速变形程度的评估。

它重现了接触式荷载模式,试验就像在单看无承载能力的活塞上下放大力一样。

2. 放散实验:
放散实验是一种广泛应用的应力可靠性测试,其目的是通过空间变形张力的控制,来验证对象的机械性能和可靠性,这是通过应用多次的荷载施加和控制应力梯度来评估。

该试验可以用于多种材料的应力可靠性测试,比如塑料和金属,它可以测试材料的疲劳承受能力、抗冲击性能及抗拉伸变形能力,在产品质量控制方面也有很多应用。

放散实验具有深度、灵活性、控制精度高等特点,与自由应力模拟肉哓试验相似,也是一种综合可靠性测试,试验条件和结果可以准确反映出实际应用环境中物体所承受的荷载、变形以及断裂情况。

无论是自由游离试验还是放散实验都具有很强的实用性,尤其是对于轻薄结构的固体件,它们对对象的强度和可靠性评估具有较高的准确性,为工程制造和质量控制提供测试保证。

新生儿溶血病检测标准操作规程

新生儿溶血病检测标准操作规程

新生儿溶血病检测标准操作规程1.检验原理:本试验为将排阻层析和抗人球蛋白试验(COonIbS试验)相结合,即在微柱凝胶介质中,红细胞抗原与相应的不完全抗体在抗人球蛋白的作用下发生凝集反应,形成红细胞免疫复合物,在一定离心力下,该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中;如无相应的不完全抗体结合,则不能形成红细胞免疫复合物,在一定离心力下,分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔底部。

2.主要组成部分:本品系在聚丙烯塑料透明卡片上的六支微柱型管中填充葡聚糖凝胶和抗人球蛋白(多抗),制成抗人球蛋白检测卡,凝胶微管分为反应腔和凝胶分离柱两部分。

3.样本要求:3.1红细胞样本:采集被检对象静脉血,用EDTA抗凝,配制成红细胞悬液(直接抗人球蛋白试验配制成红细胞生理盐水悬液,间接抗人球蛋白试验配制成红细胞低离子溶液悬液(只适用于交叉配血和不规则抗体筛检)),红细胞最终浓度0.5%-0.8%o3.2血清样本:采集被检对象静脉血,放入含有兔脑粉或者其他促凝剂的试管中,10分钟后离心,取上清;或者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或者37℃放置2小时后离心,20OrPmlO分钟,取上清该上清不得有絮状物或沉淀。

血清标本必须充分去蛋白,否则标本中析出的或红细胞悬液中残余的纤维蛋白可阻碍红细胞沉降,使非凝集细胞离心后在胶表面形成一条红线,呈假阳性反应。

4.检验方法4.1.准备工作1)微柱凝胶检测卡的准备:观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡平衡至室温(18—25℃),再用专用离心机离心5分钟。

2)标本采集:用EDTA抗凝管采集被检对象脐带血或静脉血,制备成红细胞标本和血浆标本。

3)红细胞悬液的制备:将被检者红细胞标本至少洗涤4次,取被检者压积红细胞10微升,加入1毫升红细胞稀释液或生理盐水,外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。

4)血浆标本的处理:将被检者血浆标本进行离心,采用3000r∕min离心3min或3500r∕min离心2min(不得有絮状物或沉淀)。

放散试验原理

放散试验原理

放散试验原理
放散试验原理是通过对物质进行加热或施加外部能量,使其分子或原子脱离原来的状态,进入高能级激发态或离散态,从而使物质发生放散现象。

放散试验常用来研究物质的热力学性质、光谱性质和反应动力学性质等。

具体原理如下:
1. 加热法放散试验原理:物质通过加热使其温度升高,使分子或原子的热运动增强,从而克服吸附能、键能等,使其脱离原有的状态进入激发态或离散态。

这种方法适用于固体、液体和气体等不同形态的物质。

2. 光解法放散试验原理:利用光的能量激发物质中的分子或原子,使其光解分解,从而发生放散现象。

光解法可以通过选择适当的光源和光波长来精确控制能量的输入,以实现对物质分解过程的研究。

3. 爆炸法放散试验原理:通过物质在短时间内获得巨大能量的方式,使其分子或原子直接跃迁到高激发能级或离散态,从而发生放散现象。

这种方法通常用于研究高能化合物、火药等。

放散试验原理的基本思想是利用外部能量使物质进入高能态,然后通过测量物质在高能态下的动力学、光谱等性质来研究其特性和反应过程。

这些实验可以提供关于物质分子结构、活性中心、反应机理等方面的重要信息,对于物质的研究和应用有着重要的意义。

微柱凝胶技术检测在新生儿ABO溶血病的应用

微柱凝胶技术检测在新生儿ABO溶血病的应用

微柱凝胶技术检测在新生儿ABO溶血病的应用摘要】目的采用微柱凝胶技术(MGT)进行新生儿溶血病(HDN-ABO)血清学检测,对新生儿直接试验、游离试验、放散试验的结果进行分析。

方法采用微柱凝胶技术对1089例疑为HDN的患儿进行检测,包括直抗试验、游离试验、放散试验。

结果采用MGT法检查了1089例疑为HDN的患儿送检血样,结果确诊ABO血型系统HDN 64例,阳性率5.88%,可疑HDN 26例,阴性结果999例,3项阳性的有15例,游离和放散试验均阳性的有49例,仅放散试验阳性的有64例。

结论微柱凝胶技术用于新生儿溶血病的检测,方法操作简单,使用方便,标本用量少,敏感性高和特异性强,阴阳性结果明显,判断结果标准,结果易保存等优点。

可成为医院实验室常规检测方法。

实验室能为临床快速准确提供试验报告,有利于患儿的早期诊断、早期治疗,对提高新生儿健康水平有很重要的意义。

【关键词】微柱凝胶技术新生儿溶血病(HDN-ABO)微柱凝胶技术(MGT)是一种新的改良抗球蛋白试验技术,是近年发展起来的一种新型免疫检测方法,在临床上已逐渐成为常规的红细胞血型血清学检测技术,该技术已在国内、外应用于交叉配血、血型鉴定以及不完全抗体的测定。

我科于2009年1月至2012年1月,采用MGT对HDN-ABO进行了检测,收到良好效果,报告如下:1 材料与方法1.1 样本:标本为我院新生儿科1089例,出生7d内疑为HDN患儿血样1.2 仪器与试剂1.2.1 仪器:检验医学多功能离心机、免疫微柱孵育器(由中山市生科试剂仪器有限公司生产)、台式低速离心机等1.2.2 试剂:抗人球蛋白检测卡、A、B、O标准红细胞 (由中山市生科试剂仪器有限公司生产)1.3 实验方法1.3.1 样本来源、要求 2009年1月至2012年1月住在我院新生儿科患儿(母亲是O型,患儿是A型或B型)出生后1-3天皮肤巩膜黄染,血红蛋白降低,血清胆红素高于正常值,对患儿采集EDTA抗凝血3毫升共1089份标本,本实验室对所送标本必须在接到后6小内检查完毕。

两种不同放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的比较

两种不同放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的比较

两种不同放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的比较卜祥茂;刘国凤;李胜军;蒋玉红【摘要】目的观察比较酸放散和传统热放散在新生儿ABO溶血病检测中的应用效果.方法共收集344例新生儿血标本,同时进行酸放散和热放散试验,比较两者的差异及其与临床诊断的吻合度.结果酸放散阳性112例,阴性232例:热放散阳性112例,阴性232例.酸放散与热放散试验间差异无统计学意义(P>0.05).结论对于新生儿ABO溶血病的诊断,酸放散与传统热放散试验的检测效果并无差别,且酸放散试验不受主观因素影响,缩短试验时间,不需要特殊的加热振荡水浴箱,值得推广.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2013(015)004【总页数】2页(P349-350)【关键词】新生儿ABO溶血病;高胆红素血症;放散试验【作者】卜祥茂;刘国凤;李胜军;蒋玉红【作者单位】266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科;266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科;266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科;266000 山东省青岛市妇女儿童医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R556.6+3;R446.11ABO新生儿溶血病(HDN)是母婴血型不合溶血病中最常见的一种。

母亲的 IgG抗-A或抗-B血型抗体通过胎盘进入胎儿血液循环,可引起胎儿或新生儿红细胞破坏。

在新生儿红细胞或血清中查出对抗其自身红细胞的血型抗体,是诊断 ABO溶血病的重要实验根据。

一般进行3种试验:直抗试验,游离试验,放散试验。

其中游离试验检查患儿血清中的抗体,若仅有游离抗体阳性,仅表示患儿体内有抗体,并不说明红细胞已被致敏,故只能疑诊为 ABO溶血病。

放散试验和直抗试验同为检测红细胞上致敏的抗体,但由于放散试验所用的红细胞表面上的血型抗原远远多于新生儿红细胞表面上的血型抗原,所以放散试验最为敏感。

为此比较两种不同的放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的应用效果,及其与临床诊断的吻合度,现报道如下。

新生儿溶血病直抗结果探讨

新生儿溶血病直抗结果探讨

包括直抗 阴性组 2 0例 ,直抗 阳性组 2 0例。
表1 直抗 阴性和直抗阳性两组患儿微柱凝胶法结果 例
较 多,免疫性抗 A或抗 B抗体 ( G 可通 过胎盘 ,抗体进入 I ) g 胎儿体 内后附着在胎儿红 细胞 膜与对应 抗原发生免疫性溶血
反应 , 以丈夫血型为 A型、 所 B型或 A B型者 , 母亲为 O型者, 容易引起 H N。而且 由于存在 上述因素均可使孕妇产生抗体 , D 所 以 A O溶血病可以在第一胎发病 [3 B 21 -。 直抗、游离、放散试验对于辅助诊断 H N有重要的临床 D 价值。直接抗人球蛋 白试验为阴性 ,理论上应该不需要再进行
o D hlrn addv e tte eai op(o ae) n epsi ru 2 ssacrig o i cat l uiepr na sl . o ae f Nc i e , n iddi oh gt e ru 2 ssa dh oiv gop( c e) codn r t nio l ei tleut C mprd H d i n n vg c t te oa t d e g b n x me r s
导致 胎儿 或者 新生 儿的红 细胞破 坏而 引起溶 血。HD N确 诊 主要通 过 血清学 实验,其中确诊 HD N的新 生儿 直抗实验 理 论上应均为阳性 ,但是根据 临床上 的结果统计发现并非如此 ,
特在此探讨 吓’ o 1 资料与方法
抗体 ,I g G抗体通 过胎 盘进 入胎儿体 内,发生 同种 免疫反 应
7 . 0
《 国 学 新》 卷第2期( 第2 期)0 年8 医技与临床 Yi uic u a 中 医 创 第9 2 总 3 22 月 2 1 j l hng i n y

新生儿溶血三项试验检测结果分析

新生儿溶血三项试验检测结果分析

新生儿溶血三项试验检测结果分析作者:林湘珠来源:《健康必读(上旬刊)》2019年第03期【摘; 要】目的:探讨新生儿溶血三项试验在临床中的应用价值。

方法:选择 2018年1月至 2018年 12月我院儿科病房收治的 291例高胆红素血症患儿,对其溶血三项试验进行回顾性分析。

结果:291例高胆红素血症新生儿确诊为新生儿溶血病占62.20%(181/291)。

181例新生儿溶血三项试验结果:放散试验均阳性,游离试验阳性115例(63.54%),直抗试验阳性52例(28.73%)。

结论:抗体释放试验对诊断新生儿溶血病具有重要意义。

【关键词】新生儿溶血病;溶血三项【中图分类号】R722.18;;;;; 【文献标识码】A;;;;; 【文章编号】1672-3783(2019)03-0283-01新生儿溶血病(HDN)是由于母婴 A B O 血型不合,胎儿红细胞进入到母体的血液循环中,母体产生的抗胎儿红细胞的免疫性 IgG抗 A 或抗 B 抗体通过胎盘进入胎儿体内,在网状内皮细胞,致敏胎儿红细胞被清除、识别,从而引起溶血。

该病仅发生在胎儿和新生儿早期,可导致高胆红素血症,少数病情严重者可发展成为胆红素脑病,导致听力损害、智力发育障碍或新生儿死亡等。

尤其以母亲血型为O 型,婴儿血型为A 型或 B 型的 A B O 溶血病,在临床上最为常见,约占HDN的80% [1]。

为了更好地为临床早期诊断和治疗HDN提供依据,本研究回顾性分析了291例高胆红素血症新生儿溶血三项试验检测结果。

现将研究结果报道如下。

1 资料与方法1.1一般资料我院2018年1月~2018年12月儿科高胆红素血症新生儿291例,男性130例,女性161例,日龄在出生后 2h~15d,用EDTA-K2抗凝全血2~5ml,抽血后即时送检,2h内完成检验。

1.2仪器及试剂FYQ免疫微柱孵育器 TD-3A型血型血清学用离心机,由长春博研科学仪器有限责任公司生产,新生儿溶血病微柱凝胶检测卡、ABO标准红细胞由长春博讯生物技术有限责任公司生产。

免疫血液学技术题库3-2-10

免疫血液学技术题库3-2-10

免疫血液学技术题库3-2-10问题:[单选,A2型题,A1A2型题]关于RhD变异体抗原,以下哪种说法是正确的()。

A.部分D者的D抗原与某些抗-D试剂是不发生凝集反应的B.弱D,其抗原与正常D抗原相比,抗原的质量发生了变异,数量也减少C.部分D,其抗原与正常D抗原相比,抗原的质量没有发生变化D.部分D,其抗原与正常D抗原相比,抗原的质量没有发生变异E.弱D,其抗原与正常D抗原相比,抗原的质量发生了变异,数量不变Rh系统也有较多的亚型,常见的主要有:DU弱D抗原,由碱基突变形成,表现为红细胞上抗原量少,大约490~1870个位点之间,而正常D阳性个体的红细胞上一般有10000~33000个位点。

DU的特性是抗原的质量没有发生变化,只是数量减少,与各抗-D试剂的反应基本一致,该个体的血清中不产生抗-D。

血清学表现为盐水介质阴性,IAT检测为阳性。

部分D:D基因单或多核苷酸碱基取代、RHD-CE杂交基因。

D抗原由多个独立的抗原决定簇组成,缺乏部分D决定簇的红细胞即为部分D。

其特性是抗原的质量发生了变异表位不全,数量并没有减少,与各抗-D试剂反应不一,经免疫后可产生抗-D。

问题:[单选,A2型题,A1A2型题]凝聚胺试剂对检测下列哪个血型系统的抗体不敏感()。

A.MN系统B.ABO系统C.Rh系统D.Kell系统E.P系统聚凝胺Polybrene试验是一快速检测不规则抗体的方法。

聚凝胺是一种多价阳离子聚合物,在溶液中有多个阳离子基团,能中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。

如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集不可逆。

在聚凝胺试验中,红细胞与血清首先在低离子介质中孵育,以促进抗体与红细胞结合,然后加入聚凝胺凝集细胞。

离心后,往凝集的细胞中加入枸橼酸钠重悬液,枸橼酸根的负电荷与聚凝胺上的正电荷中和,使正常红细胞的凝集解散,而抗体引起的凝集仍存在。

但是聚凝胺方法对检测Kell系统的抗体不理想,所以对阴性结果须进行抗球蛋白试验,以免漏检。

新生儿溶血三项试验检查及相关临床分析

新生儿溶血三项试验检查及相关临床分析

新生儿溶血三项试验检查及相关临床分析摘要】目的:了解新生儿溶血病(HDN)发病情况、分析溶血三项检测试验的重要性。

方法:对2012年4月~2013年8月广西区妇幼保健院448例母婴血型不合、高疸血症病例的临床资料进行回顾性分析。

结果: 448例患儿中排除HDN6例,确诊ABO-HDN392例,可疑56例,总阳性率875%,不同试验阳性率比较有显著差异(P<o.05),不同日龄患儿组间阳性率有显著差异(P<001)。

结论:溶血三项试验是新生儿溶血病的可靠诊断依据。

ABO-HDN在出生后0一2 d组高发于其他组别,且随着时间的延长其检出率逐渐降低。

【关键词】ABO 血型不合;新生儿溶血病;溶血三项试验【中图分类号】[R5566+3]【文献标识码】B【文章编号】1674-8999(2013)08-0258-01新生儿溶血病(HDN)[1]是由于母婴血型不合,母亲体内产生的 IgG 血型免疫抗体通过胎盘进入胎儿体内,使胎儿红细胞破坏。

临床上以ABO-HDN较为多见,血型血清学检查能为新生儿溶血病患儿的换血和治疗提供依据,现就对本院448 例新生儿黄疸患儿进行了溶血三项检测现报告如下。

1资料与方法11一般资料:2012年4月~2013年8月本院新生儿母婴血型不合、高胆血症患儿448 例,日龄0~41d,男 226 例,女222例;O-A型194例,O-B型228例,O-O型6例。

1 2 试剂与仪器:抗-A、抗-B、抗-D血清试剂、ABO标准红细胞由上海血液生物医药有限公司提供;微柱凝胶卡、DiaCidel 放散试剂、37℃孵育器、卡式离心机均为DiaMed公司生产。

13方法:标本进行ABO和Rh血型鉴定及溶血三项试验,具体操作参照文献[2]。

HDN的检验诊断标准:母婴血型不合,新生儿血浆和(或)红细胞放散液中检出了可致敏新生儿红细胞的血型抗体者可诊断为HDN,以抗体放散试验为最终诊断标准。

14统计学分析: PEMS31软件进行分析,P<001有统计学意义。

放散试验标准操作规程

放散试验标准操作规程

放散试验标准操作规程1.目的为规范红细胞放散试验的技术操作,依据《输血实验室管理程序》4.1.8(2)条款的要求制定本规程。

2.适用范围适用于输血科( 血库) 对红细胞血型弱抗原的鉴定及致敏红细胞的抗体特异性鉴定等。

3.职责输血科(血库)技术人员负责放散试验操作。

4.原理红细胞血型抗体与血型抗原的结合是可逆的,通过改变某些物理条件,可使结合在红细胞血型抗原上的抗体被放散出,再通过检测放散液中的抗体,可鉴定致敏红细胞的抗体特异性或间接鉴定红细胞抗原。

5.所需设备和试剂5.3设备普通离心机,血型血清学专用离心机,水浴振荡仪。

5.4试剂分析纯乙醚。

6.检测环境条件室温应保持在18- 27℃,湿度应保持30%-70%。

7.步骤与方法7.1热放散试验7.1.1将受检者抗凝压积红细胞或已进行吸收试验的压积红细胞用生理盐水洗涤3-6次,每次洗涤后将生理盐水除尽,最后一次洗液留作对照。

7.1.2在洗涤后的压积红细胞中加入与压积红细胞等容量的生理盐水(如放散液需要保存,改用6%牛血清白蛋白或红细胞不规则抗体筛选阴性的AB型血清),充分混匀后56℃轻摇(15-30s摇动一次) 10min,56℃保温离心(1300g离心3min)立即将上清液(放散液)转移至另一试管中备用。

7.2乙醚放散试验7.2.1将受检者抗凝压积红细胞或已进行吸收试验的压积红细胞用生理盐水洗涤3-6次,每次洗涤后将生理盐水除尽,最后一次洗液留作对照。

7.2.2在洗涤后的压积红细胞中加入与压积红细胞等容量的生理盐水(如放散液需要保存,改用6%牛血清白蛋白或红细胞不规则抗体筛选阴性的AB型血清),再加2倍于压积红细胞容量的分析纯乙醚,密封。

7.2.3用力颠倒摇动1min,小心放气减压,置37℃30min每10min摇动1次1000g离心5min。

7.2.4离心后分成三层,最上层是乙醚,中层是红细胞基质,下层是深红色放散液(含有血红蛋白)。

7.2.5弃去上层乙醚,用清洁的吸管通过中间基质层,吸出下层放散液移人另一试管中(不加盖),置37℃水浴中挥发残存乙醚后备用。

新生儿溶血病检测操作SOP

新生儿溶血病检测操作SOP

新生儿溶血病检测操作SOP一、产前诊断1、夫妇血型检测(微柱凝胶检测法:ABO、Rh(D)血型定型检测卡)1、1将红细胞稀释至1% 红细胞生理盐水悬液;1、2撕开微胶卡的封膜,于正定管蓝A、黄B、灰D、Control微柱管反应腔中加入1% 待检 RBC 生理盐水悬液各50μl;于反定管白色A、B、O、自身管分别对应加入1、0% A1、B、O型试剂红细胞与待检红细胞生理盐水悬液50μl,再分别加入待检血浆(血清)50μl;1、3将检测卡室温反应≥10 min,取出,置离心机1000r/min 2min,1800r/min 3 min离心;1、4取出,判定结果(凝集强度判断详见结果判定示图)。

2、孕妇抗体效价的测定(微柱凝胶检测法:抗人球蛋白检测卡)2、1孕妇IgG(抗A/抗B)效价2、1、1取待检血清与2-Me(二巯基乙醇)应用液各0、2ml,充分混匀,37℃水浴2小时(以充分破坏血清中的IgM类抗体)。

2、1、2取4支干净试管排于试管架上;将第一管加入50微升中与血清与1、6毫升低离子介质(原液为1:1稀释,此时稀释倍数为原液的64倍)。

2、1、3 第2-4管中分别加入400微升低离子介质;从第一管中吸出400微升的液体加入第二管,混匀,在从第二管吸出400微升加入第三管混匀,依次倍比稀释。

2、1、4取抗人球蛋白检测卡,撕去铝箔,在4管中个依次加入倍比稀释好的灭活血清50微升与1%的标准红细胞(或父亲红细胞)低离子介质(LIM)悬液50微升。

2、1、5将加好样的检测卡入生科孵育器中孵育15分钟。

2、1、6将孵育好的检测卡放入生科离心机中离心5分钟(1000r/min 2 min,1800r/min 3 min),(离心必须在加样后30分钟内进行)2、1、7取出,判定结果(凝集强度判断详见结果判定示图)临床参考值:孕妇IgG(抗A/抗B)效价≤64。

2、2孕妇IgG(抗D)效价测定2、2、1 确定孕妇为RhD阴性,丈夫为RhD阳性。

3种放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的效果比较

3种放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的效果比较

·实验研究·3种放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的效果比较戴维陈剑朱凯凤婧(四川大学华西第二医院检验科,四川成都610041)摘要:目的观察比较冷冻复融放散试验、三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和传统热放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的效果。

方法共收集104例新生儿或脐血标本,同时进行冷冻复融放散、三氯乙烯-三氯甲烷放散和热放散试验,比较三者之间差异与临床诊断的吻合度。

结果冷冻复融放散试验阳性为29例,阴性为75例;三氯乙烯-三氯甲烷放散试验阳性为3例,阴性为101例;热放散试验阳性为28例,阴性为76例。

冷冻复融放散试验与热放散试验间差异无统计学意义(P>0.05),而三氯乙烯-三氯甲烷放散试验和热放散试验间差异有统计学意义(P<0.05)。

104例标本中临床确诊新生儿ABO溶血病共28例,未明确黄疸病因而诊断为新生儿高间接胆红素血症的为6例,排除溶血诊断的有70例,冷冻复融放散试验的灵敏度为100%,特异性为98.68%;三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度为37.5%,特异性为100%。

结论对新生儿ABO溶血病,三氯乙烯-三氯甲烷放散试验的灵敏度明显偏低,冷冻复融放散试验和传统热放散试验的检测效果并无差别,且冷冻复融放散试验操作过程中无需全程的手工操作,更适用于大批量标本同时进行检测。

关键词:新生儿;ABO溶血病;病理性黄疸;血清学检测;抗体释放试验中图分类号:R457.1+1R722.18文献标识码:A文章编号:1004-549X(2011)02-0128-02新生儿ABO溶血病的血清学检测方法主要有直接抗球蛋白试验、游离试验和放散试验。

放散试验和直抗试验同为检测红细胞上致敏的抗体,但由于放散试验所用的红细胞是直抗的几百倍,所以放散试验是3项试验中最为敏感的一项试验,也是判定新生儿ABO溶血病最有力的证据。

我们比较了3种不同的放散试验在新生儿ABO溶血病检测中的应用效果,以及与临床诊断的吻合度,报道如下。

放散试验

放散试验

3、 放散液中抗体易变性,故应立即进行鉴定。 若需保存,应将抗体放散于AB血清或牛白 蛋白溶液中。
临床应用
热放散法常用于ABO亚型的鉴定,全凝集 或多凝集红细胞的定型,类B的放散实验以 及新生儿溶血病的诊断等。
乙醚放散试验原理
已知 致敏 抗原
的红 细胞
受检者 血清
乙醚
已致敏 红细胞
放散液
除去乙醚 后鉴定 抗体
红细胞上 有无相应 抗原及其
强度
间接判定待检 红细胞血型 及其亚型种类
试剂
抗A及抗B分型血清。 2%A型及B型红细胞。 受检红细胞。
操作步骤
1、吸收液的制备: 取受检红细胞用生理盐水洗涤3次,末次洗
涤后将盐水倒尽,取压实红细胞1份,与等 量抗A血清混合, 另取1份与等量抗B血清混 合,置4℃冰箱至少1小时,每10分钟摇动试
管1次(红细胞充分吸收抗体),离心后取
上清液(即吸收液)。
2、倍量稀释:
排列10mm×60mm小试管4排,每排5支, 每管各加生理盐水0.2 ml。第1、3两排第1 管分别加己吸的收抗A及抗B血清 0.2 ml; 第2、4两排第1管分别加未吸收的抗A及抗 B血清0.2 ml;分别作2~32的倍量稀释。
4 、将放散液用2%A型和B型试剂红细胞鉴 定抗体,即可检出受检红细胞的血型。
结果判定
鉴定A亚型:用已知A亚型红细胞按放散 液抗体的强度A1<A2<A3<Ax<Am,判 定受检红细胞A亚型的型别。
B亚型的放散液鉴定方法相似。
注意事项
1、为了获得最大量的抗体, 应加大吸收血清 量。
2 、放散时,应严格注意温度和时间。温度过 高红细胞易溶解;温度过低,抗体从红细胞 上放散不完全。
8、将放散液放置37℃水浴30min(除尽乙 醚),然后鉴定抗体。

药物体外释放试验设计

药物体外释放试验设计

药物体外释放试验设计药物体外释放试验是一种评估药物从给药系统中释放的速率和方式的实验方法。

通过对药物体外释放进行系统性的研究,可以帮助研究人员了解和优化药物的释放行为,为药物制剂的开发和评价提供重要的依据。

以下将介绍药物体外释放试验的设计要点和流程。

药物体外释放试验设计的要点之一是选择适当的试验方法。

常用的药物体外释放试验方法包括离体悬浮试验、离体扩散试验、离体流体流通试验等。

离体悬浮试验适用于评估固体给药系统的药物释放速率,离体扩散试验适用于评估凝胶或膜给药系统的药物释放速率,离体流体流通试验适用于评估液体给药系统的药物释放速率。

根据研究目的和所要评估的给药系统特性,选择适当的试验方法非常重要。

其次,试验设计需要考虑药物的理化性质。

药物的溶解度、离解度、晶型和亲水/疏水性等因素会影响药物的释放行为。

在设计试验时,需要考虑这些因素,并选择合适的试验条件,以保证试验结果的准确性和可靠性。

比如,对于溶解度较低的药物,可以增加试验温度、使用增溶剂或调整pH值,以促进药物的溶解和释放。

试验设计还应该考虑到释放介质的选择。

释放介质的选择要与目标给药系统和研究目的相匹配。

常用的释放介质包括模拟胃液、模拟肠液、生理缓冲液等。

通过选择合适的释放介质,可以模拟体内环境,更好地预测药物的释放行为。

试验过程中,需注意控制试验条件的一致性。

例如,试验温度、pH值、搅拌速度、样品收集时间等条件要严格控制,以确保试验结果的可比性。

另外,在试验过程中,需要周期性地采集样品,并通过合适的分析方法对样品中的药物含量进行测定,以得到药物的释放曲线。

最后,需要对试验结果进行数据分析和解读。

通过分析药物释放曲线,可以了解药物的释放速率和方式,比较不同给药系统的性能差异。

同时,还可以利用药物体外释放结果预测药物在体内的释放行为,为临床疗效和安全性评价提供参考。

总之,药物体外释放试验的设计是药物制剂研究和评价的重要环节。

通过选择适当的试验方法、考虑药物的理化性质、合理选择释放介质、控制试验条件和对试验结果进行数据分析和解读,可以为药物制剂的研发和评价提供可靠的依据。

吸收放散试验标准操作规程

吸收放散试验标准操作规程

吸收放散试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面可能存在的弱血型抗原、鉴定、分离血清中可能存在的混合抗体,辅助红细胞血型及混合抗体特异性的鉴定。

(二)检验原理抗体与相应抗原在适合条件下可以发生凝集或致敏,但这种结合是可逆的,如果改变某些物理条件时,抗体可以从结合的红细胞上解脱下来。

表达弱血型抗原(A或B等)的红细胞与相应抗体反应不出现凝集现象,但可以吸收相应的抗体,被吸收的抗体在适当条件下可以放散出来,与具有对应正常抗原的红细胞发生反应,检测和鉴定该放散出来的抗体,可以证明相应抗原的存在,也可以将混合抗体得到分离。

(三)适用范围1.弱血型抗原的鉴定(本操作规程主要选取弱A/B抗原鉴定制定相应试验流程)。

2.混合血型抗体的分离与鉴定。

3.新生儿溶血病的诊断。

(四)设备性能参数参见KA-2200血清学专用离心机、B600-A型离心机、电热恒温水浴箱使用说明书。

(五)器材与试剂1.器材B600-A型离心机、KA-2200台式离心机、电热恒温水浴箱、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

2.试剂生理盐水、抗A和抗B标准血清(经过筛选后)、抗人球蛋白试剂(市售单克隆或多克隆)、3%反定试剂红细胞。

(六)标本要求抗凝全血经B600-A型离心机在1 760g条件下,离心5分钟后压积红细胞应≥2ml。

(七)校准步骤参见KA-2200血清学专用离心机、B600-A型离心机、电热恒温水浴箱使用说明书中校准要求执行。

(八)操作程序1.吸收试验(1)生理盐水洗涤lml压积红细胞至少3遍,最后1次洗涤后,尽量弃去试管中红细胞沉淀上的所有上清盐水。

(2)如怀疑是弱A(或弱B)抗原红细胞,在洗涤后的红细胞中加入lml抗A(或抗B)血清。

(3)将红细胞与抗体试剂充分混匀,在4℃条件下孵育2小时,期间不时轻摇试管,混合红细胞与抗体血清。

(4)使用B600-A型离心机在1 760g条件下,离心5分钟,将所有上清(抗A或抗B试剂)转移到另一支试管中。

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