定量分析方法性能确认汇总.
最新定量项目的性能验证.
（R＝检测值的均值/预期值）
临床可报告范围
可接受标准
以80％≤R≤120％为可接受限 ➢ R＜80％或者R＞120％时，按厂商推荐的次高的稀释
倍数进行稀释，以80％≤R≤120％为可接受限，依次 类推。 结果计算 ➢ CRR上限值 ＝最大稀释倍数×对应标本的AMR上限 浓度 ➢ CRR的下限值 ＝AMR的下限值
定量项目的性能验证.
定量项目性能验证指标有哪些
正确度 精密度 线性范围（可报告范围） 参考范围 抗干扰 分析灵敏度/检测限
ISO15189的相关要求
CNAS-CL38 《在临床化学检验领域的应用说明 》 ➢ 5.3.7设备故障修复后，如果设备故障影响了分析性能，应对相关检测给予
验证；程序中试剂、设备等更换都需要性能验证 ➢ 5.5.2 检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可
取样测定所得结果之间的接近程度。 ➢ 准确度：测量结果与被测量真值之间的一致程度。 ➢ 可报告范围：临床可报告范围（clinical reportable range,CRR）是指
对临床、诊断有意义的待测物浓度范围。此范围如果超出了AMR（分 析测量范围），可将样本通过稀释、浓缩等预处理是待测物浓度处于 分析测量范围内，最后乘以稀释或浓缩的倍数。 ➢ 生物参考区间：参考值分布的95%区间
正确度验证
➢ 有证参考物质（CRM) ➢ 卫生部临检中心正确度验证计划（人源样本用
可溯源参考方法测定的结果去验证常规方法结 果，其偏倚是否允许） ➢ 参考实验室、参考方法比对
正确度
常用能力验证或比对：
➢ 参加能力验证/室间质评 ➢ 与使用相同检测方法已获认可实验室比对
定量分析方法的方法学验证
定量分析方法的方法学验证定量分析方法的方法学验证定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。
验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。
一，线性线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。
应在规定的范围内测定线性关系。
可用一贮备液经精密稀释，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备五份供试样品；以测得的响应信号对被测物浓度作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。
必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。
回归方程的相关系数( r ) 越接近于1 ，表明线性关系越好。
用UV 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，吸光度A一般在0.3 ～0.7 ，浓度点n ＝5 ，用浓度C 对A作线性回归，得一直线方程，方程的截距应接近于零，相关系数r 应大于0.9999 。
用HPLC 法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，浓度点n ＝5 ～7 ，用浓度 C 对峰高h 或峰面积A或被测物与内标物的响应值之比进行线性回归或非线性拟合（如HPLC-ELSD ），建立方程，方程的截距应趋于零，相关系数r 应大于0.999 。
线性关系的数据包括相关系数、回归方程和线性图。
二，范围范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。
范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。
对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。
三，精确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率( ％) 表示。
2定量分析系统的性能验证及经验分享
定量检测系统的性能验证及经验分享
中南大学湘雅医院检验科 易 斌
2
目 录
1.有关概念和管理要求 2.分析性能指标与标准 3.精密度评价 4.正确度评价 5.分析测量范围评价 6.参考区间评价
3
检验程序的性能特征
测量精密度（含测量重复性和测量中间精密度） 测量正确度和测量准确度 测量不确定度 分析特异性（含干扰物） 分析灵敏度和检出限（空白限、检出限和定量限） 测量区间（可报告范围/分析测量范围） 诊断特异性和诊断灵敏度。
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性能确认要求
方法确认应尽可能全面，并通过客观证据（以性能 特征形式）证实满足检验预期用途的特定要求。 确认的对象是非标准方法、实验室设计或制定的方 法、超出预定范围使用的标准方法、修改过的确认 方法。 实验室应将确认程序文件化，并记录确认结果。确 认结果应由授权人员审核并记录审核过程。 当对确认过的检验程序进行变更时，应将改变所引 起的影响文件化，适当时，应重新进行确认。
n
n
n
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精密度实验基本要求
试验样品一定要稳定，要严格控制冻融、混匀的操作。 至少做正常和病理2个水平的精密度实验。 尽可能在可报告范围内做高、中、低3个水平。 若有可能应尽可能选择参考区间两端和医学决定水平 处的浓度。 实验样品的分析物含量应尽量与公司对检测系统性能 评估时采用的含量一致，便于比较。 实验时按厂商操作规程要求做好校准，并且一定要和 实验样品一起做质量控制。
CNAS CL02:2012
4
精密度
精密度 « 测量结果的离散程度 « 用SD或CV表示 « 来源于方法学评价和室内质控 • 精密度分类 – CLSI：批内、批间、日间、实验室内（总）不精密度 – ISO：重复性、中间不精密度、再现性不精密度
定量项目分析性能验证PPT课件
数据处理
• 数据有效性判断 随机误差、操作失误、标本问题等等； 产生的有问题数据若参与计算，会使结果判读有较大偏差； 根据统计学方法找出离群值，剔除； 剔除离群值后应找出问题原因并改正，缺少的标本数应补全。
• 数据计算 借助Excel工具，行标和EP文件中都给了完整的数据统计表格形式。
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结果判读——精密度
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验证实验
• 校准：按照日常操作校准频率进行校准 or 每个检测批次进行校准 • 质控：闭环质控，每日实验样本检测前做室内质控，实验样本检测
结束后也应做室内质控。当日质控需均在控当日实验数据才有效。 • 样本检测：尽可能接近日常样本检测。
《标准操作流程— 检测系统定量实验分析性能评价/验证》
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抽样误差——确认限
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结果判读——精密度
• 确认限的计算 需要消除由于抽样误差等造成的统计学差异
1. 自由度v的计算以及假拒绝率α的选择
自由度是有关样本数的数据；假拒绝率选择后得到的为（1-α/1）区间 ，α一般取5,得到的即为95%置信区间。
2. C值的确定
由确定的自由度v和α查表得到。
3. 确认限计算
准备工作
以TSH做精密度实验为例做样本准备： 1. 说明书中声明，TSH的检测范围为0.005-100.0 uIU/mL，TSH的参考范围
为0.27-4.2 uIU/mL，2008年中国甲状腺疾病诊疗指南-甲状腺功能亢进症 诊疗指南中提出甲亢患者TSH一般小于1.0 uIU/mL。故，应挑选1.0 uIU/mL，以及接近参考范围上限4.2 uIU/mL的两水平标本。 2.普通干燥管收集，2-8℃可保存7天；-20℃可保存1个月，不可反复冻融。 3. 一次检测标本用量为50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多 预留一些，则每天至少需要300uL样本，总共需1.5mL。因标本量小，且装在 同一子弹头及日立杯中，在操作过程中应避免不必要的蒸发。（此处计算的是 最少用量，如果标本有富余应多分装一些子弹头）
定量检验的分析性能验证解读
定量检验的分析性能验证解读定量检验是一种用于评估分析方法性能的常见方法。
它可以通过比较分析结果与已知参考值或者其他分析方法的结果来评估分析方法的准确性、精确性、灵敏度和特异性等性能指标。
该方法可应用于各种领域，如医学诊断、环境监测和药物研究等。
在进行定量检验之前，首先要确定所需评估的指标。
常见的指标包括准确性、精确性、线性度、回归分析、检出限、可测限、准确度和灵敏度等。
准确性是指分析结果与真实值之间的关系，可以通过比较结果与标准物质的浓度来评估。
精确性是指同一样本的多次分析结果之间的一致性，可以通过重复分析多个样本来进行评估。
线性度是指分析方法在一定浓度范围内是否具有良好的线性关系。
回归分析可以用来评估分析结果与已知浓度之间的关系。
检出限是指分析方法能够检测到的最低浓度。
可测限是指分析方法能够可靠测定的最低浓度。
准确度是指分析结果与真实值之间的偏差，可以通过比较结果与已知浓度的平均偏差来评估。
灵敏度是指分析方法对样品中低浓度物质的检测能力。
在进行定量检验时，首先要选择合适的参考标准或者与之比较的分析方法。
参考标准可以是已知浓度的标准物质，也可以是其他公认准确、精确的分析方法。
然后，使用待测试的分析方法来分析一组样本，并将结果与参考标准或者其他分析方法的结果进行比较。
根据比较结果，可以评估分析方法的性能，并判断其是否符合要求。
在解读定量检验的结果时，需要综合考虑各种指标的评估结果。
如果分析结果与参考标准或者其他分析方法的结果非常接近，那么可以认为该分析方法具有较高的精确性和准确性。
如果分析结果在一定浓度范围内具有良好的线性关系，且与已知浓度之间有较高的相关性，那么可以认为该分析方法具有较好的线性度和回归分析能力。
如果分析方法能够可靠地检测到低浓度的物质，并具有较高的灵敏度，那么可以认为该分析方法具有较好的检出限和可测限。
如果分析结果与真实值之间的偏差较小，那么可以认为该分析方法具有较好的准确度。
总之，定量检验是一种评估分析方法性能的重要方法。
定量检验的分析性能验证
定量检验的分析性能验证定量检验是一种广泛应用于大型或小型实验室的检验方法。
它涉及根据一系列预定的准则和规则，使用各种科学方法和技术对特定样本或物质进行分析。
这种分析方法的目的是确定样品的组成、浓度或性质，并生成可靠的结果，以支持决策制定和问题解决。
分析性能验证是确保定量检验方法可靠和准确的重要步骤。
这个过程通常涉及一系列的评估和实验，旨在验证方法是否满足所需的性能指标。
以下是进行分析性能验证时应考虑的关键方面：1.精密度：精密度是测量方法在重复性条件下得到一致结果的能力。
它可以通过重复测量相同样本多次，并计算结果的标准偏差来评估。
较低的标准偏差指示了更高的精密度。
2.精确度：精确度反映了测量结果的接近真实值的能力。
它通常通过与真实值进行比较来评估，这可以通过使用已知浓度的标准物质来实现。
误差百分比是评估精确度的常用指标。
较小的误差百分比指示了更高的精确度。
3.线性范围：线性范围指的是分析方法能够准确测量样本中不同浓度的物质。
这通常通过使用一组标准溶液，涵盖所检测物质可能存在的范围来评估。
线性范围越宽，分析方法的可靠性越高。
4.检出限和定量限：检出限是指分析方法能够可靠地检测到样品中的最低浓度。
这通常通过比较测量信号与背景噪声水平来评估。
定量限是指分析方法能够准确测量样品中的最低浓度。
这可以通过比较测量信号与噪声水平的比例来评估。
较低的检出限和定量限指示了更高的检测和测量能力。
5.选择性：选择性是指分析方法能够与其他组分区分开来，这些组分可能同时存在于样品中。
这通常通过添加类似结构的干扰物质并评估其对目标组分测量的影响来评估。
较高的选择性意味着分析方法不会被其他组分所干扰。
6.可重复性：可重复性是指在不同时间或由不同操作员执行相同样品的测量时，分析方法能够得到相似结果的能力。
这可以通过分析重复样品并计算结果的变异系数来评估。
较低的变异系数表明较高的可重复性。
7.稳定性：稳定性是指分析方法在不同条件下（如温度、湿度、时间等）是否产生一致的结果。
定量检验的分析性能验证
定量检验的分析性能验证在医学诊断、科学研究、工业生产等领域中，常用定量检验的方法对物质的成分和数量进行分析。
为确保检测结果的准确性和可靠性，必须进行分析性能验证。
本文将介绍定量检验的分析性能验证的概念、目的和方法。
概念与目的分析性能验证是对定量检验方法的准确性、精密度、灵敏度、特异性等性质进行评价的过程。
其目的是通过科学合理的方法，验证检验结果的可靠性，并提高定量检验方法的准确性和可重复性，保证检验结果的正确性。
方法精密度验证精密度验证是评价检验方法的可重复性和精密度的一个重要步骤。
其一般包括以下方法：1.同日内反复检测：在同一实验室中，使用相同的仪器设备、试剂、操作人员和环境条件，一天内对同一样品进行三次或以上的检测，记录检测结果，并计算平均值和标准差。
2.不同日间反复检测：在同一实验室中，使用相同的仪器设备、试剂、操作人员和环境条件，在不同的日期上对同一样品进行三次或以上的检测，记录检测结果，并计算平均值和标准差。
3.操作员间反复检测：在同一实验室中，选择两个或以上的操作员，在相同的操作流程和条件下，选取同一样品进行三次或以上的检测，记录检测结果，并计算平均值和标准差。
针对以上方法，可以采用统计学方法进行数据分析，如计算结果的均值、标准差、变异系数、误差限等等，用于评价检验方法的精密度。
准确性验证准确性验证是评价检验方法的测量误差和偏差的重要步骤。
以下是准确性验证的两种主要方法：1.对标准试品进行测定：使用已知浓度的标准试品，使用检验方法进行测定，与标准值进行比较，计算误差和偏差。
2.对不同样品进行测定：对不同样品进行测定，测定结果与真实值进行比较，计算误差和偏差。
灵敏度验证灵敏度验证是评价检验方法检测物质的最小浓度或最小可检测量的一个重要步骤。
常用方法有以下两种：1.构建标准曲线：使用目标物质的不同浓度的标准试品，使用检验方法进行测定，绘制标准曲线，根据曲线的斜率和截距计算最小检测限。
2.进行稀释：对于样品有浓度范围的情况，对样品进行适当稀释，保证测定结果在标准曲线的线性范围内。
药物定量分析与分析方法验证
（1）直接滴定法 D% = V ×F × T/W ×100% F = 实际标定的浓度/规定的浓度
（2）间接滴定法（回滴定法；剩余滴定法）
D% = （VO – VB) ×F ×T/W ×100%
1．乙酰水杨酸的含量测定：取本品，准 确加入氢氧化钠滴定液，水浴 上煮沸15min，放冷后以酚酞为指示剂，用硫酸 滴定液(0.25mol/L, F=1.004)滴定，并将滴定结 果用空白实验校正，每1ml氢氧化钠滴定液 (0.5mol/L)相当于乙酰水杨酸。样品消 耗硫酸滴定液， 空白消耗，求本品的含量？
对乙酰氨基酚的含量测定：取本品，精密称定 （），置500mL量瓶中，加甲醇100mL 溶解，加水至刻度，摇匀。精密吸取5mL，置 100mL量瓶中，加水至刻度，作为供试液。另用 相同溶剂配制对乙酰氨基酚对照液 （），于244nm处，以水为空白，分 别测定供试液和对照液的吸光度，按公式10C （A样/A对）计算供试品中对乙酰氨基酚的mg数。 式中C代表对照液浓度。测得供试液的吸光度为 ，对照溶液为。计算对乙酰氨基酚的 百分含量？并解释上述计算公式中10的由来?
2．盐酸氯丙嗪片剂的含量测定：取本品20片， 精密称定为，研细，精密称取片 粉，置于500ml量瓶中，加酸及水溶解并稀释至 刻度，取上清液，置100ml量瓶中，加水 至刻度，在254nm测得吸收度为，已知盐 酸氯丙嗪在254nm的E为915，标示量为50mg/ 片，计算标示量百分数？
复方酮康唑乳膏中丙酸氯倍他索的含量测定：按HPLC法， 取本品约4 g，精密称定（）,加无水乙醇适量， 水浴加热使溶解，并稀释至，滤过，精密量取续 滤液10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取丙酸氯 倍他索对照品适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀 释制成每1 ml中含丙酸氯倍他索的溶液，摇匀， 同法测定。按外标法以峰面积计算。测得对照液中丙酸氯 倍他索的峰面积为778；供试液中丙酸氯倍他索的峰面积 为768。已知乳膏规格：10mg酮康唑和丙酸氯倍 他索/g，计算丙酸氯倍他索相当于标示量的百分含量?
定量分析方法概述
（一）滴定分析法
T(滴定度):1ml滴定液(m mol/L)相当于被测 药物的毫克数
（一）滴定分析法
（一）滴定分析法
呋塞米原料药含量测定
取本品0.4988g（干燥品），加乙醇30ml，微温使溶解，放 冷，加甲酚红指示液4滴与麝香草酚蓝指示液1滴，用氢氧
化钠滴定液（0.1003mol/L）滴定至溶液显紫红色，消耗氢
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
A 1 V D 1% E1cm 100 含量% 100% m
0.582 1 100 250 5 100% 99.05% 715 100 0.0411
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度，摇 匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度，摇 匀。照紫外-可见分光光度法，在271nm波长处测定吸光度为
测得量 回收率% 100% 加入量 取样量
取样量
原料药 可用已知纯度的对照品或供试品进行测定 用本法所得结果与已知准确度的另一个方 法测定的结果进行比较。
制剂：考察其他组分和辅料对回收率的影响 •①用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。 •②可向制剂中加入已知量的被测物进行测定 （加样回收率） •③用本法所得结果与已知准确度的另一个方法 测定结果进行比较。
本品含量合格
(二）分光光度法
供试品溶液的浓度CX
1.单位的统一 2.样品有没有稀释 3.表示方法
供试品溶液的浓度CX
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
精密称取对乙酰氨基酚0.04110g，置250ml量瓶中，加0.4%氢 氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置 100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀 。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。按 C8H9NO2的百分吸收系数为715计算对乙酰氨基酚的百分含量
(完整版)第三节定量分析方法评价
定量分析方法 评价指标
一、灵敏度(Sensitivity)
反映了仪器或方法识别微 小浓度或含量变化的能力，也 就是说，当浓度或含量有微小 变化时，仪器或方法均可以觉 察出来。
(一) 定义：
被测物质单位浓度或单位质量的变化引 起响应信号值变化的程度。
S dx 或 S dx
dc
dm
dc 是被测物质的浓度的变化量 dm 是被测物质的质量的变化量 dx 响应信号的变化量
(一) 表示
准确度常用相对误差量度
Er
x
100 %
x：被测物质含量的测定值，
：被测物质含量的真值或标准值。
(二) 作用
(1) 制备标准物质。 (2) 在建立新的分析方法时，对标准
物质的测量可找出误差的来源， 并通过空白分析和仪器校正来消 除误差。
五、选择性(Selectivity)
定义：是指某种分析方法测定某组分时能 够避免试样中其他共存组分干扰的能力。
(二) 影响灵敏度的因素
(1) 校正曲线的斜率：灵敏度实 际上就是标准曲线的斜率，标准 曲线的斜率越大，方法的灵敏度 就越高。
(2) 分析的重现性或精密度。
二、精密度(Precision)
使用同一方法或步骤，对同一 试样进行多次重复测量所得分析数 据之间符合的程度。
(一) 标准偏差
(Absolute standard deviation),s
B. 只有当有用的信号大于噪音信号时，仪 器才有可能识别有用信号。
例如：光学分析法
可以与空白信号区别的最小测定信号XL _
X L X b ksb
Xb ：空白信号的平均值 sb: 空白信号的标准偏差 k: 根据一定的置信水平确定的系数，
定量项目分析性能验证
可报告范围
根据检验目的、预期用途等选择需要验证的性能特征
分析性能验证
生物参考区间
灵敏度/检出限
稀释倍数验证
分析特异性
（含干扰物）
• 实验室的参考区间可依据厂家说明书也可依据权威文献，
如存在地区、人群等差异，应自行验证
某些项目的诊断灵敏度对辅助临床诊断、监测病情、判断
预后有价值
• 对于需要稀释的样本，应对稀释样本进行验证，才可将可报告
验证实验数据计算获得批内不精密度 ，总不精密度1 ；
与厂家声明相比较 or 与实验室质量目标相比较？
➢ 性能验证的目的，是为了确定实验室现行方法能够满足临
床实验室对分析性能的要求。
➢ 在模拟日常操作的情况下，满足实验室质量目标即可。
结果判读——精密度
• CLIA’88 允许总误差或卫生部室间质量评价标准
2.普通干燥管收集，2-8℃可保存7天；-20℃可保存1个月，不可反复冻融。
3. 一次检测标本用量为50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多
预留一些，则每天至少需要300uL样本，总共需1.5mL。因标本量小，且装在
同一子弹头及日立杯中，在操作过程中应避免不必要的蒸发。（此处计算的是
定度，则验证通过。
其中室间质评样品的不
确定度为
=
若参 ＞参考物质的不确
定度，则需计算验证区
间。
结果判读——线性范围
• 用两次均值画图，拟合线性回归线，计算相关系数 2 。
Hale Waihona Puke ➢ 若 2 ＞0.995，则可初步判读厂家声明的线性范围符合要求
➢ 若否，则应根据均值散点图确定，是采用扩大样本数量或重复检测次数
定量方法确认报告
定量方法确认报告1. 引言定量方法确认报告是一种用于验证和确认定量分析方法的有效性和可靠性的文档。
在研究和实践中，定量方法的正确性和准确性对于决策和预测具有重要意义。
本文将介绍编写定量方法确认报告的步骤和要点。
2. 方法选择在编写定量方法确认报告之前，首先需要选择适合的定量方法。
根据研究目的和数据特点，可以选择合适的统计方法，例如描述统计、假设检验、回归分析等。
在方法选择时，需要考虑方法的适用性、可靠性和有效性，以确保最终结果的准确性。
3. 数据收集数据收集是定量方法确认报告的关键步骤之一。
在此步骤中，需要明确收集的数据类型和来源，并设计合适的数据采集方法。
例如，可以使用问卷调查、实验观测或者数据挖掘等方式收集数据。
对于每一种数据类型，需要制定相应的数据收集计划，并确保数据的完整性和准确性。
4. 数据预处理在进行定量方法确认之前，通常需要对原始数据进行预处理。
数据预处理包括数据清洗、数据转换和数据归一化等步骤。
数据清洗是指检查和修正数据中的错误、异常和缺失值。
数据转换是指将数据转化为适合分析的形式，例如通过对数据进行标准化或者对数变换。
数据归一化是指将不同尺度的数据统一到相同的范围内，以避免由于数据尺度不同而导致的偏差。
5. 方法验证在定量方法确认报告中，需要对选择的定量方法进行验证。
方法验证是指通过对已知数据或者模拟数据进行分析，来验证定量方法的准确性和可靠性。
可以通过比较实际观测值和预测值之间的差异，或者通过模拟实验来评估方法的性能。
在方法验证过程中，需要注意选择合适的指标和评价方法，以客观地评估方法的优劣。
6. 结果分析在定量方法确认报告中，需要对方法验证的结果进行详细的分析和解释。
分析结果应该包括定量方法的准确性、可靠性和有效性等方面的评估。
可以使用图表、统计指标和描述性分析等方法，来直观地展示和解释结果。
同时，需要对结果的不确定性和局限性进行讨论，以提高研究的可信度。
7. 结论和建议定量方法确认报告的最后一部分是结论和建议。
定量检测项目的性能验证
实验室原因
图片来自：《全国临床生化正确度验证EQA/PT 》
（卫计委临检中心生化室主任 张传宝）
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一、定量检测性能验证的要求 二、定量检测性能验证的实施 三、个人体会及总结
14
性能验证
精密度 正确度 线性范围 可报告范围 生物参考区间
16
正确度验证
ISO 15189: 5.3.1.4
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正确度确认
正确度确认 配套系统：溯源性文件和正确度验证计划
18
溯源性
5.3.1.4 设备校准和计量学溯源 计量学溯源性应追溯至可获得的较高计量学级别的参考物质或 参考程序。 注：追溯至高级别参考物质或参考程序的校准溯源文件可以由 检验系统的制造商提供。只要使用未经过修改的制造商检验系统 和校准程序，该份文件即可接受。 参考： CNAS-CL06《测量结果的溯源性要求》 CNAS-GL18《量值溯源要求在医学测量领域的实施指南》
量值溯源的实现
物质 校准/赋值 方法
实施
国际单位定义 一级校准品
溯
二级校准品
源
工作校准品
产品校准品
常规样品
一级参考方法 二级参考方法
厂商选择检测方法
厂商常备检测方法 用户常规的检测方
法
厂
家
实
验标 室准化
量 值
实 验 室
传 递
不确定度
结果
配套系统具有较好的溯源性
• 完整的分析系统有明确的系统性能标准和方法特征， 为实验室规定了分析系统的使用范围、样本种类、配 套试剂与校准品，及明确的系统性能标准和方法特征。
线性范围（测量范围）
药物定量分析与分析方法验证
方法验证的内容与步骤
准确度
通过对比已知浓度的样品测量值 与真实值，评估方法的准确度。
精密度
通过多次测量同一样品，评估方 法的重复性和再现性。
专属性
验证方法是否能够区分目标成分 与其他物质的干扰。
耐用性
验证方法在不同条件下的稳定性 及变化程度。
范围
验证方法适用的浓度范围。
线性
验证方法在一定浓度范围内的响 应是否呈线性关系。
响应值应无明显交叉干扰，能够准确区分目标物质与杂质。
专属性验证结果
根据响应值判断分析方法的专属性是否符合要求。
检测限与定量限验证
检测限与定量限验证方法
逐渐降低样品浓度，观察信号响应值的变化。
检测限与定量限验证要求
检测限和定量限应满足预设的灵敏度要求。
检测限与定量限验证结果
根据信号响应值判断分析方法的检测限与定 量限是否符合要求。
分析方法验证的意义
分析方法验证是确保药物定量分析结果准确可靠的重要手段。通过验证，可以证明所选用 的分析方法适用于该药物的分析，并确保其在各种条件下的稳定性和可靠性。
当前发展状况
随着科学技术的发展，药物定量分析的方法和技术也在不断进步。目前，高效液相色谱法 、气相色谱法和质谱法等先进技术已被广泛应用于药物定量分析中，大大提高了准物质进行多次测定，计算相对标准偏 差（RSD）。
精密度验证要求
RSD应符合预设的接受范围，通常不超过±5%。
精密度验证结果
根据RSD大小判断分析方法的精密度是否符 合要求。
专属性验证
专属性验证方法
采用具有相似结构或相同成分的物质进行测定，比较其响应值。
专属性验证要求
中药有效成分的定量分析
中药是我国传统医学的重要组成部分， 中药有效成分的定量分析对于确保中 药质量和临床疗效具有重要意义。
医院医疗定量检验分析性能验证与确认要点分析
《WS/T 420-2013 临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》 《WS/T 492-2016 临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》
CLSI EP15-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南第二版》
方法-精密度
精密度---判断标准
➢ 批内精密度＜1/4TEa或说明书给出允许CV为符 合
质控和校准 品
同一批号
有效期
稳定期
验证的标本 标准物质 临床样本 外借样本 质控品
常用小工具 和耗材
加样枪校 准
新的枪头
新的反应 杯
干净的滴 定管
性能验证的过程
法规 法
方法
标准文件 科室管理体系
文件 试剂盒说明书
精密度
正确度 线性范围/临 床可报告范围 生物参考区间
法规
法规
标准文件
科室管理体系文 件
CLSI EP15-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南第二版》方源自-精密度精密度---方案2
➢ 重复性：每个浓度样本批内重复测定20次，使用浓度对数值计算不 同浓度时的测量精密度
➢ 中间精密度：每个浓度样本连续测定20天，每天测定1次 ➢ 获得的数据按照《WS/T 420-2013 》或《WS/T 492-2016 》或
背景
美国【临床实验室标准化协会】 CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）
➢ 大多数国家包括中国都部分依赖CLSI发布的方法和标 准指南
➢ EP16-A、EP5-A、C28
性能验证（verification）
验证：通过提供客观证据证明特定的要求得到满足的认定 （“verification”： broadly as “confirmation through the
定量分析方法的评价指标
定量分析方法的评价指标
定量分析方法是研究者用来收集、分析和报告数据的一种方法。
它可以帮助研究者更好地理解研究问题，并为研究者提供有用的信息。
定量分析方法的评价指标是用来衡量定量分析方法的有效性和可靠性的指标。
首先，定量分析方法的准确性是一个重要的评价指标。
准确性指的是定量分析方法的结果是否准确，是否能够准确反映研究问题。
准确性可以通过比较定量分析方法的结果和实际情况来评估。
其次，定量分析方法的可靠性也是一个重要的评价指标。
可靠性指的是定量分析方法的结果是否可靠，是否能够反映出研究问题的真实情况。
可靠性可以通过重复定量分析方法的结果来评估。
此外，定量分析方法的可操作性也是一个重要的评价指标。
可操作性指的是定量分析方法的结果是否易于操作，是否能够有效地解决研究问题。
可操作性可以通过比较定量分析方法的结果和其他方法的结果来评估。
最后，定量分析方法的可解释性也是一个重要的评价指标。
可解释性指的是定量分析方法的结果是否易于解释，是否能够清楚地表达研究问题的结果。
可解释性可以通过比较定量分析方法的结果和研究者的解释来评估。
总之，定量分析方法的评价指标包括准确性、可靠性、可操作性和可解释性。
这些指标可以帮助研究者更好地理解定量分析方法，并为研究者提供有用的信息。
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COM.50000 Reference Intervals •
方法确认的支持性文件
定量实验室方法的初步评价 （CLSI EP10） 临床化学设备操作精密度评价 （ CLSI EP5） 用患者标本进行方法学比较和偏倚评估 （ CLSI EP9） 定量分析方法的线性（ CLSI EP6） 临床化学干扰试验 （ CLSI EP7） 基质效应的评价 （ CLSI EP14）
–可报告范围的确认 (线性) –参考值的确认 (正常值范围)
方法的评价的主要内容
对于更改的中等和高度复杂性或实验室开发的试 验，要增加二项内容： – 分析方法的灵敏度Analytical sensitivity (limit of
detection)
–分析方法的特异性Analytical specificity
精密度和准确度性能的用户证实 (EP15-A)
CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute
方法的评价的主要内容
方法确认= 评价误差 总误差 = 系统误差 +随机误差 . 方法确认的基本内容: –评价不精密度 (随机误差)
–评价不准确度 (系统误差)
管理机构的要求
《医疗机构临床实验室管理办法》检查细则 （通用要求）
医疗机构临床实验室应当保证检测系统的完整性
和有效性，对需要校准的检验仪器、检验项目和对
临床检验结果有影响的辅助设备定期进行校准。
CAP-LAP的要求
COM.40300 Analytic Accuracy/Precision Phase II
•
The laboratory verifies or establishes analytic accuracy and precision for each test.
Phase II The laboratory verifies or establishes the analytic sensitivity (lower detection limit) of each assay, as applicable. Phase II Phase II The laboratory verifies or establishes analytic interferences for each test
TEST METHOD VALIDATION
方 法 确 认
学习和讨论内容
管理机构的要求 方法确认的支持性文件 方法的评价的主要内容
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ALB试剂说明书
ALB试剂说明书
管理机构的要求
2003年1月24日,美国医医疗服务中心 (CMS、 the Final CLIA Rule) 公布. 陈述： “实验室的分析方法（non-waived）必须要确认其性能.”
3. Non-waived, modified (or in-house developed) tests. (更
ห้องสมุดไป่ตู้改中度或高度试验或开发的试验)
管理机构的要求
Non-waived,未更改的中等和高度复杂性 化学、血液学etc.要求进行四个方面的方法确认 1.重复性实验 Replication experiment (estimate imprecision) 2.方法学的比较Comparison of methods (estimate inaccuracy) 3.线性实验Linearity experiment (reportable range) 4.参考值的确认Establish reference intervals.
管理机构的要求
Non-waived tests更改的中等和高度复杂性或实验室开发的试
验，要求进行六个方面的方法确认
1.Precision 精密度 2.Accuracy 准确度
3.Reportable range 可报告范围 4.Reference Intervals 参考值范围 5.Analytical sensitivity (detection limit) 分析灵敏度（最低检测值） 6. Analytical specificity (interfering substances) 分析的特异性（干扰物质）
不精密度
CLIA88推荐最大测量不精密度
不正确度
大批检测结果的均 值与真值的一致程度
与系统误差有关，常
用偏倚表示不正确度
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测量不正确度与检测系统的关系
管理机构的要求
使用美国食品及药物管理局认可的但未更改的方法，
实验室要证实其方法的性能与生产厂家所建立方法的性能
进行比较。
管理机构的要求
CLIA 是根据分析方法的复杂性，方法分为三大类: 1. Waived tests (豁免试验) 2. Non-waived unmodified tests – moderate and high complexity tests (中度或高度试验)
(interfering substance)
不精密度
指同一样本在一定条件下多次重复测定得到的一系 列单次测定值之间的接近程度，是表示测定结果中随机误 差大小程度的指标。
用标准差和变异系数描述不精密度的大小
不精密度
1.计算批内（间）不精密度(CV或SD), 并将与厂家批内 （间）不精密度比较 2.计算总不精密度(CV或SD)，并将与厂家总不精密度比 较 3.不精密度分析目标进行比较
COM.40400 Analytic Sensitivity •
COM.40500 Analytic Interferences COM.40600 Reportable Range •
The reportable range (analytic measurement range) is verified/established for each analytic procedure before implementation Phase II The laboratory establishes or verifies its reference intervals (normal values).