探究影响酶活性因素
实验七探究影响酶活性的因素
实验七探究影响酶活性的因素一、实验目的:1.探究不同温度和PH对酶活性的影响;2.培养实验设计能力。
二、探究温度对酶活性的影响(一)实验原理:1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C(二)方法步骤:1、取3支试管,编上号(A、B、C),然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液;2、另取3支试管,编上号(a、b、c),然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液;3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,分别放入热水(约600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度5min;思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液,这是为什么?4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min;5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录;思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象?思考题3、通过上述实验,你能得出什么结论?思考题4、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么?三、探究PH值对酶活性的影响(一)实验原理:思考题5、请依据下面所列实验操作步骤,写出该实验的实验原理。
思考题6、请在上表中填入你所观察到的实验现象。
思考题7、通过上述实验,你能得出什么结论?思考题8、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是什么?思考题9、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果?为什么?探究影响酶活性的因素四、与酶有关的曲线解读(一)表示酶高效性的曲线:1、催化剂可 化学反应速率,与无机催化剂相比,酶的催化效率更 。
2、酶只能 达到化学平衡所需时间,不改变化学反应的 。
3、酶只能催化 的化学反应。
(二)表示酶专一性的曲线:1、在A 反应物中加入酶A ,反应速率较未加酶时明显 ,说明酶A 催化底物A 参加反应。
2、在A 反应物中加入酶B ,反应速率和未加酶时 ,说明酶B 不催化底物A 参加反应。
探究影响酶活性的因素
酶的特性一、课程目标分析本节课是在对酶的作用和本质已有较深理解,并且通过实验已对酶的催化效率有了感性认识的基础上实施的。
通过本节课的学习,应了解酶的概念,理解酶的特性,领悟探究酶的特性的科学研究方法,比如变量的控制、定性说明基础上的定量探究等。
由于新课程倡导探究性学习的理念,强调让学生具有较强的生物学实验的操作技能、收集和处理信息的能力、以及交流与合作的能力等,可以说对酶的特性的学习是感悟新课程理念的范例,因此在苏教版和人教版的教材中,都有探究酶的特性及活性受温度和酸碱度影响的实验。
当然本节内容成为历年高考的重点也是情理之中,比如04年上海卷考查了胰蛋白酶对底物的分解速度和温度之间的关系、05年江苏卷考查了探究酶的高效性的实验、06年广东卷考查了探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验等。
此外,同学们在学习本节内容的过程中,还可开展研究性学习,研究酶与人类生活的关系,开阔自己的眼界,更好地体会新课程理念。
二、学习方法建议1、与无机催化剂比较认识酶的特性------高效性同学们对酶的认识有限但对催化剂的特点、作用条件比较熟悉。
催化剂是在化学反应中能增大反应速率,但本身的化学性质和质量在反应前后都没有发生变化的物质。
无机催化剂催化反应时有时需加热、加压如工业合成氨。
而生物体内的代谢主要是在细胞内进行的,细胞内的环境是一个常温、常压的状态,这种环境状态下发生的化学反应,应该有适合的生物催化剂。
可见同样是催化剂但作用的特点是不同的。
比如生物催化剂过氧化氢酶和无机催化剂Fe3+需都能催化H分解为H,但列表比较后会发现:通过对表格中信息的分析,联系上节课中的实验 ------ 比较过氧化氢酶在不同条件下的分解,与无机催化剂比较,认识酶的高效性。
2、根据蛋白质结构和功能关系理解酶的特性------专一性酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物,其中绝大多数酶是蛋白质。
由于氨基酸种类、数目、排列顺序和肽链数目及空间结构的不同,就形成了分子结构不同、各具特定空间构型的蛋白质,蛋白质的分子结构是蛋白质功能的物质基础。
探究影响酶活性的因素
2.实验步骤和结果 (1)探究温度对酶活性的影响
序号
实验操作内容
试管1
试管2
试管3
1 加入等量的可溶性淀粉溶液
2 mL
2 mL
2 mL
60 ℃热水(5分钟
2
控制不同的温度条件
沸水(5分钟) 冰块(5分钟)
)
1 mL(5分钟 3 加入等量的新鲜淀粉酶溶液 1 mL(5分钟) 1 mL(5分钟)
)
4
产物总量也不会1 2增3加4 5
解析
答案
(4)生物体内酶的化学本质是__蛋__白__质__或__R__N_A, 其特性有__高__效__性__、__专__一__性_(答出两点即可)。
12345
解析
答案
(排除温度干扰),且将酶溶液的pH调至 预设 pH后再 滴入,
不宜在未达到预设pH前,让反应物与酶接触。
过氧 化氢
过
过酶
氧
氧
化
化
氢
氢
酶
酶
关键点拨
1.实验材料选择时的注意事项 (1)在探究温度对酶活性的影响的实验中,不宜选择过氧化氢 (H2O2)和过氧化氢酶作为实验材料,因为过氧化氢(H2O2)在常 温常压时就能分解,加热的条件下分解会加快,从而影响实 验结果。 (2)在探究pH对酶活性的影响实验中,不宜选用淀粉和淀粉酶 作为实验材料,因为在酸性条件下淀粉本身分解也会加快, 从而影响实验结果。
长句应命题探究 答突破简答 题
如图为不同条件下,某酶促反应生成物的浓度随时间的变化曲线,请分析:
1.若表示的是不同催化剂条件下的反应,③是不加催化剂, ②是加无机催化剂,①是加酶,这体现了酶的高效性, 酶具有该特性的原理是同无机催化剂相比,酶能显著降低化 学反应的活化能。
酶活性下降的因素
酶活性下降的因素
1. 温度:酶活性受温度影响较大,过高或过低的温度会使酶蛋白变性,使酶活性降低甚至失效。
2. pH值:酶对不同pH值的适应能力不同,过高或过低的pH值也会使酶失去催化活性。
3. 底物浓度:当底物浓度过高时,底物与酶蛋白竞争吸附在反应活性位点上,使酶反应速率降低。
4. 抑制剂:一些物质可以通过反应活性位点、非竞争性抑制或竞争性抑制等机制影响酶催化活性,从而使酶活性降低。
例如,氰化物可与酶中的铁离子结合,阻止酶催化作用。
5. 酶蛋白结构变化:酶蛋白结构的变化可能由于氧化、还原、水解等作用而发生。
此时,酶的结构和性质发生改变,酶活性下降。
6. 缺乏辅因子:某些酶需要辅因子才能发挥催化作用。
如果辅因子缺乏,则酶无法正常催化反应。
7. 物种差异:不同物种的酶结构和催化机制不同,因此对环境因素的适应性也不同,会导致酶活性差异。
8. 原始酶活性:所有的酶都是通过自发变异、天然选择等过程演变而来,原始酶活性可能不够优异,随着时间的推移,其活性可能会降低。
高中生物实验探究影响酶活性的因素
实验探究影响酶活性的因素
原理:淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。
淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物。
1、材料:新配置的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。
2、步骤:
(1)探究温度对酶活性的影响
温度对酶活性的影响
在温度对酶活性的影响的实验中,三支试管的条件,除温度外均相同。
3号试管处在60℃的温度条件下,酶活性最大,试管中的淀粉被分解,滴入碘液后不会变蓝。
2号试管的温度条件是100℃,这样高温度条件下,淀粉酶已失去活性,1号试管的温度条件是O℃,低温抑制淀粉酶的活性。
所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解,滴上碘液后都会变蓝,此实验可以证明;酶的催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性。
(2)探究pH对酶活性的影响
实验1 过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下,可以分解成水和氧气,可以放入带火星的木条,看能否复燃来检测是否有氧气产生。
2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在过低或过高pH环境中,过氧化氢酶失去活性,不能使过氧化氢分解,没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱,溶液近似中性,过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气,使木条复燃。
影响酶活性的因素
2022年高考生物总复习:影响酶活性的因素方法1 用“试剂检测法”鉴定酶的本质可采用“试剂检测法”或“蛋白酶水解法”确认酶的化学本质——若酶为蛋白质,则遇双缩脲试剂可呈紫色,并且用蛋白酶处理可失活。
同理若为RNA ,则遇吡罗红呈红色,且用蛋白酶处理仍具生物活性,而用RNA 水解酶处理会丧失活性。
方法2 用“对比实验法”探究或验证酶的高效性、专一性及影响酶活性的因素 (1)验证酶的高效性 ①设计思路验证酶高效性的方法是“对比法”,实验变量为不同类型催化剂,因变量为底物的反应速率进行比较。
②设计方案(2)酶的专一性的实验探究方法——对比法①设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
②设计方案方案一⎩⎪⎨⎪⎧实验组:底物+相应酶液――→检测底物被分解对照组:另一底物+相同酶液――→检测底物不被分解方案二⎩⎪⎨⎪⎧实验组:底物+相应酶液――→检测底物被分解对照组:相同底物+另一种酶液――→检测底物 不被分解③结果分析:根据底物性质选用相应试剂检测,若实验组底物被分解,对照组底物不被分解,则证明酶具专一性。
④实验成功关键点若选择淀粉、蔗糖、淀粉酶做酶的专一性实验,最好选用斐林试剂检测反应物是否被分解,一般不选用碘液,因其无法检测蔗糖是否被分解。
方法3用“梯度法”探究影响酶活性的因素(温度或pH)(1)设计思路:设计实验时需设置一系列不同温度(或pH)的实验组进行相互对照,最后根据实验现象得出结论。
酶促反应所需时间最短的一组对应的温度(或pH)最接近最适温度(或pH)。
相邻组间的差值(即梯度值)越小,测定的最适温度(或pH)就越精确。
(2)设计方案【典例1】(2016·全国课标卷Ⅰ,3)若除酶外所有试剂已预保温,则在测定酶活力的试验中,下列操作顺序合理的是()A.加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量B.加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量C.加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量D.加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量解析测定酶活力影响因素时,在改变被探究因素之前,务必防止酶与底物混合,故只有C选项所述操作顺序正确。
[实验7] 探究影响酶活性的因素
[实验7]探究影响酶活性的因素
酶活性受到多种因素的影响,以下是一些常见的影响因素:
1. 温度:酶活性通常随温度的升高而增加,直到达到最适温度,然后随着温度继续升高,酶活性会迅速下降。
这是因为较低温度下活性中心的活动较慢,而较高温度下活性中心会变性失活。
2. pH值:不同的酶对于特定的pH范围敏感。
这是因为活性
中心上的氨基酸残基在酶活性中起到关键作用,并且它们的离子化状态受到pH的影响。
在不适宜的pH条件下,活性中心
的结构可能会受到破坏,从而影响酶的活性。
3. 底物浓度:在底物浓度较低的条件下,酶的活性通常会随着底物浓度的增加而增加,直到达到饱和点。
在饱和点之后,酶的活性不再随底物浓度增加而增加。
4. 抑制剂:某些化合物可以抑制酶的活性。
有两种类型的抑制剂,一种是可逆抑制剂,另一种是不可逆抑制剂。
可逆抑制剂的结合可以解除,从而恢复酶的活性;而不可逆抑制剂与酶结合是永久性的,无法恢复。
这些影响因素可能会相互作用,并对酶活性产生复杂的影响。
因此,在实验中探究影响酶活性的因素时应综合考虑这些因素的影响。
实验报告影响酶活性的因素
实验报告影响酶活性的因素实验报告影响酶活性的因素酶是一类生物催化剂,能够加速化学反应的速率。
在生物体内,酶参与了许多重要的生化过程,如新陈代谢、消化和免疫等。
了解酶活性的影响因素对于理解生物体的正常功能以及疾病的发生机制具有重要意义。
本文将从温度、pH值、底物浓度和酶浓度四个方面来探讨实验报告对酶活性的影响。
一、温度对酶活性的影响温度是影响酶活性的重要因素之一。
在适宜的温度范围内,酶活性会随温度的升高而增加,因为高温能够提高酶分子的动力学能量,使其与底物发生更多的碰撞。
然而,当温度超过酶的适宜范围时,酶的活性会迅速下降,甚至失活。
这是因为高温会破坏酶分子的三维结构,使其失去催化功能。
因此,在实验报告中,我们需要控制好温度,以保证酶活性的准确测定。
二、pH值对酶活性的影响pH值是指溶液的酸碱程度,也是影响酶活性的重要因素之一。
不同的酶对pH值的要求不同,有些酶在酸性环境中活性较高,而有些酶则在碱性环境中活性更高。
这是因为酶的活性与其分子结构密切相关,而pH值能够改变酶分子的电荷状态,从而影响其催化活性。
在实验报告中,我们需要在不同的pH值条件下测定酶的活性,以确定其最适宜的工作条件。
三、底物浓度对酶活性的影响底物浓度是指在酶催化反应中底物的浓度,也是影响酶活性的重要因素之一。
在一定范围内,底物浓度的增加会使酶活性逐渐增加,因为更多的底物能够与酶分子发生碰撞,从而增加反应速率。
然而,当底物浓度超过一定限制时,酶活性将不再增加,因为酶的活性受到底物浓度的饱和限制。
在实验报告中,我们需要确定底物浓度与酶活性之间的关系,以了解酶催化反应的动力学特性。
四、酶浓度对酶活性的影响酶浓度是指在酶催化反应中酶的浓度,也是影响酶活性的重要因素之一。
一般来说,酶浓度的增加会使酶活性逐渐增加,因为更多的酶分子能够与底物发生碰撞。
然而,当酶浓度超过一定限制时,酶活性将不再增加,因为酶的活性受到酶浓度的饱和限制。
在实验报告中,我们需要确定酶浓度与酶活性之间的关系,以了解酶催化反应的动力学特性。
探究影响酶活性的因素
下表为某同学做的探究pH对酶活性影响的实验:
试管编号
A
B
实 1 加入2 mL体积分数为 加入2 mL体积分数
验
3%的H2O2溶液
为3%的H2O2溶液
步 2 5滴猪肝研磨液
5滴猪肝研磨液
骤
3 0.5 mL质量分数为5%的 0.5 mL质量分数为
NaOH溶液
5%的HCl溶液
4 观察气泡的产生速率 观察气泡的产生速率
上述实验设计中有两处不妥之处,请指出: a. 缺少pH=7的对照组
加入NaOH和HCl的时间顺序不合理,
b. 应在加入H2O2酶前改变溶液的pH
3.将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶
和适量的水混合装入一容器中,调整pH值至
2.0,保存于37℃的水浴锅内。过一段时间后
容器内剩余的物质是
()
A.淀粉、胃蛋白酶、多肽、水
B.唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水
C.唾液淀粉酶、麦芽糖、胃蛋白酶、多肽、水
D.唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水
谢谢
克/升,在70℃~80℃条件下作用12小时,褪浆率仅为
50%~60%;加酶法,用少量细菌淀粉酶,在适宜温度时只需5分
钟,褪浆率达100%,这一事实说明
( B)
A.酶具有多样性 B.酶具有高效性
C.酶具有专一性 D.酶具有溶解性
2.淀粉酶使淀粉水解为麦芽糖,而不能使麦芽糖水解为葡萄糖,
这一事实说明了酶的(B)
例如:鉴别蔗糖溶液和KCl溶液
1、将洋葱表皮细胞置于一定浓度的KNO3溶液 中,一段时间后用显微镜观察,未观察到质
壁分离现象。以下推测不合理的是( C )
A.所取洋葱表皮细胞可能是死细胞 B.KNO3溶液的浓度可能低于细胞液浓度 C.细胞在盐溶液中不发生质壁分离 D.细胞可能发生质壁分离后又自动复原
影响酶活性的因素
影响酶活性的因素a.温度:温度(temperature)对酶促反应速度的影响很大,表现为双重作用:(1)与非酶的化学反应相同,当温度升高,活化分子数增多,酶促反应速度加快,对许多酶来说,温度系数(temperature coefficient)Q10多为1~2,也就是说每增高反应温度10℃,酶反应速度增加1~2倍。
(2)由于酶是蛋白质,随着温度升高而使酶逐步变性,即通过酶活力的减少而降低酶的反应速度。
以温度(T)为横坐标,酶促反应速度(V)为纵坐标作图,所得曲线为稍有倾斜的钟罩形。
曲线顶峰处对应的温度,称为最适温度(optimum temperature)。
最适温度是上述温度对酶反应的双重影响的结果,在低于最适温度时,前一种效应为主,在高于最适温度时,后一种效应为主,因而酶活性迅速丧失,反应速度很快下降。
动物体内的酶最适温度一般在35~45℃,植物体内的酶最适温度为40~55℃。
大部分酶在60℃以上即变性失活,少数酶能耐受较高的温度,如细菌淀粉酶在93℃下活力最高,又如牛胰核糖核酸酶加热到100℃仍不失活。
最适温度不是酶的特征性常数,它不是一个固定值,与酶作用时间的长短有关,酶可以在短时间内耐受较高的温度,然而当酶反应时间较长时,最适温度向温度降低的方向移动。
因此,严格地讲,仅仅在酶反应时间已经规定了的情况下,才有最适温度。
在实际应用中,将根据酶促反应作用时间的长短,选定不同的最适温度。
如果反应时间比较短暂,反应温度可选定的略高一些,这样,反应可迅速完成;若反应进行的时间很长,反应温度就要略低一点,低温下,酶可长时间发挥作用。
各种酶在最适温度范围内,酶活性最强,酶促反应速度最大。
在适宜的温度范围内,温度每升高10℃,酶促反应速度可以相应提高1~2倍。
不同生物体内酶的最适温度不同。
如,动物组织中各种酶的最适温度为37~40℃;微生物体内各种酶的最适温度为25~60℃,但也有例外,如黑曲糖化酶的最适温度为62~64℃;巨大芽孢杆菌、短乳酸杆菌、产气杆菌等体内的葡萄糖异构酶的最适温度为80℃;枯草杆菌的液化型淀粉酶的最适温度为85~94℃。
影响酶活性的因素实验报告
一、实验目的1. 探究影响酶活性的主要因素。
2. 分析不同因素对酶活性的影响规律。
3. 掌握酶活性测定的方法。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质,具有高效性和专一性。
酶活性受多种因素的影响,如温度、pH值、底物浓度、酶浓度等。
本实验主要探究温度、pH值和底物浓度对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器1. 材料:淀粉酶、淀粉、蔗糖、葡萄糖、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等。
2. 仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、试管架、烧杯、滴定管、酸度计等。
四、实验方法1. 温度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别置于不同温度(如0℃、20℃、40℃、60℃、80℃)的水浴锅中预热。
(2)取等量淀粉溶液,分别加入等量的酶溶液,观察并记录反应时间。
(3)重复实验,计算不同温度下酶的活性。
2. pH值对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液分别用盐酸和氢氧化钠调节至不同pH值(如3、4、5、6、7、8、9、10)。
(2)取等量淀粉溶液,分别加入等量的酶溶液,观察并记录反应时间。
(3)重复实验,计算不同pH值下酶的活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响(1)将淀粉酶溶液置于恒温水浴锅中预热。
(2)分别配制不同浓度的淀粉溶液(如0.1g/mL、0.2g/mL、0.4g/mL、0.6g/mL、0.8g/mL、1.0g/mL)。
(3)取等量淀粉溶液,分别加入等量的酶溶液,观察并记录反应时间。
(4)重复实验,计算不同底物浓度下酶的活性。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响实验结果显示,酶活性随温度升高而增加,但在一定范围内(如20℃-60℃)达到最大值后,随温度继续升高而降低。
这表明酶活性受温度的影响,且存在最适温度。
2. pH值对酶活性的影响实验结果显示,酶活性随pH值的变化而变化。
在一定的pH值范围内(如5-7),酶活性较高,而在酸性或碱性条件下,酶活性降低。
这表明酶活性受pH值的影响,且存在最适pH值。
3. 底物浓度对酶活性的影响实验结果显示,酶活性随底物浓度的增加而增加,但在一定范围内(如0.2g/mL-0.8g/mL)达到最大值后,随底物浓度继续增加而降低。
2016.8.8探究影响酶活性的因素
A.a酶和b酶的最适温度为30 ℃左右 B.不论温度大小,酶的用量一定会影响实验结果 C.该实验中,自变量有两个,分别为温度和酶的种类 D.三种酶中较适宜高温环境的是c酶
2.某同学完成“探究pH对胰蛋白酶活性影响”实验 后,绘制了结果曲线图,根据酶的相关知识判断下列最可 能的是( )
3.利用麦芽酿造啤酒时,麦芽中 多酚氧化酶(PPO)的作用会降低啤酒质 量。如图为不同 pH 和温度对 PPO 活 性影响的曲线,有关叙述错误的是 ( ) A.PPO 催化多酚类物质的生化反应 B.相同温度时,pH 7.8 的酶促反应产物比 pH 8.4 的少 C.在制备麦芽过程中应将反应条件控制在温度 80 ℃、pH 8.4 D.高于 90 ℃,若 PPO 发生热变性,一定温度范围内温度越 高变性越快
3.无关变量:是指除自变量外,其他对实验结果能造成影 响的可变因素,如H2O2浓度、肝脏研磨液新鲜程度等。 4.对照实验:除了一个因素以外,其余因素都保持不变的 实验叫做对照实验。它一般要设置对照组和实验组。
注意 高考考查此知识时常以实验的形式出现,解答时 需首先明确实验目的,在确定实验设计思路后,选择准 确的实验衡量标准。 1.(11· 广东卷)生产中使用的普通淀粉酶的最适温度 在40~60℃之间,而极端耐热淀粉酶在100℃仍能保持 较高的活性,因此具有更为广泛的应用前景。某同学正 在设计一个实验以探究温度对两种淀粉酶活性的影响, 其中有些问题需要你的帮助。 (1)此实验中除自变量和因变量外, 还需要考虑 pH 、 酶浓度 及 底物浓度 等因素。 (2)在此实验中,因变量可以用碘液和斐林试剂检 测,两种试剂各与何种物质发生颜色反应?检测的是底 物还是产物? 碘液与淀粉反应,检测的是底物; 。 斐林试剂与还原糖反应,检测的是产物 16
探究影响酶活性的因素实验报告
探究影响酶活性的因素实验报告一、实验介绍本次实验是为了探究影响酶活性的因素,以淀粉酶为对象进行研究。
淀粉酶是一种消化淀粉的酶,分泌于胰腺和口腔两个部位。
在口腔中,淀粉酶可以分解淀粉质为葡萄糖,并改善口腔健康。
实验中我们分别以不同的酶液浓度、pH值、温度等参数对淀粉酶酶活进行观察和测量,以期研究影响酶活性的因素。
二、实验方法1、制备淀粉酶酶液将5g淀粉酶粉末加入100mL色谱纯水中,60℃加热,搅拌溶解,待完全溶解并滤除杂质后使用。
2、制备淀粉溶液将10g淀粉粉末加入100mL色谱纯水中,50℃加热,搅拌溶解,待淀粉完全溶解后,加入色谱纯水稀释至1L,即制备出淀粉溶液。
3、制备不同酶液浓度将50mL淀粉酶液分别加入50mL、40mL、30mL、20mL、10mL色谱纯水中,并标记为50倍、40倍、30倍、20倍、10倍浓度的酶液。
4、测量酶活性分别取1mL不同浓度的淀粉酶液加入试管中,再加入4mL 淀粉溶液,以50℃加热,10min后停止反应。
后加入硫酸钠溶液,恒定时间后使用紫外分光光度计测定程序中指定波长下的吸光度值(A值),以此计算出淀粉酶活性。
5、探究影响酶活性的因素- 不同浓度淀粉酶液测量酶活性- 在不同pH值下测量淀粉酶酶活性,分别以pH4、pH5、pH6、pH7、pH8、pH9为条件进行实验。
- 在不同温度下测量淀粉酶酶活性,分别以10℃、20℃、30℃、40℃、50℃、60℃为条件进行实验。
实验条件:使用同一批淀粉酶液和淀粉溶液,保证实验条件一致。
三、实验结果1、不同浓度淀粉酶液测量酶活性浓度(倍)A490值酶活性50 1.03 281.139U/mL 40 0.88 240.681U/mL 30 0.69188.493U/mL 20 0.44 119.865U/mL 10 0.18 49.180U/mL2、在不同pH值下测量淀粉酶酶活性pH值A490值酶活性4 0.58 158.470U/mL5 1.01 275.099U/mL6 1.12305.458U/mL 7 1.26 342.466U/mL 8 0.86 234.426U/mL 9 0.62 168.904U/mL3、在不同温度下测量淀粉酶酶活性温度(℃)A490值酶活性10 0.18 49.180U/mL 20 0.53 144.503U/mL 30 0.93253.924U/mL 40 1.23 334.852U/mL 50 1.42 386.578U/mL 60 1.26 342.466U/mL四、实验分析根据实验结果可以得出如下结论:1、淀粉酶酶活受浓度影响的趋势为:酶活性随着浓度的升高而增加,且不同浓度之间的酶活性有明显差异,浓度越高,酶活性越大。
探究影响酶活性的因素
1.探究温度对酶活性的影响(1)实验原理①反应原理:②鉴定原理:温度影响酶的活性,从而影响淀粉水解,滴加碘液,根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断酶的活性。
(2)实验步骤取试管分组编号(1、2、3号)→加入等量可溶性淀粉溶液→分别控制温度(60 ℃、沸水、冰块)5 min →加等量淀粉酶溶液5 min →加等量碘液→观察溶液颜色。
[思考] ①在上述实验操作中先加入等量淀粉酶再分别控制温度可行吗?为什么?提示:不可行。
因为酶具有高效性,先加入酶液后,酶在常温下就可以发挥催化作用,影响实验结果。
②上述实验的实验结果是什么?提示:1号试管溶液(60 ℃)不变蓝色,2号、3号试管溶液变蓝色。
(3)实验结论:温度影响酶的活性。
2.探究pH 对酶活性的影响(1)实验原理 ①反应原理:H 2O 2――→过氧化氢酶2H 2O +O 2(反应式)。
影响酶的活性,从而影响氧气的生成量,可用带火星的卫生香燃烧的情况来检验O 2产生量的多少。
(2)实验步骤取试管分组编号(1、2、3)→分别注入等量过氧化氢酶溶液→调节pH(分别加入等量的蒸馏水、5%的盐酸、5%的NaOH 溶液)→分别注入等量的3%的H 2O 2溶液→观察气泡产生→带火星的卫生香检验。
[思考] ①上述实验步骤中,调节pH 和注入等量3%的H 2O 2溶液能否调换?说明理由。
提示:不能调换。
酶与底物一接触,就会发生催化作用,使H 2O 2分解,影响实验结果。
②本实验观察到的实验现象是什么?提示:(3)实验结论:pH 能影响酶的活性。
角度一 以实验分析的形式,考查影响酶活性的因素1.(2013·江苏高考稍改动)为了探究温度、pH 对酶活性的影响,下列实验设计合理的是解析:选B过氧化氢受热易分解,不宜用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响,实验①不合理;蔗糖酶不能催化淀粉水解,实验③不合理;斐林试剂呈碱性,能与酸性物质发生反应,不适合用于探究pH对酶活性的影响,实验④不合理。
影响酶活性的因素实验报告
影响酶活性的因素实验报告影响酶活性的因素实验报告引言:酶是一种生物催化剂,对于生物体内的代谢过程起着至关重要的作用。
酶活性的变化会直接影响到生物体的正常功能和生命活动。
因此,研究酶活性的影响因素对于深入了解生物体的代谢机制具有重要意义。
本实验旨在探究影响酶活性的因素,并通过实验结果分析其对酶活性的影响。
材料与方法:1. 实验材料:- 酶溶液:本实验选择了过氧化氢酶作为研究对象,使用浓度为10mg/mL的酶溶液。
- 反应底物:过氧化氢(H2O2),浓度为10mol/L。
- 反应缓冲液:磷酸盐缓冲液,pH值为7.0。
- 辅助试剂:甲酚酚酞指示剂,用于检测反应的终点。
2. 实验步骤:- 步骤一:准备一系列不同浓度的过氧化氢溶液,分别为2mol/L、4mol/L、6mol/L、8mol/L和10mol/L。
- 步骤二:取一定量的酶溶液,加入磷酸盐缓冲液,使其浓度为2mg/mL。
- 步骤三:将酶溶液与不同浓度的过氧化氢溶液混合,使其反应体系的总体积为10mL。
- 步骤四:反应开始后,记录反应时间,并在适当的时间点取样。
- 步骤五:每个样品取样后,立即加入甲酚酚酞指示剂,观察颜色变化,并记结果与讨论:在本实验中,我们探究了过氧化氢浓度对过氧化氢酶活性的影响。
通过实验结果的观察和数据的分析,我们得出了如下结论:1. 酶活性随过氧化氢浓度的增加而增加:实验结果显示,随着过氧化氢浓度的增加,反应体系中酶活性逐渐增强。
这是因为过氧化氢是过氧化氢酶的底物,增加过氧化氢的浓度可以提高底物与酶的接触机会,从而增加反应速率。
2. 酶活性在一定浓度范围内达到最大值后逐渐降低:实验结果还显示,当过氧化氢浓度超过一定范围时,酶活性开始逐渐降低。
这是因为过高的过氧化氢浓度可能会导致酶的变性或失活,从而影响酶的催化效率。
3. 酶活性受pH值的影响:酶活性还受到反应体系的pH值的影响。
在本实验中,我们选择了pH为7.0的磷酸盐缓冲液作为反应缓冲液。
影响酶活性的因素实验
思考:测定人体内某些酶的活性时,反应体系中温 度、pH值应如何设定,为什么?
通过实验了解温度、pH值对酶作用的影响。
1、酶的活性受到温度、pH值的影响 2、淀粉酶可催化淀粉逐步水解生成糊精,糊 精分子的大小不同,遇碘时呈现的颜色也不 同。 3、可根据颜色判断淀粉被水解的程度,从而 判断温度、pH值对酶活性的影响。
图中物质的背景颜色表示该物质遇碘时所呈现的颜色,无 底色表示为无色透明。
试管号
1
2
3
pH3.0缓冲溶液(d) pH6.8缓冲溶液(d) pH8.0缓冲溶液(d)
1%淀粉溶液(d) 稀唾液(d) 稀碘液(d) 观察颜色
20 10 5 1
20 10 5 1
20
10 5 1
混匀,37℃水浴10分钟
1、加入稀唾液后应充分混匀。 2、滴加稀碘液时注意不可摇晃试管。 3、碘液不能滴加太多。
试管号
1
2
3
pH6.8缓冲溶液(d) 1%淀粉溶液(d) 水浴
稀唾液(d) 水浴 稀碘液(d) 观察现象(颜色)
20 10 0℃水浴5分钟
10 37℃水浴5分钟
5 混匀后37℃水浴10 分钟 1
20 10 100℃水浴5分钟
5 混匀后100℃水浴10 分钟 1
1、1%淀粉溶液 2、稀碘液 3、pH3.0、pH6.8、pH8三种缓冲溶液 4、实验器材 试管,试管夹,冰浴,沸水浴,恒温水浴锅 (37℃),吸管,滴管,试管架,记号笔,120ml烧 杯一个(或一次性纸杯)
1、制备稀释唾液 漱口后含约20ml蒸馏水在口中做咀嚼动作,3 分钟后吐入120ml烧杯或纸杯中,备用。
影响酶活性的条件实验报告
一、实验目的本实验旨在探究影响酶活性的条件,包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂等因素,并通过实验验证这些因素对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂,其活性受多种因素影响。
温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都是影响酶活性的重要因素。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响,并通过观察实验现象,分析实验结果。
三、实验材料与仪器材料:1. 酶制剂(如淀粉酶、蛋白酶等)2. 底物(如淀粉、蛋白质等)3. 抑制剂(如重金属盐、酸、碱等)4. 激活剂(如某些金属离子等)5. pH试纸、pH计6. 温度计7. 移液器8. 试管9. 水浴锅仪器:1. 紫外可见分光光度计2. 热水浴锅3. 冷水浴锅4. pH计四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将酶制剂和底物分别置于不同温度的水浴锅中预热。
- 将预热好的酶制剂和底物按一定比例混合,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
2. pH值对酶活性的影响- 使用pH试纸或pH计测定不同pH值下酶的活性。
- 将酶制剂和底物分别置于不同pH值的溶液中,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 将酶制剂和不同浓度的底物按一定比例混合,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 将不同浓度的酶制剂与底物按一定比例混合,记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化,计算酶活性。
5. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响- 将抑制剂和激活剂分别加入酶制剂和底物中,观察酶活性的变化。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响- 随着温度升高,酶活性逐渐增强,在一定温度范围内达到最大值,随后逐渐下降。
2. pH值对酶活性的影响- 酶活性在不同pH值下表现出不同的活性,存在一个最适pH值,酶活性在此pH值下达到最大值。
酶的影响因素作用机理
酶的影响因素作用机理酶活性的影响因素及作用机理:1、pH:pH值的变化影响酶的活性,高于或低于最佳pH值时,酶的活性会降低。
一般而言,酶的活性随着pH值的升高而提高,达到一定程度后,再升高pH值,酶的活性反而会降低,这称之为“pH钝化”。
此外,不同酶在不同pH值中的活性也有差异,表明酶对pH值有特定的要求。
2、水溶性离子的作用:水溶性离子的活度与酶的活性有关。
一般而言,高浓度的水溶性离子会降低酶的活性,而加入合适的离子能够增加酶活性,在已知的酶的活性阻碍,例如热力降解或PH钝化,水溶性离子的添加也可以恢复酶活性。
3、温度的作用:温度是影响酶反应速率的重要因素,一般来说,随着温度升高,酶的反应速率会逐渐增加,直到某一特定温度,此时,酶反应速率达到最大,再高于这一温度,酶会受到热力学钝化而导致活性下降。
4、氧化还原性物质:氧化还原性物质可以影响酶的活性,这些物质的氧化还原反应是使酶的活性衰减的关键因素之一。
如果氧化还原性物质的分子结构中存在可扭转的氧化还原反应,其在氧化还原反应中持续出现的电子会影响其与酶的相互作用,从而降低酶活性。
5、酰胺功能:酰胺功能可以通过特定的反应影响酶的活性,它们可以与酶分子上的氨基映射出,并通过氢键和酰胺水解反应直接降低酶活性。
6、有机溶剂的作用:有机溶剂有助于溶解有机物质,如有机酸、糖、脂肪和黏液等,从而增加对酶活性的影响,而这些有机溶剂的浓度不能过高,否则会对酶活性产生不利影响。
7、抑制剂的作用:也可以通过抑制酶的反应活性而影响酶活性,抑制剂通常是介质溶液中存在的有机物质,它们可以通过难溶性化合物、氢键或竞争反应交互作用而抑制酶活性,其中,最具有危害性的是细胞色素P450,它可以抑制我们期望促进重要生物催化反应的重要参与者。
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影响酶活性的条件
一提出问题温度和PH影响酶活性
二作出假设
1.在最适宜的温度和PH条件下,酶活性最高
2.温度和PH偏高或偏低,酶活性都会明显降低
三实验思路
1.用H2O2和肝脏研磨液,在适宜条件下,设置PH梯度进行对比实验;观察相同时间内,产生气泡多少。
2.用淀粉和淀粉酶,在在适宜条件下,设置温度梯度进行对比实验;检测淀粉剩余量。
四预期结果
1.接近体温的温度组,产生气泡最多;温度偏高和偏低,产生气泡明显减少
2.中性PH组,无蓝色;PH偏高和偏低,蓝色逐渐加深
五实验方案
1.材料用具
六.观察现象并记录
七结论
温度和PH影响酶活性:在最适宜的温度和PH条件下,酶活性最高;温度和PH偏高或偏低,酶活性都会明显降低。