无糖双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定研究
RP—HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷的含量
关 键 词 ：双 黄 连 注 射 液 ；黄 芩 苷 ；高 效 液 相 色 谱 法
中图 分 类 号 ：Ｒ ８ ． ２３ ４ 文 献标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ０ ９ ７ （ ０ ８ ３— ０ ３— ２ ０ ８— ８ Ｘ ２ ０ ）０ ０ ５ ０ 一
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Ａ ｓｒ ｃ ：Ｏｂ ｃｉ Ｔ ｅｅｏ Ｐ Ｃ ｍ ｔｏ ｏ ｔｅｄ ｔ ｍｉ ｔ ｎ ｏ ａ ａ ｎ ｉ ｓ ｕ ｎ ｈ ａ ｇ ａ ｎ ｃ ｌ ｉ ｕｄ ｂｔ ｔ ａ ｊ ｔ ｅ： ｏｄ ｖ ｌｐ ａＨ Ｌ ｅｈ ｄ ｆ ｈ ｅ ｒ ｎ ｉ ｆ ｉ ｌ ｎ ｈ ａ ｇ ｕ ｎ ｌ ｎ ｉｏ ｕａ ｏ ｆ ｉ． ｅ ｖ ｒ ｅ ａｏ ｂ ｃｉ ｉ ｔ ｎｌ Ｍｅｈ ｄ Ｔ ｅｍ ｔｏ ｓ ｄｔｅＲ ｔ ｏ ： ｈ ｅ ｄｕ ｅ Ｐ—Ｈ Ｌ ，ｔ ｈｏ ｔ ｒｐ ｉ ｃ ｌ ａ ｒｍａｉ Ｃ ８ （ ５ ４ ６ ｍ，５ ｈ ｈ Ｐ Ｃ ｈ ｃ ｒ ｏ ａ ｈｃ ｏ ｍｎｗ ｓ ｏ ｓ ｌ １ ０Ｘ ． ｍ ｅ ｍａ ｇ ｕ Ｋ ｌ ｍ） ｔｅ ｂ ｅ ，ｈ ｉ ｍｏ ｌ
Ｒ ＨＬ Ｐ— Ｐ Ｃ法测定双 黄连注射液 中黄芩苷 的含量
杨 瑞 芬 ， 彭 家钢 ， 张 远 远 ， 王 永 莫
（ 北 中 医 学 院 ，湖 北 武 汉 ４０ ６ ） 湖 ３ ０ ５
摘 要 ： 目的 建 立 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 双 黄 连 注 射 液 中黄 芩 苷 外标 定 量 的 方 法 。 方 法 采 用 Ｒ Ｐ—Ｈ Ｌ 法 ， 色 ＰＣ
实验八高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量
实验八高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量一、目的要求1．练习使用高效液相色谱仪2．学会用外标法定量分析二、实验原理外标法可分为外标一点法、外标二点法及标准曲线法。
当标准曲线截距为零时，可用外标一点法进行定量。
利用高效液相色谱法进行分离双黄连口服液中的黄芩苷，在λmax274nm 处进行检测。
在药物分析中，为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随行外标一点法定量，即每次测定都同时进对照品与供试品溶液。
三、仪器与试药1．仪器高效液相色谱仪、超声波提取器、分析天平、微量注射器、ODS-C18反相色谱柱、容量瓶（25ml，50ml）2．试药黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）、双黄连口服液（三精制药）、甲醇（色谱纯）、冰醋酸（A·R）、双蒸水。
四、实验内容与步骤1．色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水－冰醋酸（50：50：1）为流动相；检测波长为274nm。
理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于1500。
2．对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含0.1mg 的溶液，0. 45μm滤膜滤过，即得（浓度为0.1216mg/ml）。
3．供试品溶液的制备精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，0. 45μm滤膜滤过，即得。
4．样品测定分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1ml含黄芩以黄芩苷计不得少于8mg。
五、思考题1、HPLC中常用的定量方法有几种？外标一点法有何优缺点？2、紫外检测器的优缺点是什么？教你如何用WORD文档(2012-06-27 192246)转载▼标签：杂谈1. 问：WORD 里边怎样设置每页不同的页眉？如何使不同的章节显示的页眉不同？答：分节，每节可以设置不同的页眉。
文件――页面设置――版式――页眉和页脚――首页不同。
紫外-可见分光光度法测定双黄连颗粒中黄芩苷的含量
【 关键词】 紫外 一 可见分光光度法； 双黄连颗粒； 黄芩苷； 含量测定 【 中图分类号】 Ｒ 【 ９ 文献标识码】 Ａ
ＴＨＥ ＣｏＮＴ ＥＮＴ ＯＦ ＢＡＩ ＣＡＬＩ ｏＦ Ｓ Ｎ ＨＵＡＮＧＨ ＵＡＮＧＬＩ ＡＮ ＧＲＡＮＵＬＥＳ ＤＥＴ ＥＲＮ姗 Ｄ ＢＹ ＵＬＴＲＡＶＩ ｏＬＥＴ 一Ⅵ Ｓ Ｂ Ｉ ＬＥ Ｐ Ｓ ＥＣＴＲ Ｐ ｏＴｏＭ［ ｏ Ｈ ＥＴＲＹ
～
３ ． ｐ ／ Ｌ浓度 范 围 内呈 良好 的 线 性 关 系 ， 均 回 收 率 为 １０ １％ ， Ｓ 为 ０ ８ ％ 。 结 论 ： 方 法 简 便 快 速 、 现 性 好 ， ００￣ ｍ ｇ 平 ０．８ Ｒ Ｄ ．８ 该 重 结
果准确可靠 ， 为一种快速测定双黄连颗粒 中黄芩 苷含 量的分析方法。 可作
ｃｎｒｓ ａｅｔ［ ］Ａ Ｒ，９ ８：３ ３ ｏｔ ｔ ｇｎ Ｊ． Ｊ １９ １７ ． ａ
４ 张晓丹 ， 高剑 波 ， 李荫太 ．胃癌的螺旋 ｃ Ｔ诊断进展 ［ ］ Ｊ ．国外医 学临床放射学分册 ， ０ ，６ ６ ： ３ ３７ ２ ３２ （）３ — ６ ． ０ ６ ５ 郭启 勇 ． 实用 放射学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 人民卫生出版社 ， ０ ： １ ２ ７６ ． ０ ４
韩秋 伟
（ 黑龙 江林业职业技术 学院 黑龙 江 牡 丹江 １７ １ ） ５ ０ １
【 摘
要 】 目的 ： 双黄 连颗 粒 中黄 芩苷 的含 量 测定 方 法。方 法 ： 用 紫外 一可见 分光 光度 法 。以 ９ ％ 的 乙醇溶 液和 建立 采 ０
０ ２ ｌＬ盐酸溶 液为溶剂 ， ．ｍｏ ／ 检测 波长为 ２ ６ ｍ。结果 ： ７ｎ 回归方程 为 Ａ＝ ．６ ５ ０ ６ ００ ９ ８ ３ ３ ｒ ．９ ２ ， ０ ０ ２ ００ Ｃ＋ ． １６ ３３ （ ＝０９ ９ ） 黄芩 苷在 ６０ ．
高效液相色谱法测定双黄连胶囊中黄芩苷的含量
２ 方 法
２ １ 色 谱 分 离 条 件 色 谱 柱 为 岛 津 Ｃ。（ ５ ×４ ６ ｎｉ ； 动 相 为 ． １ Ｏ ． ）ｌ１流 １ ＂
甲醇 ： ： 醋 酸 （ ７：５ 水 冰 ４ ３：１ ． 速 １ ０ｍｌｍｉ ； 测 波 长 ２ ４ ）流 ． ／ ｎ 检 ７
ｎ ［１。 １
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同 液 相 色 谱 法 测 定 双 黄 连 胶 囊 中 黄 芩 苷 的 含 量 效
Ｃ ＝，
－ 一
麦 惠环 ，许 晓 峰
（ 州 中医 药 大 学 ， 东 广 州 ５ ０ ０ ） 广 广 １ ４ ５
摘要 ： 目的 ： 定双 黄连 胶 囊 中黄芩 苷 的含 量 ． 测 为制 定 其质 控标 准提 供 依据 。方法 ： 高效 液 相 色谱 法对 惠 州 中药 厂的 双 用
瓶 中 ， ５ 甲 醇 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 加 Ｏ 摇 即得 。
２ ４ 线 性 关 系 的 考 察 精 密 称 取 黄 芩 苷 对 照 品 液 ６ ８ １ ． ， Ｏ ． ． ．０ １ ２ ５ ｌ 以 黄 苓 苷 浓 度 为 横 坐 标 ． 面 积 为 纵 坐 标 ， 制 标 准 曲 线 。 结 ， 峰 绘 果 表 明 在 ０ ５ ～ １ ８ ｇ之 间 呈 线 性 关 系 ， 回 归 方 程 ： 一 ．４ ． 得 Ａ
积分值
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含 量
” ｍ ｇ ｌ
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含 量
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５２ ４ ． ５ ２ ２．
反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量
反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量.txt我们用一只眼睛看见现实的灰墙，却用另一只眼睛勇敢飞翔，接近梦想。
男人喜欢听话的女人，但男人若是喜欢一个女人，就会不知不觉听她的话。
反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量更新日期：2011-09-21 点击：莫志江莫可元提要目的：探讨双黄连口服液含量测定检测方法。
方法：利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定双黄连口服液中黄芩甙含量。
固定相为Nova-Pak C18反相柱；流动相为甲醇-水-磷酸(50∶50∶0.2)；检测波长为276 nm。
结果：该方法的线性范围为0.36～1.79 μg(r=0.999 6)，平均回收率为102.62%，RSD=1.56%(n=5)。
结论：本法简便，准确，灵敏度高，重现性好，可用于该制剂的含量测定。
关键词双黄连口服液；黄芩甙；反相高效液相色谱法(PR-HPLC)中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)03-0196-01Determination of Baicaline in ShuanghuanglianOral Liquid by RP-HPLCMO Zhi-jiang, MO Ke-yuan(Hospital of Guangxi Autonomous Region, Nanning 530021, China)Abstract OBJECTIVE:The content of baicaline in Shuanghuanglian oral liquid was determined by RP-HPLC.METHOD: RP-HPLC analysis was carried out by using Nava-Pak C18 column and methanol-water-phosphoric(50∶50∶0.2) as the mobile, the detection wave length was 276 nm.RESULTS: The method was linear within the range of0.36～1.79 μg(γ=0.999 6),the average recovery was 102.62%, the RSD=1.56%(n=5). CONCLUSION: The method was simple, accruate, highly sensitive and reproducible. It may be used for the quantitative determination of baicaline in Shuandhuanglian oral liquid.Key words Shuanghuanglian oral liquid；Baicaline；RP-HPLC双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘三味中药经提取精制而成，主要用于外感病的表里热证，用于治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，咽炎，病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病。
HPLC法同时测定双黄连胶囊中黄芩苷、黄芩素的含量
温 ， ７ ％乙醇至刻度 ， 加 ０ 摇匀 ， 滤过 ， 精密吸取 ２ｍ 置 １ Ｉ ｌ ０｜ ｌ ｌ
ＣＨ Ｎ ＤＣＡ Ｒ Ｄ 巾■医药写报 ６ Ｉ Ａ ＭＥ Ｉ ＬＨＥ ＡＬ ７
・
药 品鉴定 ・
２３线 性 关 系考察 ．
２１ ０ １年 １ １月第 ８卷第 ３ ３期
容 量瓶 中 ， 甲醇稀 释 至刻度 ， 加 摇匀 ， 滤过 ， 用 。 备 ２２２对 照 品溶 液 制备 分 别 精 密称 取 ＰＯ 干燥 过 夜 的黄 芩 ．． ＝ 苷 、 芩 素对 照 品 ３ ．９ｍｇ和 １ ．２ｍｇ 置 同 一 ５ 容 量 黄 １８ ０６ ， ０ｍｌ
Ｓ ｕ ｎ ｈ ａ ｇ ｉ ｎ Ｃａ ｓ ｌ ｓｂ ｉ ｈ ｐ ｒ ｏ ｍ ａ ｃ ｑ ｉ ｈ ｏ ａ ｏ ｒ ｐ ｙ ｈ ａ ｇ ｕ ｎ ｌ ｐ ｕ ｅ ｙ ｈ ｇ ｅ ｆ ｒ ｎ ｅｌ ｕ ｄ ｃ ｒ ｍ ｔ ｇ ａ ｈ ａ ｉ
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（＝ ）黄芩 素 的平 均 回收 率 为 ９ ． ％，Ｓ ｎ６ ； ９ ２ Ｒ Ｄ为 ０ ％（＝ ） １ ． ｎ ６ 。结 论 ： ６ 本法 操 作 简便 、 快速 、 结果 准 确 ， 用 于双 黄连 胶 可
高效液相色谱法测定双黄连胶囊中黄芩苷的含量
表１
时阋 （ ） ｈ
０５ ．
黄芩苷的稳定 性试验表
穰分 笸
３ ３ ．４ ６ ６８ ９
含量（ ｇ ａ ｒ）
５ ． ２４ ５ ． ２４ ５ ． ２４ ５ ． ２２
批 号
００２ １７４
黄芩苷的含 量测定 ｌ 样 ） 。 ． ２ 。 号 ｒ １ｌ号样（Ｉ） ｎ ｇ
表５
５ ．６ ２３
５ ．３ １９
１ ． ≯ 鳓菪 懒
５ ． ２１
０Ｊ ｌ 唰嚼 口
０００ １９２
５ ６ 氟ｏ ＇
４ ．４ ７２
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４ ．２ ８７
胶 囊中的黄芩苷进行 测定 ， 结果：回收率９ ．％ ， Ｓ 峰 面积 为纵坐 标。 制标准曲线 ， ８ ９ ＲＤ 绘 结果表明在 ０５ ． ４— ２５ （ ５ ，可 为该 制剂 制定新 的质量标准提 供 １８ ｇ之间呈 线性关 系，得 回归方程 ： ． ％ ＝ ） ．
Ａ＝３ ９ ２ ６Ｃ一６ ６ ２ ；ｒ ．９ ０ ７．７ ９．５ ＝Ｏ９ ９８
一 ０ Ｊ
１０ ０
ｊ 。
１０ ０
２５ ．
：８一 ＝ 蠹 １００ ≥ ：＝ ｊ ０ ： ： ；
２８ 含量测定 分别精 密吸取对照品 溶液和供 测定两次 ，色谱 图见图 ｌ ． ；结果见 表 ５
ｊ
试品溶液 各 ｌ ｌ 入液相色谱仪 ， ０ 注 每个批 号供试品 图 ｌ 黄芩苷及双 黄连胶囊的 ＨＰ Ｃ图 Ｌ
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实验项目八 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定
实验项目八双黄连口服液中黄芩苷的含量测定【实验目标】1. 正确解读《中国兽药典》相关规定，在模拟的工作环境和过程中，以学生和药检工的双重身份，完成双黄连口服液中黄芩苷的含量测定；2.掌握HPLC外标一点法测定中兽药制剂含量技术，理解测定原理，熟练规范操作；3.正确规范书写实验报告和检验报告书；4.了解HPLC常用其它定量方法。
【实验原理】利用高效液相色谱法分离双黄连口服液中的黄芩苷，在λmax274nm处进行检测。
为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随机外标一点法定量。
【仪器试药】1．高效液相色谱仪、超声波提取器、移液管；2．甲醇（色谱纯）、冰醋酸（AR）、双蒸水、甲醇（AR）3．黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）、双黄连口服液（市售品）【实验内容】照高效液相色谱法（《中国兽药典》2015版二部附录35页）测定双黄连口服液中黄芩苷含量。
【标准规定】《中国兽药典》2015版二部P580页，含量测定项规定：本品含黄芩按黄芩苷计，每1ml 不得少于10.0mg。
【操作步骤】1. 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）为流动相，检测波长274nm。
理论塔板数按黄芩苷峰计不低于1500.2.对照品溶液制备：精密称取黄芩苷对照品10mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量，置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含黄芩苷0.1mg）。
3.制备供试品溶液：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20min，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
4.测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
5.结果判断：根据测定结果，判断此项检验是否合格。
【思考】1.HPLC中常用的定量方法有几种？外标一点法有何优缺点？2. 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定还可用哪些方法？。
HPCE法测定双黄连口服液中的黄芩苷和绿原酸
HPCE法测定双黄连口服液中的黄芩苷和绿原酸【摘要】目的：结合实验，通过建立双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸含量测定的毛细管电泳法，分析了其中含量。
方法：:用毛细管区带电泳和紫外检测模式测定双黄连口服液中黄芩苷和绿原酸的含量,电泳条件:以40mmol·L-1硼砂为电泳介质(测定黄芩苷和绿原酸的pH值分别为9100和9155),未涂层弹性融硅毛细管(50μm×3915cm,有效分离长度3418cm)为分离通道,压力进样(68195kPa·s),17kV恒压电泳(25℃),黄芩苷和绿原酸的检测波长分别为285,326nm。
结果:在20～640μg·mL-1和8～400μg·mL-1范围内,黄芩苷和绿原酸可分别进行定量分析,二者加样回收率分别为100160%±2136%和99168%±2127%。
结论:本方法简便、快速,结果准确,重现性好,可用于双黄连口服液的质量控制。
【关键词】双黄连口服液；高效毛细管电泳法；绿原酸；实验；黄芩苷双黄连口服液是由金银花、黄芩以及连翘等中药成分提炼制成的，在临床治疗中有着清热解毒、辛凉解表的功效，是治疗咽喉炎、上呼吸道感染、扁桃体炎和病毒性肺炎的主要药物。
在双黄连口服液中，黄芩苷、绿原酸是主要活性成分，是发挥药物效果的主要因素，为此测定双黄连口服液中这些成分的含量十分必要。
本文参照国家现行药物标准和实验依据，通过优化色谱条件的措施，建立了双黄连口服液黄芩苷、绿原酸含量的测定方法，利用高效毛细管电泳法同时测定了两种成分的含量，其余传统的检测方法相比，有效提高了工作效率和线性宽度，结果准确性令人满意，值得推广和应用。
一、实验准备和过程1、仪器和试剂1.1、仪器美国Bio-Focus公司生产的3000型高效毛细管电泳系统；河北某光导纤维厂生产的未涂层弹性融硅毛细管柱，设备长度为39.5cm，有效长度为34.8cm。
最新UPLC法测定黄芩提取物中黄芩苷和黄芩素的含量--论文
武汉轻工大学毕业设计（论文）论文题目：UPLC法测定黄芩提取物中黄芩苷和黄芩素的含量Determination of BaicaLin and BaicaLein inScuteLLarein by UPLC method2015年6月目录摘要 (1)Abstract (3)第一章绪论 (4)1. 黄芩的研究进展 (4)1.1黄芩的药理作用 (4)1.2黄芩的有效成分 (5)1.3黄芩的检测方法 (5)2.研究内容 (8)3. 研究意义 (8)3.1禽类 (8)3.2猪 (9)3.3 反刍动物 (10)第二章实验研究 (11)1. 材料方法 (11)1.1 实验材料 (11)1.2 实验方法 (12)2．方法学验证 (13)2.1系统适应性 (13)2.2标准曲线及线性关系考察 (14)2.3精密度试验 (15)2.4稳定性试验 (16)2.5重复性试验 (17)2.6加标回收率的测定 (18)3．黄芩的提取液含量测定 (18)4．讨论 (18)5．试验方法的优缺点 (19)5.1缺点 (19)5.2优点 (20)参考文献 (21)致谢 (24)摘要建立用超高效液相色谱（UPLC）同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素的方法。
方法:将适量黄芩提取液溶于甲醇，于100mL容量瓶中定容，配成黄芩供试品溶液。
检测方法：Waters 超高效液相色谱仪，色谱柱为ACQUITY UPLC®BEH C18 (2.1×50mm ,1.7um) ，流动相为乙腈（流动相C），0.05% 磷酸（流动 D ）；0～0.68min ,30%C,70%D；0.68～1.02min,30%→40% C,70% →60%D;1.02～1.36min ，40% →65% C，60% →35% D;1.36～2.30min,30%C ,40%D的梯度洗脱。
流速为0.61mL/min，柱温30℃，紫外检测波长为278nm，进样量为0.02µL。
高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量
实验三 高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量【实验目的】（1）初步掌握福立FL-2200高效液相色谱仪原理及其使用方法；（五号宋体） （2）掌握高效液相色谱对流动相、样品处理的要求及注意事项；（3）能根据测定数据计算双黄连口服液中黄芩苷的含量；（4）了解中药制剂质量检测的方法。
【实验原理】双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、 清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌 和病毒感染性疾病有一定疗效。
其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素 是其主要活性成分。
本试验根据《2010版中国药典》方法对双黄连口服液中黄芩苷含量进行测 定，以便控制制剂质量。
【仪器和试剂】1. 高效液相色谱仪（福立FL-2200）：2. 黄芩苷对照品（中食品药品检定所）【实验步骤】1.按操作说明书使用仪器，其色谱条件如下：色谱柱：C18 反相色谱柱流动相：甲醇-水-冰醋酸（50:50:1）检测波长：274nm。
柱温：30℃流速：1.0ml/min理论板数：按黄芩苷峰计算应不低于 1500。
2.【含量测定】 黄芩照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品 10mg，置 100ml 量瓶中，加 50%甲醇适量， 置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 中含黄芩苷 0.1mg）。
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品 1ml，置 50ml 量瓶中,加 50%甲醇适量,超声处理 20 分钟，放置至室温，加 50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即 得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5μl，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本品每支含黄芩按黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于 80mg。
【数据处理】采用外标法进行含量计算。
【思考题】1. 高效液相色谱仪在样品检测过程中设置的主要仪器参数有哪些？2. 高效液相色谱仪在使用过程中应注意些什么？3. 高效液相色谱仪在样品检测中与紫外-可见分光光度计相比，具有哪些不同和优势？。
高效液相色谱法测定双黄连注射剂中黄芩苷的方法分析
高效液相色谱法测定双黄连注射剂中黄芩苷的方法分析双黄连注射剂是由黄连、黄芩、连翘、黄柏等中草药制成的复方中药注射剂。
其中，黄芩苷是双黄连注射剂药效的重要活性成分之一、因此，高效液相色谱法（HPLC）是测定双黄连注射剂中黄芩苷含量的常用方法之一在高效液相色谱法中，主要包括样品制备、色谱条件的优化以及样品分析三个部分。
首先，需要对样品进行制备。
通常采用提取液法制备样品溶液。
将一定量的双黄连注射剂取出，加入一定比例的醇提取液，进行超声提取或加热提取。
然后，用适量的溶剂将提取液定容，并过滤掉杂质。
提取液中的黄芩苷已被完全溶解，并可直接用于HPLC分析。
其次，需要对色谱条件进行优化。
选择合适的色谱柱是关键。
常用的色谱柱包括C18柱和C8柱。
鉴于黄芩苷的极性较大，一般选择C18柱为分析柱。
此外，还需优化流动相的组成和流速。
常用的流动相为甲醇-水（含醋酸）混合溶液，比例为8:92（v/v），流速为1.0 mL/min。
这种流动相条件可以提供较好的分离效果。
最后，进行样品分析。
在HPLC系统中，设置波长为280 nm，以便检测黄芩苷的特征吸光峰。
注射制备好的提取液样品，并运行仪器。
通过比对样品峰面积与标准品的峰面积，可以确定黄芩苷的含量。
通过外标法进行定量分析，即通过建立标准曲线，再利用标准曲线计算样品中黄芩苷的含量。
需要注意的是，在进行样品分析的过程中，还需进行系统的验证和方法验证。
系统验证包括检测指标的选择、色谱峰特性和色谱参数的验证等。
而方法验证则关注色谱法的灵敏度、稳定性、精密度和准确度等。
这些验证都是确保分析结果准确可靠的关键步骤。
综上所述，高效液相色谱法是测定双黄连注射剂中黄芩苷含量的常用方法。
通过对样品的制备、色谱条件的优化以及样品分析，可以精确测定双黄连注射剂中黄芩苷的含量，为质量控制提供科学的依据。
双黄连黄芩苷HPLC样品含量测定
仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 21进样日期 : 2020/11/1 15:30:32 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 2.409 BB 0.0477 15.12984 4.94221 0.77562 2.727 BV 0.1388 257.41949 24.06033 13.19683 2.923 VV 0.1015 401.93970 56.13813 20.60574 3.199 VV R 0.1072 486.38379 68.22692 24.93485 3.407 VB E 0.1532 110.68676 9.55104 5.6744----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.739 BB 0.1070 63.34822 9.12820 3.24767 4.119 BV 0.0999 100.03092 14.97304 5.12828 4.297 VB 0.1008 25.43734 3.86498 1.30419 4.567 BB 0.1286 36.95013 4.28363 1.894310 4.970 BV E 0.1068 9.65007 1.32754 0.494711 5.188 VV R 0.1431 131.69249 13.83214 6.751312 5.554 VV R 0.1979 278.79474 21.41352 14.292613 6.075 VB E 0.1676 33.15791 2.62043 1.6999总量 : 1950.62142 234.36210===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 22进样日期 : 2020/11/1 15:38:33 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.162 BB 0.1448 36.01236 3.31302 0.41012 2.531 BV R 0.2575 7106.49609 411.45520 80.93263 2.933 VV E 0.1002 371.27637 52.70876 4.22834 3.219 VV E 0.1168 512.76837 65.88605 5.83975 3.422 VB E 0.1465 130.35542 11.65573 1.4846----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.783 BB 0.1091 59.42217 8.34599 0.67677 4.168 VV R 0.1210 94.16077 12.34379 1.07248 4.367 VB 0.1030 21.00816 3.26996 0.23939 4.657 BB 0.1457 39.75462 3.74904 0.452710 5.017 BV E 0.0971 9.17073 1.17445 0.104411 5.277 VV R 0.1388 124.50764 13.85801 1.418012 5.643 VB 0.2323 251.80861 17.67023 2.867713 6.190 BV 0.1506 24.01774 2.40341 0.2735总量 : 8780.75906 607.83364===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 23进样日期 : 2020/11/1 15:46:35 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.139 BB 0.1715 48.59724 3.42588 0.56352 1.167 BB 0.2893 313.68045 13.48712 3.63753 2.624 BV R 0.2468 6702.40723 389.34586 77.72324 2.931 VV E 0.0961 311.11780 46.47921 3.60785 3.219 VV E 0.1143 497.83759 65.79671 5.7731----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.414 VB E 0.1438 128.60307 11.56135 1.49137 3.779 BB 0.1078 65.60003 9.35976 0.76078 4.166 BV 0.1158 97.87812 13.00279 1.13509 4.353 VB 0.0968 18.97343 3.21747 0.220010 4.650 BB 0.1469 32.16723 3.15735 0.373011 5.026 BV E 0.1087 8.48536 1.09198 0.098412 5.273 VV R 0.1357 112.92078 12.94855 1.309513 5.652 VB 0.2241 250.59393 17.81137 2.906014 6.192 BB 0.1957 34.57077 2.29593 0.4009总量 : 8623.43303 592.98133===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 24进样日期 : 2020/11/1 15:54:39 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.127 BB 0.1919 62.29534 5.19530 0.67752 1.211 BB 0.3176 300.68619 13.51348 3.27023 2.585 BV R 0.2514 7204.77100 425.87555 78.35834 2.932 VV E 0.0989 363.45386 52.43235 3.95295 3.218 VV E 0.1162 522.80115 67.64084 5.6859----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.419 VB E 0.1443 134.42583 11.85374 1.46207 3.783 BB 0.1050 60.54358 8.72512 0.65858 4.168 BV 0.1262 99.92563 12.64276 1.08689 4.356 VB 0.0906 19.32903 3.19232 0.210210 4.655 BB 0.1487 37.12266 3.52960 0.403711 4.999 BV E 0.1066 8.77242 1.08227 0.095412 5.282 VB R 0.1297 116.96114 13.69330 1.272113 5.644 BB 0.1915 243.99164 16.99612 2.653614 6.214 BB 0.1255 19.57436 2.29414 0.2129总量 : 9194.65381 638.66690===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 25进样日期 : 2020/11/1 16:02:42 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.162 BB 0.1725 61.21359 5.01332 0.66722 1.207 BB 0.3097 316.84137 13.60541 3.45333 2.635 BV R 0.2440 7170.54932 414.07822 78.15364 2.932 VV E 0.0904 294.66852 46.20224 3.21175 3.223 VV E 0.1174 540.14539 70.46091 5.8872----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.423 VB E 0.1448 146.27788 12.84601 1.59437 3.790 BB 0.1082 64.24318 9.11570 0.70028 4.177 BV 0.1295 104.05950 12.44579 1.13429 4.370 VB 0.0903 19.46764 3.32532 0.212210 4.661 BB 0.1340 37.01480 3.66028 0.403411 5.030 BV E 0.1049 9.15563 1.17543 0.099812 5.291 VV R 0.1322 131.37842 15.00328 1.431913 5.662 VB 0.2033 258.40677 17.59945 2.816414 6.223 BB 0.1144 21.51852 2.55254 0.2345总量 : 9174.94051 627.08390===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 26进样日期 : 2020/11/1 16:10:44 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.200 BB 0.1839 109.91430 7.54795 1.20692 1.288 BB 0.2763 316.22900 14.06699 3.47223 2.668 BV R 0.2421 7409.00586 415.39294 81.35104 3.222 VV E 0.1242 538.99695 65.37891 5.91825 3.417 VB E 0.1468 129.40962 11.54220 1.4209----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.786 BB 0.1081 66.08678 9.16854 0.72567 4.170 VV R 0.1285 94.38035 11.64804 1.03638 4.368 VB 0.0929 17.11086 2.89914 0.18799 4.665 BB 0.1314 29.23759 3.06124 0.321010 5.037 BV E 0.1069 9.23906 1.16035 0.101411 5.293 VV R 0.1300 118.96421 13.60568 1.306212 5.693 VB 0.2086 250.94687 16.96705 2.755413 6.222 BB 0.1309 17.93041 2.07300 0.1969总量 : 9107.45186 574.51204===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 27进样日期 : 2020/11/1 16:18:47 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.214 BB 0.1884 119.89918 8.30800 1.31412 1.344 BB 0.2976 326.04767 15.36411 3.57343 2.663 BV 0.2252 6891.30908 420.41403 75.52764 2.921 VV 0.0863 537.61536 89.17351 5.89225 3.219 VV R 0.1176 516.23236 65.72817 5.6578----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.417 VB E 0.1518 119.14068 10.08797 1.30587 3.782 BB 0.1135 74.26492 9.90563 0.81398 4.167 VV R 0.1261 93.85139 11.63590 1.02869 4.356 VB 0.0940 16.67881 2.77991 0.182810 4.654 BB 0.1337 29.81258 3.11286 0.326711 5.047 BV E 0.1118 10.38448 1.14520 0.113812 5.285 VV R 0.1368 114.66826 13.26566 1.256713 5.702 VB 0.2022 256.35632 17.37155 2.809614 6.221 BB 0.1150 17.96214 2.07403 0.1969总量 : 9124.22321 670.36653===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 28进样日期 : 2020/11/1 16:26:48 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.223 BB 0.1950 125.94299 8.29924 1.34232 1.365 VB R 0.2678 306.63995 14.09388 3.26813 2.690 BV R 0.2420 7633.72559 416.14536 81.35844 3.225 VV E 0.1247 543.06079 65.50836 5.78785 3.422 VB E 0.1435 130.11404 11.72077 1.3867----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.788 BB 0.1103 69.12408 9.56093 0.73677 4.174 VV R 0.1366 99.51070 11.77207 1.06068 4.370 VB 0.0938 17.28765 2.80748 0.18429 4.667 BB 0.1412 31.66734 3.20668 0.337510 5.024 BV E 0.1154 12.33679 1.36612 0.131511 5.294 VV R 0.1349 126.15172 14.03588 1.344512 5.708 VB 0.2069 268.66110 17.52454 2.863313 6.220 BB 0.1284 18.61334 2.12140 0.1984总量 : 9382.83609 578.16269===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 29进样日期 : 2020/11/1 16:34:48 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.271 BB 0.2316 152.46611 9.09497 1.64742 1.432 BB 0.2728 295.67001 14.20489 3.19483 2.761 BV R 0.2401 7532.23779 434.74710 81.38714 3.224 VV E 0.1243 496.10214 61.39088 5.36055 3.451 VB E 0.1493 133.38705 13.04047 1.4413----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.791 BV 0.1253 73.95948 8.86458 0.79917 4.174 VV 0.1563 125.82410 12.20182 1.35968 4.370 VB 0.0952 22.56522 3.69817 0.24389 4.658 BB 0.1340 33.88452 3.29545 0.366110 5.033 BV E 0.1169 10.51727 1.08700 0.113611 5.301 VV R 0.1396 126.34021 13.95769 1.365112 5.650 VV 0.1148 107.82194 14.49808 1.165013 5.731 VB 0.1285 125.33674 14.54408 1.354314 6.227 BB 0.1301 18.72043 1.88193 0.2023总量 : 9254.83302 606.50712===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 30进样日期 : 2020/11/1 16:42:50 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/1 15:29:28 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-01 15-29-27\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:27:11 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.283 BB 0.2321 149.56187 8.30324 1.74642 1.459 BB 0.2944 312.27350 14.54753 3.64643 2.745 BV R 0.2457 6781.68896 373.73019 79.19014 3.224 VV E 0.1239 532.66669 64.76997 6.22005 3.421 VB E 0.1430 119.67100 10.99704 1.3974----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.793 BV 0.1232 92.10455 10.83503 1.07557 4.012 VV 0.0781 17.88603 3.15801 0.20898 4.175 VV 0.1514 126.78074 13.27331 1.48049 4.364 VB 0.0954 23.48726 3.73291 0.274310 4.667 BB 0.1026 13.12714 2.00032 0.153311 5.305 VV R 0.1347 120.33887 13.15465 1.405212 5.668 VV 0.1089 106.87867 15.58814 1.248013 5.740 VB 0.1406 149.06763 16.31308 1.740714 6.231 BB 0.1238 18.27774 2.01639 0.2134总量 : 8563.81063 552.41982===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 31进样日期 : 2020/11/2 10:44:27 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/2 10:43:26 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:28:17 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 2.323 BB 0.0534 21.84709 6.47347 1.08902 2.643 BV 0.1047 83.48467 11.78017 4.16153 2.740 VV 0.0914 140.47238 21.74428 7.00214 2.959 VV 0.1148 456.49069 55.02905 22.75465 3.254 VV R 0.1420 534.42090 57.74719 26.6392----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.436 VB E 0.1466 106.36124 9.22044 5.30187 3.812 BB 0.1205 63.81229 7.87758 3.18088 4.185 BV 0.0913 58.65947 9.08337 2.92409 4.258 VV 0.1002 63.19981 9.42522 3.150310 4.419 VV 0.1474 55.62823 5.09571 2.772911 4.709 VB 0.1269 41.67276 4.63469 2.077312 5.345 BV 0.1258 103.59306 12.61481 5.163813 5.681 VV 0.1386 128.04428 13.50751 6.382614 5.817 VB 0.1412 114.39842 11.58378 5.702415 6.295 BB 0.1751 34.05761 2.43640 1.6977总量 : 2006.14291 238.25366===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 32进样日期 : 2020/11/2 10:52:28 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/2 10:43:26 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:28:17 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.256 BB 0.1683 51.72218 4.01584 0.59472 1.526 BB 0.1660 15.92193 1.20583 0.18313 2.331 BV E 0.0559 25.50794 7.10101 0.29334 2.980 VV R 0.2601 7908.03906 430.83856 90.92605 3.818 VB E 0.1208 64.01376 7.88199 0.7360----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 4.196 BV 0.0921 56.74071 8.93593 0.65247 4.265 VV 0.0949 59.93873 9.33800 0.68928 4.424 VV 0.1565 59.08711 5.04999 0.67949 4.714 VB 0.1281 40.77084 4.75009 0.468810 5.121 BV E 0.1170 12.53297 1.31766 0.144111 5.347 VV R 0.1366 126.16693 13.81297 1.450712 5.685 VV 0.1404 136.01797 14.11479 1.563913 5.811 VB 0.1522 117.02634 11.74600 1.345614 6.303 BB 0.1463 23.73924 2.19293 0.2730总量 : 8697.22570 522.30160===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 33进样日期 : 2020/11/2 11:00:32 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/2 10:43:26 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:28:17 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.219 BV 0.1662 56.51281 4.11595 0.66882 0.592 VB 0.2564 113.93665 5.30931 1.34843 1.797 BB 0.2736 275.11472 12.26939 3.25594 2.321 BB 0.0490 19.65758 6.19747 0.23265 2.952 BV R 0.2408 6871.38428 424.67050 81.3211----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.225 VV E 0.1283 327.08276 38.81556 3.87097 3.416 VB E 0.1415 94.46941 8.64446 1.11808 3.801 BB 0.1190 60.81738 7.62889 0.71989 4.176 BV 0.0894 55.65349 9.09848 0.658610 4.246 VV 0.0988 63.35785 9.38203 0.749811 4.408 VV 0.1381 52.00669 4.88839 0.615512 4.698 VB 0.1270 36.76767 4.33438 0.435113 5.096 BV E 0.1182 12.27805 1.27678 0.145314 5.331 VV R 0.1391 124.14164 13.51812 1.469215 5.669 VV 0.1330 132.60773 14.46387 1.569416 5.797 VB 0.1485 124.83102 12.28705 1.477317 6.292 BBA 0.1932 29.07043 1.95774 0.3440总量 : 8449.69011 578.85837===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 34进样日期 : 2020/11/2 11:08:35 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/2 10:43:26 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:28:17 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.195 BV 0.1538 49.16383 4.04495 0.56502 0.542 VB 0.2664 111.52209 5.15476 1.28163 1.740 BB 0.2913 296.10706 12.82939 3.40294 2.316 BB 0.0480 17.89337 5.80116 0.20565 2.932 BV R 0.2452 7046.55859 425.61285 80.9809----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.230 VB E 0.1486 467.14346 45.96755 5.36857 3.797 BB 0.1160 56.74608 7.04374 0.65218 4.174 BV 0.0870 56.15068 9.22287 0.64539 4.239 VV 0.0988 65.33416 9.67368 0.750810 4.394 VV 0.1532 51.83944 4.61085 0.595811 4.693 VB 0.1293 39.56866 4.64694 0.454712 5.097 BV E 0.1188 11.48856 1.23167 0.132013 5.322 VV R 0.1397 128.00607 13.61795 1.471114 5.659 VV 0.1372 137.08646 14.64756 1.575415 5.786 VB 0.1468 124.00411 12.38490 1.425116 6.275 BB 0.2233 42.89582 2.41458 0.4930总量 : 8701.50844 578.90538===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 35进样日期 : 2020/11/2 11:16:39 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 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%----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.232 BB 0.1300 19.78999 1.92425 0.22642 0.510 BB 0.1774 35.50959 2.53542 0.40623 1.688 BB 0.3004 311.13553 13.32430 3.55954 2.312 BB 0.0485 18.14944 5.79380 0.20765 2.933 BV R 0.2407 7241.63330 443.01431 82.8457----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.224 VV E 0.1224 344.09814 43.42975 3.93667 3.411 VB E 0.1296 83.06973 8.23888 0.95038 3.791 BV 0.1340 82.92424 8.79463 0.94879 4.165 VV 0.2328 196.94937 10.79687 2.253110 4.678 VB 0.1272 34.54427 4.14704 0.395211 5.308 BV 0.1262 100.16998 12.40221 1.146012 5.646 VV 0.1329 120.07468 13.61799 1.373713 5.762 VB 0.1471 119.20675 11.87920 1.363714 6.257 BB 0.1995 33.85425 2.22526 0.3873总量 : 8741.10926 582.12393===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 37进样日期 : 2020/11/2 11:32:41 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/2 10:43:26 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:28:17 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.215 BV 0.1813 56.78001 4.37900 0.65092 0.537 VB 0.2486 106.63189 5.25715 1.22243 1.685 BB 0.2877 295.97818 12.99812 3.39314 2.308 BB 0.0502 18.22110 5.87010 0.20895 2.909 BV R 0.2444 7038.07568 426.77560 80.6838----|-------|----|-------|----------|----------|--------|6 3.221 VV E 0.1250 400.56967 50.24763 4.59217 3.407 VB E 0.1301 93.67339 9.25132 1.07398 3.777 BV 0.1319 83.61698 9.03761 0.95869 4.155 VV 0.2113 163.62604 9.87742 1.875810 4.667 VB 0.1168 31.25184 4.01508 0.358311 5.072 BV E 0.1032 8.94050 1.07266 0.102512 5.296 VV R 0.1360 125.30695 13.79679 1.436513 5.635 VV 0.1351 135.53017 14.76049 1.553714 5.754 VB 0.1464 126.10423 12.63505 1.445615 6.242 BB 0.2169 38.72845 2.22712 0.4440总量 : 8723.03508 582.20113===================================================================== *** 报告结束 ***仪器 : Agilent 1260LC 位置 : 38进样日期 : 2020/11/2 11:40:41 进样次数 : 1进样量 : 10.000 µl序列文件 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\生物181双黄连黄芩苷含量测定.S 采集方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M最后修改 : 2020/11/2 10:43:26 : 系统分析方法 : d:\Chem32\1\Data\生物181双黄连黄芩苷含量测定 2020-11-02 10-43-25\2020双黄连样品测定.M (序列方法 )最后修改 : 2020/11/4 11:28:17 : 系统=====================================================================面积百分比报告=====================================================================排序 : 信号乘积因子 : 1.0000稀释因子 : 1.0000内标中不使用乘积因子和稀释因子信号 1: DAD1 A, Sig=274,4 Ref=off峰 保留时间 类型峰宽峰面积峰高峰面积# [min] [min] [mAU*s] [mAU] %----|-------|----|-------|----------|----------|--------|1 0.229 BV 0.1793 64.49257 4.49779 0.70252 0.512 VB 0.2396 103.78841 5.32094 1.13053 1.677 BB 0.2862 299.44577 13.12190 3.26164 2.308 BV E 0.0507 21.09002 6.35743 0.22975 2.922 VV R 0.2494 7522.17627 449.10147 81.9335。
高效液相色谱法测定双黄连注射剂中黄芩苷的方法分析
高效液相色谱法测定双黄连注射剂中黄芩苷的方法分析【摘要】目的建立以高效液相色谱（HPLC）法测定双黄连注射剂中组分含量的方法。
方法以甲醇-水（10%的磷酸溶液调节pH至2.7）为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为326 nm，在Diamonsil（钻石）C18 (5 μm，4.6 mm×150 mm) 色谱柱上洗脱，外标法定量，黄芩苷含量可测定。
结果黄芩苷在5.1～81.6μg/ml范围内呈良好的线性关系，r=0.999 8，平均加样回收率为100.34%，RSD= 0.82 %(n=5 )。
结论该方法简便，灵敏，重复性好，结果准确，精密度较高，线性关系良好，回收率也较高，测定结果显示12 h内黄芩苷稳定，适合于双黄连注射剂的质量控制。
【关键词】双黄连注射剂黄芩苷高效液相色谱法双黄连注射剂是近年来研制的中药制剂，在临床上主要用于急性上呼吸道感染、急性支气管炎、急性扁桃腺炎、肺炎及急性尿路感染等，其疗效确切，安全，应用十分广泛。
双黄连注射剂由金银花、黄芩、连翘3味中药提取制成，主要成分为黄芩苷、绿原酸、连翘苷等［1］。
药理学研究已证实黄芩苷具有抑菌、清热、降压、镇静、利尿、利胆、抗炎、抗变态反应、解毒等作用；绿原酸具抗菌消炎、清热解毒等作用；而连翘苷则具有较强的抑菌、抗病毒的活性。
双黄连注射剂黄芩苷含量测定的方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法、紫外分光光度法等，高效液相色谱法具有分离效能高、分析速度快且精准等特点，适合中药成分的多样性及复杂性，在双黄连制剂的质量控制上应用也最多。
本文通过优化色谱条件测定黄芩苷的含量，以期为进一步研究双黄连注射剂中绿原酸及其它成分打下基础，为双黄连注射剂工艺研究和质量控制提供理论基础。
1 仪器与试剂1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪(美国Agilent公司）；TU－1800紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责公司）；KQ－100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；电子天平（上海精科天平）；予华SHZ－D （Ⅲ）循环水式真空泵（河南省巩义市英峪予华仪器厂）；Diamonsil（钻石）C18色谱柱（5μm，4.6 mm×150 mm Cat.no：9990 Ser.no：8011571 Dikma Technologies）。
无糖双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定研究
无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定研究摘要：目的：建立无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定方法。
方法：采用以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）；检测波长为274nm。
结果：黄芩苷峰与其他杂质峰分离良好，在0.0000μg～0.0000μg 范围内，黄芩苷线性关系良好（r=0.0000），平均回收率为000.00%（n=0）RSD=0.00%。
结论：该方法简便易行，准确度高，重现性好，可用于无糖型双黄连颗粒的质量控制。
1. 引言无糖型双黄连颗粒是由金银花、黄芩和连翘提取物制成的纯中药复方制剂，收载《中国药典》（2010版一部）中, 具有疏风解表，清热解毒的功效，用于外感风热所致的感冒，发热、咳嗽、咽痛等症状。
而本试验主要采用高效液相色谱法对黄芩苷进行含量测定研究，取得了较好的效果，从而证实可以通过此方法对无糖型双黄连颗粒的质量进行有效控制。
2. 仪器与试药2.1 仪器SHIMADZU 高效液相色谱仪(LC-10ATVP 溶剂输送系统，LC-10AVP 检测器)；TIANHEC18(5μm,150mm×4.6mm) 色谱柱；十万分之一电子天平(Sartorius BP121S)；超声波清洗器（DL-360 ）2.2 试药黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110715-200514，供含量测定用)，使用前经60℃减压干燥4 小时；甲醇、冰醋酸为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
3. 方法与结果3.1 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）；检测波长为274nm。
理论板数按黄芩苷峰计算应不低于1500。
按处方比例配成不含黄芩的阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液，实验结果表明无干扰。
3.2 对照品溶液的制备精密称取经60℃减压干燥4 小时的黄芩苷对照品12.5mg，置25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml 置25ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
紫外-可见分光光度法测定双黄连颗粒中黄芩苷的含量
紫外-可见分光光度法测定双黄连颗粒中黄芩苷的含量
韩秋伟
【期刊名称】《牡丹江医学院学报》
【年(卷),期】2012(033)002
【摘要】目的:建立双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定方法.方法:采用紫外-可见分光光度法.以90％的乙醇溶液和0.2mol/L盐酸溶液为溶剂,检测波长为276nm.结果:回归方程为A=0.06250006C +0.019683333(r =0.9992),黄芩苷在6.0～
30.0μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.18％,RSD为0.88％.结论:该方法简便快速、重现性好,结果准确可靠,可作为一种快速测定双黄连颗粒中黄芩苷含量的分析方法.
【总页数】3页(P21-23)
【作者】韩秋伟
【作者单位】黑龙江林业职业技术学院黑龙江牡丹江 157011
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷的含量优秀doc资料
HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷的含量优秀doc资料HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷的含量【摘要】【目的】:探讨以HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷含量的方法,为测定其它成分作准备。
【方法】:应用甲醇-水(10%的磷酸溶液调节pH至2.7为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为326nm [1],在Diamonsil(钻石C(5μm,150mm×4.6mm 色谱柱上洗脱,外标法定量,黄芩苷成分含量可测定。
18【结果】:双黄连注射液中黄芩苷在5.1~81.6μg/ml范围内呈良好的线性关系,r=0.9998, 平均加样回收率为100.34%,RSD= 0.82 %(n=5 。
【结论】:该方法简便,灵敏,重现型好,结果准确,精密度较高,线性关系良好,回收率也较高,测定结果显示12小时内黄芩苷稳定,适合于双黄连的质量控制。
【关键词】:双黄连注射剂;黄芩苷;高效液相色谱法Determination of baicalin in shuanghuanglian injection by HPLC 【ABSTRACT】【Objective】:To develop a HPLC method for the determination of baicalin in Shuanghuanglian injection ,in order to determining other things ,we do that.【Method】: The colum was packed with Diamonsil(钻石C18(5μm,150mm×4.6mm. Methanol-water(pH2.7was usd as mobil phase ,the flow rate was1.0ml/min, and the detection wave length was set at 326nm. Baicalin were separated by HPLC with grade elution.【Results】: The method was linear with in the rang of 5.1~81.6μg/ml,r=0.9998, and the average recovery was 100.34 %, with the RSD=0.82 %,(n=5 .【Conclusions】: The method was simple, accurate, highly sensitive, and reproducible.It also has the high precision and recovery , the linear is good,the determination solusion is steady winthin12h, and is suitable for the quality control of Shuanghuanglian injection.【Key Words】: Shuanghuanglian injection,baicalin,HPLC, gradient elution.前言:双黄连注射液是大剂量静脉点滴用的注射剂,具有良好的抗菌作用、抗病毒作用、抗解脲支原体作用及消炎清热的功能。
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无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定研究
摘要：目的：建立无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量测定方法。
方法：采用以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）；检测波长为274nm。
结果：黄芩苷峰与其他杂质峰分离良好，在0.0000μg～0.0000μg 范围内，黄芩苷线性关系良好（r=0.0000），平均回收率为000.00%（n=0）RSD=0.00%。
结论：该方法简便易行，准确度高，重现性好，可用于无糖型双黄连颗粒的质量控制。
1. 引言
无糖型双黄连颗粒是由金银花、黄芩和连翘提取物制成的纯中药复方制剂，收载《中国药典》（2010版一部）中, 具有疏风解表，清热解毒的功效，用于外感风热所致的感冒，发热、咳嗽、咽痛等症状。
而本试验主要采用高效液相色谱法对黄芩苷进行含量测定研究，取得了较好的效果，从而证实可以通过此方法对无糖型双黄连颗粒的质量进行有效控制。
2. 仪器与试药
2.1 仪器
SHIMADZU 高效液相色谱仪(LC-10ATVP 溶剂输送系统，LC-10AVP 检测器)；TIANHE
C18(5μm,150mm×4.6mm) 色谱柱；十万分之一电子天平(Sartorius BP121S)；超声波清洗器（DL-360 ）
2.2 试药
黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110715-200514，供含量测定用)，使用前经60℃减压干燥4 小时；甲醇、冰醋酸为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
3. 方法与结果
3.1 色谱条件与系统适用性试验
以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）；检测波长为274nm。
理论板数按黄芩苷峰计算应不低于1500。
按处方比例配成不含黄芩的阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液，实验结果表明无干扰。
3.2 对照品溶液的制备
精密称取经60℃减压干燥4 小时的黄芩苷对照品12.5mg，置25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取5ml 置25ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
（0.1mg/ml）
3.3 供试品溶液的制备
取装量差异项下的本品研碎，取约0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20分钟使溶解，放冷，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
3.4 阴性供试品溶液的制备
取处方中除黄芩以外的其他原料，按工艺制备方法，并按供试品溶液的制备方法制得阴性供试品溶液。
3.5 线性范围的考察
精密量取黄芩苷对照品溶液(0.1mg/ml)1μl、3μl、5μl、7μl、9μl 注入液相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值(Y)对进样量(X)进行回归，得标准曲线方程为：Y=000000X+000000，r=0.0000。
以峰面积值(Y)对进样量(X)作图，得一直线，结果表明
在0.0000μg～0.0000μg范围内，黄芩苷线性关系良好。
3.6 精密度试验
精密吸取同一对照品和供试品溶液5μl 注入液相色谱仪，连续进样5 次，测得黄芩苷峰面积的相对标准差分别为0.00%和0.00%，表明仪器精密度良好。
3.7 稳定性试验
精密吸取同一对照品和供试品溶液5μl，分别于0、4、8、12 小时注入液相色谱仪，测得黄芩苷峰面积的相对标准差分别为0.00%和0.00%，表明对照品和供试品溶液在12小时内稳定。
3.8 重复性试验
按3.1含量测定方法，对同一批号样品(批号000000) ，同时制备6 份样品供试品溶液，精密吸取5μl 注入液相色谱仪，计算黄芩苷含量，其相对标准偏差为0.00%，表明该方法重复性良好。
3.9 加样回收率试验
取已知含量的供试品9 份（批号：000000），每份约0.01g，精密称定，分别置50ml量瓶中,分别加入黄芩苷对照品溶液（浓度：1mg/ml）3、4、5ml(每个水平平行三份)，照3.3项下制备供试品溶液并测定黄芩苷含量，按以下公式计算黄芩苷的回收率。
结果见表1：
测得量(mg)－制剂中黄芩苷的量(mg)
回收率(%)= ×100%
加入黄芩苷量(mg)
表1 加样回收率试验结果(n=2)
按3.1 拟定的含量测定方法，制备样品供试品溶液，对3 批样品进行含量测定。
考虑到药材的来源、炮制加工、制剂生产及贮存等因素，确定其转移率不低于90％，则无糖型双黄连颗粒中黄芩苷含量应不低于200mg/袋。
结果见表2
4. 讨论
在利用RP-HPLC 法测定无糖型双黄连颗粒中黄芩苷的含量时，我们曾采用《中国药典》（2010年版一部)黄芩药材含量测定项下的色谱条件甲醇－水－冰醋酸（50：50：1）进行试验，结果发现供试品溶液在该条件下测定效果良好，保留时间约7分钟左右，且能达到基线分离。
通过线性范围、精密度、稳定性、重现性、回收率等试验考察，证明该方法快速、简便，结果准确可靠，能对无糖型双黄连颗粒中的黄芩苷进行测定，为较好的无糖型双黄连颗粒的质量控制方法。