黄芩主要成分的分析研究方法
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黄芩主要成分的分析 研究方法
黄芩的简介
拉丁名】 Scutellariae） 英文名(Root 【拉丁名】 （Radix Scutellariae） 英文名(Root of Baikel Skullcap) 为唇形科植物黄芩的干燥根。主产于河北、山西、内蒙古、河南、 为唇形科植物黄芩的干燥根。主产于河北、山西、内蒙古、河南、陕西等 秋两季采挖，去除须根及泥沙，晒后撞去粗皮， 地。春、秋两季采挖，去除须根及泥沙，晒后撞去粗皮，蒸透或开水润透 切片，晒干。生用、酒炙或炒炭用。 切片，晒干。生用、酒炙或炒炭用。 药性】 归肺、 大肠、小肠经。 【药性】苦，寒。归肺、胆、脾、胃、大肠、小肠经。 功效】清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。 【功效】清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。 有效成分】 含多种黄酮类化合物,主要为黄芩苷,黄芩素,汉黄芩苷, 【有效成分】 含多种黄酮类化合物,主要为黄芩苷,黄芩素,汉黄芩苷,汉黄 芩素,黄芩新素Ⅰ Ⅱ,去甲汉黄芩素,7-甲氧基黄芩素,7 去甲汉黄芩素,7 ,7芩素,黄芩新素Ⅰ和Ⅱ,去甲汉黄芩素,7-甲氧基黄芩素,7-甲氧基去甲基汉 黄芩素, 此外还有挥发油,苯乙醇糖苷类成分等. 黄芩素,等.此外还有挥发油,苯乙醇糖苷类成分等. 药理作用有】 抗病毒、抗菌作用；抗氧化作用及清除自由基；保肝作用； 【药理作用有】 抗病毒、抗菌作用；抗氧化作用及清除自由基；保肝作用； 抗炎抗过敏作用；抗肿瘤作用；另外,中药黄芩还有保护神经元细胞、 抗炎抗过敏作用；抗肿瘤作用；另外,中药黄芩还有保护神经元细胞、防辐 抑制凝血酶引起的血小板凝聚等作用。 射、抑制凝血酶引起的血小板凝聚等作用。 其中黄芩苷为主要有效成分之一,具有抗脂质过氧化活性、 黄芩苷为主要有效成分之一 其中黄芩苷为主要有效成分之一,具有抗脂质过氧化活性、抗血小板聚集活 抗肿瘤活性。 性、抗肿瘤活性。以下主要介绍黄芩中黄芩苷含量测定的有关方法
中国药典关于黄芩苷含量分析测定的要求
按照高效液相色谱法 附录Ⅵ D）测定。 高效液相色谱法（ 含量测定 按照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂；甲醇－水－磷酸(47:53:0.2) 为流动相；检测波长 填充剂；甲醇－ 磷酸(47:53:0.2) 为流动相； 280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500 2500。 为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。 精密称取在60℃减压干燥4 60℃减压干燥 对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩 苷对照品适量，加甲醇制成每1ml 的溶液，即得。 苷对照品适量，加甲醇制成每1ml 含60μg 的溶液，即得。 取本品中粉约0.3g 精密称定， 0.3g， 供试品溶液的制备 取本品中粉约0.3g，精密称定，加70 乙醇40ml 加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml 40ml， ％乙醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml 量瓶中，用少量70 乙醇分次洗涤容器和残渣， 70％ 量瓶中，用少量70％乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同 一量瓶中， 70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml, 1ml,置 一量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml,置10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl, 10μl,注 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注 液相色谱仪，测定，即得。 入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含黄芩苷(C 不得少于9.0 9.0％ 本品按干燥品计算，含黄芩苷(C21H18O11) 不得少于9.0％ 。
误差较大
制作简单、使用方便、 在方法学上还不够成熟， 制作简单、使用方便、 在方法学上还不够成熟， 重现性好， 重现性好，分析快速 需要对浸泡时间及过滤 等
END 谢谢
④ 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC）膜电极法 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC）
以黄芩苷与三辛基甲基氯化铵的缔合物为活性物质, 以黄芩苷与三辛基甲基氯化铵的缔合物为活性物质, 三辛基甲基氯化铵的缔合物为活性物质 制成PVC PVC膜 以此为电极,Ag/AgCl作为参比电极,10 ,Ag/AgCl作为参比电极,10制成PVC膜,以此为电极,Ag/AgCl作为参比电极,10mol/L黄芩苷溶液作为内参溶液 黄芩苷溶液作为内参溶液, 3 mol/L黄芩苷溶液作为内参溶液,可直接测定黄芩 苷的电位值。 苷的电位值。以标准溶液的电位值与溶液浓度的负 对数作图,在一定范围内为线性相关(5.0 10(5.0× 对数作图,在一定范围内为线性相关(5.0×10-5～ 2.0×10-2mol/L,斜率为52± 斜率为52 9)。 2.0×10-2mol/L,斜率为52±1 mv,γ=0.999 9)。 由此可计算待测样品中黄芩苷的含量。 由此可计算待测样品中黄芩苷的含量。
四种检测分析方法比较
方法 高效液相色谱法 HPLC） （HPLC） 紫外紫外-可见分光 光度法 薄层扫描法 TLCS） （TLCS）
黄芩苷黄芩苷-聚氯乙烯 PVC） （PVC）膜电极法
优点
缺点
灵敏度高，分析速度快， 价格昂贵， 灵敏度高，分析速度快， 价格昂贵，要用各种填 重复性好，定量精度高， 料柱，容量小， 重复性好，定量精度高， 料柱，容量小，流动相 消耗大 。 应用范围广 灵敏度高，操作简单， 灵敏度高，操作简单， 仪器要求不高易于普及 方便快捷、 方便快捷、操作简单 干扰较大
高效液相色谱法（HPLC） ① 高效液相色谱法（HPLC）
最常用的分析检测方法，尤其以反相液相色谱为主（ 最常用的分析检测方法，尤其以反相液相色谱为主（因黄芩 苷极性较弱） 苷极性较弱） 对于黄芩苷来说,人们通常用C18柱或ODS柱作为固定相, C18柱或ODS柱作为固定相 对于黄芩苷来说,人们通常用C18柱或ODS柱作为固定相,普遍 采用甲醇磷酸作为流动相,用紫外检测器(276nm (276nm采用甲醇-水-磷酸作为流动相,用紫外检测器(276nm-280nm) 检测血清或药物当中的黄芩苷含量。 检测血清或药物当中的黄芩苷含量。 应用HLPC法测定中药中黄芩苷的含量,选定色谱柱后, HLPC法测定中药中黄芩苷的含量 应用HLPC法测定中药中黄芩苷的含量,选定色谱柱后,用适当 的流动相使制剂中黄芩苷内标物与其他成分能很好地分离, 的流动相使制剂中黄芩苷内标物与其他成分能很好地分离, 经紫外分光光度计检测峰面积, 经紫外分光光度计检测峰面积,用内标法或外标法由回归方 程计算黄芩苷含量。在测式注射液时可直接测定, 程计算黄芩苷含量。在测式注射液时可直接测定,其他剂型 需加一步除杂质,该法准确性高。 需加一步除杂质,该法准确性高。
紫外② 紫外-可见分光光度法
紫外分光光度法具有灵敏度高，操作简单， 紫外分光光度法具有灵敏度高，操作简单，仪器要 求不高易于普及，对于一些基层机构和药厂不失为一种好方法。 求不高易于普及，对于一些基层机构和药厂不失为一种好方法。 黄芩苷对紫外光具有选择性吸收，可用分光光度法测定含量。 黄芩苷对紫外光具有选择性吸收，可用分光光度法测定含量。黄芩制剂 大多组成复杂， 大多组成复杂，共存成分和黄芩苷的紫外光谱发生不同程度的重叠常干 扰测定，随着光谱技术的发展，现多通过适当的数学处理方式， 扰测定，随着光谱技术的发展，现多通过适当的数学处理方式，应用双 波长，三波长和导数光谱法可不经分离消除干扰组分的影响。 波长，三波长和导数光谱法可不经分离消除干扰组分的影响。 单波长光度法由于黄芩苷制剂成分复杂干扰测定，应用受到一定的限制， 单波长光度法由于黄芩苷制剂成分复杂干扰测定，应用受到一定的限制， 但测定前经过适当的提取分离和处理亦可用来测定黄芩苷的含量。 但测定前经过适当的提取分离和处理亦可用来测定黄芩苷的含量。 三波长-紫外分光光度法是计算机辅助含量测定方法 是计算机辅助含量测定方法。 三波长-紫外分光光度法是计算机辅助含量测定方法。其在干扰组分的 吸收光谱上具有线性吸收的三个波长处对被测组分的吸光度进行测量, 吸收光谱上具有线性吸收的三个波长处对被测组分的吸光度进行测量, 然后通过计算而求得被测组分的含量。此法能消除某些干扰组分的影响、 然后通过计算而求得被测组分的含量。此法能消除某些干扰组分的影响、 溶液混浊、 溶液混浊、吸收池不洁净或不完全配对所引起的误差并且解决随浓度不 同使本底值漂移、吸收峰不对称等给定量分析带来的困难。 同使本底值漂移、吸收峰不对称等给定量分析带来的困难。
其他分析检测方法
高效毛细管电泳法（HPCE） 80年代发展起来的一类分 高效毛细管电泳法（HPCE） 80年代发展起来的一类分 离分析方法，将经典电泳技术和现代微柱分离相结合， 离分析方法，将经典电泳技术和现代微柱分离相结合，具 有高效、高速、微量、操作简单和低耗的优点。此法快捷、 有高效、高速、微量、操作简单和低耗的优点。此法快捷、 灵敏、准确,适用于该制剂的快速含量分析,前景较好， 灵敏、准确,适用于该制剂的快速含量分析,前景较好，有 潜力。 Biblioteka Baidu力。 液相色谱/串联质谱法(LC (LC此方法快速、灵敏、 液相色谱/串联质谱法(LC-MS/MS) 此方法快速、灵敏、 选择性好, 选择性好,非常适于血浆中黄芩苷的药物代谢动力学研究 近红外光谱法 利用近红外光谱漫反射技术直接测定黄 芩原药材中黄芩苷含量。 芩原药材中黄芩苷含量。 薄层-比色法 薄层利用薄层色谱，通过紫外分析仪和荧光灯 利用薄层色谱， 对比分析， 对比分析，测定吸收度
黄芩主要成分的结构
黄芩苷的检测分析方法
① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧
高效液相色谱法（HPLC） 高效液相色谱法（HPLC） 紫外紫外-可见分光光度法 薄层扫描法（TLCS） 薄层扫描法（TLCS） 高效毛细管电泳法（HPCE） 高效毛细管电泳法（HPCE） 液相色谱串联质谱法（LC-MS） 液相色谱串联质谱法（LC-MS） 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC） 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC）膜电极法 近红外光谱法 薄层薄层-比色法
薄层扫描法（TLCS） ③ 薄层扫描法（TLCS）
薄层吸收扫描法具有分离和测定的功能， 薄层吸收扫描法具有分离和测定的功能，测定黄芩苷大多用 聚酞胺薄膜或GF254作为固定相，醋酸-甲醇-甲酸GF254作为固定相 聚酞胺薄膜或GF254作为固定相，醋酸-甲醇-甲酸-水以一定 双波长扫描 比例混合为展开剂，不需要显色剂直接行双波长扫描。 比例混合为展开剂，不需要显色剂直接行双波长扫描。 薄层扫描法具有方便快捷、操作简单的优点，但也有其缺点， 薄层扫描法具有方便快捷、操作简单的优点，但也有其缺点， 其误差常由于点样不精确，展开分离不完全， 其误差常由于点样不精确，展开分离不完全，斑点不集中所 用自动点样装置，选择合适的展开剂可以减少一定误差， 致，用自动点样装置，选择合适的展开剂可以减少一定误差， 且因斑点稳定性欠佳故分离后 应及时测定， 应及时测定，由于薄层板的差异以及 展开时温度、 展开时温度、湿度等外界条件的不同 使该法的重现性较差。 使该法的重现性较差。
黄芩的简介
拉丁名】 Scutellariae） 英文名(Root 【拉丁名】 （Radix Scutellariae） 英文名(Root of Baikel Skullcap) 为唇形科植物黄芩的干燥根。主产于河北、山西、内蒙古、河南、 为唇形科植物黄芩的干燥根。主产于河北、山西、内蒙古、河南、陕西等 秋两季采挖，去除须根及泥沙，晒后撞去粗皮， 地。春、秋两季采挖，去除须根及泥沙，晒后撞去粗皮，蒸透或开水润透 切片，晒干。生用、酒炙或炒炭用。 切片，晒干。生用、酒炙或炒炭用。 药性】 归肺、 大肠、小肠经。 【药性】苦，寒。归肺、胆、脾、胃、大肠、小肠经。 功效】清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。 【功效】清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。 有效成分】 含多种黄酮类化合物,主要为黄芩苷,黄芩素,汉黄芩苷, 【有效成分】 含多种黄酮类化合物,主要为黄芩苷,黄芩素,汉黄芩苷,汉黄 芩素,黄芩新素Ⅰ Ⅱ,去甲汉黄芩素,7-甲氧基黄芩素,7 去甲汉黄芩素,7 ,7芩素,黄芩新素Ⅰ和Ⅱ,去甲汉黄芩素,7-甲氧基黄芩素,7-甲氧基去甲基汉 黄芩素, 此外还有挥发油,苯乙醇糖苷类成分等. 黄芩素,等.此外还有挥发油,苯乙醇糖苷类成分等. 药理作用有】 抗病毒、抗菌作用；抗氧化作用及清除自由基；保肝作用； 【药理作用有】 抗病毒、抗菌作用；抗氧化作用及清除自由基；保肝作用； 抗炎抗过敏作用；抗肿瘤作用；另外,中药黄芩还有保护神经元细胞、 抗炎抗过敏作用；抗肿瘤作用；另外,中药黄芩还有保护神经元细胞、防辐 抑制凝血酶引起的血小板凝聚等作用。 射、抑制凝血酶引起的血小板凝聚等作用。 其中黄芩苷为主要有效成分之一,具有抗脂质过氧化活性、 黄芩苷为主要有效成分之一 其中黄芩苷为主要有效成分之一,具有抗脂质过氧化活性、抗血小板聚集活 抗肿瘤活性。 性、抗肿瘤活性。以下主要介绍黄芩中黄芩苷含量测定的有关方法
中国药典关于黄芩苷含量分析测定的要求
按照高效液相色谱法 附录Ⅵ D）测定。 高效液相色谱法（ 含量测定 按照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂；甲醇－水－磷酸(47:53:0.2) 为流动相；检测波长 填充剂；甲醇－ 磷酸(47:53:0.2) 为流动相； 280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500 2500。 为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。 精密称取在60℃减压干燥4 60℃减压干燥 对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩 苷对照品适量，加甲醇制成每1ml 的溶液，即得。 苷对照品适量，加甲醇制成每1ml 含60μg 的溶液，即得。 取本品中粉约0.3g 精密称定， 0.3g， 供试品溶液的制备 取本品中粉约0.3g，精密称定，加70 乙醇40ml 加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml 40ml， ％乙醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml 量瓶中，用少量70 乙醇分次洗涤容器和残渣， 70％ 量瓶中，用少量70％乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同 一量瓶中， 70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml, 1ml,置 一量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml,置10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl, 10μl,注 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注 液相色谱仪，测定，即得。 入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含黄芩苷(C 不得少于9.0 9.0％ 本品按干燥品计算，含黄芩苷(C21H18O11) 不得少于9.0％ 。
误差较大
制作简单、使用方便、 在方法学上还不够成熟， 制作简单、使用方便、 在方法学上还不够成熟， 重现性好， 重现性好，分析快速 需要对浸泡时间及过滤 等
END 谢谢
④ 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC）膜电极法 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC）
以黄芩苷与三辛基甲基氯化铵的缔合物为活性物质, 以黄芩苷与三辛基甲基氯化铵的缔合物为活性物质, 三辛基甲基氯化铵的缔合物为活性物质 制成PVC PVC膜 以此为电极,Ag/AgCl作为参比电极,10 ,Ag/AgCl作为参比电极,10制成PVC膜,以此为电极,Ag/AgCl作为参比电极,10mol/L黄芩苷溶液作为内参溶液 黄芩苷溶液作为内参溶液, 3 mol/L黄芩苷溶液作为内参溶液,可直接测定黄芩 苷的电位值。 苷的电位值。以标准溶液的电位值与溶液浓度的负 对数作图,在一定范围内为线性相关(5.0 10(5.0× 对数作图,在一定范围内为线性相关(5.0×10-5～ 2.0×10-2mol/L,斜率为52± 斜率为52 9)。 2.0×10-2mol/L,斜率为52±1 mv,γ=0.999 9)。 由此可计算待测样品中黄芩苷的含量。 由此可计算待测样品中黄芩苷的含量。
四种检测分析方法比较
方法 高效液相色谱法 HPLC） （HPLC） 紫外紫外-可见分光 光度法 薄层扫描法 TLCS） （TLCS）
黄芩苷黄芩苷-聚氯乙烯 PVC） （PVC）膜电极法
优点
缺点
灵敏度高，分析速度快， 价格昂贵， 灵敏度高，分析速度快， 价格昂贵，要用各种填 重复性好，定量精度高， 料柱，容量小， 重复性好，定量精度高， 料柱，容量小，流动相 消耗大 。 应用范围广 灵敏度高，操作简单， 灵敏度高，操作简单， 仪器要求不高易于普及 方便快捷、 方便快捷、操作简单 干扰较大
高效液相色谱法（HPLC） ① 高效液相色谱法（HPLC）
最常用的分析检测方法，尤其以反相液相色谱为主（ 最常用的分析检测方法，尤其以反相液相色谱为主（因黄芩 苷极性较弱） 苷极性较弱） 对于黄芩苷来说,人们通常用C18柱或ODS柱作为固定相, C18柱或ODS柱作为固定相 对于黄芩苷来说,人们通常用C18柱或ODS柱作为固定相,普遍 采用甲醇磷酸作为流动相,用紫外检测器(276nm (276nm采用甲醇-水-磷酸作为流动相,用紫外检测器(276nm-280nm) 检测血清或药物当中的黄芩苷含量。 检测血清或药物当中的黄芩苷含量。 应用HLPC法测定中药中黄芩苷的含量,选定色谱柱后, HLPC法测定中药中黄芩苷的含量 应用HLPC法测定中药中黄芩苷的含量,选定色谱柱后,用适当 的流动相使制剂中黄芩苷内标物与其他成分能很好地分离, 的流动相使制剂中黄芩苷内标物与其他成分能很好地分离, 经紫外分光光度计检测峰面积, 经紫外分光光度计检测峰面积,用内标法或外标法由回归方 程计算黄芩苷含量。在测式注射液时可直接测定, 程计算黄芩苷含量。在测式注射液时可直接测定,其他剂型 需加一步除杂质,该法准确性高。 需加一步除杂质,该法准确性高。
紫外② 紫外-可见分光光度法
紫外分光光度法具有灵敏度高，操作简单， 紫外分光光度法具有灵敏度高，操作简单，仪器要 求不高易于普及，对于一些基层机构和药厂不失为一种好方法。 求不高易于普及，对于一些基层机构和药厂不失为一种好方法。 黄芩苷对紫外光具有选择性吸收，可用分光光度法测定含量。 黄芩苷对紫外光具有选择性吸收，可用分光光度法测定含量。黄芩制剂 大多组成复杂， 大多组成复杂，共存成分和黄芩苷的紫外光谱发生不同程度的重叠常干 扰测定，随着光谱技术的发展，现多通过适当的数学处理方式， 扰测定，随着光谱技术的发展，现多通过适当的数学处理方式，应用双 波长，三波长和导数光谱法可不经分离消除干扰组分的影响。 波长，三波长和导数光谱法可不经分离消除干扰组分的影响。 单波长光度法由于黄芩苷制剂成分复杂干扰测定，应用受到一定的限制， 单波长光度法由于黄芩苷制剂成分复杂干扰测定，应用受到一定的限制， 但测定前经过适当的提取分离和处理亦可用来测定黄芩苷的含量。 但测定前经过适当的提取分离和处理亦可用来测定黄芩苷的含量。 三波长-紫外分光光度法是计算机辅助含量测定方法 是计算机辅助含量测定方法。 三波长-紫外分光光度法是计算机辅助含量测定方法。其在干扰组分的 吸收光谱上具有线性吸收的三个波长处对被测组分的吸光度进行测量, 吸收光谱上具有线性吸收的三个波长处对被测组分的吸光度进行测量, 然后通过计算而求得被测组分的含量。此法能消除某些干扰组分的影响、 然后通过计算而求得被测组分的含量。此法能消除某些干扰组分的影响、 溶液混浊、 溶液混浊、吸收池不洁净或不完全配对所引起的误差并且解决随浓度不 同使本底值漂移、吸收峰不对称等给定量分析带来的困难。 同使本底值漂移、吸收峰不对称等给定量分析带来的困难。
其他分析检测方法
高效毛细管电泳法（HPCE） 80年代发展起来的一类分 高效毛细管电泳法（HPCE） 80年代发展起来的一类分 离分析方法，将经典电泳技术和现代微柱分离相结合， 离分析方法，将经典电泳技术和现代微柱分离相结合，具 有高效、高速、微量、操作简单和低耗的优点。此法快捷、 有高效、高速、微量、操作简单和低耗的优点。此法快捷、 灵敏、准确,适用于该制剂的快速含量分析,前景较好， 灵敏、准确,适用于该制剂的快速含量分析,前景较好，有 潜力。 Biblioteka Baidu力。 液相色谱/串联质谱法(LC (LC此方法快速、灵敏、 液相色谱/串联质谱法(LC-MS/MS) 此方法快速、灵敏、 选择性好, 选择性好,非常适于血浆中黄芩苷的药物代谢动力学研究 近红外光谱法 利用近红外光谱漫反射技术直接测定黄 芩原药材中黄芩苷含量。 芩原药材中黄芩苷含量。 薄层-比色法 薄层利用薄层色谱，通过紫外分析仪和荧光灯 利用薄层色谱， 对比分析， 对比分析，测定吸收度
黄芩主要成分的结构
黄芩苷的检测分析方法
① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧
高效液相色谱法（HPLC） 高效液相色谱法（HPLC） 紫外紫外-可见分光光度法 薄层扫描法（TLCS） 薄层扫描法（TLCS） 高效毛细管电泳法（HPCE） 高效毛细管电泳法（HPCE） 液相色谱串联质谱法（LC-MS） 液相色谱串联质谱法（LC-MS） 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC） 黄芩苷-聚氯乙烯（PVC）膜电极法 近红外光谱法 薄层薄层-比色法
薄层扫描法（TLCS） ③ 薄层扫描法（TLCS）
薄层吸收扫描法具有分离和测定的功能， 薄层吸收扫描法具有分离和测定的功能，测定黄芩苷大多用 聚酞胺薄膜或GF254作为固定相，醋酸-甲醇-甲酸GF254作为固定相 聚酞胺薄膜或GF254作为固定相，醋酸-甲醇-甲酸-水以一定 双波长扫描 比例混合为展开剂，不需要显色剂直接行双波长扫描。 比例混合为展开剂，不需要显色剂直接行双波长扫描。 薄层扫描法具有方便快捷、操作简单的优点，但也有其缺点， 薄层扫描法具有方便快捷、操作简单的优点，但也有其缺点， 其误差常由于点样不精确，展开分离不完全， 其误差常由于点样不精确，展开分离不完全，斑点不集中所 用自动点样装置，选择合适的展开剂可以减少一定误差， 致，用自动点样装置，选择合适的展开剂可以减少一定误差， 且因斑点稳定性欠佳故分离后 应及时测定， 应及时测定，由于薄层板的差异以及 展开时温度、 展开时温度、湿度等外界条件的不同 使该法的重现性较差。 使该法的重现性较差。