美天旎公司磁珠分选产品

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美天旎公司磁珠分选产品

附：Miltenyi分离柱技术指标及图片
Miltenyi的柱子回收方法
准备使用回收的柱子时，抗体孵育始，即将柱子置于新鲜的75%酒精中，柱的容器内盛满酒精，自动流下，既消毒，又de-gas，去除气泡十分关键。洗抗体时，即开始洗柱子，将回收柱架于消毒过的长试管口上。换新的酒精自然滴下，换PBS+0.1%FBS冲洗之，最后用MACSBuffer冲洗。柱子准备完毕，准备上柱的细胞也就同时准备好了。
（主要针对Miltenyi产品）
一、标记策略
用MACS进行磁分离，最重要的参数就是高质量的标记。对阳性细胞的标记应尽可能强，而背景要尽可能低，才能获得对磁标记的阳性细胞和未标记的阴性细胞的最好分辨。有多种不同的标记策略可供参考：
1、直接标记
直接标记是最快速和最特异的磁标记方法。
2、间接标记
几乎所有的单克隆抗体或多克隆抗体都可以用于间接标记。用无标记的、生物素化的或FITC、PE或APC结合的一抗标记细胞，再用抗免疫球蛋白、抗生物素、链霉菌亲和素、抗FITC、抗PE、或抗APC的微珠分别进行磁标记。间接标记可以放大磁标记，用于分离表达比较弱的标记很有用。在间接标记中，以使用生物素化的或PE表记的一抗结果特异性最好。
109个标记细胞
SuperMACS
自动分选
AutoMACS分选柱
4X109总细胞2X108个标记细胞
AutoMACS
CliniMACS
6-12X1010总细胞6-12X108个标记细胞
CliniMACS
分子生物学分选
μ分选柱
10μgmRNA
μMACS
M分选柱
50μgmRNA
MiniMACS
Miltenyi磁柱选择及标记问题
回收方法

miltenyi biotec(德国美天旎生物公司)CD133相关专利产品

CD133是近年在干细胞领域研究较为活跃的细胞膜糖蛋白之一,常表达于未成熟的造血干细胞或祖细胞,新近有报道认为它在脑肿瘤、前列腺癌、小鼠的Lewis肺癌、B16黑色素瘤的干细胞中均有表达,已被认为是这些肿瘤干细胞的标志之一。

miltenyi biotec（德国美天旎）拥有CD133全系列的全球专利。

美天旎部分CD133：一.CD133的分子结构人CD133抗原为5次跨膜糖蛋白，目前发现的同源性抗原有CD133_1和CD133_2，其基因分别定位在人类的4号和2号染色体上，分析CD133的基因结构发现，CD133_1基因至少含有27个外显子，CD133_2基因比CD133_1基因少1个27 bp的4号外显子。

CD133_1抗原cDNA全长为3 794 bp，其中5′端有37 bp的非翻译区，3′端有1 159 bp的UTR，中间为2 598 bp的开放阅读框，编码865个氨基酸的蛋白。

转录起始密码子ATG位于38bp 处，ATG之后还有一编码19个氨基酸的信号肽序列,终止密码子位于第2 763位,第3 906核苷酸处有一长20 bp的polyA序列。

CD133_1与CD133_2的相对分子质量分别为120 KD 和112 KD，CD133_2由含856个氨基酸的肽链组成，比CD133_1少9个位于E1区的氨基酸[2]。

在发现人CD133的同年，在小鼠中也发现了CD133_1的同源性抗原并命名为Prominin_1，二者具有60％的相似结构，之后，成功克隆出Prominin_2，与Prominin_1和人CD133分别有29％和26％的相似结构，认为是Prominin_1的同源性抗原。

CD133的功能目前尚不清楚，存在于C端的酪氨酸暗示它可能是通过酪氨酸残基磷酸化作用而发挥级联效应的生长因子受体。

二. CD133阳性的肿瘤干细胞利用某些干细胞标志物与肿瘤细胞标志物相结合的方法确定肿瘤干细胞特异性的标志物，是当前肿瘤干细胞筛选的主要手段。

德国美天妮磁珠分选

MD0043.02
MACS® 细胞分选策略
• 阳性分选
• 去除分选 • 去除分选后再阳性分选
• 多重分选
MD0044.02
MACS细胞分选策略
1、阳性分选：
• 根据特异性标志分选细胞: 阳性分选是指目的细胞磁性标记
后，作为阳性的标记组分直接分选出来。
• 优点：
》高纯度，尤其是富集稀有的细胞》高回收率》操作简便、迅速
MD0044.02
识别DC和DC亚群 New
DC 亚群特异性标志: Blood Dendritic Cell Antigens
Lineage- (CD3, CD14, CD16, CD19, CD20, CD56) HLA-DR+ CD11c+ CD123low/-
BDCA-2/4+ BDCA-1+ BDCA-3+
MD0044.02
MACS® 技术分选与分析功能性T细胞
T细胞分选
T细胞亚群
T细胞功能亚群
抗原特异性 T细胞
Th细胞（ CD4） Tc细胞（ CD8）调节性 T细胞 (CD4+CD25+) TCRr/d 细胞 (TCRr/d微珠 ) NK/T细胞 (CD56多选微珠＋ CD3微珠 )
NaiveT细胞 (CD45RO阴选 ) 活化 T细胞（ CD69、 CD25、 CD30）效应 T细胞（ CD27）记忆 T细胞（ CD45RA阴选、 CD45RO阳选） Th2细胞 (anti-CRTH2)
IFN-r IL-2 IL-4 IL-10 TNF-a
MD0044.02
MACS® 细胞因子分泌细胞分析与分选 New
Catch Reagent

德国美天妮磁珠分选

New
CD11c
CD11c+ B220+ Gr-1 (Ly-6C/G)+ DC
Conventional DC
Plasmacytoid DC (PDC)
CD11c B220 Gr-1
CD8+ DC
(―lymphoid― DC)
CD4+ DC
(―myeloid― DC)
mPDCA-1
CD11c CD8a
Miltenyi Biotec: 免疫磁珠分选技术及应用
德国美天旎生物技术有限公司北方区技术支持王卉
1/1 MD0xxx.01
内容
• MACS技术原理 • MACS技术设备及分选策略 • 几种特殊的MACS分选
分选和分析DC细胞分选各种T细胞分选和分析细胞因子分泌细胞分选造血干细胞分选人类肿瘤细胞分选和分析凋亡和死亡细胞分选转染细胞分子生物学和蛋白生化的分选
MD0044.02
主要卖点
干细胞产品：人类：CD133、CD34、MSC试剂盒（CD271）小鼠：系别阴性试剂盒、CD117微珠定向分化培养基 DC产品：人类：BDCA-1、BDCA-2/4 小鼠：CD11c NK产品：人类：NK细胞阴选试剂盒、CD3/CD56 T细胞产品： CD4+CD25+调节性T细胞（人和小鼠） CSA系列 CD4、CD8微珠及阴选试剂盒 B细胞产品： CD19微珠及阴选试剂盒肿瘤细胞分选：癌细胞富集试剂盒、HEA微珠、CD45阴选单核细胞分选：CD14微珠及阴选试剂盒间标微珠死细胞去除试剂盒预选滤器、FCR阻断剂、T细胞活化与扩增试剂盒流式细胞仪抗体（价廉、包装量大、优质）
MD0044.02
识别DC和DC亚群 New

MACS(磁珠分选)介绍-优宁维

技术一：MACS磁珠分选介绍MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。

MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了一种可在每一个实验室进行高品质细胞分选的方法。

MACS技术主要组成成分为MACS微珠、MACS分选柱和MACS分选器。

MACS微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒。

MACS分选柱置于一个永久性磁场—MACS分选器中，可以将磁力增强1000倍，足以滞留仅标记极少量微珠的目的细胞。

用缓冲液冲洗分选柱，所有未标记的细胞被冲洗掉。

分选柱离开磁场，即可获得被标记的细胞组分。

所有的操作在2.5－30分钟内即可完成，得到的细胞可立即用于后继实验。

德国美天旎公司是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。

开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为其专利产品。

MACS技术优点1、稳定、高质量的分选使用MACS技术，可获得高纯度（90-99%）、高回收率的分选细胞群。

2、对细胞无损伤50nm微珠和MACS分选柱均无毒性，对细胞无损伤，可以纯化有活力和功能活性的细胞而不影响其活性。

3、操作简便、快速MACS技术操作简单，消毒方便。

磁珠孵育时间很短，仅需15分钟。

手动分选可在30分钟内完成，autoMACS分选可在2.5-10分钟之内完成。

4、从实验室到临床MACS技术可以实现从105到1011个细胞分选。

美天旎临床产品解决方案

德国美天旎生物技术公司上海强智生物科技有限公司
德国美天旎临床解决方案
美天旎的完整解决平台–细胞治疗的首选工具
MACS GMP Antibodies CliniMACS and Reagents MACS GMP Antigens MACS GMP Cytokines MACS GMP Media MACS culture bag
细胞治疗领域介绍 3
自身免疫病 - 自体干细胞移植
主要适应症-CD34分选
1. 严重系统性硬化 2. 系统性红斑狼疮 3. 克隆氏病
严重的自身免疫病疾病用SCT治疗是必须的。
重要的临床试验 - ASTIS和ASSIST
ASTIS（系统性硬化）
入选150例患者已经完成，2010年10月完成最后一例入选 2011年发表安全性检测报告 2012年发表有效性报告
肿瘤，感染和耐受包括下列产品
细胞因子捕获系统（IFN-r）用于分离AgT CD8用于富集TIL
CD56,CD3,CD19用于富集NK细胞
CD14用于富集MoDC细胞 CD1c,CD304用于富集BDC，分别为MDC和PDC
CD25用于富集Treg细胞，有时也用CD8,CD19
预防复发，减轻感染，帮助抑制，支持免疫重建，从GVT中分离GvHD
CD45R去除系统：去除naiveT细胞，预防GvHD Treg细胞：CD25，减轻免疫耐受，预防GvHD，也可结合TexMACS GMP Treg
medium和GMP ExpAct Treg kit扩增Treg细胞。
DC疫苗和CCS：CD14，预防移植后的感染
CliniMACS® 富集管道系统
临床用
科研用（临床前期）

德国美天妮磁珠分选

MACS技术技术
设备与试剂
• MACS分选器
autoMACS分选仪分选仪
• 9种程序，一机完成所有细胞分选种程序，种程序 • 成本低，两个可重复使用的分选成本低，周内100次柱（2周内次）周内 • 快速（3－10分钟）快速（－分钟分钟） •重复性好重复性好 • 全自动分选，仪器操作简单全自动分选， • 适用范围广：从少量标本（105）适用范围广：从少量标本（到大量标本（），进样量到大量标本（4X109），进样量 0.5ml-50ml • 8种全血微珠，可以做常见细胞的种全血微珠，种全血微珠全血分选，全血分选，省去了费时的提取单个核细胞过程
• 去除分选是磁性标记非目的细胞，并将其从细胞混合物中去去除分选是磁性标记非目的细胞，
除，即未磁性标记的细胞为目的细胞。即未磁性标记的细胞为目的细胞。
• 去除分选策略适用范围：去除分选策略适用范围：
》去除不需要的细胞缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤细胞）》缺乏针对目的细胞的特异性抗体（如肿瘤细胞）》不需要抗体和目的细胞结合》需进一步通过阳性选择分选细胞亚群
MD0347.01
MACS® 磁性分选
MACS微珠进行微珠进行磁性标记
洗脱阳性分选的细胞
未标记的细胞先行流出
MD0651.01
分选前标本制备：分选前标本制备：过滤
.02
MACS 技术
设备与试剂
» MACS微珠微珠 » MACS分选柱 MACS分选柱 » MACS 分选器 » 详细分选方案详细分选方案*
MD0197.02
MACS技术技术
设备与试剂
• MACS微珠：微珠：微珠
MACS 微珠是与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，可用于目的细胞的磁性标记。磁化微粒，可用于目的细胞的磁性标记。

美天旎细胞治疗全线-130723

细胞特异性的免疫磁性标记试剂
管道
Mo-DC culture
5~7 ds
2 ds
美天旎DC细胞治疗方案
GM-CSF 1000 IU/mL IL-4 1000 IU/mL
流式细胞检测CD11c， CD40 ，CD80，CD83，CD86
IL-6 1000 IU/mL TNFα 1100 IU/mL IL-1β 1900 IU/mL PGE2 1 µg/mL
某些不适合手术、不能耐受放化疗的中晚期癌症
非T细胞相关的白血病和淋巴瘤
乙型肝炎，丙型肝炎，慢性寄生虫感染等
对于手术、放化疗或造血干细胞移植后患者体内微小残留病灶的清除，防止癌细胞扩散和复发
T细胞相关淋巴瘤和白血病；器官移植后，长期使用免疫抑制药物或正在使用免疫抑制药物的患者；自身免疫病患者
美天旎产品在CIK细胞治疗中的应用
NK治疗简介 NK（Natural Killer）来源尚不清楚，体外实验
表明，胸腺细胞在体外IL-2、 IL-12、IL-15、 IFN-α、TNF-α等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。
NK细胞表面标记物为：CD3- CD56+
NK 细胞杀死肿瘤细胞特点
广泛识别肿瘤细胞，自然杀伤活性无MHC限制分泌穿孔素及肿瘤坏死因子起效快、杀伤能力强
重悬NK细胞，调整浓度2×10e6
过夜培养(1000 U/ml IL-2)。用 5% HSA溶液洗
涤两次，重悬浮细胞
NK细胞终产品，调整细胞浓度2×10e7，回输人体, 注射Hi-Cy/Flu，连续14
天注射IL-21 （1.75*10e6 IU/m2）
流式鉴定表型（CD3,CD4,CD8,CD56，CD25）

不知道分选柱该如何选择

不知道分选柱该如何选择？给你方案！美天旎的分选柱分几类，如MS、LS、LD级autoMACS column 等，那么，这些有什么区别呢，您在实验中又该如何去选择适合您的分选柱呢？首先，让我们来认识一下分选柱：美天旎的分选柱（Column）是MACS技术的核心，其特点如下：•填充有不同规格的铁珠，可分选或者去除10^7-10^10细胞；•表面亲水包被，不损伤细胞，同时保证流速；•可以将磁场放大1000-10000倍，因此只需极少的细胞表位被识别即可被磁场捕获，从而为后续实验预留足够抗原表位，如磁珠分选后的细胞无需切除磁珠即可直接染流式抗体，而不受影响。

我们知道，美天旎的MACS分选策略有阳性分选、去除分选，那我们就按两种分选策略来分析如何选择恰当的分选柱：一、阳性分选1、要分选的细胞数量：如下图所示：MS柱容纳的最大细胞上样量是2×10^8细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞最多是10^7。

2、目的细胞是常见细胞还是稀有细胞为了在分选稀有细胞（表达频率〈5%）时得到较更高的纯度，您可以使用两个分选柱：用一根分选柱进行一次分选后，阳性成份再过一次新的分选柱。

3、大体积的细胞另外，如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞，如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等，那推荐您使用Large cell column。

因为大细胞柱的铁珠间隙足够大，容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。

二、去除分选去除分选中需要考虑以下几个因素：1您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads吗？2 抗原表达强还是弱呢？3 您需要更高的纯度还是回收率呢？4 您需要分选多少细胞？根据这几个因素，您可以按下图的标识来选择合适的去除分选柱。

德国美天旎LS柱说明书

Contents1. Description1.1 Background1.2 Technical specifications1.3 Product applications1.4 Reagent and instrument requirements2. Use of LS Columns2.1 Preparation of LS Columns2.2 Magnetic separation using LS Columns1. DescriptionComponents LS Columns (# 130-042-401):25 LS Columns and plungers, sterile packedor LS Columns plus tubes (# 130-041-306):25 LS Columns and plungers (# 130-042-401),sterile packed, and 75×13 mL tubes forLS Columns (# 130-091-596), sterile packed as3×25 tubes.Storage Store columns dry and protected from light.The expiration date is indicated on the box label.Do not use after this date.1.1 BackgroundThe patented MACS® Column Technology is based on the use of MACS MicroBeads, MACS Columns and MACS Separators. LS Columns have been developed for the gentle isolation of MicroBead labeled cells. As MACS MicroBeads are extremely small, superparamagnetic particles, a high-gradient magnetic field is required to retain the labeled cells. LS Columns contain an optimized matrix to generate this strong magnetic field when placed in a permanent magnet such as the MidiMACS™ Separator, QuadroMACS™ Separator, VarioMACS™Separator, SuperMACS™ Separator or SuperMACS™ II Separator. LS Columns contain a hydrophilic coating which allows rapid filling. This coating is washed out by rinsing the LS Column with buffer before separation. After incubation with MACS MicroBeads, the cell suspension is loaded onto the LS Column. The unlabeled cells run through while the magnetically labeled cells are retained on the LS Column. The retained material is washed with buffer to remove unlabeled material. After removal of the LS Column from the magnetic field, the magnetically retained cells can be eluted as the positively selected cell fraction, using the plunger supplied with the LS Column.1.2 Technical specifications●Column capacity: 1×10⁸ magnetically labeled cells from up to2×10⁹ total cells.▲ Note: Column capacity may decrease when separating cells larger than lymphocytes.●Recommended sample size for leukocytes: 10⁵–10⁸ labeled cellsin 10⁷–2×10⁹ total cells. ●Typical enrichment rate: 50-fold to up to 1,000-fold, dependingon the strength and specificity of the magnetic labeling. Up to 10,000-fold enrichment can be achieved by separation over two sequential columns.●Columns are "flow stop" and do not run dry.●Void volume: 400 µL. Reservoir volume: 8 mL.●Typical flow rate for PBS (phosphate-buffered saline) containing0.5% BSA (bovine serum albumin): 1.3–2.0 mL/min.●LS Columns are for single use only.1.3 Product applicationsLS Columns have been developed for positive selection of human and animal cells, especially rare cells, out of a heterogeneous cell suspension in combination with a MACS Separator. LS Columns can also be used for depletion of cells which strongly express the magnetically labeled surface antigen. They can also be used to separate other biological material such as plant cells, bacteria, viruses, protozoa, cell organelles etc.▲ Do not use LS Columns in combination with magnetic particles other than MACS MicroBeads. Magnetic forces in the column are very high and may damage biological material if other beads are used.▲ LS Columns are not suitable for particles larger than 30 µm. To remove clumps and to prevent aggregates in the sample, resuspend material carefully and pass through 30 µm nylon mesh (Pre-Separation Filters, # 130-041-407) before separation.▲ Samples or buffers with high viscosity might cause reduced column flow or column clogging.1.4 Reagent and instrument requirements● Buffer: Prepare a solution containing phosphate-buffered saline(PBS), pH 7.2, 0.5% bovine serum albumin (BSA), and 2 mM EDTA by diluting MACS BSA Stock Solution (# 130-091-376) 1:20 with autoMACS™ Rinsing Solution (# 130-091-222). Keep buffer cold (2−8 °C). Degas buffer before use, as air bubbles could block the column.▲ Note: The recommended buffer is PBS supplemented with EDTA and BSA. The suitability of other buffers has to be tested experimentally.▲ Note: Use degassed buffer only! Degas buffer by applying vacuum, preferentially with buffer at room temperature. Excessive gas in running buffer will form bubbles in the matrix during separation. This may lead to clogging of the column and decrease the quality of separation.●MACS MicroBeads for magnetic labeling of cells.●MidiMACS Separator, QuadroMACS Separator, VarioMACSSeparator, SuperMACS Separator or SuperMACS II Separator.●LS Column Adapter (# 130-090-544) for use with VarioMACSSeparator or SuperMACS Separator, or Adapter for MS, LS and LD Columns for use with SuperMACS II Separator.●MACS Acrylic Tube Rack (# 130-041-406) or MACS 15 mL TubeRack (# 130-091-052).●(Optional) Pre-Separation Filters (# 130-041-407) to remove cellclumps.LS ColumnsLS Columns Order no. 130-042-401 LS Columns plus tubes Order no. 130-041-306140-000-127.08Miltenyi Biotec GmbHFriedrich-Ebert-Straße 68, 51429 Bergisch Gladbach, Germany Phone +49 2204 8306-0, Fax +49 2204 85197macs@miltenyibiotec.de Miltenyi Biotec Inc.2303 Lindbergh Street, Auburn, CA 95602, USAPhone 800 FOR MACS, +1 530 888 8871, Fax +1 530 888 8925 macs@page 1/22. Use of LS Columns2.1 Preparation of LS Columns1. Insert LS Column with the column wings to the front into anMACS Separator according to A), B), or C).A) Use with MidiMACS™ or QuadroMACS™ SeparatorAttach MidiMACS™Separator or QuadroMACS™Separator to the MultiStand and place LS Column in the separator. Place a collection tube under the LS Column.▲ Note:Check that the ejection blocks in the gap of the magnet are attached before placing the MACS Column into the magnetic field of the MidiMACS or QuadroMACS Separator.▲ Note:Be careful when attaching the QuadroMACS Separator to the MultiStand to avoid trapping your fingers (for details see QuadroMACS Starting Kit data sheet).B) Use with VarioMACS™or SuperMACS™ SeparatorInsert LS Column Adapter in the magnetic field of the VarioMACS™Separator or the SuperMACS™Separator (for details, see LS Column Adapter Kit data sheet). Place the LS Column in the LS Column Adapter and the 13 mL collection tube in the tube holder.C) Use with SuperMACS™ II SeparatorInsert Adapter for MS, LS, and LD Columns in the magnetic field of the SuperMACS™ II Separator (for details, see SuperMACS II data sheets). Place the LS Column in the Column Adapter and the 13 mL collection tube in the lower tube holder. 2. Prepare LS Column by rinsing with buffer: apply 3 mL ofdegassed buffer on top of the column and let the buffer run through. LS Columns are "flow stop" and do not run dry.3. Discard effluent and change collection tube. The LS Column is nowready for magnetic separation.▲Note: Use column immediately after filling to avoid formation of air bubbles caused by warming up. Do not store columns after filling.▲ Note: The time for filling the column with buffer is dependent on the storage conditions, temperature and humidity. Therefore, the time may vary from a few seconds to several minutes. This filling time has no influence on the quality of theseparation.2.2 Magnetic separation using LS Columns▲For details on magnetic labeling, see MACS Cell Separation Reagent data sheets.1. Resuspend up to 108 total cells in 500 µL of buffer.▲ Note:For higher cell numbers, scale up buffer volume accordingly.▲ Note:When working with fresh anticoagulated blood or buffy coat, dilute before separation 1:2 with buffer.▲ Note:To remove clumps, pass cells through Pre-Separation Filters.2. Apply cell suspension onto the prepared LS Column.3. Collect unlabeled cells which pass through. Wash LS Columnwith 3×3 mL degassed buffer, adding buffer each time once the column reservoir is empty. Collect total effluent. This is the unlabeled cell fraction.4. Remove LS Column from the separator and place it on a newcollection tube.5. Pipette 5 mL buffer onto the LS Column. Immediately flush outfraction with the magnetically labeled cells by firmly applying the plunger supplied with the column.▲ Note: To increase the purity of the magnetically labeled fraction, it can be passed over a new, freshly prepared MS Column (for up to 107 magnetically labeled cells) or LS Column (for up to 108 magnetically labeled cells).WarrantyThe products sold hereunder are warranted only to be free from defects in workmanship and material at the time of delivery to the customer. Miltenyi Biotec GmbH makes no warranty or representation, either expressed or implied, with respect to the fitness of a product for a particular purpose. There are no warranties, expressed or implied, which extend beyond the technical specifications of the products. Miltenyi BiotecGmbH’s liability is limited to either replacement of the products or refund of the purchase price. Miltenyi Biotec GmbH is not liable for any property damage, personal injury or economic loss caused by the product.MACS is a registered trademark and autoMACS, MidiMACS, QuadroMACS, SuperMACS, and VarioMACS are trademarks of Miltenyi Biotec GmbH.© 2007 Miltenyi Biotec GmbH.140-000-127.08Order no. 130-042-401Order no. 130-041-306page 2/2Unless otherwise specifically indicated, Miltenyi Biotecproducts and services are for research use only and not fordiagnostic or therapeutic use.。

MACS技术介绍

高功率，水冷
需要调整 488nm、 633nm、 407nm 模拟否 7
数据处理模式脱机补偿最多检测FL
分选速度
300/sec
no
70000/sec
10000/sec
MACS分选与 FACS分选比较 MACS优势1
• 快速》FACS分选时间: 》MACS® 分选时间: （FACS Aria） (autoMACS™ 分选仪) 每秒钟获取70 000 细胞平均每秒钟处理107 细胞 108 cells => 2 3 min 108 cells => 5 min 109 cells => 4 h 109 cells => 5 min （没有包括操作人员调节（无需调节机器）机器时间） • 操作简单、无需专人操作，可随时使用 • 分选后细胞活性好 • 无菌分选：仪器小巧，可以进操净台，耐受紫外线照射，消毒方便，耗材为无菌性包装
• 在没有直接标记微珠可选时
• 使用自备抗体或配体的磁性分选中
• 分选或去除用多个抗体混合物标记的多种细胞
• 分选稀有细胞和抗原弱表达的细胞
• 分选标记蛋白质
MACS分选柱
填充有磁性铁珠，有亲水包被，对细胞柔和。
在分选器中产生高梯度磁场，滞留带有微珠磁性标记的细胞
MACS分选柱
• 能进行完全的清洗 • 单独无菌包装，便于无菌条件使用 • 可用于分选多种细胞及亚细胞物质、细菌、病毒、mRNA 和蛋白质
美天旎中国
• 2001年设立中国代表处，目前美天旎中国总部位于上海，在北京、广州设有办事处。 • 美天旎中国目前有近15名员工，分属销售与产品推广部，市场与技术服务部，客服与物流部。 • 美天旎中国合作伙伴总进口商:中仪英斯泰克进出口公司代理商：上海强智生物技术有限公司上海优宁维生物科技有限公司北京利文商贸有限公司

磁珠分选产品

美天旎公司MACS(磁珠分选)相关产品一、MACS微珠（MicroBeads）MACS微珠是一种与高度特异性单克隆抗体相偶联的超顺磁化微粒，用于目的细胞或者去除细胞的磁性标记。

微珠直径约有50nm，比细胞小200多倍，体积为细胞的百万分之一，光学显微镜下不可见。

微珠由多聚糖和氧化铁组成，无毒性，对细胞无损伤，可以生物降解。

MACS微珠与流式细胞仪兼容，不会影响细胞的光散射特性；磁性标记只占用20－30％的结合位点，不影响细胞的荧光抗体标记。

此外，MACS微珠可以最大限度地避免细胞活化；无需解离磁珠，可以直接进行后续实验：如流式细胞仪分析或分选、细胞培养、分子生物学研究、回输给人或者动物。

MACS微珠主要有三种：直标微珠、间标微珠、多选微珠。

其中间标微珠有抗免疫球蛋白微珠、抗生物素微珠或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠。

多选微珠是专门为分选细胞亚群而研制的一种微珠。

这种微珠通过特殊的方式与抗体偶联，在第一次阳性分选完成后，与细胞结合的多选微珠可以被解离试剂剪切下来，阳性分选的细胞可以进行再次阳性分选或者去除分选。

MACS技术分选的CD8阳性T细胞（箭头所示为磁性结合在细胞表面的微珠）二、MACS分选柱（Separation Column）MACS分选柱是一类填充有不同规格铁珠的塑料容器，铁珠表面有亲水包被，因此不会损伤细胞。

在磁场外MACS分选柱不带有磁性，但是当置于一个永久性磁场—MACS分选器中时，分选柱内的铁珠可以使分选器的磁场增强1000倍，足以滞留仅标记有极少量微珠的目的细胞；磁性标记细胞从分选柱中通过时可以受到均匀的磁力作用，从而提高分选纯度和回收率。

手动操作在30分钟内可完成，自动分选仅需2.5-10分钟，得到的细胞可立即用于后续实验。

此外，大多数MACS分选柱都是无菌包装，一次性使用，可以满足细胞培养所需的无菌条件。

三、MACS分选器（MACS Separators）MACS分选器由永久性磁铁和支架构成。

CliniMACS介绍

美天旎细胞治疗平台CliniMACS系统简介第一部分、德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍第二部分、CliniMACS系统在临床细胞治疗中的应用一、CliniMACS细胞分选仪及其配件介绍二、CliniMACS CD34系统的安全性德国美天旎生物技术有限公司上海市仙霞路319号远东国际广场A栋2301室200051电话：（86 21）62351005传真：（86 21）62350953服务热线：800 820 2606北京市东城区朝阳门内大街银河SOHO D座50723室100010电话：（86 10）64107101传真：（86 10）64100990第一部分德国美天旎生物技术有限公司及MACS细胞分离技术介绍德国美天旎生物技术有限公司（Miltenyi Biotec GmbH）是一个以细胞分选技术为主、拥有多样化产品的生物技术公司。

开发研制并销售世界上最先进的细胞分选、细胞生物学、相关分子生物学产品和技术，尤其在干细胞分选、DC细胞分选与分析、细胞因子分泌细胞分选与分析、免疫治疗、再生医学方面占有极大的优势，CD133、BDCA-2（CD303）、BDCA-4（CD304）单抗为我公司专利产品。

我公司总部位于德国科隆，在科隆和德国北部罗斯托克均有cGMP生产机构。

我们的产品有免疫磁珠、特异性细胞及蛋白质或者DNA/RNA分选用的MACS分选设备、单克隆抗体、无菌溶液、基础和特殊培养基、血液/血浆治疗用的生物学吸附剂、LIFE18血浆分离机、流式细胞仪及相关耗材。

MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从实验室到临床，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞，MACS技术提供了可在每个实验室进行高品质细胞分选的方法。

MACS技术原理MACS技术为德国美天旎生物技术有限公司的专利产品，是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术，其高度特异性来自抗体对抗原的特异性识别。

德国美天旎

MACS® MACS® Cell Separation Columns
根据不同的分选策略、细胞的大小和多少等条件，选择不同的柱柱子。如适合Positive selection的有MS 如适合Positive selection的有MS Columns, LS Columns, and XS Columns ;MScapacity:2×108 ，LS的 ;MScapacity:2× LS的 capacity:2× capacity:2×109, XS的capacity:2×1010；sparate rare cells XS的capacity:2× by using two columns；Large Cell Columns were designed columns； for positive selection of large human or animal cells Depletion，根据你是用kits 还是用Microbeads，抗原 Depletion，根据你是用kits 还是用Microbeads，抗原表达水平，细胞多少等选择。
MACS® MACS® Separators
MACS® Separators are designed for fast and easy cell separation in combination with MACS Columns and MACS MicroBeads. They contain strong permanent magnets to induce a highhighgradient magnetic field within the MACS Columns – strong enough to retain cells labeled with minimal amounts of MACS MicroBeads.

MACS如何选择合适的分选器

如何选择合适的分选器？美天旎MACS技术已经成为磁性细胞分选的金标准，其文献引用量一直远超同类其他产品。

MACS磁珠分选所用到的主要组份有：MACS磁珠、MACS分选柱和MACS分选器。

如果您是第一次使用美天旎磁珠，则可以选择合适的起始套装，这样既能满足您的分选要求，又节省成本。

美天旎提供以下套装产品供您选择，针对您的实验，选择最适合您的分选器套装产品。

手动分选产品产品一：MiniMACS Starting Kit （送磁珠）130-090-312 MiniMACS Starting Kit对应使用分选柱：MS适合分选策略：阳性分选最大上样量：2X108最大目的细胞吸附量：107一次上样数量：1个产品二：MidiMACS Starting Kit （送磁珠）130-042-301 MidiMACS Starting Kit（LS）对应使用分选柱：LS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：2X109最大目的细胞吸附量：108一次上样数量：1个130-090-329 MidiMACS Starting Kit（LS）对应使用分选柱：LD适合分选策略：阴性分选最大上样量：2X109最大目的细胞吸附量：108一次上样数量：1个产品三：Mini & MidiMACS Starting Kit（送磁珠）130-042-501 Mini & MidiMACS Starting Kit（MS LS）对应使用分选柱：MS LS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：2X108+2X109最大目的细胞吸附量：107+108一次上样数量：2个Mini & MidiMACS Starting KitMACS MultiStand 分选架MidiMACS Separation Unit 分选器130-042-501 Mini & MidiMACS Starting Kit （MS LD）对应使用分选柱：MS LD适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：2X108+2X109最大目的细胞吸附量：107+108一次上样数量：2个产品四：OctoMACS Starting Kit （送磁珠）130-042-108 OctoMACS Starting Kit对应使用分选柱：MS适合分选策略：阳性分选最大上样量：8X2X108最大目的细胞吸附量：8X107一次上样数量：8个产品五：QuadroMACS Starting Kit （送磁珠）130-091-051 QuadroMACS Starting Kit （LS）对应使用分选柱：LS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：4X2X109最大目的细胞吸附量：4X108一次上样数量：4个130-092-857 QuadroMACS Starting Kit（LD）对应使用分选柱：LD适合分选策略：阴选最大上样量：4X2X109最大目的细胞吸附量：4X108一次上样数量：4个产品六：VarioMACS Separator（手动细胞分选）130-090-282 VarioMACS Separator（手动细胞分选）对应使用分选柱：MS, LS, LD and CS适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大上样量：4X10E9最大目的细胞吸附量：2X10E8一次上样数量：1个半自动分选产品130-095-346 MultiMACS Cell24 Separator（半自动分选器）对应使用分选柱：LS LD适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大细胞上样量：24X2X10E9最大一次上样量：24个全自动分选产品autoMACS Starting Kit（全自动分选器）对应使用分选柱：自动分选柱（可重复使用）适合分选策略：阳性分选和阴性分选最大细胞上样量：4x10e9最大目的细胞吸附量：2x10e8最大一次上样量：6个。

美天旎临床产品解决方案

造血和内皮干细胞
心脏疾病-CD133
心脏疾病全球死亡第一原因，在US，CVD死亡率比癌症高 35%。主要是冠状动脉疾病。
起源于造血/肿瘤，作为CD34的替代品，许多研究人员证明 CD133有显著的分化潜力，使CD133产品成为组织再生的基本产品。在心脏疾病领域使用自体骨髓CD133进行治疗有很大的潜力。产品： CD133试剂， tubing set LS，CD133 complete LS kit 骨髓体积大于100ml推荐使用Prodigy。全球细胞治疗中，MSC是心脏疾病首选干细胞来源
Bags, Medium
Vaccination
Patient
Cryopreservation
DC疫苗
CD14系统从2000年开始已有25篇文献，可行性和安全度得到很好的验证，2011年继续以试剂折扣支持感兴趣的客户。一个循环同时获得PDC和MDC 还可结合DendricMACS GMP Medium，GMP细胞因子（ IL4,GM-CSF,IL1,IL6,TNF）,GMP抗原，细胞分化袋等 CD1不需要细胞因子，CD304需要IL3
CliniMACS 管道 150* 167-01
20x109
10x109
MACS技术－从实验室到临床
与科研产品的差异： • 欧共体CE认证，SFDA认证 • 全自动免疫磁性细胞分选系统 • 密闭、无菌管道系统（一次性使用） • 分选后的细胞可直接用于临床治疗 • 样本处理极为安全 • 标准化的、可控的、可靠的分选过程
MACS分选原理
• MACS磁珠标记细胞
• 混和细胞通过分选柱
• 去除磁铁
• 阳性细胞洗脱
去除成分
富集成分

美天旎7月新产品

美天旎7月新品细胞分选产品：1、Pan-DC 富集试剂盒，人：适用于阴性分选Pan-DC细胞，可获得高活性，高纯度，高得率的DC细胞，分选细胞与下游实验相兼容。

应用：•分选的细胞适用于免疫表型分析和功能检测，分子分析；•与其他细胞共培养检测其与其他细胞之间的相互作用；•适用于细胞迁移实验。

2、高纯度CD34 磁珠试剂盒，人：该试剂盒可以分选获得超高纯度的CD34+造血干祖细胞，并且能够确保细胞功能和活性不受影响，分选获得的细胞与下游实验相兼容。

应用：分选的细胞适用于细胞培养，分子分析，流式检测。

3、MACSxpress 分选器该分选器适用于MACSxpress大磁珠的分选，无需配合分选柱，分选更方便，更快捷。

4、抗TRA-1-60 磁珠，人：TRA- 1-60单克隆抗体可以特异性的和表达在未分化的ES细胞，包括iPS细胞，EC 细胞和EG 细胞表面的抗原相结合。

伴随着细胞的分化TRA-1-60在人ES细胞表面的表达量会降低。

TRA-1-60磁珠可特异性的分选人未分化的ES和重编程后的iPS。

应用：•适用于阳性分选人未分化的ES细胞，iPS细胞，EC 细胞和EG 细胞；•分选的细胞适用于下游细胞培养；•分选的细胞适用于下游分子分析等；细胞培养产品：1、CytoBox Mo-DC：该试剂盒包括用于刺激单核细胞向DC转换的细胞因子，该试剂盒所含的细胞因子为重组人的粒细胞巨噬细胞克隆刺激因子（GM-CSF）和重组人的IL-4（rIL-4）。

应用：在GM-CSF和IL-4 的共同作用下，可以将单核细胞诱导成未成熟的DC。

2、TLR9 检测试剂该试剂盒中包括4种不同刺激TLR9受体的CpG ODNs 以及相应的ODNs 对照. 该试剂盒包括A-级, B-级, C-级和P-级.。

美天旎推出线粒体分离试剂盒

美天旎推出线粒体分离试剂盒
摘要：
美天旎的线粒体分离试剂盒是适用于人的。

它的独特之处在于，它是使用磁珠，也就是响当当的MACS技术来纯化的，纯度更高，更快速，2个小时之内就能从人的细胞或组织中分离到完整的线粒体。

说到线粒体分离，首先想到的肯定是差速离心，教科书上也是这样教的。

不过此法颇为麻烦，匀浆再加上一次又一次的离心，得率还不见得高。

要是有个试剂盒就好了，可惜现有的线粒体分离的试剂盒不多，最近，美天旎推出了一个高效分选线粒体的方法。

实验步骤：
1 裂解细胞。

2 用Anti-TOM22磁珠来标记线粒体外膜转位酶22（TOM22）。

3 将标记的细胞裂解液上样到MACS柱中，MACS柱置于MACS分选器中。

洗涤杂质，洗涤过程中磁性标记的线粒体保留在柱中。

4 将柱从分选器中移走，洗脱线粒体。

于是就得到了高纯、完整的线粒体。

此试剂盒与传统方法，比如差速离心或密度梯度离心相比，产量和纯度都更高。

纯化到的线粒体中不会带有其他细胞器的污染，如内质网或细胞核。

而且，MACS技术对细胞和细胞器特别温和，因此分离得到的线粒体保持了完整性，这样在下游的功能分析中能获得更可靠、重复性更好的数据。