利用泥鳅红细胞微核形成来监测溪源江水
利用泥鳅及蝌蚪红细胞微核技术监测小洋河的水质
１４ ． 方法
的一种 简便 、 快速 、 有效 的生物监测方法… 。本研究选用 ２种
水生动 物——泥 鳅 及 中华 大 蟾 蜍 蝌 蚪 进行 红 细胞 微 核试 验 ， 监测小洋河水 中污染 物的致突变性 ， 以了解盐城 市主 要水体的污染状 况 ， 从而为地方水环境的监测治理、 保护水生 动物 、 保证人 民健康提供依据。
从小洋河市区段分别在 上段 、 中段 、 段各选取 ３个 点 ， 下 各取水样 ５００ｍＬ 过滤除去较粗的悬浮颗粒 ， 于塑料瓶 内 ０ ， 置
避光保存 ， ４℃冰箱 中保存备 用。
１ ２ 试 验 动 物 ．
尾， 取血 ， 涂片 ， 自然 晾干 ， 甲醇 固定 液 固定 １ ｉ， ｉｍ ａ 用 ５ｒ ｎ Ｇ ｅ ｓ ａ
染液染色 １ ｉ ， ５ｍ ｎ 水洗 ， 晾干 。 １４ ２ 小洋河水对蝌蚪 红细胞微 核的影 响 ．． 对照组 用曝气 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
泥鳅 ： 发育状 况相 似 ， 重 （ ．６±１４ ） ， 长 （ ． 体 ２８ ．２ ｇ 体 ８ ２±
１ １ ）ｍ， ．４ ｅ 购于盐城市商业街菜市场 ， 试验前用 曝气 的 自来水 驯养 １ ， ２ｄ换水 １次 ， 周 每 整个驯养和染毒过程 都不添加任 何饲料 ， 试验时挑选外 观健康 的正常个体进行处理 。 中华大蟾蜍变态期的蝌蚪 ： 体重 ０ ２ｇ ． 左右 ，— ５ ４ 月初采
养猪场污水对泥鳅红细胞微核和核异常的影响
中 图分 类 号 ：Ｘ ５ ２ 文 献 标 识 码 ：Ａ
Ｅｆｅ ｔ ｆｐｉ ａ ｍ ｓ ｅ ｔ ｒ ｏ ｈｅｍ ｉｒ － ｃｅ ｓ ａ ｄ ａ ｏ ｍ ａ ｃｅ ｓｉ ｅ ｙ ｈｒ ｃ ｔ ｓ ｆ ｃ ｓ ｏ ｇ ｆ ｒ ｗａ ｔ ｗａ ｅ ｎ ｔ ｃ ｏ ｎｕ ｌ ｕ ｎ ｂｎ ｒ ｌｎｕ ｌ ｕ ｎ ｒ ｔ ｏ ｙ ｅ
养猪 场 污水 对 泥鳅 红 细胞 微 核 和核 异 常的影 响
蔡 燕 燕 ，蔡 婉 玲 ， 陈 文静 ， 邓春 梅 ，吴 若 菁
（ 建 师 范 大 学 生 命 科 学 学 院 ，福 建 福
摘
福 州 ３ ０ ０ ） ５ １ ８
要 ：利 用 泥 鳅 红 细 胞 微 核 技 术 检测 养 猪 场 污 水 的 诱 变 活 性 。结 果 表 明 ： 泥鳅 红 细 胞 微 核 率 及 ｓＡ ， ｌｆｆ口ｌ 口 ｌ ｆＭ ｓ ｎｕ ｌ ｆｆｃ ｌ ｌ ｇｌ ｄ
ＣＡＩＹａ － ａ ｎ ｙ ｎ，ＣＡＩＷ ａ －ｉｇ，ＣＨＥＮ ｎｊｎ ｎｌ ｎ Ｗｅ －ｉｇ，ＤＥＮＧ ｕ － ｉ Ｃｈ ｎｍｅ，Ｗ Ｕ ｏｊ ｇ Ｒｕ －ｉ ｎ
（ ｏｌ ｅ ｆＬ ｆ ｃｅｃｓ ｕ ｉｎＮｏｍ ｌＵ ｉｅｓｔ Ｆ ｚｏ ，Ｆ ｊａ ３ ０ ０ ，Ｃ ｉａ Ｃ ｌ ｇ ｉｅＳ ｉ ｅ ，Ｆ ｊａ ｒ ａ ｎｖ ｒｉ ｅ ｏ ｎ ｙ， ｕ ｈ ｕ ｕ ｉｎ ５ １８ ｈｎ ）
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福 建农 业 学报 ２ （ ） ３ ５ １ ，０ ７ ２ ３ ： １ ～３ ９ ２ ０
甲醛对大鳞副泥鳅的毒性研究
健康活泼 、 体表无损伤 、 体长 ｌ ３ｅ 体重 ｌ ７ｇ ０～１ ｍ、 ２～１ 。 实验前用曝气的 自来水驯养一周 ， 每天换水一次。甲醛
（ 分析纯） 自洛 阳化学试 剂有 限公司。谷丙转氨酶试 购 剂盒和谷 草转氨 酶试 剂盒购 自南京 建成 生物 工程 研
Ｐ ｒ ｍｉ ｕ ｎ ｓ ｄ ｂ ｙ ｎ ｓ ｎ ｄ ｉ Ｄ５ ａ ６ ｈ ｕ ｓＷ ６ ． １ ｍｇ ．１ １ ｃ ｏ ｕ ｌｕ ａｅ ｎ ａｌｔ ａｍｅ ｔ ｅ ｅ ｈｇ ｅ ｈ ａ ａ ａ ｓ ｒ ｕ ａ ｒ ａ ｕ ，ａ ｓＬ ｏ ｔ ｏ ｒ ａ ３ ８ ７ ／Ｌ １ｅｍｉ ｒ ｎ ｃｅ ｓ ｒ ｔｓｉ ｌ ｒ ｔ ｎ ｓｗ ｆ ｉｈ ｒｔ ａ ｔ ｔ ｇ ｔ ９ ｓ ｅ ｎ ｈ
胞总数 × ００ ｏ １０ ％ 。
效地治理鱼病提供依据 。同时为研究甲醛对人类的危害 提供一定的科学理论基础 ， 以加强人们对甲醛危害性的
认知 。
１２３ 生理毒性试验 本试验的实验设计同遗传毒性 ．．
试验设计。分别于 ２４ ６ｄ 、 、 各取材一次 ， 每次每个浓度 组随机取 ２ 尾大鳞副泥鳅 ， 迅速解剖取其肝脏并准确称 重， 按质量体积比 １９ ：９加鱼用生理盐水进行研磨， 制成
感的淡水鱼 。其红细胞具有细胞核 ， 在其成熟期 间要经
尔马林对于治疗鱼类各种细菌性病效果好 ， 但是 甲醛毒
性很强 ， 副作用比较大 ， 一旦浓度使用不当 ， 将对鱼类的
过有丝分裂和无丝分裂 的过程。在分裂期 间， 其细胞易
受到水体中的污染物毒 害而产生遗传损伤 。另外 ， 大
存活力、 繁殖力等有明显的负面影响。目前 ， 国内外 已有
利用泥鳅红细胞核的遗传损伤监测福州市内河水质
利用泥鳅红细胞核的遗传损伤监测福州市内河水质吴若菁林霞陈宜秋黄静娜连迎摘要利用泥鳅红细胞核的遗传损伤监测福州市内河水质，探讨红细胞核的遗传损伤与水质常规衡量指标间的相关性．结果表明：泥鳅红细胞的微核率及核异变率的高低能够反映出河水的综合污染程度，差异达到显著或极显著．在一定范围内河水受污染程度越严重，微核及核异常率越高．但当染毒时间太长时，微核率及核异常率反而有所下降．微核率与水质的几项常规衡量指标间的相关程度依次为：高锰酸盐指数＞溶解氧＞氨氮比＞pH值；总核异常率与河水的几项常规指标问的相关程度依次为：高锰酸盐指数＞氨氮比＞溶解氧＞pH值，核异常率与微核率达到最高值的处理时间不完全同步．核异常率显著高于微核率，微核率与核异常率相关系数为0．44，这反映出生物体本身具有自动修复能力，能通过各种途径修复受损的DNA．此外，还探讨了泥鳅红细胞的微核来源和利用泥鳅红细胞核的遗传损伤监测河水水质的可行性及注意问题．图3 表6 参16关键词泥鳅；福州市内河；水质衡量指标；红细胞；遗传损伤CLC X174 ：X832GENETIC DAMAGE OF THE NUCLEAR IN ERYTHROCYTES OFMISGURNUS ANGUILLICADATUS TO MONITOR WATER QUALITYOF THE RIVER IN FUZHOU*WU Ruojing1 , CHEN Yiqiu2, LIN Xia1 , HUANG Jingna1 & LIAN Ying1( Bioengineering College, Fujian Normal University, Fuzhou 350007, China)( Environmental Monitoring Bureau of Taijiang, Fuzhou 350001, China)Abstract The genetic damage of the nuclear in erythrocytes of Misgurnus anguillicadatus was used to monitor the waterquality of the river in Fuzhou, and study the correlation between genetic damage of the nuclear in erythrocytes and the normal index of water quality. The results indicated that frequency of micronuclei and nuclear anomalies could reflect the polluted extent of the inland river, and there existed difference or obvious difference compared with th e control. Within certain distance, the contaminative degree the river water suffered was more serious, the frequenc y of micronuclei and nuclear anomalies was higher. How-ever, the frequency of micronuclei and nuclear anomalies decr eased when testing time was long. The correlation between the frequency of micronuclei and the normal index of water quality was : COD MN > DO > NH3N > pH ; the correlation between the total frequency of nuclear anomalies and the norma l index of water quality was: COD MN > NH3 N > DO > pH . The time of the frequency of micronuclei and nuclear anomalies reaching to the highest was not synchronous completely. The frequency of micronuclei was obviously higher than that of nuclear anomalies, and their correlative coefficient was 0.44. This reflected that the creature had the ability to repair themselves. The damaged DNA could be repaired by many means. In addition, it also studied the sources of t he erythrocytes in loach, the possibility to monitor the river water quality and the problems that must be noticed. Fig 3 , Tab 6, Ref 16Keywords Misgurnus anguillicadatus; river in Fuzhou; water quality index; erythrocytes; genetic damageCLC X174 ：X832随着城市的发展，大量的工业废水和生活污水直接排入内河，使内河污染情况加剧，仅水质污染一项就使中国每年损失几百亿元．内河水质的恶化严重阻碍了经济的发展，因此，有效的监测水质污染状况已成为我国保护生态环境建设的重要内容之一．水质的污染，会给水生生物带来遗传损伤，导致微核的形成．鱼类对化学物质的反应与哺乳动物有很多相似之处，因此，常被用来检测水体的污染情况。
利用泥鳅红细胞微核形成来监测溪源江水
１２１取水样 ．． ３ｈ ６ ８７ ７ ８ ０ １＋． ９ ． ８０ ５ ６ ０ 差异极显 著 取样点选择溪 源江 的内河 ． 采用多点取样 法 ． 在溪源 江的福师大 段、 闽江学院段 、 福大段 、 农大段取样 多次 ， 混合 。 全部 分别编号为水体 ｌ 水体 ２ 水体 ３ 并设计 １ 对照组 ． 、 、 ， 个 即加入 与实验组体积 相同的经 过暴晒处理的 自来水。实验开始 前 ２ 完成取水工作 ｄ １２２泥鳅 染 毒 处 理 ．． 染毒在 ２ Ｌ的统一规格水桶内进行 ，将 泥鳅随机分配 ．放入 四组 中， 在同一水体下分别处理 １ ｈ２ ｈ ３ｈ后 ， ２ 、４ 、６ 进行断尾取血 。 请木对鞠蛆 １ ２ 蚰 ３ｈ ６ １２３血涂片 的制备 ．． 图一 各个实验组于染毒后 ， 取泥鳅 断尾取血 ， 分别 制备血涂片 。 涂片晾 ２ 溪源江水对泥鳅红细胞微核率及核异常率 的影 响． ． ２ 干后 。 用卡诺 固定液 固定 １ｍ ｎ 瑞氏染 色液染 色 ｌ ｉ． 用 Ｇｅ ｓ ５ ｉ． ｍｎ再 ｉ ａ ｍ 扑感敏对泥鳅红细胞的微核的诱导存在差 异 ３ 在 个时间段测试 染液染色 ２ ｍｎ 用水（ ０ ｉ， 或磷酸缓 冲液） 冲洗 ， 晾干 ， 观察。 中，２ 诱发的微核率为（ ３ ８ 。 是清水对 照组 的 ２ ７ 倍 ， ｈ １ｈ ０ ８％） ． ， ． ６ ２ 诱发 ６ ４ １２ ．． ４血涂片 的分析 的微核 率 （ ４ ０ 。，是 清水对 照 组的 ３ １ ，６ ０ ８％） ． ． ０倍 ３ ｈ诱发 的微 核率 ３ 油镜下观察血 涂片． 每重复浓度 组随机 观察 ４ 泥鳅涂片 ． 尾 每张 （． ８ ｄ 是清水 对照组 的 ４ ６ 倍 。 ０ １％ 。 ６ ．２ ２
【 ｓｒｃ ｌ ｅｅｔｎ ｏ ｅｓｕｃ ｆｔｅｒ ｅ ａ ｒｏ ｈ ｏｍａｉ ｆｍｉ ｏｕ ｌ ｓｉ ｆ ｃ． ｈ ｅｕｔ ｓｏ ｈｔｔｅｓｕｃ ｆｔｅｒ ｅ Ａｂ ｔ ｔＤ ｔｃｉ ｆｔ ｏ ｒｅｏ ｉ ｒｗ ｔ ｎ ｔｅｆｒ ｔ ｎ ｏ ｅ ｎ ｅｅ ｎｅ ｅｔ Ｔ ｅｒｓｌ ｈｗ ｔａ ｈ ｏ ｒｅｏ ｉ ｒ ａ ｏ ｈ ｈ ｖ ｅ ｏ ｒ ｕ ｓ ｈ ｖ
遗传学论文3(1)
Cu2+对泥鳅红细胞微核的影响张晋，王馨【摘要】采用硫酸铜对泥鳅进行染毒试验，用常规方法制备血涂片，以研究其不同浓度范围（0.05mg/L—0.4mg/L）对泥鳅红细胞核异常和微核的诱导效应。
结果表明：硫酸铜能不同程度地引起泥鳅红细胞核异常率的升高，各处理组泥鳅红细胞微核的出现率随铜离子浓的增加先增加后减少再增加的趋势，不具有一定的剂量－效应关系。
【关键词】Cu2+；泥鳅；红细胞微核；核异常近年来，大量工农业生产的废弃物被排到江河湖泊，其中的重金属在水体中不易被降解，重金属通过食物链在鱼体中积累，会对鱼类产生毒害作用。
微核试验是20世纪70年代由Heddle（1973）和Schmid（1975）分别独自创立的，是检测细胞遗传损伤的指标和检测化学物质毒性的一种常规方法。
该方法已经被广泛应用于检测和监察各种理化因子对机体的致癌、致突变效应。
泥鳅的血红细胞具核，在外来诱变剂的作用下会出现微核和各种核畸变现象。
近年来学者将泥鳅作为研究水体污染的材料，取得较好效果。
泥鳅在实验室易于饲养，分布广泛，取材容易，易于涂片，且具有较高的敏感性等优点，因而常被用于检测水体的污染情况。
因此，可用泥鳅作为评价水体污染和化学物质对水生生物遗传损害及毒理效应的指示生物。
泥鳅对环境中低浓度的污染物较为敏感，微核试验已广泛应用于化学物质、重金属、除草剂及食品添加剂等对泥鳅遗传毒性的影响的研究。
实验以泥鳅为研究对象，探讨Cu2+对泥鳅红细胞微核、核异常等遗传指标的影响，为环境监测提供参考和数据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物泥鳅30条（泥鳅购大学城永辉超市，体长10±2．0）cm，在曝气的自来水中暂养3 d，实验时选用体重相近、体表无损、健康活泼的个体作为试验材料。
1.1.2 主要试剂分析纯CuSO4·5H2O用蒸馏水配置成10 mg/L母液，再稀释成所需的浓度；吉姆瑞氏混合染液，使用前用0.2 mol/L 磷酸缓冲液（pH值6.8）稀释10倍。
通过泥鳅血细胞微核数变化研究水体对水生生物的影响
通过泥鳅血细胞微核数变化研究水体对水生生物的影响摘要：随着轻工业的发展，人们的生活水平越来越提高，生活污水排放也逐渐成为我们需要面对的问题。
生活中经常会产生包括洗衣粉、肥皂、洗洁精和洗衣液等的生活污水。
本文主要叙述了通过使用上述生活污水养育泥鳅一段时间后，取得泥鳅的血液研究其红细胞微核数的变化来对生活污水的污染深入研究。
关键词：泥鳅红细胞；微核；生活污水生活污水的排放和治理在当今社会成为一个公众问题，之所以如此重视这个问题也是因为现今排放倡导生活污水的毒性越来越强。
如果不经处理随意排放到河流中就会对水生生物造成严重危害，从而危害到人类自身。
对于生活污水的几大种类进行研究性实验可以知道其对水生生物的影响的大小。
本研究选用泥鳅作为研究对象，对主要的几种常见生活废水的生理和遗传毒性进行了研究，为环境水污染与人群健康预警研究提供参考。
1生活污水的种类及危害水体污染是指排入水体的污染物在数量上超过了该物质在水体中的本底含量和自净能力即水体的环境容量，从而导致水体的物理特征、化学特征发生不良变化，破坏了水中固有的生态系统，破坏了水体的功能及其在人类生活和生产中的作用。
[3]这类污染物因须通过微生物的生化作用分解和氧化，所以要大量消耗水中的氧气，使水质变黑发臭，影响甚至窒息水中鱼类及其他水生生物。
长期饮用被污染的水，会使人发生急、慢性中毒或导致机体癌变，危害严重。
水与生命的关系是非常密切的，拿人体来说，人体内有百分之六十到百分之七十的水分，儿童体内水分甚至高达百分之八十。
没有水便没有生命。
人类要生存、要发展便一定要保护好水资源。
[10]2实验对象的选择鱼类作为水环境污染的一种合理监测指示物已日益受到重视。
而泥鳅由于其生命力强，取材容易，对污染物敏感等特点，可以作为一种理想的毒性实验材料。
[1]3实验原理鱼类外周血红细胞微核试验是一种监测水环境中三致物质综合诱变作用的简单有效方法，已得到了广泛的应用。
鱼体吸收了水环境中致变物质，致使鱼造血系统的干细胞部分有丝分裂发生异常，细胞染色体发生断裂，断片残留于胞浆中成为微核，少数可形成2个以上的微核，从微核率多少反映了机体细胞染色体受损伤的程度。
利用泥鳅红细胞核的遗传损伤监测广州大学内河水质
边 的 内河 ， 用 ４点 取 样 法 ， 潮 、 潮 各取 １次 ， 采 涨 退 混合 ， 分别 编号 为水 样 １水 样 ２水 样 ３和水 样 ４， 、 、 并 设计 １ 对 照 组 ， 个 即加 入 与 实验 组 体 积 相 同 的 经 过暴 晒处 理 的 自来 水 ．实 验 开 始 前 ２ｄ完 成 取
现极显著 的增 高 ； 用不 同水样进行 处理 ， 两项指标在各 水样 间也达到极 显著的差异 ， 染指数都 大于 １ 说 利 这 污 ，
明 大 学城 内 河 水质 受 到 不 同程 度 的 污染 ， 染 源 主要 是 实验 废 水 和 生 活废 水 ． 污
关键词 ：水质 ；泥鳅 红细胞 ； 微核 ；核异常
微 核试 验是 检验 动 物 细胞 遗 传 损 伤 和检 测 化 学 物质 毒性 的一 种 常 规 方 法 … ．国 内外 的学 者 都 利用 鱼类 的红 细 胞 微 核 技 术 做 过 相 关 研 究 ， 吴 如 中华 等利 用鲫 鱼 外周 血 红 细胞 微 核 技 术对 遗 爱 湖
取样 点选 择 珠 江 、 化 实 验 楼 、 书馆 、 堂 生 图 食
文 章 编 号 ：６ １４ ２ （０ １ ０ ￣ ９ －４ １７ —２ ９ ２ １ ） ３ ０ １ ０
利 用泥鳅红细 胞核 的遗传 损伤 监测 广州大学 内河水质
汪珍 春 ，姚 焱 ， 廖 娟 ，梁 幸婷 ， 伯 春 周
（ 州大学 生命科学学 院 ， 广 广东 广州 ５００ ） １０ ６
损 的泥 鳅 按 每 桶 ３条 分 别 投 放 到 对 照 组 和 实 验
组 ， 理 １ ． 处 ２ｈ
作者简介 ：汪珍春（ ９ ６一） 女 ， １６ ， 副教授．Ｅｍａ ：Ｚ．ａｓｉ ａ ｏ．ｏ ｃ — ｉ Ｗ Ｃ１ ｈ＠ｙｈｏ ｃｎ．ｎ ｌ ｏ
利用泥鳅染色体损伤监测改性炭K对造纸污水的净化作用
（ ｕｉｎ ｏｍ ｎｖｒｔ ｉ ｎ ｃｅｃ ｏｌ ｅ Ｆ ｊｎ ｕｈ ｕ３ ００ ， ｈｎ ） Ｆ ｊ ｇＮ ｒ ａ Ｕ ｉｅ ｉ Ｌｆ ａｄＳｉｎｅＣ ｌｇ ，ｕｉ ｇＦ ｚｏ ５ １８ Ｃ ｉａ ａ ｌ ｓｙ ｅ ｅ ａ
Ａｂｓｒ ｃ Ｉ ｈ ｓｔｉ ，ｔ ｅ ｃ ｒ ｍｏ ｏ ｔｔ ｎ ｉ ｄ ｃ ｄ ｂ ａ ｅ ｌ ｅ ｕ ｎ ，ｗａ ｎ ｔｒ ｄ ｗｉｈ ｔ ｅ ｒｔ ｆ ｅ ｏ ｕ ｌ ｉｉ ｒ ｔ ｒ ｅ ｔｓ ｔ ａ ｔ：ｎ ｔ ｉ ｒａ ｌ ｈ ｈ ｏ ｓ ｍｅ ｍｕａ ｉ ｎ ｕ ｅ ｙ ｐ ｐ ｒｍｉ ｆ ｅ ｔ ｓ ｍｏ ｉ ｅ ｔ ｈ ａｅ ｏ ｒ ｎ ｃｅ ｎ ｅｙ ｈ ｏ ｙ ｅ ． ｏ ｌｌ ｏ ｍｉ Ｔｈ ｅ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｈ ｒ ｔ ｒ ｃ ｔ ｓｗｅｅ ｔ ａ ｅ ｔ ｉｏ ｉ ｇｆ ｒ ｅ ｒ ｓ ｌ ｓ ｏ ｄ ｔ ｅ ｅ ｙｈ ｏ ｙ ｅ ｒ ｒ ｔ ｗｉ ｐｏｓ ｎ ｎ ｏ ｈ，ｔ ｅｒｍｉｒ ｎ ｅｅ ｓａ ｄ ａ ｎ ｒ ｌ ｕｃｅ ｓ ｈ ｄ ａ ｓａ ｉ ｉａ ｌ ｉｎ ｆ ｓ ｅ ｄ ｈ ４８ ｈ ｉ ｅ ｏ ｕ ｌ ｕ ｎ ｂ ｏ ｍａ ｎ ｌｕ ａ ｔｔｓ ｃ ｙｓｇ ｉ — ｔｌ ｉ
甲醇对泥鳅红细胞微核和核异常的影响
ｃ ｍ。试验前 暂养在经 曝气 ３ｄ的符合 饮用 水标 准 的 自来水 中 ，每 Ｈ投 喂食 物 （ 鱼饵 料 ） 金 ，每 ２ ４ｈ换 水 １ 。试 验 时挑选 健康 活泼 、体表 无 损 的个 体 进 次 行 染毒处 理 。整个试 验期 间的水温 ２ ２ ℃ 。甲醇 ３～ ５ 采用 国药集 团化学试 剂有 限公 司生产 的分 析纯 ，含
度 的 ６ ％ 、６ ％ 、７ ％ 、７ ％ 及 ８ ％ ，对 照组 采 ０ ５ ０ ５ ０
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７ ６
１ ｔ 芏 舛妓 旅
１ ２ ４ 统 计分析 ．．
２８ 第 期 ０ 年 ４ ０
利 用 Ｅ Ｃ Ｌ软 件 ，对试 验 数据 ＸＥ
用曝气 ３ｄ的自来水，设 ３个重复 ，每处理每重复 投 放泥鳅 １ ０条 ，每 ２ ４ｈ换染毒 液 １次 。 １２３ 血涂 片 制备 与观 察 分 析 分 别 在 染 毒后 ４ ．．
量 ／９ ． ％ 。 ＞ ９５ １ ２ 方 法 ．
人做 了一些 相关研究 ，如佘 洁婷 等 以小 鼠为试 材
研 究 了甲醇对眼部 的毒性 作用 ，结果 发现 急 性 甲醇 中毒 的小 鼠模 型 出现 典 型 的 视 网 膜结 构 和 功 能 改 变 。而有 关 甲醇对 机体 的生物遗 传 物质 的损 害及 毒 理效应 的研 究仍未 见报道 。
种理化 因子 对 机体 的致癌 、致 突 变效 应 的方 法 ‘ 。
Ｈ ｏ ｍ ｎ等人最 早将微 核应用 于鱼 类 ，并 首 次证 明 ｏｆ ａ ｔ
采用 曝气 ３ｄ的 自来水 。对 照组 和试 验组 的水 量 均 为 １Ｌ ，用统 一规 格 的水 桶 盛 放 ，每 处 理设 ３个 重 复 ，各 放 １ 泥鳅 ，培养 ４ｄ ０条 。统计各 浓度 泥鳅 总 死亡 数 ，以 死 亡 率 ８ ％ 为 上 限 ，２ ％ 为 下 限 ，按 ０ ０ “ 良寇 氏法 ” 算 出其半致死 浓度 。 改 ‘’ “ 良寇 氏法 ” 要求 每 个剂 量组 间距 呈等 比或 改 剂量对 数呈等差 ，每个剂 量组 动物 数相 等及 中间剂
利用鱼外周血红细胞微核技术监测长江江苏段水质污染
Ｒｉｅ ｎＪａ ｇｕ ｉ ｈ ａ ｅ ． ｈ Ｎ ｒ ｅｅｍｉｅ ｎ ｅｓ ｔ ｔ ａ ａ ａｙｉ ｎ ｉａｅ ｈ ｔ ｈ ｒ ａ ｉｅｅ ｃ ｖ ｒｉ ｉｎ ｓ ｎｔｅｐ ｐ ｒ Ｔ ｅ ＭＣ ％ｏｗｅｅｄ ｔｒ ｎ ｄａ ｄｔ ｔ ｉ ｉｌ ｎ ｓｓｉｄｃｔｄｔａ ｅｅｗ ｓｄｆ ｒｎ ｅｉ ｈ ａ ｓｃ ｌ ｔ ｆ ｎ
利用鱼外周血红 细胞微核 技术监测长江江 苏段水质污染
沈 燕 飞 ， 厉 以强 ， 黎 刚
（ 苏省 环 境 监 测 中心 ， 江 苏 南 京 江 ２０３ ） １０ ６
摘 要 ： 用 鱼 类 外 周 血 红 细胞 微 核 技 术 对 长 江 江 苏 段 水质 进 行 监 测 ， 定 奔 苏 ７个 点 位 水 中 的 鱼 类 外周 血 微 核 应 测 ￡
．
Ｐｏｌｔｏ ｎ ｔｅＲｉ ｅ ｉｎ ｓ ｌ ｉｎ ｏ Ｙａ ｇｓ ｖ ｒｉ Ｊ ａ ｇ ｕ ｕ ｆ ｎ
ＳＨＥＮ Ｙａ —ｆｉ ｎ ｅ 。 Ｌ Ｙｉ ａ ｇ。 Ｉ －ｑｉｎ Ｌ Ｇａ ｇ Ｉ ｎ
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｉｈ ｐ ｒ ｈ ｒｌ ｓ ｓｅ ｂ ｏ ｄ ｒ ｄ ｃ ｌ ｃ ｏ ｅｎ ｌｔｃ ｎｑ ｅ ａ ｓ ｄ ｔ ｔ ｄ ｈ ｔ ｒｐ ｌ ｔ ｎ ｏ ｎ ｔｅ ｓｒ ｃ ：Ｆ ｓ ｅ ｐ ｅ ａ ｙ ｔ ｍ ｌｏ ｅ ｅ ｌ ｍｉ ｒｋ ｒ ｅ ｅ ｈ ｉ ｕ ｓ ｗ ｓ ｕ ｅ ｏ ｓｕ ｙ ｔ ｅ ｗａｅ ｏｌ ｉ ｆＹａ ｇｓ ｉ ｓ ｕｏ
长江是 我 国第一 大河 ．水域 面 积约 占全 国淡 水 水 域 面 积 的 ５ ％ ．是 我 国 沿 江人 民 的 主 要 饮 用 水 ０ 源 。 着长 江流域 的人 Ｅ增 长和经 济发 展 ． 随 ｌ 周边 城市 工业 废水 和生 活污水 的大 量排放 ．水 质 污染 现象 越 来越严 重 ．已直接影 响到 下游地 区人 民的身 体健 康 和经 济发展 长江 的水质 监测 以往 多注重 化学 分 析 ．生物 监
初中生物教学论文：漂染废水对泥鳅红细胞核异常的诱导
漂染废水对泥鳅红细胞核异常的诱导【摘要】探究了漂染废水在不同体积分数和染毒时间对泥鳅红细胞核异常的影响.结果表明,3种不同体积分数的漂染废水均能诱发泥鳅红细胞核异常.从试验结论得出,泥鳅红细胞的微核和核异常测定法可作为监测水环境中致突变化合物的一个较为实用的指标。
【关键词】泥鳅红细胞微核核异常漂染废水随着工农业生产的迅速发展,水体污染问题日趋严重,尤其近年来漂染工业的蓬勃发展,水环境日益恶化，已对水生动物及人类造成了极大的危害，污染物对水生动物及人类的影响已引起人们的极大关注。
因此,对污染水体中具有诱变和致癌活性的化学性质的检测显得十分重要.目前,除用理化方法对水体进行监测外,还可用生物学方法,如遗传学毒理学方法来检测不同环境中污染物对遗传物质的损害及毒理效应,从不同角度评价它们对人类和生物造成的潜在危害,其中比较简便迅捷而且敏感准确的检验方法为微核测定法(Micronucleus test)，该方法已被广泛应用于评价各种理化因子的致癌、致突变效应及环境监测等。
微核测定法是二十世纪七十年代初建立起来的细胞遗传学方法之一.由于微核与染色质的突变具有较为密切的联系，所以长期以来微核被许多科研工作者用来评价毒物、放射性物质以及细胞毒性物质对人、动物及体外细胞损伤的指标。
Buckley用水体中残留的氯成功地诱发银大马哈鱼(Oncorhychus kisutch)红细胞微核的形成,这是最早报道的水体污染物诱发水生脊椎动物的微核试验.Hooftman等用化学诱变剂甲基磺酸乙酯诱发泥荫鱼(Umbrapygmaca)外周红细胞微核的形成[1].近年,国内学者用蝌蚪[2-4]、黄鳝[5]、泥鳅[1、6-11]等作实验动物,检测具有诱变活性的污染物有污水、农药、除草剂等.但至今尚未见到漂染废水诱发鱼类微核的报道.本探究使用工业上的漂染废水,探讨其不同体积分数和染毒时间对泥鳅红细胞微核形成和核异常的影响,为保护水源,治理污染提供科学依据.1 材料与方法1.1材料1.1.1试验鱼试验鱼为泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),购自仙游中心市场,体长8～11.5cm,体重2.5～4.5g,实验前暂养在实验室经曝气的符合饮用水标准的自来水中,实验时挑选健康活泼和体表无损的个体进行染毒处理.整个实验期间的水温范围为13～25℃。
利用泥鳅红细胞微核技术探究护肤品中的月桂醇聚醚硫酸酯钠对环境影响
利用泥鳅红细胞微核技术探究护肤品中的月桂醇聚醚硫酸酯钠对环境影响【摘要】目的：通过泥鳅红细胞微核检测技术，定量分析洗面奶内月桂醇聚醚硫酸酯钠（以下简称硫酸酯钠）对水体环境影响。
结果表明，硫酸酯钠浓度与泥鳅红细胞微核率变化有明显关系（相关系数K²分别为5.69与1.561），且根据图像分析发现泥鳅红细胞微核率与硫酸酯钠浓度成正相关。
结论：硫酸酯钠可在质量分数为0.1%0~0.25%时对泥鳅生存环境造成影响。
【关键词】微核率；月桂醇聚醚硫酸酯钠；泥鳅1研究目的护肤品已经成为人们日常生活中必不可少的一部分。
在使用护肤品过后，其中的硫酸酯钠随污水一同排入下水道，可能对水生生物造成影响。
微核技术是检查环境污染物对遗传物质——染色体损伤效应的一种简便、快速、有效的生物监测方法[1]。
通过计算微核率，可量化硫酸酯钠不同浓度下对泥鳅生存环境的影响，从而对生态环境治理提出建议。
2材料与方法2.1 材料2.1.1仪器和耗材水桶，显微镜（20×40），载玻片，盖玻片，医用手套，量筒，托盘天平，一次性手术防护服，一次性医用手套，吸水纸，1L量杯、自来水（曝气）。
2.1.2 样品试剂月桂醇聚醚硫酸酯钠、卡诺固定液、瑞氏-Giemsa复合染液、磷酸缓冲液（pH6.8）泥鳅（体长8cm±2cm）：均购买自同一菜市场，在实验进行的全过程不喂养任何饲料，置于32℃～38℃室温下，均使用曝气自来水进行培养。
2.2方法图1 实验流程图2.2.1预实验在5个盛有经曝气的自来水塑料桶内各放置5条泥鳅与2L经过滤后的自来水，其中一组设为对照组，其余4组各放入硫酸酯钠，使桶内溶液质量分数达到1%（20g）,3%（60g）,4%（80g）,5%（100g），（称量过程采用塑料杯重量为7g），培养6小时后，将泥鳅取出迅速处死，并将体表粘液与水擦干，在距离尾部1.5cm处用解剖刀将其分离并取出外周血，后将血液涂抹至载玻片上，迅速用另外一片载玻片将其推成单层细胞的薄片。
孔雀石绿诱导泥鳅外周血红细胞微核的形成_陈静_吴欢欢_林雪娇
收稿日期：２０１４－０４－１５基金项目：国家自然科学基金（ＮＳＦＣ＃３０９７１１０６）；教育部留学回国人员基金（教外司留［２０１０］１５６１）．作者简介：陈静（１９７２－），女，副研究员，博士，研究方向：水生生物毒理学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｃ２４１７＠ｆｊｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ文章编号：１００５－３８３２（２０１４）０４－００２３－０３Vol.27，No.4Aug.2014第２７卷第４期２０１４年８月水产学杂志CHINESE JOURNAL OF FISHERIES孔雀石绿是一种有毒的三苯甲烷类人工合成有机化合物，带有金属光泽，作为杀菌剂和染料广泛用于水产养殖、食品、医疗和纺织业，尤其用于防治鱼类或鱼卵的真菌感染。
但近年发现，孔雀石绿有致癌、致突变、致畸、使染色体断裂等毒性［１，２］，能高度残留于鱼体内；人类若进食这些污染鱼类，易引发肝癌等癌症，多国政府已禁用于养殖业。
但我国有些监管较弱的地区仍在使用，在淡水鱼类中检出孔雀石绿的事件仍时有发生［１，２］。
孔雀石绿的病理改变表现在多器官损伤［１，２］，多有血液生化指标显著的改变。
孔雀石绿及其代谢产物隐色孔雀石绿能残留于水产生物及其胚胎的血清、肝脏、肾脏、肌肉及其它组织中［１，３，４］。
目前有关孔雀石绿对泥鳅（Misgurnus anguillicadatus ）的遗传毒性却未见报道。
本文以泥鳅为模型动物探究孔雀石绿对水产生物的遗传毒性。
环境因素造成的遗传毒理效应包括三个方面：①突变形成；②癌形成；③致畸效应。
其检测方法包括以基因突变为指标的检测法、以微核检验等为主的染色体指标法、ＤＮＡ损伤修复的检测和离体培养细胞恶性转化试验等检测方法。
微核是有害因素作用于细胞，使染色体断裂，在细胞分裂过程中丧失着丝粒的染色体断片不能随有丝分裂进入子细胞核，而在细胞中形成直径小于主核、嗜色与主核一致、完全与主核分开的圆形或椭圆形微小核。
其大小一般为主核的１／１２￣１／３，故称微核。
维生素C对除草剂诱发泥鳅红细胞微核率的影响
维生素C对除草剂诱发泥鳅红细胞微核率的影响
林建城
【期刊名称】《重庆环境科学》
【年(卷),期】2000(022)006
【摘要】应用泥鳅外周血红细胞微核试验，研究了维生素C对3种除草剂诱发泥鳅遗传物质损伤的影响。
结果表明，维生素C和除草剂共同作用时，均能显著降低除草剂诱发的外周血红细胞微核率，说明维生素C可以抑制除草剂对鱼类的遗传毒性作用。
因此，在鱼饲料中添加适量的维生素C对鱼类具有保护作用。
【总页数】3页(P17-18，25)
【作者】林建城
【作者单位】福建省莆田高等专科学校资环系，莆田 351100
【正文语种】中文
【中图分类】X171.5
【相关文献】
1.苏丹红Ⅰ对泥鳅红细胞微核率和组织磷酸酶活性的影响 [J], 杜启艳;吴小华;南平;常重杰
2.维生素C对除草剂诱发泥鳅红细胞微核率的影响 [J], 林建城
3.利用泥鳅红细胞微核及核异常测定法对四种除草剂遗传毒性的研究 [J], 谢志浩;蔡亚非;陈国;黄剑锋;余红卫
4.四种除草剂对泥鳅红细胞微核及核异常诱导 [J], 谢志浩;蔡亚非;陈国;黄剑锋;余
红卫
5.除草剂乙草胺对泥鳅血红细胞微核及核异常的诱导 [J], 谢志浩;黄剑锋;陈国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
水体中铊对泥鳅外周血红细胞的遗传毒性
水体中铊对泥鳅外周血红细胞的遗传毒性汪珍春;姚焱;蔡冬霞;张平;陈永亨【期刊名称】《生态环境学报》【年(卷),期】2009(018)002【摘要】铊(T1)是剧毒的重金属元素.含铊矿产资源在开发利用过程中会释放铊,对生态环境和人体健康造成威胁.目前我国尚缺乏水环境中铊的安全标准.利用泥鳅Misgurnus anguillicaudatus红细胞微核技术研究水体中铊的遗传毒性.结果表明:水体中铊含量在0～1 μg·L-1范围内,随铊质量浓度的增加,泥鳅红细胞产生微核以及核突起、凹陷等各种核异常现象;微核率、核异常率及核空泡率等3项指标随铊质量浓度升高而升高,且呈显著或极显著正相关.这3项指标作为铊胁迫下泥鳅红细胞毒害程度的依据具有可行性.当水体铊质量浓度为0.3 μg·L-1时,微核率、核异常率及核空泡率均极显著高于对照.将铊质量浓度0.3 μg·L-1作为泥鳅红细胞发生突变的阈值.【总页数】4页(P414-417)【作者】汪珍春;姚焱;蔡冬霞;张平;陈永亨【作者单位】广州大学生命科学学院,广东,广州,510006;广州大学生命科学学院,广东,广州,510006;广州大学生命科学学院,广东,广州,510006;广州大学环境科学与工程学院,广东,广州,510006;广州大学环境科学与工程学院,广东,广州,510006【正文语种】中文【中图分类】X826【相关文献】1.水体中铊对泥鳅外周血红细胞的遗传毒性的时效性 [J], 汪珍春;姚焱;张平;廖亮;陈永亨2.蚕豆根尖微核技术研究水体中铊的遗传毒性 [J], 张平;汪珍春;姚焱;袁惜如;吴燕珍;陈永亨3.利用泥鳅红细胞微核及核异常测定法对四种除草剂遗传毒性的研究 [J], 谢志浩;蔡亚非;陈国;黄剑锋;余红卫4.孕妇外周血中胎儿有核红细胞在性连锁遗传病产前诊断中的初步应用 [J], 邬晋芳;王琳;马旭;叶国玲;蔡小宁5.四种除草剂对泥鳅红细胞遗传毒性的研究 [J], 谢志浩;李骏;平波;樊亚青因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
微核试验及其在水污染监测中的应用
微核试验及其在水污染监测中的应用
孟顺龙;陈家长;冷春梅
【期刊名称】《水利渔业》
【年(卷),期】2006(26)4
【摘要】微核(MCN)是真核类生物细胞经辐射或化学诱变剂的作用而产生的一种游离于主核之外的异常结构.微核测定法是在染色体分析方法的基础上建立和日益受到重视的细胞遗传学测定方法.采用微核试验对水污染进行监测是理化监测和其它生物监测的一个重要补充.可以根据微核率的高低来判断被监测水质的污染程度.由于该方法具有简便、快速、结果可靠等优点,目前已经在水污染监测中得到了广泛的应用.介绍了微核的形态、形成机理以及微核实验在水污染监测中的应用和存在的不足.
【总页数】3页(P71-72,74)
【作者】孟顺龙;陈家长;冷春梅
【作者单位】南京农业大学无锡渔业学院,214081;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,江苏,无锡,214081;南京农业大学无锡渔业学院,214081
【正文语种】中文
【中图分类】S917
【相关文献】
1.蚕豆根尖微核试验在水环境污染物检测中的应用 [J], 贺磊;刘智峰
2.蝌蚪红细胞微核试验在水环境污染状况监测中的应用 [J], 王刚;蒋洁;常国亮;刘
洋
3.微核与微核试验在遗传毒理学中的应用 [J], 王爽;诸葛坚;余应年
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泥鳅染色体标本制备方法的研究
“第九届长j角科技论坛水产科技分论坛暨2012年江苏省水产学会学术年会”论文集泥鳅染色体标本制备方法的研究王雨辰，胡廷尖，林锋，李倩，刘士力，练青平(浙江省淡水水产研究所，浙江湖州313001)摘要：以泥鳅的头肾为材料，采用植物血球凝结素(PHA)和秋水仙素体内注射法，通过谪片制备染色体标本，获得大量形态清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相。
关键词：泥鳅；PHA；染色体标本泥鳅是一种杂食小型淡水经济鱼类，由于肉质3。
4h后杀死取头肾，加入1．0 mL2％柠檬酸钠溶细嫩、味道鲜美，具有滋补药用功能，深受国内外消液，利用移液器反复费者的喜爱，现已成为我国主要养殖品种之一。
目吹打头肾细胞，使细胞团分散，转入10 mL离前泥鳅规模化人工育种技术不够成熟，导致养殖生心管，以1000r／rain离心5min；然后加入0．4％产不稳定，影响了泥鳅产业的发展。
近年来随着研KCL溶液8mL，随即将离心管置37。
C水浴中低渗究的深人，发现泥鳅虽然存在不同的地理种群，但10min；以3 000r／rain离心5min，弃上清，取沉淀，主要分为二倍体和四倍体泥鳅两类，四倍体泥鳅属加固定液5 mL，轻轻吹打悬浮，固定10 rain。
于多倍体类型I 。
由于多倍体鱼个体大、生长快、适l。
2．2制片与染色应性强，育种的潜力很大，因此多倍体鱼类的开发在干净、湿、冷的载玻片上滴2-3滴细胞悬液，和利用在育种中已引人关注15-61。
作为鱼类一员的泥在酒精灯上文火烘干。
在实验样本少时采用滴染鳅，其良种选育对规模化生产的快速发展也尤为重法，样本多时采用浸染法。
玻片上滴加Wright—要，因此本文利用对泥鳅头肾组织染色体的染色分Giemsa染液A覆盖涂片染色1min，加入2～3倍析，来对泥鳅的倍性进行鉴定，以期望找到适应泥W呶ht—Giemsa染色液B液，充分混合2液，10～20 鳅染色体快速鉴定的方法。
rain染色10。
20 min，水洗干燥后中JI生树胶封片，镜l材料与方法检。
南京市分布的中国珍稀昆虫
４ １ 分 类 地位 ．
状横斑 ； 足褐 色 ， 足第 ３跗节成钩状 ， 前 端跗节 与变大的爪形 成钳状 。雄体长 ３ ２ｍｍ， 、 ． 头 胸黑色 ； 、 头 胸部 有夹点 网皱 ； 触 角褐色 ， １ 第 ２节褐黄 色 ； 翅透 明 ， 色斑 。足 褐黄 色 ； 第 、 前 无
５ ４ 分布 ．
－ ０ － － ５・ — —５ — —
８ ２ 寄 主 ．
菖蒲 。
８ ３ 分 布 ．
主要分布于中国的江 苏 （ 京 ） 北京 、 南 、 南 、 河 山东 、 香港
等地 ； 在老挝 、 斯里 兰卡 、 菲律宾 、 马来西亚等国家也有发现。
６ 中华 树 蟋 … （ ６ 图 ）
（ 南京农业大学 ， 江苏南京 ２ ０９ ） １０ ５
摘要 ： 分布于江苏省南京市 的珍稀 昆虫包括 拉步 甲、 角铠 甲 、 独 阳彩臂金 龟 、 氏长节叶蜂 、 李 布氏螯 蜂和 中华树 蟋， 对其分类地位 、 识别要 点 、 寄主及其 目前 的分布 状况进行 介绍 ， 并提 供它们 的照片 以供识别 ； 中华绢 蛾、 点雕 对 银 蛾、 中华虎凤蝶指名亚种 、 橙翅襟粉蝶及傲 白蛱蝶 的分类地 位 、 寄主及分布信息进行 了介绍 。 关键词 ： 珍稀昆虫 ； 新记 录 ； 江苏南京
属鳞翅 目凤蝶科 （ ａｉｏｉａ） Ｐｐｌ ｎ ｅ 。中华虎凤蝶为 中国特有 ｉ ｄ
珍稀种 ， Ｉ Ｃ 在 Ｕ Ｎ的红皮书中列为 Ｋ级 ， 国家趿 保护物种 。 属
３３ ． 识 别 要 点
雄虫体长 ４ ６～６ ｍ， ２ ３ ｍ。头 背 面、 ０ ｍ 宽 ４— ２ｍ 前胸 背 板、 小盾片金绿色光亮 ， 、 足 鞘翅大部黑色 ， 有时有 暗铜绿色泛 光； 鞘翅肩 凸内侧 、 缘折 内侧及缝肋 内侧 有浅褐条斑或 斑点 ，
应用微核试验对饮用水遗传毒性的检测
应用微核试验对饮用水遗传毒性的检测摘要：目的应用两种微核试验对饮用水遗传毒性进行检测比较的灵敏性、有效性。
方法采用蚕豆根尖微核试验和人外周血淋巴细胞微核试验分别对某市的饮用水的有机浓集物的遗传毒性进行检测。
结果 1水厂水源水、末梢水和2厂的末梢水诱导的微核细胞千分率与对照组差异无显著性，污染指数在1.5-2.0之间，属于轻度污染。
2厂的水源水诱导的微核细胞千分率与对照组差异无显著性，污染指数小于1.5，基本无污染。
两个水厂的出厂水诱导的微核细胞千分率与对照组有显著差异，污染指数在2.0-3.5之间，属于中度度污染。
两个水厂检测结果一致，都存在经过消毒工艺后水的致突变性增加的现象。
结论对于遗传毒性的检测，两种方法都比较稳定，蚕豆根尖微核技术适用于低剂量致变因子遗传毒性的检测分析，人外周血淋巴细胞微核试验能更好的反映致变因子对人体的影响。
关键词：蚕豆根尖微核试验；人外周血淋巴细胞微核试验；遗传毒性水资源是人类生存和社会发展的必备资源，由于各种环境污染物向水体的大量排放导致水中的有机污染物的种类和数量急剧增加，对人类健康造成严重威胁。
因此开展水环境的遗传毒性检测，特别是有机化学物遗传毒性检测对保障人民群众的健康具有重要的意义。
本研究釆用人外周血淋巴细胞微核试验及蚕豆根尖细胞微核试验对水环境样品进行遗传毒性检测，并根据检测结果划分水质污染程度，为水环境污染及风险评价提供科学依据。
1 材料和方法1. 1 材料与仪器1.1.1 材料松滋青皮蚕豆（中国疾控中心提供）、卡诺氏固定液、席夫试剂、HLB固相萃取柱、健康男性肘静脉血（肝素抗凝）、细胞松弛素-B、Giemsa染液、二甲基亚砜、PBS缓冲液。
1.1.2 仪器超净工作台、CO2培养箱、莱卡显微镜（DM6000B）、固相萃取仪、细胞计数器。
1. 2 方法1. 2. 1 水样的采集处理采集某市两个自来水厂入厂的水源水、出厂水及管网末梢水各5L，用HLB固相萃取柱将水样浓缩，用氮吹仪吹干，丙酮洗脱，用二甲基亚砜定容，使1.5 ml定容液相当于2L水样，贮于4 ℃冰箱备用。
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利用泥鳅红细胞微核形成来监测溪源江水
【摘要】检测溪源江水对泥鳅红细胞微核形成的影响。
结果表明溪源江水在12h-36h间均不同程度地引起泥鳅微核细胞率增高，且呈明显的剂量一效应关系。
其原因可能是由于时间仍较短，对细胞的毒性较小，使具有微核的细胞仍能存活。
此外，还说明了溪源江水虽然旁观上去较为混浊，但其内在水质影响不大。
【关键词】水质；泥鳅；红细胞；微核
【Abstract】Detection of the source of the river water on the formation of micronucleus in effect. The results show that the source of the river water in12h-36h of different degree caused by loach micronucleus cell rate increased, and a significant dose effect relationship. The reason may be due to the time is shorter, less toxic to cells with micronuclei, so that cells can survive. In addition, also explains the source of the river river while watching up more cloudy, but its inherent quality have little effect.
【Key words】Water quality；Loach;Red blood cell;Micronucleus
溪源江位于福建省福州市闽侯县北部旗山脚下，福州市大学城各大高校的内河均来自溪源江。
同时闽侯县各村镇的灌溉养鱼用水均取自溪源江各分支。
近年来，随着大学城的建设开发，大量建筑废水、生活污水未经处理直接排入溪源江中，使江水发黑。
这不仅给溪源江水体造成巨大的环境破坏，还严重危及到了当地居民及大学生的生活。
微核是有害因素作用于细胞，使细胞的染色体发生断裂，在细胞分裂的过程中，着丝粒的染色体丧失，染色体断片不能随有丝分裂进入子细胞核，而在细胞浆中形成直径小于主核的，嗜色与主核一致，完全与主核分开的圆形或椭圆形微小核，其大小一般为主核的1／12－1／3，故称微核。
微核率是单位细胞中的微核数，通常使用微核千分率(一千个细胞中含微核的细胞数)。
已经证实，微核率的高低与致微核物质的剂量和毒害作用的强弱呈正相关。
近年来，国内外学者都利用泥鳅微核方法来测定、评价对遗传物质的损害及毒理效应。
１．材料和方法
1．1 实验材料
卡诺固定液(甲醇：冰醋酸=3：1）、瑞氏染色液、Giemsa染液、磷酸缓冲液。
泥鳅体重(2．86~1．42)g，体长(8．2±1．14)cm，购自福州市永辉超市。
将泥鳅分为四组：分别放入溪源江水组1、2、3及清水组。
每组各放入10尾泥鳅。
1．2实验方法
1．2．1 取水样
取样点选择溪源江的内河，采用多点取样法，在溪源江的福师大段、闽江学院段、福大段、农大段取样多次，全部混合，分别编号为水体1、水体2、水体3，并设计1个对照组，即加入与实验组体积相同的经过暴晒处理的自来水。
实验开始前2d完成取水工作。
1．2．2 泥鳅染毒处理
染毒在2L的统一规格水桶内进行，将泥鳅随机分配，放入四组中，在同一水体下分别处理12h、24h、36h后，进行断尾取血。
1．2．3 血涂片的制备
各个实验组于染毒后，分别取泥鳅断尾取血，制备血涂片。
涂片晾干后，用卡诺固定液固定15min，瑞氏染色液染色1min，再用Giemsa染液染色20min，用水(或磷酸缓冲液)冲洗，晾干，观察。
1．2．4 血涂片的分析
油镜下观察血涂片．每重复浓度组随机观察4尾泥鳅涂片，每张涂片随机观察2000个左右的细胞，统计微核和核异常总数，计算微核率。
微核细胞率(‰)=带有微核的细胞数／观察的细胞总数×1000‰
1．2．5 微核及核异常的鉴别
微核位于细胞质中，与主细胞核分开，形状呈圆形或椭圆形，边缘光滑，染色性质与主细胞核一致，大小为主核的1／3(将含有多个微核的细胞记为一个微核细胞)。
异常核位于细胞质中，形状不规则，如核内凹、核变形、核破裂、核内有空泡，周围不光滑，染色性质与主细胞核不一致。
1．3 统计学分析
应用显著性t检验法对染毒组与对照组之间微核及核异常的差异性进行检验。
2.结果和分析
2．1溪源江水对泥鳅红细胞产生诱变效应
溪源江水对泥鳅红细胞产生诱变效应(图1)。
表2结果表明，泥鳅经不同浓度扑感敏处理后，其红细胞微核细胞率和核异常细胞率均高于清水对照组。
不同浓度组与对照组比较，具有统计学意义(P＜0．05、P＜0．01)。
表1 扑感敏诱导泥鳅红细胞的微核率和核变形率
表2 不同浓度诱导下泥鳅红细胞微核率和核变形率的T检验
图一
2．2溪源江水对泥鳅红细胞微核率及核异常率的影响
扑感敏对泥鳅红细胞的微核的诱导存在差异。
在3个时间段测试中，12h诱发的微核率为(0.388‰)，是清水对照组的2.676倍，24h诱发的微核率(0.480‰)，是清水对照组的3.310倍，36h诱发的微核率(0.618‰)，是清水对照组的4.262倍。
3.结果
(1)在扑感敏处理下，微核的形成途径可能有两条：一条是出现染色体断裂，进而产生微核；另一条是幼红细胞的正常分裂被扰乱，细胞不均等缢缩分裂，进而形成微核。
(2)扑感敏对泥鳅微核的诱变中，时间在12h-36h时，时间与微核细胞率之间呈明显剂量一效应关系，微核细胞率随时间的增长而呈上升趋势。
其原因可能是由于时间仍较短，对细胞的毒性较小，使具有微核的细胞仍能存活。
如当时间过长时，会抑制或终止细胞的正常分裂活动，甚至导致具有微核的细胞死亡。
(3)在溪源江水的处理下，时间与泥鳅的微核率与对照相比，达到显著或极显著水平。
因此，可以说泥鳅能作为评价扑感敏毒理学的模式生物。
4.实验发现
在本次微核实验中，我发现浓度36h的水体混浊度总比12h、24h来得大，在实验血涂片制作过程中，36h染毒下的泥鳅血液颜色也偏黑于另外两个浓度。
初步猜测，可能是时间过长导致泥鳅体内分泌不协调，体外分泌物增多造成水体混浊。
同时分泌液还可能造成水体富营养化，同时引起水体各种微生物繁殖。
同时又从水体反作用于泥鳅体内，主要有两种方式，一种是泥鳅通过嘴巴摄食，一
种通过皮肤吸收。
所以影响了内部血液颜色。
可以发现通过这种影响的微核率比清水对照组更高。
【参考文献】
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［３］吴若菁，吴惠平，杜惠东等．亚硫酸氢钠对泥鳅红细胞微核和核变形的诱导[J]．福建师范大学学报(自然科学版)，2006，(1)：74－76．［４］刘秀英，胡怡秀，易传祝等．苦瓜醇提取物对小鼠的急性经口毒性和遗传毒性试验研究[J]．癌变畸变突变，2007，15(5)：381－383．
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