粘膜细胞免疫系统与核康素(H9核酸)

粘膜细胞免疫系统与核康素（H9 核酸）
粘膜细胞免疫系统
粘膜免疫系统指机体与外界相通的腔道（呼 吸道、消化道和泌尿生殖道等）粘膜相关的淋巴 组织所构成的免疫系统。
因此，也是人工实施粘膜免疫 的重要途径与场所。
它不仅是机体抵御外界病原入侵的第一道天 然屏障，与机体的系统免疫相比，粘膜免 疫系统的淋巴细胞总数远远超过存在于骨 髓、胸腺、脾脏以及淋巴结中的淋巴细胞 数量，粘膜表面分泌性免疫球蛋白以IgA 抗体为主，其量显著高于循环IgG的总量， 是经消化道、呼吸道和生殖道粘膜有效地 诱导粘膜免疫应答产生的。
3.粘膜耐受性

指口服抗原后，引起机体对该抗原产 生特异性无或低免疫性应答，又称口服耐 受 。口服粘膜耐受的形成主要通过克隆去 除、克隆无能、主动抑制和旁路抑制等机 制实现。 因此，口服疫苗首先要解决粘膜 免疫耐受问题。解决粘膜免疫耐受性一般 可以通过以下方式实现。

（1）控制抗原剂量；
（2）解决参与粘膜免疫细胞被抑 制或细胞因子分泌不足的情况，目 前主要通过使用粘膜免疫佐剂，

（3）对体液免疫的作用 用微生态制剂(益生菌)灌服1日龄雏鸡3天,灌 服后1、4、7、10、18天，采用组织切片及免疫 组织化学方法检测盲肠扁桃体、潘氏节、哈德氏 腺中IgA、IgM、IgG生成细胞数量的动态变化。 结果发现，上述三种粘膜组织的IgA、IgM、IgG 生成细胞数量主要在4～7 d明显高于对照组雏鸡。 表明益生菌能够提高雏鸡呼吸道和消化道局部粘 膜免疫组织的抗体生成细胞数量。

根据Naqi（1984）和Cook（1984）研究发现， 抗生素可降低鸡消化道粘膜中淋巴组织（包括法 氏囊、盲肠扁桃体、肠道固有膜）内产免疫球蛋 白的细胞（B细胞）的生成和分布密度，显著降 低血清IgM和粘膜表面的SIgA浓度。Gordon （1995）试验发现，饲喂抗生素的常规鸡，其小 肠粘膜内淋巴细胞滤泡和游离浆细胞数目显著降 低，接近无菌鸡。Voiculesu等（1983a，1983b） 的研究表明，红霉素、粘杆菌素和氯霉素可显著 抑制机体的体液和细胞免疫。
2.泛粘膜免疫

外周免疫器官中一部分致敏淋巴细胞（B细 胞）离开淋巴器官进入淋巴液、血液，在体内循 环，最后携带抗原再返回淋巴器官，这一过程也 称为淋巴细胞再循环。通过淋巴细胞的归巢，将 机体各部位粘膜建立起共同的粘膜防御机制，是 粘膜免疫重要活动之一。

（1）粘膜归巢性具有选择性。 这种选择性取决于粘膜淋巴细胞表面的归巢 受体与粘膜部位血管内皮细胞上表达的血管地址 素特异性识别有关。 近几年已发现几类粘附分子， 其中主要是整合素分子。整合素是Ⅰ型跨膜糖蛋 白，由α、β亚基组成，至少有15个α亚基和8个β 亚基，参与了淋巴细胞的归巢与定居。这是选择 性归巢的分子基础， 也是定向迁徙、归巢的依据。

（2）细胞免疫作用 雏鸡口服益生菌后，血液中T-细胞数量、胸腺和脾脏 T-细胞外周血液和免疫器官细胞免疫均增强。不同的益 生菌对淋巴细胞作用效果不同。 乳酸杆菌注入小鼠腹腔后，巨噬细胞活化状态的酸性 磷酸酶、非特异性酯酶的数量明显增加，巨噬细胞的体内 及体外细胞毒作用也显著增强。在电镜下，可以观察到巨 噬细胞体积增大，伪足增多，细胞器的数量增多，细胞因 子分泌增多。 由此可见，益生菌能明显的激活巨噬细胞活 性，增强细胞因子的分泌，提高宿主的免疫功能和抗病能 力。
:对粘膜免疫起诱导和活化作用
弥散淋巴细胞 :分布在粘膜上皮内（包括CD8和T细胞等） 和粘膜固有层（包括大量的浆细胞、T细 胞、B细胞和吞噬细胞等） :发挥粘膜免疫的效应作用
（二）粘膜免疫功能是通过粘膜局 部免疫、泛粘膜免疫和粘膜耐受来 实现的。

1.粘膜局部免疫

粘膜免疫与系统免疫有所不同,粘膜免疫主要 是发挥免疫抑制作用,而系统免疫主要起免疫增强 作用,这与两个系统的不同作用方式有关。对抗病 原微生物的肠粘膜免疫可分为先天性免疫和后天 获得性免疫,其先天性免疫是构成肠粘膜屏障的基 础。由于粘膜免疫系统呈区域性分布，一般诱导 系统免疫的免疫途径和免疫佐剂不能诱导粘膜免 疫应答。经消化道、呼吸道和生殖道免疫通过粘 膜免疫佐剂可有效地诱导粘膜免疫应答。

4、对疫苗免疫促进作用 据报道，光合细菌与传染性支气管炎 疫苗(H-52)混合使用，具有提高实验组鸡 的γ-球蛋白和对禽传染性支气管炎病毒 （IBV）的特异性抗体水平。同样在ND疫 苗接种前后饲用益生菌，可提高鸡血清中 抗NDV血凝抑制抗菌体，延长抗体的高峰 期。
三、维护和完善粘膜免疫系统，构 建动物健康养殖第一道屏障

SIgA是粘膜免疫的主要效应因子,虽然SIgA 难以通过激活补 体等途径直接杀伤病毒和细菌,但是可以通过大量非炎性反 应途径清除病毒和细菌感染。SIgA 发挥主要作用的部位是 局部粘膜,局部粘膜免疫的基本原理是由于局部抗原刺激比 全身更能有效的刺激机体粘膜分泌大量SIgA, 可有效中和粘 膜上皮内的病原体、细菌毒素和酶,捕捉粘膜内层病原体,削 弱细菌表面疏水性,阻止病毒附着、细菌粘附和抗原的粘附, 刺激肠道粘膜表面分泌粘蛋白降解病毒,同时加速粘液在粘 膜表面移动,从而加速了细菌和内毒素等有毒物质的排出,还 可与细菌等形成免疫复合物并排除体外。大量的粘膜免疫 细胞参与摄取、递呈抗原、诱导发生免疫反应、产生免疫 效应因子(主要是SIgA) ,发挥免疫作用,抵抗病原微生物对机 体的入侵袭。
（二）肠道有益菌群与肠粘膜 免疫屏障

动物机体粘膜屏障系统除了机械屏障 外还具有菌膜保护屏障、正常益生菌群对 致病菌和条件致病菌的制约作用及促进粘 膜免疫系统的发育与完善等重要的作用。

1、菌膜屏障作用 益生菌通过各种不同的粘附方式，在粘膜表 面定植构成了一种菌膜屏障。其功能 （1）占据 肠粘膜表面的受体位点和立体空间。（2）利用 这种内源性营养(降解利用粘性蛋白)，保持益生 菌数量稳定。（3)促进损伤的肠粘膜修复，降低 肠道的通透性，防止肠道“大肠杆菌移位”发生 内源性感染。通过实验观察，双歧、乳酸菌等主 要通过分泌一种蛋白肽，阻止大肠埃希菌与肠粘 膜上的受体结合，抑制大肠埃希菌的粘附。

（2）粘膜归巢性不仅发生在炎症阶段， 正常情况下也会发生。 （

3）致敏的淋巴细胞和产生的SIgA浓度与 局部粘膜远近有关，呈梯度分布。

王岚等通过对不同途径感染志贺菌，发现 小鼠滴鼻感染福氏志贺菌后48h， 在肠系 膜淋巴结、潘氏节中均发现有其抗体高效 表达， 表明滴鼻感染后效应细胞能有效地 归巢至肠道等粘膜部位，产生强而广泛的 粘膜免疫应答。因此，依赖于淋巴细胞归 巢性，制备口服疫苗，用于疾病控制已成 为人们研究的热点，且安全、简单。
目前，采用喷雾、点眼、滴鼻和饮水等方式 对动物进行粘膜免疫越来越受到人们的重 视和青睐，在现代畜牧养殖中实现健康养 殖必须充分保持和发挥这一重要的防御屏 障功能。
（一）粘膜免疫细胞组成与分 布：

粘膜相关淋巴组织 :分布在呼吸道、消化道和泌尿生殖道 粘膜中的集合淋巴小结 （MALT）
粘 膜 免 疫 系 统

近年来，随着我国养禽业的快速发展， 禽病危害越来越突显，能否有效控制当前 疾病已关系到我国养禽业能否健康发展的 主要因素之一。有资料显示，动物机体95 ％以上的感染发生在粘膜或从粘膜入侵， 是病原体入侵的主要门户，因此，粘膜免 疫屏障是动物机体抵抗病原的第一道防线。

目前，国内大部分养禽场对于动物机体粘 膜免疫系统等非特异性免疫屏障关注不够， 尤其是低水平、高密度的分散养殖，仍然 沿用传统的养殖模式，为了解决养殖过程 中的疾病，对疾病预防和控制缺乏系统的 疾病控制观念，过于依赖抗生素药物的治 疗。

用从小鼠骨髓中分离的树突状细胞与不同量致死 的乳杆菌共同培养，测定其共同培养物中IL-6、 IL-10、IL-12和a-INF的量。结果发现，不同乳杆 菌株诱导产生IL-12、INF-α的能力不同，而产生 IL-10、IL-6能力差别较小，所有乳杆菌都能上调 表面MHC-Ⅱ-类分子和CD86。其中，以能产生IL12的乳杆菌的上调作用更强，这提示肠道DC控制 Th1/Th2/Th3平衡的能力与肠道益生菌的调节有 一定关系。

病原微生物等进了肠道，通过肠道粘膜中的淋巴 滤泡集结（M细胞）摄取，进入胞内形成吞饮泡 转送入淋巴滤泡集结中的巨噬细胞, 经巨噬细胞 对抗原进行加工提呈,并将抗原转移给辅助性T细 胞,辅助性T细胞激活B淋巴细胞,被活化的B细胞经 肠系膜淋巴结（MLN）进人血液，通过血液循环 大部分被带到粘膜固有层（LP），少部分进入其 它外分泌组织细胞在固有层定居下来，并在抗原 的刺激下、T细胞和细胞因子作用下增殖为成熟 的分泌IgA浆细胞，产生大量SIgA。

3.病原菌多为过路菌，长期定植的机会少 ， 生态平衡时，这些菌数量少，不会致病， 如果数量超出正常水平，则可引起机体发 病，如变形杆菌、假单胞菌和韦氏梭菌等。 由此可见，肠道是体内最大的细菌库和内 毒素库。

一旦肠粘膜屏障功能受损（如发生变态 反应、肠道免疫系统发育不良或退化）， 可以导致肠道细菌移位，就能造成菌血症、 败血症和肠源性内毒素血症的发生。 因此， 肠粘膜屏障功能是否完善对动物健康有密 切关系。

如 ① 细菌毒素：如大肠杆菌热不稳定毒素、霍乱毒素等， 是目前认为最有效的粘膜佐剂。 ② 细胞因子：主要有IL-1、 IL-2、TNF-γ 、IL-12及GM-CSF等 ③CPG基序：CPG 的DNA 是一种高效的粘膜佐剂，引起高水平的SIgA。④ 减毒微生 物：重组细菌和病毒，除了诱导产生血清抗体外，还可产 生分泌型IgA。⑤ 化学合成类佐剂：常用的生物降解微粒、 脂质体、脱乙酰几丁质和免疫刺激复合物。⑥微生态制剂： 益生菌定植到新生或出生后较长时间的无菌小鼠肠道后， 均可以建立对卵白蛋白的耐受，说明益生菌通过促进免疫 系统的发育，影响耐受性的建立，维持着机体的自稳状态。 同时，对于不能建立耐受性而诱发的变态反应，也有较强 的控制作用。
二、肠道粘膜免疫系统