阿托品与乙酰胆碱对豚鼠离体肠平滑肌的作用
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
实验报告
针对实验数据，进行结果描述 针对实验数据， 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2 对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如：[1]陆源，夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社， 2004，245-247
肠管
观察项目
记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 基础张力 加入10 换液。 加入 -2 g/L Ach 0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。 ，观察并记录曲线，作用明显时换液 重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml， 剂量，待收缩到最高点时加入 重复以上 剂量 阿托品 ， 观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后， 观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的 Ach，观察并记录收缩曲线，换液。 ，观察并记录收缩曲线，换液。 加入10 换液。 加入 -2 g/L组胺 0.3ml，作用明显时迅速换液。 组胺 ，作用明显时迅速换液 预先加入10 扑尔敏0.2 ， 预先加入 -2 g/L扑尔敏 ml，5 min后（不换液）加入同量组 扑尔敏 后 不换液）加入同量组 换液。 胺，观察并记录收缩曲线 ，换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，当作用达到最高点，加入1 g/L阿托 加入 溶液 ，当作用达到最高点，加入 阿托 品 0.2 ml，观察并记录收缩曲线。 ，观察并记录收缩曲线。
标本准备（ ） 标本准备（2）
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对 角处分别用缝针穿线 并打结。一端系于浴槽固定钩 分别用缝针穿线， 角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩 另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 张力换能器的悬臂梁上 上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器
药物对离体豚鼠回肠的作用
注意事项
• 冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽量避免牵拉 肠管。肠管两端穿线时，切勿将肠管缝死，只 需穿过一层肠壁。 • 台氏液应保持在37±0.5 °C，换液时，台氏液 亦应38±0.5 °C 。 • 加药时不要把药液直接加到回肠上，以免影响 结果。 • 浴温和肠肌的张力均可影响实验结果，应注意 调节。
方法和步骤
• 实验装置准备和仪器参数设置
– 麦氏浴槽内稳度：37 °C – 通气：95％O2＋5％CO2 （1-2个气泡/秒）
• 标本制备
– 击昏豚鼠，剖开腹腔，在离回盲部1 cm处剪 取回肠（长约10 cm），置于氧饱和的冷台 氏液中，除去肠系膜，将回肠剪成数小段 （长约1－1.5 cm）,用注射器冲洗干净，换 以新鲜台氏液备用。勿牵拉肠段。 – 在肠管两端对角处用线打结。注意保持肠管 通畅。肠管一端系于浴槽固定钩上，然后放 入浴槽中。另一端系于张力换能器，调节张 力至2－3 g。
观察项目
（1）稳定10－30 min后，记录一段正常收缩曲线。 然后用注射器依次向麦氏浴槽中滴加药液。每加 一组药时立即标记，并观察、记录收缩幅度。 （2）加入Ach 0.2 ml，观察2－3 min后换液（3次） （3）重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时，加 入atropine 0.2 ml。不换液，待平滑肌收缩曲线 稳定后，再加入Ach 0.2 ml，观察2－3 min后换 液
• 先给乙酰胆碱，是因为乙酰胆碱是一种完全拟 胆碱药，作用于M受体产生M样作用，兴奋平 滑肌，使回肠肌收缩，描笔曲线呈现上升。 • 给阿托品后，由于阿托品能竞争性阻断M受体， 对抗乙酰胆碱的M样作用，对内脏平滑肌有松 弛作用，因此给阿托品后曲线下降到正常状况。 • 氯化钡不作用于受体，而是直接作用于肠管， 使肠管受到钡离子的刺激后产生收缩，曲线呈 上升，此时再加阿托品，不能拮抗，曲线无变 化。
药物对离体豚鼠回肠的作用
将RM6240系统处 在记录状态；
将回肠标本的上 端连线打一活 结，勾在张力换 能器的悬臂梁钩 上
2. 方法
2.5 RM6240系统的使用：
剪辑
1.实验---生理科学实 验--- 肠肌 2.记录、实验中用暂 停, 实验结束用停 止，停止后一定要 另存为d或e盘。 3.标记：在标记窗内 打上药名，加药时
1. 摘要（目的、方法、结果、结论） 2. 材料和方法： 3. 实验结果：
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图（图题在图的下方） 3.2 表1 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
3.3 结果
• 观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体 拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）对乙酰 胆碱、组胺的拮抗作用。
实验原理
1. 乙酰胆碱：小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆 [Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱 受体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。
注意事项：
实验结束将资料另存为D盘或E盘，不要存在C盘或桌面，以免误退出 程序时实验数据丢失。
3. 结果
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图 3.2 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响 (数据ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ计表）
收集数据
离 体 豚 鼠 回 肠 实 验 10个 小 组 的 原 始 数 据 列 表
收 缩 幅 度 （ g）
收 缩 幅 度 （ g）
阿托品
氯苯那敏
实验小组 Ach
Ach
His
H is
1
2
对乙酰胆碱、阿托品、氯化钡三种药物的鉴别实验设计
2、取三个培养皿，分别标号甲乙丙丁，加入台氏液5ml，再放上离体兔肠一小段，连上通气钩，通气钩另一端与充满空气的球胆相连，缓慢通入气泡，并置水浴锅中，水浴锅中加入热水，加热，维持水温38°C±0.5°C。
3、分别在三个甲乙丙三个培养皿中缓慢滴加等量的三种待测药液，丁培养皿中滴加等量生理盐水，并仔细观察各培养皿中离体兔肠的变化。
实验名称：对乙酰胆碱、阿托品、氯化钡三种药物的鉴别
组员：庄桂文2008013090罗志文2008013091
余筱篆2008013087卢宇彬2008013095
【实验目的】观察乙酰胆碱、阿托品、氯化钡等药物对家兔离体肠平滑肌的作用，鉴别这三种药物。
【实验原理】乙酰胆碱为胆碱能神经递质，可明显兴奋兔肠平滑肌的M受体，使其收缩幅度、张力、蠕动增加；氯化钡不作用于受体，而是直接作用于肠管，使肠管受到钡离子的刺激后产生收缩痉挛；阿托品为阻断M胆碱受体的抗胆碱药，能拮抗乙酰胆碱对平滑肌的M样作用，但不能拮抗氯化钡对离体兔肠的收缩作用。
4、在甲乙丙中，将离体兔肠没有发生变化所对应的待测药物溶液作为实验试剂进行下一步的鉴别。
5、分别在实验组另外两个培养皿中滴加适量的第四步鉴别出的溶液，仔细观察离体兔肠的变化，描述现象，并写出实验结果。
对乙酰胆碱、阿托品、氯化钡三种药物的鉴别
编号
药物
第一次给药
第二次给药
现象
甲
乙
丙
丁
【注意事项】
1、冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽量避免牵拉肠管。
2、台氏液应保持在38±5°C，换液时，台氏液亦应38±5°C。
3、加药时不要把药液直接加到回肠上，以免影响结果。
4、浴温可影响实验结果，应注意调节。
我们离体肠管实验是在浴槽里做的，不是在培养皿里，你还要连接换能器，描记肠管收缩曲线呢。所以应该是在一条肠管上，通过加入不同药物、木槌、小剪刀、小镊子、培养皿等。
药物对豚鼠离体回肠的作用
药物对离体肠管的作用 参数：电流：DC 灵敏度：3.8克 滤波：50HZ 走纸速度：12.5s/div
（三）离体回肠标本的连结
离体回肠两端各系一线，一端挂于换能器尖端， 另一端绕过浴槽内铁丝钩自由悬垂，给予1g外力， 使波形上升1-2格，固定于铁架台上
【预习要求】
1．预习相关理论 2．实验方法与步骤 3．预测实验结果。
下次实验内容磺胺嘧啶钠在兔体内的药物动 力学。
（二） ASB240U生物信号处理系统的设定
（三） 离体回肠标本的连结
（四） 给药
（一） 仪器准备
（1）打开恒温水浴箱电源开关，预热 （注意：已设定37±0.5 ℃ ，勿动）
（2）清洗麦氏槽，加入约20ml台式液
(注意：打开空气泵再清洗)
（3）调节空气泵：呈细密小气泡
（二） ASB240U生物信号处理系统的设定
（固定）
（连换能器）
动作应轻柔，尽量避免牵拉肠管
（四）给药
氯化钡0.2ml
乙酰胆碱0.2ml
.
组胺0.2ml 阿托品0.1ml
苯海拉明0.1ml 乙酰胆碱0.2ml 组胺0.2ml
苯海拉明0.1ml
阿托品0.1ml
给药注意事项
1.每次给药后立即打标记，观察，待曲线稳定后 （走2-3格）再加入另一种药物
组胺
待作用稳定后，加入苯海拉明0.1ml。
2.注意清洗针管，加药时勿将药液直接加到 肠管上或将药物沾染到浴槽壁 3.做完后点 结束实验，结果存到E:/我的实验
组胺
苯海拉明
【实验结果打印说明】
1.实验结果保存在E:/我的实验 2.打开数据文件 →右键显示所有数据 →通过⊕放大选中波段，调整图形至最佳 通过⊕放大坐标轴 →剪切图片 →右键输出图形到Word →打印结果
实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)
2 2.810.1032.230.564
3 3.430.1253.070.111
4 3.260.1873.460.394
5 1.340.2712.160.776
62.150.1202.980.230
7 3.34-0.083.010.418
8 3.460.1542.590.103
3.讨论
3.1M受体激动药及拮抗药对平滑肌的药理作用
M胆碱受体激动药可分为两类，即胆碱酯类和天然形成的拟胆碱生物碱。乙酰胆碱属于胆碱酯类药物[2]，小剂量时为M胆碱受体激动作用。Ach与M胆碱能受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流增加，肌浆Ca2+浓度增大，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有N胆碱受体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。Atropine为M胆碱受体阻断药，其与平滑肌细胞膜M-受体结合，本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断乙酰胆碱与M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体的激动作用[3]。
【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏M胆碱受体 H1受体
胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断histamine与H1受体的结合，从而产生抗histamine作用。BaCl2为肌肉兴奋剂，能够使平滑肌强烈收缩[1]。
如上histamine同样具有使回肠平滑肌收缩的能力，作用前后其张力变化幅度为2.76±0.618，经扑尔敏作用后，再加入histamine平滑肌的收缩幅度变为0.37±0.213，用t检验得P<0.01，两者差异显著。说明扑尔敏具有对抗histamine的作用，主要是阻断了肠道上的H1受体。
药物对离体豚鼠回肠的作用
药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱，炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。
方法以离体豚鼠回肠为材料，研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。
结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时（P<0.01）；加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时（P<0.01）；BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。
关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl21.材料和方法1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液1.3 器材双层玻璃浴槽（20ml）张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统RM6240生物信号采集处理系统1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只，以木槌击打头部致昏死，立刻剖开腹腔，在离回盲部1cm处剪断，取长约10cm左右的回肠一段，置于氧饱和的台氏液中，沿肠壁去除肠系膜，将回肠剪成1-1.5cm左右的小段，用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。
1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度，调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃，通气管接95% O2+5%CO2混合气体，调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。
将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中，另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。
连接RM6240生物信号采集处理系统，仪器参数：通道时间常数直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。
1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。
药物对离体肠肌的作用实验报告
药物对离体肠肌的作用实验报告摘要：本实验旨在研究不同药物对离体肠肌的作用。
采用离体肠道平滑肌的收缩松弛实验，观察了不同药物的作用效果。
结果表明，乙酰胆碱能够显著引起肠肌收缩，而异丙肾上腺素和阿托品则能够引起肠肌松弛。
这些发现对于深入了解肠道平滑肌调节机制以及药物的临床应用具有重要意义。
引言：肠道平滑肌的调节对于消化功能的正常进行至关重要。
不同药物通过作用于肠道平滑肌，能够引起肠道收缩或松弛，进而影响肠道的蠕动和排泄功能。
因此，研究药物对离体肠肌的作用，对于深入了解肠道平滑肌调节机制以及药物的临床应用具有重要意义。
本实验旨在通过离体肠道平滑肌的收缩松弛实验，研究不同药物对离体肠肌的作用效果。
材料与方法：1.实验动物：从实验室小鼠中取得离体肠道，并且移除粘膜层。
2.药物制备：制备乙酰胆碱、异丙肾上腺素和阿托品的不同浓度溶液。
3. 实验装置：将离体肠道悬挂在器皿中，并用两根丝线固定。
悬挂在器皿中的肠道长度为5cm左右。
4.实验组设置：-阳性对照组：将肠道放在含有乙酰胆碱的溶液中，观察肠道的收缩情况。
-阴性对照组：将肠道放在普通生理盐水中，观察肠道的基础状态。
-实验组：将肠道分别放在含有不同浓度的异丙肾上腺素和阿托品的溶液中，观察肠道的松弛情况。
5.实验记录：记录每组药物作用后的肠道收缩或松弛情况。
结果：实验结果显示，阳性对照组中，乙酰胆碱能够显著引起肠道的收缩，使肠道呈现强烈的蠕动状态。
阴性对照组中，肠道保持基础状态，没有明显的收缩或松弛现象。
实验组中，异丙肾上腺素和阿托品都能够引起肠道的松弛，使肠道呈现较为松弛的状态。
并且药物的作用效果与浓度呈正相关关系，即浓度越高，药物的作用越明显。
讨论：本实验通过离体肠道平滑肌的收缩松弛实验，研究了乙酰胆碱、异丙肾上腺素和阿托品对离体肠肌的作用效果。
实验结果表明，乙酰胆碱能够引起肠道的强烈收缩，而异丙肾上腺素和阿托品能够引起肠道的松弛。
这与之前的研究结果一致，乙酰胆碱能够通过激活肠道的胆碱能受体，促进肠道平滑肌的收缩，而异丙肾上腺素和阿托品则能够通过激活肠道的肾上腺素能受体和胆碱能受体，减少胆碱的释放，从而引起肠道的松弛。
阿托品与乙酰胆碱对豚鼠离体肠平滑肌的作用
阿托品与⼄酰胆碱对豚⿏离体肠平滑肌的作⽤阿托品与⼄酰胆碱对豚⿏离体肠平滑肌的作⽤及PA2、PD2测定年级：2006年药学专业学⽣：苏鹤桂学号：2006038068【实验⽬的】通过离体器官实验，观察药物对M胆碱受体的激动作⽤和竞争性拮抗作⽤，加深理解受体的亲和⼒、内在活性概念以及受体动⼒学参数K D、pD2、Emax及pA2的计算和意义。
【实验意义】1 建⽴⽅法研究药物拮抗作⽤2 观察药物的拮抗性作⽤【实验原理】M胆碱受体激动药卡巴胆碱能剂量依赖性地激动肠管平滑肌上的M胆碱胆碱受体，产⽣平滑肌收缩效应，M胆碱受体阻断药阿托品可竞争性拮抗卡巴胆碱对M胆碱受体的激动作⽤。
通过累积剂量效应曲线，以及曲线直线化⽅法，可求得受体动⼒学常⽤参数。
实验材料⼄酰胆碱（mol/L）：10-6、10-5、10-4、10-3、10-2阿托品（mol/L）：3 10-7台⽒液配制1000ml台⽒液含：NaCl 8.0g、10% KCl 2.0ml(0.2g)、10% MgSO4.7H2O 2.6ml(0.26g)、5% NaH2PO4 .2 H2O 1.3ml(0.065g)、NaHCO3 1.0g、1M CaCL2 1.8ml（0.2g）、葡萄糖 1.0g。
离体器官浴池及恒温装置、PowerLab系统、混合⽓体（95％O2＋5％CO2）、负荷500 mg、加液器、培养⽫、缝针、线、眼科镊⼦、剪⼑。
【实验步骤】1．离体肠肌的制备猛击豚⿏头部⾄昏，⽴即剖开腹腔，⾃幽门下5cm剪取空肠和回肠上段，迅速置于台⽒液液中。
⼩⼼剪去肠系膜，⽤吸管吸取台⽒液液缓慢冲洗肠内容物；将空肠段分割成2 cm的⼩段备⽤，然后⽤缝针在肠段两端各穿⼀根线，作为固定肠肌之⽤。
2．实验装置将制成的标本⼀端固定于通⽓钩上，另⼀端连接于肌⼒换能器并接⼊PowerLab系统的桥式放⼤器上，浴池内放20ml 台⽒液液，加500mg负荷，恒温37±1?C，浴池内持续通⼊95％O2与5％CO2的混合⽓体。
区分鉴别这四种药物是乙酰胆碱、阿托品、氯化钡、生理盐水
第二临床医学院，10级中医1班，廖耀坚，2010051096【实验目的】观察这四种未知药物对家兔离体肠平滑肌的作用，区分鉴别这四种药物是乙酰胆碱、阿托品、氯化钡、生理盐水中的哪种。
【材料】器材：张力换能器、生物机能信号系统、控温浴槽、加氧泵、铁支架、双凹夹、温度计、烧杯、培养皿药物：A、B、C、D、台氏夜5种药液生物材料：离体家兔肠肌【实验原理】乙酰胆碱为胆碱能神经递质，可明显兴奋兔肠平滑肌的M受体，使其收缩幅度、张力、蠕动增加；阿托品为阻断M胆碱受体的抗胆碱药，能拮抗乙酰胆碱对平滑肌的M样作用，但不能拮抗氯化钡对离体兔肠的收缩作用；氯化钡不作用于受体，而是直接作用于肠管，使肠管受到钡离子的刺激后产生收缩痉挛；生理盐水对兔肠平滑肌张力无影响，只是保持肠肌的湿润；台氏液是进行哺乳动物离体肠肌实验时使用的试剂，配合不断通入氧气以维持离体肠肌的正常生理功能，对平滑肌张力无影响【方法】一、安装标本：（1）装浴槽：电热浴槽放在托盘上，装入约1/2自来水并架好温度计；灌流浴槽加入室温台氏夜，并放置通气管或将浴槽连接超级恒温水浴，调温38℃。
（2）装标本：用线扎牢肠段一端的一角并绑在通气管向上弯曲的部位。
另一端用蛙心夹夹紧，引线垂直连接到张力换能器上。
调节换能器的位置及松紧度，使线与肠段勿接触浴槽壁，以免引起摩擦而影响实验。
（4）供氧：连接通气管与加氧泵胶管，加氧泵悬挂铁支架上，注意避免震动对实验的影响。
尽快通电加氧，调节螺旋夹控制气流量。
（5）连接记录系统：将张力换能器与实验系统第一通道连接。
二、开机并启动相关实验系统三、观察项目观察肠段收缩情况，比较给药前后肠段收缩频率、幅度和张力的变化。
分次往灌流浴槽中滴入未知药液中的一种。
注意，每一实验项目均应做好标记，并且每一实验记录完后要用38℃台氏夜反复冲洗灌流浴槽至肠段恢复正常收缩。
四、区分出生理盐水和阿托品后，分次滴入剩下的2种未知药液中的其中1种，然后再滴入已测出的阿托品。
药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及PA2、PD2测定的实验方案
根据实验方案准备实验材料 进行实验 统计结果及数据统计
2009/12/5-2009/12/8
实验总结及撰写报告
四、参考文献 [1] 葛建国.不合理用药实例分析.中国乡村医药杂志[J].2005,12(1):38-39. [2] 韩仕平.阿托品治疗慢性肠炎的疗效观察.畜禽生产[J].2007,4:45 [3] 徐 端 正 . 估 计 竞 争 性 拮 抗 剂 pA2 的 改 良 方 法 . 中 国 药 理 学 报 [J].1989,10(6):568-571 [4] 龙丽辉.关于 PD2、 PA2 计算方法的探讨.中国民族民间医药[J].2008,4(6):67-71 [5] 阿托品对乙酰胆碱的竞争性作用与 PA2 值探讨.2006. [6] 颜光美主编.药理学[M].北京：高等教育出版社,2004：53，65
1．离体肠肌的制备 猛击豚鼠头部至昏，立即剖开腹腔，自幽门下 5cm 剪取空肠和回肠上段， 迅速置于台氏液液中。 小心剪去肠系膜， 用吸管吸取台氏液液缓慢冲洗肠内容物； 将空肠段分割成 2 cm 的小段备用，然后用缝针在肠段两端各穿一根线，作为固 定肠肌之用。 2．实验装置 将制成的标本一端固定于通气钩上，另一端连接于肌力换能器并接入 PowerLab 系统的桥式放大器上，浴池内放 20ml 台氏液液，加 500mg 负荷，恒 温 37±1°C，浴池内持续通入 95％O2 与 5％CO2 的混合气体。 3．累积剂量－效应曲线的制作 实验装置完毕以后，打开 PowerLab 系统，按“操作指南”设置参数： （1）选择 channel 1 （2）记录速度 10 /s （3）Bridge Amplifer 中“rang”选择 20 mv，“Low Pass”选择 50 Hz （4）调零“zero” 描记肠肌收缩曲线，待收缩基线平稳后，按下列（表 6-2）次序在浴池中加 入预先配好的不同分子浓度的乙酰胆碱。 表 6-2 累加次 序 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 药液浓度 药液的毫升数（ml） （mol/L） 10-6 10-6 10-5 10-5 10-4 10-4 10-3 10-3 10-2 10-2 0.2 0.4 0.14 0.4 0.14 0.4 0.14 0.4 0.14 0.4 （µmol） 0.01 0.03 0.1 0.3 1 3 10 30 100 300 累积剂量法加药顺序 每 L 中累积剂量
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
2021年7月21日星期三
目的
学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。 观察药物acetylcholine (Ach、乙酰胆碱），
histamine (His、组胺），BaCl2分别对离体 豚鼠回肠平滑肌的作用，并以atropine(阿托 品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏） 为工具药，初步分析以上药物的作用原理。
1. 针对实验数据，进行结果描述
总结Ach、阿托品、His、扑 离体豚鼠回肠有什么作用。
尔
敏
、
B
a
C
l
2分
别
对
2. 讨论和结论
分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2对离体 豚鼠回肠平滑肌的科学实验. 浙江大学出 版社，2004，245-247
标本准备（1）
• 找到盲肠，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm
左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，冲洗干净， 将回肠剪成1-1.5cm的几小段。
标本准备（2）
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端 对角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固 定钩上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器
原 理（1）
胃肠平滑肌收缩的自动节律性（慢波理论： Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。
原 理（2）
乙酰胆碱：M胆碱能受体激动药。Ach与M 受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内 流↑，肌浆[Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。
阿托品：M胆碱能受体阻断药。阿托品与平 滑肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M 受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体的激动作 用。
传出神经药物对离体肠肌的作用
实验观察
第二组
（1）换组换液 （2）1%氯化钡溶液0.3，带收缩达到最明显时立即加入
（3）0.2%硫酸阿托品0.3
注意事项
注意 事项
⑴在恒温槽内先装水，方可接通电源 ；
⑵制备肠标本时,动作宜轻柔,勿用手捏, 以免损伤肠壁。冲洗肠管不能用力过猛, 避免肠管过于膨胀，影响其正常功能。 标本不宜在空气中暴露过久,以免影响 数据的准确性；
实验材料实验动物试剂和药品装置和器材家兔01乙酰胆碱02阿托品1氯化钡溶液台式液bl420生物信号采集与处理系统恒温平滑肌槽哺乳类动物手术器械张力换能器双凹夹培养皿注射器丝线等
传出神经药物对离体肠肌的作用
实验内容
1. 实验目的与原理 2. 实验材料 3. 实验方法 4. 注意事项
实验目的
理论
温度、营养、氧气
实验材料
实验动物 试剂和药品
家兔
0.1%乙酰胆碱、0.2%阿托品、1%氯化 生物信号采集与处理系统、恒 温平滑肌槽、哺乳类动物手术器械、 张力换能器、双凹夹、培养皿、注射 器、丝线等。
实验方法
1.安装实验装置
1、安装恒温平滑肌槽 2、调试420系统 3、张力换能器连接
实验方法
2.动物手术
制备离体肠肌标本。
小肠解剖位置： 找到接食管的喷门
幽门
小肠中十二指肠
实验观察
第一组
⑴观察正常小肠平滑肌运动的节律、波形和幅度；
⑵给予0.1%乙酰胆碱0.3，观察收缩曲线的变化；收缩达 到最明显时，加入 ⑶给予0.2%阿托品0.3，观察收缩曲线的变化。待收缩恢 复至基线后
（4）加入乙酰胆碱0.3于浴槽内，观察收缩曲线的变化；
⑶连接小肠的线要稍拉直，但不能过 分牵扯
豚鼠离体回肠实验报告
一、实验目的1. 了解离体豚鼠回肠实验的基本原理和方法。
2. 观察不同药物对豚鼠离体回肠平滑肌张力的影响。
3. 掌握绘制量效曲线、分析量效关系、认识竞争性拮抗剂和非竞争性拮抗剂等概念。
二、实验原理豚鼠离体回肠实验是一种常用的生物学实验方法，通过在体外模拟豚鼠回肠平滑肌生理状态，观察不同药物对回肠平滑肌张力的影响，从而研究药物的药理作用。
实验过程中，豚鼠回肠平滑肌的收缩与舒张反应受到多种因素的影响，如神经递质、激素、药物等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：豚鼠离体回肠、生理盐水、乙酰胆碱、阿托品、组胺、扑尔敏等。
2. 实验仪器：恒温浴槽、肌力换能器、显微镜、培养皿、微量注射器、缝衣针、缝线、洗瓶、RM6240多媒体化生物信号记录分析系统等。
四、实验方法1. 豚鼠离体回肠标本的制备：取豚鼠离体回肠约2cm，对角结扎，一端固定在浴槽的通气钩上，另一端垂直连接于肌力换能器的感应片上，调节基础张力约为0.5g。
2. 实验分组：将实验分为以下几组：（1）对照组：加入生理盐水；（2）乙酰胆碱组：加入不同浓度的乙酰胆碱；（3）阿托品组：加入不同浓度的阿托品；（4）组胺组：加入不同浓度的组胺；（5）扑尔敏组：加入不同浓度的扑尔敏。
3. 观察指标：观察并记录不同药物对豚鼠离体回肠平滑肌张力的变化，绘制量效曲线。
4. 数据处理：采用统计学方法对实验数据进行处理，分析量效关系。
五、实验结果1. 生理盐水组：豚鼠离体回肠平滑肌张力基本稳定，无显著变化。
2. 乙酰胆碱组：随着乙酰胆碱浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐增强，呈剂量依赖性。
3. 阿托品组：随着阿托品浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐减弱，呈剂量依赖性。
4. 组胺组：随着组胺浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐增强，呈剂量依赖性。
5. 扑尔敏组：随着扑尔敏浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐减弱，呈剂量依赖性。
六、实验结论1. 乙酰胆碱对豚鼠离体回肠平滑肌具有兴奋作用，呈剂量依赖性。
阿托品对肠肌作用临床应用
阿托品对肠肌作用临床应用阿托品是一种常用的抗胆碱药物，具有扩张支气管、抑制腺体分泌和降低运动性蠕动等效应。
在临床上，阿托品常用于治疗胃肠道疾病，其中对肠肌的作用尤为重要。
本文将就阿托品对肠肌的作用及临床应用进行探讨。
阿托品通过竞争性拮抗乙酰胆碱受体，阻断乙酰胆碱的作用，从而导致肠道平滑肌的弛缓和抑制。
其作用机制主要体现在以下几个方面：1. 抑制运动性蠕动：阿托品可以抑制乙酰胆碱对M 受体的作用，从而减少肠壁平滑肌的收缩，降低蠕动频率和幅度，延长肠腔的潜伏期。
这种作用对于治疗腹泻等肠道高蠕动性疾病具有重要意义。
2. 减少分泌：阿托品还能降低胰液、胃液和唾液等分泌物的分泌量，减轻腹痛、腹泻等症状。
其通过抑制M3受体对腺体的刺激而实现这一效果。
3. 扩张血管：阿托品的抗胆碱作用还可导致血管平滑肌的松弛，扩张血管，降低内脏血流，减少输液引起的胃肠动力亢进等不良反应。
在临床应用方面，阿托品主要用于以下几种情况：1. 治疗腹泻：由于阿托品具有抑制肠道蠕动和减少分泌的作用，适用于各种原因引起的腹泻，如感染性腹泻、功能性腹泻等。
2. 缓解胃肠痉挛：阿托品可以通过放松肠道平滑肌，减轻胃肠痉挛引起的腹痛和腹胀等症状。
3. 防治术后肠蠕动亢进：手术后常常伴有肠蠕动亢进，导致腹痛、腹泻等并发症，使用阿托品可以减轻这些症状。
4. 防治放射性肠炎：放射治疗常引起肠道黏膜损伤和炎症，使用阿托品可以减少放射性肠炎的发生。
总的来说，阿托品对肠肌的作用主要表现为抑制运动性蠕动和减少分泌，其临床应用多用于治疗腹泻、胃肠痉挛、术后肠蠕动亢进和放射性肠炎等情况。
然而，使用阿托品需注意剂量、不良反应和禁忌症等问题，避免出现不良后果。
因此，在使用阿托品时应严格按照医嘱使用，避免自行增减剂量或长期大量使用，以免出现不良反应。
【字数达到1500字】。
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阿托品与乙酰胆碱对豚鼠离体肠平滑肌的作用
及PA2、PD2测定
年级：2006年药学专业
学生：苏鹤桂
学号：2006038068
【实验目的】
通过离体器官实验，观察药物对M胆碱受体的激动作用和竞争性拮抗作用，加深理解受体的亲和力、内在活性概念以及受体动力学参数K D、pD2、Emax及pA2的计算和意义。
【实验意义】
1 建立方法研究药物拮抗作用
2 观察药物的拮抗性作用
【实验原理】
M胆碱受体激动药卡巴胆碱能剂量依赖性地激动肠管平滑肌上的M胆碱胆碱受体，产生平滑肌收缩效应，M胆碱受体阻断药阿托品可竞争性拮抗卡巴胆碱对M胆碱受体的激动作用。
通过累积剂量效应曲线，以及曲线直线化方法，可求得受体动力学常用参数。
实验材料
乙酰胆碱（mol/L）：10-6、10-5、10-4、10-3、10-2
阿托品（mol/L）：3 10-7
台氏液配制 1000ml台氏液含：NaCl 8.0g、10% KCl 2.0ml(0.2g)、10% MgSO4.7H2O 2.6ml(0.26g)、5% NaH2PO4 .2 H2O 1.3ml(0.065g)、NaHCO3 1.0g、1M CaCL2 1.8ml（0.2g）、葡萄糖 1.0g。
离体器官浴池及恒温装置、PowerLab系统、混合气体（95％O2＋5％CO2）、负荷500 mg、加液器、培养皿、缝针、线、眼科镊子、剪刀。
【实验步骤】
1．离体肠肌的制备
猛击豚鼠头部至昏，立即剖开腹腔，自幽门下5cm剪取空肠和回肠上段，迅速置于台氏液液中。
小心剪去肠系膜，用吸管吸取台氏液液缓慢冲洗肠内容物；将空肠段分割成2 cm的小段备用，然后用缝针在肠段两端各穿一根线，作为固定肠肌之用。
2．实验装置
将制成的标本一端固定于通气钩上，另一端连接于肌力换能器并接入PowerLab系统的桥式放大器上，浴池内放20ml 台氏液液，加500mg负荷，恒温37±1︒C，浴池内持续通入95％O2与5％CO2的混合气体。
3．累积剂量－效应曲线的制作
实验装置完毕以后，打开PowerLab系统，按“操作指南”设置参数：
（1）选择channel 1
（2）记录速度10 /s
（3）Bridge Amplifer中“rang”选择20 mv，“Low Pass”选择50 Hz
（4）调零“zero”
描记肠肌收缩曲线，待收缩基线平稳后，按下列（表6-2）次序在浴池中加入预先配好的不同分子浓度的乙酰胆碱。
表6-2 累积剂量法加药顺序
秒钟肠肌的收缩达高峰。
应在高峰未下降前，迅速加入下一个剂量。
当反应到一定高峰，再递增剂量，效应不再增加，此时的效应为最大效应。
4．阿托品拮抗乙酰胆碱的剂量－效应曲线的制作
放去浴池中的液体，用台氏液液冲洗三次，以后每隔10min 冲洗一次，共冲洗三次，再加入台氏液液至20ml 。
待收缩基线平稳后，加入阿托品3X10－7 mol/L 0.2ml ，培育15min ，再按“方法3”依次加入不同浓度的乙酰胆碱，便可得到有拮抗剂时乙酰胆碱的累积剂量效应曲线，此时拮抗剂（阿托品）摩尔浓度的负对数即pA x 。
【统计与处理】
1．绘制累积剂量效应曲线
取方格纸，以肠肌收缩幅度（mv ）作为纵坐标即效应（E ），以药物对数浓度（lg C ）为横坐标，绘制量效曲线。
K D 值即达到50％最大效应时，在横坐标上所对应的药物浓度。
药物的最大效应（Emax ）即曲线的高度。
当比较同类药物的Emax 时，即比较曲线的高度（肠肌收缩最大幅度）。
2．直线回归（LR ）计算参数
为了正确求得各参数，必须将曲线直线化。
可按D/R 式（改良Lineweaver －Burk 式）使剂量效应曲线直线化。
(y) (a) (b) (x)
式中：D 为药物剂量（浓度），E 为某一剂量的效应，K D 为药物的解离常数，Emax 为药物的最大效应。
以[D]/E 为纵坐标，[D]为横坐标进行直线回归。
按直线公式y = a + bx ，则
－Log K D 即pD 2
][1
][m ax
m ax D E E K E D D +=max
E K a D
=
截距max
1E b =
斜率D D K E E K b a
=⨯=max max
根据公式pA 2 = pA x + log (x-1)，式中pA x 为拮抗剂摩尔浓度的负对数，x 为用拮抗剂后与用拮抗剂前K D 之比。
【实验结果】
C(mol/l)
lgc
E （乙酰
胆碱)
E(乙酰
-1.95） E （+阿托品)
E2（阿托品
-1.12）
C/E(乙酰胆碱
-1.95）
C/E2（+阿托品
-1.12）
10-5
-5 3.37 1.42 1.47 0.35 7.04X10-6 2.86X10-5 3X10-5 -4.5 3.62 1.67 1.61 0.49 1.79X10-5 6.12X10-5 10-4 -4 4.15 2.2 1.72 0.6 4.54X10-5 1.67X10-4 3X10-4 -3.5 5.07 2.8 2.26 1.14 1.07X10-4 2.63X10-4 10-3 -3 5.36 3.41 3.34 2.22 2.93X10-4 4.50X10-4 0.003 -2.5 5.69 3.74 3.9 2.78 8.02X10-4 0.0011 0.01 -2 5.86 4.01 4.3 3.18 2.49X10-3 0.0031 0.03 -1.5 6.03 4.1 4.92 3.8 7.32X10-3
0.0079 0.1 -1 5.92 3.97 5.45 4.33 0.025 0.023 0.3
-0.5
5.66 3.71 5.51 4.39
0.081 0.068
A B E KD
乙酰胆碱 3.45X10-5
0.268 3.72 1.29X10-4 阿托品 3.68X10-4
0.227
4.41
0.00162 X 12.61 PAX 7.52 PA2
8.59
PD2
2.79
b
E 1m ax
图1
【注意事项】
（1）悬挂肠管时，不要过度牵拉肠管，肠管及连线勿紧贴浴管壁。
（2）加药时不要将药液滴在连线上，应直接滴在液面上。
（3）水浴箱应保持在37±1︒C，浴池内营养液的容积在洗涤标本前后要保持一致。
（4）为了正确地制作累积剂量反应曲线，应在对某剂量的反应到最大后立即给予下一个剂量，但若前一个剂量达到最大反应后慢慢观察再加下一个剂量，则反应曲线难予累积，故可稍微提前一点加入下一个剂量。
【分析讨论】
从图1量效曲线图可见，乙酰胆碱随着给药剂量的增大，肠管平滑肌收缩曲线上升的幅度越大。
说明乙酰胆碱有明显的兴奋肠平滑肌作用．且量效呈正相关性。
阿托品同样随着浓度升高，拮抗性作用也明显增强。
图1还显示，乙酰胆碱与阿托品注射液使肠管平滑肌收缩幅度的下降值为纵坐标，对数剂量为横坐标都呈S 形量效曲线，两者对肠道兴奋与抑制作用统计学分析无显著性差异。
从表格的PA2,PD2值可知，PA2为阿托品竞争性拮抗强度指标，其值越大说明拮抗性越强，PD2为乙酰胆碱受体亲和力的定量，其值越大说明乙酰胆碱亲和性越强。
【总结】
从实验数据可知，乙酰胆碱对肠道具有亲和性作用，其产生的张力效应随浓度增加而增加。
阿托品对肠道具有拮抗性，高浓度阿托品拮抗性越强。
两者的量效曲线显示出它们对肠道不同程度的收缩或兴奋作用；阿托品竞争性拮抗强度指标PA2与阿托品浓度呈正相关，PA2越大说明阿托品拮抗性越强，而乙酰胆碱受体亲和力的定量表示PD2随浓度增加呈上升趋势，表示其对受体亲和力越大。
乙酰胆碱对胃肠道药理作用
ACh可明显兴奋胃肠道，使其收缩幅度、张力增加，胃、肠平滑肌蠕动增加，并可促进胃、肠分泌，导致恶心、嗳气、呕吐、腹痛及排便等症状。
阿托品对胃肠道药理作用
阿托品能松弛许多内脏平滑肌，对过度活动或痉挛的内脏平滑肌，松弛作用较显著。
它可抑制胃肠道平滑肌的强烈痉挛，降低蠕动的幅度和频率，缓解胃肠绞痛；对膀胱逼尿肌也有解痉作用；但对胆管、输尿管和支气管的解痉作用较弱。
胃肠道括约肌的反应主要取决于括约肌的机能状态。
例如胃幽门括约肌痉挛时，阿托品具有松弛作用，但作用不显著和不恒定。
阿托品对子宫平滑肌影响较小。
存在问题：本实验采用的是豚鼠肠道进行实验，影响因素很多，如水浴箱温度，肠道活性，仪器灵敏度，操作不规范等等，所得数据有些偏差。
改进方法：遵守实验室操作规范，掌握仪器使用方法，熟悉实验操作。