药物对离体平滑肌的作用

药物对离体平滑肌受体的作用

[适用对象适用对象适用对象适用对象] 中药学、药学、药物制剂专业

实验目的：利用兔十二指肠或上段空肠，观察乙酰胆碱，阿托品及氯化钡对离体兔肠平滑肌的作用。

实验原理：离体兔肠平滑肌在适当的条件下可以保持较长时间的自动节律性收缩。根据受体在肠道平滑肌中分布的特点，可观察药物的作用，并可借助工具药分析其作用原理。

仪器设备：（动物与药品试剂）

1、动物：家兔2.5kg左右

2、药品与试剂：0.001%氯化乙酰胆碱溶液，0.1%硝酸毛果芸香碱溶液0.1%硫酸阿品托溶液0.05%溴化新斯的明溶液1%氯化钡溶液台氏液

3、仪器设备：BL-420E生物机能实验系统，张力换能器，HW-300型恒温平滑肌槽，多用电源插座，铁支架，双凹夹，L 型钩，培养皿，缝线，1ML注射器，10ML注射器，手术器械一套。

四、相关知识

1、由于肠肌上分布有M受体，当向营养液加入Ach（N 、M）受体激动药、阿品托（M受体阻断药）、毛果芸香碱（M受体激动药）、新斯的明（抗胆碱酯酶药）等药物时，可与相应的受体结合，激动或阻断M受体，引起肠肌收缩或松弛。

2、氯化钡是一种非受体作用的有毒化合物，对肠肌有直接的兴奋收缩作用，常用于药理实验中、

五、实验步骤

（一）仪器连接1、打开HW－300型恒温平滑肌，恒温37-38摄氏度。2、启动电脑，确认USB接口已经连通，打开BL－420E 生物机能实验系统软件，在“实验项目”下拉菜单中选择“消化道平滑肌活动”，或在“输入信号”下拉菜单中选择“1通道”的“张力”，在“1通道”连接张力换能器。

（二）制备标本取家兔1只，击头致死，剖腹，取出空肠或十二指肠，放入台氏液的器皿中，用吸管吸取台氏液将肠内空物冲净，剥离肠系膜。将肠管煎成2cm的肠段备用。肠管两端对角穿线，将其安放在有台氏液的平滑肌槽中，上端连接拉力换能器，下端系于L型钩上，通入空气供氧。

（三）药物对离体兔肠平滑肌的作用1、加药：待肠肌稳定10min 后，描记正常收缩曲线，然后依次加药并记录收缩曲线的变化，顺序如下：（1）0.001%Ach溶液0.2ml，当肠肌活动曲线降至基线时，台氏液连续冲洗3次；

（2）重复（1），作用达到最高点时再加0.1%阿品托0.2ml，记录曲线变化后，台氏液连续冲洗3次；

（3）1%氯化钡1.0ml作用达到最高峰时立即加入0.1%阿品托1.0ml，记录曲线变化；

（4）待肠肌活动稳定后加入0.1%毛果芸香碱0.5ml观察描记肠肌活动曲线后，台氏液连续冲洗3次；

（5）加0.1%阿品托0.5ml，作用明显时再加0.1%毛果芸香碱0.5ml, 观察描记肠肌活动曲线后，台氏液连续冲洗3次；

（6）加0.05%新斯的明溶液0.5ml，描记肠肌活动曲线变化。2、记录结果：将描记的曲线图打印剪贴，标明题目，时间，地点，室温，实验者及主要条件（如肠段长度，走纸速度，加药标记等）。

（四）注意事项：

1、实验用动物在实验前24h禁食，不禁水，已保持肠道无粪便。

2、每加入药液，至作用明显后，用台氏液连续冲洗3次，等到曲线恢复到用药前的水平，随之描记一段基线，再加入下一个药液，如果肠管反应已失灵，可更换一段肠管。

3、向管内加药时，不要触碰连接线，也不要把药滴到管壁上

4、肠管与换能器连接线不宜太紧，亦不能与浴管壁接触。

5、关闭电脑时，确认USB接口已经关闭，再关闭BL－420E生物机能实验系统软件，关闭电脑。

六、实验报告要求、实验报告内容应包括：【实验目的】、【实验原理】、【器材】、【药品与试剂】、【动物】、【实验方法】、【结果】及【讨论】等部分。

【结果】要对所得实验数据进行统计分析；【讨论】要对实验中

遇到的问题进行描述并分析原因。

七、思考题

1、试分析上述药物对离体肠平滑肌有什么作用。为什么？

2、用实验方法，还可以做哪些实验？

八、实验成绩评定办法

原理描述: 10分

实验流程: 10分

数据记录: 10分

解决问题的能力: 20分

资料搜集: 10分

实验结果: 10分

实验效果10分

附录：

许多二价离子都和钙离子相似的作用，如镁离子。可能是这么机制吧。 兴奋信号传到肌接头处时,兴奋引起钙离子大量释放.释放的钙离子促进神经轴突中的囊泡膜与接头前膜(突触前膜)发生融合而破裂而释放囊泡中的乙酰胆碱(递质),乙酰胆碱(递质)经过神经肌肉接头间隙(突触间隙)；与接头后膜(突触后膜)上的受体结合，引发终板电位。 其过程,包括三个阶段. (一是钙离子促进神经轴突中的囊泡膜与接头前膜发生融合而破裂；二是囊泡中的乙酰胆碱释放到神经肌肉接头间隙；三是乙酰胆碱与接头后膜上的受体结合，引发终板电位。