实验四___胶体金试纸条检测技术剖析
最新实验四 胶体金试纸条检测技术
H5ＡIV细胞 毒阳性结果 阴性对照
测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合（免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG）， 而 显 出 红 色质控线条（R）。
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 ： 操 作 简 单 ， 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
测定
测定时将试纸条下端浸入液体 标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测定
若 标 本 中 有 待 测 特 异 抗 原 ， 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的 毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用 胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗 体。
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的 作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于
静电作用成为一种稳定的胶体状态。
➢胶体金的质量判定标准
胶体金试纸条检测技术
吸收垫
背衬 （底板）
检测线 硝酸纤维素膜
测定
测定时将试纸条下端浸 入液体标本中，下端吸 水材料即吸取液体向上 端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物 复溶，并带动其向膜条 渗移。
测定
若标本中有待测特异抗 原，即可与免疫金复合 物中的抗体结合，此抗 原抗体复合物流至测试 区即被固相抗体捕获， 在膜上显出红色反应线 条（T）。
阴性对 照
H5ＡIV 细胞毒纸条诊断技术 的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微 孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一 端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗 原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色 （红色）反应，检测抗原/抗体。有 三种反应模式：夹心法，间接法，竞 争抑制法。
胶体金试纸条示意 图
样品垫
连接垫
（胶体金垫） 质检线
结果易于判定：阴、阳性呈色很 明显，肉眼很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单 克隆抗体标记，这决定了它具有
胶体金快速诊断技术的 应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病 、禽流感、新城疫、犬细小病 毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛 虫病、囊虫病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻 疽。
H5 亚 型 AIV 尿 囊 液阳性结 果
测定
过 剩 的 免 疫 金 复 合 物 继续前行，至参照区 与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的 单克隆抗体为小鼠 IgG），而显出红色质 控线条（R）。
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显 示质控线条。
胶体金快速诊断技术的 特点
简捷快速：操作简单，一般只要 5-10min 就会出结果，而其它 方 法 如 ELISA 需 要 1 -2h ， PCR 需要时间更长。
➢基础金核 ➢双离子 内层负离子（AuC12－） zeta电位 z排 体et斥 间a电， 的位以 溶可液维以中持外使胶层胶体离金体子的金层稳颗定粒H状+之分态间散。相在互胶
胶体金试纸条半定量的原理
胶体金试纸条半定量的原理胶体金试纸条是一种半定量的检测工具，它通过特殊的反应机制检测到目标物质的存在而实现定量化。
该试纸条主要由胶体金颗粒和特定的前体分子构成。
胶体金颗粒作为试纸条的核心组成部分，具有很高的表面活性和生物相容性。
这种颗粒的尺寸约为20到50纳米，具有很好的光学性质。
它们吸收和散射光线的能力非常强，所以在水溶液中能够造成很强的表面等离子共振效应。
当胶体金颗粒受到环境信号激发时，形成的电场会产生强烈的局部热效应和极化效应，从而引起表面等离子共振的出现。
这种表面等离子共振现象能够改变胶体金颜色的强度和色调。
胶体金颜色的变化是胶体金试纸条半定量原理的基础。
当前体分子接触到胶体金颗粒时，它们会与胶体金颗粒表面上的裸露离子成键。
这些前体分子能够在水中游离和沉淀，其浓度随环境信号的增加而变化。
当前体分子沉积在接触面上时，胶体金颜色的强度和色调就会相应发生变化。
胶体金试纸条的半定量原理也利用了金纳米粒子表面修饰的性质。
金纳米粒子表面修饰能够改变金纳米粒子的SERS特性，从而实现目标物质的检测。
这种修饰的方法包括吸附、共价键合、离子交换等。
胶体金试纸条的半定量原理还利用了金纳米粒子表面积的大小和相对稳态。
这些属性能够影响金纳米颗粒和前体分子之间的化学反应。
通过测量目标物质与金纳米颗粒之间的交互作用，就能够获得目标物质的数量信息。
总之，胶体金试纸条的半定量原理是通过利用胶体金颗粒、特定前体分子、金纳米颗粒表面修饰的特性，并结合虚函数的原理，使很低浓度的样品向成常见的视检品的化合物浓度转化。
这种检测方法广泛应用于生物医学、环境监测和食品安全检测等领域。
胶体金试纸条检测技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素 （ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
technique）是以胶体金作为示踪记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细 血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端 渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜 色（红色）反应，检测抗原/抗体。有三种反应模 式：夹心法，间接法，竞争抑制法。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术（Immunogold labeling
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行，
胶体金免疫层析技术实验
样品垫
连接垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬
测
定
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
测定时将试纸条下端浸入液体标 本中，下端吸水材料即吸取液体 向上端移动，流经C处时使干片 上的免疫金复合物复溶，并带动 其向膜条渗移。
测
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
定
若标本中有待测特异抗原，即可 与免疫金复合物中的抗体结合， 此抗原抗体复合物流至测试区即 被固相抗体捕获，在膜上显出红 色反应线条（T）。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
实验目的
掌握胶体金试纸条诊断技术的原理、使用方 法及结果的判定
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的 免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性 腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表 面抗原（HBsAg）等检测。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就 会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼 很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标 记，这决定了它具有很好的特异性。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
简介
胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4） 的水溶胶，利用HAuCl4在还原剂（柠檬酸钠） 的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，形成带 负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳 定的胶体状态，故称胶体金。
简 介 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条原理胶体金试纸条是一种常用于检测生物标志物的快速诊断工具，其原理基于胶体金纳米颗粒的特性和生物分子的相互作用。
胶体金纳米颗粒具有良好的生物相容性和生物亲和性，可以与生物分子（如蛋白质、核酸等）特异性结合，形成可见的颜色变化，从而实现生物分子的快速检测。
胶体金试纸条的原理主要包括两个方面，一是胶体金纳米颗粒的表面增强效应，二是生物分子的特异性识别。
首先，胶体金纳米颗粒具有表面增强效应，即在特定波长下，其表面等离子体共振会导致颜色的增强和变化。
当胶体金纳米颗粒与生物分子结合时，会引起表面等离子体共振的改变，从而导致胶体金纳米颗粒的颜色发生可见的变化。
其次，胶体金试纸条上的生物分子探针与待检测样品中的靶分子特异性结合，形成复合物，使胶体金纳米颗粒发生聚集或分散，进而导致颜色的变化。
通过比较试纸条上的颜色变化与标准颜色条，可以快速判断待测样品中的生物标志物的浓度或存在与否。
胶体金试纸条的原理具有以下特点，首先，具有高灵敏度和特异性。
胶体金纳米颗粒的表面增强效应和生物分子的特异性识别使得试纸条对生物标志物具有高度灵敏性和特异性，能够实现快速、准确的检测。
其次，具有快速反应和直观可见的特点。
胶体金试纸条的检测过程简单快速，无需复杂的仪器和操作，通过肉眼即可直接观察到颜色的变化，使得检测结果直观可见，便于临床诊断和现场应用。
再次，具有良好的可控性和稳定性。
胶体金纳米颗粒的制备工艺成熟，具有良好的可控性和稳定性，能够保证试纸条的稳定性和重复性，为实际应用提供了可靠的保障。
总之，胶体金试纸条基于胶体金纳米颗粒的表面增强效应和生物分子的特异性识别，实现了生物标志物的快速检测，具有高灵敏度、特异性、快速反应和直观可见的特点，逐渐成为临床诊断、食品安全和环境监测等领域的重要工具，对于提高诊断效率和保障公共健康具有重要意义。
绒毛膜促性腺激素(HCG)胶体金试纸条诊断实验
绒毛膜促性腺激素（HCG）胶体金试纸条诊断实验摘要：目的：掌握胶体金试纸条诊断技术的原理，使用方法及结果的判定；掌握绒毛膜促性腺激素（HCG）胶体金试剂盒的制作技术。
胶体金是氯金酸(HAuC14)的水溶胶，利用HAuCl4在还原剂(柠檬酸钠)的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，故称胶体金。
本实验所用到的双抗夹心法是胶体金检测平台最常用的检测方法，主要用于检测比较大的生物分子及颗粒性抗原。
关键词：胶体金绒毛膜促性腺激素（HCG）免疫金胶体金试剂盒双抗夹心法绒毛膜促性腺激素（HCG）是胎盘合体滋养层细胞所分泌的一种糖蛋白激素，胎盘绒毛膜的合体滋养层产生。
其主要功能就是刺激黄体，有利于雌激素和黄体酮持续分泌，以促进子宫蜕膜的形成，使胎盘生长成熟。
HCG结构中包括α、β两个亚基，α-亚单位为垂体前叶激素所共有，β链为其独有，β亚基被用来制备特异性抗体测定血中的HCG，专用名为β-HCG。
胶体金快速诊断技术具有简捷快速，结果易于判定，特异性好等特点。
该技术操作简单，一般只要5-10min 就会出结果，阴、阳性呈色很明显，肉眼很容易判断。
该技术大多用单克隆抗体标记，具有很好的特异性。
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。
双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体，一个抗体用胶体金标记并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线(T线)上。
另外，还需要准备能与金标抗体(即胶体金标记抗体)特异结合的二抗并固定于NC膜的控制线(C线）上。
1.仪器和材料1.1可编程切条机切条机是将试纸板快速切割成一定宽度的单份试纸，适合各类不同规格试纸的研发与生产。
其最大的特点是一根一根切下来，可以随时终止并更改宽度。
实验四 胶体金试纸条检测技术ppt
测定
过剩的免疫金复合物继续前行， 至 参 照 区 与 固 相 抗 小 鼠 IgG 结 合（免疫金复合物中的单克隆 抗 体 为 小 鼠 IgG）， 而 显 出 红 色质控线条（R）。
-
测定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
-
胶体金快速诊断技术的特点
简 捷 快 速 ： 操 作 简 单 ， 一 般 只 要 5 -10min 就会出结果，而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的 毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢 向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用 胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗 体。
➢最常用的是双抗夹心法检测抗原 -
胶体金试纸条示意图
样品垫
连ห้องสมุดไป่ตู้垫 （胶体金垫）
质检线
吸收垫
背衬 （底板）
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼 很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标 记，这决定了它具有很好的特异性。
-
胶体金快速诊断技术的应用
病毒性疾病：传染性法氏囊病、禽流感、 新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫 病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
-
实验四 胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析 技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗 滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫 学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素 （ HCG） 的 测 定 和 乙 型 肝 炎 病 毒 表 面 抗 原 （HBsAg）等检测。
-
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸 （HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的 作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
胶 体 金 标 记 技 术 （ Immunogold labeling
technique）是以胶体金作为示踪标记物应
用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜 的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢 慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利 用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/ 抗体。
实验四
胶体金试纸条诊断技术
一、简
介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激 素（ HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg）等检测。
胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
连接垫 （胶体金垫） 样品垫 质检线 吸收垫
背衬 （底板）
检测线
硝酸纤维素膜
测
定
测定时将试纸条下端浸入液体
标本中，下端吸水材料即吸取 液体向上端移动，流经C处时使 干片上的免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测
定
若标本中有待测特异抗原，即
（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作 用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
胶体金的质量判定标准 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球 形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状 各异。
胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带
病毒性疾病பைடு நூலகம்传染性法氏囊病、禽流感、
新城疫、犬细小病毒、猪瘟等。
寄生虫疾病：血吸虫病、旋毛虫病、囊虫
病、恙虫病。
细菌性疾病：霍乱弧菌、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5ＡIV细胞 毒阳性结果
阴性对照
可与免疫金复合物中的抗体结 合，此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获，在膜 上显出红色反应线条（T）。
测
定
过剩的免疫金复合物继续前行，
至参照区与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG），而显出红色质 控线条（R）。
测
定
阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。
胶体金快速诊断技术的特点
简捷快速：操作简单，一般只要5-10min 就
会出结果，而其它方法如 ELISA 需要 1-2h ， PCR 需要时间更长。
结果易于判定：阴、阳性呈色很明显，肉眼
很容易判断。
特异性好：因为该技术大多用单克隆抗体标
记，这决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用