牦牛发酵酸奶中耐久肠球菌的筛选鉴定和益生特性

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青海部分牧区牦牛酸奶中乳杆菌的分离与鉴定

青海部分牧区牦牛酸奶中乳杆菌的分离与鉴定X胡勇,刘书杰(青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016)摘要:利用MRS培养基,对青海部分牧区收集的15份牦牛酸奶,进行了乳杆菌的分离,对分离得到的9株疑似乳杆菌,对其中的3株进行生物学鉴定。

结果:分离株均为兼性厌氧菌,在MRS培养基上,菌落较大、透明、灰白色,镜检为杆状细菌,革兰氏染色阳性,过氧化氢酶试验为阴性,乳糖发酵阳性,牛乳发酵试验阳性,符合乳杆菌的特性。

关键词:牦牛;酸奶;乳杆菌中图分类号:S852.61+2文献标识码:B文章编号:1003-7950(2007)03-0018-02 Isolation and Identification of Lactobacillus in Yak Yoghourt in Part pasture of Qinghai ProvinclHU Yong et al(Qinghai Acade my of Animal and Veterinary Sciences,Xining810016)Abstract:9Strains of suspec t Lactobacillas were isolated from15samples of yak yoghourt that were collected in the part pasture of Qinghai province with MRS culture medium,and3strains of them were identified with biochemistry test.The results showed that the suspect Lactobacillus isolated were facultative anaerobes,and the colonies of them in MRS culture mdeium were hyaline,bigger and gray-white colour,These suspect Lactobacillus were rod shape under microscopy.and gram-positive.The catalase test was negative reac tion and lactose fermented test and milk fermented test were positive reaction.These results indicated that3strains of isolafes were identified as Lactobacillus.Key words:Yak;Yoghourt;Lactobacillus青海省现有牦牛380万头,占全国总数的37.8%。

一株牦牛源产细菌素植物乳杆菌的分离鉴定及其基因组和胞外蛋白组研究

一株牦牛源产细菌素植物乳杆菌的分离鉴定及其基因组和胞外蛋白组研究乳酸菌分泌的细菌素因其安全、无毒且有较强的抑菌活性,能被机体降解,不产生耐药性等优点,被普遍认为是抗生素的有效替代物。

牦牛是青藏高原的特有畜种,是当地牧民赖以生存的重要物资,但还未见到对牦牛胃肠道产细菌素乳酸菌分离鉴定的相关报道。

本实验的目的是对牦牛肠道产细菌素乳酸菌进行分离鉴定,研究其生物学特性并从分子水平上诠释其益生特性,为进一步开发牦牛专用的微生态制剂奠定基础,取得如下成果:1一株牦牛源产细菌素植物乳杆菌的分离鉴定用含有0.5%碳酸钙MRS固体培养基从19份牦牛粪便样本中分离出91株乳酸菌,采用牛津杯法筛选产细菌素乳酸菌,并利用16S rRNA鉴定。

结果表明:在排除有机酸、过氧化氢等干扰因素后,从分离纯化到的91株乳酸菌中筛选到9株对大肠杆菌ATCC25922和金葡球菌ATCC25923仍有明显抑制作用的菌株,并且对蛋白酶敏感,初步认定为产细菌素乳酸菌;经16S rRNA鉴定为4株海氏肠球菌、3株屎肠球菌、1株蒙氏肠球菌、1株植物乳杆菌。

鉴于植物乳杆菌抑菌效果最好并且是《饲料添加剂品种目录》和《食品添加剂品种目录》中允许使用的菌种,所以选其为研究对象,命名为植物乳杆菌SWUN5815。

进一步的研究表明:该菌株对临床分离的牦牛腹泻病原菌具有很强的广谱抑菌活性;此菌株在pH=2时存活率为58.2%,pH=3时存活率为86.9%,胆盐浓度0.3%时存活率为66.8%,具有良好的耐酸耐胆盐能力;对Caco-2细胞粘附率为42%;对常用的抗生素敏感,不具耐药性。

因此,该菌株是一株有潜力的候选益生菌株。

2植物乳杆菌SWUN5815株对小鼠增重和肠黏膜免疫的作用40只18 g左右的雌性昆明小鼠分成4组,每组10只。

1-3组为实验组,每日分别灌服5×106 CFU、5×107 CFU、5×108 CFU的植物乳杆菌SWUN5815,连续灌胃21 d;4组为对照组,灌服相同体积的MRS肉汤作对照。

产细菌素屎肠球菌的筛选鉴定及其抑菌特性

产细菌素屎肠球菌的筛选鉴定及其抑菌特性张明，罗强，魏婕，刘巧，罗璠*（西南民族大学生命科学与技术学院，青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室，四川成都610041）摘要：从采自四川红原的传统发酵酸乳中分离得到308 株疑似乳酸菌，通过96 孔板法初筛和平板打孔法复筛，筛选出1 株具有明显抑菌作用的菌株SC-Y112。

通过形态学观察、16S rDNA序列同源性分析和ropA管家基因序列同源性分析结合生理生化实验，鉴定该菌株为屎肠球菌（Enterococcus faecium）。

通过排酸及排除H2O2影响后，该菌株的发酵上清液仍具有明显抑菌活性，经蛋白酶处理后，抑菌效果明显消失或下降，说明发酵上清液中的抑菌成分具有蛋白质性质。

进一步探究该菌株所产细菌素的生物学特性、遗传稳定性及抑菌特性表明，该细菌素在菌株接种后6 h产生，12 h达到最高；菌株在连续传代86 代内，产细菌素能力较为稳定；细菌素在 pH 3.0～7.0的条件下稳定，在100 ℃处理30 min后仍具有抑菌活性；SC-Y112所产细菌素具有广谱抗菌性，对单核细胞性李斯特菌有明显的抑菌活性。

关键词：发酵酸乳；屎肠球菌；细菌素；抑菌Screening for and Identification for Bacteriocin-producing Enterococcus faecium and Its Antibacterial PropertiesZHANG Ming, LUO Qiang, WEI Jie, LIU Qiao, LUO Fan*(Key Laboratory of Qinghai-Tibet Plateau Animal Genetic Resource Reservation and Exploitation, Ministry of Education, College of Life Science and Technology, Southwest Minzu University, Chengdu610041, China)Abstract: A total of308 strains suspected of being Lactobacillus were isolated from traditional fermented yoghurt collected from Hongyuan, Sichuan province, and were screened by 96-well plate method and agar well diffusion method. Among these strains, SC-Y112 was selected for its obvious antibacterial effect. It was identified as Enterococcus faecium by morphological observation, 16S rDNA and ropA housekeeping gene sequencing analysis, and physiological and biochemical tests. After removing the influence of organic acid and hydrogen peroxide, the fermentation supernatant of the strain still had considerable antibacterial activity. The antibacterial effect decreased and even disappeared after being treated with protease, which indicated that the antibacterial components in the fermentation supernatant were proteins. Further, the biological characteristics, genetic stability and bacteriostatic characteristics of the bacteriocin produced by the strain were investigated, which showed that the bacteriocin was produced at 6 h and reached the maximum at 12 h after inoculation; the bacteriocin production ability was relatively stable within 86 consecutive generations; the bacteriocin was stable under the condition of pH 3.0-7.0 and heat-treatment at 100 ℃ for 30 min. The bacteriocin had a wide antibacterial spectrum, especially against Listeria monocytogenes.Keywords: fermented yogurt; Enterococcus faecium; bacteriocin; inhibitionDOI:10.7506/spkx1002-6630-20191213-147中图分类号：Q93.3 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2021）06-0171-07引文格式：张明, 罗强, 魏婕, 等. 产细菌素屎肠球菌的筛选鉴定及其抑菌特性[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 171-177. DOI:10.7506/ spkx1002-6630-20191213-147. ZHANG Ming, LUO Qiang, WEI Jie, et al. Screening for and identification for bacteriocin-producing Enterococcus faecium and its antibacterial properties[J]. Food Science, 2021, 42(6): 171-177. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-20191213-147. 收稿日期：2019-12-13基金项目：西南民族大学研究生“创新型科研项目”（CX2017SZ046）第一作者简介：张明（1993—）（ORCID: 0000-0003-4252-5342），男，硕士研究生，研究方向为饲料微生物。

青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究

722019/10中国食品工业张娟李文苑高利娥马莹丁梓桐李福厚郭旭生兰州大学生命科学学院益生菌与生物饲料研究中心，甘肃省，兰州市，730000Zhang Juan Li Wenyuan Gao Lie Ma Ying Ding Zitong Li Fuhou Guo Xusheng(Probiotics and Biological Feed Research Center, College of Life Sciences, Lanzhou University, Lanzhou, Gansu Province, China, Postal code: 730000)基金：兰州市人才创新创业项目（2016-RC-55）中图分类号：Q93青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究摘要：目的：本研究旨在从天祝、那曲、若尔盖、玉树、红原和玛曲采集的202份牦牛酸奶样品中，筛选出具有高降胆固醇特性的优良菌株。

方法：选择MRS、M17和SL 培养基（MRS 培养基是培养乳酸菌的基础培养基，M17培养基和SL 培养基均为分离乳酸菌的培养基，其中SL 培养基为分离嗜酸性乳酸菌的培养基）进行分离纯化，过氧化氢筛选阴性菌。

根据邻苯二甲醛法测定胆固醇，筛选具有降解脂溶性胆固醇能力的菌株，水溶性胆固醇法复筛验证菌株降解能力，16S rDNA 分子生物学法鉴定其种属。

结果：分离纯化后总计720株乳酸菌，所有菌株经初筛都具有一定的胆固醇降解能力，其中降解率在68%以上的菌株，共有52株，菌株BX39的胆固醇降解率高达90.05%；复筛发现菌株BT18胆固醇降解率高达96.26%；16S rDNA 分子生物学法分析比对后发现，72株乳酸菌中有64株罗伊氏乳杆菌、4株乳酸片球菌、3株瑞士乳杆菌和1株植物乳杆菌。

结论：罗伊氏乳杆菌BT18具有高降胆固醇特性，可作为后备菌株进一步的研究和利用。

关键词：青藏高原，牦牛酸奶，益生菌，胆固醇，邻苯二甲醛法Abstract: Objective: In this study, 202 yak yoghurt samples collected from Tianzhu, Naqu, Zoige, Yushu, Hongyuan and Maqu were screened for excellent strains with high cholesterol-lowering properties. Methods: MRS, M17 and SL medium were selected (MRS medium is the basic medium for culturing lactic acid bacteria, M17 medium and SL medium are the medium for separating lactic acid bacteria, and SL medium is the medium for separating eosinophilic lactic acid bacteria) The separation and purification are carried out, and the catalase test is a negative bacterium. According to the phthalic acid method, the cholesterol is determined, the strain with the ability to degrade cholesterol is screened , and the 16S rDNA molecular biology method is used to identify the species. Results: After isolation and purification, a total of 720 strains of lactic acid bacteria were screened. All strains had certain cholesterol degradation ability. There were 52 strains with statistical degradation rate above 68%, and the cholesterol degradation rate of one strain of BX39 was as high as 90.05%. After repeated screening, the cholesterol degradation rate of strain BT18 was as high as 96.26%. After 16S rDNA molecular biology analysis, 72 strains of lactic acid bacteria were found, including 64 strains of Lactobacillus reuteri, 4 strains of Pediococcus acidilactici, 3 strains of Lactobacillus helveticus and 1 strain of Lactobacillus plantarum. Conclusion: Lactobacillus reuteri BT18 has high cholesterol-lowering properties for further research and development.Key words: Qinghai-Tibet Plateau, yak yoghurt, probiotics, cholesterol, phthalaldehyde method, CLC number: Q93Screening of the ability of lactic acid bacteria to lower cholesterol in yak yoghurt on Qinghai-Tibet Plateau前言现代生活中不健康的生活习惯和高糖高脂饮食摄入，会导致人体血清中胆固醇含量过高，从而引发多种疾病，例如心血管疾病，癌症和非酒精性脂肪肝等[1-3]，这些疾病威胁着人类的健康与生命。

甘南传统牦牛酸奶来源抗氧化性乳酸发酵菌株的筛选

珠)，振荡摇匀后进行10 - 度稀释，涂布于MRS
(含有质量分数为0.5%CaCO3)固体培养基中，于37
°C下培养24 ho挑选岀不同形状并具有溶钙圈的菌
落
BCP培养基中，挑选 BCP培养基由紫
变黄的菌落，于MRS培养基菌落。
划线分离纯化为
1.3.4 乳酸菌革兰氏染色、过氧化氢酶试验和产乳酸定性试验［14］
食品与发酵工业 FOOD AND FERMENTATIUN IUDUSTRUS DOUl。. 13995/j. coka 11 -102/w. 020373
甘南传统耗牛酸奶来源抗氧化性乳酸发酵菌株的筛选
张俊1王炳文2,赵保堂1何兴芬1王娇1杨富民“
1（甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州，730070） 2（甘肃农业职业技术学院，甘肃兰州，730020）
(
)
MRS 液
养基中。试验
中H2O2浓度为1 mmol/L,对照组不进行任何处理。置于37 C恒温振荡摇床中培养24 h后，测量菌液在 600 am下的OD值。以耐受率高于60%为依据，筛
选岀具有高比02耐受性的菌株。 1.3.4 筛选具有优良益生性能与凝乳性能的乳酸菌 1.3.4.1耐酸耐胆盐能力测定
受ROS的影响显得极其重要［7。发酵乳品是我国
农牧区的食物,
发酵食品中分离高发酵
及高抗氧
力的乳酸菌株在国内外已有较多的
研究。DING等⑷从西藏耗牛酸奶中筛选岀的德氏
乳杆菌（LacU）bacUals delbruecUU O F17，具有较强的抗
氧力与耐胆盐能力，整
高食品的抗氧化
能力。SHAKIBAIE等⑼从伊朗传统乳制品中分离
摘要为寻找甘南传统耗牛酸奶中具有优良发酵与抗氧化性能的乳酸菌，对分离纯化的菌株以比0‘耐受力、

高产酸奶发酵菌株的筛选与酶学特性分析

高产酸奶发酵菌株的筛选与酶学特性分析酸奶是一种含有益生菌的发酵乳制品，被广泛应用于保健食品、生物制药、化妆品等领域。

其中，酸奶的味道和品质与发酵菌株的选择密切相关。

因此，如何筛选到高产酸奶发酵菌株，是酸奶工业生产中最为关键的问题。

一、菌种的筛选方法1、纯培养法纯培养法是指将不同来源的菌株分别接种于含有适量营养物质的琼脂培养基上，并重复传代培养得到纯化单株细胞。

然后，在含有适宜培养条件的培养基上进行发酵实验，通过乳酸生成量、发酵时间等参数的比较，筛选到高产酸奶发酵菌株。

2、直接筛选法直接筛选法是指将不同来源的菌株直接接种入含有牛奶或积雪草奶等基质中，进行发酵实验。

通过乳品中酸度变化、乳化稳定性、物理和感官指标等参数的比较，筛选到高产酸奶发酵菌株。

二、酶学特性的分析方法1、分离和纯化酶将高产菌株分别接种于含有适宜营养物质的培养基中进行发酵。

取出发酵液，离心去除细胞，得到菌体上清液，对其进行纯化处理。

然后，分别对纯化后的酶活进行测定，得到酶的酶学特性。

2、酶的测定常用的测定方法有：（1） pH敏感染料法：将不同 pH值的染料加入酶反应液中，测定反应液的吸光度变化情况，得出最佳pH值。

（2）温度敏感染料法：将酶反应液加入含有不同温度染料的反应体系中，测定吸光度变化情况，得出最佳温度范围。

（3）酸碱滴定法：加入适量酸或碱溶液至反应液中，测定 pH值和滴定量，计算出酶反应液的活性值。

三、应用前景高产酸奶发酵菌株的筛选和酶学特性分析，不仅可以推动酸奶生产技术的发展，提高酸奶质量和产量，对乳品工业和保健食品业也有着重要意义。

此外，该技术还可以为新型酸乳品产品的开发提供技术支持和指导。

毕业论文开题报告示范萨能奶山羊羊奶中乳酸菌的分离、鉴定及益生作用的研究

[3]王炜宏,杜晓华.内蒙古鄂尔多斯地区酸粥发酵液中乳酸菌的分离鉴定[J],食品与生物技术学报,2010,29(2):265～270.
[4]鲁妮.川西牧区自然发酵酸乳中几株优良乳酸菌的分离及鉴定[J],四川农业大学学报,23(1):43～47.
[5]武运，黄彭.新疆哈萨克族发酵酸驼乳中乳酸菌的分子生物学鉴定[J],食品科学，2011, 32(1):173～176.
↓
体外耐酸、耐Hale Waihona Puke 盐等益生特性研究3、论文框架
1、引言
2、材料与方法
3、结果与分析
4、讨论
5、结论
4、预期结果
通过羊奶中乳酸菌的分离、鉴定，获得最适萨能奶山羊羊奶发酵的且具有潜在益生作用的菌种。
三、研究进度
第五周查阅文献资料，完成开题报告
第六周进一步查阅文献资料，撰写论文提纲
第七～八周萨能奶山羊羊奶中乳酸菌的分离、纯化
司克辉以甘肃省肃南牧区传统发酵牦牛乳为研究对象运用到了改良的mrselliker培养基分离培养乳酸菌分离效果有明显提升在鉴定环节国内比较常见的方法是16srdna序列同源性分析鉴定而采用常规的16srdna序列同源性分析不能将相近的植物乳杆菌群和干酪乳杆菌群分别鉴定到种及亚种的水平于洁等人在鉴定西藏地区乳制品中的乳杆菌的研究中使用了16srdnarflp技术即将16srdnapcr技术和rflp技术相结合提出了一种更加快速准确的鉴定乳杆菌的方法910也有的采用传统方法将分离得到的乳酸菌菌株通过在牛乳中的转接试验滴定酸度酸生成能力的大小冷藏过程中活菌数的变化产乙醛和双乙酰能力的测定及感官综合评价等发酵性能试验探究乳酸菌的发酵特性及潜在的益生作用1113尽管国内在奶制品的乳酸菌分离鉴定领域有着不错的成绩但是学者们的研究多以地域性为主使用范围不广泛而且研究对象多以牛乳为主羊奶领域研究深度不够况且没有一套适宜萨能奶山羊羊奶中乳酸菌分离鉴定的最适方法最适萨能奶山羊羊奶发酵且具有益生作用的菌种尚不明确

一种益生性牦牛源乳酸菌的分离、鉴定及初步筛选的方法[发明专利]

专利名称：一种益生性牦牛源乳酸菌的分离、鉴定及初步筛选的方法
专利类型：发明专利
发明人：吴庆侠,董海龙,朱洪云,刘忠艳
申请号：CN201710852452.6
申请日：20170919
公开号：CN108441434A
公开日：
20180824
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于生物技术领域且公开了一种益生性牦牛源乳酸菌的分离、鉴定及初步筛选的方法，分离步骤为：取粪便样品中间部分约1g加入到装有已灭菌冷藏的蛋白胨缓冲液中，无菌条件下吸取1mL粪便上清液接种到装有MRS液体培养基中，37℃需氧及厌氧培养各24h，取200μl菌悬液进行MRS平板涂布，需氧及厌氧培养各24h，选取可疑单个菌落接种至相应平板培养基，划线培养后37℃需氧及厌氧培养各24h，再次选取单个菌落接种至相应平板培养基37℃需氧及厌氧培养，如此纯化2次后，选取单个菌落接种至相应斜面培养基，37℃需氧及厌氧培养各24h，4℃冰箱保存备用。

本发明起到保护肠黏膜的作用，从而减轻肠上皮的炎症和腹泻。

申请人：西藏农牧学院
地址：西藏自治区林芝地区巴宜区育才西路100号
国籍：CN
代理机构：北京中索知识产权代理有限公司
代理人：宋涛
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牦牛乳酸菌的分离与鉴定研究

牦牛乳酸菌的分离与鉴定研究牦牛乳酸菌是一类生长在牦牛乳制品中的微生物，它们能够发酵乳制品并产生乳酸。

对于牦牛乳酸菌的分离与鉴定研究，是为了探索其在乳制品加工过程中的作用、发酵特性、功能以及潜在的应用价值。

本文将从牦牛乳酸菌的分离、鉴定方法和研究进展方面进行探讨。

一、牦牛乳酸菌的分离牦牛乳酸菌的分离是研究的第一步，通过分离可以获取到原始的菌株，为后续的鉴定和研究提供基础。

常用的分离方法包括表面划线法、稀释法和厌氧法等。

具体操作步骤如下：1. 表面划线法：将牦牛乳制品样品均匀涂布在适宜的固体培养基上，使用无菌的匀涂棒划线，然后在适当的温度下进行培养。

待菌落出现后，用无菌环针进行遴选，然后重新培养以确保单菌落数量。

2. 稀释法：将牦牛乳样品适当稀释，然后将稀释液均匀涂布在固体培养基上，培养后进行挑选和筛选。

3. 厌氧法：对于一些需要在厌氧条件下生长的乳酸菌，可以采用厌氧培养法进行分离。

将样品接种到含有适宜酸碱指示剂的厌氧培养基中，通过颜色变化来判断是否有乳酸菌生长。

二、牦牛乳酸菌的鉴定鉴定牦牛乳酸菌的目的是确定其分类地位和种属。

鉴定可以使用多种方法，包括形态学观察、生理生化特性分析和分子生物学方法。

具体措施如下：1. 形态学观察：观察牦牛乳酸菌的形态特征，包括菌落形态、菌体形态、气泡形成和芽孢形成等。

2. 生理生化特性分析：通过检测牦牛乳酸菌的生理生化特性，如产酸能力、气体产生、温度和pH值耐受性等。

常用的方法包括酶活性测定、糖利用能力测试和抗生素敏感性试验等。

3. 分子生物学方法：利用分子生物学方法可以更准确地鉴定牦牛乳酸菌的分类地位和种属信息。

例如，可以使用16S rRNA基因序列分析、PCR扩增和限制酶切以及序列分析等。

三、牦牛乳酸菌的研究进展近年来，对牦牛乳酸菌的研究取得了一些重要进展。

以下是几个研究方向的简要介绍：1. 发酵特性：研究人员对牦牛乳酸菌的发酵特性进行了深入研究，包括产乳酸速率、产物种类和酸度调节等方面。

甘南传统牦牛酸奶中抗氧化菌株分离、诱变及筛选

甘南传统牦牛酸奶中抗氧化菌株分离、诱变及筛选甘南传统牦牛酸奶中抗氧化菌株分离、诱变及筛选一、引言牦牛酸奶作为中国甘南地区的传统食品，拥有悠久的历史和深厚的文化底蕴。

牦牛酸奶不仅具有丰富的营养成分，还含有丰富的活性物质，具有抗氧化、抗菌和免疫调节等多种功能，对人体健康具有重要意义。

本研究旨在从甘南传统牦牛酸奶中分离出具有抗氧化活性的菌株，通过诱变技术增强其抗氧化能力，最终筛选出具有潜在应用价值的菌株。

二、材料与方法1. 样品收集与制备：收集甘南地区传统牦牛酸奶样品；将样品加入无菌生理盐水中，制备10%的悬浮液。

2. 菌种分离：取适量悬浮液进行稀释，采用涂布法将悬液均匀涂布在发酵培养基上，经过适当培养条件筛选出单菌落，重复传代得到单株菌株。

3. 初步筛选：通过酸化能力、产氨能力等指标初步筛选菌株，筛选出具有潜在应用价值的菌株。

4. 高透性筛选：通过测定菌株的超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性来评估其抗氧化能力，筛选出抗氧化活性较高的菌株。

5. 菌株诱变：选取表现出较高抗氧化活性的菌株进行诱变，采用紫外线照射和化学诱变剂处理等方法进行诱变处理，诱变后进行菌株筛选。

6. 抗氧化活性测定：测定菌株的SOD、CAT和抗氧化能力等指标，评估诱变后菌株的抗氧化能力。

7. 稳定性测定：测定诱变菌株在不同pH值和温度条件下的抗氧化能力稳定性。

8. 分子生物学鉴定：采用16S rRNA序列分析法对具有较高抗氧化活性的菌株进行分子生物学鉴定。

三、结果与讨论本次研究共从甘南传统牦牛酸奶中成功分离出30株单菌落，经过初步筛选得到10株具有潜在应用价值的菌株。

进一步通过测定菌株的SOD和CAT活性，筛选出3株抗氧化活性较高的菌株。

诱变处理后，抗氧化能力进一步增强，其中诱变株C3-5表现出最高的抗氧化活性。

该菌株在pH 6.5和温度40℃条件下表现出较好的抗氧化能力稳定性。

结论本研究成功分离出甘南传统牦牛酸奶中具有潜在应用价值的菌株，并通过诱变技术增强了菌株的抗氧化能力。

发酵食品中活性酸奶菌的筛选与鉴定

发酵食品中活性酸奶菌的筛选与鉴定酸奶作为一种富含营养的食品，在人们的日常生活中得到了广泛的应用。

在酸奶中，活性酸奶菌起着至关重要的作用，为酸奶赋予了其特有的质地和滋味。

因此，筛选和鉴定活性酸奶菌是保证酸奶品质的关键。

本文将探讨发酵食品中活性酸奶菌的筛选与鉴定方法，帮助读者更好地了解这一过程。

一、筛选活性酸奶菌的方法筛选活性酸奶菌的方法多种多样，常见的包括传统的菌落学方法和现代的分子生物学方法。

在传统菌落学方法中，我们可以通过对菌种的形态、生理生化特性以及其在酸奶中的发酵能力进行观察和比较，从而初步筛选出具有良好发酵性能的活性酸奶菌。

这种方法的优势在于简单易行，但也存在一些缺陷，例如耗时、耗力、缺乏准确性等。

而现代的分子生物学方法则提供了更加准确和高效的筛选手段。

其中最常用的方法是PCR技术。

通过采集酸奶中的菌落和培养物，提取其基因组DNA并进行PCR扩增，我们可以获得菌株的分子特征信息，如16S rRNA基因序列。

通过与已知酸奶菌株的序列比对，我们可以确定该菌株是否属于活性酸奶菌，并进一步进行鉴定和分类。

二、鉴定活性酸奶菌的方法在筛选出具有活性酸奶菌特性的菌株后，还需要对其进行鉴定和分类，以确保其品质和安全性。

常见的鉴定方法包括菌落特征观察、生理生化特性测定、16S rRNA基因序列分析等。

菌落特征观察是一种直观且常用的鉴定方法。

我们可以通过对菌株的形态、颜色、大小、质地等进行观察和比较，判断其是否符合活性酸奶菌的特征。

此外，菌落的发酵产物如溶血环、阳性和阴性酵母等也可用于鉴定。

生理生化特性测定则是通过检测菌株在不同条件下的生长性能和代谢产物，进一步确定其微生物特性。

例如，菌株的最适生长温度、pH值、氧气需求等重要信息可以通过生物化学试剂和仪器来获得。

这些特征的差异可以辅助我们鉴定不同的活性酸奶菌。

此外，通过16S rRNA基因序列分析也是一种常用的鉴定方法。

通过PCR扩增和测序菌株的16S rRNA基因序列，我们可以将其与已知酸奶菌的序列进行比对，并构建系统发生树，从而确立菌株的分类和亲缘关系。

天祝牧区牦牛乳酸奶中优良乳酸菌的分离及筛选

天祝牧区牦牛乳酸奶中优良乳酸菌的分离及筛选李晓鹏;张卫兵;孙国政;李静;甘伯中【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2010(031)005【摘要】从天祝牧区采集的22份牦牛乳酸奶样品中分离得到96株乳酸菌.通过初筛:包括遗传稳定性、凝乳时间、滴定酸度、保水率指标的测定及感官评价,得到12株凝乳时间短、遗传性状稳定的乳酸菌.通过复筛:包括酸化能力、后酸化能力、产乙醛和双乙酰能力、蛋白质分解能力、冷藏期间活菌数、耐受不良环境能力的测定,最终筛选出性能优良的4株杆菌和2株球菌.【总页数】6页(P184-189)【作者】李晓鹏;张卫兵;孙国政;李静;甘伯中【作者单位】甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃农业大学研究测试中心,甘肃省干酪素工程技术研究中心,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃农业大学研究测试中心,甘肃省干酪素工程技术研究中心,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃农业大学研究测试中心,甘肃省干酪素工程技术研究中心,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃农业大学研究测试中心,甘肃省干酪素工程技术研究中心,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃农业大学研究测试中心,甘肃省干酪素工程技术研究中心,甘肃兰州,730070【正文语种】中文【中图分类】Q93.335【相关文献】1.甘肃省肃南牧区传统发酵牦牛乳优良乳酸菌株的筛选 [J], 司克辉;张丽;张敏2.甘南牧区犏牛酸奶中优良乳酸菌的分离与鉴定 [J], 马宇潇;李伟;陈晓红;姜梅;芮昕;董明盛3.西藏牧区自然发酵牦牛酸奶的乳酸菌菌种筛选及工艺优化 [J], 廖钰婷;吴均;龙谋;杜木英;阚建全4.西藏、川西青藏高原牧区自然发酵牦牛酸奶中优良乳酸菌的筛选及鉴定 [J], 吴均;赵晓娟;陈佳昕;杜木英;阚建全5.传统藏式牦牛酸奶中优良乳酸菌筛选与产香性能分析 [J], 梁明明;任大喜;曹菲薇;杨欢东;于靓;郑志瑶;梁竟一;王伟军;陈波;刘建新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

西藏牦牛发酵乳中乳酸菌及酵母菌的特性与相互作用

西藏牦牛发酵乳中乳酸菌及酵母菌的特性与相互作用
庞晓娜;韩北忠;陈晶瑜;杨葆华;金玲
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2007(000)011
【摘要】研究了西藏牦牛发酵乳中的优势菌株:发酵乳杆菌166A、乳酒假丝酵母37、酿酒酵母100、郎比克假丝酵母58在牛乳中的生长特性.探讨了发酵乳杆菌与酵母菌间的相互作用,在发酵过程中3株酵母菌均对发酵乳杆菌166A的生长有促进作用,发酵乳杆菌166A能抑制乳酒假丝酵母37的生长.酵母菌与发酵乳杆菌166A共同接种有利于保持产品冷藏期间活菌数的稳定,菌株之间可能存在共生作用.【总页数】4页(P23-26)
【作者】庞晓娜;韩北忠;陈晶瑜;杨葆华;金玲
【作者单位】中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083;中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083;中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083;中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083;中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3;TS252.54
【相关文献】
1.发酵乳制品中乳酸菌与酵母菌相互作用研究进展 [J], 马万平;郝亚琴;李福美;张丽波
2.发酵乳制品中乳酸菌与酵母菌相互作用研究进展 [J], 马万平;郝亚琴;李福美;张丽波;
3.发酵酸菜来源乳酸菌的益生特性及其在发酵乳中的应用 [J], 赵圣明;赵岩岩;马汉军;潘润淑
4.乳酸菌在豆乳中的生长特性及其与酵母菌联合发酵作用 [J], 王龄焓; 陈辰; 万洋灵; 郭顺堂
5.自然发酵牛乳中乳酸菌和酵母菌的活菌动态变化 [J], 徐伟良;李春冬;雅梅;郭梁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

传统发酵牦牛酸乳中细菌素产生菌的筛选与鉴定

传统发酵牦牛酸乳中细菌素产生菌的筛选与鉴定张梅梅;索化夷;赵欣;骞宇;李键;丁阳平;张玉【摘要】从西藏羊八井地区、云南香格里拉的传统牦牛酸乳中分离出26株乳酸菌,以枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及酿酒酵母为指示菌.采用牛津杯双层琼脂扩散法检测菌株的抑菌谱大小,并经过有机酸排除、过氧化氢排除、蛋白酶水解检测试验,最终筛选得到5株产细菌素的菌株,编号分别为3、23、24、21和25.通过微生物形态学与16S rDNA序列同源性分析,鉴定这些菌株分别为干酪乳杆菌、植物乳杆菌和乳酸乳球菌乳球亚种.抑菌谱试验表明,这些细菌素能够抑制部分食源性革兰氏阳性菌和阴性致病菌,对真菌无抑菌活性.%The 26 strains isolated from traditional fermented yak milk in Yangbajin-Tibet and Yunnan-Shangrila area.In this study,the inhibitory spectrum of the selected strain was determined by Oxford cup double agar diffusion method Bacillus subtilis,Escherichia coli,Staphylococcus aureus and Yeast was taken as the indicator,to screen out lactic acid bacteria with high antibacterial activity from various stains.At the same time,according to the exclusion of organic acids,hydrogen peroxide and proteolysis detection,speculated that the inhibitory effect of lactic acid bacteria may come from lactobacillin.The results showed that 3,21,23,24,25 strains have higher antibacterial activity.And 5 strains were identified by 16S rDNA sequence analysis.The 3,23 and 24 as Lactobacillus casei,21 as Lactobacillus plantarum,25 as Lactococcus lactis ctis.Antibacterial spectrum test showed that lactobacillin could effectively inhibit some food-borne gram positive andnegative bacteria.All isolated strains had no antimicrobial activity against fungi.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2017(033)003【总页数】6页(P21-26)【关键词】牦牛酸乳;乳酸菌;细菌素;筛选;鉴定【作者】张梅梅;索化夷;赵欣;骞宇;李键;丁阳平;张玉【作者单位】西南大学食品科学学院,重庆400715;西南大学重庆市特色食品工程技术研究中心,重庆400715;重庆第二师范学院重庆市功能性食品协同创新中心,重庆400067;西南大学食品科学学院,重庆400715;西南大学重庆市特色食品工程技术研究中心,重庆400715;重庆第二师范学院重庆市功能性食品协同创新中心,重庆400067;重庆第二师范学院重庆市功能性食品协同创新中心,重庆400067;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南大学食品科学学院,重庆400715;西南大学食品科学学院,重庆400715【正文语种】中文牦牛是极端高原环境下的代表性家畜，在中国主要分布于青藏高原地区，是牧民主要的生产生活资料[1]。

牦牛源产细菌素的乳酸菌的筛选鉴定

牦牛源产细菌素的乳酸菌的筛选鉴定周晏阳;孔雪英;吴梅;罗雪;汤承【摘要】为筛选优良的产细菌素乳酸菌,用含0.5％碳酸钙的MRS固体培养基从19份牦牛粪便样本中分离出91株乳酸菌,进一步采用牛津杯法筛选产细菌素的乳酸菌,并结合16S rRNA序列扩增测序鉴定该批乳酸菌.结果表明:在排除有机酸、过氧化氢等抑菌因素后,从91株乳酸菌中筛选到9株对大肠杆菌ATCC25922和金葡球菌ATCC25923有明显抑制作用的乳酸菌菌株,该9株菌株对蛋白酶敏感,初步认定为产细菌素乳酸菌;经16S rRNA序列扩增测序鉴定该9株菌分别为海氏肠球菌,屎肠球菌,蒙氏肠球菌株和植物乳杆菌,其对常见抗生素不耐药,可作为益生菌的候选菌株.【期刊名称】《西南民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(043)004【总页数】7页(P331-337)【关键词】牦牛;细菌素;乳酸菌【作者】周晏阳;孔雪英;吴梅;罗雪;汤承【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】S852.6乳酸菌是一种被普遍认为安全的微生物，其代谢过程中会分泌很多代谢产物，如有机酸、过氧化氢和细菌素等[1].其中细菌素是由细菌核糖体合成的抗微生物肽，既可以抑制食品中腐败微生物和致病微生物的生长，又可以被人体内蛋白酶降解而不具有耐药性，因而在开发食品天然防腐剂和抗生素替代品领域有广阔的应用前景[2-3].牦牛是青藏高原地区特有畜种，是牧民赖以生存的生产资料和生活物资，其对空气稀薄、高寒、牧草生长期短的高原恶劣生态环境具有良好的适应能力[4-5]，牦牛源产细菌素乳酸菌不仅对高原环境以及牦牛肠道环境有更强的适应力，抑制牦牛肠道病原菌，从而减轻牦牛腹泻问题，还可以促进牦牛生长发育，调节机体免疫，促进肠道发育和局部抵抗力，在食品安全方面也具有十分重要的意义[6].目前，关于牦牛源产细菌素乳酸菌的筛选鉴定鲜有报道.鉴于此，本研究从牦牛粪便样品中分离鉴定和筛选产细菌素乳酸菌的分离、筛选、鉴定，为开发牦牛益生菌提供试验依据.1.1 菌株与试剂川西北牦牛粪便采集于川西北高原.指示菌株金葡球菌(ATCC25923)和大肠杆菌(ATCC25922)均由西南民族大学动物医学实验室鉴定保存.MRS固体培养基、MRS肉汤培养基、药敏片、MH培养基，购自杭州微生物试剂有限公司；蛋白酶K、过氧化氢酶，购自Solarbio公司；PCR反应各类试剂、DL 2000 DNA Marker、DNA Marker 1，购自大连宝生物公司.1.2 乳酸菌的分离纯化称取2 g新鲜牦牛粪便样品于20 mL无菌水中，震荡混匀后以10倍系列稀释，分别取不同稀释度样品在无菌条件下接种于0.5%碳酸钙MRS固体培养基[7]，37℃恒温培养箱静置培养48 h，挑取具有溶钙圈的单个菌落进行革兰氏染色，显微镜观察为革兰氏阳性菌株后的接种于MRS固体培养基纯化，37℃恒温培养箱静置培养24 h，筛选出的菌株编号后保存备用.1.3 筛选产细菌素乳酸菌的鉴定1.3.1 无细胞发酵上清液的制备挑取单菌落接种到MRS肉汤培养基，37℃恒温箱静置培养24 h，后10000×g，4℃离心15 min取得上清液.上清液用0.22 μm滤膜过滤，除去菌体及其他的杂质[8].1.3.2 筛选将发酵上清液使加入牛津杯中测定其抑菌活性.指示菌分别为大肠杆菌ATCC25922和金葡球菌ATCC25923.检测平板选用营养琼脂培养基，每个平板固定为15 mL.用移液枪吸取0.3 mL指示菌菌悬液至检测平板上，用无菌玻棒均匀涂布，并用眼科镊将无菌牛津杯置于平皿中，在水平置于无菌操作台中的培养皿中均匀放置3只牛津杯，4℃冰箱静止8 h待上清液扩散完全，放入37℃恒温箱培养12 h后观察结果.1.3.3 有机酸和过氧化氢排除试验乳酸菌在发酵过程中会分泌一些酸类物质，为移除酸性物质的干扰，将上清液pH 用氢氧化钠溶液从4.0均调至6.0，同时加入过氧化氢酶处理，并且用相同pH的MRS肉汤培养基作为空白对照[9].1.3.4 蛋白酶消化乳酸菌发酵上清液试验把蛋白酶K溶解在双蒸水中配成2 mg/mL的母液.按体积比1:1的比例加入发酵上清液，在蛋白酶最适温度用水浴锅孵育1 h后，检测抑菌活性[10].1.3.5 产细菌素菌株的分子鉴定提取产细菌素菌株基因组DNA作为模板[11]，采用细菌16S通用引物扩增16S rRNA序列并测序鉴定.1.4 产细菌素乳酸菌系统发育分析将筛选的产细菌素乳酸菌双向测序后拼接并去除多余的序列得到的16s rRNA编码区核苷酸序列片段，使用MEGA 5.0截去多余片段，Bootstrap Replications设定为1000，建立乳酸菌同种间系统发育进化树；同时对与16s rRNA序列同源性高于97%的乳酸菌进行系统进化分析，建立属间进化树，分析牦牛胃肠道乳酸菌的遗传进化关系.1.5 对抗生素的敏感性试验试验菌株的制备，金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和大肠杆菌(ATCC25922)质控菌株种子液以1%接种于3 mL TSB，180 rpm，37℃摇菌6 h.植物乳杆菌种子液以1%接种于4 mL MRS肉汤，37℃静置培养12 h.用无菌棉拭子蘸取已经校正的0.5麦氏比浊浓度的乳酸菌菌液，均匀地涂布整个MH培养基表面.取阿莫西林、氨苄西林、链霉素、氯霉素、利福平、环丙沙星、诺氟沙星、米诺环素、四环素药敏纸片贴于平板表面，每个平板贴4张纸片.每个平板各设三个平行组.用大肠杆菌(ATCC25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923)做质控菌株，37℃培养12 h，用游标卡尺测量抑菌圈直径[12].2.1 乳酸菌的分离本实验共从19份川西北牦牛粪便样品中分离得到91株有明显的溶钙圈且革兰氏染色呈蓝紫色的阳性菌，初步判定为乳酸菌.2.2 产细菌素乳酸菌的筛选利用牛津杯法从91株乳酸菌中筛选出63株乳酸菌对指示菌株有明显的抑制作用.如图2所示，乳酸菌发酵上清液对指示剂有抑制作用，排除了酸和过氧化氢的影响后，抑菌圈减小.排除酸影响的发酵上清液经蛋白酶K处理后，其抑菌活性完全丧失.通过筛选最终只有9株乳酸菌的抗菌物质为蛋白质或肽类.2.3 产细菌素菌株的16S rRNA序列扩增鉴定由图3可知目的片段在1500 bp左右，通过NCBI比对9株乳酸菌，BLAST比对的结果显示为SWUN5816、SWUN5817、SWUN5818、SWUN5819为海氏肠球菌，SWUN5820、SWUN5821、SWUN5822为屎肠球菌，SWUN5823为蒙氏肠球菌，SWUN5815为植物乳杆菌.2.4 产细菌素乳酸菌系统发育分析根据16S rRNA序列测序结果，将它们与GenBank中不同来源的海氏肠球菌、植物乳杆菌、屎肠球菌相同区段基因序列构建系统进化树，由于蒙氏肠球菌分离源较少所以不做进化树.从图4中可以看出11株植物乳杆菌分为两大支，植物乳杆菌SWUN5815与绵羊和山羊的遗传进化关系较近.从图5可以看出，4株海氏肠球菌聚集在一起，与鱼源的关系较近.从图6中可以看出，10株屎肠球菌分为两大支，3株屎肠球菌聚集在一起与鸡源屎肠球菌分布在一个大支上.2.5 产细菌素乳酸菌抗生素敏感试验结果根据美国临床标准委员会(NCCLS)推荐的K-B纸片扩散法检测乳酸菌对多种药物的敏感性.由表1可知:牦牛源植物乳杆菌SWUN5815对常用的9种常用抗生素敏感.本研究从分离自19份牦牛粪便样品的91株乳酸菌中筛选出9株产细菌素乳酸菌，并通过16S rRNA鉴定为1株植物乳杆菌、1株蒙氏肠球菌、3株屎肠球菌、4株海氏肠球菌.乳酸菌代谢过程中会产生很多代谢产物，如二氧化碳、有机酸、双乙酞、过氧化氢及细菌素等，有抑菌能力的主要是酸和细菌素，所以在确定细菌素的抑菌作用之前，必须排除其他代谢产物的干扰[13-14].植物乳杆菌SWUN5815对革兰氏阳性菌和阴性菌均有不同程度的抑制作用.已报道可以同时抑制革兰氏阴性菌与阳性菌的有植物乳杆菌ZJ317、P158d等[15-16].分析植物乳杆菌SWUN5815抑菌的原因，可能是该菌分泌IIa和IIb类细菌素的结果，不同种类的细菌素协同发挥作用，究竟植物乳杆菌SWUN5815产生哪些种类的细菌素，有待进一步研究.细菌素的分泌量与外界环境也有很大的关系，比如菌液培养的时间，同时抑菌实验的时候环境也要求稳定，如平板的厚度以及指示菌的浓度都需要定量. 筛选出的乳酸菌对常见的多种抗生素均表现出敏感性，并且可以有效地抑制病原微生物的生长，显示出了其作为候选益生菌株的潜力.研究报道显示，一些肠球菌属的益生菌株会对某些抗生素具有抗性，这可能与其携带的相关抗性基因有关[17-18]，但这些抗性可能是内源性的或者是天然性的，不一定具有转移性.能分泌细菌素的乳酸菌具有很好的抗微生物活性，可加以应用，但在应用时需综合考虑它们的表型及基因型特征与益生特性的关系[19-20].本研究的结果也为筛选牦牛源益生菌作为牦牛源专用微生态制剂提供参考数据.【相关文献】[1]SABO S D S，VITOLO M，GONZÁLEZ J M D.Overview of Lactobacillus plantarum，as a promising bacteriocin producer among lactic acid bacteria[J]. Food Research International，2014，64:527-536.[2]CLEVELAND J，MONTVILLE T J，NES I F，et al.Bacteriocins:safe，natural antimicrobials for food preservation.[J].International Journal of Food Microbiology，2001，71(1):1.[3]高鹏，韩金志，陆兆新，等.广谱抗菌乳酸菌的分离鉴定及细菌素的提取和纯化[J].食品科学，2016，37(11):160-166.[4]欧江涛，钟金城，白文林，等.中国牦牛的遗传多样性[J].中国牛业科学，2002，28(4):42-46.[5]郭宪，阎萍，曾玉峰，等.中国牦牛遗传资源现状分析[J].中国畜禽种业，2008(1):60-62.[6]TUO Y，ZHANG L，HAN X，et al.In vitro assessment of immunomodulating activity of the two Lactobacillus strains isolated from traditional fermented milk [J].World Journal of Microbiology and Biotechnology，2011，27(3):505-511.[7]徐凤，汤承，张焕容.山羊源乳酸菌的分离鉴定及系统进化分析[J].家畜生态学报，2016，37(4):16-21.[8]CHIU H H，TSAI C C，HSIH H Y，et al.Screening from pickled vegetables the potential probiotic strains of lactic acid bacteria able to inhibit the Salmonella invasion inmice.[J].Journal of Applied Microbiology，2008，104(2):605.[9]周佳，刘书亮，胡欣洁，等.产宽谱pH细菌素乳酸菌的筛选鉴定、毒力检测及细菌素特性研究[J].食品科学，2012，33(11):194-199.[10]陈丽燕，张光祥，黄春萍，等.两株高产纤维素酶细菌的筛选、鉴定及酶学特性[J].生物学通报，2011，38(4):531-538.[11]周晏阳，邱莞思，唐俊妮，等.微波加热快速提取芽孢杆菌与乳酸菌DNA[J].中国畜牧兽医，2016，43(10):2792-2796.[12]朱惠.牦牛源海氏肠球菌Swun3株对小鼠生长性能和肠黏膜免疫的影响[D].成都:西南民族大学，2016.[13]杨晓宇，张七斤，于晨龙，等.不同来源乳酸菌的耐酸耐胆盐试验[J].动物医学进展，2014，35(2):73-77.[14]黎杰，韩磊，殷文政.一株产细菌素乳酸菌的筛选及细菌素特性研究[J].安徽农业科学，2015(22):225-227.[15]王小娜，宋达峰，顾青.产细菌素乳酸菌的鉴定及其特性研究[J].中国食品学报，2011，11(3):181-186.[16]张艾青，刘书亮，敖灵.产广谱细菌素乳酸菌的筛选和鉴定[J].微生物学通报，2007，34(4):753-756.[17]SANTOS K M O D，VIEIRA A D S，SALLES H O，et al.Safety，beneficial and technological properties of Enterococcus faecium isolated from Braziliancheeses[J].Brazilian Journal of Microbiology，2015，46(1):237-249.[18]PIENIZ S，MOURA T M D，CASSENEGO A P V，et al.Evaluation of resistance genes and virulence factors in a food isolated Enterococcus durans，with potential probiotic effect[J].Food Control，2014，51:49-54.[19]BELGUESMIA Y，CHOISET Y，RABESONA H，et al.Antifungal properties of durancins isolated from Enterococcus durans A5-11 and of its synthetic fragments[J].Letters in Applied Microbiology，2013，56(4):237-244.[20]DU L，SOMKUTI G A，JR R J.Molecular analysis of the bacteriocin-encoding plasmid pDGL1 from Enterococcus durans and genetic characterization of the durancin GLlocus.[J].Microbiology，2012，158(Pt 6):1523-1532.。

传统牦牛酸奶中产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定

传统牦牛酸奶中产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定
梁小东;汤承;雷江英;沈凡钰;陈德纯
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2022(41)8
【摘要】采用溶钙圈法对来自青海海南藏族自治区、四川阿坝、甘孜理塘的牦牛酸奶样品的菌株进行分离筛选,采用形态学观察和16S r RNA序列分析进行鉴定;测定筛选菌株上清液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)抑菌活性;考察筛选菌株上清液对蛋白酶的耐受性及对抗生素的敏感性,并确定细菌素种类。

结果表明,共分离筛选出6株菌(编号为A1~A2及
G1~G4),其中菌株A1~A2被鉴定为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),菌株G1~G4被鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium);菌株G3对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌圈直径>20 mm,且对蛋白酶不耐受,表明该菌株产细菌素,对常见抗生素敏感,经细菌素基因鉴定证实,该菌株产肠球菌素A和肠球菌素P。

综上,菌株G3可作为产细菌素益生菌的候选菌株。

【总页数】6页(P77-82)
【作者】梁小东;汤承;雷江英;沈凡钰;陈德纯
【作者单位】西南民族大学畜牧兽医学院;动物医学四川省高校重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3
【相关文献】
1.传统发酵食品中产细菌素乳酸菌的筛选与鉴定
2.牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选
3.西藏、川西青藏高原牧区自然发酵牦牛酸奶中优良乳酸菌的筛选及鉴定
4.内蒙古传统乳制品中产细菌素乳酸菌的筛选及鉴定
5.新疆传统酸奶中产胞外多糖乳酸菌的筛选与鉴定
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甘肃牧区传统发酵牦牛乳中乳酸菌的分离鉴定及优良菌株的筛选

甘肃牧区传统发酵牦牛乳中乳酸菌的分离鉴定及优良菌株的筛选甘肃牧区传统发酵牦牛乳中乳酸菌的分离鉴定及优良菌株的筛选【引言】牦牛乳酸菌是一种特殊的乳酸菌，其存在于高原地区的传统发酵牦牛乳中。

牦牛乳酸菌不仅能够产生乳酸，还具有抗菌、抗氧化、调节肠道菌群等多种生理功能。

但在牧区的传统发酵牦牛乳制品中，乳酸菌的菌群组成和种类尚未得到全面的研究和认识。

因此，本研究旨在通过分离鉴定，筛选出甘肃牧区传统发酵牦牛乳中的优良乳酸菌菌株，为乳制品生产和相关研究提供科学依据。

【材料与方法】1. 样本采集：从甘肃牧区的传统发酵牦牛乳样品中，采集新鲜乳样。

2. 乳酸菌分离：将乳样制备成适当稀释度的液态培养基，通过连续传代分离培养得到纯培养基。

3. 形态观察与生理特性测定：通过显微镜观察菌落形态，进行革兰氏染色观察，测定生理特性如产乳酸量、菌落形态、耐盐性等。

4. 16S rRNA序列分析：采用引物对细菌基因组DNA进行PCR 扩增，测定细菌的16S rRNA序列。

5. 优良菌株筛选：根据生理特性和16S rRNA序列分析结果，选取优良菌株进行筛选。

【结果】1. 分离培养：从采集的乳样中，共获得了20个纯培养基，并进行了后续研究。

2. 形态观察与生理特性测定：经过显微镜观察和相关实验，发现这些菌落形态多样，耐盐性较强，并能产生大量的乳酸。

3. 16S rRNA序列分析：对获得的20个菌株进行了16S rRNA序列分析，结果显示其与牦牛乳酸菌属中已知菌株高度相似，确认为牦牛乳酸菌。

4. 优良菌株筛选：根据乳酸产量、生理特性和16S rRNA序列分析结果，筛选出3个优良菌株，命名为A、B、C。

【讨论】本实验通过分离鉴定和优良菌株筛选，研究了甘肃牧区传统发酵牦牛乳中的乳酸菌菌株。

结果显示这些菌株具有较强的适应性和生理功能，能够产生丰富的乳酸，具有较高的耐盐性和稳定性。

同时，通过16S rRNA序列分析，确定了这些菌属于牦牛乳酸菌。

牦牛酸乳中耐酸耐胆盐乳酸菌的分离筛选和鉴定

牦牛酸乳中耐酸耐胆盐乳酸菌的分离筛选和鉴定
李洋;赵欣;张玉;王洪伟;索化夷
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2018(034)007
【摘要】通过对青海地区采集的牦牛酸乳中乳酸菌的分离鉴定,共获得48株乳酸菌.以生长旺盛且可用于食品的11株乳酸菌为研究对象,进行人工胃液和胆盐耐受性评价.结果表明,有6株菌株在pH 3.00人工胃液中存活率>50.00％,2株菌株在0.30％胆盐中生长率>15％.其中鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601为最佳抗性菌株,在人工胃液中存活率为119.53％,在0.30％胆盐中生长率为41.64％.
【总页数】7页(P23-28,33)
【作者】李洋;赵欣;张玉;王洪伟;索化夷
【作者单位】西南大学食品科学学院,重庆 400715;重庆第二师范学院功能性食品协同创新中心,重庆 400067;西南大学食品科学学院,重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆 400715;西南大学食品科学学院,重庆 400715
【正文语种】中文
【相关文献】
1.降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及其耐酸耐胆盐性能研究 [J], 陈仪婷;张红星;谢远红;金君华;刘顺
2.耐酸耐胆盐益生乳酸菌的筛选与鉴定 [J], 吕源玲
3.耐酸耐胆盐乳酸菌的鉴定及筛选 [J], 李利;孔丽;张宁;赵伟超;肖亦农;李炳学;韩晓日
4.阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究 [J], FAHAD Shah;徐鸿洋;智超;宫海萌;张和平;赵国芬
5.酸汤中乳酸菌的鉴定及其耐酸、耐胆盐和抗氧化活性 [J], 王祎然;韦明明;张涵;周天瑞;姜梅
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西藏地区牦牛发酵乳制品中乳酸菌的分离与鉴定

西藏地区牦牛发酵乳制品中乳酸菌的分离与鉴定陈芝兰;程池;马凯;刘光全;李红;李辉【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2008(029)012【摘要】实验分析西藏牧民家庭制作的牦牛发酵乳制品中酸奶和奶渣的微生物数量,通过菌种选择分离,采用传统分类与16S rRNA基因序列测定的方法对分离的乳酸菌进行了鉴定.结果表明:3份发酵牦牛乳样品中乳酸菌数为1.04×104～2.10×106CFU/ml,酵母菌数为8.20×103～6.70×105CFU/ml 2份奶渣样品中乳酸菌和酵母菌为0.2×10～1.0×10CFU/g;共分离15株乳酸杆菌、4株乳酸球菌和3株酵母;乳酸菌中10株为Lactobacillus paracasei、1株Lactobacillu fermentum、2株Lactobacillus reuteri、1株Lactobacillus brevis、1株Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus、2株Pediococcus acidilactici、另有2株分别为1株Pediococcu和1株Zactococcus菌株,未鉴定到种;L.paracasei为牦牛发酵乳制品中乳酸菌的优势种(占总分离株的55.6%).【总页数】5页(P408-412)【作者】陈芝兰;程池;马凯;刘光全;李红;李辉【作者单位】西藏农牧学院生物中心,西藏,林芝,8600001;中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京,100027;中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京,100027;中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京,100027;中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京,100027;中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京,100027【正文语种】中文【中图分类】Q939.11【相关文献】1.内蒙古鄂尔多斯地区传统发酵乳制品中乳酸菌优势菌群q-PCR定量分析 [J], 张冬蕾;陈红霞;德亮亮;刘文俊;孙天松2.PCR-DGGE法分析西藏传统发酵乳制品中乳酸菌的多样性 [J], 蒋厚阳;陈芝兰;赵国华;杨吉霞3.西藏灵菇中乳酸菌的分离及发酵牦牛酸奶性能研究 [J], 咸天成;胡世成;安逸;赵月红;姚怡铭;邓莹莹;焦迎春4.巴拉圭地区传统发酵乳制品中乳酸菌的分离鉴定 [J], 苏馨;袁婧;柳青;郭琳;刘文俊5.内蒙古赤峰地区传统发酵乳制品中乳酸菌的分离与鉴定 [J], 刘逸群;党娜;武岳;丛琳;刘文俊;孟和毕力格因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选

牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选
杨吉霞;贺稚非;陈宗道
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2015(036)003
【摘要】本研究用分离自西藏、新疆、云南地区牦牛奶酪的39株乳酸菌作为供试菌株,制备细菌素粗提液,用琼脂井法分析粗提液对9株致病菌(蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、费氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、阴沟肠杆菌、产气荚膜梭菌、宋内志贺菌)和2株非致病菌(无害李斯特菌、嗜热链球菌)指示菌株的抑菌作用.测定结果表明有30株菌的细菌素粗提液对指示菌株有抑菌作用,筛选出Y13、X29和X30这3株抑菌谱较宽的细菌素产生菌.
【总页数】5页(P122-126)
【作者】杨吉霞;贺稚非;陈宗道
【作者单位】西南大学食品科学学院,重庆市农产品加工技术重点实验室,重庆400715;西南大学食品科学学院,重庆市农产品加工技术重点实验室,重庆400715;西南大学食品科学学院,重庆市农产品加工技术重点实验室,重庆400715
【正文语种】中文
【中图分类】TS252.54
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