高考生物复习——微生物的培养与应用学案及训练
届高考一轮复习学案《微生物的培养与应用》
微生物的培养与应用考纲要求1.微生物的分离和培养（实验与探究）。
2.某种微生物数量的测定（实验与探究）。
3.培养基对微生物的选择作用（实验与探究）。
4.用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用（实验与探究）。
复习要求1.理解培养基对微生物的选择利用并能利用选择培养基分离微生物。
2.掌握培养微生物的过程、条件和方法。
3.掌握测量微生物数量的方法、统计菌落数量的方法。
4.能利用选择培养基分离微生物的方法。
基础自查一、微生物的实验室培养1.培养基（1）概念：__________________________________________________。
（2）成分：__________________________________________________。
2.无菌技术3.实验操作（1）牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备（2）微生物的分离方法二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.分离原理：统计菌落数目：3.实验流程：三、分解纤维素的微生物的分离1.纤维素酶2.纤维素分解菌的筛选原理3.土壤中纤维素分解菌的筛选实验流程课堂深化探究一、微生物的培养与应用1.微生物的实验室培养（1）培养基①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
②分类和应用③培养基配方及营养要素基本营养要素：特别提醒①微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。
②对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。
③有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。
④制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
（2）微生物培养的无菌技术①消毒和灭菌的区别②三种常用灭菌方法的比较2.微生物的纯化培养及菌种的保藏（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
高考生物一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第二讲 微生物的培养与应用学案 新人教版
第二讲 微生物的培养与应用[考纲展示]1．微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.微生物在其他方面的应用授课提示：对应学生用书第277页 一、微生物的实验室培养 1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养构成：水、无机盐、碳源、氮源和生长因子。
(3)类型：根据物理性质可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基；根据功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
2．无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)关键：防止外来杂菌的入侵。
(3)方法⎩⎨⎧消毒⎩⎪⎨⎪⎧煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灭菌{灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸气灭菌3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)纯化大肠杆菌 ①关键的步骤是接种。
②纯化培养方法：平板划线法和稀释涂布法。
③纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1．分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。
以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖，并抑制或阻止其他微生物的生长，从而将目的菌分离。
2．统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。
3．实验流程：土壤取样→制备培养基→微生物的培养与观察→细菌的计数。
三、分解纤维素的微生物的分离 1．纤维素酶(1)组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括C 1酶、C X 酶和葡萄糖苷酶。
(2)作用2．菌种筛选(1)方法：刚果红染色法。
(2)原理纤维素分解菌 ↓⎭⎪⎬⎪⎫刚果红纤维素→红色复合物――→纤维素酶红色消失、出现透明圈。
即：使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
高考生物一轮精品复习 专题2 微生物的培养与应用学案 新人教版选修1
【高考新动向】1、微生物的分离和培养2、培养基对微生物的选择作用3、某种微生物数量的测定4、利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用【考纲全景透析】一、微生物的分离和培养1、微生物的营养：碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。
1、培养基（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质（2）成分：一般都含有水、碳源、氮源无机盐，还需满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
（3）分类：固体培养基：含凝固剂，如琼脂液体培养基：不含凝固剂2、无菌技术（1）含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法（2）关键：防止外来杂菌的入侵（3）方法：消毒：煮沸消毒法，化学药剂消毒法，紫外线消毒法灭菌：灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌区别消毒和灭菌3、纯化大肠杆菌以及菌种的保藏（1）制作牛肉膏蛋白胨固体培养基方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
（2）纯化大肠杆菌①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个细胞繁殖而来的子细胞群体。
②方法：平板划线法、稀释涂布平板法。
（3）菌种的保藏①短期保存：将菌种接种到试管的固体斜面培养基上4℃保存，菌种易被污染或产生变异。
②长期保存：－20℃甘油管在冷冻箱中保藏。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、分离的原理（1）土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成脲酶。
这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。
（2）实验室中微生物的筛选应用的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
2、统计菌落数目的方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
3、细菌分离与计数的实验流程土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数三、分解纤维素的微生物的分离1、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
2020年高考 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 学案.doc
2020届一轮复习人教版微生物的培养与应用学案1.微生物的分离和培养。
2.某种微生物数量的测定。
3.培养基对微生物的选择作用。
考点一微生物的实验室培养1．培养基2．无菌技术3．大肠杆菌的纯化培养[归纳整合]1．全面比较消毒和灭菌2．平板划线法和稀释涂布平板法的比较[思维探究]如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析：(1)获得图A 效果和图B 效果的接种方法分别是什么？提示：获得效果A 的接种方法为稀释涂布平板法，获得效果B 的接种方法为平板划线法。
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？提示：最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。
(3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ 提示：火焰附近存在着无菌区域。
[教材深挖]1．教材选修1P 17“倒平板操作讨论”：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
2．教材选修1P 18“旁栏小资料”：微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？提示：不是。
微生物的接种方法还包括斜面接种、穿刺接种等，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
命题点一微生物的培养基及无菌技术1．(2018·全国卷Ⅱ，T37)在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________。
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专题35 微生物的培养与应用讲考纲讲考点考点一 微生物的培养与应用 1．微生物的实验室培养 （1）培养基①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
②营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH 、氧气以及特殊营养物质的要求。
③种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。
（2）无菌技术①含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
②关键：防止外来杂菌的入侵。
③不同对象的无菌操作方法（3）大肠杆菌的纯化培养2．微生物的筛选和计数（1）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
②统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。
③实验流程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。
（2）分解纤维素的微生物的分离①纤维素分解菌的筛选②实验流程【例1】（2017年新课标Ⅰ卷，37）某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。
回答下列问题：（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生_______________________。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是________________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是________________________（答出两点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择____________________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是________________________。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________（答出两点即可）。
高三生物二轮复习专题8第2讲微生物的培养与应用学案
第2讲微生物的培养与应用考点一微生物的实验室培养一、基础知识A拉圭苴1、培养基（1 ）营养组成：一般都含有碳源、氮源、水和无机盐。
（2）种类：按物理状态分有固体培养基（琼脂的作用:作凝固剂）和液体培养基;按功能或用途分有选择培养基和鉴别培养基。
（3）培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调为酸性；培养细菌时需要将pH调为中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧条件。
2、无菌技术：（1）无菌技术的目的是获得纯净培养物，此外还可以防止感染实验操作者。
获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵；使用后的培养基丢弃前一定要灭菌处理。
（2）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
常用的消毒方法有:煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒、化学药剂消毒。
灭菌的方法：（1）接种环、接种针等接种用具用灼烧灭菌，所用器具是酒精灯；（2）玻璃器皿、金属用具可使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌丄；（3）培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅；二、大肠杆菌的纯化培养：可分成制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段。
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）操作步骤：计算T称量T溶化T灭菌T倒平板。
〖思考1〗在称量操作中，动作要迅速，主要是为了防止防止牛肉膏吸收空气中水分。
〖思考2〗溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破生。
（2）倒平板操作：待培养基冷却至_50_ C左右时在酒精灯火焰附近进行操作。
2、纯化大肠杆菌接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，接种工具分别是接种环和涂布器。
接种前接种工具都应先燃烧灭菌,且待冷却后才接种操作的目的是以免温度太高，杀死菌种。
整个接种过程都应在酒精灯火焰附近进行。
三、菌种保藏的方法1临时保藏法：放在4 C的冰箱中保藏，主要用于频繁使用的菌种。
2、甘油管藏法：放在-20 C的冷冻箱中保存，主要用于长期使用的菌种。
四、简答题〖思考3〗平板冷凝后，要将平板倒置的作用是既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
高三生物一轮复习精品学案：微生物的培养与应用
第39讲微生物的培养与应用[最新考纲] 1.微生物的分离和培养。
2.培养基对微生物的选择作用。
3.某种微生物数量的测定。
4.微生物在其他方面的应用。
考点一微生物的实验室培养1.培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。
2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)关键：防止外来杂菌的入侵。
(3)不同对象的无菌操作方法(连线)3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①操作步骤计算溶化②倒平板的方法及注意事项a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
c.丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
(1)(教材P16旁栏思考题解答)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
①培养细菌用的培养基与培养皿②玻棒、试管、烧瓶和吸管③实验操作者的双手提示①、②需要灭菌；③需要消毒。
(2)(教材P17“倒平板操作讨论”解答)①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
2019高考生物一轮复习第40讲微生物的培养与应用讲练结合学案
第40讲微生物的培养与应用[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用板块一知识·自主梳理一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养成分：水、碳源、氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(3)培养基的分类①按物理状态分类②按功能分类2．无菌技术3．纯化大肠杆菌及菌种的保藏(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
②倒平板的过程a．在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞。
b．右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰。
c．左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上培养皿的皿盖。
d．待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。
(2)纯化大肠杆菌①平板划线法(图中A)：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法(图中B)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的菌落。
(3)菌种的保藏①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制和阻止其他种类微生物生长的培养基。
2．统计菌落数目(1)常用方法：稀释涂布平板法。
(2)统计依据当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
生物选修1-专题2-微生物的培养与应用导学案(高三复习)
高三生物选修1 专题2 微生物的培养与应用导学案〔一〕微生物的实验室培养1. 培养基〔1〕概念：人们按照微生物对＿＿＿＿＿＿的不同需求，配制出供其＿＿＿＿＿＿的营养基质叫培养基。
按物理性质可分为＿＿＿＿培养基和＿＿＿＿培养基。
〔2〕营养构成：各种培养基一般都含有＿＿＿＿、＿＿＿＿＿、＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。
从细胞的化学元素组成来看，培养基中都含有这些营养成分的原因是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿〔3〕在上述主要营养物质的基础上，还要满足微生物生长对＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿以及＿＿＿＿的要求，例如：培养乳酸杆菌时需在培养基中添加＿＿＿＿＿、培养霉菌时需将培养基PH调至＿＿＿＿、培养细菌时需将PH调至＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、培养厌氧微生物则需提供＿＿＿＿＿条件。
2. 无菌技术〔1〕获得纯洁培养物的关键是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，具体操作如下：①对实验操作的＿＿＿＿＿、操作者的＿＿＿＿和＿＿＿进行＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
②将用于微生物培养的＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿等器具进行＿＿＿＿。
③为防止周围环境中微生物的污染，实验操作应在＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿附近进行。
④实验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿相接触。
〔2〕消毒和灭菌①消毒是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿〔不包括芽孢和孢子〕。
日常生活中常用的方法有＿＿＿＿＿＿＿＿；不耐高温的液体用＿＿＿＿＿＿；人们也常使用〔如酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等〕消毒、＿＿＿＿消毒。
②灭菌是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿〔包括芽孢和孢子〕。
常用的方法有：＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿。
③无菌技术除了防止培养物被污染外，还能＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
④利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，防止＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
2020年高考 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 学案.doc
2020届 一轮复习 人教版 微生物的培养与应用 学案【最新考纲】 1.微生物的分离和培养。
2.培养基对微生物的选择作用。
3.某种微生物数量的测定。
4.微生物在其他方面的应用。
考点一 微生物的实验室培养见学生用书P1941．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH 、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)分类⎩⎨⎧ 固体培养基：含凝固剂液体培养基：不含凝固剂2．无菌技术(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)不同对象的无菌操作方法(连线)3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
诊断辨析(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质。
(√)(2)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。
(×)(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。
(√)(4)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。
(×)(5)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落。
(√)热图解读如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考：(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么？(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？(3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？提示(1)获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法，获得效果B的接种方法为平板划线法。
高考生物一轮复习第40讲微生物的培养与应用培优学案
第40讲微生物的培养与应用[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用板块一知识·自主梳理一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养成分：水、碳源、氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(3)培养基的分类①按物理状态分类②按功能分类2．无菌技术3．纯化大肠杆菌及菌种的保藏(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
②倒平板的过程a．在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞。
b．右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰。
c．左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上培养皿的皿盖。
d．待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。
(2)纯化大肠杆菌①平板划线法(图中A)：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法(图中B)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的菌落。
(3)菌种的保藏①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制和阻止其他种类微生物生长的培养基。
2．统计菌落数目(1)常用方法：稀释涂布平板法。
(2)统计依据当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
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高考生物复习——微生物的培养与应用学案及训练
最新考纲全国卷考情
1.微生物的分离和培养
2.培养基对微生物的选择作用
3.某种微生物数量的测定
4.微生物在其他方面的应用
2018·全国卷Ⅰ(37)、2018·全国卷Ⅱ(37)、
2018·全国卷Ⅲ(37)、2017·全国卷Ⅰ(37)、
2016·全国卷Ⅰ(39)、2016·全国卷Ⅲ(39)
考点一微生物的实验室培养
1.培养基
(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
(3)种类
①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
2.无菌技术
(1)含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
(2)常用方法
3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算称量溶化灭菌倒平板
(2)纯化大肠杆菌的方法
①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种
a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
如图所示：
b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
(3)菌种的保存方法
①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
点悟：(1)用稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目“低”。
这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
而显微计数法由于不能区分死菌与活菌，故所得数值可能比实际值“偏高”。
(2)平板划线法只适用于微生物的提纯，不适用于微生物的计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。
下图中图1为“倒平板”相关操作，图2为微生物接种方法。
请思考：
(1)请用文字和箭头写出图1中正确的倒平板操作流程。
提示C→B→A→D
(2)图示B为何需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为何需进行D操作？
提示B操作是通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
D操作是平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
(3)图2中E、F依次利用何种方法进行接种？其接种工具依次是什么？其接种后效果图解应如下图中a还是b？
提示平板划线法稀释涂布平板法接种环涂布器E—a、F—b
微生物实验室培养及无菌操作技术
1.(2018·全国卷Ⅱ，37)[生物——选修1：生物技术实践]
在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题：
(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种。