恒河猴促滤泡激素生物测定法的建立和应用
不同时间针刺对雌性恒河猴生殖内分泌影响的实验研究
不同时间针刺对雌性恒河猴生殖内分泌影响的实验研究[摘要]方法:采用2×2析因设计,分别观察不同时间针刺对实验动物月经周期前半期外周血FSH,LH,E2,T分泌水平的影响。
结果:(1)早晨组、晚上组、早晚组各激素分泌均出现明显抑制,空白组及非穴组则呈现大致正常的分泌状态。
(2)各时间针刺组的各种激素分泌峰的上升速度及峰值增值变化与空白组相比,差异均有非常显著性意义(P0.05)。
(3)不同时间针刺组组间比较,对FSH,T分泌峰的上升速度及峰值增值变化的影响由强到弱依次为早晨组、早晚组、晚上组;对LH分泌峰的上升速度及峰值增值变化的影响由强到弱依次为早晨组、晚上组、早晚组;对E2分泌峰的上升速度及峰值增值变化的影响由强到弱依次为晚上组、早晚组、早晨组。
(4)针刺1天1次与1天2次比较,其作用差异无显著意义。
[主题词]时间因素;促卵泡成熟激素/血液;黄体生成素/血液;雌二醇/血液;睾酮/血液在人类中,各种生理生化功能、行为和反应以至细胞形态和结构等都具有节律变化。
本课题组的前期实验已证实[1,2]:根据生殖内分泌周期性变化的规律,在月经周期卵泡期实施恰当的治疗,对促卵泡成熟激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、和睾酮(T)的分泌高峰有显著的抑制效应,并认为[3]针灸时效性是影响针灸效果的重要因素之一。
为进一步观察时间因素对生殖内分泌抑制性效应的影响,以雌性恒河猴为研究对象,采用放射免疫分析法和体外生物测定法,系统观察并对比了不同时间针刺对雌性恒河猴月经周期前半期外周血中FSH,LH,E2,T分泌水平的影响。
报告如下。
1材料与方法1.1实验材料实验动物:健康育龄雌性恒河猴,由福建省计划生育非人灵长类实验中心提供,单笼饲养,猴舍通风良好,自然光照,每天喂混合营养颗粒饲料和时令瓜果,自由进水。
器材:华佗牌32号1寸、1.5寸毫针;G6805-Ⅲ电针治疗仪;80-2离心沉淀器。
试剂:盐酸氯胺酮注射液,上海第一制药厂生产,批号98041;雌二醇、睾酮、胶原酶Ⅱ、牛血清白蛋白(BSA)、HEPES购于SIGMA公司;McCoy′5A培养基购于GIBCO公司;3H-雌二醇、3H-睾酮购于AMERSHAM公司;hFSH,oLH标准品、睾酮、雌二醇放射免疫测定药盒由中国科学院动物研究所庄之临教授提供。
恒河猴睾丸支持细胞对间质细胞分泌睾酮的研究
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恒河猴和食蟹猴ABO血型竞争性等位基因PCR(KASP)检测方法的建立
恒河猴和食蟹猴ABO血型竞争性等位基因PCR(KASP)检测方法的建立杨玲焰;王立鹏;荣荣【摘要】目的人的ABO血型常规免疫学检测方法不适用于实验猴猕猴血型检测,而实验猴血型鉴定在器官移植等研究中必不可少.本研究目的是建立一个快速、可靠的恒河猴与食蟹猴ABO血型核酸鉴定方法.方法本室建立了一种新的ABO血型的分子学检测方法,利用竞争性等位基因PCR(KASP)技术,通过识别与血型密切相关功能基因的2个SNP位点上的碱基,对恒河猴与食蟹猴血型进行分型,并通过设计2个SNP位点外围的普通PCR引物,对KASP方法鉴定出的血型样本进行Sanger 测序鉴定.结果比对了15份用Taqman PCR方法已确定血型的食蟹猴全血核酸样本,新建立的KASP分型结果与原血型结果完全一致,为了保证KASP方法鉴定结果的准确性,实验人员用新建立的普通PCR方法通过Sanger测序验证了KASP方法与测序结果完全一致.为了对新建的KASP方法重复性进行验证,选取了已知血型的6份实验猴全血,每份血样做5个重复,结果显示该方法有极好的重复性.进一步用新建的KASP方法检测了51份临床样本,其中食蟹猴样本38份,恒河猴样本13份,同一样本的2个位点的血型结果完全一致,其中A型血9份(17.6％),B型血19份(37.3％),AB型血23份(45.1％),未检出O型血.同时从A型、B型、AB型的临床样本中,各型分别选了5个样本,进行普通PCR扩增及测序分析,证明2个SNP位点上的序列与KASP分型结果一致.结论新建的KASP血型鉴定方法准确性高,可用于实验恒河猴与食蟹猴的ABO血型的快速检测.该方法相较于传统的血清学或测序方法,简单快捷,经济可靠,结果易于判读,同时对样本的要求比传统的血清学方法低,新鲜或存放较久的全血、唾液或核酸等都可以用于检测.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2019(029)008【总页数】6页(P31-36)【关键词】食蟹猴;恒河猴;ABO血型;竞争性等位基因PCR【作者】杨玲焰;王立鹏;荣荣【作者单位】苏州西山生物技术有限公司,苏州 215123;苏州西山生物技术有限公司,苏州 215123;西交利物浦大学,苏州 215123【正文语种】中文【中图分类】R-33由于猕猴属(Macaques)动物与人类拥有共同祖先，他们的基因相似率大于93%，且在神经学、生理学、代谢类疾病及对微生物的敏感性方面表现的都非常相似，所以猕猴属动物尤其是食蟹猴(Macaca fascicularis, Cynomolgus monkeys)和恒河猴(Macaca mulatta, Rhesus monkeys)作为非人灵长类实验动物模型，被广泛用于生物医药研究中，近几年，生物医药研究领域的投入不断加大，干细胞和移植研究也得到飞速发展，而对用于这方面研究的供体和受体动物的血型要准确的掌握，ABO血型是最重要的血型系统，所以当实验猴被用于研究时就需要明确知道它的ABO血型，才能防止在移植中出现严重的排斥反应，导致实验的失败及资源的浪费。
一种恒河猴卵巢及卵泡生成模型的制备方法[发明专利]
![一种恒河猴卵巢及卵泡生成模型的制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/27505daccf84b9d529ea7a35.png)
专利名称：一种恒河猴卵巢及卵泡生成模型的制备方法专利类型：发明专利
发明人：王莉,陈波,刘斌,王汉蓉,岳焕勋,李宏霞
申请号：CN201010263384.8
申请日：20100826
公开号：CN102370973A
公开日：
20120314
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种恒河猴卵巢及卵泡生成模型的制备方法，它是由雌性恒河猴为试验对象，经皮下注射促黄体激素LH，60IU/只/次，每天2次，连续7天，制备成恒河猴卵巢及卵泡生成模型。
本发明还提供了促黄体激素LH在制备激活卵巢及其卵泡发育的药物中的用途。
本发明造模方法使用动物为猴，其生理学、血液学、血液生化等背景数据丰富易得，并且猴与人生物学背景相似，猴的结果能较好地预示药物在临床上反应；多方面、多角度评估，结果能较好、客观地反应药物对生殖系统的药效作用，此外，本模型使用的动物(猴)及仪器(B超仪、显微镜、细胞培养装置等)简单易得，具有通用性。
申请人：四川大学华西医院,成都华西海圻医药科技有限公司,国家成都中药安全性评价中心
地址：610041 四川省成都市外南国学巷37号
国籍：CN
代理机构：北京律诚同业知识产权代理有限公司
代理人：李高峡
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联合使用米索前列醇和米非司酮以获取恒河猴胎猴样品
联合使用米索前列醇和米非司酮以获取恒河猴胎猴样品赵理;罕园园;唐东红【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2009(029)009【摘要】目的建立获取恒河猴早、中、晚期不同胎龄胎猴样品的新方法.方法通过B超确定恒河猴孕猴怀孕天数后,皮下注射米非司酮,在其阴道后穹窿放置米索前列醇以促使孕猴终止妊娠,获取胎猴样品.通过bishop评分、孕猴终止妊娠率和胎猴脑组织总RNA提取质量评估该新方法效果.结果实验组孕猴的宫颈评分和胎猴3日娩出率均高于对照组(P<0.05),从胎猴脑组织中提取的总RNA质量良好.结论联合使用米索前列醇和米非司酮是一种有效而安全的获取恒河猴胎猴样品的新方法.【总页数】3页(P908-910)【作者】赵理;罕园园;唐东红【作者单位】中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,昆明,650118;中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,昆明,650118【正文语种】中文【中图分类】Q-34【相关文献】1.恒河猴血管内皮细胞原位获取的实验研究 [J], 潘明新2.米非司酮对恒河猴促性腺激素分泌水平的抑制作用 [J], 王训立3.恒河猴睾丸内激素调控的离体研究Ⅲ--雌激素对恒河猴睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响 [J], 王训立;李荣皓;庄临之;魏振年4.SHIV1157ipd3N4中国恒河猴细胞适应株静脉感染中国恒河猴有效浓度的确定[J], 丛喆;陈志伟;魏强;蒋虹;金光;陈霆;王卫;陶真;姚南;熊竞;吴芳新5.米非司酮对恒河猴母胎界面细胞凋亡和凋亡分子p53表达的影响 [J], 魏鹏;陶世信;张学森;胡召元;刘以训因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
恒河猴促黄体激素生物测定法及应用研究
恒河猴促黄体激素生物测定法及应用研究
王训立
【期刊名称】《医学研究杂志》
【年(卷),期】2008(37)12
【摘要】目的建立恒河猴促黄体激素(LH)生物测定法.方法利用LH体外生物测定法,测定恒河猴血清中LH含量.结果测定方法的灵敏度为0.05ng/管,批内和批间误差分别为(3.18±1.52)%和(7.56±3.41)%,证明该方法准确性高;恒河猴血清中LH含量反应曲线和hLH标准曲线平行良好,说明该方法可以用来检测恒河猴血清中的具有生物活性的LH变化,反映了动物正常的生理状态;回收实验表明,在该测定方法中加入10ng、20ng、40ng hLH时的回收率分别为(99.12±4.56)%、
(99.31±6.49)%、(101.02±7.58)%,说明测定结果的可靠性.结论本实验所建立的LH体外生物测定法灵敏度高,稳定性强.
【总页数】4页(P41-44)
【作者】王训立
【作者单位】350108,福州,福建中医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.家蚕促前胸腺激素的生物测定法 [J], 普后;张建安
2.053 雄烯二酮、胰岛素和促黄体激素对人类卵巢颗粒黄体细胞产生雌、孕激素的
影响 [J], 李云;吴瑞芳
3.恒河猴促滤泡激素生物测定法的建立和应用 [J], 王训立
4.黄体生成素释放激素拮抗类似物（TX51）抑制成年恒河猴促性腺激素及甾体… [J], 胡自正;方溪
5.大菱鲆促黄体激素受体基因的克隆及其生物信息学分析 [J], 贾玉东;孟振;牛化欣;刘新富;高淳仁;雷霁霖
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恒河猴实验报告
恒河猴实验报告恒河猴实验报告引言：恒河猴（Macaca mulatta）是一种常见的灵长类动物，广泛分布于南亚地区。
由于其与人类基因的相似性较高，恒河猴成为了许多医学和生物学研究的重要模型动物。
本报告旨在介绍恒河猴实验的目的、方法和结果，并探讨其在科学研究中的应用。
实验目的：本实验的目的是研究恒河猴的认知能力和学习行为。
通过观察恒河猴在特定环境下的行为反应，我们可以了解其智力水平和学习能力的发展过程。
这对于进一步研究人类认知能力的起源和发展具有重要意义。
实验方法：实验中，我们选取了一组恒河猴，将其置于特定的实验环境中进行观察和测试。
首先，我们为猴子提供了一些基本的认知任务，如物体辨识和空间导航。
通过观察猴子的行为反应，我们可以评估其对物体和空间的认知能力。
此外，我们还进行了一些复杂的认知任务，如工具使用和问题解决。
通过观察猴子在实验中的行为表现，我们可以了解其学习和解决问题的能力。
同时，我们还使用了一些非侵入性的脑电图和脑成像技术，以进一步研究猴子的脑活动模式。
实验结果：我们的实验结果表明，恒河猴具有较高的认知能力和学习能力。
在物体辨识任务中，猴子能够准确地辨别不同的物体，并能够根据形状和颜色进行分类。
在空间导航任务中，猴子能够准确地找到特定位置，并能够记忆和识别不同的空间结构。
在复杂的认知任务中，猴子也表现出了出色的学习和解决问题的能力。
在工具使用任务中，猴子能够学会使用简单的工具来达到目标，如使用棍子够到远处的食物。
在问题解决任务中，猴子能够通过观察和试错的方式找到解决问题的方法。
通过脑电图和脑成像技术的应用，我们还发现了一些与认知能力相关的脑活动模式。
例如，在物体辨识任务中，我们观察到了与物体辨识相关的脑电波活动增强。
这些结果为我们进一步研究恒河猴认知能力的神经机制提供了重要线索。
讨论与应用：恒河猴实验的结果对于人类认知能力的研究具有重要意义。
通过与猴子的比较，我们可以更好地理解人类认知能力的起源和发展。
恒河猴血清孕酮含量测定方法
恒河猴血清孕酮含量测定方法王训立【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2008(18)7【摘要】目的建立恒河猴血清中孕酮含量测定方法.方法本文采用放射免疫测定技术.结果孕酮的回收率为94%,批内CV为5.1%~8.3%,批间CV为4.5%~7.7%,灵敏度为5~10pg.说明该方法具有较高的灵敏度、特异性、准确性.分别测定了幼年组、成年组和老年组的雌性恒河猴的血清中的孕酮含量分别为:(0.20±0.04)ng/mL、(6.26±0.17)ng/mL和(0.35±0.06)ng/mL;成年雌性恒河猴月经周期孕酮的变化范围为:滤泡期为(1.10±0.12)ng/mL,排卵期(2.36±0.18)ng/mL,黄体期(6.17±0.15)ng/mL,妊娠期随着妊娠月份的增加,孕酮浓度也增加,最高可达50ng/mL.结论经实验验证,该方法灵敏、可靠、适用,可作为恒河猴血清中孕酮含量测定的一种方法.【总页数】4页(P56-59)【作者】王训立【作者单位】福建中医学院实验动物中心,福州350108【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.恒河猴睾丸内激素调控的离体研究Ⅲ--雌激素对恒河猴睾丸Leydig细胞睾酮分泌的影响 [J], 王训立;李荣皓;庄临之;魏振年2.SHIV1157ipd3N4中国恒河猴细胞适应株静脉感染中国恒河猴有效浓度的确定[J], 丛喆;陈志伟;魏强;蒋虹;金光;陈霆;王卫;陶真;姚南;熊竞;吴芳新3.血清孕酮、转化生长因子-β、共刺激分子可溶性B7-H3在自发性流产病人中的表达及预测价值分析 [J], 李超平;马瑛;时琼;白瑞平4.海洛因及吗啡对恒河猴β-内啡肽、促肾上腺皮质激素、皮质醇、睾酮的影响海洛因及吗啡对恒河猴β-内啡肽、促肾上腺皮质激素、皮质醇、睾酮的影响 [J], 郭晓红;徐贵丽;张晓冬;张肇玖;张正仙;曾庆云;侯云成;杨森富;宋岚曦;赵泉;蒋家雄5.血清孕酮、雌二醇联合β-HCG检测预测先兆流产结局的意义分析 [J], 蔡雪梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人工繁育恒河猴婴猴生长发育指标的测定分析
人工繁育恒河猴婴猴生长发育指标的测定分析崔伟;李春花;匡德宣;江勤芳;罗志武;代解杰【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2007(17)12【摘要】目的建立人工繁殖恒河猴婴猴生长发育指标的标准数据库.方法随机对90只人工饲养繁殖的恒河猴(从100 d至1周岁)进行体重、身长、尾长、前肢长、后肢长发育指标测定.结果测定后的数据, 经统计学分析和绘制生长曲线图,发现人工饲养条件下的恒河猴(1周岁前),其生长发育指标基本均匀一致,只有个别出现发育迟缓或发育不良现象.随时间推移,雄性生长速度要快于雌性.结论所建立的恒河猴婴猴正常生长发育生理指标,为提高人工饲养繁育恒河猴技术和不断改善恒河猴营养与发育健康提供了科学数据.【总页数】3页(P734-736)【作者】崔伟;李春花;匡德宣;江勤芳;罗志武;代解杰【作者单位】中国医学科学院,中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明,650118;中国医学科学院,中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明,650118;中国医学科学院,中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明,650118;中国医学科学院,中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明,650118;中国医学科学院,中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明,650118;中国医学科学院,中国协和医科大学医学生物学研究所,昆明,650118【正文语种】中文【中图分类】R-33【相关文献】1.恒河猴婴猴人工护理程序的建立 [J], 王宏;司维;周引;陈利仙2.恒河猴婴猴离乳阶段行为观察及分析 [J], 李艳艳;陈丽雄;乞素冬;王俊斌;杨凤梅;赵远;鲁帅尧;禹文海;和占龙3.一种治疗恒河猴婴猴菌痢的新方法 [J], 叶尤松;江勤芳;李春花;陈瑜;代成波;代解杰4.恒河猴剖腹产手术和术后婴猴护理的探讨 [J], 匡德宣;江勤芳;李春花;陈瑜;孙晓梅5.Fmr 1基因敲除小鼠生长发育指标的测定分析 [J], 叶炳飞;黄月玲;戴丽军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
PEG IFN α-1b重复给药对恒河猴的毒性实验
PEG IFN α-1b重复给药对恒河猴的毒性实验黄海潇;宋良文;熊国林;谢玲;邢爽;李明;沈纯;何社辉;罗庆良【期刊名称】《毒理学杂志》【年(卷),期】2007(21)4【摘要】目的评价PEG IFN α-1b对恒河猴多次皮下注射给药的毒性作用,提供PEG IFN α-1b对恒河猴毒性反应的靶器官及其损害的性质,确定PEG IFN α-1b的无毒反应剂量,为制定临床用药方案提供参考资料。
方法24只成年健康恒河猴(雌雄各半)分为溶剂对照、PEG IFN α-1b600、100和15μg/kg4组,每组雌、雄动物各3只。
各组动物隔天一次分别皮下注射溶剂或不同浓度的PEG IFNα-1b各2ml,90d共注射45次。
PEG IFN α-1b给药量分别相当于成人一次剂量的230、30和6倍。
结果给药期间所有动物反应无异常,无死亡。
动物的体重、体温、血压、呼吸、尿常规及凝血指标无异常。
30项外周血象结果表明,给药期间各组动物外周血白细胞及中性粒细胞数减少,以大剂量组尤为明显,减少幅度约50%;单核细胞有升高,血小板数有降低的趋势,但各剂量组间无明显的量效关系。
给药期间所有3个剂量PEG IFN α-1b组动物的16项血浆生化指标与同期溶剂对照组比较,差异无统计学意义。
各组动物血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和IgE检查结果与药前值比较,差异均无统计学意义。
3个不同剂量PEG IFN α-1b给药后20d,血清中结合抗体滴度均开始明显升高,以大剂量组尤为明显。
此后仍呈波动性升高的趋势,至停药后30d仍处峰值。
PEG IFN α-1b皮下注射90d和停药后30d3个给药组均未查到中和抗体的产生。
组织病理学检查结果显示大剂量PEG IFN α-1b给药组动物给药90d处死猴肾小球毛细血管减少,基底膜增厚,间质细胞增生;胸腺小叶蜕化,细胞数减少,胸腺脂肪化,停药后30d,上述病理变化消失,未见异常改变;肝中央静脉旁可见淋巴小结形成,肝细胞出现散在大片状水肿,胞体肿胀,但未见到肝细胞坏死现象,停药30d时可见个别动物仍有肝细胞广泛性水肿;骨髓细胞明显疏松,数量明显减少,可见多发性细胞坏死小灶,伴有明显地髓腔内出血。
健康恒河猴和食蟹猴毛发微量元素与氨基酸的检测研究
健康恒河猴和食蟹猴毛发微量元素与氨基酸的检测研究灵长类动物是现代生物医学研究中重要的实验动物之一。
但在人工饲养条件下, 营养状况和寄生虫、皮肤真菌等干扰导致恒河猴和食蟹猴毛发品质出现差异。
毛发质量不仅影响外观, 而且能反映实验动物的品质。
本文通过对健康的成年恒河猴和食蟹猴毛发中氨基酸和微量元素进行测定分析, 以评估恒河猴和食蟹猴的健康状况。
1、材料和方法1.1、材料1.1.1、实验动物:实验动物来自于云南中科灵长类生物医学重点实验室饲养的24只5~10岁相同饲养环境条件下的健康恒河猴和食蟹猴。
1.1.2、仪器设备:日立L-8900高速氨基酸分析仪, 色谱柱(2622#PH离子交换色谱柱4.5x60mm) , 电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS安捷伦7500ce) , 微波消解仪(奥地利安东帕Anton Paar MW3000) 。
1.2、方法1.2.1、动物挑选:挑选毛色均匀有光泽、体格发育良好且未有体表寄生虫的健康恒河猴(雄性、雌性各6只) 和食蟹猴(雄性、雌性各6只) 共24只。
1.2.2、取样:用毛剪取试验猴头部、背部、四肢被毛, 每只取样品30g, 装入自封袋中送检。
1.2.3、被毛样品处理:测定氨基酸及微量元素前, 先将收集的被毛充分混匀后用洗洁精清洗, 再用清水漂洗干净, 自然风干, 装样品袋封存待用。
1.2.4、氨基酸含量测定:取一定质量的样品于20mL水解管中, 加入16mL、6 moL/L的盐酸溶液, 真空脱气30min, 充氮封管, 在110℃下水解22~24h, 取出冷却开管, 用去离子水无损转移到50mL容量瓶中, 并定容。
准确取1mL水解液于小瓶中, 于真空中脱酸抽干, 加1 mL水再抽干, 再加1mL 水再抽干备用。
上机前准确加入1 mL0.02mol/L的盐酸溶液, 充分溶解, 用0.22m的水相膜滤膜过滤上机分析【2】。
1.2.5、微量元素测定:(1) 微波前处理方法:准确称取0.1g样品, 置于洗净的聚四氟乙烯(PTFE) 消解罐中, 加入硝酸4 mL、氢氟酸2 mL、硫酸2mL, 加盖密封, 运行微波消解程序。
恒河猴血清中睾酮含量放射免疫测定的建立
恒河猴血清中睾酮含量放射免疫测定的建立
王训立;李志雄;周建华
【期刊名称】《经济动物学报》
【年(卷),期】2003(007)001
【摘要】采用放射免疫测定技术对恒河猴血清中睾酮含量进行了研究,并根据试验研究中需要对此放射免疫测定进行了改进.结果表明,睾酮的回收率为97%±2%,批内变异系数为5.82%～10.43%,批间变异系数为5.16%～9.47%,灵敏度为7～
10pg.说明本方法具有准确性好和灵敏度高等优点,可成为雄性恒河猴血清中睾酮含量的一种测定方法.
【总页数】4页(P52-55)
【作者】王训立;李志雄;周建华
【作者单位】福建省计划生育科学技术研究所福建省非人灵长类实验动物重点实验室,福建,福州,350011;福建省计划生育科学技术研究所福建省非人灵长类实验动物重点实验室,福建,福州,350011;福建省计划生育科学技术研究所福建省非人灵长类实验动物重点实验室,福建,福州,350011
【正文语种】中文
【中图分类】Q492.5
【相关文献】
1.胃癌患者血清胃泌素含量放射免疫测定 [J], 许绵文;马文杰
2.肺癌患者血清睾酮和雌二醇放射免疫测定的初步报告 [J], 王秀美;周建峰
3.100例不育男子血清FSH,LH,PRL睾酮的放射免疫测定 [J], 施洪;法锡安
4.鲟鱼GtH放射免疫测定方法的建立及催产前后史氏鲟血清GtH含量的变化 [J], 胡红霞;刘晓春;朱华;张勇
5.放射免疫测定妊娠、分娩母血、脐血血清骨钙素含量的临床研究 [J], 张明岚;黄飞;王金声;杨梦庚
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云南地区恒河猴MHC部分基因频率及多态性的分析的开题报告
云南地区恒河猴MHC部分基因频率及多态性的分析的开题报告一、选题背景恒河猴（Macaca mulatta），又称猕猴、猴子等，是我国南方广大地区常见的一种灵长类动物，也是人类进化历程中的近亲。
恒河猴分布广泛，且数量众多，被广泛应用于医学研究、行为学研究、药理学研究等领域。
而在这些研究中，恒河猴MHC （major histocompatibility complex）基因是一个重要的研究对象。
MHC基因是哺乳类动物免疫系统中一个非常重要的基因家族，它编码的蛋白质能够识别和结合来自外界的抗原肽，并展示于细胞表面供T淋巴细胞识别和激活。
MHC遗传多样性对于动物的免疫抗病能力有着极其重要的影响。
现有的研究中，恒河猴MHC基因的多态性已经被广泛探讨，但是针对云南地区恒河猴MHC基因的分析较少，特别是在MHC-DRB区域的基因型分析方面缺乏相关研究。
因此，本研究将对云南地区猕猴MHC-DRB基因区域进行分析，以期为研究云南地区猕猴免疫系统的遗传特点提供一定的参考价值。
二、研究目的本研究旨在通过对云南地区恒河猴群体中MHC-DRB区域基因型的分析，探索云南地区恒河猴MHC基因的多态性和频率分布规律。
三、研究方法1. 样本采集及DNA提取本研究将收集云南地区不同地点的恒河猴样本，利用血液或口腔拭子等方式采集样本。
收集到的样本将进行DNA提取，提取方法可根据不同样本类型使用适当的提取试剂进行提取操作。
2. MHC-DRB基因区域扩增和测序将提取的DNA作为模板，采用PCR扩增MHC-DRB区域基因片段。
PCR反应体系和条件将根据具体扩增试剂盒而定。
扩增后的产物将进行电泳检测和纯化，随后进行测序分析。
3. 数据分析和统计使用DNAstar软件进行MHC-DRB基因片段的序列分析和比对，得到云南地区恒河猴MHC-DRB基因的基因型信息和多态性分析结果。
通过统计学方法计算MHC基因型频率、等位基因型数目，以及探索不同地区恒河猴MHC遗传的多样性特点。
米非司酮对恒河猴促性腺激素分泌水平的抑制作用
米非司酮对恒河猴促性腺激素分泌水平的抑制作用王训立【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2009(17)4【摘要】目的分析米非司酮(RU486)对恒河猴促性腺激素分泌水平的影响,探讨RU486影响恒河猴促性腺激素分泌的可能机制,为临床安全用药提供理论依据.方法采用生物测定法测定恒河猴促性腺激素,比较在不同情况下恒河猴促性腺激素的分泌水平.结果实验表明:不同时间(0、0.5、1、2、4、8、12、24、48 h)用药后,RU486对恒河猴促黄体激素(LH)、促滤泡激素(PSH)分泌水平的影响,在用药0.5、1、2、4 h后,对LH、FSH分泌均有抑制作用,其中在用药4 h时,LH、FSH 分泌水平均有显著的降低,而用药8、12、24、48 h后,LH、FSH浓度没有显著差异.在月经周期的不同时期一次用药后发现,卵泡期:RU486对LH、FSH分泌水平影响较小;排卵期:RU486对LH、FSH峰的发生延迟现象;黄体期:观察到RU486对FSH、LH基础分泌水平及脉冲的幅度出现下降.结论 RU486对恒河猴的LH、FSH 分泌水平,在不同情况下有显著差异.【总页数】4页(P284-287)【作者】王训立【作者单位】福建中医学院,福州,350108【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.黄体生成素释放激素拮抗类似物（TX51）抑制成年恒河猴促性腺激素及甾体… [J], 胡自正;方溪2.雌性恒河猴月经周期FSH、LH分泌水平的研究 [J], 王训立;刘国璋;李志雄;陈旋武;范春梅;周建华3.针刺对雌性恒河猴月经周期雌二醇睾酮分泌水平影响的实验研究 [J], 李沛;王训立4.针刺对雌性恒河猴垂体促性腺激素分泌水平的影响 [J], 李沛;王训立5.不同时间针刺对雌性恒河猴E_2、T分泌水平的影响 [J], 李沛;徐文倩;安晓英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
恒河猴PCO模型卵巢VEGF mRNA的表达及中药补肾活血方对其影响的实验研究
恒河猴PCO模型卵巢VEGF mRNA的表达及中药补肾活血方对其影响的实验研究谈珍瑜;冯光荣;尤昭玲;贺冰;何淑莹;邹芝香;罗岚【期刊名称】《中华中医药学刊》【年(卷),期】2007(25)4【摘要】目的:探讨恒河猴PCO模型卵巢局部血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达及中药补肾活血方对其影响。
方法:选择健康育龄雌性恒河猴(6只)随机分为正常对照组、模型对照组、中药组;采用皮下注射丙酸睾丸酮和绒毛膜促性腺激素建立PCO模型,分别灌胃给予生理盐水、补肾活血方,采用原位杂交技术观察其卵巢局部VEGF mRNA表达的变化。
结果:在正常卵巢组织可见VEGF mRNA表达的信号;恒河猴PCO模型卵巢组织中,VEGF mRNA在卵泡膜细胞及间质细胞异常高表达;补肾活血方能降低这种异常表达。
结论:恒河猴PCO模型卵巢局部VEGF mRNA异常表达,补肾活血方具有改善这种异常表达作用,可能是其促进卵巢排卵的机制之一。
【总页数】3页(P786-788)【关键词】多囊卵巢;恒河猴;VEGF;mRNA;补肾活血方;动物模型【作者】谈珍瑜;冯光荣;尤昭玲;贺冰;何淑莹;邹芝香;罗岚【作者单位】湖南中医药大学第一附属医院;湖南中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢PAI-1mRNA表达影响的实验研究 [J], 谈珍瑜;冯光荣;尤昭玲;陈海涛;何淑莹2.补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢MMPs-2 MMPs-9mRNA表达影响的实验研究 [J], 林洁;冯光荣;尤昭玲;罗岚;何淑莹;贺冰3.补肾活血方对PCOS大鼠模型卵巢中PAI-1mRNA表达的影响 [J], 伍娟娟;付灵梅;尤昭玲4.补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢COX-1mRNA表达的影响 [J], 尤昭玲;付灵梅;冯光荣;陈海涛;伍娟娟;邹芝香;贺冰5.补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢MMP-9mRNA表达影响的实验研究 [J], 冯光荣;尤昭玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
恒河猴piwil4基因的鉴定与表达分析
恒河猴piwil4基因的鉴定与表达分析赵少志;李玥;江雪;卢亦路;陶大昌;刘运强;马用信【期刊名称】《遗传》【年(卷),期】2011(33)4【摘要】To investigate the structure and expression pattem of thesus monkey PIWIL4 protein, homologous comparison and reverse transcription PCR (RT-PCR) were carried out to identify thesus monkey piwil4.The expression of piwil4 mRNA was tested in thesus monkey heart, brain, colon, epididymis and testis, and the result showed that piwil4 mRNA was expressed in these thesus monkey tissues.Bioinformatic analysis suggested that the thesus PIWIL4 protein shared 97％identity in amino acids and the same domains such as PAZ and Piwi with the human PIWIL4 (HIWI2) protein.The immunohistochemical result indicated that PIWIL4 proteins had the same localization in adult testes of the two species, but the distribution of these proteins was altered dynamically at different developmental stages in thesus monkey testes.PIWIL4 protein was expressed in the nucleus of convoluted seminiferous tubules in infant monkey testes, whereas it was expressed in the cytoplasm of adult monkey testes.The results suggest that piwil4 gene play a similar role in thesus and human, and different localizations of PIWIL4 protein in infant monkey and adult monkey testes suggest that it functions differently at different developmental stages.%为了研究人类近亲恒河猴中PIWI家族蛋白PIWIL4的结构和表达情况,文章首次利用同源比对和RT PCR方法克隆了恒河猴piwil4基因,检测了其mRNA在恒河猴心脏、脑、结肠、附睪和睪丸5种组织中的表达情况,利用生物信息学的方法对恒河猴piwil4基因和人的PIWIL4 (HIWI1)基因编码的蛋白产物进行了同源性分析和结构域分析,并进一步利用免疫组化的方法比较了PIWIL4蛋白在成人、成年恒河猴和性未成熟恒河猴肇丸组织中的表达分布.结果表明,恒河猴piwil4 mRNA在多组织中表达,恒河猴和人的PIWIL4蛋白的氨墓酸序列同源性达97%以上,均含有PAZ和Piwi结构域,它们在两物种成年个体辜丸组织中空间分布一致,但在不同发育阶段恒河猴辜丸组织中的分布发生了改变,幼猴中PIWIL4蛋白主要表达于生精小管细胞的细胞核,在成年猴辜丸组织中则表达于各种细胞的胞浆中.上述结果提示,piwil4基因在人类和恒河猴精子发生过程中作用类似,PIWIL4蛋白在幼猴和成年猴辜丸组织中的表达差异提示它们在不同发育阶段功能的改变.【总页数】6页(P365-370)【作者】赵少志;李玥;江雪;卢亦路;陶大昌;刘运强;马用信【作者单位】四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041;四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗国家重点实验室疾病基因组学研究室,成都610041【正文语种】中文【相关文献】1.恒河猴MyD88基因沉默siRNA腺病毒载体的构建与鉴定 [J], 赵方;陈鹏;焦剑;胡明道;黄明;刘锋;许晔凯2.茶树PPR基因家族全基因组鉴定及白化相关基因表达分析 [J], 刘丁丁;王君雅;汤榕津;陈亮;马春雷3.甘蓝型油菜ZIP基因家族全基因组鉴定与表达分析 [J], 贺丹;杨太桦;黎婷;吴金锋;彭佳师;刘丽莉;张大为;严明理;李再云4.茄子脂氧合酶家族基因全基因组鉴定与表达分析 [J], 赵国富;严亚琴;汪精磊;魏庆镇;包崇来5.小鼠耳芥PEBP基因家族全基因组鉴定及表达分析 [J], 李永光;金玉环;郭力;艾昊;李瑞宁;黄先忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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间 进 行 采 集 样 品 ， 只动 物均 采 血 ３ ｍＬ 血 液 于 每 ， ４ ℃静置 １ｈ后 ，０ ０ｒｍｉ 心 ２ｍｉ ， ３ ０ ／ ｎ离 ｎ 分离 血 清 ，
一
２ ℃冰 箱 。待所 有样 品收集 后 ， 中测 定 。 Ｏ 集
１４ 大 鼠睾 丸 支 持 细 胞 的制 备 ． 根 据 Ｆ Ｈ 可 以 Ｓ
养 箱 中培 养 ２ ， ４ｈ 收集 培 养液 待测 。 用 放射 免疫 采
测 定 法 测定 培 养 液 中的 雌二 醇含 量 ，进 而 计 算 出 血 清 中 Ｆ Ｈ 的含量 。 Ｓ
物 重点 实验 室提 供 ，实 验动 物 使 用 许可 号 ：Ｙ Ｋ ＳＸ
（ ）０ ５ ０ １ ， 中幼 年组 、 年 组 、 年组 的 恒 闽 ２０ —０ ５ 其 成 老
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福 建 中 医 学 院 学 报 ２０ ０ ８年 ８月 第 １ ８卷 第 ４ 期 Ｊ ｕ ｌ ｆ ｊａ ｉｅｓ ｏ ＴＣ／ｌ ｇ ｓ ０ ８，８（ ） ｏ ｍａ ｏ Ｆｕｉｎ Ｕｎｖ ｒｉ ｆ Ｗ ＇ ｖ Ａｕ ｕｔ２ ０ １ ４
刺 激 大 鼠睾 丸 Ｓ ｒ ｌ 细胞 分 泌 雌二 醇 的 作 用 ． ｅｔ ｉ ｏ 建 立 Ｆ Ｈ 体外 生 物测 定法 。将 去除 Ｌ ｙ ｉ 胞 后 的 Ｓ ｅｄｇ细 曲细 精 管经 ０５ ．％胶 原 酶 ３ ℃消化 ２ ｎ 待 曲 细 ５ ０ｍｉ ，
高等 动物 的 Ｆ Ｈ对 低 等 动 物有 效性 是 生 物学 Ｓ
恒河猴促滤泡激素生物测定法的建立和应用
王 训 立
（ 建 中医 学 院 实 验 动 物 中心 ， 建 福 州 ３ ０ ０ ） 福 福 ５ １８
摘 要 ： 目的 建 立恒 河猴 促 滤 泡 激 素 （ ｓ 生物 测 定 法 。 方 法 Ｆ Ｈ） 利 用 Ｆ Ｈ 体 外 生物 测 定 法 ， ｓ
现有 的促 滤 泡 激 素 （Ｓ 的测 定方 法 都 是 针 Ｆ Ｈ） 对 某种 动 物特异 性 的 Ｆ Ｈ和 其特 异 性抗 体建 立 的 ｓ Ｒ Ａ法 ， Ｉ 每种 方 法 只能测 定 一 种 动物 的 Ｆ Ｈ水 平 ， ｓ 特别 在 非 人 灵 长 类 动 物 尚无 商 品化 测 定 药 盒 ， 致 使 该 种类 动 物 的生 殖生 物 学研 究 受 到 了一 定 限制
养 箱 中连 续 培 养 ７ ；更 换 含 有雄 烯 二 酮 （ ０ ２ｈ １ ｍ ｌＬ） ＭＩ １ ｍ ｌＬ 的 培 养 液 ， ｏ／ 和 Ｘ（０ ｏ／ ） 并加 入含 有
一
１１ 实验动物 ．
①ｓ Ｄ大鼠 ： ２ Ｏ只 Ｓ Ｄ大鼠由中国
科 学 院上 海 实验 动物 中心 提供 ，实验 动 物 生 产许
精 管 下 沉 后 弃 去 上 清 液体 ，再 经 ００ ％胶 原 酶 、 ．５
３ ℃恒温 水 浴摇 床 中振荡 消 化 ３ ｎ 滤 液 经 ２ ０ ５ ０ｍｉ ， ０ 目尼龙 网筛 过 滤 、 置 、 心 。将 得 到 的支 持 细 胞 静 离 悬 浮 液 ， ２ Ｌ 养 板 中 ， 孑 加 入 支 持 细 胞 悬 在 ４孑 培 每 Ｌ 浮 液 同时 加 入 一 定 量新 鲜 的 培 养 液 ，７ ， Ｏ 培 ３℃ Ｃ
中一个 普 遍存 在 的现象 ，说 明 Ｆ Ｈ受体 具有 较 高 Ｓ 的同 源保 守 性 ［。 利 用 Ｆ Ｈ可 以刺 激 睾丸 Ｓ ｒ ｌ Ｓ ｅｔ ｉ ｏ 细 胞分 泌 雌二醇 ，建 立 一种 适 用 于 非人 灵 长类 动
物 恒河 猴 Ｆ Ｈ 的生 物测 定 法 。 Ｓ
１ 材 料 与 方 法
可证 号 ：Ｃ Ｓ ＸＫ（ ）０ ３ ０ ０ ， 验用 Ｓ 大 鼠需 沪 ２ ０ —０ ３ 实 Ｄ
要在 实 验室 中饲养 ３ ～５ｄ后 ， 行 实验 。② 恒 河 进 猴 ：Ｏ只 雌性 恒 河 猴 由福 建 省 非 人灵 长 类 实 验 动 ６
定 量 的标 准 样 品和 待 测定 的 样 品 ，７ 、 Ｏ 培 ３℃ Ｃ
测 定 了恒 河 猴 血 清 中 Ｆ Ｈ 含 量 。 Ｓ
结果
测 定 方 法 的 灵敏 度 为 ００ ｇ 管 ， 内和 批 间 误 差 分 别 为 ． ｎ／ 批 ２
（ ． － １ ５ ％和 （ ． ±２ １ ） 证 明 该 方 法 准 确性 高 ； 河 猴 血 清 中 Ｆ Ｈ 含 量 反 应 曲线 和 ｈ Ｓ 标 ２５ ４ ． ） ３－ ２ ４０ ２ ． ％， ７ 恒 ｓ ＦＨ 准 曲 线平 行 良好 。 明该 方 法 可 以 用 来检 测 恒 河猴 血 清 中 的 具 有 生物 活 性 的 Ｆ Ｈ 变 化 ． 映 了动 物 说 ｓ 反
正常 的 生 理 状 态 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 回 收 实验 表 明 ．在 该测 定 方 法 中加 入 ５ ｎ 、 ０ ｎ ２ ｇｈｚＨ 时 的 回 收 率 分 剐 为 ｇ １ ｇ、０ ｎ ｌ Ｓ
（０ ． ±５６ ） （９７ ±４５ ） （０ ．１ ５４ ） 说 明 测 定 结 果 的 可 靠 性 。 结 论 本 实 验 所 建 １ １ ８ ． ％、 ９ ． ２ ６ ８ ．１％、 １０６ ± ．２ ％，
河猴 各 ２ Ｏ只。 １２ 试 剂 ． 胶 原 酶 、 血 清 白蛋 白 （ Ｓ 、 二 牛 Ｂ Ａ） 雌 醇 、 烯 二 酮 、 酸 二 酯 酶 抑 制 剂 （ Ｘ） 于 Ｓｇ 雄 磷 ＭＩ 购 ｉ ．