免疫透射和免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白及补体的比较
800例免疫球蛋白与补体检测结果分析
IM增高病例多见于小儿感染性疾病 ( 0 g 4 %)和成人的重度感染 (5 2%),肾病综合征病例常常/ IG  ̄ g 减低NI g M ̄ b 体增高的 现象,多发性骨髓瘤IM检测大幅度增高达l倍 以上。 g O 3 补体系统 :C是补体 系统 中起关键作用 的一种成分 ,所有 . 4 , 的补体激活途径均需C 的参与。在本组试验统计中,C增高的病
IG、IA、IM和补 体C 、C。结果 :本 组试 验统 计 中 ,有一 半 出现异 常结果 ,可 见于各 种疾 病 。结论 :免疫 球 蛋  ̄IG、IA、I q g g g I g g g M ̄ 补 体C 、C的含量 变化 和多种 疾病 的发 生 、发展 密切相 关 ,是了解 机体 免疫状 态 的简易 检测方 法 。 ,
于 其他 类 免疫 球 蛋 白。IA 以结 合抗 原 ,但 不 能激 活补 体 的经 g可 典 途径 ,最新 的研 究 发现 ,血清 型IA 多参 与循 环 免疫 复 合抗 g大 体 ,以无炎性 反应 形 式清 除大量 的抗 原 ,是维 持机 体 内环境 稳定
l 资 料 与 方 法 11 一般 资 料 :本文 报告 的 80 检测 对象 ,大部分 为我 院的住 . 0例 院和 门诊 患者 ,少量 为 外 院的送 检 标本 ,年 龄 7 月 一8 岁 ,男 个 9
【 关键词】 免疫球蛋白;补体;免疫功能
免 疫 球 蛋 白与 补 体检 测 简 称 免疫 常 规 检测 ,是 临床 用 于 了 解 患 者 身体 免 疫 系统 状 态 的 常用 检 查 项 目。广 东 省 潮州 市 中心 医院 检 验科 采 用 比较 先 进 的速 率散 射 比浊 法在 临床 开展 免 疫 常 规 检 查 ,检 测 结 果 的 准确 性 较 以往 的单 向 免疫 扩 散 法 有很 大 的 提 高 …。对 开 展 免 疫 常 规 检 测 的8 0 患 者 的 检 测 结 果 进 行 分 0例
特定蛋白测定仪简介及应用
特定蛋白测定仪简介及应用特种蛋白分析仪(special protein analyzer)是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的一种检测方法。
其最大特点是特异性好,即某一特定抗原只与其相应的抗体反应。
蛋白质具有抗原性,可制备其相应特异性抗体。
以此抗体作为试剂,可以在不需分离的条件下,定量检测存在于复杂蛋白质混合物中的此种蛋白质。
因此免疫测定将血浆蛋白质的测定大大推进了一步,使血清中数十种具有临床意义的微量蛋白质可以简便地进行单个定量测定。
免疫测定的另一特点是敏感性高,可测出纳克(ng)水平的量。
将反应物进行标记而做免疫测定,如放射免疫测定和酶免疫测定,其敏感度可达皮克(pg)水平。
因有临床意义的多种血浆蛋白质含量一般均高于纳克(ng)水平,用简便快速的浊度法已可满足要求。
一、特定蛋白仪简介Grabar和Willams在1953年报道了免疫电泳(对流免疫电泳、火箭免疫电泳和免疫固定电泳)。
上述为经典免疫沉淀试验,测定范围窄10~100μg/ml,灵敏度低,繁琐费时,不能自动化。
1959年Schultze等报道了透射比浊法;1967年Ritchie等提出用激光散射测定补体和触珠蛋白形成的抗原抗体复合物,并称为散射比浊法。
特种蛋白分析仪根据监测散射光角度不同,分为免疫透射浊度(transmission turbidimetry)分析仪和免疫散射浊度(nephelometry)分析仪。
二、透射比浊法其基本原理是一定波长光线通过含抗原-抗体复合物溶液时,被其中的免疫复合物(IC)反射或遮挡、吸收而减弱。
在一定范围内,透射光被吸收的量与IC量成正比,后者又与相应抗原和抗体的量呈函数关系。
抗体量合适,即可从标准曲线获知抗原的量。
由于要求IC的数量足够,并且颗粒要足够大(35~100nm),本法的测定灵敏度和准确度相对较低。
三、散射比浊法散射比浊是指一定波长的光沿水平照射,光线通过检测溶液时,被其中所含的IC等微粒折射而部分偏转,产生散射光。
免疫学实验 免疫比浊(免疫球蛋白的测定)
3 免疫胶乳比浊法
原理
选择一种大小适中,均匀一致的胶乳颗 粒,吸附抗体后,当遇到相应抗原时,则 发生凝集,单个胶乳颗粒在入射光波长之 内,光线可透过,当两个胶乳凝集时,则 使透过光减少。这种减少的程度与胶乳凝 集成正比,与抗原量成正比。
(a)带抗体的胶乳在波长之内可透过光线; (b)结合后,则形成光线衰减
2. 海德堡(heidelberger)曲线理 论
2 抗体的质量
(1)特异性高 (2)效价高 (3)亲和力高 (4)抗血清来源
3 抗原抗体反应的溶液
• pH 6.5~8.5
• 电解质 离子强度、种类(磷酸盐缓冲液)
4 增浊剂的使用
• PEG、tween-20等非离子型亲水 剂
• 作用:消除蛋白质分子周围的电子 云和水化层,促进抗原、抗体分子 靠近,结合形成大分子复合物。
(二)类型
1. 透射免疫比浊法 2. 散射免疫比浊法 3. 免疫胶乳比浊法
1 透射免疫比浊法
原理:
抗原抗体在一定缓冲液中形成免疫复合物 (IC),当光线透过反应溶液时,由于溶液内复 合物粒子对光线的反射和吸收,引起透射光减 少,免疫复合物量越多,透射光越少,即光线 吸收越多,可用吸光度表示。吸光度和复合物 的量成正比,当抗体量固定时,与待检抗原量 成正比。用抗原标准品建立标准曲线,可测出 待检抗原含量。
•
样本管吸光度
• 浓度=————————×校准液浓度(g/L)
•
校管吸光度
• 结果及讨论
– 检测报告 – 检测意义
实验二、免疫浊度测定 ——免疫球蛋白检测
实验步骤见说明书 IgG9.77g/L IgA1.72g/L IgM1.37g/L
沉淀反应
微生物与免疫教研室
免疫比浊法检测免疫球蛋白
免疫浊度法测定中应注意的问题 1、伪浊度的影响
伪浊度形成原因很复杂,主要是抗血清含有非特异 性的交叉反应性杂抗体成分;增浊剂浓度和反应时间掌 握不当;样品本身的浊度处理不当;试剂的污染和变质 ;器材尤其是比色杯等不够清洁等因素. 2、非特异性散射光的影响
免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰,为避免这些 非特异性光散射的影响,应用透射比浊法时需保证抗体组 分在3%以下,散射比浊法需保证在 0.5%以下.
免疫比浊法检测免疫球蛋白
免疫学系
实验原理
免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中 特异结合,产生一定大小的复合物,形成光的 折射或吸收,测定这种折射或吸收后的透射 光或散射光作为计算单位.
当一束光
免
线通过溶
பைடு நூலகம்
疫
液受到光
比
散射和光
浊 法 分 类
吸收两个 因素的影 响而使光
的强度减
弱
散射比浊法: 在光源的光路方向50-960 角的方向上测量透射光强度 和被检测溶液中微粒浓度关 系的方法.
❖ 测量方法利用分光光度计测量被吸收的量.读数以
吸收单位A或OD值表示,A值反映了入射光和透射光的比 率.待测物中Ig含量可通过标准曲线计算得出.
❖ 待测样品中的抗原含量与吸光度呈正比,而与透射
光呈反比.
❖ 反应在PEG的作用下,加速复合物的形成.
透射比浊法测定原理
诱
光源
导
剂
透射比浊法测定原理
样品 光电计
在速率峰基础上完成的标准曲线
CONCENTRATION
RATE
方法评价:
敏感度高 快速不必达平衡 抗原抗体结合的动态测定,理论上测定不受 本底散射信号的影响 可检测微量样品
免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较
免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较刘少华;邓文平;李燕【摘要】目的探讨免疫透射比浊法和免疫散射比浊法测定免疫球蛋白(Ig)水平的关系.方法用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测252例健康体检人群的血清Ig,同时测定IgG高、低值水平,分析两种方法测定结果之间的关系.结果健康体检人群中血清IgG水平免疫透射比浊法[(11.46±4.92)g/L]测定与免疫散射比浊法[(11.85±3.72)g/L]测定相比,差异无统计学意义(P>0.05);免疫透射比浊法IgM[(1.51±1.06)g/L],免疫散射比浊法IgM[(1.60±0.91)g/L]和免疫透射比浊法IgA[(2.08±1.51)g/L],免疫散射比浊法IgA[(2.15±1.19)g/L]水平差异均无统计学意义(P>0.01).高、低值IgG用两种方法均可以测定.结论了解免疫功能水平时,测定Ig用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法均可,但免疫散射比浊法更有利于病情的监测.%Objective To compare transmission turbidity and scatter turbidity method on measuration of serum immunoglobulin (Ig) levels. Methods Serum Ig concentration was measured by transmission turbidity and scatter turbidity method in 252 healthy people. The high level and low level of IgG were also measured. The relationship between the two methods was analyzed. Results The results showed that the levels ofIgG[(11. 46 ±4. 92)g/L,(11. 85 ± 3. 72)g/L] ,IgM[(l. 51 ± 1. 06)g/L,(l. 60 ± 0.91)g/L] and IgA [(2. 08± 1. 51)g/L, (2. 15 ± 1. 19)g/L] had no significant difference in healthy people(P>0. 05) measured by transmission turbidity and scatter turbidity method. High and low level of IgG can detect by transmission turbidity and scatter turbidity method. Conclusion Transmission turbidity and scatter turbidity method can both be used fordetermination of IgG, while immune scatter turbidity method could be beneficial for evaluation of the disease condition.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)020【总页数】2页(P2034-2035)【关键词】散射测浊法和比浊法;免疫球蛋白【作者】刘少华;邓文平;李燕【作者单位】重庆市涪陵中心医院检验科,408000;重庆市涪陵中心医院检验科,408000;重庆市涪陵中心医院检验科,408000【正文语种】中文人体免疫球蛋白(Ig)测定,是检查人体免疫功能状态最直接而简单的方法,只有选择好的检测方法才能保证检验结果的准确性。
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较-精选文档
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较在临床上,对于人血清内特定蛋白的检测,一般是采取免疫散射比浊法、免疫透射比浊法进行检测;然而,在检测的过程中,如游离血红蛋白、脂蛋白等会对检测的结果带来一定的干扰,继而影响检测结果的准确性[1]。
对此,为保证血清检测的准确性,笔者对免疫透射比浊法、免疫散射比浊法在特定蛋白抗干扰能力的效果进行探讨,具体报道如下。
1.资料与方法1.1对象本次研究的样本源自于某医院门诊与住院患者当天的新鲜血清,其中排除存在脂血、溶血、浑浊等血清。
同时,事前准备好IgM、CRP等浓度不等的混合血清,具体为IgM低浓度1.0~1.5g/L,高浓度大于2.0g/L;CRP低浓度4~10mg/L,高浓度大于100mg/L。
1.2仪器设备选用Dade Behring BNProSpec特定蛋白测定仪、Roche Modular P全自动生化分析仪,试验所用试剂皆为仪器配套试剂。
同时选取三个干扰物,即FBil(游离胆红素)、CH(乳糜)、Hb(血红蛋白),每种干扰物各准备两瓶试剂盒,一瓶作为空白对照使用,另外,干扰物的浓度具体为FBil3280μmol/L、CH15000FTU、Hb49.6μmol/L[2]。
1.3研究方法首先,对混合血清进行制备,之后依据干扰试剂盒上的制备顺序,配制干扰物;将2ml的蒸馏水加入到每一个干扰物与空白对照内,复溶。
然后,按照1:9的比例,把已经准备好的干扰物和混合血清混合在一起,制作成干扰物样本,其中含有干扰物的为样本甲,未加干扰物为样本乙[3]。
把两个样本分别制定浓度不等的若干个样本,具体浓度见下表1所示。
最后采取特定蛋白测定仪与全自动生化分析仪展开特定蛋白的抗干扰试验检测,同时对其干扰率进行计算。
1.4统计学分析本次研究所得全部数据,均采取软件Excel加以分析与处理。
其中,干扰率计算公式为:含有干扰物组的均值减去空白对照组的均值,之后再除以空白对照组的均值。
免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较
免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较目的对免疫透射比浊法测定血清胱抑素C的方法学性能行初步评价,并与免疫散射比浊法进行比较。
方法应用Rohe Modular P全自动生化分析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪分别对血清胱抑素C进行初步的方法学评价,包括精密度、线性回归试验、回收试验、干扰试验。
结果免疫透射比浊法和免疫散射比浊法无论是批内还是批间精密度均符合要求,CV均0.95;免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的回收率均>96%;干扰物试验结果显示血红蛋白、三酰甘油及胆红素均对测定无明显影响。
结论免疫透射检验的灵敏度较高,检测范围广,与免疫散射试验的结果基本一致,系统误差小、抗干扰能力强,且更加快速、实用和便利。
[Abstract] Objective To initially evaluate the methodological properties of serum cystatin C by transmitted immunoturbidimetric assay and compare it with scatter turbidimetric assay. Methods Methodological evaluation was carried out for the serum cystatin C by Rohe Modular P automatic biochemical analyzer and SIEMENS BN ProSpec specific protein instrument,including precision,linear regression test,recovery test and interference test. Results Transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay both conformed to the requirements of intra-or inter-batch precision,and CV was 0.95;the recovery rates of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay were both>96%;interferent test results showed that hemoglobin,triglyceride and bilirubin had no significant effects on the determination. Conclusion The sensitivity of immune transmission test is high,the detection range is wide,which is consistent with the result of scatter turbidimetric assay. The system error is small,the anti-interference ability is strong,and it is more rapid,practical and convenient.[Key words] Transmitted immunoturbidimetric assay;Scatter turbidimetric assay;Serum cystatin C;Methodology;Test胱抑素C(CysC)又稱為半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。
免疫球蛋白与补体450例检测结果分析
I g A,因而认为 ,血 清型 I g A以无炎症 形式清 除大量 的抗 原 , 这 种 免疫 效 应对 维 持机 体 内环 境 的稳 定非 常 有 益。在 本 组 试 验统计 中 ,I g A增高病 例可 见于 ] g A型 肾炎 、 自身免疫 性 疾 病如类 风湿性关 节炎 、S L E、结节病 等。
0 弓 I 言 血 清免疫球 蛋 白与补 体 的测 定是检查 体液免疫 功 能最 常
用 的方法 ,I 临床 上 常常用 于 了解患 者 免疫 系统 的状 态和 功 能 。通 常对 I g G、I g M、I g A进 行 检 测 就可 以了解 血 清 免 疫 球 蛋 白的水平 ,对 c 3 、c 4进行 检测 可 以了解 血清补 体水平 。 我 院采 用免 疫 散射 比浊法 测定 血 清免 疫球 蛋 白与补 体 ,有 助于 临床 医生 正 确判 断各 种疾 病 的病 情 。现收 集 2 o 1 0年 1 月至 2 0 1 3年 2月来 我院 检查 免疫 球蛋 白及补 体 的 4 5 0 例 患 者 ,并对 其 测定 结 果进 行 分析 ,探 讨 上述 检 测在 临 床疾 病 诊断 中的参考作 用 ,报 告如下 。
自及 补 体 的 住 院及 门诊患 者 4 5 0例 ,其 中男 性 2 0 0 例 。女 低 1 3 8 例 ; c 4 增5 6 高例 ,减低 8 5 例 。具体见表 1 。 表1 4 5 0例免疫球 蛋白与补体检测结果 ( 例)
3 讨论
免 疫 球蛋 白约 占血 浆 蛋 白总 量 的 2 0 %,主 要存 在 于 血 浆 中 ,也见 于其他体 液 、组织 和一些分 泌液 中 ,具 有抗体 活 性和 ( 或 )抗 体 样结 构 ,可 以特 异 性 识别 和 结合 抗 原 ,生 成 抗 原 一抗体 复合 物 ,并 引发一 系列 生物 学 效应 。补 体 是 存 在 于血 清 、组织 液 和 细胞 膜表 面的 的一 组不 耐 热 的经 活 化 后 具有 酶 活性 的蛋 白质 。补 体广 泛 参与 机 体微 生 物 防御 反 应 以及 免 疫 调节 ,也 可介 导 免疫 病 理 的损 伤性 反 应 ,是 体 内具有 重要生 物学作 用的效应 系统和效 应放 大系统 【 】 】 。各 种 疾 病都 可 引起 免疫 球 蛋 白和 补 体含 量发 生 程度 不 同 的改
免疫球蛋白、补体检查项目及临床意义
免疫球蛋白、补体检查项目及临床意义体液免疫主要涉及了抗体与补体系统,其中抗体属于免疫球蛋白,抗体主要见于血清中,也可出现在其他体液或外分泌液,其重要功能在于特异性地结合抗原,免疫球蛋白作为一组由浆细胞合成分泌的球蛋白,可发挥抗体活性,免疫球蛋白类型及含量在不同疾病和感染阶段均有所差异性。
而补体系统可参与机体的免疫调节和抗感染中,并能够介导病理性反应,是人体重要的免疫效应系统以及放大系统。
1.什么是免疫球蛋白?免疫球蛋白是一组有着抗体活性的球蛋白,处于体液、血清、外分泌液以及部分细胞膜上,检测免疫球蛋白的主要目的是为了评估机体的免疫功能,分析机体对不同细菌与病毒的抵抗力,判断机体在识别各类抗原侵入方面的能力。
免疫球蛋白可发挥重要的生理功能,血清和体液免疫球蛋白水平可因疾病而有所变化。
免疫球蛋白的异常波动可提示机体的体液免疫功能情况,联合患者的临床症状进行评估,可对免疫增生性疾病、感染性疾病等进行识别和诊断,有利于为临床监控与预后管理工作提供参考。
根据不同的功能与理化性质,可将免疫球蛋白分为5类,分别是IgA、IgG、IgD、IgE、IgM。
免疫球蛋白主要是借助特异性的抗原抗体反应进行检测。
血清中的IgA、lgG、IgM 水平较高,可通过免疫散射比浊法、免疫透射比浊法、单向免疫扩散法完成检测。
IgE、IgD水平较低,多通过放射免疫(RIA)、ELISA、化学发光法、荧光偏振技术进行检测。
有文献报道提出,虽然免疫球蛋白能够暂时增强人体的免疫力,但维持时间受限,并且免疫球蛋白属于外来的异体蛋白,长时间反复使用不仅无法增强免疫力,甚至可能会引起自身抗体的形成。
2.什么是补体?补体系统是天然免疫的重要组成,在监测病原体免疫及维持组织稳态中发挥了积极作用。
补体是一组具有酶样活性的糖蛋白,其不耐热,处于人类与脊椎动物组织液、血清以及部分细胞膜上,可以参与机体的免疫调节和抗感染防御反应中,并能介导免疫病理的损伤性反应,是体内起到关键生物学效用的效应放大系统。
透射比浊法和散射比浊法测定免疫球蛋白和补体的评价
[ 3 ] 熊立凡 , 刘成玉. 临床检 验基 础 [ M] . 4版 . 北京 : 人 民卫 生 出 版
社 , 2 0 0 7: 1 7 2 .
[ 4 ] 薛冰蓉 , 杨渝伟 , 陈曦 , 等. UF 一 1 0 0 0 i 尿沉渣分析仪检测尿红细胞 、
白细 胞 影 响 因 素 的 探 讨 [ J ] . 国 际检验 医学 杂志 , 2 0 1 1 , 3 2 ( 1 1 ) :
北京 : 人 民 军 医 出 版社 , 2 0 0 7 : 5 7 .
AX - 4 2 8 0尿 干 化 学 分 析 仪 的 白细 胞 检 测 原 理 为 白 细 胞 酯 酶法 , 粒 细 胞 质 内含 有 酯 酶 , 可作用于试带模块 中的吲哚酚酯 , 从而释放 出吲哚酚 , 后 者 与重 氮盐 反 应 生 成 紫 色 络 合 物 。 白 细 胞 中 以 中性 粒 细 胞 含 酯 酶 最 多 , 单 核 细 胞 次 之 。尿 干 化 学 分 析 仪检 测 出现假 阴性 的尿 液, 多 数 为 肾移 植 、 肾炎 、 慢 性 扁 桃 体 炎、 上 呼 吸 道 感 染 等 患 者 的尿 样 。在 肾 移植 患 者 发 生 排 斥 反 应 时, 尿 中 以 淋 巴细 胞 为 主 , 或 其 他 病 因 引 起 的 淋 巴 细 胞 尿 会 产 生 假 阴性 的结 果 _ 8 ] 。高 蛋 白 、 高 密度尿 、 尿 中 大 量 葡 萄 糖 或 含 有 大 剂 量 头孢 菌 素 、 庆 大霉素 等药物 时 , 亦可使 结果偏 低或 出 现 假 阴性 [ 。本 研 究 共 发 现 7 4例 尿 干 化 学 假 阴 性 , 尿 液 镜 检 主 要 是 淋 巴 细胞 , 尿 白细 胞 聚 集 成 团 , 此 外 或 许 与 大 剂 量 抗 菌
免疫比浊法检测免疫球蛋白
随着技术的进步,免疫比浊法的检测过程将更加自动化和标准化,提高检测效率和准确 性。
多项目联合检测
未来免疫比浊法有望与其他免疫分析方法联合使用,实现多项目同时检测,提高诊断效 率。源自未来发展趋势及新技术应用前景
• 拓展应用领域:随着对免疫球蛋白研究的深入,免疫比浊 法的应用领域将进一步拓展,如疾病预后评估、免疫治疗 监测等。
力。
质评样本处理
02
按照质评计划要求处理质评样本,确保结果的准确性和可比性
。
结果分析与反馈
03
对室间质评结果进行认真分析,及时发现问题并采取改进措施
。
问题分析与解决策略
问题识别
通过室内质控和室间质评结果 分析,识别存在的问题。
原因分析
针对问题进行深入的原因分析 ,包括试剂、仪器、操作等方 面。
改进措施
影响。
06
总结与展望
免疫比浊法检测免疫球蛋白优势与局限性
灵敏度高
免疫比浊法能够检测到非常低浓度的 免疫球蛋白,具有较高的灵敏度。
特异性强
该方法使用的抗体具有高度的特异性 ,能够准确识别并定量目标免疫球蛋 白。
免疫比浊法检测免疫球蛋白优势与局限性
• 操作简便:免疫比浊法检测步骤相对简单 ,易于自动化和标准化,适用于大规模样 本检测。
分为血清型和分泌型两 种。血清型IgA主要存在 于血液中,而分泌型IgA 主要分布于呼吸道、消 化道等黏膜表面,是黏 膜免疫的主要抗体。
正常血清中含量极低, 主要参与I型超敏反应和 抗寄生虫免疫。当机体 发生过敏反应时,血清 中IgE水平会显著升高。
主要存在于B淋巴细胞表 面,作为B细胞分化发育 成熟的标志。在血清中 含量很低,其功能尚不 完全清楚。
免疫透射比浊法 透射免疫比浊法检测的原理是
免疫透射比浊法一、原理当光线通过一个浑浊介质溶液时,由于溶液中存在混浊颗粒,光线被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比,这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。
这一方法早于1959 年Schultre 和Schuick 等报道应用于血浆蛋白与其抗体结合后形成复合物,导致浊度的改变,再进行透射比浊测定,一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法,称为免疫透射比浊法。
其原理是,利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物,通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法。
在介质溶液中,抗原与特异性抗体在一定条件下才能形成复合物,一定的条件包括:①对抗体的要求,作为体液或组织中蛋白质种类很多,若要快速特异检测,要求有单价特异抗体才能与抗原形成复合物。
某一种蛋白质,有其特异抗体才能与该抗原结合,形成免疫复合物进行定量,若抗体不纯混杂有另一种或两种少量的抗体,这种免疫复合物就不是单一复合物而是大杂烩,结果偏高;②抗原抗体比例适当,因免疫复合物形成有三个阶段,第一阶段是复合物形成抗原抗体复合物;第二阶段是初步形成抗原抗体复合物,此阶段是复合物交联成大的网格状结构;第三阶段是复合物聚合产生絮状沉淀。
只有在抗原与抗体等价时即无过剩抗体,此时,复合物的结合与解离处于平衡状态,其混浊程度达高峰。
在抗体过量时,随抗原量的增加而复合物形成也增加,其测定只能在反应曲线的左侧进行(见图18-4 );3—般要求溶液中有非离子性亲水多聚体促进免疫复合物的形成,如聚二乙醇6000等。
溶液pH为6.5〜8.0之间为宜。
载脂蛋白有形成两性螺旋片(amphipathic helix )的特性, 对脂质(特别是磷脂)有高度亲和力,与脂质结合后有时会掩盖抗原位点或构象改变,可以部分或完全丧失对抗血清的特异反应。
为此,载脂蛋白检测过程中有必要先暴露抗原位点,所用试剂有表面活性剂,尿素,盐酸胍和吐温等解离蛋白剂,或用四甲基脲脱脂或有机溶剂脱脂等暴露抗原决定簇等方法,血清脂蛋白颗粒中的载脂蛋白,能在短时间内形成抗原抗体复合物进行定量;④抗原不能过量,因为抗原过量,抗原抗体复合物形成不但不增加,反而会减少,光散射或光吸收减少,检测结果反而偏低。
一种检测人血清中补体Clq浓度的试剂盒及其方法[发明专利]
专利名称:一种检测人血清中补体Clq浓度的试剂盒及其方法专利类型:发明专利
发明人:刘颖成,朱慧琳,杨杰,朱晓敏,刘颖冰,王泉龙,刘中令申请号:CN201110226543.1
申请日:20110809
公开号:CN102323427A
公开日:
20120118
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明属于生物工程领域,提供了一种免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测人血清中补体Clq浓度的试剂盒,解决了现有技术中采用免疫扩散法和ELISA双抗体夹心技术测定补体C1q浓度步骤复杂,准确性不高、重复性差的技术问题,包括两种试剂,第一种试剂由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、PEG6000、EDTA-NA和TX-100组成,第二种试剂由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、PEG6000、EDTA-NA、TX-100和兔抗人补体C1q抗血清组成。
本发明还提供了采用上述的试剂盒检测人血清中补体Clq浓度的方法,本发明的试剂盒和方法用测定补体C1q浓度的步骤简单方便,准确性高、重复性好,用于自动化分析仪。
申请人:上海北加生化试剂有限公司
地址:201802 上海市嘉定区南翔镇科富路265号
国籍:CN
代理机构:上海申汇专利代理有限公司
代理人:林炜
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免疫比浊法名词解释
免疫比浊法名词解释
嘿,朋友们!今天咱来聊聊免疫比浊法。
这免疫比浊法啊,就好比是一场“战斗”!
想象一下,身体里有好多小“敌人”,也就是各种抗原啦。
而我们要怎么发现这些“敌人”呢?免疫比浊法就闪亮登场啦!它就像是一个超级厉害的“侦探”,能把这些抗原给揪出来。
它的原理呢,其实也不难理解。
就是让抗原和专门对付它的抗体相遇,然后它们俩一结合,就会形成一些复合物。
这些复合物可不是普通的东西哦,它们会让溶液变得浑浊起来。
就好像原本清澈的水里突然多了很多杂质,变得不那么透明了。
然后呢,我们就可以通过一些仪器,去测量这种浑浊度。
浑浊度越高,说明抗原越多呀!这是不是很神奇?
你说这免疫比浊法是不是很厉害?它能帮我们检测好多东西呢!比如说一些疾病的标志物,这样医生就能更快更准确地判断我们的身体状况啦。
而且啊,免疫比浊法还挺“聪明”的呢!它可以分为透射比浊法和散射比浊法。
这就像是有两个不同“性格”的侦探,各有各的本事。
透射比浊法呢,就像是一个老老实实一步一个脚印的侦探,它通过直接测量透过溶液的光的强度来判断。
而散射比浊法呢,就像是一个更机灵一点的侦探,它通过测量散射光的强度来发现线索。
你看,这免疫比浊法多有意思啊!它在医学领域可是发挥了大作用呢。
没有它,我们怎么能那么快那么准确地知道自己身体里的情况呢?
免疫比浊法真的是医学检测的好帮手啊!它就像是一道光,照亮了我们了解身体内部世界的道路。
它让我们对疾病有了更及时的发现和应对,难道不是吗?所以啊,可别小瞧了这免疫比浊法,它可是守护我们健康的重要一环呢!。
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较彭凤;徐晓萍;王琳;应春妹【摘要】Objective To compare the anti-interference abilities of immune turbidimetry and immune nephelometry for detecting specific proteins [ immunoglobulin G ( IgG) , immunoglobulin M (IgM ) and C reactive protein ( CRP) ] through the interferers of free bilirubin ( FBil) , conjugated bilirubin ( CBil) , hemoglobin ( Hb) and chyle ( CH ). Methods A total of 6 mixed serum samples were prepared under 2 levels (high/low) of specific proteins (IgG: 8-12 g/L, >16 g/L;IgM:1.0-1.5 g/L, > 2. 0 g/L;CRP:4-10mg/L, >100mg/L). The 4 interferers were prepared into 5 different concentrations(FBil:656, 1 312, 1 968, 2 624 and 3 280 μmol/L;CBil:688, 1 376, 2 064, 2 752 and 3 440 μmol/L;Hb:9.9, 19.8, 29.8, 39. 7 and 49.6μmol/L;CH:3 000, 6 000, 9 000, 12 000 and 15 000 FTU) by rules(l: 5 , 2- 5 , 3: 5, 4: 5 and 5: 5) , and the interferers were added to the mixed serum. The concentration of the specific proteins was detected by immune turbidimetry and immune nephelometry respectively, and the interference rate was calculated. The anti-interference abilities of the 2 methods were calculated according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) EP7-A standard. The average concentration of the specific proteins with different in terferers ±5% of the control tubes at the same concentration was considered to have interference. Results By the immune nephelometry, the values to detect IgM (high level ) and CRP ( low level) with theinterferer of Hb (9. 9 and 29.8 μmol/L)and Hb(9.9, 29.8 and 39.7 μmol/L) respectively, also the values to detect IgM (high level and low level ) with the interferer of CH (9 000, 12 000 and 15 000 FTU)and CH (6 000, 9 000,12 000 and 15 000 FTU) were all considered to have interference. However, by the immune turbidimetry,the values to detect IgG, IgM and CRP withthe 4 interferers were considered to have no interference. Conclusions To 4 interferers (FBil, CBil, Hb and CH) ,the anti-interference ability of immune turbidimetry is better than that of immune nephelometry. The immunernturbidimetry shows better accuracy to detect specimens with the interferers of lipidemia and haemolysis as large particles in the clinical application.%目的比较免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白[免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和C反应蛋白(CRP)]时对游离胆红素(FBil)、结合胆红素(CBil)、血红蛋白(Hb)和乳糜(CH)的抗干扰能力.方法收集血清样本,分别制备高、低2种浓度(IgG:8 ~ 12 g/L、>16 g/L;IgM:1.0 ~ 1.5 g/L、>2.0 g/L;CRP:4 ~ 10 mg/L、>100 mg/L)的特定蛋白混合血清6管,按1∶5、2∶5、3∶5、4∶5、5∶5将4种干扰物分别配成5种不同浓度(FBil:656、1 312、1 968、2 624、3 280 μmol/L;CBil:688、1 376、2 064、2 752、3440 μmol/L;Hb:9.9、19.8、29.8、39.7、49.6 μmol/L;CH:3 000、6 000、9 000、12 000、15 000 FTU)添加于混合血清中,用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法分别检测相应的特定蛋白浓度,计算干扰率,按美国临床实验室标准化协会(CLSI) EP7-A文件评价2种方法的抗干扰能力.添加不同浓度干扰物之后的特定蛋白测定均值超过同一浓度下的空白对照管的±5%为产生了干扰作用.结果免疫散射比浊法检测高浓度IgM、低浓度CRP分别在Hb浓度为9.9、29.8和9.9、29.8、39.7 μmol/L时有干扰作用;免疫散射比浊法测定高、低浓度IgM分别在CH浓度为9 000、12 000、15 000和6 000、9 000、12000、15 000 FTU时有干扰作用;而4种干扰物对免疫透射比浊法检测IgG、IgM和CRP均无干扰作用.结论免疫透射比浊法对临床常见的4种干扰物(FBil、CBil、Hb和CH)的抗干扰能力优于免疫散射比浊法.免疫透射比浊法对于干扰物颗粒较大的脂血、溶血样本具有更高的准确性.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2013(028)002【总页数】4页(P142-145)【关键词】免疫球蛋白G;免疫球蛋白M;C反应蛋白;免疫透射比浊法;免疫散射比浊法;抗干扰能力【作者】彭凤;徐晓萍;王琳;应春妹【作者单位】上海交通大学医学院附属仁济医院检验科,上海200127【正文语种】中文【中图分类】R446.62在临床检测样本时,经常遇到溶血、黄疸和脂血样本。
一张表读懂C反应蛋白(CRP)各类检验方法利弊
一张表读懂CRP各类检验方法利弊CRP又称C-反应蛋白,已成为诊断界又一颗冉冉升起的新星。
当患者身体发生炎症反应时,CRP会第一时间在肝细胞中合成,其含量也会伴随患者的感染程度加重而不断升高,当患者疾病恢复时又会立即降低到正常水平。
正是这位号称诊断界“及时雨”的急性蛋白,作为急性时相反应的一个极灵敏的指标,在炎症的临床感染、糖尿病、心脑血管类疾病等领域都应用广泛。
今天为大家罗列了CRP 日常检验工作中的常见检测方法,并对各类方法学的优缺点进行归纳。
CRP的检验方法通常可以归为两大类,一类是非标记免疫技术,另一类是标记免疫技术。
前者的主要包括单向免疫扩散、乳胶凝集法和免疫比浊法,这几类方法学的反应原理中都不涉及分子标记的过程故归属于非标记免疫技术。
标记免疫技术主要包括免疫层析法、ELISA、放射免疫、化学发光和电化学发光,后几类方法学的反应原理中都参与了分子标记的过程,只不过是彼此之间的标记物不同。
单向免疫扩散法又称单扩法,是临床上最早应用的CRP研究方法,它也是一种基于凝集反应原理的测试方法,其反应原理是在琼脂胶中混入抗体使得待测抗原从局部向琼脂内自由扩散,其形成的可见沉淀环与待测抗原量相关。
但此类方法易存在抗原过量现象从而导致体系内不出现沉淀,故当CRP浓度过高时临床会出现假阴性现象。
乳胶凝集法是以乳胶颗粒作为载体的一种间接凝集试验,即将抗原吸附于乳胶颗粒表面,特异性抗体与之结合后产生凝集反应,但这种方法易受RF因子干扰,同时也存在假阳性和假阴性的现象。
这两种方法学本身制约了其检测浓度的线性范围,实际测量结果误差较大,目前临床应用已很少。
免疫比浊法,又可分为透射比浊和散射比浊,两者在CRP反应原理上相似,只是在光波接收方式上不同。
散射比浊由于其光波接收方式的特点,通常测量结果的灵敏度要优于透射比浊。
透射比浊反应中需要分子足够大、足够多,故临床常添加增敏剂来提高反应灵敏度,胶乳增强法便因此出现了。
免疫比浊法测定血清前蛋白及临床意义
免疫比浊法测定血清前蛋白及临床意义
陈克江
【期刊名称】《现代医药卫生》
【年(卷),期】2004(020)012
【摘要】血清前蛋白(Preablumin PA)是肝功能损害的早期诊断、疗效观察和预后判断的一项特异、敏感的指标,其检测方法主要有电泳法、单向免疫扩散法、免疫电泳法和放免法等,近年来又相继出现了速率散射法和散射比浊法,其中电泳法所得的血清PA并非真值;单向免疫扩散法和免疫电泳法虽然特异性高,但所需时间较长;速率散射法和散射比浊法需要特殊的设备;免疫比浊
【总页数】1页(P1163-1163)
【作者】陈克江
【作者单位】永川市中医院,重庆,永川,402160
【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
1.血清C4的免疫透射比浊法测定及其临床意义 [J], 杨朝国;廖晓
2.免疫比浊法测定血清前白蛋白及临床意义 [J], 谭韬;何永华
3.免疫透射和免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白及补体的比较 [J], 但刚;胡宗海;李同心
4.透射比浊法测定血清免疫球蛋白及补体C<sub>3</sub> [J], 姜淑华;王安林;刘义夫
5.免疫比浊法测定人血清前白蛋白及其应用 [J], 韦京豫;高兰兴;金宏;许志勤;王宗印;王先远
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血清免疫球蛋白和补体检测在肾病综合症诊断和治疗中的作用分析
血清免疫球蛋白和补体检测在肾病综合症诊断和治疗中的作用分析摘要目的将血清免疫球蛋白和补体检测技术应用于肾病综合症患者,进而探讨该技术在病患诊断以及治疗中的作用, 为后期合理广泛临床应用提供应有价值。
方法选择于2021年1月至2021年7月期间在我院住院的58例肾病综合症患者作为观察组,而将在此期间检查的56例健康体检者作为对照组。
采用免疫比浊法来测量每位样本的补体成分(C3、C4)和血清免疫球蛋白(IgA、IgG与IgM)值并收集数据进行分析。
结果对比患者之间的血清补体成分值可知,虽然两组的C4 值差异性小(P>0.05),但观察组C3值较对照组明显偏低,观察组C3值:(0.93±0.06)g/L,对照组C3值(1.45±0.76)g/L。
测得的数据具有显著性差异(P<0.05)。
另外,通过将两组采用免疫比浊法测得的相应免疫球蛋白各项数据的结果比较得知,观察组IgA与IgG值较对照组显著降低,观察组IgA(1.69±0.63)g/L、IgG(4.81±0.32)g/L,对照组IgA(2.78±1.32)g/L、IgG(13.65±2.02)g/L;IgM值对照组却明显更高,观察组IgM (2.12±0.34),对照组IgM (1.14±0.29),且三种Ig值数据差异有统计学意义(P<0.05)。
结论血清免疫球蛋白和补体检测在肾病综合症诊断和治疗过程中的指导性强,值得广泛推广并应用于临床。
关键词:免疫比浊;血清免疫球蛋白;补体;肾病综合症1.资料与方法本次研究中选择于2021年1月至2021年7月期间在我院住院的58例肾病综合症患者作为观察组,其中包含男性研究对象30例,女性28例。
同时将在此期间检查的56例健康体检者作为对照组,其中男性研究对象28例,女性28例,并且所有健康体检者内不存在肾脏病、糖尿病以及风湿病等可能造成检查结果偏差大的疾病,以上所有参与本次研究的研究对象年龄在20-58岁,平均年龄在34.8±1.4岁,并且在年龄、性别等方面无统计学显著性差异(P>0.05),因而具有可比性。
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s r m a l s e u s mp e we e r me s r d a u e wi i t mm u e r n mi so a d m mu e c t e t r i iy y e k n h n t a s s i n n i n s a t r u b d t b B c ma Co he S n hr n u r y c o IX 2 0
摘要
目的: 比较免疫透射和免疫散射 比浊法测定免疫球蛋 白和补体时 的准确性、 精密度 、 偏离度及测定范 围。方法 : 采
用 克曼 I 2 与 DE A特定蛋 白分析仪 , x一 O I T 分别以免疫透射和免疫散射 比浊法 , 同一临床标本测定血清 中免疫球 对
蛋 白 ( G、 A、 M ) 补 体 ( 3 C ) I I I 和 g g g C 、4 的含 量 。结 果 : 种 仪 器 测 定 IG、g IM 、 3 准 确 性 、 密 度 均 良好 。两 法 两 g IA、g C 、 精 各浓 度 值 测 定结 果 的 预 期偏 差 均 在 可接 受范 围 。结 论 : 克曼 I 一 O 用免 疫 透 射 比浊 法 与 D I 贝 2应 X E TA特 定 蛋 白分 析仪
应用免疫散射比浊法测定免疫球蛋 白和补体准确性 、 精密度均 比较好 , 且散射 比浊法优于透射 比浊法。
关键 词 免疫 球 蛋 白 ; 体 ; 射 比浊 ; 射 比浊 补 透 散 R4 6 6 4. 2 文 献 标 识码 A 文章 编 号 1 0 0 8 (08 0 —0 5 0 0 4— 18 2 0 )5 6 9— 3 中 图分 类 号
s a t rt bi t t o c te ur diy m h d e
Ga g, n Zn og . J To g x n De a t n f a o a o y, n r lHo pt l f e gd la y C mma d, he d .6 0 8 ,C ia I n i pr me to b r t r Ge ea s i n u Mi tr o L a o Ch i n C n u 10 3 hn g
i mm n g o ul n o l me t b mmu e ta s s i n mm u e s a t r t r i iy i c u a e a d p e ie F l e mo e mmu e n o l b i a d c mp e n y i n n r n mison a d i n c t e u b d t s a c r t n r c s . ur h r r ,i n s a t r t r d L sbe t r t a mm u e ta s s i n t r i iy a c r i g t o r h n ie a a y i fr s s c t e u biiv i te b n i n r n mi so u b d t c o d n O c mp e e s v n l ss o e uh .
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西南 国防医药 2 0 0 8年第 1 8卷第 5 期
・
・69 ・ 5
论著 ・
免 疫 透 射 和 免 疫 散 射 比 浊 法 测 定 血 清 免 疫 球 蛋 白及 补1 03 ( 都军 区总 医 院 检验 科 , 成 四川 成 都
Bo h mityAn lz ra d Dv a P o en An lz r ep c iey Re u t: ea c rc n rcso ft to si ee miaino ic e sr ay e n h r ti aye 、rs e tv l. s ls Th c ua y a d p e iino womeh d nd tr n t f o
I G,I g gA,IM .C3.C4 g we eg o . Th x e td d vain ofb t eh d si c e tbl a g . ncu i F e d tcin o r o d ee p ce e it o h m t o swa n ac p a e rn e Co l son: b ee t f o o
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Co p rs n ofd tr i to o e u mm a o lbu i nd c m p e e tb t e m m u r n m iso u b d t nd i m a io ee m na in fs r m i n go ln a o lm n ewe n i ne ta s s i n t r i iy a mm u ne