散射免疫比浊法
免疫荧光法与免疫散射比浊法测定超敏C反应蛋白的相关性及其在感
免疫荧光法与免疫散射比浊法测定超敏C反应蛋白的相关性及其在感染中的价值探讨目的研究免疫荧光法与免疫散射比浊法测定超敏C反应蛋白的相关性及其在感染中的价值。
方法选取我院收取的確诊为各种类型感染疾病的患者240例作为观察组，同时选取于我院接受健康体检的人员240名作为对照组，分别使用免疫荧光法与免疫散射比浊法对所有参与研究者的血液标本进行超敏C反应蛋白检测，分析检测结果。
结果观察组超敏C反应蛋白水平明显高于对照组，差异具有统计学意义（p＜005）。
使用免疫荧光法与免疫散射比浊法对接受研究者的超敏C反应蛋白水平进行检测的差异无统计学意义（P>005）。
结论在进行超敏C 反应蛋白进行检测时，利用免疫荧光法与免疫散射比浊法测定均能够取得良好的测定效果，对各种感染患者进行超敏C反应蛋白检测的诊断和预后判断具有较大的价值。
免疫荧光法检测需要的血量比较少，检测需要的时间比较短，在单个快速测定的门诊或急诊工作中比较适用，免疫散射比浊法具有较简单的操作，有较好的重复性，对于批量测定比较适用，具体使用过程中要根据具体情况选择合适的检测方式。
标签：免疫荧光法；免疫散射比浊法；超敏C反应蛋白；相关性；感染；价值人体在受到细菌感染或者出现创伤后，会出现超敏C反应蛋白升高的情况，随着患者疾病的好转，超敏C反应蛋白也会相应下降，所以临床上经常对各种炎性疾病患者、心血管疾病患者和创伤患者进行超敏C反应蛋白检测[1]。
免疫荧光法与免疫散射比浊法是临床上较为常用的超敏C反应蛋白检测方式，为了研究免疫荧光法与免疫散射比浊法测定超敏C反应蛋白的相关性及其在感染中的价值，选取我院收取的确诊为各种类型感染疾病的患者60例作为观察组，同时选取于我院接受健康体检的人员240名作为对照组，分别使用免疫荧光法与免疫散射比浊法对所有参与研究者的血液标本进行超敏C反应蛋白检测，报告如下：资料与方法一、基本资料选取我院收取的确诊为各种类型感染疾病的患者240例作为观察组，男132例，女108例，年龄18岁～66岁，平均年龄（43.2±2.5）岁，患者所患疾病包括肺炎、风湿性关节炎以及接受各类外科手术的患者等。
免疫透射和免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白及补体的比较
ｓ ｒ ｍ ａ ｌ ｓ ｅ ｕ ｓ ｍｐ ｅ ｗｅ ｅ ｒ ｍｅ ｓ ｒ ｄ ａ ｕ ｅ ｗｉ ｉ ｔ ｍｍ ｕ ｅ ｒ ｎ ｍｉ ｓｏ ａ ｄ ｍ ｍｕ ｅ ｃ ｔ ｅ ｔ ｒ ｉ ｉｙ ｙ ｅ ｋ ｎ ｈ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ｉ ｎ ｎ ｉ ｎ ｓ ａ ｔ ｒ ｕ ｂ ｄ ｔ ｂ Ｂ ｃ ｍａ Ｃｏ ｈｅ Ｓ ｎ ｈｒ ｎ ｕ ｒ ｙ ｃ ｏ ＩＸ ２ ０
摘要
目的： 比较免疫透射和免疫散射 比浊法测定免疫球蛋 白和补体时 的准确性、 精密度 、 偏离度及测定范 围。方法 ： 采
用 克曼 Ｉ ２ 与 ＤＥ Ａ特定蛋 白分析仪 ， ｘ一 Ｏ Ｉ Ｔ 分别以免疫透射和免疫散射 比浊法 ， 同一临床标本测定血清 中免疫球 对
蛋 白 （ Ｇ、 Ａ、 Ｍ ） 补 体 （ ３ Ｃ ） Ｉ Ｉ Ｉ 和 ｇ ｇ ｇ Ｃ 、４ 的含 量 。结 果 ： 种 仪 器 测 定 ＩＧ、ｇ ＩＭ 、 ３ 准 确 性 、 密 度 均 良好 。两 法 两 ｇ ＩＡ、ｇ Ｃ 、 精 各浓 度 值 测 定结 果 的 预 期偏 差 均 在 可接 受范 围 。结 论 ： 克曼 Ｉ 一 Ｏ 用免 疫 透 射 比浊 法 与 Ｄ Ｉ 贝 ２应 Ｘ Ｅ ＴＡ特 定 蛋 白分 析仪
应用免疫散射比浊法测定免疫球蛋 白和补体准确性 、 精密度均 比较好 ， 且散射 比浊法优于透射 比浊法。
关键 词 免疫 球 蛋 白 ； 体 ； 射 比浊 ； 射 比浊 补 透 散 Ｒ４ ６ ６ ４． ２ 文 献 标 识码 Ａ 文章 编 号 １ ０ ０ ８ （０８ ０ —０ ５ ０ ０ ４— １８ ２ ０ ）５ ６ ９— ３ 中 图分 类 号
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较目的：对免疫透射比浊法与免疫散射比浊法在检测特定蛋白抗干扰能力的效果进行对比。
方法：收集血清样本，且制作浓度不同的特定蛋白混合血清，同时将比例不同的两种干扰物置于混合血清当中，之后再用免疫透射比浊法、免疫散射比浊法对其进行测定，且对干扰率加以计算，以了解两种检测方法的抗干扰能力。
结果：CH在9000与15000时，免疫散射比浊法对IgM进行检测受到干扰;Hb在9.9与29.8浓度时，免疫散射比浊法对高浓度IgM、低浓度CRP检测时受到干扰;采取免疫透射比浊法对三种含有干扰物的特定蛋白进行检测时，未受到任何干扰影响。
结论：在对CH、Hb等干扰物的抗干扰能力方面，免疫透射比浊法比免疫散射比浊法更为优越。
标签：特定蛋白;免疫透射比浊法;免疫散射比浊法在临床上，对于人血清内特定蛋白的检测，一般是采取免疫散射比浊法、免疫透射比浊法进行检测;然而，在检测的过程中，如游离血红蛋白、脂蛋白等会对检测的结果带来一定的干扰，继而影响检测结果的准确性[1]。
对此，为保证血清检测的准确性，笔者对免疫透射比浊法、免疫散射比浊法在特定蛋白抗干扰能力的效果进行探讨，具体报道如下。
1.资料与方法1.1对象本次研究的样本源自于某医院门诊与住院患者当天的新鲜血清，其中排除存在脂血、溶血、浑浊等血清。
同时，事前准备好IgM、CRP等浓度不等的混合血清，具体为IgM低浓度1.0～1.5g/L，高浓度大于2.0g/L;CRP低浓度4～10mg/L，高浓度大于100mg/L。
1.2仪器设备选用Dade Behring BNProSpec特定蛋白测定仪、Roche Modular P全自动生化分析仪，试验所用试剂皆为仪器配套试剂。
同时选取三个干扰物，即FBil（游离胆红素）、CH（乳糜）、Hb（血红蛋白），每种干扰物各准备两瓶试剂盒，一瓶作为空白对照使用，另外，干扰物的浓度具体为FBil3280μmol/L、CH15000FTU、Hb49.6μmol/L[2]。
免疫比浊法检测免疫球蛋白
抗体的特异性、效价、亲和力 3、反应的溶液 4、增浊剂的使用
透射比浊法和散射比浊法优缺点比较
1、透射比浊操作简便，适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度 计，几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想， 所需的抗血清量大，检测的周期较长。
2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快速。其缺点是需特 定的分析仪器，试剂价格高。
本实验中应用聚乙二醇的生理特性聚乙二醇是中性无毒且具有独特理化性质和良好的生物相溶性的高分子聚合物聚乙二醇即peg具有高度的亲水性在水溶液中有较大的水动力学体积并且没有免疫原性
免疫比浊法检测免疫球蛋白
免疫学系
实验原理
免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中 特异结合，产生一定大小的复合物，形成 光的折射或吸收，测定这种折射或吸收后 的透射光或散射光作为计算单位。
散射比浊法的缺陷
(1)因为是一次性测定光吸收值，没有考虑每一个待 测样本的吸收和散射效果，可测定结果不准确
(2)测定的仍是抗原－抗体反应的第二阶段，不适合 快速检测。
(3) 终点法存在反应本底，测定样本的含量越低本底 比例越大，故在微量测定时，本底的干扰是影响 准确测定的重要因素。
影响免疫比浊测定的因素
当一束光
免
线通过溶
疫
液受到光
比
散射和光
浊 法 分 类
吸收两个 因素的影 响而使光
的强度减
弱
散射比浊法: 在光源的光路方向（50-960） 角的方向上测量透射光强度 和被检测溶液中微粒浓度关 系的方法。
透射比浊法: 在光源的光路方向（00） 测量透射光强度和被检测 溶液微粒浓度关系的方法。
透射比浊法和散射比浊法光路
免疫球蛋白MIgM测定免疫比浊法-检验科免疫室作业指导书
免疫球蛋白MIgM测定免疫比浊法1.原理分析原理是液相免疫沉淀散射比浊终点测定法。
抗血清用缓冲液稀释后加到一份病人血清中，经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光。
散射光结果和血清中的IgM浓度成正比。
标本采集：标本采集前病人准备：受检者空腹标本种类：血清或血浆标本要求：取被检者静脉血2ml，室温放置不超过4小时，分离血清备用。
标本储存：待测标本在2-8℃存放不超过24小时，-20℃不超过三个月，-70℃长期保存。
避免反复冻融。
标本运输：室温运输标本拒收标准：细菌污染、溶血、脂血不能作测定。
试剂6.1试剂名称：免疫球蛋白M检测试剂盒6.2试剂生产厂家：芬兰Orion诊断试剂公司6.3包装规格：60Test/kit6.4试剂盒组成：缓冲液30ml空白缓冲液30ml抗血清试剂0.5ml定标液0.5ml磁卡1张仪器设备：仪器名称：OrionTurboxRplus特定蛋白分析仪仪器厂家：芬兰Orion集团公司仪器型号：Turboxplus8.操作步骤：8.1试剂配制：8.1.1抗血清应用液准备：吸取500ul抗血清加到反应缓冲液中，轻轻混匀，应用液2-8℃可保存12个星期。
8.1.2空白缓冲液：液体待用。
8.1.3定标液：用0.9%NaCL进行1：51稀释。
定标液根据IFCC提供的材料CRM470进行标定。
8.2收集与处理样品：样品用0.9%Nacl进行1：51稀释。
8.3为每一份样本测定准备一份样品空白，同样，为定标液另外准备一份定标液空白。
8.4准备两份定标液测定（定标完成后，标准曲线数据存储在磁卡内。
下次检测如使用同批试剂，可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息）。
8.6轻轻摇动混匀，室温18-25℃放置30±5分钟。
8.7仪器测试步骤：参见TurboxR特定蛋白分析仪作业指导书。
9.结果计算：仪器直接计算并打印结果。
临床意义：IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是一种高效能抗体、能固定补体，具有溶菌、抑菌、中和病毒作用。
免疫比浊法名词解释
免疫比浊法名词解释
嘿，朋友们！今天咱来聊聊免疫比浊法。
这免疫比浊法啊，就好比是一场“战斗”！
想象一下，身体里有好多小“敌人”，也就是各种抗原啦。
而我们要怎么发现这些“敌人”呢？免疫比浊法就闪亮登场啦！它就像是一个超级厉害的“侦探”，能把这些抗原给揪出来。
它的原理呢，其实也不难理解。
就是让抗原和专门对付它的抗体相遇，然后它们俩一结合，就会形成一些复合物。
这些复合物可不是普通的东西哦，它们会让溶液变得浑浊起来。
就好像原本清澈的水里突然多了很多杂质，变得不那么透明了。
然后呢，我们就可以通过一些仪器，去测量这种浑浊度。
浑浊度越高，说明抗原越多呀！这是不是很神奇？
你说这免疫比浊法是不是很厉害？它能帮我们检测好多东西呢！比如说一些疾病的标志物，这样医生就能更快更准确地判断我们的身体状况啦。
而且啊，免疫比浊法还挺“聪明”的呢！它可以分为透射比浊法和散射比浊法。
这就像是有两个不同“性格”的侦探，各有各的本事。
透射比浊法呢，就像是一个老老实实一步一个脚印的侦探，它通过直接测量透过溶液的光的强度来判断。
而散射比浊法呢，就像是一个更机灵一点的侦探，它通过测量散射光的强度来发现线索。
你看，这免疫比浊法多有意思啊！它在医学领域可是发挥了大作用呢。
没有它，我们怎么能那么快那么准确地知道自己身体里的情况呢？
免疫比浊法真的是医学检测的好帮手啊！它就像是一道光，照亮了我们了解身体内部世界的道路。
它让我们对疾病有了更及时的发现和应对，难道不是吗？所以啊，可别小瞧了这免疫比浊法，它可是守护我们健康的重要一环呢！。
免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较
免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较刘少华;邓文平;李燕【摘要】目的探讨免疫透射比浊法和免疫散射比浊法测定免疫球蛋白(Ig)水平的关系.方法用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测252例健康体检人群的血清Ig,同时测定IgG高、低值水平,分析两种方法测定结果之间的关系.结果健康体检人群中血清IgG水平免疫透射比浊法[(11.46±4.92)g/L]测定与免疫散射比浊法[(11.85±3.72)g/L]测定相比,差异无统计学意义(P>0.05);免疫透射比浊法IgM[(1.51±1.06)g/L],免疫散射比浊法IgM[(1.60±0.91)g/L]和免疫透射比浊法IgA[(2.08±1.51)g/L],免疫散射比浊法IgA[(2.15±1.19)g/L]水平差异均无统计学意义(P>0.01).高、低值IgG用两种方法均可以测定.结论了解免疫功能水平时,测定Ig用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法均可,但免疫散射比浊法更有利于病情的监测.%Objective To compare transmission turbidity and scatter turbidity method on measuration of serum immunoglobulin (Ig) levels. Methods Serum Ig concentration was measured by transmission turbidity and scatter turbidity method in 252 healthy people. The high level and low level of IgG were also measured. The relationship between the two methods was analyzed. Results The results showed that the levels ofIgG[(11. 46 ±4. 92)g/L,(11. 85 ± 3. 72)g/L] ,IgM[(l. 51 ± 1. 06)g/L,(l. 60 ± 0.91)g/L] and IgA [(2. 08± 1. 51)g/L, (2. 15 ± 1. 19)g/L] had no significant difference in healthy people(P>0. 05) measured by transmission turbidity and scatter turbidity method. High and low level of IgG can detect by transmission turbidity and scatter turbidity method. Conclusion Transmission turbidity and scatter turbidity method can both be used fordetermination of IgG, while immune scatter turbidity method could be beneficial for evaluation of the disease condition.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2012(041)020【总页数】2页(P2034-2035)【关键词】散射测浊法和比浊法;免疫球蛋白【作者】刘少华;邓文平;李燕【作者单位】重庆市涪陵中心医院检验科,408000;重庆市涪陵中心医院检验科,408000;重庆市涪陵中心医院检验科,408000【正文语种】中文人体免疫球蛋白(Ig)测定，是检查人体免疫功能状态最直接而简单的方法，只有选择好的检测方法才能保证检验结果的准确性。
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较-精选文档
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较在临床上，对于人血清内特定蛋白的检测，一般是采取免疫散射比浊法、免疫透射比浊法进行检测;然而，在检测的过程中，如游离血红蛋白、脂蛋白等会对检测的结果带来一定的干扰，继而影响检测结果的准确性[1]。
对此，为保证血清检测的准确性，笔者对免疫透射比浊法、免疫散射比浊法在特定蛋白抗干扰能力的效果进行探讨，具体报道如下。
1.资料与方法1.1对象本次研究的样本源自于某医院门诊与住院患者当天的新鲜血清，其中排除存在脂血、溶血、浑浊等血清。
同时，事前准备好IgM、CRP等浓度不等的混合血清，具体为IgM低浓度1.0～1.5g/L，高浓度大于2.0g/L;CRP低浓度4～10mg/L，高浓度大于100mg/L。
1.2仪器设备选用Dade Behring BNProSpec特定蛋白测定仪、Roche Modular P全自动生化分析仪，试验所用试剂皆为仪器配套试剂。
同时选取三个干扰物，即FBil（游离胆红素）、CH（乳糜）、Hb（血红蛋白），每种干扰物各准备两瓶试剂盒，一瓶作为空白对照使用，另外，干扰物的浓度具体为FBil3280μmol/L、CH15000FTU、Hb49.6μmol/L[2]。
1.3研究方法首先，对混合血清进行制备，之后依据干扰试剂盒上的制备顺序，配制干扰物;将2ml的蒸馏水加入到每一个干扰物与空白对照内，复溶。
然后，按照1：9的比例，把已经准备好的干扰物和混合血清混合在一起，制作成干扰物样本，其中含有干扰物的为样本甲，未加干扰物为样本乙[3]。
把两个样本分别制定浓度不等的若干个样本，具体浓度见下表1所示。
最后采取特定蛋白测定仪与全自动生化分析仪展开特定蛋白的抗干扰试验检测，同时对其干扰率进行计算。
1.4统计学分析本次研究所得全部数据，均采取软件Excel加以分析与处理。
其中，干扰率计算公式为：含有干扰物组的均值减去空白对照组的均值，之后再除以空白对照组的均值。
透射免疫比浊和散射比浊的评估
【摘要】目的：评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性。
方法：用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP 浓度。
结果：两种方法在8—20mg／L、20～40mg／L、40～80mg／L、80～160mg／L、160～300mg／L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0．990、0．996、0．995、0．992、0．997．说明两种方法的相关性是良好的，而在低值1～8mg／L的测定中两方法的相关系数为0．928．结论：速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中可以得到较为准确的CRP检测结果。
【关键词】透射免疫比浊法散射免疫比浊法C反应蛋白在急性应急性疾病时如大手术、重度创伤、心肌梗死、严重感染、肿瘤等，血浆中某些蛋白浓度可明显增高或降低，这种现象称为急性时相反应，这些蛋白统称为急性时相反应蛋白。
最具有代表性的急性时相蛋白首推C反应蛋白(CRP)，CRP是目前临床上最有用的急性时相反应的一个敏感指标。
CRP作为炎症标志物，本身尽管为非特异性的，但对于细菌感染、各种炎症过程及组织坏死与损伤及其恢复期的筛检、监测、病情评估与疗效判断，都具有重要的意义J。
CRP的检测方法目前使用比较多的有胶乳凝集试验、免疫沉淀法、免疫浊度法和标记免疫测定法等，而其中的透射免疫比浊法和速率散射比浊法是目前公认为检测CRP较为精确的两种方法。
为了评估两种方法的灵敏度和特异性，我们收集了80份血清，用免疫透射比浊法和速率散射比浊法分别进行CRP的检测，并作了结果比较。
一、材料与方法1、标本来源样本血清来源于80例本院门诊和住院病人，其中骨折病员21例，确诊的恶性肿瘤病人15例，急性肺炎病员22例，冠心病病人10例，外科手术病员12例。
采集空腹血后及时分离血清，并置-20℃保存备用。
2、仪器日立7170型自动生化分析仪，BeckmanArray 360特定蛋白检测系统。
3、试剂透射免疫比浊法试剂盒及配套的校准品由上海基恩科技有限公司提供，批号为ISEP03。
免疫球蛋白GIgG测定免疫比浊法-检验科免疫室作业指导书
免疫球蛋白GIgG测定免疫比浊法原理分析原理是液相免疫沉淀散射比浊终点测定法。
抗血清用缓冲液稀释后加到一份病人血清中，经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光。
散射光结果和血清中的IgG浓度成正比。
2.标本采集：标本采集前病人准备：受检者空腹。
标本种类：血清或血浆。
标本要求：取被检者静脉血2ml，室温放置不超过4小时，分离血清备用。
3.标本储存：待测标本在2-8℃存放不超过24小时，-20℃不超过三个月，-70℃长期保存。
避免反复冻融。
标本运输：室温运输。
标本拒收标准：细菌污染、溶血、脂血不能作测定。
试剂6.1试剂名称：免疫球蛋白G检测试剂盒6.2试剂生产厂家：芬兰Orion诊断试剂公司6.3包装规格：60Test/kit6.4试剂盒组成：缓冲液30ml空白缓冲液30ml抗血清试剂0.5ml定标液0.5ml磁卡1张仪器设备：7.1仪器名称：OrionTurboxRplus特定蛋白分析仪7.2仪器厂家：芬兰Orion集团公司7.3仪器型号：Turboxplus操作步骤：试剂配制：8.1.1抗血清应用液准备：吸取500ul抗血清加到反应缓冲液中，轻轻混匀，应用液2-8℃可保存12个星期。
8.1.2空白缓冲液：液体待用。
8.1.3定标液：用0.9%NaCL进行1：51稀释。
定标液根据IFCC提供的材料CRM470进行标定。
收集与处理样品：样品用0.9%Nacl进行1：51稀释。
为每一份样本测定准备一份样品空白，同样，为定标液另外准备一份定标液空白。
准备两份定标液测定（定标完成后，标准曲线数据存储在磁卡内。
下次检测如使用同批试剂，可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息）。
如下准备各比色管：轻轻摇动混匀，室温18-25℃放置30±5分钟。
仪器测试步骤：参见TurboxR特定蛋白分析仪作业指导书。
结果计算：仪器直接计算并打印结果。
临床意义：IgG是血清中抗细菌、抗病毒、抗毒素的主要抗体。
巨噬细胞、中性粒细胞表面具有IgGFc受体，可增强对细菌等物质的吞噬能力。
免疫比浊分析
（三）技术要求
• 待测的抗原抗体复合物分子量足够大。
• 抗原抗体复合物数量足够多。 • 具有充分的反应时间，只能测定抗原抗 体反应的第二阶段。 • 高亲和力的抗体，并保证抗体过量。
（四）方法评价
优点: 灵敏度高，稳定性好，操作简便，结果准确 不足: ①抗体用量较大； ②溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大 ③透射比浊测定在抗原－抗体反应的第二阶段，检 测需在抗原抗体反应达到平衡后进行，耗时较长。
1．抗原抗体比例 抗原抗体比例要适当。 诊断试剂应尽可能 溶液中免
颗粒上的抗体与抗原特异结合，引起胶乳颗粒凝
聚 ，使透射光和散射光即出现显著变化。
三、免疫胶乳比浊法
（一）原理：
第二节 自动化免疫比浊分析
一、主流免疫比浊设备概况
（一）BN特种蛋白分析测定系统 1.测定原理 该系统的测定方法是透射免疫比浊法的 一种改良。以发光二极管作为光源，检测前
向角13～24度的散射光，然后利用硅化光电
二、免疫散射比浊法
(一) 原理 粒子对光线的散射作用是溶液中的微粒子受到 光线照射后，微粒子对光线产生反射和折射而形成 散射光。 悬浮微粒对光散射形成的散射光强度与微粒的 大小、数量、入射光的波长和强度、测量角度等因 素密切相关。
不同大小的微粒形成的散射光分布不同。
当微粒直径小于入射光的波长的十分之一时，
(二) 技术要求 应选择适当的光源强度、反应时间、测量角 度及光源的波长。 另外，要注意保证抗原浓度合适。 此外，还要选择适宜的离子强度、pH值等。
(三)速率散射比浊法（rate nephelometry） 速率散射比浊法是抗原抗体结合反应的一种动 态测定方法。
所谓速率是指抗原抗体反应在单位时间内形成免
saa免疫散射比浊法原理
saa免疫散射比浊法原理宝子们！今天咱们来唠唠这个SAA免疫散射比浊法的原理，可有趣啦。
咱先来说说SAA是啥吧。
SAA就是血清淀粉样蛋白A啦，这可是个挺重要的小玩意儿呢。
在咱们身体里啊，它就像个小信号兵。
当身体有炎症的时候，它就开始活跃起来啦。
那科学家们怎么知道它的量有没有变化呢？这就用到了免疫散射比浊法。
想象一下啊，咱们这个检测就像是一场小小的聚会。
在这个聚会里呢，有SAA这个主角，还有专门来找它的“小伙伴”，也就是抗体。
抗体就像个小侦探，专门负责找到SAA。
那这个聚会的场地就是咱们的检测溶液啦。
当把含有SAA的血清样本放到这个溶液里的时候，那些抗体就开始满世界找SAA。
一旦抗体和SAA碰到一起啊，它们就会结合起来。
就像两个好久不见的好朋友，一见面就紧紧抱在一起啦。
这一结合可就有变化喽。
你看啊，原来溶液里的这些分子啊，都是自己管自己，自由自在地游来游去的。
可是当抗体和SAA结合之后呢，它们就变成了一个比较大的复合物啦。
这个复合物啊，就和那些单个的分子不一样啦。
这时候呢，咱们就开始用一束光去照这个溶液。
这束光就像个小探照灯一样。
那些单个的分子啊，它们让光散射的情况是一种样子。
可是当有了这个抗体 - SAA复合物之后呢，光散射的情况就变啦。
就好像原本平静的水面，你丢进去一个小石子，会泛起一种涟漪，现在丢进去一个大石块，泛起的涟漪肯定就不一样啦。
而且呢，这个光散射的变化程度啊，是和溶液里SAA的量有关系的。
如果SAA的量很多，那能和抗体结合的就多，形成的复合物就多，光散射的变化就特别明显。
要是SAA的量少呢，那复合物就少，光散射的变化也就小一些。
检测仪器就特别聪明啦，它能很敏锐地察觉到这种光散射的变化。
然后呢，根据这个变化的程度，就能算出样本里SAA到底有多少啦。
这就像是根据水面涟漪的大小，能推断出丢进去的是小石子还是大石块一样的道理呢。
这个免疫散射比浊法啊，它的好处可多啦。
它特别灵敏，就像一个特别细心的小观察员，一点点的SAA变化都能被它发现。
非浓缩尿蛋白电泳法和免疫散射比浊法测定尿免疫球蛋白G的比较
非浓缩尿蛋白电泳法和免疫散射比浊法测定尿免疫球蛋白G的比较陈志;王朝晖;邰宏明【摘要】目的比较非浓缩尿蛋白电泳法和免疫散射比浊法测定尿免疫球蛋白G的临床应用及价值.方法分别采用十二烷基磺酸钠-琼脂凝胶电泳技术(SDS-AGE)与免疫散射比浊法分别测定2010年7月至2011年7月兴化市人民医院62例干化学法尿蛋白(+～++++)的住院患者非浓缩尿液标本中免疫球蛋白G的百分含量,并按尿总蛋白定量及尿IgG电泳百分比计算尿IgG含量,与免疫散射比浊法定量做相关分析.结果 62例非浓缩蛋白电泳法尿IgG结果阳性率53％,免疫散射比浊法阳性率64％,电泳法和免疫散射比浊法测定尿中IgG阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),两种方法在检测非浓缩尿IgG上完全符合率达89％,相关系数为0.95,呈正相关(P ＜0.01).结论非浓缩蛋白电泳法与免疫散射比浊法检测尿IgG结果差异无统计学意义,有显著相关性,且结果准确,灵敏度高.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2013(010)008【总页数】2页(P940-941)【关键词】尿蛋白电泳法;免疫散射比浊法;尿IgG【作者】陈志;王朝晖;邰宏明【作者单位】江苏省兴化市人民医院检验科 225700;江苏省兴化市人民医院检验科 225700;江苏省兴化市人民医院检验科 225700【正文语种】中文尿中免疫球蛋白G（IgG）增多与肾小球严重病变程度有关，大多是非选择性蛋白尿［1］。
传统的尿IgG检测方法主要有免疫散射比浊法、放射免疫法等。
放射免疫法由于放射性污染及操作者人为因素的干扰，逐渐被淘汰。
近几年非浓缩尿蛋白电泳已作为检测尿蛋白和区别尿蛋白类型较好的方法应用于临床，其优点是操作简便，灵敏度高，干扰少，结果判断清晰、直观，能将尿液中所有的蛋白成分显示出来，并便于保存，能动态观察和对比［2-4］。
作者采用非浓缩尿蛋白电泳法和免疫散射比浊法分别测定尿免疫球蛋白G，进行比较分析，现将结果报道如下。
免疫速率散射比浊法的标准
免疫速率散射比浊法的标准
免疫速率散射比浊法的标准因具体检测项目和目标物的不同而有所差异。
一般来说，免疫比浊法的正常范围是/L。
该方法是通过测定抗原抗体反应液的浊度来判断疾病。
当一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液时遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。
散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测抗原越多散射光也越强。
请注意，免疫速率散射比浊法的标准并非一成不变，可能会根据不同的检测需求和实验条件进行调整。
因此，在进行相关实验或检查时，应遵循专业医师和实验室技术人员的指导，以确保结果的准确性和可靠性。
06第六章 免疫比浊分析
返回章目录
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
第二节 自动化免疫比浊分析
一、主流免疫比浊设备概况
（一）BN特种蛋白分析测定系统 1.测定原理 该系统的测定方法是透射免疫比浊法的一种
改良。以发光二极管作为光源，检测前向角
13～24度的散射光，然后利用硅化光电二极 管接收散射光信号，经过微电脑处理，与标 准曲线进行比较，最后转换成待检物质的浓 度。
复合物产 产生速率 生总量
8 13 25 60 150 230 300 360 415 450 480 500 — 5 12 35 90 80 70 60 55 45 30 20
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
（二）技术要求 速率散射比浊法峰值出现的时间与抗体浓 度及纯度直接相关，需选用抗体纯度及亲和力 交高的试剂。此外，要保证待测样本血清的性 状符合要求，如严重脂血等即为不合格样本。
4
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
在抗原或抗体量一定的条件下，可以利用比 浊仪在光源的光路方向上测定透射光强度与 入射光强度的比值或吸光度，来判断待测抗 原的量，这种方法称为透射比浊法 。
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
透射免疫比浊法光路图
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
（二）技术要求
• 待测的抗原抗体复合物分子量足够大。
影响检测结果，因此需要选择均匀一致的
胶乳颗粒。此外，试剂需要加保护剂以提
高其稳定性，所用器皿要洁净，避免杂质 微粒的干扰。
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
（三）方法学评价 该法敏感度高，试剂稳定，个体免疫复 合物对结果影响也小，因此结果稳定、可 靠，特异性好，精确度高，且不需要特殊
免疫透射比浊法 透射免疫比浊法检测的原理是
免疫透射比浊法一、原理当光线通过一个浑浊介质溶液时，由于溶液中存在混浊颗粒，光线被吸收一部分，吸收的多少与混浊颗粒的量成正比，这种测定光吸收量的方法称为透射比浊法。
这一方法早于1959 年Schultre 和Schuick 等报道应用于血浆蛋白与其抗体结合后形成复合物，导致浊度的改变，再进行透射比浊测定，一般采用抗体对抗原定量的透射比浊法，称为免疫透射比浊法。
其原理是，利用抗原和抗体的特异性结合形成复合物，通过测定复合物形成量的多少对抗原或抗体进行定量的方法。
在介质溶液中，抗原与特异性抗体在一定条件下才能形成复合物，一定的条件包括：①对抗体的要求，作为体液或组织中蛋白质种类很多，若要快速特异检测，要求有单价特异抗体才能与抗原形成复合物。
某一种蛋白质，有其特异抗体才能与该抗原结合，形成免疫复合物进行定量，若抗体不纯混杂有另一种或两种少量的抗体，这种免疫复合物就不是单一复合物而是大杂烩，结果偏高；②抗原抗体比例适当，因免疫复合物形成有三个阶段，第一阶段是复合物形成抗原抗体复合物；第二阶段是初步形成抗原抗体复合物，此阶段是复合物交联成大的网格状结构；第三阶段是复合物聚合产生絮状沉淀。
只有在抗原与抗体等价时即无过剩抗体，此时，复合物的结合与解离处于平衡状态，其混浊程度达高峰。
在抗体过量时，随抗原量的增加而复合物形成也增加，其测定只能在反应曲线的左侧进行（见图18-4 ）;3—般要求溶液中有非离子性亲水多聚体促进免疫复合物的形成，如聚二乙醇6000等。
溶液pH为6.5〜8.0之间为宜。
载脂蛋白有形成两性螺旋片（amphipathic helix ）的特性, 对脂质（特别是磷脂）有高度亲和力，与脂质结合后有时会掩盖抗原位点或构象改变，可以部分或完全丧失对抗血清的特异反应。
为此，载脂蛋白检测过程中有必要先暴露抗原位点，所用试剂有表面活性剂，尿素，盐酸胍和吐温等解离蛋白剂，或用四甲基脲脱脂或有机溶剂脱脂等暴露抗原决定簇等方法，血清脂蛋白颗粒中的载脂蛋白，能在短时间内形成抗原抗体复合物进行定量；④抗原不能过量，因为抗原过量，抗原抗体复合物形成不但不增加，反而会减少，光散射或光吸收减少，检测结果反而偏低。
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
疫比浊法是检测类风湿因子的方法,是利用抗原和抗体相互结合,动态测定类风湿因子的方法,基本原理是抗原、抗体在特定稀释系统中反应,比例合适的时候形成可溶性免疫复合物,在稀释系统中的促凝剂作用下,从液体状态析出形成微粒,使反应液混浊,抗体浓度固定的时候形成的免疫复合物量,会随检测样中抗原量增加,反应液混浊度也会随之增加。
通过测定反应液的浊度,与一系列标准品进行对比,可以计算出检测样品中抗原含量。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
目
录
第一节 免疫比浊技术原理 第二节 自动化免疫比浊分析
第三节 小结
第一节
免疫比浊技术原理
免疫比浊技术分类：
透射免疫比浊法
（turbidimetric immunoassay）
散射免疫比浊法
（nephelometry immunoassay）
终点散射比浊法 速率散射比浊法
一、透射免疫比浊法
8 13 25 60 150 230 300 360 415 450 480 500 — 5 12 35 90 80 70 60 55 45 30 20
（二）技术要求
速率散射比浊法峰值出现的时间与抗体浓度及 纯度直接相关，需选用抗体纯度及亲和力交高的试 剂。此外，要保证待测样本血清的性状符合要求， 如严重脂血等即为不合格样本。
（三）方法学评也小，因此结果稳定、可靠， 特异性好，精确度高，且不需要特殊的仪器 设备，一般分光光度计、自动化生化分析仪 或散射比浊仪均可使用。
返回章目录
第二节 自动化免疫比浊分析
一、主流免疫比浊设备概况
（一）BN特种蛋白分析测定系统 1.测定原理 该系统的测定方法是透射免疫比浊法的一种
（三）方法学评价
该法具有快速、敏感度及精密度高的特点， 其最大优点在于快速，检测不必等到抗原抗体 达到平衡，大大节省反应时间，每小时可检测 标本数十份；敏感度高，最小检出量达微克/ 升水平。
四、免疫胶乳比浊法
（一）基本原理 将抗体吸附在大小适中、均匀一致的胶乳颗粒 上，制成致敏的胶乳颗粒，当遇到相应抗原时， 发生交联反应，形成抗原抗体复合物，胶乳颗
抗原抗体反应曲线
二、散射免疫比浊法
（一）基本原理
散射比浊法是指一定波长的光沿水平轴照射，
通过溶液时遇到其中的抗原抗体复合物，光
线被粒子颗粒折射而发生偏转，产 生散射
光。
其中光线偏转的角度与发射光的波长 和抗原抗体复合物的大小和多少密切相关。 散射光的强度与复合物的含量成正比，即 待测的抗原越多，形成的复合物越多，散 射光就越强。
疫比浊分析仪器的问世解决了以上的诸多问题。
目前，透射免疫比浊法和散射免疫比浊等方法已 常规运用于临床特定体液蛋白质的检测，相关仪器已 广泛应用于国内各级医院，成为临床免疫检测的重要 手段之一。
返回章目录
谢
谢！
雅安职业技术学院
BN100、BNⅡ特种蛋白分析分析系统
（二）ARRAY分析系统 1.测定原理 本系统属于速率散射比浊分析法，在抗体过量的 前提下，光束通过抗原抗体复合物时所产生的散 射光速率变化大小与抗原浓度成正比。速率的峰
值通过电脑处理系统转换成待测抗原的浓度。
2.仪器基本组成
ARRAY系统由分析仪、电脑处理系统、打印机构
当抗体的浓度固定于一定范围时，速度峰值
的高低与抗原的含量成正比，随着时间的延长，
免疫复合物的量逐渐增多，抗原抗体结合速度的
峰值在一定的时间出现。通过微机处理即可得到
待测蛋白成份的含量。
抗原抗体复合物形成时间与速率的关系
累计时间
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
复合物产 产生速率 生总量
3．免疫复合物的大小及稳定性 该不容易相互聚集。
疫复合物颗粒的分散度尽可能相同，颗粒应
4．增聚剂
利用增聚剂破坏抗原抗体的水化
层，促进反应的进行。
5. 离子强度
PBS是较好的反应液 。
返回章目录
小
结
经典的免疫沉淀反应通常是在抗原抗体 反应的终点进行结果判断，存在操作繁琐、费 时、敏感度低及难以自动化等缺陷。自动化免
透射浊度法和散射浊度法的光路
（二）技术要求
应选择适当的光源强度、反应时间、测量角度
及光源的波长。另外，要注意保证抗原浓度合 适。此外，还要选择适宜的离子强度、pH值等。
（三）方法学评价
散射免疫比浊法是当今免疫化学分析中比较有 优势的方法。可以实现自动化管理，但用于免疫沉
淀反应有很多缺陷，如因为是一次性测定光吸收值，
没有考虑单个待测样本的散射效果，可能使测定结 果不准确。
测定的时间依然较长，且随时间延长，抗原抗
体复合物有重新结合的趋势，可影响散射值的变
化及存在反应本底，在微量测定时，本底的干扰 是影响测定准确性的重要因素。
三、速率免疫比浊法
（一）基本原理 该法是抗原抗体结合反应的一种动态测定方法。 将抗原抗体的沉淀反应与散射比浊分析相结合， 对单位时间内抗原和抗体结合形成复合物的速 度进行动力学测定即为速率免疫比浊法。
（一）基本原理 当一定波长的光通过抗原抗体反应形成 的免疫复合物时会因为反射和吸收而减弱，
一定范围内，透射光被吸收的量与复合物的
量呈正相关关系，而复合物的量与抗原抗体 量为一定的函数关系。
在抗原或抗体量一定的条件下，可以利用比浊 仪在光源的光路方向上测定透射光强度与入射
光强度的比值或吸光度，来判断待测抗原的量，
成，其主要构成部分为分析仪，由加液系统、
散射测浊仪、40孔样本转盘、20孔试剂转盘、 软盘驱动器等组成。
Array360、IMMAGE特种蛋白分析分析系统
二、免疫比浊分析的主要影响因素
1．抗原抗体比例 抗原抗体比例要适当。 诊断试剂应尽可能 溶液中免
2．抗体的纯度与效价
选择高纯度与高效价的抗体。
改良。以发光二极管作为光源，检测前向角
13～24度的散射光，然后利用硅化光电二极 管接收散射光信号，经过微电脑处理，与标 准曲线进行比较，最后转换成待检物质的浓 度。
2.仪器基本组成
系统由分析仪、计算机、条码读取器、打印机四部分组成，
其中分析仪是主要组成部分，包括散射测浊仪、自动加样系统、 运输装置和比色杯装置。
这种方法称为透射比浊法 。
透射免疫比浊法光路图
（二）技术要求
待测的抗原抗体复合物分子量足够大。
抗原抗体复合物数量足够多。 具有充分的反应时间。 高亲和力的抗体，并保证抗体过量。
（三）方法学评价
透射免疫比浊法的灵敏度是单向琼脂扩散方
法的5～10倍，但其与标记免疫分析技术相比 还不够高。因此，透射比浊类的自动分析仪用 于免疫测定已趋减少，该测定原理主要用于生 化分析仪。
粒发生凝集。
单个胶乳颗粒在入射光波长之内并不阻碍光 线透过，两个及其两个以上胶乳颗粒凝聚时则 使透过的光减少，其减少的程度与胶乳颗粒凝 聚的程度呈正比，即与待测抗原量呈正比，由 此可检测样本中的特定抗原含量。
（二）技术要求
胶乳颗粒的均一性将直接影响光散射作用， 影响检测结果，因此需要选择均匀一致的胶 乳颗粒。此外，试剂需要加保护剂以提高其 稳定性，所用器皿要洁净，避免杂质微粒的 干扰。