免疫比浊法工艺模板
免疫比浊法反应曲线
免疫比浊法反应曲线免疫比浊法反应曲线是一种常用的实验方法，用于检测免疫反应和测定抗原或抗体的浓度。
该方法的原理基于抗原与抗体结合所形成的免疫复合物对光的散射或吸收现象。
通过测量吸光度或比浊度的变化，可以确定免疫反应的程度以及样品中抗原或抗体的浓度。
免疫比浊法反应曲线通常由一系列不同浓度的标准溶液构成，这些标准溶液中含有已知浓度的抗原或抗体。
反应曲线上的吸光度或比浊度值与标准溶液中抗原或抗体的浓度成正比关系。
这种关系可以用来推断未知样品中抗原或抗体的浓度。
免疫比浊法实验的步骤如下：1.准备标准溶液：根据需要的浓度范围，制备一系列标准溶液。
通常选择具有已知浓度的抗原或抗体来制备标准溶液。
2.反应体系构建：将标准溶液和待测样品分别与适当的抗原或抗体混合。
将混合物孵育（一般为室温或37°C）一段时间，以便允许免疫反应发生并形成免疫复合物。
3.吸光度或比浊度测量：在反应体系孵育完成后，使用比色计或比浊计测量吸光度或比浊度。
比色计测量所用波长通常为450 nm，而比浊计则根据测量要求选择合适的波长。
4.绘制反应曲线：将吸光度或比浊度值绘制成反应曲线。
横坐标表示标准溶液中抗原或抗体的浓度，纵坐标表示对应的吸光度或比浊度值。
5.浓度计算：根据反应曲线上待测样品的吸光度或比浊度值，通过插值计算样品中抗原或抗体的浓度。
根据实验需要，可以采用线性拟合、对数拟合或其他曲线拟合方法。
免疫比浊法反应曲线具有以下特点和应用：1.灵敏度：免疫比浊法可以检测低浓度的抗原或抗体，提供灵敏的浓度测量。
2.特异性：免疫比浊法能够区分目标抗原或抗体与其他物质之间的相互作用，帮助鉴定和定量目标物质。
3.定量性：通过绘制标准曲线，可以将吸光度或比浊度值与抗原或抗体的浓度进行定量关联，从而对未知样品进行浓度测定。
4.应用广泛：免疫比浊法可以用于检测体液中的疾病标志物、药物浓度监测、生物样品的鉴定等多个应用领域。
总结起来，免疫比浊法反应曲线是一种常用的实验方法，可以测定抗原或抗体的浓度。
《免疫比浊分析》课件
案例三
总结词
辅助诊断、判断病情
详细描述
自身免疫性疾病是一类复杂的疾病，免疫比 浊分析可以检测出自身抗体，辅助医生进行 诊断和判断病情。通过检测自身抗体水平， 有助于了解疾病的活动度和治疗效果。
THANKS
感谢观看
06
案例分享：免疫比浊分析在疾病 诊断中的应用
案例一
总结词
准确、快速、敏感
详细描述
免疫比浊分析在乙肝病毒检测中表现出高准确性和高敏感性，能够快速检测出乙肝病毒 的抗原和抗体，为乙肝的诊断和治疗提供了有力支持。
案例二
总结词
早期发现、监测病情
VS
详细描述
免疫比浊分析用于检测肿瘤标志物，有助 于肿瘤的早期发现和病情监测。通过定期 检测肿瘤标志物水平，可以及时发现肿瘤 复发或转移，为制定治疗方案提供依据。
结果解读
根据实验结果，结合专业知识，对结果进行解读 和解释，为临床诊断和治疗提供依据。
03
免疫比浊分析的仪器与试剂
仪器介绍
仪器类型
介绍免疫比浊分析中常用的仪器 类型，如分光光度计、全自动生 化分析仪等。
工作原理
阐述仪器的工作原理，如光线通 过溶液时发生散射、吸收等现象 ，用于测量物质浓度。
仪器参数
研究进展与展望
• 自动化程度提高：仪器设备的自 动化程度不断提高，减少了人为 误差和操作时间。
研究进展与展望
标准化和规范化
建立统一的检测标准和方法，提高不同仪器 和试剂间的可比性。
智能化发展
结合人工智能、大数据等技术，实现检测结 果的自动分析和解读。
应用拓展
拓展免疫比浊分析在临床诊断、生物医药等 领域的应用范围。
实验注意事项
仪器维护
免疫透射比浊实验2PPT课件
使用专业的数据分析软件（如Excel、SPSS等）进行数据处理和统 计分析，提高工作效率和准确性。
结果解读与报告撰写
结果解读
根据实验目的和预期结果，对分 析后的数据进行解读，判断实验 是否达到预期目标。
报告撰写
按照规范的实验报告格式，详细 记录实验过程、数据分析和结果 解读，确保报告完整、准确、清 晰。
详细描述
介绍如何利用图表、图像等可视化手段展示免疫透射比浊实验数据。通过柱状图、折线图、散点图等 图表形式，将实验数据以直观、易懂的方式呈现出来，提高数据可读性和分析效率，为实验人员和临 床医生提供更加全面的数据支持。
THANKS
感谢观看
2. 将血清加入透射比浊管中，加入适量的抗体试剂。
实验步骤与注意事项
01
3. 摇匀后，放入比浊仪中，记录 透射光的变化量。
02
4. 根据标准曲线或已知浓度进行 定量分析。
实验步骤与注意事项
注意事项 1. 确保血清样本新鲜、无溶血、无污染。
2. 选择合适的抗体试剂，确保与待测物质特异性结合。
实验步骤与注意事项
态。
加样
将处理好的样本和试剂加入仪 器中，按照规定的顺序和比例
进行加样。
开始实验
启动仪器开始实验，记录实验 过程中的数据和结果。
结果读取
等待实验结果读取，记录并分 析实验数据。
结果判断与注意事项
01
结果判断
根据实验结果，判断患者的病情或健康状况。
02
结果分析
对实验结果进行分析，结合患者的具体情况，给出相应的诊断或建议。
问题解决方案与技巧
解决方案1：定期检查试剂和仪器 确保试剂在有效期内，定期更换。 定期对仪器进行校准和维护，确保仪器性能稳定。
免疫比浊法生产流程
免疫比浊法生产流程免疫比浊法的生产流程如下：1. 清洗：吸取100μL胶乳微球加入1 mLMES缓冲液中，混匀后17000 rpm离心30min，弃上清，加入1mLMES，用超声波清洗器振散微球团块，每次持续约30s，3~5次。
2. 活化：将NHS粉末和EDCI粉末恢复室温，配制浓度为20mg/mL的NHS活化剂和EDCI活化剂，将适量的NHS和EDCI活化剂加入已清洗的微球中，上下颠倒混匀后再置旋转混匀器上混匀，持续约20~30min。
3. 包被：将已彻底超声振散的微球加入一定浓度的CSFVE2蛋白单抗中，先手动上下颠倒混匀，再置旋转混匀器充分反应。
15000rpm离心10min后弃上清，加入1 mL MES。
4. 封闭：将已彻底超声振散的微球加入100μL封闭液，置旋转混匀器充分反应1h或置2~8℃封闭过夜。
此外，还应注意如下问题：在离心前使标本完全自然形成凝块。
保持样品管的密闭状态。
抽血后2小时内完成离心和冷藏。
血清和血浆需用物理方法尽快与细胞分离。
去除所有可能存在的纤维蛋白和细胞成分，否则会得到假阳性结果。
如果48小时内不能完成检测即应将标本放入-20℃冰箱冻藏。
标本只能复溶一次，检测前须将复溶标本离心处理。
不要用水浴方法复溶标本。
吸取血浆标本时应避免将红细胞层上的白细胞或血小板层吸出。
含有颗粒物质的浑浊血清或血浆标本在检测前须先从原始管内转运出来，并重新离心，原始管中含有分离介质(分离胶)的可以不再离心。
如果标本不在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在-20℃或更低温度的环境中。
标本不能溶血。
标准液所用的物质对HIV抗体，乙型肝炎表面抗原和丙型肝炎抗体测试呈阴性反应。
建议各实验室建立自己的正常值范围。
测量的特征值(测量范围、精度、准确度、灵敏度)和多种分析仪的参数将另外提供。
以上信息仅供参考，如有需要建议咨询专业人士。
《免疫比浊分析》课件
免疫比浊试剂的制备
2
便进行免疫比浊分析实验。
根据实验需求，制备相应的免疫比浊试
剂，确保其质量和稳定性。
3
试管法免疫比浊分析的步骤
按照一定的程序和条件，在试管中进行Βιβλιοθήκη 微量比浊仪法免疫比浊分析的步
4
免疫比浊分析实验。
骤
使用微量比浊仪进行免疫比浊分析，准 确测定样品的蛋白质含量。
3. 数据分析
- 免疫比浊试剂的标准曲线 - 样品测定的结果计算 - 数据分析的示例
《免疫比浊分析》PPT课 件
免疫比浊分析是一种常用的实验方法，用于测定血液或生化样品中的特定蛋 白质含量。本课件将介绍免疫比浊分析的概述、实验步骤、数据分析、实验 注意事项、结论与展望等内容。
1. 概述
- 免疫比浊分析简介 - 免疫比浊分析的应用领域
2. 实验步骤
1
样品和抗原的制备
准备样品和抗原的浓度合适的溶液，以
4. 实验注意事项
样品处理的注意事项
保证样品质量和纯度，避免 样品污染或降解。
免疫比浊试剂的保存和 使用
妥善保存免疫比浊试剂，避 免受到温度、光照等因素的 影响。
实验过程中的注意事项
注意操作规范，避免误差的 产生。
5. 结论与展望
- 结论总结 - 免疫比浊分析的发展前景
6. 参考文献
- 相关研究文献 - 参考书目
胶乳免疫比浊法
胶乳免疫比浊法
胶乳免疫比浊法是一种测定血清中抗体水平的方法，又称为“比浊法”或“免疫比浊试验”。
它是由德国医学家莫尔登施塔特博士发明的，在20世纪50年代开始应用于临床实验室检测工作中。
它的原理是通过比较血清中抗体的浓度和浊度来估算出抗体水平。
胶乳免疫比浊法主要分为以下步骤：
1.将标本血清稀释到1:4，然后加入硫酸钠和5%的乳糖溶液，使其混匀；
2.将混合液加入到胶乳中，用磁搅拌机搅拌均匀；
3.将混合物放入温度为52℃-58℃的恒温水浴中，使其浊度变大；
4.将胶乳混合液冷却到室温，放入0.5mol/L硫酸钾溶液中，使其凝固；
5.将凝固的胶乳混合液放入定性比色皿中，添加碘酒精染色液，观察染色结果；
6.根据染色结果计算抗体水平，得出结论。
胶乳免疫比浊法的主要优点是快速、简便、准确，可以准确测定血清中抗体的浓度和浊度，反应时间短，报告时间短，可以很快地提供准确的抗体检测结果，且不需要使用任何复杂的仪器设备，适合在临床实验室实施。
同时，胶乳免疫比浊法也存在一些缺点，如检测过程中需要精确控温，并且胶乳混合液凝固后可能存在粘附现象，影响报告结果的准确性，也可能影响样本的保存，所以在检测过程中要注意避免这些问题的发生。
总而言之，胶乳免疫比浊法是一种快速、准确的血清抗体检测方法，可以帮助医生快速准确地确定病人的病情，为临床治疗提供重要参考。
免疫比浊法PPT
异性聚集影响结果。
免疫比浊法的特点：
实验原理
优点
稳定性好，敏感性高(达ng/L)、精确度高，干扰因素少，结果判断更加客观、 准确。
快速、简便，结果回报时间短，便于及时将各种信息向临床反馈，又可节约 大量人力物力，利于大批量样品的处理。
空白管
+蒸馏水 （10mL）
校准管 +IgX试剂 37℃ （1mL） 5min
+校准品 （10mL）
混匀 37℃,10min
OD340
样本管
+样品血清 （10mL）
结果计算方法：
实验结果
样本管吸光度 Ig浓度（g/L）×= Ig校准浓度（g/L）
校准管吸光度 IgA：1.72 g/L IgG：9.77 g/L IgM，除非放置较长时间 。
如要形成较大的的复合物，抗原抗体量应较大。
实验材料
1.免疫球蛋白A,M,G（IgA, IgM, IgG）测定试剂 2.免疫球蛋白A,M,G （IgA, IgM, IgG）校准品，蒸馏水，
血清样本 3.微量加样枪、试管 4.分光光度仪、水浴箱
实验方法
实验 免疫比浊法检 测免疫球蛋白
免疫系
1
实验原理
2
材料和方法
3
实验结果
实验原理
免疫球蛋白（Ig）是指一类具有抗体样结构或具有抗体活性的 球蛋白，能与诱导其产生的抗原发生特异性结合，是体液免疫 应答的主要效应分子。免疫球蛋白水平增高常见于各种慢性细 菌感染，如慢性骨髓炎、慢性肺脓肿等。在多种自身免疫病、 肝脏疾病患者中可有IgG、IgA、IgM升高：在系统性红斑狼疮 患者中以IgG、IgA或IgG 、IgM升高较多见；在类风湿关节炎 中则以IgM升高为主。免疫球蛋白水平降低多见于先天性体液 免疫缺乏病、肾病综合症、吸收不良综合症、淋巴瘤、放射损
免疫比浊分析
（三）技术要求
• 待测的抗原抗体复合物分子量足够大。
• 抗原抗体复合物数量足够多。 • 具有充分的反应时间，只能测定抗原抗 体反应的第二阶段。 • 高亲和力的抗体，并保证抗体过量。
（四）方法评价
优点: 灵敏度高，稳定性好，操作简便，结果准确 不足: ①抗体用量较大； ②溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大 ③透射比浊测定在抗原－抗体反应的第二阶段，检 测需在抗原抗体反应达到平衡后进行，耗时较长。
1．抗原抗体比例 抗原抗体比例要适当。 诊断试剂应尽可能 溶液中免
颗粒上的抗体与抗原特异结合，引起胶乳颗粒凝
聚 ，使透射光和散射光即出现显著变化。
三、免疫胶乳比浊法
（一）原理：
第二节 自动化免疫比浊分析
一、主流免疫比浊设备概况
（一）BN特种蛋白分析测定系统 1.测定原理 该系统的测定方法是透射免疫比浊法的 一种改良。以发光二极管作为光源，检测前
向角13～24度的散射光，然后利用硅化光电
二、免疫散射比浊法
(一) 原理 粒子对光线的散射作用是溶液中的微粒子受到 光线照射后，微粒子对光线产生反射和折射而形成 散射光。 悬浮微粒对光散射形成的散射光强度与微粒的 大小、数量、入射光的波长和强度、测量角度等因 素密切相关。
不同大小的微粒形成的散射光分布不同。
当微粒直径小于入射光的波长的十分之一时，
(二) 技术要求 应选择适当的光源强度、反应时间、测量角 度及光源的波长。 另外，要注意保证抗原浓度合适。 此外，还要选择适宜的离子强度、pH值等。
(三)速率散射比浊法（rate nephelometry） 速率散射比浊法是抗原抗体结合反应的一种动 态测定方法。
所谓速率是指抗原抗体反应在单位时间内形成免
体外诊断试剂XX测定试剂盒 (免疫比浊法)产品技术要求模板
医疗器械产品技术要求编号：XX测定试剂盒 (免疫比浊法)1.产品规格4 100 测试/盒，1 100 测试/盒。
2.性能指标2.1外观试剂盒整洁完好，文字标记和条码打印清晰。
2.2分析灵敏度试剂盒的分析灵敏度不高于1.0 IU/mL。
2.3准确性试剂盒对质控品的检测结果均值应在质控范围内。
2.4重复性试剂盒对质控品重复检测结果的CV值应不大于10%。
2.5批间差不同批次试剂盒检测结果的批间相对极差应不大于5%。
2.6稳定性取近效期或过效期的试剂盒检测各水平质控品，检测结果均值应在质控范围内。
3.检验方法3.1外观目视检查，应符合2.1的要求。
3.2分析灵敏度以校准液A重复测量20次，计算测量结果的平均值（x）及标准差（s）（公式1），平均值加两个标准差的浓度（x+2s）即为所得的分析灵敏度数值，应符合2.2的要求。
1-n )(s 2∑-=x x i (1)3.3 准确性分别以各水平质控品重复检测试剂盒，每个水平质控品各重复检测3次，计算各水平测量结果平均值，结果应符合2.3的要求。
3.4 重复性以质控品+对试剂盒进行检测，重复检测10次，按照公式（2）计算检测结果的CV 值，应符合2.4的要求。
%100⨯=x s CV (2)式中：CV 为变异系数；s 为标准差；x 为测量值的均值。
3.5 批间差用质控品+分别测试2个不同批号的试剂盒，每个批号测试5次，分别计算每批5次测定的均值i x （i=1,2），按公式（3）、（4）计算批间相对极差（D ），结果应符合2.5的要求。
221x x x C +=……………………………………………………(3) %10021⨯-=C x x x D (4)3.6 稳定性 取近效期或过效期的试剂盒检测各水平质控品，重复检测3次，检测结果应符合2.6的要求。
胶乳透射免疫比浊法
附件5胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）注册技术审查指导原则本指导原则旨在指导技术审评部门对胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）的技术审评工作，同时也为注册申请人注册申报资料的准备及撰写提供参考。
本指导原则是对胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）是指基于透射免疫比浊法原理，利用半自动生化分析仪、全自动生化分析仪对人血清、血浆中的胱抑素C 进行体外定量分析的试剂。
目前胱抑素C 含量的测定方法主要是基于抗原抗体反应的免疫方法，如胶乳免疫比浊法、胶体金免疫比色法、单向免疫扩散法、酶联免疫吸附法、放射免疫测定法、荧光免疫测定法等，免疫比浊法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。
其中透射免疫比浊法可适用于半自动生化分析仪、全自动生化分析仪，散射免疫比浊法需特定蛋白分析仪。
从方法学上讲，本指导原则仅适用于胶乳透射免疫比浊法, 不适用于散射免疫比浊法。
依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5 号）和《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242 号），胱抑素C 测定试剂（免疫比浊法）管理类别为二类，分类代号为6840。
二、注册申报资料要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、方法学特征、生物安全性评价、研究结果总结以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5 号）和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014 年第44 号）的相关要求。
06第六章 免疫比浊分析
返回章目录
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
第二节 自动化免疫比浊分析
一、主流免疫比浊设备概况
（一）BN特种蛋白分析测定系统 1.测定原理 该系统的测定方法是透射免疫比浊法的一种
改良。以发光二极管作为光源，检测前向角
13～24度的散射光，然后利用硅化光电二极 管接收散射光信号，经过微电脑处理，与标 准曲线进行比较，最后转换成待检物质的浓 度。
复合物产 产生速率 生总量
8 13 25 60 150 230 300 360 415 450 480 500 — 5 12 35 90 80 70 60 55 45 30 20
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
（二）技术要求 速率散射比浊法峰值出现的时间与抗体浓 度及纯度直接相关，需选用抗体纯度及亲和力 交高的试剂。此外，要保证待测样本血清的性 状符合要求，如严重脂血等即为不合格样本。
4
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
在抗原或抗体量一定的条件下，可以利用比 浊仪在光源的光路方向上测定透射光强度与 入射光强度的比值或吸光度，来判断待测抗 原的量，这种方法称为透射比浊法 。
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
透射免疫比浊法光路图
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
（二）技术要求
• 待测的抗原抗体复合物分子量足够大。
影响检测结果，因此需要选择均匀一致的
胶乳颗粒。此外，试剂需要加保护剂以提
高其稳定性，所用器皿要洁净，避免杂质 微粒的干扰。
人民卫生出版社
第六章
免疫比浊分析
（三）方法学评价 该法敏感度高，试剂稳定，个体免疫复 合物对结果影响也小，因此结果稳定、可 靠，特异性好，精确度高，且不需要特殊
免疫比浊法(可直接使用).ppt
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最新.课件
实验原理
聚乙二醇即PEG是中性、无毒且具有独特理化性质和良 好的生物相溶性的高分子聚合物，聚乙二醇具有高度的亲水 性，在水溶液中有较大的水动力学体积，并且没有免疫原性。
在免疫反应中，为增强抗原抗体反应常使用增聚剂，如34％的聚乙二醇等，利用其破坏抗原抗体的水化层，促进其靠 近反应，但如浓度不适合，高了会影响其它溶质或产生非特 异性聚集影响结果。
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最新.课件
实验原理
免疫比浊法的特点：
缺点
当抗体或抗原大量过剩时，出现可溶性的复合物，造成误差。
应维持反应管中的抗体蛋白量始终过剩，此值要预先测定。
受血脂浓度影响。脂蛋白的小颗粒可形成浊度，造成假性升高。
少量小抗原抗体复合物极难形成浊度，除非放置较长时间 。
如要形成较大的的复合物，抗原抗体量应较大。
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实验原理
血浆蛋白分析技术经历了：
试管沉淀反应、琼脂凝胶的扩散实验发展到现代免疫 分析技术，其中很重要得一类就是免疫比浊法。
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实验原理
抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫 复合物，在PEG作用下，成为悬浮于反应溶液中的微粒，使样品浊 度发生变化。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质， 当一定波长光线通过浊度发生变化的反应混合物时，由于被不溶性 免疫复合物吸收而减弱，故在一定范围内吸光度与免疫复合物量呈 正相关。当抗体浓度固定时，样品的浊度与其中所含抗原量成正比。
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最新.课件
实验材料
1.免疫球蛋白A,M,G（IgA, IgM, IgG）测定试剂 2.免疫球蛋白A,M,G （IgA, IgM, IgG）校准品，蒸馏水， 血清样本 3.微量加样枪、试管 4.分光光度仪、水浴箱
免疫比浊法工艺模板
纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）主要生产工艺及反应体系的研究一、实验目的研究合适的纤维蛋白（原）降解产物的生产工艺和最佳反应体系。
二、实验设计思想纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）原理是样本中的FDP抗原与试剂中的抗体结合，形成抗原抗体复合物，产生吸光度变化，胶乳试剂可特异性的增大该吸光度的变化，增大试剂的灵敏度。
该吸光度变化的高低与样本中的FDP的含量成正比，测定该吸光度，采用与校准品比较，即能得出样本FDP的含量。
三、主要仪器及试剂材料1.D240全自动生化分析仪/雷杜420全自动生化分析仪生产商:南京神州英诺华医疗科技有限公司/深圳雷杜生命科学股份有限公司2.纤维蛋白（原）降解产物校准品FDP含量：84μg/mL生产商：上海捷门生物技术合作公司批号：S2814-1四、实验内容及程序纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒主要生产工艺过程的研制及试剂盒反应体系的建立分为三个部分：生产工艺的研制、试剂盒组成的研制、试剂盒反应体系的建立。
产品拟定标准：线性范围：在拟定线性范围内，相关系数r≥0.99；准确度：测定已知溯源的FDP质控品，相对偏差（Bias%）≤±25%；灵敏度：测定已知溯源的FDP质控品12次，结果CV≤20%；精密度：测定已知溯源的FDP质控品20次，结果CV≤15%。
1.主要工艺描述1.1原液的准备购进商品化的高效价纤维蛋白（原）降解产物抗体致敏胶乳，将其稀释成合适的倍数，作为试剂2备用。
选择合适的缓冲体系，加入一定量的增浊剂和稳定剂作为试剂1备用。
1.2原液的验证购进有溯源的定值校准品，在生化分析仪上，将适量的校准品加入试剂1中，在适宜的条件下，和试剂2反应，根据校准品浓度和吸光度做剂量/响应曲线，得出一条持续上升的平滑曲线，即得到合格的原液。
2.反应体系的组成及其研究2.1购进有溯源并标示有定值的校准品；FDP含量：84μg/ml生产商：上海捷门生物技术合作有限公司批号：?2.2致敏胶乳的准备抗体致敏胶乳：上海捷门生物技术合作有限公司提供用实验室PBS缓冲液（0.1mol/L，PH=7.4）将其倍半稀释，分别稀释成：3.5倍、3倍2.5倍、2倍、1.5倍。
载脂蛋白C3测定试剂盒(免疫比浊法)产品技术要求模板
医疗器械产品技术要求编号载脂蛋白C3测定试剂盒(免疫比浊法)1.产品型号/规格及其划分说明1试剂组成试剂1：Tris-HCL缓冲液10mmol/L、氯化钠（NaCl）0.15mol/L、聚乙二醇(PEG)5.0%试剂2：Tris-HCL缓冲液10mmol/L、羊抗人载脂蛋白C3抗体≥65%校准品:冻干粉,单水平：人血清≥70%、目标浓度范围10.0～15.0mg/dL质控品:冻干粉,2水平：人血清≥70%、目标浓度范围：水平1：3.8～6.5mg/dL、水平2：6.0～12.5mg/dL、水平3：8.1～14.5mg/dL1.2型号规格试剂1:2×45mL、试剂2:2×15mL校准品（单水平，选配）：1×1mL；1×2mL；1×3mL质控品（水平1，选配）：1×1mL；1×2mL；1×5mL质控品（水平2，选配）：1×1mL；1×2mL；1×5mL质控品（水平3，选配）：1×1mL；1×2mL；1×5mL。
2.性能指标2.1外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色至淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为浅黄色或黄色粉末状物质，复溶后为浅黄色或黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为浅黄色或黄色粉末状物质，复溶后为浅黄色或黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3试剂空白A340nm下测定空白吸光度应≤0.5000。
2.4准确度与已上市产品进行比对试验：相关系数r≥0.975，在[2.0，6.0]mg/dL区间内测定的绝对偏差应不超过±0.60mg/dL，在（6.0，20]mg/dL区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
免疫比浊法测C反应蛋白
免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。
其基本原理是：当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂（聚乙二醇等）的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。
当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。
通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。
抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。
在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质，可用仪器检测，提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。
免疫比浊测定注意事项：1、抗原或抗体量大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差。
2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。
3、易受到脂血的影响。
分类1.免疫透射比浊法抗原抗体结合后，形成免疫复合物，在一定时间内复合物聚合出现浊度。
当光线通过溶液时，可被免疫复合物吸收。
免疫复合物量越多，光线吸收越多。
光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。
利用比浊计测定光密度值，复合物的含量与光密度值成正比，同样当抗体量一定时，光密度值也与抗原含量成正比。
本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便，但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度，否则就难以测出。
2.免疫散射比浊法一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液使遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。
散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测抗原越多，形成的复合物也越多，散射光也越强。
散射光的强度还与各种物理因素，如加入抗原或抗体的时间、光源的强弱和波长、测量角度等密切相关。
散射比浊法又分为速率散射比浊法和终点散射比浊法。
3.免疫胶乳比浊法胶乳比浊法即是将待测物质相对应的抗体包被在直径为15－60nm的胶乳颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，光通过之后，透射光和散射光的强度变化更为显著，从而提高试验的敏感性。
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纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）
主要生产工艺及反应体系的研究
一、实验目的
研究合适的纤维蛋白（原）降解产物的生产工艺和最佳反应体系。
二、实验设计思想
纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）原理是样本中的FDP抗原与试剂中的抗体结合，形成抗原抗体复合物，产生吸光度变化，胶乳试剂可特异性的增大该吸光度的变化，增大试剂的灵敏度。
该吸光度变化的高低与样本中的FDP的含量成正比，测定该吸光度，采用与校准品比较，即能得出样本FDP的含量。
三、主要仪器及试剂材料
1.D240全自动生化分析仪/雷杜420全自动生化分析仪
生产商:南京神州英诺华医疗科技有限公司/深圳雷杜生命科学股份有限公司
2.纤维蛋白（原）降解产物校准品
FDP含量：84μg/mL
生产商：上海捷门生物技术合作公司
批号：S2814-1
四、实验内容及程序
纤维蛋白（原）降解产物测定试剂盒主要生产工艺过程的研制及试剂盒反应体系的建立分为三个部分：生产工艺的研制、试剂盒组成的研制、试剂盒反应体系的建立。
产品拟定标准：
线性范围：在拟定线性范围内，相关系数r≥0.99；
准确度：测定已知溯源的FDP质控品，相对偏差（Bias%）≤±25%；
灵敏度：测定已知溯源的FDP质控品12次，结果CV≤20%；
精密度：测定已知溯源的FDP质控品20次，结果CV≤15%。
1.主要工艺描述
1.1原液的准备
购进商品化的高效价纤维蛋白（原）降解产物抗体致敏胶乳，将其稀释成合适的倍数，作为试剂2备用。
选择合适的缓冲体系，加入一定量的增浊剂和稳定剂作为试剂1备用。
1.2原液的验证
购进有溯源的定值校准品，在生化分析仪上，将适量的校准品加入试剂1中，在适宜的条件下，和试剂2反应，根据校准品浓度和吸光度做剂量/响应曲线，得出一条持续上升的平滑曲线，即得到合格的原液。
2.反应体系的组成及其研究
2.1购进有溯源并标示有定值的校准品；
FDP含量：84μg/ml
生产商：上海捷门生物技术合作有限公司
批号：?
2.2致敏胶乳的准备
抗体致敏胶乳：上海捷门生物技术合作有限公司提供
用实验室PBS缓冲液（0.1mol/L，PH=7.4）将其倍半稀释，分别稀释成：3.5倍、3倍2.5倍、2倍、1.5倍。
用上述已准备好的不同稀释倍数FDP抗体致敏胶乳和稀释好的校准品在生化仪上进行操作。
2.2.1实验方法
2.2.2实验结果
2.2.3实验结论
由上述测试结果可以看出，将FDP抗体致敏胶乳稀释到?倍的时候高值出现下滑，因此本试剂的最高稀释倍数为?倍,因此购进上海捷门生物技术合作公司的FDP抗体致敏胶乳，选择能够稀释?倍或以下倍数的致敏胶乳原料。
2.3缓冲体系的选择
由于致敏胶乳的稀释是PBS缓冲液，因此反应的缓冲体系也选用相同浓度和PH值的缓冲液
2.3.1PH值的选择
经过纯化的抗体在常用的缓冲液中是稳定的，PH值应保持在中性左右。
PH 在7到8之间时，保存多年，对抗体也无实质性的损害，可保证其活性的稳定性。
配制PH值分别为：7.0、7.4、7.8、8.0的PBS缓冲液，选择稀释了？倍的致敏胶乳抗体作为试剂2。
按照2.2.1中的实验方法进行操作。
2.3.1.1 实验结果
2.3.1.2实验结论
由测试结果可以看出PH在7.4的时候线性是最好的，而且各相邻浓度之间
吸光度变化明显，因此可以确定PH为7.4时，是最佳的反应环境。
2.3.2稳定剂的选择
叠氮钠价格低廉，原材供应渠道广，是实验室常用的稳定剂，用量很少。
因此选用叠氮钠1g/L。
2.3.3PEG浓度
PEG有促进抗原抗体结合的作用，很多时候抗原抗体反应缓慢，为了满足临床检测的需求会加入适当的PEG加快抗原抗体反应速度，缩短检测时间。
配制PEG浓度：0%、0.5%、1%、1.5%、2%的PBS缓冲液，并将配制好的缓冲液作为试剂1备用。
选择稀释了3倍的致敏胶乳作为试剂2，按2.2.1方法操作。
2.3.3.1实验结果
2.3.3.2实验结论
由测试结果可以看出PEG浓度在0%的时候，线性是最好的，而且各相邻浓度之间吸光度变化明显，因此可以确定PEG的浓度为0%时是最佳浓度。
3.样本的要求
静脉采血，将枸橼酸钠（0.11mol/L）与全血以1:9混合，避免气泡产生。
立即离心，不小于3000转/分，离心10分钟，收集上层血浆。
如不能使用新鲜血浆，可在2-8摄氏度保存2天，或在-20摄氏度分量冰冻，避免反复冻融。
4.试剂用量
确定R1和R2试剂加入的最佳比例。
按确定的配方配制R1与R2试剂，并按产品标准要求，用校准品按照2.2.1方法进行检测，比较各比例试剂的吸光度。
4.1 实验结果
4.2 实验结论
由测试结果可以看出试剂用量比例为225:75时线性是最好的，而且各相邻浓度之间吸光度变化明显，因此可以确定试剂比例为225:75为最佳比例。
5. 样本用量
取配制合格的R1、R2试剂，用校准品检测，样本用量分别按3ul 、5ul 、7ul 、10ul 进行，R1和R2的用量为225:75，按照2.2.1
方法检测，比较各个样本量的吸光度值。
5.1 实验结果
5.2 实验结论
由测试结果可以看出样本量为5ul 时线性是最好的，而且各相邻浓度之间吸光度变化明显，因此样本量为5ul 时是最佳的反应量。
6. 反应条件
因为免疫试剂是模仿体内反应，因此做一下几种温度的研究，25℃、37℃、40℃。
6.1 实验结果
6.2实验结论
由测试结果可以看出，温度为25℃反应很缓慢，吸光度偏小，温度为40℃反应很迅速，但是高值分不开，温度为37℃时反应速度适宜，测试结果的线性也比较好，因此最佳的温度确定为37℃。
五、结论
综上所述，反应体系成分组成如下：
一、胶乳凝集实验方法
1．胶乳凝集实验：先加受检标本，滴于反应板上，再加致敏胶乳1滴，连续摇动2-3min后观察结果。
胶乳凝集者为阳性，不凝集者为阴性。
同时需做阴、阳性对照。
2．胶乳凝集抑制实验：在反应板上先加受检标本1滴，再加1滴配对抗血清混匀，最后加1滴致敏胶乳悬液，连续摇动2-3min观察结果。
胶乳凝集者为阴性，不凝集者为阳性。
同时需做阴、阳性对照。
二、致敏胶乳试剂的制备（物理吸附法）
1．先用蒸馏水将10%胶乳悬液稀释至1-2%。
继将吸附物（抗原或抗体）溶于pH8.2硼酸缓冲盐水或pH8.2甘氨酸缓冲盐水中，逐滴加入稀释的胶乳悬液中，摇动使之充分混匀。
1%胶乳悬液1ml，一般能吸附0.1-1mg物质。
2．放置室温或37℃30-60min。
3．吸附完后，4000r/min离心30-45min，弃去上清液，沉淀仍用同一缓冲盐水恢复悬浮状态。