细胞生物学实验⑤植物组织切片的制备
植物切片相关实验报告(3篇)
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第1篇一、实验目的1. 了解植物切片的制作过程及注意事项。
2. 掌握植物组织切片技术在植物学研究中的应用。
3. 通过观察植物切片,了解植物组织的结构特征。
二、实验原理植物切片技术是一种重要的植物学研究方法,通过将植物组织制成薄片,便于在显微镜下观察其结构特征。
本实验采用石蜡切片法,将植物组织固定、脱水、透明、包埋、切片、染色,最后进行封片。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:洋葱鳞片叶、马铃薯块茎、胡萝卜根等。
2. 仪器设备:切片机、显微镜、显微镜载物台、显微镜镜头、载玻片、盖玻片、酒精灯、酒精、二甲苯、甲醛、石蜡、刀片、剪刀、镊子、滴管、烧杯、滤纸等。
四、实验步骤1. 固定:将植物材料放入装有甲醛的烧杯中,浸泡24小时。
2. 脱水:将固定后的植物材料依次放入50%、70%、90%、95%、无水酒精中,每级酒精浸泡30分钟。
3. 透明:将植物材料放入二甲苯中,室温下浸泡,使组织透明。
4. 包埋:将透明后的植物材料放入熔化的石蜡中,使其成为石蜡块。
5. 切片:将石蜡块放入切片机中,切取5-10微米的薄片。
6. 染色:将切片放入染液中,如苏木精-伊红染色液,室温下染色30分钟。
7. 水洗:将染色后的切片用蒸馏水冲洗,去除多余的染液。
8. 封片:将冲洗后的切片用中性树胶封片,制成植物切片。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶切片观察:- 表皮细胞:细胞呈长方形,排列紧密,细胞壁较厚,细胞核较大,染色较深。
- 保卫细胞:位于表皮层,呈肾形,细胞壁较薄,细胞核较小。
- 保卫细胞间隙:保卫细胞之间形成的空隙,有利于气体交换。
- 气孔:保卫细胞之间形成的开口,是气体交换的主要通道。
2. 马铃薯块茎切片观察:- 表皮细胞:细胞呈多边形,排列紧密,细胞壁较厚,细胞核较大。
- 薄壁组织:位于表皮下方,细胞较大,细胞壁较薄,含有丰富的营养物质。
- 维管束:由韧皮部和木质部组成,负责水分和养分的运输。
3. 胡萝卜根切片观察:- 表皮细胞:细胞呈长方形,排列紧密,细胞壁较厚,细胞核较大。
植物切片图实验报告内容
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植物切片图实验报告内容引言植物切片图是植物解剖学研究中常用的技术手段之一,通过对植物的组织结构进行切片、染色和观察,可以了解植物不同部位的细胞和组织的形态特征、结构组成以及功能等方面的信息。
本实验旨在通过对一种植物的切片制备、染色和观察,掌握植物切片图的制备和解读方法。
材料与方法材料1. 鲜嫩的植物组织(例如青菜、茄子等)2. 苏木精3. 95%乙醇4. 伊红(或其他染色剂)5. 水6. 显微镜7. 切片刀8. 干燥培养皿9. 轻柔镊子10. 毛细管方法1. 取一片新鲜的植物组织,使用切片刀将其切成薄片。
2. 将切片放入干燥培养皿中,用毛细管吸取适量的苏木精液覆盖切片,浸泡10分钟。
3. 将切片捞出,放入另一个干燥培养皿中,用毛细管滴加少量95%乙醇漂洗,漂洗时间为2-3分钟,使苏木精被乙醇溶解出来。
4. 用毛细管滴加适量的伊红液覆盖切片,浸泡5-10分钟,使切片染色。
5. 将切片捞出,用毛细管滴加水漂洗,漂洗时间约为1分钟。
6. 将切片用毛细管转移到显微镜玻片上,轻轻压平并吸走多余的水。
7. 将显微镜玻片放入显微镜平台上,使用显微镜观察切片,调节放大倍率和焦距,观察并记录切片中的细胞和组织结构。
结果与分析经过染色和观察,我们成功制备了一张植物切片图,以青菜叶片为例,我们观察到了以下几个主要部分:1. 表皮细胞:位于叶片表面的一层细胞,通常为长方形或多角形,覆盖在叶片的外表面,起到保护作用。
2. 导管组织:植物体内的维管束组成,由导管细胞和同伴细胞组成,用于水分和养分的运输。
3. 叶肉细胞:叶片内部组织,通常为长方形或多角形,负责光合作用和储存养分。
4. 维管束:包括导管组织和伴随细胞,负责水分和养分的输送,使得叶片能够正常生长和供养整个植物。
5. 叶脉:位于叶片中央的部分,主要由维管束组成,可分为主脉和次脉,起到支持和运输的功能。
通过观察植物切片图,我们可以了解到不同组织的形态特征和结构组成,从而推测其功能和作用。
一款制作植物组织永久切片的简单工序
![一款制作植物组织永久切片的简单工序](https://img.taocdn.com/s3/m/901472ab70fe910ef12d2af90242a8956becaaf7.png)
一款制作植物组织永久切片的简单工序制作植物组织永久切片的简单工序___________________________________________植物的永久切片是由植物学家和生物学家制作的一种技术,可以用来观察植物细胞的结构和形态,从而获得有关植物生长、发育、适应性等的重要信息。
制作植物永久切片的工序简单易行,但需要一定的技术。
下面介绍了制作植物组织永久切片的简单工序:### 一、准备材料要制作植物组织永久切片,需要准备如下材料:1. 植物样本:通常是取自健康的植物,尽量避免使用伤口或染色体变异的植物;2. 水和盐水:用于浸泡样本;3. 一把实验剪刀:用来剪取植物样本;4. 盐酸:用于脱落去除样本表面的死细胞和细胞外物质;5. 水溶性胶:用于将样本固定在显微镜片上;6. 水溶性染料:用于染色切片;7. 显微镜片:用于观察切片;8. 盐水:用于保存切片。
### 二、准备样本1. 将样本浸泡在水中或盐水中10-15分钟,以便其表皮和内部的细胞均匀地膨胀;2. 使用剪刀剪取样本的一小部分,然后放入盐酸中浸泡5-10分钟,以去除表皮死细胞和外部物质;3. 用凉水冲洗样本,直至表皮无法剥离。
### 三、固定样本并制作切片1. 将样本放入水溶性胶中浸泡10-15分钟,以将样本固定在显微镜片上;2. 使用一把实验剪刀将样本剪成3-4微米厚的切片;3. 将制作出的切片放入盐水中浸泡5-10分钟,以保证细胞不被剪断。
### 四、染色并观察切片1. 将样本切片浸泡在水溶性染料中10-15分钟,以使其形成彩色染色效果;2. 将彩色的样本切片放入显微镜下观察,以获得关于植物生长、发育、适应性等信息。
### 五、保存切片1. 将彩色的样本切片取出后用凉水冲洗干净;2. 将冲洗后的样本切片放入盐水中保存。
通过以上步骤就可以完成一份优秀的植物永久切片。
在制作过程中要尽量避免使用伤口或变异的样本,以便得到真实而准确的信息。
一款制作植物组织永久切片的简单工序
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一款制作植物组织永久切片的简单工序
植物组织永久切片,是一种实验室常用的技术,它能够精确地显示出细胞结构和组织关系,为进一步的生物学研究提供重要的实物参考。
本文将介绍一种简易的制作植物组织永久切片的工序。
1. 收集静态干燥的植物组织样品,若有生长的植物组织,可使用锋利的剪刀将其剪成稍细的片段,然后将其放入焦磷酸盐纸中,处理到它们在纸中能够保持它们的原形;
2. 将其从焦磷酸盐纸中取出,放入70%甲醇中浸泡5分钟,然后将甲醇沥干;
3. 将该块片段放入离心瓶中,倒入脱水甲醇,再加入2-3滴甲醇衍生物,然后像正常甲醇操作一样在37℃处理一小时;
4. 将片段放入脱模剂中浸泡5分钟,然后抽出片段,放入彻底的脱水甲醇中,处理2-3分钟;
5. 用混合85%醇,5%玻璃胶和10%蓝指甲油的溶液将片段放入,加热至60-65℃,处理五分钟;
6. 将处理过的植物片段放入原位置,放入含石蜡的贴片切片机中,切片,厚度约为4-5微米;
7. 将切好的片段放入石蜡胶片中,再放入至少5%氢氧化钾溶液中浸泡;
8. 胶片冷却到室温后,用正常的洗涤法洗涤,再用100%乙醇洗涤;
9. 用染料渗透染色,准备放大装配的抛光膜,细腻制作,就可以得到完美的植物组织永久切片了。
本方法均为视个体样品的不同而定,步骤或配方可调整。
作出完美切片不仅需要操作工具与药剂的加减,还需要有足够的经验和技能,只有经过细致的操作,才能将植物组织永久切片做得完美。
细胞生物学实验⑤植物组织切片的制备
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植物组织切片的制备生物122 祝洪晨1202040220 实验目的:通过石蜡切片法了解和掌握动物和植物材料切片制作的基本原理和一般方法。
实验原理:进行组织学和细胞学研究,必须把新鲜的组织或器官制作成切片,以便在显微镜下观察。
制作生物制片要求尽量保持细胞结构的完整性和真实性。
石蜡切片法是一种较常用的制片法。
一般操作步骤是:取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→烤片→脱蜡→复水→染色→脱水→透明→封藏。
其原理是将样品固定后,包埋于石蜡中,使其具有一定的硬度,便于在石蜡切片机上切片成足够薄的切片。
切片染色后经封藏可制作成永久制片。
实验步骤:1)取材、固定与抽气:本实验用蚕豆根、向日葵茎、夹竹桃叶为材料,制作横切片观察其内部结构。
用刀片切取所需根和茎的部位3-4㎜为一段,叶应取叶片中部主脉约4㎜宽的叶片。
小组各取5-6块,立即用FAA固定液固定。
固定过程中必须进行抽气。
2)洗涤与保存:教师代做。
3)脱水:70%酒精(1h)→80%酒精(1h)→90%酒精(1h)→95%酒精(1h)→无水乙醇(1h)→无水乙醇(1h)。
4)透明:无水乙醇(1h)→2/3酒精+1/3二甲苯(1h)→1/2酒精+1/2二甲苯(1h)→1/3酒精+2/3二甲苯(1h)→二甲苯(1h)→二甲苯(1h)。
5)浸蜡:教师代做。
6)包埋:折叠纸盒→灌蜡水→竖直放置植物材料于纸盒底部→冷却石蜡。
7)切片:将包埋好的蜡块用刀片修成较规则的梯形,以少量热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上,夹在轮转式切片机的蜡块钳内,使蜡块切面与切片刀刃平行,旋紧。
切片厚度通常为5~12μm,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上。
8)贴片与烤片:在洁净的载玻片上直接滴加两滴蒸馏水,再将一定长度的蜡带放至载玻片上铺正,在温台上略加热使蜡片铺展开来,最后用滤纸吸去多余的水分,将载玻片放入45℃的温箱中干燥。
9)染色:二甲苯(5min)→二甲苯(5min)→2/3二甲苯;1/3乙醇(1min)→1/2二甲苯;1/2乙醇(1min)→1/3二甲苯;2/3乙醇(1min)→100%乙醇(1min)→95%乙醇(1min)→90%乙醇(1min)→80%乙醇(1min)→70%乙醇(1min)→50%乙醇(1min)→番红染色(40min)→50%乙醇(1min)→70%乙醇(1min)→80%乙醇(1min)→90%乙醇(1min)→95%乙醇(1min)→0.5%固绿(1min)→95%乙醇(1min)→100%乙醇(1min)→1/3二甲苯;2/3乙醇(1min)→1/2二甲苯;1/2乙醇(1min)→2/3二甲苯;1/3乙醇(1min)→二甲苯(1min)→二甲苯(1min)。
安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤
![安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤](https://img.taocdn.com/s3/m/430925a8e109581b6bd97f19227916888486b9c0.png)
安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤制作植物细胞和组织切片是植物学和生物学研究中常用的实验方法之一、下面是一般的植物细胞和组织切片制作步骤。
1.实验材料准备-植物标本:选择具有代表性的植物标本,新鲜度较高的嫩叶、茎和根部适合制作细胞和组织切片。
-植物细胞和组织固定剂:常用的固定剂有乙醇、乙酸、福尔马林等。
选择适当浓度的固定剂根据样本的特性来确定。
-切片工具:显微刀片、玻璃切片、切片夹和切片盒等。
-切片染色剂:苏木素、伊红等。
2.样本处理-选择适当大小的植物标本,将其放置在固定剂中固定一段时间,常规处理时间为1-24小时,具体时间根据固定剂浓度和标本的特性来确定。
较硬的组织可选择用150-200mL的固定液浸泡2-12小时,较脆弱的组织可缩短固定时间。
-固定后,将样本从固定剂中取出,用纸巾轻轻擦干外表水分。
3.组织松解-对于较厚的植物组织,需要进行松解以使细胞方便切片观察。
通常,可用腐解溶液进行松解。
常用的腐解溶液有酶解液、盐酸和氯化铁等。
将样本浸泡在腐解溶液中,温度和处理时间根据样本的特性而定,通常需要温和的温度(如37°C)并持续一段时间(如30分钟-4小时),直到细胞组织松解。
4.切片制备-用镊子将处理好的样本取出,用切片钳将样本固定在切片夹上。
夹住样本的位置要仔细选择,以尽量保留较好的细胞和组织结构。
-使用显微刀片沿着横切面或纵切面将样本切割成较薄的切片。
刀片的角度和力度要适中,避免切片过厚或者过薄。
厚度通常为10-20微米。
-将切好的样本放在预先准备好的玻璃切片上。
用切片钳将切片夹住,并用切片盒盖上,防止灰尘和水分进入。
5.切片染色-拿起玻璃切片,将其放在染色剂(如苏木素溶液)中浸泡。
染色时间根据样本和染色剂而定,通常需要15-30分钟。
-取出染色剂,用去离子水或蒸馏水冲洗切片,直到水洗液透明。
-将切片用纸巾轻轻吸干水分,然后放在显微镜玻片上。
6.保存和观察-将切片放在带盖玻片上,用透明胶带黏贴边缘以防止切片移动。
植物组织切片技巧
![植物组织切片技巧](https://img.taocdn.com/s3/m/3d0f9b09f011f18583d049649b6648d7c1c708a5.png)
植物组织切片技巧植物组织切片技巧是生物学研究中非常重要的一项实验技术,它能够帮助我们观察和研究植物的细胞结构、组织构成以及生理功能。
本文将介绍一些常用的植物组织切片技巧,希望能够对读者有所帮助。
1. 样品采集与固定在进行植物组织切片之前,首先需要采集新鲜的植物样品,并将其固定。
样品的选择应根据研究目的而定,可以是植物的叶片、茎、根等部位。
固定样品的目的是保持其原有的形态和结构,常用的固定剂有福尔马林、醋酸乙酯等。
固定时间一般为数小时至数天,具体时间根据样品的大小和组织结构而定。
2. 组织切片的准备在进行组织切片之前,需要将固定的样品进行处理和准备。
首先,将样品进行脱水处理,这可以通过逐渐将样品浸泡在浓度递增的酒精溶液中来实现。
脱水的目的是去除样品中的水分,以便后续的切片操作。
接下来,将样品进行透明化处理,这可以通过将样品浸泡在透明剂(如苯酚、甘油等)中来实现。
透明化的目的是使样品变得透明,以便于观察切片。
3. 切片的技巧在进行组织切片时,需要使用显微镜和切片刀。
首先,将透明化的样品取出并放置在显微镜玻片上。
然后,使用切片刀将样品切成薄片,薄片的厚度一般为几十至几百微米。
切片时需要保持手稳定,刀片锋利,以免损坏样品或者切出不理想的切片。
切片完成后,将切片放置在显微镜玻片上,并加入一滴适当的显微镜溶液,以保持切片的湿润。
4. 切片染色与观察为了更好地观察和研究植物组织的细胞结构,可以对切片进行染色处理。
常用的染色剂有甲苯胺蓝、伊红等。
染色的目的是使细胞和组织的结构更加清晰可见。
将染色剂滴在切片上,静置片刻后,用纸巾轻轻吸去多余的染色剂。
然后,将切片放置在显微镜下观察。
可以调节显微镜的放大倍数和焦距,以获得更清晰的图像。
总结起来,植物组织切片技巧是一项需要细心和耐心的实验技术。
在进行植物组织切片之前,需要采集和固定样品,然后进行脱水、透明化和切片处理。
最后,可以对切片进行染色处理,并使用显微镜观察和研究植物组织的细胞结构。
植物切片实验报告
![植物切片实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/e5fc2e41fd4ffe4733687e21af45b307e871f9a7.png)
一、实验目的1. 掌握植物切片的制作技术,了解植物组织结构。
2. 通过显微镜观察植物组织的细胞结构,学习植物细胞的基本形态和特征。
3. 熟悉植物组织的分类和功能,加深对植物生理学知识的理解。
二、实验原理植物切片实验是通过将植物组织切成薄片,在显微镜下观察其细胞结构,从而了解植物组织的形态、结构和功能。
实验过程中,需使用切片机将植物组织切成薄片,然后通过染色、封片等步骤,使细胞结构清晰可见。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:植物叶片、茎、根等新鲜或干燥的组织。
2. 实验仪器:切片机、显微镜、染色液、封片剂、载玻片、盖玻片等。
四、实验步骤1. 切片制作a. 将植物组织洗净,切成适宜大小的块状。
b. 将组织块放入切片机中,调整切片厚度(一般为10-20微米)。
c. 将切片取出,用毛刷轻轻扫入盛有清水的培养皿中。
2. 染色a. 将切片用吸水纸吸干水分。
b. 将切片放入染色液中,根据不同组织选择合适的染色液(如苏木精-伊红染色液)。
c. 染色时间根据组织类型和染色液浓度进行调整,一般为5-15分钟。
3. 封片a. 将染色后的切片用吸水纸吸干水分。
b. 将切片放置在载玻片上,用封片剂覆盖,使其与载玻片牢固粘合。
4. 显微镜观察a. 将封片后的载玻片放置在显微镜载物台上,调整焦距,观察植物组织的细胞结构。
b. 观察不同植物组织的细胞结构,如叶片的表皮、叶肉、叶脉;茎的韧皮部、木质部;根的皮层、维管束等。
五、实验结果与分析1. 叶片切片a. 表皮细胞:多为长方形,排列紧密,细胞壁较厚,具有气孔器。
b. 叶肉细胞:分为栅栏组织和海绵组织,栅栏组织细胞排列紧密,海绵组织细胞排列疏松。
c. 叶脉:由维管束构成,包括木质部和韧皮部。
2. 茎切片a. 韧皮部:细胞排列紧密,细胞壁较厚,具有韧性和保护作用。
b. 木质部:细胞排列紧密,细胞壁较厚,具有输送水分和养分的功能。
3. 根切片a. 皮层:细胞排列疏松,具有吸收水分和养分的功能。
切片实验报告心得体会
![切片实验报告心得体会](https://img.taocdn.com/s3/m/348658720166f5335a8102d276a20029bd6463ea.png)
一、实验背景切片实验是生物学实验中常见的一种技术,通过对生物样本进行切片,以便于观察和研究其内部结构和组织。
本次实验旨在通过切片技术,了解植物细胞的结构和功能,以及动物组织切片的制备过程。
二、实验目的1. 掌握植物细胞和动物组织切片的制备方法。
2. 观察植物细胞和动物组织的显微结构,了解其功能。
3. 培养实验操作技能和观察分析能力。
三、实验过程1. 植物细胞切片制备(1)选取新鲜的植物叶片,用剪刀剪成小块。
(2)将剪好的叶片放入装有酒精的试管中,浸泡30分钟。
(3)取出叶片,用刀片将叶片切成薄片。
(4)将切片放入装有甘油和醋酸的混合液中,浸泡10分钟。
(5)取出切片,用滤纸吸去多余液体,放入载玻片中。
(6)用显微镜观察植物细胞结构。
2. 动物组织切片制备(1)选取新鲜的小鼠肝脏,用剪刀剪成小块。
(2)将剪好的肝脏放入装有酒精的试管中,浸泡30分钟。
(3)取出肝脏,用刀片将肝脏切成薄片。
(4)将切片放入装有甘油和醋酸的混合液中,浸泡10分钟。
(5)取出切片,用滤纸吸去多余液体,放入载玻片中。
(6)用显微镜观察动物组织结构。
四、实验结果与分析1. 植物细胞切片观察结果通过显微镜观察,发现植物细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等结构。
细胞壁位于细胞的最外层,具有保护和支持细胞的作用;细胞膜是细胞内外物质交换的通道;细胞质是细胞内部的结构和功能区域;细胞核是细胞的控制中心,负责细胞的遗传信息传递;液泡是细胞内储存物质的地方。
2. 动物组织切片观察结果通过显微镜观察,发现动物组织具有细胞、血管、神经等结构。
细胞是组织的基本单位,具有多种功能;血管负责输送氧气和营养物质,以及带走代谢废物;神经负责传递信息,调节身体的各种生理活动。
五、心得体会1. 实验操作的重要性本次实验让我深刻认识到实验操作的重要性。
在实验过程中,要严格按照操作步骤进行,避免人为误差。
同时,要注重实验操作的规范性和安全性,确保实验顺利进行。
组织切片制备实验报告
![组织切片制备实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/2541ee53fd4ffe4733687e21af45b307e871f927.png)
组织切片制备实验报告引言组织切片制备是生物学和医学研究中常用的技术方法之一,它可以将生物组织固定、切割、染色,并用于显微镜观察。
本实验的目的是掌握组织切片制备的基本步骤和技巧,为后续的细胞结构和功能研究打下基础。
实验步骤1. 组织采集:选择适当的实验动物(如小鼠),麻醉后将其进行献血,获取需要研究的组织样本。
2. 组织固定:将组织样本迅速放入福尔马林等固定液中,使细胞和组织结构得以保存,避免其在切片过程中的变形和退变。
3. 组织处理:将固定的组织样本进行脱水、浸渍和包埋处理,以便更好地进行切片。
4. 切片:将处理好的组织样本放入冰箱中冷冻,使用切片机将其切成薄片,一般常见的切片厚度为5-10μm。
5. 切片染色:将切片置于染色溶液中,如血液涂片常用的偏心染色法,使细胞和组织结构得以清晰显现。
6. 封片:将染好色的切片用封片胶囊将其包裹住,一方面保护切片,另一方面增加穿刺性。
7. 显微镜观察:将封好的切片放在显微镜载物上,调节显微镜的倍镜和焦距进行观察,观察并记录切片的细胞和组织结构。
实验结果我们成功地制备了小鼠肝脏组织切片,并进行了染色和封片处理。
在显微镜下观察到了切片中肝细胞和血管的明显结构,如图1所示。
![图1. 小鼠肝脏组织切片](image1.jpg)由于染色的存在,可以清晰地观察到肝细胞的细胞核、胞质和细胞排列的方式,这有助于后续的细胞学研究。
同时,血管的形态和分布也能够被明确观察到,为血管学的研究提供了依据。
实验讨论组织切片制备是一项基础而重要的技术,对于生物学和医学研究非常关键。
在本次实验中,我们采用了小鼠肝脏作为研究对象,通过固定、切片、染色和封片等步骤,成功地观察到了其细胞和组织结构。
然而,在实验过程中也存在一些问题和改进的空间。
首先,组织的制备工作需要迅速而准确,以避免细胞和组织结构的变形和退变。
其次,在切片过程中,切片的厚度和大小也需要一定的技巧掌握,这会直接影响到显微镜下的观察效果。
安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤
![安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤](https://img.taocdn.com/s3/m/90129074e418964bcf84b9d528ea81c759f52e7b.png)
安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作
步骤
安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤如下:
1. 材料准备:准备需要制作切片的植物样品,可以是根、茎、叶等组织,将其放入无菌蒸馏水中洗净,并使用无菌器具将样品切成适当大小的块状。
2. 固定样品:将植物样品放入固定液中,常用的固定液有缓冲福尔马林液、乙酸铅等。
固定液的选择应根据实验目的和样品的性质来确定。
固定时间根据样品的厚度和性质有所不同,一般为数小时至数天。
3. 组织脱水:将固定的样品从固定液中取出,用一系列的醇溶液逐步脱水,例如50%、70%、85%、95%和100%的乙醇浓度。
每个浓度的乙醇浸泡时间一般为几分钟至数小时,直到样品完全脱水。
4. 渗透剂处理:将脱水后的样品放入透明剂中,常用的透明剂有二甲苯、苯酚等。
透明剂的选择也要考虑样品的性质,渗透剂的浸泡时间一般为数小时至数天。
5. 浸渍和切片:将样品从透明剂中取出,放入浸蜡剂中,浸泡时间一般为数小时至数天,直到样品浸渍均匀。
然后,将浸渍后的样品放入专门的石蜡模具中,倒入石蜡进行固化,待石蜡固化后,用切片机将石蜡块切成薄片。
6. 制片染色:将切得的薄片放入脱脂苯中进行溶剂脱蜡,然后使用一系列的醇浓度逐步脱水。
最后,将薄片放入适当的染色剂中,如苏木精和伊红染剂进行染色。
7. 封片:将染色后的薄片放在载玻片上,涂上适当的封片剂,然后将另一片玻片压在上面,使其充分粘合。
8. 标本保存:将制作好的植物细胞及组织切片标本放入干燥、通风、阴凉的地方,避免阳光直射,可长时间保存。
这些步骤仅为大致参考,实际操作应根据具体情况和实验要求进行调整。
实验植物细胞切片的制作
![实验植物细胞切片的制作](https://img.taocdn.com/s3/m/5b487c9765ce050876321354.png)
3)下降至70%酒精(水):分别经400 ml纯酒精、95%、85%、70%酒精割 400 ml(50%及30%酒精下降至蒸馏 水),并回收各液。 4)番红复染色:400 ml 1%番红酒精(水 液)再染色2h。回收染液, 并用自来水 洗去多余的染液。 5)继续脱水:用30%、50%和70%酒精 400 ml各处理30s~1 min,并回收各液。 6)固绿复染:用0.1%固绿的95%酒精 400 ml复染10~30s,回收染液。
二、实验用品和材料
1、显微镜、尖嘴镊子、刀片、载玻片、 盖玻片、吸水纸、解剖针、纱布、碘 液。 2、蚕豆(芹菜)茎和叶 3、洋葱或玉米根尖纵切永久制片 4、南瓜或向日葵茎横、纵切永久制片 .
三、内容与方法
(一)临时切片制作
1、徒手切片法(重点)
2、整体装片 适合于植物体形小而扁
平的材料。如菌丝、孢子束、藓类。
2、蜡块制取
1)逐级脱水
将上述经软化的材料转入 250ml已洗净的输液瓶中加入40ml,70%酒 精脱水24h。分别加入各级酒精40ml,70% 酒精脱水24h,85%酒精脱水12h,95%酒 精脱水2h,无水酒精脱水1h。同时回收各 级酒精。 番红酒精染液染色(1g番红溶于 100ml 50%酒精中,纱布过滤)染色24h。
;
2)放在载玻片上作临时水装片,然 后置于显微镜下观察;
3)如果结构能被清晰地显示出来,
石 蜡 切 片 机
(二)永久装片的制作
1、材料预处理
将材料装在25ml规格的小指管, 加入甘油—酒精软化剂(甘油1份, 70%酒精1份)8ml封盖后在电热恒 温水浴锅50℃18h,第二天升成的光滑的硬纸(10.0×1.0×1.0㎝)制成 的纸盒中制取蜡块,在恒温箱门的低坎处 摆好纸盒,并写上名称,使其一面紧贴恒 温箱的受热金属板,纸盒底面紧贴恒温箱 底面金属板,倒入溶化石蜡0.2~0.3㎝厚的 薄层,2min后待薄层稍有凝固时将材料依 次排列于其上,再倒入溶化石蜡,并用烧 热的解剖针刺破其中的气泡,提着纸盒两 端预留的盒耳将纸盒浸入盛有冷水的盆中 冷却制成石蜡块。
植物细胞切片实验报告
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一、实验目的1. 学习制作植物细胞切片的基本方法。
2. 观察植物细胞的结构特点。
3. 认识植物细胞的主要组成部分。
二、实验原理植物细胞切片实验是利用切片技术将植物细胞切割成薄片,然后在显微镜下观察细胞的结构。
通过观察细胞的结构,可以了解植物细胞的基本组成和功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:洋葱鳞片叶、菠菜叶片、显微镜、切片机、载玻片、盖玻片、染色液(如伊红、苏木精等)、酒精、蒸馏水、盐酸、剪刀、镊子、解剖针、擦镜纸等。
2. 实验仪器:切片机、显微镜、显微镜载物台、显微镜光源、显微镜物镜、显微镜目镜、显微镜调焦旋钮等。
四、实验步骤1. 制备切片材料:取洋葱鳞片叶和菠菜叶片,用剪刀将叶片剪成适当大小的块状,用解剖针挑出叶片中的叶脉和主脉,以便观察细胞结构。
2. 涂片:将剪好的叶片块状物放在载玻片上,用解剖针轻轻涂抹,使叶片均匀分布在载玻片上。
3. 固定:将涂抹好的载玻片放入固定液(如盐酸)中浸泡5-10分钟,以固定细胞结构。
4. 切片:将固定好的载玻片放入切片机中,调整切片厚度(约10-20微米),进行切片。
5. 染色:将切片放入染色液中,染色时间为30-60秒,根据不同染色剂进行调整。
6. 清洗:将染色后的切片用蒸馏水冲洗,去除多余的染色剂。
7. 复盖:将清洗后的切片用盖玻片覆盖,确保切片与盖玻片紧密贴合。
8. 观察与记录:将载玻片放在显微镜下,调节物镜和目镜,观察细胞结构并记录。
五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶切片:观察洋葱鳞片叶切片,可见细胞壁、细胞核、细胞质、液泡、叶绿体等结构。
细胞壁位于细胞的最外层,呈厚薄不均的环状;细胞核位于细胞中央,呈圆形或椭圆形;细胞质位于细胞核周围,含有大量细胞器;液泡位于细胞质内,呈球形或椭圆形;叶绿体位于细胞质内,呈扁平的椭球形。
2. 菠菜叶片切片:观察菠菜叶片切片,可见细胞壁、细胞核、细胞质、液泡、叶绿体等结构。
与洋葱鳞片叶切片相比,菠菜叶片切片中的叶绿体更为明显,且叶绿体呈盘状。
组织切片观察实验报告
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组织切片观察实验报告
实验报告:组织切片观察实验
摘要:
实验目的:
本实验主要目的是借助显微镜等工具,观察不同组织切片的结构和特点,进一步了解组织细胞的组成和功能。
实验材料:
组织切片(植物叶片切片、果实切片和动物肝脏切片)、显微镜、载玻片、盖玻片、草酸铁钾、苏丹红等试剂。
实验方法:
制备组织切片:用草酸铁钾脱色法将植物叶片和果实切片进行处理,再用苏丹红染色。
对动物肝脏切片先进行蜡采嵌切技术处
理,然后进行苏丹红染色。
最后,将制好的组织切片放置到载玻片上,加盖玻片并利用显微镜观察和拍照。
实验结果:
观察植物叶片切片,我们可以看到其细胞排列有序,每个细胞都有细胞壁、细胞质、细胞核和色素体等组成部分。
果实切片则主要由皮层、维管束、内果层等组成,显示出明显的环状结构和寄生粘液细胞。
肝脏切片则展示出肝细胞的形态和排列方式,丰富的细胞器和小颗粒显示出肝细胞合成蛋白质和代谢功能。
实验结论:
通过本次组织切片观察实验,我们对植物和动物组织的结构和特点有了更深入的了解,同时也加深了我们对细胞结构和功能的认识。
植物细胞切片制作方法
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植物细胞切片制作方法1. 嘿,想知道植物细胞切片咋做不?这就像搭积木,得一步一步来。
首先呢,你得准备好材料,就像厨师做菜得先备好食材一样。
像我有次给学生演示,材料不齐那可真是抓瞎。
需要一把锋利的刀片,这刀片就像战士的剑,得足够锋利才能切得好。
还得有载玻片和盖玻片,这俩就像小床和被子,细胞就躺在上面呢。
2. 植物材料的选择可重要啦!你不能随便揪一片叶子就了事。
这就好比挑衣服,得精心挑选合适的。
我跟我朋友做实验的时候,他随便拿了个快枯萎的叶子,结果细胞结构都不清晰。
要选新鲜、健康的植物部分,像幼嫩的叶片或者根尖就很不错。
这就像挑运动员,得挑状态好的。
3. 固定植物材料就像给它定个型。
你想啊,如果人拍照乱动,照片就糊了,植物细胞也一样。
我老师教我的时候说,可以用化学药剂来固定,就像给细胞上了个枷锁,让它保持原来的模样。
比如说用福尔马林溶液,把植物材料放进去泡一会儿,就像把调皮的小孩按在座位上。
4. 接下来是脱水,这可是个关键步骤。
就好比把湿衣服拧干,不过比那要精细多啦。
得用不同浓度的乙醇逐步脱水。
我自己做的时候,一开始没掌握好浓度,细胞就像被水淹了的房子,结构都变形了。
要从低浓度到高浓度慢慢过渡,就像爬楼梯,一步一步来。
5. 透明化这个步骤有点神奇哦。
把脱水后的材料放到透明剂里,这就像是给细胞披上了一件透明的纱衣。
我看到实验室的小伙伴没做好这一步,细胞就像蒙了一层雾,啥都看不清楚。
二甲苯就是常用的透明剂,它能让细胞变得通透,就像打开了一扇通往微观世界的窗户。
6. 浸蜡这一步就像给细胞盖房子。
把透明后的材料浸到石蜡里,石蜡就像砖头一样,把细胞围起来保护好。
我同事做的时候,蜡没浸透,就像房子盖了一半,细胞在里面可不安稳啦。
得保证石蜡完全浸透材料,这样切片的时候细胞才不会散掉。
7. 切片的时候,手可得稳啊。
这就像走钢丝,一不小心就全毁了。
我第一次切片的时候,手直发抖,切出来的片子那叫一个惨不忍睹。
把浸好蜡的材料固定在切片机上,然后像切面包一样,一片一片切下来。
植物细胞学分析之组织切片技术
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植物细胞学分析之组织切片技术一、试剂(1)卡诺氏固定液:无水乙醇与冰醋酸按体积比为3:1混合配制。
(2)1mol/L盐酸溶液:取浓盐酸(比重1.19)82.5ml,加入蒸馏水917.5ml。
(3)醋酸洋红染液:4-5g洋红,冰醋酸45ml,蒸馏水55ml,先将冰醋酸加入蒸馏水中煮沸,然后将火移去,立刻加入洋红,用玻璃棒搅匀溶化,冷却后过滤即成。
(4)70%酒精;95%酒精。
二、细胞分析方法1.有丝分裂全过程的染色体制片方法步骤:取材-预处理-固定-根尖解离1mol/L HCL-醋酸洋红染色-压片(1)发根挑选每份黑麦种子材料25粒,经流水冲洗,放于培养皿内温水浸泡24h。
置于25℃恒温箱中发根。
待根长到1~2cm时,于适宜时间用蒸馏水洗净,将水吸干,剪取根尖0.5~1cm进行预处理。
为获得尽可能多的分裂相,根尖以上午9~10时剪取为宜。
(2)预处理为了有利于有丝分裂中,染色体的观察和计数,通常要对材料进行不同的预处理。
预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成,来获得更多的中期分裂相,同时还可以改变细胞质的粘度,促使染色体缩短和分散,便于压片和观察。
将根尖浸于蒸馏水内,1-4℃低温处理24h。
(3)固定材料经预处理后,用流水冲洗2次,然后投入卡诺液(3份甲醇∶1份冰乙酸)中固定26h,用95%的乙醇洗两次,转入70%乙醇中保存备用(4℃)。
固定的目的是:①迅速防止细胞死亡后的变化,如自溶、腐败等,尽量保持生长状态结构。
②使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物质,以保持生前的形态。
③使组织内各种物质成分产生不同的折光率,便于观察和鉴定。
④使不同组织成分对染料有不同的亲和力,便于染色。
⑤防止细胞过度收缩或膨胀,失去原有的形态结构。
(4)解离常用酸解法:从70%乙醇中取出固定好的根尖,用蒸馏水冲洗后,吸水纸吸干,放入盛有1 mol/L的HCl的1.5ml离心管中,60℃水浴,恒温条件下解离10min。
植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用,分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体,因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离,这一操作称为解离。
植物切片制作
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植物组织制片技术是随着显微镜的出现而发展起来的技术,是人们认识植物体结构的有效手段,已成为植物生物学的重要组成部分.植物制片技术已建立了许多方法,现简要介绍如下几种最常见的制片技术:徒手切片法、滑走切片法、离析法、压片法、石蜡制片法和冰冻切片法。
徒手切片法徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片,所作的切片通常不经染色或经简单染色后,制成临时的水装片用于观察,亦可以通过脱水与染色制成永久制片。
优点:简单、方便,不需要复杂的设备,不经过化学药物的处理,基本上保留了植物活体的状态。
用品与材料显微镜、载(盖)玻片、刀片、毛笔、培养皿、吸水滤纸、滴管、ddH2O或清水、1%番红水溶液、菜叶、胡萝卜、马铃薯实验材料对于软硬适中,便于手持的材料,可将实验材料截成适当小块,一般以长2~3cm,切片断面不超过3~5mm2为宜。
对于过于柔嫩的器官(如叶片等),一般可选用胡萝卜根、土豆块茎等作为支撑物,包被住材料后再进行切片。
有时也可将叶片卷成圆筒后再进行切片. 实验步骤1、在小培养皿中放入ddH2O或清水。
2、用左手拇指、食指和中指拿住材料,拇指略低于食指与中指,并使材料略为突出在指尖上面。
3、右手持刀,将刀片平稳地放在左手食指之上,与材料切面平行,然后以均匀的动作,自左前方向右后方,斜着向后拉切,切时用臂力而不用腕力。
4、切下许多薄片后,用湿毛笔将这些薄片放人培养皿中.用毛笔挑选透明的薄片,放在载玻片上,用吸管滴一滴水在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片进行观察。
注意事项1、在切片前,要不断地用水湿润材料和刀片。
2、切片时,两只手应该保持活动状态,不要使它们紧靠身体或实验台,且用力不要过猛,不能用刀片挤压材料或来回切割材料。
3、动作要敏捷,材料要一次切下,不要追求切片形状的完整。
简单的组织化学染色经徒手切片法切下的薄片,可以进行简单的组织化学染色,这样更容易分辨细胞的结构,同时可以观察到细胞各部分的化学成分。
植物组织切片制作以及注意事项
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植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=18:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA),置于4℃固定24 h。
配方:福尔马林(38%甲醛) 5 ml冰醋酸5ml70%酒精90 ml5 ml甘油(丙三醇)⑵脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min;重复一次,室温静置20 min。
换成1%番红O溶液(用70%酒精配制),室温脱水染色过夜。
次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次)。
⑶透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次)。
最后加入少量二甲苯(浸没材料即可)和碎蜡,放入38℃温箱中过夜。
⑷浸蜡:将温箱温度调至56℃,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次)各1h、1h、40min(从温度上升到56℃开始计时)。
⑸包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。
⑹切片:修整蜡块,用Lica RM2126切片机切片,厚度5-10 μm。
⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂,将切好的蜡带放入温水中,捞至载玻片上,最后置于37℃恒温箱过夜烤片。
⑻脱蜡及染色:①番红-固绿对染ⅰ脱蜡:二甲苯60min,二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。
ⅱ染色:80%乙醇5 min,1%固绿(用95%酒精配制)迅速蘸一下,大约10s,直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min(2次)。
②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡:二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。
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二甲苯(5min)→二甲苯(5min)→二甲苯;乙醇(1min)→二甲苯;乙醇(1min)→二甲苯;乙醇(1min)→100%乙醇(1min)→95%乙醇(1min)→90%乙醇(1min)→80%乙醇(1min)→70%乙醇(1min)→50%乙醇(1min)→番红染色(40min)→50%乙醇(1min)→70%乙醇(1min)→80%乙醇(1min)→90%乙醇(1min)→95%乙醇(1min)→
切片染色后经封藏可制作成永久制片。
实验步骤:
1)取材、固定与抽气:
本实验用蚕豆根、向日葵茎、夹竹桃叶为材料,制作横切片观察其内部结构。用刀片切取所需根和茎的部位3-4㎜为一段,叶应取叶片中部主脉约4㎜宽的叶片。小组各取5-6块,立即用FAA固定液固定。固定过程中必须进行抽气。
2)洗涤与保存:
教师代做。
植物组织切片的制备
生物122xx实验目的:
通过石蜡切片法了解和掌握动物和植物材料切片制作的基本原理和一般方法。
实验原理:
进行组织学和细胞学研究,必须把新鲜的组织或器官制作成切片,以便在显微镜下观察。
制作生物制片要求尽量保持细胞结构的完整性和真实性。
石蜡切片法是一种较常用的制片法。一般操作步骤是:
取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→烤片→脱蜡→复水→染色→脱水→透明→封藏。其原理是将样品固定后,包埋于石蜡中,使其具有一定的硬度,便于在石蜡切片机上切片成足够薄的切片。
0.5%固绿(1min)→95%乙醇(1min)→100%乙醇(1min)→二甲苯;乙醇(1min)→二甲苯;乙醇(1min)→二甲苯;乙醇(1min)→二甲苯(1min)→二甲苯(1min)。
10)封片:
将切片从二甲苯中取出,用滤纸擦去材料周围的二甲苯。在材料中央滴加一滴加拿大树胶,然后用镊子轻轻加盖盖玻片。
3)脱水:70%酒精(1h)→80%酒精(1h)→90%酒精(1h)→95%酒精(1h)→无水乙醇(1h)→无水乙醇(1h)。
4)透明:
无水乙醇(1h)→酒精二甲苯(1h)→酒精二甲苯(1h)→酒精二甲苯(1h)→二甲苯(1h)→二甲苯(1h)。
5)浸蜡:
教师代做。
6)包埋:
折叠纸盒→灌蜡水→竖直放置植物材料于纸盒底部→冷却石蜡。
11)镜检。
实验结果:
维管束结构比较
相同差异
表皮
一般由单层细胞
初生结构均
蚕豆根横切装片
疏
松)和维管束
向日葵茎横切装片
组成。厚,存在角质层。表皮细胞外壁较
构成,向外突出形皮层
细胞间隙明显。所占茎较大部分。
具有细胞间隙,所占茎较小部分。
7)切片:
将包埋好的蜡块用刀片修成较规则的梯形,以少量热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上,夹在轮转式切片机的蜡块钳内,使蜡块切面与切片刀刃平行,旋紧。切片厚度通常为5~12μm,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上。
8)贴片与烤片:
在洁净的载玻片上直接滴加两滴蒸馏水,再将一定长度的蜡带放至载玻片上铺正,在温台上略加热使蜡片铺展开来,最后用滤纸吸去多余的水分,将载玻片放入45℃的温箱中干燥。