石蜡切片法的原理及应用

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石蜡切片的原理和基本步骤

石蜡切片的原理和基本步骤石蜡切片是一种常用于生物医学和生物化学实验中的技术。

通过使用石蜡作为嵌入剂，将组织标本固定在特定位置，并以薄片的形式制备，方便进一步的显微镜观察。

这篇文章将介绍石蜡切片的原理和基本步骤。

石蜡切片的原理主要涉及组织标本的固定、去水、脱脂、渗透、嵌入、切割和染色等步骤。

下面将逐步详细介绍每个步骤。

第一步是组织样本的固定。

固定是将生物组织中的蛋白质和核酸固定住，防止组织变性和腐败。

常用的固定剂包括乙酸乙酯、福尔马林和缓冲盐水。

在固定过程中，组织样本通常需要用切片器切割成较小的块。

第二步是去水。

在固定样本中，常常会有一些水分存在。

水分对之后的处理步骤会造成影响，所以需要进行去水处理。

去水可以通过渐进浓度的有机溶剂（例如乙醇）进行。

通常从浓度较低的乙醇开始，逐渐提高乙醇浓度，直至100%乙醇。

第三步是脱脂。

脱脂是为了去除溶剂和固定剂中的脂类物质。

脂类物质在之后的步骤中会妨碍切片的制备。

脱脂一般使用有机溶剂（如苯和二甲苯）进行处理。

第四步是渗透。

渗透是将脱脂样本置于石蜡中，使其被石蜡渗透。

石蜡具有良好的透明性和稳定性，可以保持组织样本的形状并方便切割。

渗透一般在60-65°C的温度下进行。

第五步是嵌入。

嵌入是将渗透好的样本放入预先制备的模具中，加热使其固化。

嵌入后的样本与石蜡牢固结合，形成坚固的石蜡块，有利于后续切割操作。

第六步是切割。

切割是将嵌入好的组织样本切割成非常薄的片。

常用的切片工具有旋转式切片机和滑动切片机。

切割时，需要将石蜡切割成5-10微米厚度的切片。

最后一步是染色。

染色是为了使细胞结构更清晰可见。

常用的染色剂有血红蛋白染剂和亚甲基蓝染剂等。

染色可以根据需要选择染色时间和染色剂。

石蜡切片的制备过程需要一定的实验技巧和仪器设备。

为了获得高质量的切片，需要注意固定、去水和渗透的处理时间和温度，以及切割的速度和厚度。

切割后的切片需要进行适当的质控，确保切片的质量并方便进一步的显微镜观察。

石蜡切片llp

3、脱水
脱水一般使用酒精，渐次脱去组织中水分，防止材
料急剧收缩而发生变形。一般从50%酒精——70% 酒精——85%酒精——95%酒精——100%酒精，每一级间隔时间1~2小时。脱水这步是制片中的一个关键，如果脱水不彻底，石蜡就不可能浸好切片，切片过程中就会发生破碎现象。酒精用量为材料的 3-5倍。脱水必须在有盖的玻璃器皿中进行，防止吸收空气中的水分；在更换高一级的脱水剂时，最好不要移动材料，以免损坏材料。 4、透明材料从纯酒精中出来后要经过1/2二甲苯+1/2纯酒精混合液1小时，然后转入纯二甲苯中透明。（二甲苯为挥发性的有毒物质，所以要严格在通风橱中操作，且用完的含有二甲苯的液体需回收处理）
向上），迅速地在切片的中央滴一滴树胶（必须在二甲苯干燥前进行），用右手持小镊子轻轻地夹住盖玻片的右侧，稍微倾斜使其左侧与封藏剂接触，然后再缓慢地放下，避免产生气泡。待中性树胶干片后，进行观察，拍照。
恒温箱酒精灯吸管切片机载玻片盖玻片染色缸树胶显微镜 2、试剂福尔马林-酒精-醋酸混合固定液（简称：FAA，18： 1:1）各级酒精（30% 50% 70% 80% 90% 95% 纯酒精）蒸馏水纯二甲苯 1%番红 0.1%固绿 3、材料植物叶
三、实验步骤
1、取材
取健康、正常、有代表性新鲜叶3个（大小一般不
将所切材料放置1天，干燥（第二天休息）。
第三天，染色。染色时间按前所述。注意固绿的染色时间，太长染
色太深，不易观察细胞结构，太浅效果达不到。番红容易在酒精中褪色，固在染色的脱水过程中，时间为1min。封片尽量一次完成，不要动已经切好的材料，否则结构容易破裂。
方法：将含材料的载玻片放在吸水纸上（切片一面

石蜡切片的实验报告

一、实验目的1. 掌握石蜡切片的制作过程，包括组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和染色等步骤。

2. 了解石蜡切片技术在生物学研究中的应用。

3. 学会使用显微镜观察石蜡切片，识别不同组织结构。

二、实验原理石蜡切片技术是一种重要的生物学制片方法，用于观察组织、细胞等微观结构。

其基本原理是将组织固定后，通过一系列的脱水、透明、浸蜡等步骤，使组织在石蜡中充分浸渍，然后用切片机切成薄片，最后进行染色和观察。

三、实验材料1. 实验动物：小鼠2. 组织：肝脏、肾脏、心肌、骨骼肌等3. 试剂：卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液、甘油蛋白粘片剂、郝普特氏粘片剂、中性树胶、1%番红、1%固绿、1%过碘酸、Schiff 试剂、0.5%偏重亚硫酸钠溶液、醋酸酐-吡啶混合液、0.5%~1%淀粉糖化酶溶液等4. 器材：切片刀、切片机、恒温箱、温台、熔蜡炉、蜡杯、酒精灯、蜡铲、展片台、解剖刀、解剖针、解剖剪、解剖盘、培养皿、吸管、镊子、单面刀片、台木、毛笔、洒精灯、包埋纸盒、染色缸、盖玻片、载玻片、玻片盘、树胶、树胶瓶、显微镜、温度计、脸盆、水浴锅等四、实验步骤1. 取材：取新鲜组织，固定于4%多聚甲醛24小时以上。

2. 脱水：将固定后的组织依次放入75%、85%、90%、95%酒精中浸泡1小时，然后放入无水乙醇I、无水乙醇II中浸泡30分钟，最后放入醇苯中浸泡5-10分钟。

3. 透明：将组织放入二甲苯I、二甲苯II中浸泡5-10分钟。

4. 浸蜡：将组织放入熔化的石蜡中浸泡1小时。

5. 包埋：将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋，待石蜡凝固后取出并修整蜡块。

6. 切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚约4微米。

7. 展片：将切片漂浮于摊片机40℃温水上，将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60℃烤箱内烤片。

8. 染色：将烤干的切片进行染色，如苏木精-伊红染色。

石蜡的切片实验报告

一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作过程。

2. 掌握石蜡切片的染色技术。

3. 了解石蜡切片在组织学研究和病理诊断中的应用。

二、实验原理石蜡切片技术是一种常用的组织学制片方法，其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等处理，使其在石蜡中充分浸渍，然后用微型切片机将其切成薄片，最终制成组织学切片。

石蜡切片具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点，是组织学研究和病理诊断的重要工具。

三、实验材料1. 实验动物：小白鼠2. 实验器材：石蜡切片机、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、酒精灯、剪刀、镊子等3. 实验试剂：卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液等四、实验步骤1. 取材：取小白鼠肝脏组织，用剪刀剪成小块。

2. 固定：将剪好的组织块放入卡诺氏固定液中固定24小时。

3. 脱水：将固定好的组织块依次放入70%、80%、90%、95%、100%酒精溶液中，每级酒精溶液浸泡1小时，使组织逐渐脱水。

4. 透明：将脱水的组织块依次放入三个二甲苯溶液中，每缸浸泡1小时，使组织逐渐透明。

5. 浸蜡：将透明的组织块依次放入三个石蜡溶液中，每缸浸泡1小时，使组织完全浸渍在石蜡中。

6. 包埋：将浸好蜡的组织块放入熔蜡中，待石蜡凝固后取出，用剪刀修整蜡块。

7. 切片：将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上，调整切片厚度为4微米，制成石蜡切片。

8. 展片：将切好的石蜡切片展平在载玻片上。

9. 脱蜡：将展平的石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇中，使切片脱蜡。

10. 染色：将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色5-10分钟，然后放入1%盐酸酒精溶液中分化，最后放入伊红染液中复染30秒。

11. 封片：将染好的切片放入封片液中封片。

五、实验结果制作完成的石蜡切片在显微镜下观察，可见到肝脏组织的细胞结构，如细胞核、细胞质、血管等。

六、实验讨论1. 石蜡切片技术是组织学研究和病理诊断的重要工具，具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点。

《石蜡切片技术》课件

2 不足
制备石蜡切片需要复杂的操作和专业设备，同时样本可能发生失真和伪影。
石蜡切片技术的发展前景
科技创新
随着科技的
石蜡切片技术在不同领域的应用将促进跨学科的合作和创新。
新发现
通过石蜡切片技术，我们将有机会发现更多细胞和组织的奥秘，推动科学的发展。
总结和展望
《石蜡切片技术》是一项重要的科学技术，它在医学和科学研究中发挥着重要作用。我们相信随着技术的不断发展，石蜡切片技术将为我们带来更多的新发现和突破。
《石蜡切片技术》PPT课件
欢迎来到《石蜡切片技术》的世界！让我们一起探索这个令人着迷的技术，揭开它的奥秘！
技术背景
在科学研究和医学领域中，石蜡切片技术起着重要作用。了解其背景将有助于我们深入了解该技术的重要性和应用。
石蜡切片技术的定义与原理
1
定义
石蜡切片技术是一种用于制作细胞切片的方法，它可以保持细胞结构的完整性。
2
原理
该技术的原理是将固定的组织样本浸入石蜡中，使其固化，然后使用显微切片机切割出薄片。
3
挑战
石蜡切片技术需要严格的控制温度和时间，以确保薄片的质量和细胞结构的完整性。
石蜡切片制备方法
石蜡切片技术有多种制备方法，包括冷冻切片、热切片和冷热切片等。每种方法都有其适用的情况和优缺点。
石蜡切片技术的应用领域
医学研究
石蜡切片技术在病理学和生物医学研究中广泛应用，有助于揭示疾病发生的机制。
植物学
通过石蜡切片技术，科学家可以观察植物的细胞结构、组织构造和生长过程。
材料科学
该技术也用于材料科学中，用于观察材料的结构和性能。
石蜡切片技术的优势与不足
1 优势

石蜡切片实验报告

石蜡切片实验报告石蜡切片是一种常用的组织学实验技术，已经被广泛应用于医学、生物学等领域。

本实验报告将详细介绍石蜡切片实验的步骤、原理以及实验中可能遇到的问题和解决方案。

第一部分：实验步骤石蜡切片实验的步骤主要包括标本制备、石蜡浸渍、切片和染色几个关键环节。

首先，我们需要收集适当的组织标本，如动物器官或植物组织。

这些标本需要经过固定处理，通常使用福尔马林进行固定，然后进行脱水和透明化处理，最终被浸渍进入石蜡中。

在石蜡浸渍的过程中，我们需要将标本逐渐浸入温度逐渐升高的石蜡中，以使其充分浸渍并软化。

这个过程中需要注意温度的控制，同时还要避免气泡的产生。

一旦标本被完全浸渍在石蜡中，我们可以使用石蜡切片机进行切片。

在切片过程中，我们需要调整切片机的切片厚度，通常为4-6微米。

此外，为了得到较好的切片质量，我们还需要确保刀片的锋利度和切片机的切片速度适当。

切片完成后，我们需要将切片置于载玻片上，并进行染色处理。

染色可以提高组织的对比度，使细胞和组织结构更加清晰可见。

常用的染色方法包括血液学染色、核染色和生物标记染色等。

第二部分：实验原理石蜡切片实验的原理是基于石蜡的高渗透性和易于切割的特点。

通过浸渍和固化过程，标本会充分浸泡在石蜡中，使其变得坚硬而易于切割。

切片机通过旋转刀片来切割标本，形成薄而均匀的切片。

石蜡切片实验的目的是为了观察和研究细胞和组织的结构。

通过切片和染色，我们可以清晰地看到细胞的形态、组织的排列以及细胞内的细胞器结构。

这对于研究疾病的发生机制、药物治疗的效果评估以及生物学基础研究等方面都具有重要意义。

第三部分：实验问题与解决方案在石蜡切片实验中，可能会遇到一些常见的问题，如切片不均匀、切片断裂或组织变形等。

这些问题可能会影响实验的结果和观察效果。

为了解决这些问题，我们可以在实验过程中采取一些措施。

首先，在标本制备过程中，我们可以控制好固定时间，避免过长或过短的固定时间导致的组织变形。

其次，在切片机操作过程中，我们需要确保刀片的锋利度和切片机的切片速度适当，以避免切片不均匀或切片断裂的问题。

石蜡切片原理

石蜡切片原理石蜡切片是一种常用的组织学技术，它可以将组织样本切割成极薄的切片，以便于显微镜观察。

在生物医学研究和临床诊断中，石蜡切片技术被广泛应用于病理学、组织学和细胞学领域。

本文将介绍石蜡切片的原理及其相关知识。

首先，让我们来了解一下石蜡切片的原理。

石蜡切片的制备过程主要包括组织固定、脱水、透明化、浸渍和包埋、切片、脱脂和染色、封片等步骤。

其中，组织固定是将组织样本固定在载玻片上，以保持其形态和结构不变。

脱水是通过逐渐浸泡在酒精溶液中，将组织中的水分逐渐脱除，使组织逐渐硬化。

透明化是将脱水后的组织样本浸泡在透明质料中，以使组织透明，便于观察。

浸渍和包埋是将透明化后的组织样本浸渍在熔化的石蜡中，然后进行包埋，使组织样本固定在石蜡中。

切片是将包埋好的组织样本切割成极薄的切片，通常为4-6微米厚。

脱脂和染色是将切片脱除石蜡并进行染色处理，以便于显微观察。

最后，将染色后的切片放置在载玻片上，并进行封片处理，以便于保存和观察。

石蜡切片的原理是基于石蜡的特性和组织样本的结构。

石蜡具有较好的渗透性和包埋性，可以使组织样本固定在其中，并且能够保持组织的形态和结构。

而组织样本经过脱水、透明化和浸渍后，可以使组织样本透明、坚硬并固定在石蜡中。

切片后，经过脱脂和染色处理，可以清晰地显示组织的形态和结构，以便于显微镜观察和分析。

除了石蜡切片的原理，我们还需要了解一些相关的知识。

首先是石蜡的选择。

石蜡通常有不同的软化点，根据不同的样本类型和切片要求，需要选择适当软化点的石蜡。

其次是切片机的选择和使用。

切片机的性能和切片刀的锋利度对切片质量有重要影响，因此需要选择适合的切片机和切片刀，并进行正确的使用和维护。

另外，脱脂和染色的过程也需要严格控制，以保证切片的质量和染色效果。

总之，石蜡切片是一种重要的组织学技术，它在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用。

通过了解石蜡切片的原理和相关知识，可以更好地掌握这一技术，提高切片质量，为科研和临床工作提供可靠的数据和依据。

石蜡切片的相关介绍

石蜡切片的相关介绍石蜡切片是一种常用的组织学研究技术，可以将生物样品切成极薄的切片，便于显微镜观察。

本文将介绍石蜡切片的原理、方法和应用。

原理石蜡切片的制作原理是将生物样品固定在石蜡中进行包埋，形成石蜡组织块，然后用微型切片机将石蜡组织块切成极薄的切片，并将切片染色，以便观察。

方法标本制备1.样品采集：根据需要采集样品，可以是动物组织、植物组织或其他生物体的某一部分，根据不同采集要求决定。

2.固定样品：将采集的样品放入一定体积的固定液中固定，常用的固定液包括福尔马林、戊二醛等。

3.脱水：将固定后的样品放入一定体积的酒精容器中进行脱水处理，分别使用不同浓度的酒精依次脱水。

4.渗透：将脱水后的样品放入一定体积的作用剂中进行渗透处理，作用剂包括丙烯酰胺、丙烯酰酸等。

5.包埋：将渗透后的样品放入一定体积的石蜡容器中进行包埋处理。

切片1.切片机设置：将切片机的温度、刀片、厚度等参数进行设置。

2.切片：将包埋好的样品放入切片机中进行切片，切片厚度一般为2~10微米。

3.切片传递：将切片沉淀在蒸馏水中，使用玻璃刀将切片转移到载玻片上去。

4.切片染色：使用不同染色剂（如血红蛋白染色剂、伊红染色剂等）对切片进行染色，便于观察。

应用石蜡切片是常用的组织学实验技术，广泛应用于医学领域和基础研究中，主要应用于以下几个方面：1.病理学诊断：通过切片对肿瘤、疾病等样本进行组织学分析，帮助医生判断疾病的类型和程度。

2.细胞学研究：通过切片对不同类型的细胞进行观察和分析，了解细胞结构和功能。

3.生物学研究：通过切片对生物体的不同部位进行观察和分析，了解生物组织和器官的结构和功能。

总之，石蜡切片是一项非常重要的生物组织学实验技术，为医学研究和诊断提供重要的手段。

石蜡切片的原理

石蜡切片的原理
石蜡切片是组织学中常用的一种制备技术，用于观察和研究生物组织的微观结构。

其原理可以分为以下几个步骤：
1. 组织采集：首先，需要将待观察的生物组织（例如动物、植物的器官或细胞等）进行采集和收集。

采集可以通过活体取材或者组织固定的方式进行。

2. 组织固定：为了保持组织的形态和结构不受损失，采集到的生物组织需要进行固定处理。

常用的固定方法包括用福尔马林（formalin）进行固定、液氮冷冻等。

3. 组织处理：固定后的生物组织需要进行一系列的处理步骤，以便使其能够被切割成薄片。

处理步骤包括去水化、透明化和浸渍。

4. 包埋：将处理后的组织用石蜡进行包埋，即将其浸入熔化的石蜡中。

石蜡可以提供支持和保护组织的结构，使得组织在切割过程中不会受损。

5. 切片：经过包埋的生物组织在石蜡硬化后，需要使用显微切片机进行切割。

切片机能够将包埋的生物组织切割成极薄的切片，常见的厚度约为4-6微米。

6. 染色：切片完成后，需要进行染色以增强对组织结构的观察。

常用的染色方法包括常规染色（如血液染色）和免疫组织化学染色等。

7. 观察和分析：最后，将染色后的切片放置在显微镜下观察，并使用显微镜和其他相关设备进行分析和研究。

通过石蜡切片技术，可以观察和研究生物组织的细胞结构、组织类型、细胞分化、病理变化等重要信息，对于医学诊断、疾病研究和药物开发等领域具有重要意义。

石蜡切片法四染色、封藏一、实验原理1染色细胞

二、试剂与器材 1.试剂：各级酒精（50%、 70%、 85%、 95%、
100%）、1/2二甲+1/2无水乙醇、二甲苯、
埃利希氏苏木精染液、1%曙红水溶液、
中性树胶.
2.器材：镊子、解剖针、染色缸、显微镜。
三、实验程序
1. 染色的一般方法由于要染的切片包在石蜡之中，而所用的染色剂又常常为水溶液，因此在染色之前，必须再度复水，石蜡切片在二甲苯中溶去石蜡，经过各级酒精，下降至水，经染色后需再脱水，上升到二甲苯透明然后封藏。
苏木精——伊红（简称 H.E）对染法 (1) 二甲苯脱蜡5-10min。 (2) 二甲苯与纯酒精等量混液5min。 (3) 纯酒精，95%、85%、70%、50%酒精各2min。 (4) 蒸馏水2min。
(5) 埃利希氏苏木精染色液20-30min。
(6) 水洗(换几次，共约5min)。
(7) 1%盐酸酒精分化数秒钟(如染色合适，此步可取消)。
以常用的苏木精-伊红对染法为例：细胞核内含有酸
性物质，易与碱性染料苏木精中有染色作用的阳离子结
合，细胞核被染上蓝色。细胞质含有碱性物质，易与酸
性染料伊红中有染色作用的阴离子结合，细胞质被伊红染上粉红色。
2．封藏：封藏是使已经透明的材料保存在适合折光率的封藏剂中，使材料能在显微镜下清晰的显示出来，并能长期保存。
4. 染色—显示脂类的苏丹黑B法：
(1)组织固定于10%中性福尔马林或10%钙福尔马林液，
冰冻切片。
(2) 于70%酒精略洗。
(3) 苏丹黑B染液5-15分钟。
(4) 70%酒精洗去多余染料。
(5) 稍水洗。
(6) 甘油明胶或阿拉伯糖胶封盖。结果：脂滴染为蓝至黑色。

石蜡切片实验原理

石蜡切片实验原理石蜡切片实验是一种常用的组织学实验方法，通过将组织样本制成切片，以便在显微镜下观察细胞和组织的形态结构。

石蜡切片实验的主要原理包括以下几个步骤：1. 取材：根据实验需求，选择合适的材料来源和部位。

例如，观察植物细胞有丝分裂时，常选择洋葱根尖作为材料，因为此处细胞分裂速度快且便于切取。

确保材料新鲜，避免长时间放置导致蛋白质分解、细胞自溶和细菌滋生，以保证观察到的组织结构能反映活体时的形态。

2. 固定：将切好的新鲜组织小块浸入适当浓度的固定液中，如中性甲醛固定液。

固定液可以迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分，终止细胞的一切代谢过程，防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。

3. 洗涤和脱水：固定后，将组织样本用磷酸缓冲液洗涤，去除多余的固定液和杂质。

然后进行脱水，通常使用系列梯度酒精（如70%、95%和100%）进行脱水。

4. 透明：将脱水后的组织样本放入透明剂中，如二甲苯，使组织透明，便于切片。

5. 浸蜡：将透明后的组织样本放入蜡液中，如石蜡，进行浸蜡。

石蜡可以填充组织间隙，使切片更加完整。

6. 包埋：将浸蜡后的组织样本放入包埋盒中，固定并密封。

7. 切片：将包埋好的组织样本放入切片机中，切成薄片（通常厚度为4-6微米）。

8. 贴片：将切好的切片粘附在载玻片上，可用甘油蛋白贴片剂辅助。

9. 脱蜡：将贴片后的切片放入二甲苯中，脱去多余的石蜡。

10. 染色：采用适当的染色方法，如苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法），对切片进行染色。

这种方法适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色，可以长期保存。

11. 脱水、透明、封片：染色后，将切片依次放入系列梯度酒精、磷酸缓冲液、甘油中进行脱水、透明。

最后，用封片胶封片，完成石蜡切片制作。

石蜡切片实验原理就是这样啦。

这种方法不仅适用于观察正常细胞和组织，还广泛应用于病理学和法医学等领域，以研究、观察和判断细胞和组织的形态变化。

实验八石蜡切片法一

镊子、烘箱、离心管或青霉素瓶子。 • 2、试剂 • 苏木色精、伊红、二甲苯、中性树胶、酒精、石蜡、氨水、
盐酸、蛋清、甘油。 • 3、材料 • 各类你感兴趣的固定标本。
.
4
四、实验步骤
• 1、取材 • 2、固定 • 3、漂洗 • 4、脱水 • 5、透明 • 6、透蜡 • 7、包埋 • 8、修块 • 9、切片 • 10、染色
实验八石蜡切片法
.
1
一、实验目的
• 学习石蜡切片法 • 了解组织染色原理
.
2
二、实验原理
• 用石蜡渗透固化组织；
• 用碱性染料如苏木精、碱性品红等，使细胞核着色；
• 用酸性染料如伊红、酸性品红等，使细胞中的嗜酸性成分着色，如蛋白质。
.
3
三、实验用品
• 1、器材： • 切片机、水浴锅、染色缸、玻片、显微镜、试剂瓶、剪刀、
• 未注明时间的一律处理2-3min。
.
8
五、作业
• 简述石蜡切片过程，绘制你所观察到的细胞形态。
• 提交一张你认为制作较好的玻片。
.
9
.
பைடு நூலகம்
5
取材到切片
• 取材——固定（Cannoy’s），材料厚度 2mm。
• 100%酒精——100%酒精——二甲苯:酒精（1:1）——二甲苯——二甲苯——二甲苯: 石蜡（65℃ 1:1）——石蜡（65℃）——石蜡（65℃），以上处理各10-30min，视材料大小而定，最后一步石蜡20min 。
• 包埋——修块——切片——贴片
.
6
脱蜡与复水
• 二甲苯——二甲苯——二甲苯/无水乙醇 (1/1)——无水乙醇 ——无水乙醇——95% 乙醇——80%乙醇——70%乙醇——50% 乙醇——蒸馏水。

石蜡切片包埋的原理是什么

石蜡切片包埋的原理是什么
石蜡切片包埋是一种常用的组织学技术，用于在光学显微镜下观察组织的形态和结构。

其原理如下：
1. 组织处理：首先，将组织标本进行固定和脱水处理。

固定可以使用甲醛等化学物质，以保持组织的形态和结构。

然后，通过一系列浓度梯度的醇溶液，如丙酮或乙醇，逐渐将水分从组织中取出，使得组织进一步脱水。

2. 渗透剂浸泡：在脱水处理后，将组织标本浸泡在溶解于有机溶剂中的石蜡中。

通常使用的有机溶剂是乙烯基石蜡（ethylene vinyl acetate copolymer），其可以很好地与水相宜，能进一步移除标本中的水分并渗透到组织中。

3. 包埋：将浸泡在石蜡中的组织标本放入包埋模具中，并加入熔融的纯石蜡。

在加热的条件下，纯石蜡会渗透到组织中，并在标本固定在模具底部的同时填充模具的其余空间。

这样，组织标本就被完全包裹在石蜡中，保持了其形态和结构。

4. 固化：放置包埋模具在冷却台上，使得石蜡迅速冷却固化。

这样，石蜡将固定住组织，并使其成为一块坚固的切片。

5. 切片：采用专门的组织切片机将固化的石蜡切成薄片，通常为5-8微米的厚度。

这些切片可以通过去石蜡和染色等步骤，进行光学显微镜观察下的染色和分
析。

鱼石蜡切片实验报告

一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的基本原理和操作步骤。

2. 掌握石蜡切片在组织学研究和病理学诊断中的应用。

3. 学习利用石蜡切片观察鱼类组织的结构和特点。

二、实验原理石蜡切片技术是一种重要的组织学制片方法，其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等过程，使其在石蜡中充分浸渍，然后用微型切片机将其切成薄片，最终制成组织学切片，以供观察。

石蜡切片具有切片均匀、厚度可调、易于染色等优点，广泛应用于组织学、病理学等领域。

三、实验材料与仪器材料：1. 新鲜鱼类组织样本2. 4%多聚甲醛固定液3. 乙醇（75%、85%、90%、95%、无水）4. 二甲苯5. 石蜡6. 脱水盒7. 吊篮8. 脱水机9. 包埋机10. 石蜡切片机11. 摊片机12. 载玻片13. 烤片机仪器：1. 显微镜2. 图像采集系统3. 图像处理软件四、实验步骤1. 取材与固定：- 将新鲜鱼类组织样本迅速放入4%多聚甲醛固定液中，固定24小时以上。

- 取出固定后的组织样本，用手术刀将目的部位组织修平整，放入脱水盒中。

2. 脱水：- 将脱水盒放入吊篮中，置于脱水机内，依次使用75%、85%、90%、95%乙醇进行脱水，每级乙醇脱水1小时。

- 最后用无水乙醇脱水30分钟。

3. 透明：- 将无水乙醇取出，用醇苯进行透明处理，5-10分钟。

- 依次使用二甲苯进行透明处理，每次5-10分钟。

4. 浸蜡：- 将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋，将融化的石蜡倒入包埋框中，待蜡凝固后取出组织块。

- 将组织块置于石蜡切片机上，切成厚度为4-5微米的切片。

5. 展片与烤片：- 将切片漂浮于摊片机40℃温水上，将组织展平。

- 用载玻片将组织捞起，放入60℃烤箱内烤片，待水烤干蜡烤化后取出。

6. 染色与封片：- 使用苏木精-伊红染色液对切片进行染色。

- 染色完成后，用蒸馏水冲洗切片，然后用甘油明胶封片。

7. 观察与拍照：- 将封片后的切片置于显微镜下观察，使用图像采集系统拍照记录。

石蜡切片技术实习报告

石蜡切片技术实习报告实习目的：通过本次实习，了解石蜡切片技术的原理和操作流程，掌握石蜡切片的基本技巧，培养实验操作能力和观察能力。

实习内容：1. 石蜡切片技术的原理和操作流程介绍2. 实习操作：取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。

3. 实习结果观察和分析。

实习过程：1. 石蜡切片技术的原理和操作流程介绍石蜡切片技术是一种常用的组织切片技术，它通过将组织样品固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤，制作出可供显微镜观察的切片。

石蜡切片技术的原理是利用石蜡的特性，使组织样品在切片过程中保持稳定，并且石蜡对组织样品有一定的渗透和固定作用，使切片质量更好。

2. 实习操作（1）取材：根据要求选取材料来源及部位，例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖，细胞分裂快又便于切取。

材料必须新鲜，否则会产生蛋白质分解变性，导致细胞自溶及细菌的滋生，不能反映组织活体时的形态结构。

（2）固定：用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料，迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。

（3）洗涤和脱水：用递升浓度的乙醇等对固定后的组织进行洗涤和脱水，去除组织中的水分。

（4）透明：用二甲苯等对脱水后的组织进行透明处理，使组织变得透明，方便切片。

（5）浸蜡：用石蜡对透明处理后的组织进行浸蜡，使组织样品硬化，便于切片。

（6）包埋：将浸蜡后的组织样品放入石蜡中，制成蜡块，用于切片。

（7）切片与粘片：使用旋转式切片机将蜡块切片，并将切片粘贴在玻片上。

（8）脱蜡：使用二甲苯对切片进行脱蜡处理，去除切片表面的石蜡。

（9）染色：根据需要选择适当的染色剂对切片进行染色，突出组织结构。

（10）脱水、透明、封片：使用乙醇等对染色后的切片进行脱水和透明处理，最后封片，制成永久性显微玻片标本。

3. 实习结果观察和分析通过实习，我成功制作了石蜡切片，并使用显微镜观察了切片。

石蜡切片原理

石蜡切片原理石蜡切片是生物组织学研究中常用的技术手段，它可以将生物组织切割成极薄的切片，使得细胞结构和组织形态得以清晰展现。

在生物医学领域和科研实验中，石蜡切片技术被广泛应用于病理学、组织学、细胞学等领域。

本文将从石蜡切片的原理入手，介绍其工作原理和相关知识，帮助读者更好地了解这一重要的实验技术。

石蜡切片的原理主要涉及样品固定、脱水、透明化、浸渗和包埋、切片等步骤。

首先，样品需要进行固定处理，以保持其形态和结构不变。

然后，通过脱水处理，将样品中的水分逐渐替换为有机溶剂，使得样品能够被石蜡所浸渗。

接下来，样品需要进行透明化处理，以使得石蜡能够充分浸透到样品中。

在浸渗和包埋过程中，样品被浸渗在石蜡中，并在石蜡块中进行包埋，以便后续的切片操作。

最后，经过专业的切片机器切割，将石蜡包埋的组织切割成极薄的切片，以便后续的染色和观察。

在石蜡切片的过程中，各个步骤都至关重要。

样品固定可以保持细胞和组织的原始形态，而脱水和透明化可以使得样品逐渐适应石蜡的浸渗。

浸渗和包埋过程中，石蜡能够充分渗透到组织中，使得组织能够被均匀地包埋在石蜡中。

最后的切片过程则需要高精度的切片机器来保证切片的薄度和质量。

石蜡切片技术的原理虽然看似简单，但其中涉及的步骤和技术要求却十分复杂。

在实际操作中，需要严格控制每一个步骤的时间和条件，以确保样品能够被成功地切割成薄片。

同时，不同类型的样品可能需要不同的处理方法，因此操作者需要根据实际情况进行调整和优化。

总的来说，石蜡切片技术是生物组织学研究中不可或缺的重要技术手段。

通过熟练掌握石蜡切片的原理和操作技巧，可以为生物医学领域和科研实验提供有力的支持，为疾病诊断和治疗、细胞结构和功能研究等领域提供重要的实验数据和信息。

希望通过本文的介绍，读者能够对石蜡切片技术有更清晰的认识，并能够在实践中运用到这一重要的技术手段中。

石蜡制片技术

（六）烘干

将烫好的片子自然烘干，或 45℃烤片箱干燥1~2天，注意防尘。
（七）脱蜡、染色、脱水、透明
将玻片标本放于100%X（15-30min)→100%X(12min)→50%X+50%A(1-2min)→100%A(12min)→95%A(1-2min)→85%A(1-2min)→番红（85%A配制）(2-4h)→85%A(3-5s）→95%A(3-5s） →固绿（100%A配制）(30s)→95%A(12min)→100%A(1-2min)→100%A(1-2min） →50%X+50%A(1-2min)→100%X(12min)→100%X(1-2min) 注意番红染色时间要长些（至少3h以上），随后的两次经过酒精的时间都应很短，以免洗掉染上的番红，固绿的染色时间大约在20-30s,其他各步的时间大约1 至2分钟，均要视具体情况而定。
（二）固定和抽气
（一）将切取的植物材料放入固定液中，使其细胞原生质在极短的时间内停止生命活动，尽量保持细胞原有的细微结构，也可使某些柔软的材料适当硬化，便于切片。材料的长和宽最大不超过1cm。固定液为材料的 20倍左右。固定时间24小时，其间要放入抽真空机中抽气15-30分钟至材料完全沉浸在固定液下面。并用铅笔写好标签。
五、石蜡制片的操作流程
（一）取材（二）固定和抽气（三）脱水、透明及渗蜡（四）包埋（五）修块、切片和烫片（六）烘干（七）脱蜡、染色、脱水、透明（八）封片
（一）取材

选取经过自己设计实验的对照和处理的材料，根据不同的要求，从植物体上选取有代表性的器官或组织，取材力求新鲜，以避免组织发生死后变化。取材时要用快刀切割材料，不能挤压，所取的材料不宜过大，在不影响观察的情况下应尽可能小些，这样有利于药剂透入组织和细胞中。

实验十二、石蜡切片法(一)取材、固定、洗涤、脱水

• 在更换高一级的脱水剂时，最好不要移动材料，以免损坏； • 在低浓度酒精中，每级停留时间不宜太长，防止材料解体； • 在高浓度酒精中，每级停留的时间也不宜太长，防止材料变脆； • 脱水必须彻底，否则不易透明。
五、思考题
1. 为什么切取病理材料时应加对照？ 2. 为什么固定液要以新配为好？
二、试剂与器材 1. 试剂：10%中性福尔马林固定液、各级乙醇（50% 70%、 50%、70% 50% 70% 85%、95%、100%） 2.器材：解剖刀、解剖针橡皮圈、软木塞、胶布、塑料脸盆。
三、实验程序 1．取材：用锋利的刀片切取材料。 2．固定：将已切好的材料放入10%的福尔马林溶液中固定12-24小时。固定剂一般为组织块体积的10-15倍。 3．洗涤：材料自固定液中取出，放入指形管，加入半管水，用纱布将管口扎紧，置于水槽内，进行流水冲洗。流水冲洗时间一般需要12-24小时。 4．脱水：材料自低浓度至高浓度的酒精进行脱水。一般经50%、70%、85%、95%直至纯酒精。每级停留约30分钟至1小时。如需过夜，应停留在70%酒精中。
实验十二
石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤、脱水
一、实验原理 • 取材：用于制片的动植物材料应选择新鲜的，用陈腐材料制片，往往不能反映材料的真正情况。 • 固定：固定是借助化学药品的作用,使细胞组织的形态保存下来,不使其改变形态和变质。
• 洗涤:是洗去渗入细胞内部的固定液。因材料中的固定液有的会妨碍染色；有的会发生沉淀或结晶，影响观察；有的会继续作用，使材料变坏等。 • 脱水：材料经洗涤后含有大量的水分，必须用脱水剂脱尽里面的水分，以利于材料的透明和制片的保存。因为水分会使材料分解，而且透明剂与水是不相混合的，只有在完全无水的情况下，透明剂才能完全透入。

石蜡切片原理

石蜡切片原理
石蜡切片（paraffin section）是组织学常规制片技术中为广泛应用的方法。

石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。

冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。

它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。

在冰冻切片前组织不经过化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。

同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片，并作为快速切片的方法应用在临床诊断。