临床免疫学抗原抗体反应
临床免疫学检验 名词解释&重要知识点 (上)
抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。
亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。
带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。
免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。
单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。
多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
免疫学临床应用
（二） 抗原或抗体的检测方法
凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 免疫标记技术
（一）凝集反应（agglutination）
颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等）与 抗体特异性结合，形成肉眼可见的凝集块。
1 、直接凝集(direct agglutination) 玻片凝集、试管凝集
2、间接凝集（indirect agglutination） 可溶性抗原包被在乳胶颗粒或红细胞表面，与相应 抗 体混合出现的凝集现象。
3、细胞因子检测
可用于鉴定分离的淋巴细胞亚群，监测某些疾病状态的细胞免疫功 能。IL-2、IL-2R、rIFN 、TNF等检测。
①免疫学方法：ELISA、RIA等。
②细胞生物学方法 ③分子生物学方法，如聚合酶链反应（PCR）法等
4、体内免疫细胞功能测定：皮肤试验
（1）迟发型超敏反应：旧结核菌素试验（ OT试验 ） 皮试（+）——有一定的细胞免疫能力 皮试（—）——细胞免疫功能缺损
免疫重建(immunoreconstitution)
将免疫功能正常个体的造血干细胞或淋巴细胞移植 给患有免疫功能缺陷的个体，使后者的免疫功能全部 或部分得到恢复。
一、免疫增强疗法和免疫抑制疗法
二、特异性免疫治疗和非特异性免疫治疗
三、主动免疫治疗（active immunotherapy） 和被动免疫治疗（passive immunotherapy）
（三）计划免疫
二、新型疫苗的发展 三、疫苗的应用
1、抗感染 2、抗肿瘤 3、计划生育 4、防止免疫病理损伤
复习题
一、名词解释 凝集反应、沉淀反应、ELISA、人工主动免疫、 人工被动免疫、类毒素、LAK细胞、TIL细胞
二、问答题 1、简述抗原抗体反应的特点。 2、何谓免疫标记技术？简述三大免疫标记技术 的原理和应用。 3、试比较人工主动免疫与人工被动免疫。
临床上常见的抗原抗体反应检测项目
《临床上常见的抗原抗体反应检测项目》一、引言在临床诊断和治疗中，抗原抗体反应检测项目是非常重要的一项内容。
它可以帮助医生诊断疾病、评估治疗效果并预测疾病进展。
本文将就临床上常见的抗原抗体反应检测项目进行全面评估并进行深入讨论，以帮助读者更加深入地了解这一重要领域。
二、临床常见的抗原抗体反应检测项目1. C-反应蛋白（CRP）检测C-反应蛋白是一种急性期蛋白，是细菌和病毒感染、组织损伤、恶性肿瘤和风湿性疾病等炎症反应的敏感指标。
CRP检测可以帮助医生判断炎症程度和指导疾病治疗。
2. 乙肝表面抗原（HBsAg）检测乙肝表面抗原检测是乙肝病毒感染的首选筛查方法。
阳性结果提示可能感染乙肝病毒，需要进一步检测确认是否患病，以及制定相应的治疗方案。
3. 艾滋病毒抗体检测艾滋病毒抗体检测是用于筛查艾滋病毒感染的一项重要检测项目。
及时发现艾滋病毒感染者，并进行隔离和治疗，可以有效控制艾滋病毒的传播。
4. 甲型流感病毒抗体检测甲型流感病毒抗体检测是用来判断病毒感染的一种检测方法。
在流感季节，可以帮助医生及时诊断患者是否感染流感病毒，以便进行针对性治疗。
5. 类风湿因子（RF）检测类风湿因子检测是风湿性疾病的重要辅助诊断指标。
对于类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断具有重要价值。
三、总结与展望通过对临床上常见的抗原抗体反应检测项目的全面评估与深入探讨，我们可以更好地认识到这些检测项目的重要性和必要性。
随着医疗技术的不断进步，我们相信在未来，会有更多、更准确的抗原抗体反应检测项目出现，为临床诊断和治疗带来更大的便利和帮助。
个人观点：抗原抗体反应检测项目在临床医学中扮演着非常重要的角色，它可以帮助医生及时发现并诊断疾病，指导治疗方案的制定，对于提高患者的生存率和生活质量有着重要的意义。
我们应该更加重视这些检测项目的应用，并鼓励科研人员加大力度，不断创新和完善相关的检测技术和方法。
在本文中，我们全面介绍了临床上常见的抗原抗体反应检测项目，并进行了深度探讨，希望读者能够从中获益良多，对这一领域有更深入的了解。
抗原抗体免疫反应的一般规律
抗原抗体免疫反应的一般规律抗原抗体免疫反应是机体对外来病原体进行识别和清除的重要防御机制。
在这一过程中，抗原和抗体之间的相互作用起着关键的作用。
下面我们来详细探讨一下抗原抗体免疫反应的一般规律。
抗原是一种能够引起机体免疫反应的物质，通常是一种蛋白质或多糖。
当抗原进入机体后，免疫系统会将其识别为外来物质，并启动相应的免疫反应。
抗体则是免疫系统产生的一种特殊蛋白质，能够与特定的抗原结合。
抗体的产生主要通过B细胞介导的体液免疫反应和T细胞介导的细胞免疫反应来实现。
在体液免疫反应中，B细胞受到刺激后会分化为浆细胞，进而产生大量抗体。
这些抗体能够与抗原结合，形成抗原抗体复合物。
这种复合物具有多种功能，包括中和病原体、激活补体系统、促进炎症反应等。
抗原抗体复合物的形成是免疫反应的重要环节，也是机体清除病原体的关键步骤。
另一方面，细胞免疫反应则主要由T细胞介导。
T细胞分为辅助T 细胞和杀伤T细胞两种类型。
辅助T细胞能够激活B细胞产生抗体，促进免疫应答的进行。
而杀伤T细胞则能够直接识别并杀伤感染的细胞，起到清除感染源的作用。
细胞免疫反应在抵御细胞内寄生的病原体方面具有重要意义，如对病毒感染的清除作用。
总的来说，抗原抗体免疫反应遵循一定的规律。
首先，抗原和抗体之间的结合是高度特异的，即每种抗体只能与特定的抗原结合。
这种特异性保证了免疫反应的准确性和有效性。
其次，抗原抗体结合后会引发一系列的生物学效应，包括病原体的中和、吞噬及清除等。
最后，免疫反应通常会伴随着炎症反应，包括发热、红肿、疼痛等症状。
这些症状是免疫系统对抗病原体的正常反应，有助于加快病原体的清除。
总的来说，抗原抗体免疫反应是机体对抗外来病原体的重要防御机制。
通过特异性的抗原抗体结合和一系列的生物学效应，免疫系统能够迅速、有效地清除病原体，保护机体免受感染。
因此，深入了解抗原抗体免疫反应的规律对于预防和治疗传染病具有重要意义。
希望通过本文的介绍，读者能对抗原抗体免疫反应有更深入的了解。
简述抗原抗体反应的基本特点与影响因素
简述抗原抗体反应的基本特点与影响因素抗原抗体反应是指在机体内，抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物，从而触发免疫反应。
这种反应具有以下基本特点：1. 特异性：抗原抗体反应是高度特异的，即抗体只能与其所识别的特定抗原结合。
抗体通过其特异性的抗原结合位点与抗原结合，形成稳定的抗原抗体复合物。
2. 亲和力：抗体与抗原结合的亲和力直接影响抗原抗体反应的强度和稳定性。
亲和力越高，抗体与抗原结合越紧密，反应越强烈。
亲和力的高低取决于抗体的结构和抗原的特性。
3. 反应动力学：抗原抗体反应具有动态平衡的特点。
在反应初期，抗原与抗体结合的速率很快，但随着反应进行，反应速率逐渐下降，最终达到平衡。
平衡时，抗原抗体复合物的浓度达到一定的稳定值。
4. 反应强度：抗原抗体反应的强度取决于抗原和抗体的浓度。
当抗原浓度较低时，抗体与抗原结合的机会减少，反应弱；当抗原浓度较高时，抗体与抗原结合的机会增加，反应强。
5. 反应平台：抗原抗体反应的最佳pH和温度范围称为反应平台。
不同抗原抗体对反应平台的要求不同，有些在酸性环境中反应较强，有些在碱性环境中反应较强。
6. 影响因素：抗原抗体反应的强度受多种因素影响。
其中包括抗原和抗体的浓度、亲和力、结构、特异性，以及反应环境的pH、温度等。
此外，还有其他因素如反应时间、离子浓度、抗体的同种异种等也会对反应产生影响。
抗原抗体反应的特点和影响因素对于免疫学的研究和临床诊断有着重要意义。
抗原抗体反应的特异性使其成为检测和诊断疾病的重要手段。
通过设计特异性抗体，可以检测和鉴定特定抗原的存在与浓度变化，从而实现疾病的早期诊断和治疗监测。
抗原抗体反应的亲和力和反应动力学特性使其成为制备特定抗体和药物的重要手段。
通过调节抗原和抗体的结构和亲和力，可以提高抗体的亲和力和稳定性，从而更好地应用于药物研发和治疗。
了解抗原抗体反应的影响因素，可以优化反应条件，提高反应效率和特异性。
例如，调节反应的pH和温度，可以提高抗原抗体反应的效果；调节抗原和抗体的浓度，可以控制反应的强度和特异性。
人卫临床免疫学检验技术
第二章抗原抗体反应作业1.抗原抗体结合力中作用最大的是A.静电引力B.范德华引力C. 氢键结合力D.疏水作用力E. 分子间结合力【答案】:D2.用已知抗原或抗体来检测相对应的抗体或抗原，是由于抗原抗体反应具有A. 特异性B.比例性C.C .可逆性D. 亲和性E.带现象【答案】:A3.由于抗体过量导致抗原抗体结合物减少的现象为A. 前带B. 后带C. 带现象D. 等价带E. 等电点【答案】:A4.一般抗原抗体反应的最适温度为A. 4℃B. 25℃C.C .37℃D. 56℃E. 45℃【答案】:C5.抗原的特异性取决于A. 抗原的化学组成B. 抗原结构的复杂性C. 抗原表位的数量D. 抗原决定簇的性质及空间构型E. 抗原分子量的大小【答案】:D第三章抗原的制备作业1.以下抗原中哪一种属于颗粒性抗原A. 各种蛋白质B. 各种细胞C. 细菌毒素D.核酸E.免疫球蛋白片段【答案】:B2.根据抗原分子大小进行纯化分离的方法为A. 盐析沉淀法B. 有机溶剂沉淀法C. 凝胶过滤D. 离子交换层析E. 亲和层析【答案】:C3.根据抗原分子所带电荷不同进行纯化分离的方法为A.盐析沉淀法B.有机溶剂沉淀法C.凝胶过滤D.离子交换层析E. 亲和层析【答案】:D4.颗粒性抗原中细胞抗原一般情况经如何处理即可使用A.100℃加温2-2.5小时B.用0.3%-0.5%甲醛处理C.经生理盐水或其他溶液洗净配置成一定浓度D.使用表面活性剂进行处理E.灭菌后加0.5%-1.0%L氯化钙溶液【答案】:C5.制备鞭毛抗原选择A.100℃加温2-2.5小时B.用0.3%-0.5%甲醛处理C. 56℃加热30minD.-20℃反复冻融E. 灭菌后加0.5%-1.0%L氯化钙溶液【答案】:B6.实验室中抗血清制备后，抗体特异性鉴定最常采用的方法是A.单向免疫扩散B.双向免疫扩散C.亲和层析D.免疫吸附法E.免疫电泳【答案】:B第四章抗体的制备作业1.单克隆抗体是指A.单个骨髓瘤细胞增殖产生抗体B.单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体C.单个浆细胞产生的抗体D.单个抗体通过克隆化产生大量抗体【答案】:B2.下面哪些是天然佐剂A.弗氏完全佐剂B.弗氏不完全佐剂C.多聚核苷酸D.百日咳鲍特菌E.外毒素【答案】:D3.单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于A.单克隆抗体能制成“生物导弹”B.单克隆抗体能够在体外制备C.单克隆抗体比血清抗体的特异性强，免疫活性高D.单克隆抗体制备过程简单【答案】:C4.抗血清保存3-5年选择A.4℃B.半量甘油C.加叠氮钠D.-20-40℃E.真空冷冻干燥【答案】:D5.制备抗血清时，若免疫原不容易获得，可选择下列何种免疫途径A.腹腔注射B.静脉注射C.肌肉注射D.淋巴结内微量注射法E.皮下注射【答案】:D6.单克隆抗体纯化法目前最有效的方法是A.盐析法B.凝胶过滤法C.离子交换法D.辛酸提取法E.亲和纯化法【答案】:E7.单克隆抗体与多克隆抗体主要的区别之一是A.只与相应的一个抗原决定簇结合B.与抗原结合牢固C.生物活性多样D.对热稳定E.可用固相放射免疫测定含量【答案】:A8.液氮保存和复苏细胞的基本原则A.快冻快溶B.慢冻快溶C.慢冻慢溶D.快冻慢溶E.自然溶冻【答案】:B9.佐剂的功能不包括A.作用于T细胞抗原受体B.激活抗原提呈细胞C.延长抗原的体内滞留时间D.改变免疫应答的类型E.增强免疫应答【答案】:A第五章免疫凝集试验作业1.颗粒性抗原在适当电解质参与下与相应抗体结合出现凝集称为（）。
抗原抗体反应及其应用
抗原抗体反应及其应用摘要抗原抗体反应指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
免疫印迹，又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
双转印法、天然电泳及western blot 分析等是最近几年出现的新型蛋白印迹技术。
单克隆抗体技术是20世纪后20年内最为重要的生物高技术之一。
单克隆抗体药物在肿瘤治疗、抗感染等方面具有重要的作用。
关键词抗原抗体反应、Western blotting、单克隆抗体技术一、抗原抗体反应抗原抗体反应指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
这种反应既可在机体内进行，也可以在机体外进行。
抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化，包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段，以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化[1]。
抗原是能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。
抗原表位是抗原上与抗体结合的区域。
蛋白质抗原的表位是由相邻的连续的或非连续的氨基酸序列形成的局部表面结构[2]，如图1所示。
抗体是指宿主对体内存在的外来分子、微生物或其他因子的应答而产生的蛋白质。
抗体主要由B淋巴细胞系的终末分化细胞-浆细胞产生，并且循环在血液和淋巴液中，在那里与抗原结合。
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。
链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。
整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。
抗体上与抗原表位结合的位点由重链和轻链的可变区构成[3]，如图2所示。
抗原抗体复合物通过大量非共价键连接。
某些免疫复合物中抗体或抗原的结构未发生改变，而另一些则出现巨大的构像改变。
研究抗原抗体复合物最有说服力的的方法是抗体-抗原共结晶的X射线衍射技术。
图1 抗原表位示意图图2 抗体结构示意图二、蛋白印迹技术免疫印迹，又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
第一章抗原抗体反应讲解学习
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
➢例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
2.范德华引力
➢ 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极 化作用而出现的引力，称范德华引力。
➢结合力的大小与两个相互作用基团的极化 程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2-12.5kJ/moL。 这种引力的能量小于静电引力。
3.氢键结合力
➢ 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引 力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和 羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳 和肽键氧等原子是主要受氢体。
➢氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离 的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力
➢ 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由 于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水 作用力，或称为疏水键。
➢当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间正、负极性消失， 由静电作用形成的亲水层立即失去，从而 促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水 作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要 的。提供的作用力最大，约占总结合力的 50%。
实验一抗原抗体反应凝集反应
将待测抗原或抗体与相应的抗体或抗原结合，再与载体颗粒结合， 形成可见的凝集块。
间接凝集抑制反应
在间接凝集反应的基础上，加入特异性抗体或抗原，抑制了抗原抗 体结合，从而抑制了凝集现象。
凝集反应的原理
抗原抗体结合
温度和pH值影响
抗原和抗体具有特异性结合的特性， 当抗原和抗体结合后，会形成较大的 复合物，导致颗粒性改变。
03
凝集反应
凝集反应的定义
01
凝集反应是指颗粒性抗原与相应 抗体结合后，在一定条件下，出 现可见的凝集现象。
02
凝集反应是一种免疫学检测方法 ，常用于检测抗原或抗体的存在 ，以及进行抗原抗体的定性或定 量分析。
凝集反应的类型
直接凝集反应
将待测抗原或抗体直接与相应抗体或抗原结合，形成可见的凝集 块。
抗原抗体反应的特点
高度特异性
抗原和抗体的结合具有高度的特 异性，这种特异性是由免疫原和
抗体的分子结构所决定的。
可逆性
抗原和抗体的结合是可逆的，当环 境发生变化时，如温度、pH值、 离子浓度等，抗原和抗体可以解离。
动力学特征
抗原和抗体的结合符合动力学特征， 包括速率常数、平衡常数等参数。 这些参数可以用于描述抗原和抗体 的相互作用。
抗原抗体反应的特性
抗原抗体反应具有高度的特异性，能专一地与相应抗原结合 ，因此可用于各种抗原的定性或定量检测、抗体的筛选和鉴 定，细胞表面标志的分析，肿瘤的诊断、鉴别和预后判断等 。
抗原抗体反应的类型
沉淀反应
可溶性抗原与相应抗体结合后，在一定条件下出现沉淀现象。沉淀反应可根据是否需要通 电等物理手段来加速其进程，分为单向沉淀和双向沉淀。
对照组
抗原抗体反应凝集反应后，试管 中未出现凝集颗粒，液体呈透明 状。
抗原抗体反应
第一节 抗原抗体反应原理
抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子 超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异 的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极短距 离内才能发生效应。因此抗原抗体结合反应的最 重要的先决条件是抗原与抗体间的特定部位的空 间结构必须相互吻合，具有互补性;其次，抗原 决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有足够 的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。
抗原抗体反应
抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗 原抗体反应(antigen-antibody reaction)。抗 原抗体反应既可在体内作为体液免疫应答的效 应机制自然发生，也可在体外作为免疫学实验 的结果出现。在体内，可表现为溶菌、杀菌、 促进吞噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免 疫病理损伤，在体外，依相应抗原物理性状 (颗粒状或可溶性)以及反应的条件 (电解质、补 体等)不同，可出现凝集、沉淀、细胞溶解和补 体结合等反应。
亲和力与亲和性有关，也与抗体的结合价 和抗原的有效决定簇数目相关。例如，IgG为 两价，其亲和力为单价的l03倍;而IgM为5～10 价;其亲和力为单价的107倍。亲和力越大，抗 原抗体结合越牢固。而在单克隆抗体反应系统 中，只有某些决定簇起作用，因此，单克隆抗 体与相应抗原的亲和力相对较弱。
抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡对其亲 和常数 K= 抗原抗体复合物浓度 游离抗原浓度×游离抗体浓度 K代表抗体结合抗原的亲和力。K值大的抗 体与抗原牢固结合，不易解离，称该抗体有高 亲和力。
第二节 抗原抗体反应的特点
一、特 异 性
特异性 (speecificity)是指任何一种抗原分 子，只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反 应的专一性能。特异性是抗原抗体反应的最重 要特征之一，是由抗原决定簇和抗体分子超变 区之间空间结构的互补性决定的。抗体分子N 端可变区形成大小约为3nm×1.5nm×0.7nm 的槽沟，其中超变区氨基酸残基的变异性使槽 形状千变万化，只有与其空间结构互补的抗原 决定簇才能如楔状嵌入，其关系如锁和钥匙， 因此，抗原抗体结合反应具有高度特异性。
《抗原抗体反应原理》课件
免疫应答机制研究
通过研究抗原与抗体的相互作用，深 入了解免疫应答的机制和过程，为疫 苗研发、免疫治疗等提供理论基础。
自身免疫性疾病机制研究
通过对自身抗体与自身抗原的反应进 行研究，揭示自身免疫性疾病的发病 机制，为治疗提供新思路。
免疫细胞功能分析
利用抗原抗体反应检测免疫细胞表面 的抗原标志，分析免疫细胞的功能和 亚型，为免疫学研究提供有力工具。
抗体的纯化
通过一系列分离纯化技术，去除血清中的其 他成分，提高抗体的纯度，常用的方法有离 心、凝胶电泳、亲和层析、离子交换层析等 。
抗原抗体反应的检测方法
沉淀反应
抗原和抗体结合后，在一定条 件下形成肉眼可见的沉淀物， 常用的方法有单向免疫扩散、 双向免疫扩散、对流免疫电泳 等。
凝集反应
抗原和抗体结合后，引起颗粒 性抗原的凝集现象，常用的方 法有直接凝集、间接凝集等。
Байду номын сангаас
抗原抗体的分类
按作用对象分类
外源性抗原和内源性抗原。外源性抗原是指来自机体外部的抗原，如细菌、病 毒等；内源性抗原是指来自机体内部的抗原，如变性或损伤的组织细胞。
按功能分类
完全抗原和半抗原。完全抗原是指具有免疫原性和反应原性的抗原物质，能够 刺激机体产生免疫应答；半抗原是指仅有反应原性而无免疫原性的抗原物质， 不能刺激机体产生免疫应答。
影响因素
亲和力受到抗原和抗体分子间的电荷分布、空间构象、结合位点数目以及溶液环 境等多种因素的影响。
抗原抗体的特异性
特异性的含义
特异性是指抗原和抗体结合的专一性，即一种抗原只能与相 应的抗体发生特异性结合。
决定因素
抗原抗体的特异性是由其分子表面的化学基团决定的，这些 化学基团在空间构象上互补，使得抗原和抗体能精确地结合 在一起。
临床免疫学：抗原抗体反应
• 前带(prezone)：抗体过量
• 后带(postzone)：抗原过量
三、可逆性（reversibility）
• 是指抗原与抗体结合成复合物后，在一定 条件下可解离为游离抗原与抗体的特性
第二节抗原抗体反应的原理
一、空间互补关系: • 抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补
性与亲和性 • 抗原表位与抗体超变区密切接触 • 高度互补使抗原抗体之间有足够的结合力 • 亲水胶体转化为疏水胶体
二、抗原抗体结合力：抗原抗体是非共价键 结合，弱结合力
●静电引力(eletrostatic forces):是抗原抗体分子 中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力 ,两个电荷距离越近,静电引力越大.
• 抗原大都是多价，抗体多 为二价，等价带结合时， 抗体的两个Fab段可分别与 两个抗原分子表面的抗原 表位结合，相互交叉连接 成具有立体结构的巨大网 格状聚集体，形成肉眼可 见的反应物。
• 等价带（equivalence zone)：抗原抗体比例合适的 范围
• 最适比(optimal ratio):抗原抗体复合物形成最多 ，上清液中几乎无游离的抗原与抗体存在
●范德华引力(vander Waals forces):抗原和抗体相 互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 .
●氢键结合力(hydrogen bonding forces)：供氢体 上的氢原子与受氢体原子间的引力
●疏水作用力(hydrophobic forces)：两个疏水基团 在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向 聚集的力.
第四节 抗原抗体反应的影响因 素
临床医学检验技师初级(师)临床免疫学及检验(抗原抗体反应)-试卷1
临床医学检验技师初级（师）临床免疫学及检验（抗原抗体反应）-试卷1(总分：74.00，做题时间：90分钟)一、 A1型题(总题数：25，分数：50.00)1.抗原抗体特异性结合的基础是（分数：2.00）A.抗原决定簇和抗体超变区结构互补性和亲和性√B.抗原分子量大小C.抗原的化学组成D.抗原表位数量E.抗原结构复杂性解析：解析：抗原抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇(表位)和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。
这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。
2.亲和性用平衡常数K来表示，K值越大（分数：2.00）A.亲和性越小B.亲和性越大√C.亲和力越大D.亲和力越小E.特异性越大解析：解析：亲和性用平衡常数K来表示，K值越大，亲和性越强，与抗原结合也越牢固。
3.必须与蛋白质载体结合才具有免疫原性的是（分数：2.00）A.超抗原B.变应原C.半抗原√D.完全抗原E.耐受原解析：解析：某些物质在独立存在时只有反应原性而无免疫原性，必须与载体结合才具有免疫原性称为半抗原。
4.完全抗原的特征是（分数：2.00）A.有反应原性，无免疫原性B.有免疫原性，无反应原性C.无免疫原性和反应原性D.有免疫原性和反应原性√E.必须与载体结合才具有免疫原性解析：解析：免疫原性和反应原性都有的抗原是完全抗原。
5.抗原抗体结合，下列哪种力作用最大（分数：2.00）A.静电引力B.范德华力C.氢键结合力D.疏水作用力√E.共价键解析：解析：抗原抗体结合为非共价键结合，主要作用力包括：①静电引力：又称库仑引力。
两个电荷距离越近，静电引力越大。
②范德华力：其能量小于静电引力。
③氢键结合力：较强于范德华力。
④疏水作用力：这些力中最强的，对维系抗原抗体结合作用最大。
6.下列哪类抗体与相应抗原表位的亲和力最强（分数：2.00）A.IgGB.IgAC.IgM √D.IgEE.IgD解析：解析：抗原抗体反应存在多价优势，如IgG为2价，亲和力为单价的10 3倍，IgM为5～10价，亲和力为单价的10 7倍。
常见抗原抗体反应种类
常见抗原抗体反应种类引言：抗原抗体反应是生物学研究中的重要领域，它涉及到免疫系统的功能与调节机制。
在这篇文章中，我们将介绍一些常见的抗原抗体反应种类，包括沉淀反应、凝集反应、中和反应、荧光反应和免疫组化。
一、沉淀反应沉淀反应是指当抗原与抗体结合后，形成可见的沉淀物。
这种反应通常发生在溶液中，例如在免疫沉淀试验中。
通过加入沉淀剂，如聚乙二醇，可以促使抗原和抗体结合形成沉淀物。
沉淀反应的结果可以通过肉眼观察或显微镜观察来确定。
二、凝集反应凝集反应是指抗原与抗体结合后，形成可见的凝集物。
这种反应通常发生在液体中，如血清凝集试验中。
当抗原与抗体结合后，它们会形成凝集物，这些凝集物可以通过肉眼观察或显微镜观察来确定。
凝集反应在临床诊断中具有重要的应用价值，可以用于检测特定疾病的诊断和监测。
三、中和反应中和反应是指抗体与抗原结合后，阻止抗原的活性或入侵机体。
这种反应通常发生在体内，例如针对病毒或细菌的中和抗体。
当中和抗体与病原体结合后，它们可以阻止病原体进入或感染宿主细胞。
中和反应是免疫系统中重要的防御机制，对于预防病毒感染和细菌感染具有重要意义。
四、荧光反应荧光反应是指通过使用荧光标记的抗体来检测特定抗原。
在荧光免疫分析中，荧光染料被标记在抗体上，当这些荧光标记的抗体与目标抗原结合时，可以通过荧光显微镜观察到荧光信号。
荧光反应在生物医学研究中具有广泛的应用，可以用于检测抗原的存在和定位。
五、免疫组化免疫组化是指通过使用特异性抗体来检测组织中的特定分子。
在免疫组化实验中，组织样本被固定和切片，然后与特异性抗体结合。
通过使用染色剂或荧光标记的二抗来检测抗原-抗体结合，可以观察到抗原在组织中的位置和表达水平。
免疫组化广泛应用于疾病诊断和医学研究领域。
结论：抗原抗体反应是免疫系统中重要的功能机制，涉及到多种反应类型。
沉淀反应、凝集反应、中和反应、荧光反应和免疫组化是常见的抗原抗体反应种类。
这些反应不仅在基础科学研究中有重要应用，也在临床诊断和医学研究中具有广泛的应用前景。
简述抗原抗体反应的效价或滴度的概念
简述抗原抗体反应的效价或滴度的概念
摘要：
一、抗原抗体反应的概念
二、抗原抗体反应的效价或滴度的含义
三、效价或滴度的检测方法
四、效价或滴度在医学检测中的应用
正文：
抗原抗体反应是免疫学中的一个重要概念，它指的是抗原与抗体之间的特异性结合。
在这个过程中，抗原和抗体的结构互补，使得它们能够紧密地结合在一起，从而引发一系列生物学反应。
抗原抗体反应在医学、生物学等领域具有广泛的应用，如诊断疾病、研究免疫机制等。
在抗原抗体反应中，效价或滴度是一个关键指标。
效价指的是抗体或抗原溶液中单位体积内所能结合的抗原或抗体分子数量。
滴度则是表示抗原或抗体在溶液中的浓度。
这两个概念在实验研究和临床检测中具有重要意义。
抗原抗体反应的效价或滴度检测方法有多种，常用的有酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光法、放射免疫分析法等。
这些方法具有高灵敏度、高特异性、快速等特点，为医学检测提供了有力的手段。
在医学检测中，效价或滴度的检测具有重要意义。
例如，在病毒感染诊断中，通过检测患者血清中的抗体滴度，可以评估病毒感染的严重程度和免疫反应的水平。
此外，在疫苗研究方面，检测疫苗免疫后的抗体效价或滴度，可以评估疫苗的保护效果和免疫持续时间。
此外，抗原抗体反应的效价或滴度检测
还应用于自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的诊断和治疗监测。
总之，抗原抗体反应的效价或滴度是一个具有重要意义的指标，它在医学检测、疫苗研究等领域发挥着重要作用。
抗原抗体结合实验报告
一、实验目的1. 了解抗原抗体结合反应的基本原理和过程。
2. 掌握抗原抗体结合实验的操作方法。
3. 观察抗原抗体结合现象，加深对免疫学基础知识的理解。
二、实验原理抗原抗体结合反应是指抗原与相应抗体在一定条件下发生特异性结合，形成抗原抗体复合物的过程。
该实验利用抗原抗体结合的特异性，通过观察沉淀反应或凝集反应等现象，检测待测样品中是否存在特定的抗原或抗体。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 抗原：待测样品（如血清、尿液等）- 抗体：特异性抗体- 稀释液：生理盐水、PBS缓冲液等- 阳性对照：已知含有特定抗原或抗体的样品- 阴性对照：不含特定抗原或抗体的样品- 试剂：沉淀试剂、凝集试剂等2. 仪器：- 微量移液器- 酶标仪- 实验台- 混匀器- 烧杯- 试管四、实验方法1. 样品处理：将待测样品和阳性、阴性对照分别进行适当稀释。
2. 抗原抗体混合：将抗体和待测样品（或对照）混合，室温下反应一定时间。
3. 沉淀反应：向反应体系中加入沉淀试剂，观察沉淀形成情况。
4. 凝集反应：向反应体系中加入凝集试剂，观察凝集现象。
5. 数据记录：记录阳性对照、阴性对照、待测样品的沉淀反应或凝集反应结果。
五、实验结果与分析1. 阳性对照：在抗原抗体混合后，加入沉淀试剂或凝集试剂，出现明显的沉淀或凝集现象。
2. 阴性对照：在抗原抗体混合后，加入沉淀试剂或凝集试剂，无沉淀或凝集现象。
3. 待测样品：在抗原抗体混合后，加入沉淀试剂或凝集试剂，根据沉淀或凝集现象的强弱，判断待测样品中是否存在特定抗原或抗体。
六、实验结论通过本次实验，我们成功掌握了抗原抗体结合实验的操作方法，观察到了抗原抗体结合的沉淀反应和凝集反应现象。
实验结果表明，待测样品中存在特定抗原或抗体。
七、实验注意事项1. 实验过程中，应严格控制温度和时间，确保抗原抗体充分结合。
2. 试剂的浓度和用量要准确，避免影响实验结果。
3. 实验操作要规范，防止污染。
4. 数据记录要准确，便于分析。
抗原抗体反应
抗原抗体反应
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• 4、前带现象:抗原抗体反应该抗体量过时,不出现 可见反应。
• 5、后带现象:抗原抗体反应该抗原量过剩时,不出 现可见反应。
• 1929年Heidelberger利用等量抗体检测浓度递增抗 原，当抗原浓度较低，抗体浓度相对较高时，沉淀 反应不显著；当抗原浓度增加到与抗体浓度百分比 适当时，沉淀反应显著；继续增加浓度时，沉淀反 应反而减弱。据此绘出双对应答曲线，曲线高峰区 域，抗体、抗原浓度呈最适比，沉淀反应显著，称 等价带。高峰区域左侧，因为抗体浓度过高，沉淀 反应不显著，称前带；高峰区域右侧，因为抗原浓 度过高，沉淀反应也不显著，称后带。抗体浓度过 高所致结果称前带现象，抗原浓度过高所致结果称 后带现象，统称为带现象。1977年Green把此现 象称为钩状效应（hook effect），包含前后带现象 。
抗原抗体反应
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抗原抗体特异性是指抗原分子上抗原决
定簇和抗体分子超变区结合特异性，由二者 之间查问结构互补决定。抗体分子VH 区和 VL 区上各自含有三个高变区共同组成抗原 结合部位，该部位形成一个与抗原决定簇互 补槽沟，决定了抗体特异性。所以，在抗原 抗体反应免疫学试验中，能够用已知抗原或 抗体来检测对应抗体或抗原。但较大分子蛋 白质常含有各种抗原表位。假如两种不一样 抗原分子上有相同抗原表位，或抗原、抗体 间构型个别相同，皆可出现交叉反应。
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二、抗原抗体反应特点
• 抗原抗体反应特点主要有三性：即特异性、
百分比性、可逆性。
（一）特异性：
是抗原抗体反应最主要特征，这种特异性 是由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间 结构互补性确定。这种高度特异性在传染病 诊疗与防治方面得到有效应用。伴随免疫学 技术发展进步，还将在医学和生物学领域得 到愈加深入和广泛应用，比如肿瘤诊疗和特 异性治疗等。
抗原抗体反应的种类
抗原抗体反应的种类抗原抗体反应是生物学中重要的一种免疫反应，在维护机体免疫稳态和抵御病原微生物入侵方面起着重要的作用。
根据免疫学的研究，抗原抗体反应可以分为以下几种类型。
一、沉淀反应沉淀反应是抗原与抗体相互作用后形成可见的沉淀物。
它主要发生在液相中，如血清、尿液等。
沉淀反应可用于检测抗体的含量和抗原的特异性。
常见的沉淀反应有双向免疫扩散和免疫电泳。
双向免疫扩散是将抗原和抗体分别加入两个对应的凹陷孔中，经过一段时间后，如果有沉淀带出现，则说明抗原与抗体相互作用形成了可见的沉淀物。
免疫电泳则是利用电场将抗原和抗体分离，形成特定的沉淀带。
二、凝集反应凝集反应是指抗原与抗体相互作用后，形成可见的凝集物。
凝集反应适用于检测血清中的抗体和病原微生物。
常见的凝集反应有血凝反应和乳凝反应。
血凝反应是将抗原溶液加入含有抗体的血清中，如果抗原与抗体相互作用，则会形成凝集物。
乳凝反应是将抗原溶液加入含有抗体的乳液中，如果抗原与抗体相互作用，则会发生乳凝。
三、中和反应中和反应是指抗原与抗体相互作用后，使病原微生物失去致病性或抑制病毒复制。
中和反应是一种重要的体内免疫反应，可用于疫苗研制和治疗病毒感染等。
中和反应主要发生在体外，通过混合抗原和抗体，观察是否能够中和病原微生物的活性。
常见的中和反应有补体中和反应和病毒中和反应。
四、荧光反应荧光反应是指利用荧光染料标记的抗体与抗原结合后发生荧光现象。
荧光反应可用于检测细胞表面分子、组织中的抗原以及细菌和病毒的定位。
常见的荧光反应有免疫荧光染色和荧光免疫分析。
免疫荧光染色是将荧光染料标记的抗体与待检测标本接触，通过荧光显微镜观察是否有荧光信号。
荧光免疫分析是利用荧光标记的抗体与待检测物相互作用后，通过荧光检测仪器检测荧光强度。
五、酶标记反应酶标记反应是指利用酶标记的抗体与抗原结合后，在适当的底物存在下产生可见的颜色变化。
酶标记反应可用于检测抗原和抗体的含量，广泛应用于生物学研究和临床诊断。
常见抗原抗体反应种类
常见抗原抗体反应种类一、免疫沉淀反应免疫沉淀反应是指抗原与相应抗体结合后形成不溶性复合物，沉淀于溶液中的现象。
这种反应常用于免疫学研究中，可以用来检测抗体与抗原之间的特异性反应。
通过免疫沉淀反应，可以分离和纯化抗原-抗体复合物，从而进一步研究其结构和功能。
二、免疫沉淀电泳免疫沉淀电泳是一种结合了免疫沉淀和电泳技术的方法。
通过将抗原与抗体结合形成复合物，并将其沉淀后进行电泳分离，可以实现对特定抗原的检测和定量。
这种方法常用于研究蛋白质相互作用、表达水平以及特定抗原的定位等方面。
三、免疫荧光反应免疫荧光反应是指利用荧光染料标记的抗体与抗原结合后产生荧光信号的现象。
通过观察样品中的荧光信号分布，可以确定抗原的位置和含量，从而用于疾病的诊断和研究。
免疫荧光反应广泛应用于细胞和组织的免疫标记、免疫组织化学以及流式细胞术等领域。
四、免疫酶联免疫吸附试验（ELISA）免疫酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常用的免疫学实验方法。
它利用酶标记的抗体与抗原结合，通过酶的催化作用产生可测量的信号，从而检测抗原的存在和浓度。
ELISA具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，被广泛应用于医学诊断、药物研发和环境监测等领域。
五、免疫沉淀质谱分析免疫沉淀质谱分析是一种结合了免疫沉淀和质谱技术的方法。
通过将抗原与抗体结合形成复合物，然后将其沉淀并进行质谱分析，可以鉴定和定量复合物中的蛋白质和其他生物分子。
这种方法常用于研究蛋白质组学、信号转导等方面，有助于揭示生物系统的功能和调控机制。
六、中和反应中和反应是指抗体与病原体（如病毒、细菌等）结合后，使其失去侵袭性和致病性的能力，从而保护机体免受感染的现象。
中和反应是人体免疫系统中的重要防御机制之一，通过阻止病原体侵入细胞和繁殖，起到保护机体的作用。
七、凝集反应凝集反应是指抗体与抗原结合后，使其形成可见的凝集现象。
凝集反应常用于血型鉴定、病原体检测和免疫沉淀等实验中。
通过观察样品中的凝集程度和形态，可以确定抗原的存在和特异性反应。
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第二章抗原抗体反应本章考点1概.述2抗.原抗体反应原理3抗.原抗体反应的特点4抗.原抗体反应的影响因素5抗.原抗体反应的类型第一节抗原抗体反应原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。
这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。
除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。
抗原抗体反应可分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应；第二阶段为可见反应阶段，这一阶段抗原抗体复合物在适当温度、电解质和补体影响下，出现沉淀、凝集、细胞溶解、补体结合介导的肉眼可见的反应，此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。
在血清学反应中，以上两阶段往往不能严格分开，往往受反应条件（如温度、电解质、抗原抗体比例等）的影响。
（一）抗原抗体结合力抗原抗体是一种非共价的结合，不形成共价键，需要四种分子间引力参与。
1静.电引力：又称库伦引力。
是因抗原、抗体带有相反电荷的氨基与羧基基团间相互吸引的能力，这种吸引力的大小和两个电荷间的距离平方成反比。
两个电荷距离越近，静电引力越大；2范.德华引力：这是原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力，是抗原、抗体两个大分子外层轨道上电子相互作用时，两者电子云中的偶极摆动而产生的引力。
这种引力的能量小于静电引力；3氢.键结合力：是供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力。
其结合力较强于范德华引力；4疏.水作用力：水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
当抗原表位和抗体超变区靠近时，相互间正负极性消失，周围亲水层也立即失去，从而排斥两者间的水分子，使抗原抗体进一步吸引和结合。
疏水作用力是这些结合力中最强的，因而对维系抗原抗体结合作用最大。
图10抗原与抗体的结合力（二）抗原抗体的亲和性和亲和力亲和性指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在的引力，它是抗原抗体间固有的结合力。
亲和性用平衡常数来表示，值越大，亲和性越高，与抗原结合也越牢固。
抗体的亲和力指抗体结合部位与抗原表位间结合的强度，与抗体结合价相关，所谓多价优势，抗体亲和力高，与抗原结合牢固，不易解离。
（三）亲水胶体转化为疏水胶体抗体是球蛋白，大多数抗原亦为蛋白质，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。
亲水胶体形成机制是因蛋白质含有大量的氨基和羧基残基，这些残基在溶液中带有电荷，由于静电作用，在蛋白质分子周围出现了带相反电荷的电子云。
如果溶液偏高，蛋白质分子带负电荷，周围出现极化的水分子，形成水化层，而当抗原抗体的结合，使表面电荷减少或消失，电子云也消失，水化层变薄，蛋白质由亲水胶体转化为疏水胶体。
此时，如再加入电解质，如C则进一步使疏水胶体物相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。
图11抗原抗体结合时胶体状态的变化习题15抗原的特异性取决于抗原（）分子量大小化学结构决定簇的性质、数目和空间构型表位的数目结构的复杂性d答疑编号『正确答案』习题16关于抗原抗体第一阶段反应的叙述,错误的是（）属于特异性结合几秒至几分钟内完成可用散射比浊测定反应结果出现肉眼可见的沉淀线或沉淀环肉眼见不到免疫复合物G答疑编号『正确答案』第二节抗原抗体反应特点1特.异性：抗原抗体结合的特异性是指抗原表位与抗体超变区结合的特异性。
是由两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。
抗原与抗体的结合高度的特异性，是应用于临床诊断的基础，但多数天然抗原具有不只一种抗原决定簇，与另一物质可能有共同抗原，对检验结果产生交叉反应，但这交叉反应仍是抗原抗体特异性结合，对临床诊断可能产生干扰，不过有时也将这种交叉反应用于临床诊断，如外-斐试验。
2比.例性：在抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。
只有当抗原抗体分子比例合适时抗原抗体充分结合，沉淀物形成快而多，称为抗原抗体反应的等价带；若抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成，称为带现象，抗体过量时，称为前带，抗原过剩时，称为后带。
图12抗原抗体反应中的带现象3可.逆性：可逆性指抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可发生解离，恢复抗原抗体的游离状态。
抗原抗体结合是分子表面的结合，犹如酶与底物的结合，是一种非共价键结合，结合虽稳定但可逆；抗17抗原抗体比例不合适出现的无沉淀现象称为前带后带中带*答疑编号『正确答案』习题18不同抗原与抗体结合发生交叉反应的原因是抗原抗体比例不合适抗体分子量较大抗原和抗体大小相近抗体为多聚体不同抗原具有相同或相似的抗原决定簇3答疑编号『正确答案』第三节影响抗原抗体反应的因素（一）反应物自身的因素1.抗体：不同来源的抗体，反应性各有差异，抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应，为提高试验的可靠性，应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。
等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成，单克隆抗体不适用于沉淀反应。
2抗.原：抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。
颗粒性抗原出现凝集反应，可溶性抗原出现沉淀反应，单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。
（二）反应环境条件1.电解质：抗原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。
为了促成沉淀物或凝集物的形成，常用05或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。
酸碱度：抗原抗体反应必须在合适的环境中进行。
蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。
抗原抗体反应一般在飞进行，有补体参与的反应为7~74过高或过低都将影响抗原与抗体反应。
3.温度：在一定范围内，温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。
一般为15℃~40℃，常用的抗原抗体反应温度为37℃，温度如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏。
每种试验都有其独特的最适反应温度要求。
此外，适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。
第四节抗原抗体反应基本类型目前临床应用的主要有沉淀反应、凝集反应、补体参与反应、中和反应、标记免疫的抗原抗体反应。
抗原抗体反应基本类型如下表。
枕♦流体反应基本美，反应嬖量里脸气水常用燃果此新方鹏沉壅反应被和瓦淀式壮肉累煤机蛙F便器构器触皮思揖彘胜犷胜此验肉业观桑罚剽定打摧境就㈱成环跷就电泳技泉肉眼费察用测定n接运雷崎威it¥社案反厘宜接我集优怆四眼.放大蜒.是雹慢火整就班理整何摄慧集试检肉眼，酸太黑，显蒙慢01意枇贝联象隹臬抑制或险曲里，曲入便，品甫请迎京掂集死能由同衣袋宜健WM,靠大把.显荫校慎察戒柒现象削球凝白试会肉眼，漱大陵.晶政悔观案及第现象补体参与的反同朴体溶血试验因m观察或知光光度计西定浴血现象补体解书试段肉眼爱瞿点力把北城计司定塔血现象中比反应毒京中和试验抑毒素毒性消失病器中fir试验病媒感助性费失标记免充费光标记先把技术用费先也看覆通苒他攸静橙量荧光・廿免疫技术用*标伏或其他优第冷恻瞬屁却显电殖式光同位K标记把程菰戒（放时凭座涧定J 用放射免废分带仪依圉放射性发光宪标技术用专用仪器内激发在案标免慈桂本遇曜金■总沉淀疑第三章免疫原和抗血清制备本章考点1.免疫原制备2.抗血清制备抗.体的纯化和鉴定第一节免疫原的制备免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
一、颗粒性抗原的制备颗粒性抗原如各种细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。
细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可；细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。
有的需经特殊处理，如鞭毛抗原需用0〜0甲醛处理；菌体抗原加温100c2〜2去除鞭毛抗原；毒素抗原则在杀菌后再加0〜氯化钙溶液等。
颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法，较少加佐剂作皮内注射。
二、可溶性抗原制备蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原，免疫前常需纯化。
（一）组织和细胞抗原的制备1.组织和细胞抗原的制备：通常需要先将来源于人和动物的组织和细胞破碎，再经一定的方法纯化，才能获得所需的抗原。
细胞破碎方法有：（1）高速组织捣碎机法；（2）研磨法（可用组织匀浆器或乳钵）组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。
2.组织细胞或培养细胞可溶性抗原制备：除上述机械捣碎获取外，尚有酶处理法，常用胃蛋白酶或胰酶，可获得游离的单个细胞。
细胞抗原分膜蛋白抗原、细胞质抗原（主要为细胞器）、细胞核与核膜抗原，制备这些抗原前均需将细胞破碎，方法有：（1）反复冻融法：一般-20℃反复冻融。
（2）超声破碎法：利用超声波机械振动原理使细胞破碎。
（3）自溶法：利用组织、细菌自身酶系统使之裂解。
（4）酶处理法：常用溶菌酶、蜗牛酶、纤维素酶等使细菌或组织裂解。
（5）表面活性剂处理法：常用十二烷基硫酸钠等表面活性剂处理。
（二）超速离心分离法用于分离亚细胞成分和蛋白质，是进一步纯化的第一次过筛。
可分下列方法：1.差速离心法：低速离心高速离心交替进行，分离大小差异的抗原颗粒；2.梯度密度离心法：是一种区带分离法，通过梯度密度离心，使各类分子量的颗粒得以分离，也可以采用梯度柱的形式分离。
超速离心分离或梯度密度离心仅适用于少数大分子抗原及一些比重较轻的抗原，而不适用于大多数中、小分子抗原。
（三）选择沉淀法选择沉淀法是采用各种沉淀剂或某些条件使抗原成分沉淀的方法。
核酸去除法：可采用氯化锰、硫酸鱼精蛋白等核酸提取沉淀剂，而核糖核酸降解法更简便（采用或酶）；2盐.析沉淀法：常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩；3有.机溶剂沉淀法：常采用乙醇或丙酮；水溶性非离子型聚合物沉淀法：常用非离子型聚合物为分子量为〜的聚乙二醇（）G （四）凝胶过滤法又称分子筛层析。
通过凝胶分子筛作用，可将大、中、小三类分子分开，选择凝胶柱时应注意选用适于分离范围内的凝胶。
（五）离子交换层析法离子交换层析是利用一些带电离子基团的凝胶或纤维素，吸附带有相反电荷的蛋白质抗原。
常用的离子交换剂有：1.具有离子交换基团的纤维素。
2具.有离子交换基团的交联葡萄糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺。
3.被覆以离子化物质的细粉。
4.凝胶合成的高度交联树脂。
（六）亲和层析法亲和层析是利用生物分子间所具有的专一性亲和力而设计的层析技术。
如抗原和抗体、酶和酶抑制物、酶蛋白和辅酶、激素和受体、和等之间有特殊亲和力，一定条件下，两者可紧密结合成复合物，如将复合物的一方固定于固相载体上，则可从溶液中分离和提纯另一方。
亲和层析支持物的选择：常用的有琼脂糖珠（a、、）、琼脂糖、聚丙乙烯酰胺、多孔玻璃球等。
2配.体的选择：配体指具有亲和力的双方，或与受体特异性结合的结构物，作为免疫亲和层析则为抗原和抗体的同义语。