培养基的配制说课稿
模块二 培养基的配制
3.有机化合物
a.碳水化合物 选用种类:蔗糖(或葡萄糖、果糖)等。 蔗糖浓度:2-3%,胚培养为4-15% 高压灭菌部分糖会分解。 大生产时可用白砂糖。
b.维 生 素
种类: VB1、 VB6、 VB3、Vc 浓度:0.1-1.0mg/L 作用:
VB1 [盐酸硫胺素] 促愈伤组织产生,提 高活力。
第一节 培养基的种类
一、培养基的种类
培养基有几十种,根据不同植物和部 位选用不同的培养基。
培养基的产生最早是Knop(1681), 以后根据不同目的进行改良产生了多种培 养基。White培养基在40年代用得较多,现 在还常用。而到60和70年代则大多采用MS 等高浓度培养基,可以保证培养材料对营 养的需要,并能生长快、分化快,且由于 浓度高,在配制、消毒过程中某些成分有 些出入,也不致影响培养基的离子平衡。
第一节 培养基的种类
培养基是植物组织培养的重要基质。 在离体培养条件下,不同种植物的组织对 营养有不同的要求,甚至同一种植物不同 部位的组织对营养的要求也不相同,只有 满足了它们各自的特殊要求,它们才能很 好地生长。因此,没有一种培养基能够适 合一切类型的植物组织或器官,在建立一 项新的培养系统时,首先必须找到一合适 的培养基,培养才有可能成功。
(3)细胞分裂素(CTK) A.种类:6-BA KT ZT B.作用:诱导不定芽分化和茎、苗增殖。 C.浓度:0.05-10 mg/mL
5.培养体支持材料
1.琼脂 A.用量6-10g/L B.新买应试凝固力 C.使用优缺点
2.其它 玻璃纤维用种类:青霉素、链霉素、庆大霉素等 B.用量:5~20% C.注意:抗生素对组织生长有抑制作用,使 用要慎重
作用:是蛋白质的组分; 促进器官增殖; 可作有机氮源。
培养基的配制高中生物教案
培养基的配制高中生物教案
目标:学生能够了解培养基的概念和作用,掌握常见培养基的配制方法。
教学重点:培养基的组成和配制方法。
教学难点:掌握不同培养基的配制要点。
教学准备:实验室用具、所需试剂、培养基配制方案、培养基配制步骤等。
教学过程:
一、导入 (5分钟)
通过图片或视频展示不同类型的培养基,引起学生的兴趣,引出培养基的作用和重要性。
二、讲解培养基的概念和分类 (10分钟)
1.介绍培养基的定义和作用。
2.讲解培养基的分类,如固体培养基、液体培养基等。
三、分组讨论培养基的配制方法 (15分钟)
1.将学生分成小组,每组分配一种培养基配制方案,让他们讨论并总结出配制要点。
2.组内学生互相讨论,解决问题,确保每位学生都掌握了配制方法。
四、实验操作 (30分钟)
1.学生按照所分配的配制方案,准备所需试剂和材料。
2.学生根据配制步骤操作,并观察结果,记录实验过程。
五、讨论与总结 (10分钟)
1.带领学生讨论实验中的问题和收获。
2.总结不同培养基的特点和配制要点。
六、作业布置 (5分钟)
要求学生回家复习课堂内容,准备下节课的学习任务。
七、教学反思 (5分钟)
对本节课的教学过程进行反思,总结教学亮点和不足之处,为下节课的教学做准备。
实验教案 培养基的制备
实验一培养基的制备一目的要求1 明确培养基的配制原理2 通过对基础培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤二基本原理不同培养基中含有不同的微生物生长所需要的营养物质,其可供微生物生长繁殖用,为微生物提供C源、能源、N源和维生素。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96度溶化,实际应用时,一般在沸水中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免烧焦,琼脂在40度时凝固,通常不被微生物分解利用,固体培养基中琼脂含量根据琼脂的质量和气温的不同有所不同。
牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏:3.0g,蛋白胨10.0g,NACl5.0g,水1000ml,pH 7.2-7.4.马铃薯培养基是霉菌的基本培养基,培养基配方如下:马铃薯100g 蔗糖10g 琼脂10g 水500ml pH 自然三器材:1试剂或溶液:马铃薯、蔗糖、琼脂、蒸馏水。
2仪器或其它用具:试管、三角瓶、烧杯、玻璃棒、天平、牛角勺,纱布、麻绳、牛皮纸、高压灭菌锅四操作步骤1称量:依次称取马铃薯块、蔗糖、,切碎的琼脂放入三角瓶中并加入500ml蒸馏水2 把三角瓶放入锅中,锅盖好后放在电热炉上加热,等琼脂溶解后取出三角瓶3过滤:趁热用多层纱布过滤,去除里面的杂质4分装:将配制好的培养基分装入试管。
5加塞:分装完后在试管口塞上塞子,以阻止外界微生物进入培养基造成污染,并保证有良好的勇气性能。
6包扎:用牛皮纸再包扎瓶口,以防灭菌时弄湿棉塞。
7灭菌:用高压蒸汽锅在0.1MP下灭菌20min8搁置斜面:趁热将试管里的培养基斜面,注意斜面的长度大约为试管长度的1/29无菌检查五:注意事项1培养基配制后,必须立即灭菌2分装过程中,注意不要使培养基沾在管口上,以免沾在塞子上而引起污染实验二革兰氏染色法一目的要求1学习并初步掌握革兰氏染色法2了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性二基本原理革兰氏染色法是1884年丹麦病理学家christain Gram 创立的而后作了些改进,革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。
实验一培养基的配制
实验一培养基的配制实验一培养基的配制实验目的1. 明确培养基的配制原理。
2. 掌握配制培养基的一般方法和步骤。
实验内容学习细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物培养基的配制。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
各类微生物对营养的要求不尽相同,因而培养基的种类繁多。
培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基,培养放线菌常用高氏I号培养基,培养霉菌常用蔡氏培养基或马铃薯培养基,培养酵母菌常用麦芽汁培养基或马铃薯葡萄糖培养基。
另外还有固体、液体、加富、选择、鉴别等培养基之分。
在这些培养基中,就营养物质而言,一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。
琼脂只是固体培养基的支持物,一般不为微生物所利用。
它在96℃以上熔化成液体,而在45℃左右开始凝固成固体。
在配制培养基时,根据各类微生物的特点,就可以配制出适合不同种类微生物生长发育所需要的培养基。
培养基除了满足微生物所必需营养物质外,还要求有一定的酸碱度和渗透压。
霉菌和酵母菌的pH偏酸;细菌、放线菌的pH为微碱性。
所以每次配制培养基时,都要将培养基的pH值调到一定的范围。
牛肉膏蛋白胨培养基配方牛肉膏 3.0 g蛋白胨 10.0gNaCl 5.0g水 1000mLpH 7.4~7.6高氏I号培养基配方可溶性淀粉 20gNaCl 0.5gKNO3 1gK2HPO4·3H2O 0.5gMgSO4·7H2O 0.5gFeSO4·7H2O 0.01g琼脂 15-25g水 1000mLpH 7.4~7.6马铃薯培养基配方马铃薯(去皮) 200g葡萄糖(或蔗糖) 20g琼脂 15~25g水 1000ml自然pH察氏培养基配方蔗糖 30gNaNO3 2gK2HPO4 1gKCl 0.5gMgSO4·7H2O 0.5gFeSO4·7H2O 0.01g琼脂 15~25g蒸馏水 1000ml自然pH实验器材牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂,1mol/LNaOH, 1mol/LHCl,KNO3,K2HPO4·3H2O,MgSO4·7H2O,FeS04·7H2O,马铃薯,蔗糖等。
培养基配制教学设计方案
一、教学目标1. 知识目标:- 了解培养基的基本组成及其在微生物培养中的作用。
- 掌握培养基配制的步骤和方法。
- 熟悉不同类型培养基的特点和应用。
2. 能力目标:- 能够独立完成培养基的配制过程。
- 能够根据实验需求选择合适的培养基配方。
- 培养实验操作技能和实验室安全意识。
3. 情感目标:- 培养学生对微生物学的兴趣和好奇心。
- 增强学生的团队协作能力和责任感。
- 增强学生的科学素养和严谨的科研态度。
二、教学对象本教学设计方案适用于生物学、微生物学等相关专业的本科生。
三、教学内容1. 培养基的基本组成:- 营养成分:碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。
- 添加剂:指示剂、抗生素、抑制剂等。
2. 培养基的配制步骤:- 原料准备:称量、溶解、灭菌。
- 配制方法:液体培养基的配制、固体培养基的制备。
- 分装与灭菌:分装、封口、高压灭菌。
3. 常见培养基的类型及其应用:- 选择培养基:用于分离和纯化特定微生物。
- 培养基:用于培养和保存微生物。
- 差异培养基:用于观察微生物的特定特征。
四、教学过程1. 理论教学:- 讲解培养基的基本组成、配制步骤和常见类型。
- 通过PPT、视频等多媒体手段展示培养基配制的实际操作。
2. 实验教学:- 学生分组进行培养基配制实验。
- 教师现场指导,解答学生疑问。
- 学生独立完成培养基配制,包括原料准备、溶解、灭菌、分装与封口等步骤。
3. 课后作业:- 完成实验报告,包括实验目的、原理、步骤、结果和分析。
- 撰写实验总结,反思实验过程中的问题及改进措施。
五、教学评价1. 课堂表现:学生的出勤率、参与度、提问积极性等。
2. 实验操作:学生的实验技能、操作规范性、实验结果等。
3. 作业完成情况:实验报告的质量、实验总结的深度等。
六、教学资源1. 教材和参考书籍:《微生物学》、《微生物实验技术》等。
2. 实验室设备:天平、高压灭菌器、移液器、培养皿、试管等。
3. 多媒体资源:PPT、视频、实验操作指南等。
培养基的配制和灭菌-北师大版选修1生物技术实践教案
培养基的配制和灭菌-北师大版选修1 生物技术实践教案一、实验目的1.学会培养基的配制方法和操作技巧。
2.掌握灭菌技术的方法和注意事项。
3.确认所制备培养基的菌落计数和纯度。
二、实验设备和材料设备•输液器架•移液器和吸头•称量器和量筒•灭菌器•干燥器•培养皿•培养箱材料•营养琼脂•十进制稀释液•生理盐水•蒸馏水•双氧水三、实验步骤1. 营养琼脂的配制1.称取所需量的营养琼脂,加入适量的蒸馏水。
2.用称量器和量筒将混合物搅拌均匀,加热至溶解,约10-15分钟。
3.在灭菌器中灭菌,灭菌温度为121℃,时间约20分钟。
4.取出灭菌器中的营养琼脂,放置于输液器架上,待温度降至约50℃时加入适量的可生长菌液体。
2. 十进制稀释液的配制1.取出所需的十进制稀释液(通常为1ml),加入9ml生理盐水,充分混合后得到以1:10(体积比)稀释的液体。
2.逐步重复以上步骤,分别得到以1:100、1:1000、1:10000等稀释液。
3. 灭菌器的操作1.将培养基和十进制稀释液放入培养皿中。
2.放置于灭菌器中,灭菌温度为121℃,时间约15-20分钟。
3.灭菌后取出,待皿内培养基呈凝固状态时即可使用。
4. 培养基的陈放和保存1.待培养基凝固后,放置于干燥器中,以去除表面的水份。
2.将培养基放入冰箱中保存,避免因沾染杂菌而失去良好的生长环境。
3.不使用时,要记得将培养基与外界隔离,避免细菌的污染。
四、实验注意事项1.培养基配制和灭菌操作必须严格按照以上步骤实施。
2.用于配制培养基的水和其他材料必须是高纯度、无菌的。
3.灭菌器操作时,应注意排放蒸汽防止炸裂发生。
4.实验前需要对实验室进行清洁、消毒和准备操作所需的设备、材料和试剂。
5.操作过程中要注意安全,保护好眼睛、手部等关键部位。
6.实验过程中的仪器、器材和培养基需要严密地保存和处理,避免出现污染。
7.实验结束后要及时清理实验室、设备和材料,做好标记和密封保护。
五、实验结果及评价通过本次实验,可以掌握培养基的配制方法和操作技巧,熟练掌握灭菌技术的方法和注意事项,无需依赖外部资源即可制备出优质的培养基。
培养基的配制-PPT
摆斜面:
◇ 成扎摆放,不需将每支试管单独摆放 ◇ 最好待培养基冷至60℃时摆斜面,以免形 成大量冷凝水
无菌检查:
将灭菌的培养基放在37℃温箱中培养24-48小 时,以检查灭菌是否彻底。
二 消毒与灭菌
实验目的
1、了解掌握常用消毒、灭菌方法的原理。 2、学习掌握干热灭菌和压力蒸汽灭菌操作步骤。
实验原理 干热法
压力蒸汽灭菌
实验内容及实验步骤 (continued)
1、检查水位,放入物品。
2、加盖、拧紧 对称用力 3、加热升温 4、排冷空气 等压力升至0.5kg/cm2时,打开排气 阀,排净冷空气。
5、升温、保压 等锅内压力升至所需数值(通常为
1.03kg/cm2),保持压力20-30分钟。
6、降压、取物
硝酸钾
1g
磷酸氢二钾 0.5 g
NaCl
0.5 g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁 0.01克
琼脂
15-20g
水
ml
pH
7.2-7.4
马铃薯蔗糖琼脂培养基:
把马铃薯洗净去皮,取200克切成小 块,加水1000毫升,煮沸半小时后, 补足水分。在滤液中加入15克琼脂, 煮沸溶解后加蔗糖20克补足水分 pH值调到7.2~7.4
99 mL无菌水 装三角瓶 6 瓶 9 mL无菌水 试管装 12 支 1 mL 吸管 15 支 牛肉膏蛋白胨固体培养基 斜面 5支
牛肉膏蛋白胨培养基配方:
牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 pH
3g 10g 5g 15-20g 1000ml 7.4-7.6
淀粉琼脂培养基(高氏培养基) :
可溶性淀粉 20 g
分装:
操作步骤 (continued)
培养基的配制及倒平板——教学设计
培养基的配制及倒平板
教学目标:
了解培养基的配方;学会配制培养基;学会倒平板。
教学重难点:
根据不同需求配制不同培养基;学会倒平板的操作。
教学内容:
一.制备培养基
1.配制培养基
称取去皮的马铃薯200g,切成小块,加水1000mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。
向滤液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15-20g琼脂用蒸馏水定容至1000mL。
加琼脂的目的是什么?作为凝固剂
2、灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100 kPa、温度为1219C的条件下,灭菌15-30 min。
将5-8套培养皿包成一包用几层牛皮纸包紧,放入干热灭菌箱内,在160-170°C灭菌2h。
注意:(1)调pH:pH7.6(用0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液把培养基调节到所要求的值)
(2)分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。
分装三角瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么?在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。
3.倒平板待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。
二、无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。
如果有菌落生长,说明培养基已被污染。
植物组织培养教学设计
植物组织培养教学设计引言概述:植物组织培养是一种重要的生物技术方法,通过对植物组织进行体外培养,可以实现植物的繁殖、育种和基因改良等目的。
本文将介绍一种植物组织培养的教学设计,旨在帮助学生掌握植物组织培养的基本原理和操作技术。
一、培养基的配制1.1 培养基的种类植物组织培养中常用的培养基有MS培养基、B5培养基等。
学生需要了解各种培养基的成分和用途,以便选择适合的培养基进行实验。
1.2 培养基的配制方法学生需要学习培养基的配制方法,包括固体培养基和液体培养基的配制。
注意培养基的成分和比例,以及消毒和pH调节的步骤。
1.3 培养基的贮存和保存学生需要了解培养基的贮存和保存方法,包括冷藏和冷冻保存的步骤和条件。
同时,还需要学习培养基的有效期和使用注意事项,以保证培养基的质量和效果。
二、组织材料的准备2.1 植物材料的选择学生需要了解植物组织培养中常用的组织材料,如茎段、叶片、种子等。
同时,还需要学习如何选择健康、无病害的植物材料,以确保培养的成功率。
2.2 组织材料的处理学生需要学习组织材料的处理方法,包括消毒、切割和分离等步骤。
注意消毒的时间和温度,以及操作的无菌条件,以避免外源性污染。
学生需要学习组织材料的接种方法,包括茎段的切口接种、叶片的背面接种等。
同时,还需要了解接种后的培养条件,如光照、温度和湿度等,以促进组织的生长和分化。
三、培养条件的控制3.1 光照条件的控制学生需要了解植物组织培养中光照条件的重要性,以及不同植物材料对光照要求的差异。
同时,还需要学习光照强度、光照周期和光照质量的控制方法。
3.2 温度条件的控制学生需要学习植物组织培养中温度条件的控制方法,包括培养室的温度调节和培养器的温度控制。
同时,还需要了解不同植物材料对温度的适应性和要求。
3.3 湿度条件的控制学生需要了解植物组织培养中湿度条件的重要性,以及不同植物材料对湿度要求的差异。
同时,还需要学习湿度的控制方法,如培养器的密封和加湿等。
第二章培养基配置PPT课件
(2)细胞分裂素类(cytokinin,CTK)
✓ 腺嘌吟的衍生物,包括6-BA、Kt、Zt 等。其中Zt活 性最强,但非常昂贵,常用的是6-BA。
• 6—BA(6—苄基腺嘌呤) Kt (kinetin 激动素) • Zt (zeatin 玉米素) ✓ 作用:
• 诱导芽的分化 • 促进侧芽萌发生长 • 促进细胞分裂与扩大(茎增粗),抑制根的分化,延缓
成分大多不清楚,一般尽量避免使用。
➢ 椰乳 使用最多、效果最大。用量为10%—20%(愈伤、细胞培养)。
➢ 香蕉汁 用量为150-200ml/L,缓冲pH值(兰花组培)。
➢ 马铃薯 用量为150—200g/L,缓冲pH值。
➢ 其他 酵母提取液、麦芽提取液、苹果和番茄的果汁等。遇热较稳定,
大多在培养困难时使用,有时有效。
第二章 培养基及其配制
定义:
培养基(culture medium)——根据植物生长所需 营养成分,配制成的供植物生长的人工制作的营养物 质。是植物组织培养的重要基质。
•不同植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一种植物不同部 位的组织对营养的要求也不相同 •没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官 •找到一合适的培养基,是培养成功的基础。
• (2)活性炭(active carbon) 目的:是利用其吸附能力,减少一些有毒物质的影响; 利于生根。
• 使用浓度:1—5g/L。
• 它的颗粒大小决定着吸附能力:粒度越小,吸附能力越 大;温度低吸附力强,温度高吸附力减弱,甚至不吸附。
优点:操作简便,通气问题易解决,便于观察研究。 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各
(1)糖类(碳水化合物 )
碳源,维持培养基的渗透压在1.5-4.1MPa。多使 用蔗糖。
精品课程项目三培养基的配制咸宁职业技术学院上课讲义
2,4-D可用少量0.1mol/L的NaOH溶解后,再加水定 容。
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2、植物生长调节物质的配制
KT和BA先溶于少量0.1mol/L的HCI中再加水定容。 玉米素先溶于少量95%的酒精中,再加热水到一
定浓度。
3、药品用量的计算
• 配制母液时药品用量(mg)=配方用量(mg)×浓缩 倍数×制备容量(L)
成100—200倍鳌合剂不易沉淀。 • (4)有机化合物 • 维生素、肌醇、氨基酸等一起配成100或200倍液
,也可分别配制。
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2、植物生长调节物质的配制
植物生长调节物质分别配成母液储于冰箱,浓度一 般为0.5-1mg/ml。
IAA、IBA、GA等先溶于少量的95%的酒精中,再加 水定容。
• 1、营养成分的配制
• 根据药品性质将母液配制成以下四类:
• (1)大量元素
•
可以混在一起配制成10—20倍液,注意离子
之间沉淀,如Ca2+和S042-,Ca2+、Mg2+和PO43-一起 溶解后,会产生沉淀,一定要分别单独配制充分
溶解再放入母液中。
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1、营养成分的配制
• (2)微量元素 • 可配成100—200倍混合母液。 • (3)铁盐 • 硫酸亚铁和EDTA钠盐易沉淀,需单独配制,配
用量:6-10g/L 种类:琼脂粉 琼脂条 作用:固化作用
其它
玻璃纤维、滤纸桥、海绵等。
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5、辅助性物质
抗生素:防止外植体内生菌造成的污染。 抗氧化物:防止氧化。 活性炭:吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物 质;抑制外植体褐变;防止玻璃苗的产生;促进 培养物生长和分化;促进生根。
培养基成分及配制课件
2
硼酸
3
硫酸锰
4
硫酸锌
5
钼酸钠
6
硫酸铜
7
氯化钾
KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCL2.6H2O
用量(mg/L)
0.83 6.2 22.3 8.6 0.25 0.025 0.025
培养基成分及配制课件
1.大量元素
2021/8/25 培养基成分及配制课件
29
2021/8/25 培养基成分及配制课件
3. 肌醇(环己六醇)
促进糖类物质的相互转化和活性物质作用的发挥 促进愈伤组织生长以及胚状体和芽的形成 对组织细胞繁殖、分化的促进作用 使用浓度100 mg/L
注:用量过多则促褐变
30
2021/8/25 培养基成分及配制课件
4. 氨基酸
是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。 培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸,其他的如精氨酸、
在离体培养条件下,不同种植物的组织对营养有不 同的要求,甚至同一种植物不同部位的组织对营养 的要求也不相同,只有满足了它们各自的特殊要求, 它们才能很好地生长。因此,没有一种培养基能够 适合一切类型的植物组织或器官。
3
2021/8/25 培养基成分及配制课件
在建立一项新的培养系统时,首先必须找 到一合适的培养基,培养才有可能成功。在植 物组织培养历史进程中,事实上也紧密地伴随 着培养基的研制史。
谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常 用。
31
2021/8/25 培养基成分及配制课件
5. 天然复合物
为了特殊的培养目的,在一部分培养基中还添加了 一些特殊成分,如水解酪蛋白,水解乳蛋白,酵母提取 物,胰蛋白胨,椰乳,西红柿汁,香蕉粉,橘子汁,可 可汁等天然复合物以及活性炭,渗透调节剂等。
常用培养基的配置课件
培养基的优化与改进
优化培养基的成分
通过调整培养基中的营养成分、激素、生长因子等成分,提高细胞的生长速度、存活率和 功能。
优化培养基的pH值和气体环境
适当的pH值和气体环境(如氧气和二氧化碳浓度)对细胞的生长和分化至关重要,因此 需要针对不同细胞类型进行优化。
优化培养基的成本
降低培养基的成本是优化的重要方向之一,通过选择廉价的替代成分或提高培养基的利用 率,可以降低实验成本。
了解培养基的配方
熟悉培养基所需的成分和浓度, 确保准确配制。
01
02
清洁和消毒
03
确保所有使用的器具都经过清洁 和消毒,以避免污染。
04
准备所需试剂和器材
根据培养基配方,准备所需的各 种试剂和器材,如玻璃器皿、称 量纸、天平、量筒等。
校准仪器
确保使用的天平、量筒等计量工 具准确无误,以避免误差。
配置步骤
计算所需各成分的量
根据培养基配方,计算出所需 的各成分的量。
称量和溶解
使用天平准确称量各成分,并 加入适量的水或其他溶剂进行 溶解。
调节PH值
使用酸或碱调节培养基的PH值 ,确保符合要求。
灭菌
将配置好的培养基进行灭菌处 理,以杀死其中的微生物。
配置注意事项
01
注意安全
在配置过程中,要注 意安全,避免直接接 触化学试剂或高温液 体。
培养基的作用
为微生物提供适宜的生长环境, 支持其生长繁殖,并促进其表现 出特定的生理生化特征。
培养基的分类
根据用途分类
根据培养基的用途,可分为选择培养 基、鉴别培养基、计数培养基等。
根据成分分类
根据培养基的成分,可分为天然培养 基、合成培养基和半合成培养基。
实验二 培养基的配制与灭菌
实验二培养基的配制与灭菌实验教学课题:实验二培养基的配制与灭菌实验教学目的:1学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤2学会实验室灭菌锅的使用方法实验教学重点:不同培养基的配制方法及步骤。
实验教学难点:微量元素的添加。
实验用品:1 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、琼脂、葡萄糖、等2 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布。
3 灭菌锅实验教学方法与手段:板书讲解+演示实验+学生动手实验教学课时:4课时教学过程:一、实验方法(一)牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如下:牛肉膏3g,蛋白胨10g.NaCl5g,琼脂15-20g,水1000mL,pH7.4-7.6。
1称药品:按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。
牛肉膏(酵母膏)可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放人热水中,牛肉膏便与称量纸分离,立即取出纸片。
蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。
2加热溶解:在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入已溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失的水分。
3调PH:检测培养基的PH,若pH偏酸,可滴加1滴1mol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围。
若偏碱,则用1mol/L HCl进行调节。
pH的调节通常放在加琼脂前。
应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
4过滤:液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利结果的观察。
5分装:按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免培养基沾在管口或瓶口上面造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面。
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《培养基配制》说课稿各位领导、老师好:今天我说课的题目是:培养基的配制。
下面我将从八个角度来谈谈我今天的说课,它们分别是:教材分析、学情分析、目标定位、教学重难点、教学分析、学法分析、教学过程和总结。
首先谈谈我对教材的理解:一、教材分析培养基的配制这一节课是选自北邮出版社出版的《微生物检验技术》教材项目六中的任务三,这门课是制药技术专业的专业核心课程,是连接基础课和专业课之间的桥梁。
从教材的前后关联来看,学生们已经学习了微生物形态类群、常用器皿的清洗包扎、相关设备的使用等,这为过渡到本课题的学习起到了铺垫的作用;同时,本节课的理论、实践也为今后的课题打下了“物质”基础,所以,它在整个教材中起着承前启后的作用。
二、学情分析备课不仅要背教材还要备学生,我所教授的是职业中专二年级的学生,大多来自农村,由于长久的价值观念使然,中专学生一般由基础薄弱、学习态度不端正的弱势群体组成,他们很少得到赏识,缺乏自信。
鉴于此,课上我会多对学生进行鼓励,提高自信,使其找到课堂归属感;同时,较于乏味的理论知识讲解,中专学生乐于动手操作练习,所以我采取以项目任务引领的项目教学法开展教学活动,老师在做中教、学生在做中学,提高学生的专注力。
三、目标定位根据本教材的结构和内容分析,结合着二年级学生他们的认知结构及其心理特征,同时本着以人为本,以服务为宗旨,我侧重体现实用性和实践性,使理论与实践相结合,着重培养学生的应用能力,引导学生重点掌握课程的基础理论知识,又注重实践技能的培养,以满足职业岗位能力需要,同时还考虑到与其他课程之间的联系与分工,尽量做到在内容上不重复,在知识上不脱节;因此,我制定了以下的三级目标:(一)能力目标:1.能够依据培养基配方,准确熟练计算出配制培养基所需的材料;2.能够准确熟练配制培养基;能够准确完成分装和灭菌工作;3.树立无菌操作意识。
(二)知识目标:1.掌握所需培养基成分计算公式;2.掌握不同培养基的配制方法、流程及注意点;(三)情感目标:1.培养学生严谨的科学态度和实事求是的作风;2.培养责任心、团队精神和竞争意识,提高观察、操作、分析问题和解决问题的能力,培养学生勤俭节约、爱护公物和相互协作的良好作风,同时为进一步学习后续的专业知识打下良好的基础。
四、教学重难点下面谈谈我对教学重难点的把握。
本着我校对项目化教学课程的要求,根据《微生物检验技术》课程标准,重在做中教,做中学,在熟悉了解教材的基础上,我确定教学重难点如下:(一)教学重点:(1)培养基的配制流程及技能操作技巧;(2)培养基的分装技术以及棉塞制作与包扎;重点的划分依据是只有掌握了这些知识与技能,才能为学习微生物限度检测打下良好的技能基础。
(二)教学难点:培养基的配制流程及技能操作技巧。
难点的依据是:学生没有这方面的基础知识,所以操作起来比较困难。
为了讲清教材的重难点,使学生能够达到本课题设定的教学目标,在教法、学法上我是这样安排的,作为一名青年教师,不足的地方希望各位老师、领导能给我帮助。
五、教法分析我们都知道微生物检验技术是一门重在培养学生操作能力的学科。
因此,在教学过程中,不仅要使学生掌握理论知识,还要使学生熟练掌握操作技能。
在以学生学为主,以师导为辅的原则下,展现获取理论知识、操作技能、解决实际问题的思维过程。
所以我采取以下教学方法来突出重点,突破难点。
1、多媒体的直观教学法:利用大量的图片、视频、课件等手段进行直观演示,激发学生的学习兴趣,活跃课堂气氛,促进学生对知识的掌握,力求从配制流程、规范操作等方面讲清概念,突出该课程的重点、难点。
2、活动探究法:通过创设情境的活动形式引导学生获取知识,让学生积极主动地参与到教学活动中来,以学生为主体,引导学生积极主动参加技能操作的训练,使学生的独立探索性得到了充分的发挥,培养学生的自觉能力、操作能力、活动组织能力。
从而从群体上讲清概念、理顺脉络、阐述规律;实训中还要注重学生动手能力的训练和提高观察、分析及处理问题的素质。
当然老师自身也是非常重要的教学资源。
教师本人应该通过课堂教学感染和激励学生,调动起学生参与活动的积极性,激发学生对解决实际问题的渴望,并且要培养学生以理论联系实际的能力,从而达到最佳的教学效果。
3.集体讨论法:通过学生的组内互测,组间竞赛培养学生自己发现问题的能力,针对学生出现的问题,组织学生进行集体和分组讨论,促使学生在学习中解决问题,培养学生团结协作的精神。
由于对本课题内容具有了直观的感受,可以让学生自己阅读课本并思考,在老师的指导下进行讨论,然后进行归纳总结,得出正确的结论。
这样有利于调动学生的积极性,发挥学生的主体作用,让学生对任务的认知更清晰、更深刻。
六、学法分析在教学过程中特别重视学法的指导。
让学生从机械的“学答”向“学问”转变,从“学会”向“会学”转变,真正成为学习的主人。
这节课在指导学生的学习方法和培养学生的操作能力方面主要采取以下方法:目标明确法、分析归纳法、以赛促练法、自主探究法、总结反思法。
最后我具体来谈谈这一堂课的教学过程。
七、教学过程本节课我将花2个课时分几个环节来进行教学设计,第一个环节是,在这节课的教学过程中,注重突出重点,条理清晰,紧凑合理的安排各项活动同时也注重互动、交流,最大限度的调动学生参与课堂的积极性、主动性。
1、课前准备:这次课之前我做了大量的准备实验材料的准备:牛肉浸出粉、蛋白胨、氯化钠、水、1mol/L的NaOH和同浓度的盐酸溶液、广泛pH试纸等。
实验器材的准备:天平、电磁炉、石棉网、酒精灯、锅、刀、烧杯、玻璃棒、铁架台、漏斗、止水夹、橡胶管、试管、纱布、棉花、线绳、牛皮纸等我是请六个小组的组长来协助准备,在准备的同时我会教他们这些仪器的规范操作,这样在正在进入课堂的时候,他们就会督促他们的组员操作的规范性。
2.导入新课:(2~3分钟)同学们,我们在任务二中学习到,无论是工业上的菌种选育,发酵生产,还是是药物的微生物限度检查,首先都要对微生物进行人工培养,而为微生物提供营养的就是培养基。
所以,培养基质量的好坏在很大程度上决定了实验结果是否准确,那么这节课,我们就以配制营养肉汤培养基为例来学习如何配制供微生物培养、检测使用的培养基。
目的:使学生认识到微生物生产、检验首先需要培养基,知道培养基的重要性。
2、讲授新课:在讲授新课的过程中,根据教材的特点,学生的实际情况,以及教学设备的情况我选择了多媒体的教学手段,在多媒体上先演示,突出教材的重点,明了地分析教材的难点。
这样可以使一些必要的知识可视化,枯燥的知识生动化,乏味的知识兴趣华。
还重视教材中的疑问,适当对某些知识点进行引申,从而让学生自己总结该课程的注意点,使它的作用更加突出,有利于学生对知识的串联、积累、加工,从而达到举一反三的效果。
步骤教师活动学生活动目的效果分析微生物靠什么来生长呢?是如何吸收的呢?吸收营养,靠整个细胞表面吸收提问,逐步引入任务。
以学生学过的知培养基的制作现在我们知道营养肉汤培养基的原料了,我们也知道用具了,那么我们应该怎样一步一步的来制作呢?最后老师总结,学生会有考虑不周全的,我会以问题的形式提出,让他们修改根据书上的1000ml的配方,让每组学生分别计算配制200、400、500、600、700、800ml的培养基说需要的原料的量,然后给每组打分同学分组讨论,进行设计,最好让代表回答;然后每组在进行互评,说出对方的优点和缺点:称量→溶解→调pH→过滤澄清→分装→加塞、包装→灭菌学生分组计算,给出答案例如500ml培养基需要的材料:牛肉浸出粉 1.5g、蛋白胨 5g、氯化钠 2.5g;培养学生自己思考、设计,并能联系实际解决问题的能力,和善于比较改正的习惯以赛促练,调动学生的积极性,增强团队精神讨论那么配制培养基需要那些要素呢?如果现在我们要配制培养基我们需要哪些仪器与用具呢?现在我们要配制营养肉汤养基,我们需要什么材料?教材中有实验配方制作培养基的六大要素:C、N、能量、生长因子、水、无机盐学生看书讨论,让代表回答:天平、电磁炉、石棉网、酒精灯、锅、刀、烧杯、玻璃棒、铁架台、漏斗、止水夹、橡胶管、试管、纱布、棉花、线绳、牛皮纸等学生查书进行回答:牛肉浸出粉、蛋白胨、氯化钠、水识经验为基础,循序渐进。
自己去思考想象会记忆清楚,甚至会考虑哪一步用什么仪器让学生充学会分的利用书上的资源,这样逐步引入任务然后老师会统一给出一个任务,配制500ml营养培养基,然后分组发放材料,让学生自己做实验前的材料称量、溶解、调pH 及过滤澄清。
利用培养基冷却等待的时间,每组拿出铁架台、分装漏斗、试管来练习分装技术水 500ml;小组自主确定行动方案和组内同学分工老师会巡回检查,个别指导,加强学生的互动观察教师的示范动作,思考如何做才能达到技能要求,学生取水代替培养基来练习,要注意分装时不能粘到试管口,分装的高度等锻炼学生的动手能力,培养学生的集体精神规范学生的操作锻炼学生的团体合作的责任感增强学生“做好”的自信心;使学生规范、准确进行操作,让学生能熟悉掌握培养基的分装技能组内互测等过滤澄清做好以后,让学生进行下一步操作,加强教学互动,老师巡回指导,检查,个别指导学生讲配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中,120℃,灭菌30min。
每一个单项技能(分装培养基,扎瓶口并作标注培养基名称、组别、日期、灭菌)反复强化训练,在组内进行互测通过组内的比赛,互相指正、训练、从而提高学生的操作技能组间比赛赛:组织学生进行组间竞赛:哪一组操作规范,做的结果优秀?组间进行比赛:每组派1-3人参加比赛以赛促练,使学生熟悉培养基配制流程,增强学生合作意识,增强学生的集体荣誉感分析讨论评:安排组内讨论操作及比赛中存在的问题及改进措施,并总结经验教训。
评:分组讨论在操作和比赛中存在的问题,分析产生的原因及改进措施使学生不仅知道怎么做,还要知道为什么这样做;再次掌握技能操作的要点及要求,为完成下面的任务储备必要的理论与技能知识。
绩效评价教师从1、学生操作规范性、准确度及速度;2、是否达到技能要求;3、培养基质量;4、组内协作情况;四个方面对每组进行绩效评价学生进行组内互评;组间互评;使学生了解自己的操作与技能要求的差距,明白操作规范、准确、熟练的重要性3.课堂小结:课堂小结的目的是强化认识、规范操作意识,可以把课堂传授的知识尽快地转化为学生的素质;简单扼要的课堂小结,可使学生更深刻地理解培养基配制的理论在实际生活中的应用,并且逐渐地培养学生形成动手操作的良好个性。
总总结教师对本次教学活动进行小结并填写学生成绩考核表。
强调本次教学的重点内容,对做得好的学生和实训小组提出表扬。
学生总结本次学习情况,主要是已经学会了那些知识与技能,那些知识与技能还需要继续学习与巩固。