2测微尺
微生物大小的测定及显微镜直接计数法
微生物大小的测定及显微镜直接计数法微生物的大小测定与显微计数生32 程雨婧 2013012406一、实验目的1. 学习并掌握使用显微镜测微尺测定微生物大小的方法。
2. 了解血细胞计数板的构造及计数原理。
3. 掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1. 显微测微尺可用于测量微生物细胞或孢子的大小，包括镜台测微尺和目镜测微尺两个部件。
镜台测微尺全长1mm，等分为100格，每格0.01mm。
用于校正目镜测微尺的长度.目镜测微尺的中央刻有50等分或100等分的小格.测量前应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大镜下,目镜测微尺每小格所代表的实际长度(见图1),再以后作为测量微生物细胞的长度。
2. 球菌用直径表示大小;杆菌用宽和长来表示(μm)图一:测微尺的校正3. 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。
中间较宽的平台，被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区(大方格)分为16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。
计数区由400个小方格组成。
每个大方格边长为1mm，其面2积为lmm，盖上盖玻片后，盖载玻片间的高度为0.1mm，所以每个计数区的体3积为0.1mm。
使用血球计数板计数时，通常测定四或五个中方格的微生物数量，求其平均值，再乘以16或25，就得到一个大方格的总菌数，然后再换算成1毫升菌液中微生物的数量。
设5个中方格中的总菌数为A，菌液稀释倍数B，则: A441mL菌液中的总菌数= ×25×10×B=5×10×A?B (25个中格) 5图二:血细胞计数室构造三、实验器材1. 菌种:啤酒酵母2. 器材:普通光学显微镜、目镜测微尺镜头、镜台测微尺、盖玻片、载玻片、滴管、试管、无菌水、血细胞计数板、计数器、吸管、生理盐水、移液器。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1．活材料：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1．目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
微生物大小测定
微生物的大小测定胡雪芳 201300261033【实验目的】1.了解显微镜测定微生物大小的原理。
2.学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、镜台测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术。
【实验原理】微生物细胞的大小，是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
1.目镜测微尺目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分（如图1所示）。
图1 目镜测微尺测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
2.镜台测微尺镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的（如图2所示）。
图2 镜台测微尺校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
【实验材料】1.菌株酵母菌液，枯草芽孢杆菌斜面培养物2.仪器和用具普通光学显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、酒精灯、吸水纸、擦镜纸、结晶紫染液等。
【实验步骤】1.目镜测微尺的校正（1）把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
2.实验二 微生物细胞计数与显微测量
实验二微生物细胞计数与显微测量一、实验目的与要求1、了解血球计数板结构，掌握血球计数板计数微生物数量的技术。
2、了解目镜测微尺和物镜测微尺，掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术。
二、微生物细胞计数1、血球计数板的结构：4条竖槽和1条横槽；计数室（即正中间的大方格）大小为1mm×1mm×0.1mm；计数室共有400个小格，划分有两种可能：16中格×25小格或25中格×16小格。
菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，因血球计数板较厚，不能使用油镜，故细菌不易看清。
2、血球计数板的使用（1）低倍镜下观察空白的血球计数板，找到计数室，注意应用调光旋钮、聚光镜和光圈调节视野亮度，建议将调光旋钮调到较亮的位置、聚光镜上升、光圈调到较小的位置。
（2）滴加稀释至适宜浓度的样品，盖上特制的盖玻片，静置5-10min. 也可以先盖上盖玻片，再沿槽滴加样品。
以酵母菌为例，以小格内含4-5个酵母菌为宜。
（3）在低倍镜下寻找大方格，将正中间的大方格（即计数室）移至视野正中央，再根据需要换上高倍镜计数。
3、血球计数板的计数方法（1）计数室含25个中格时，取4个角的中格及中间1个中格计数；计数室含16个中格时，取4个角的中格计数。
当样品中的细胞数较少时，应计算所有中格中的细胞。
每个样品须重复计数2-3次。
（实验室现有的血球计数板均为25中格的格式。
）（2）计数时需调节细准焦螺旋，以看到计数室内不同深度的微生物细胞（3）压线的细胞的计数方法：计压左线和上线的细胞或压右线和下线的细胞。
4、计算方法：样品细胞数（个/mL）=每小格的细胞数×400×10000×稀释倍数三、草履虫大小（长*宽）的显微测量1. 目尺和物尺的形态、安装及用途。
注意物尺每一小格代表的实际长度。
2. 标定：两尺平行--记录两尺重合线之间的刻度数--计算标定结果（即某一放大倍数下，目尺一小格代表的实际长度）。
微生物量微生物大小及数量的测定
微生物大小及数量的测定一、实验目的1.学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方法。
2.了解血细胞计数板的构造及计数原理。
3.掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1.微生物大小测定原理微生物细胞的大小是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
其测量工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺是中央部分刻标准刻尺的载玻片，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100小格，每一小格长度为0.01mm，即10μm。
如图1。
图1镜台测微尺中央部分及镜台测微尺校正目镜测微尺目镜测微尺，如图2，是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，一般有等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微放大后的细胞物象。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
图2目镜测微尺2.血球计数板测定微生物数量的原理血细胞计数板是一块特制的载玻片，其上由4条槽构成3个平台。
中间较宽的平台又被一段横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分9个大方格，中间的大方格即为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16小方格（图5-2）；另一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是2400个。
每一个大方格边长为1mm，则每一个大方格的面积为1mm，盖上盖玻片后，盖玻片3与载玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的容积为0.1mm（10-4mL）。
以25个中方格的计数板为例，设5个中方格中的总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则：1mL菌液中的总菌数=A/5×25×10×B图3血球计数板侧面及两种类型的计数室三、实验1.菌种枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)斜面培养物；酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)液体培养基培养物。
微生物大小与数量的测定实验报告
微生物大小与数量的测定实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握使用显微镜测量微生物大小的方法，以及学会运用血球计数板对微生物数量进行测定。
通过实验操作和数据处理，深入了解微生物的形态特征和种群密度，为后续的微生物学研究打下基础。
二、实验原理（一）微生物大小的测定微生物细胞的大小是微生物的基本特征之一。
使用显微镜测微尺可以较为准确地测量微生物细胞的长度、宽度和直径等参数。
显微镜测微尺包括目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形小玻片，上面刻有刻度；镜台测微尺是一块特制的载玻片，中央有精确的刻度，用于校正目镜测微尺。
（二）微生物数量的测定血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的工具。
它由一块特制的厚玻璃片制成，玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台又被一短横槽隔成两半，每半边上面各刻有一个方格网。
方格网上刻有 9 个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成 16 个中方格，而每个中方格又分成 25 个小方格；另一种是一个大方格分成 25 个中方格，而每个中方格又分成 16 个小方格。
但无论哪种规格，每个大方格的边长均为 1 毫米，盖上盖玻片后，计数室的容积是一定的。
因此，在一定体积的菌液中，通过计算微生物在计数室中的数量，就可以换算出菌液中微生物的数量。
三、实验材料与仪器（一）材料枯草芽孢杆菌、酿酒酵母的菌悬液。
（二）仪器显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、盖玻片、滴管、擦镜纸、吸水纸等。
四、实验步骤（一）微生物大小的测定1、安装目镜测微尺将目镜测微尺装入目镜的隔板上，注意有刻度的一面朝下。
2、校正目镜测微尺（1）将镜台测微尺置于载物台上，先用低倍镜观察，找到镜台测微尺的刻度线。
（2）移动镜台测微尺，使镜台测微尺与目镜测微尺的刻度线平行，并使两者的“0”刻度线重合。
（3）换用高倍镜观察，找出两尺再次重合的刻度线。
分别记录目镜测微尺和镜台测微尺在重合线段内各自的格数。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。
测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
2。
器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
测微尺的使用方法
测微尺的使用方法测微尺是一种常用的测量工具，主要用于精确测量物体长度、宽度、深度等尺寸。
它通常由一根可伸缩的尺子和一个可固定尺子的测量头组成。
下面是使用测微尺的一般方法：1.准备工作：在开始测量之前，首先要确保测微尺的尺度清洁和无损坏。
如果尺度有灰尘或污垢，可以用一块软布轻轻擦拭。
同时，确保测微尺的运动部件灵活可动，并且固定尺子能够牢牢固定住。
2.选择合适的尺度：测微尺通常有分米、厘米和毫米的尺度。
根据需要测量的对象，选择适当的尺度。
例如，如果需要测量的物体尺寸为1.5厘米，应该选择毫米的尺度。
3.测量物体的长度：将测微尺的固定尺子靠近物体的一端，使测量头与物体紧密接触。
尽量垂直于测量物体的表面，避免产生误差。
然后，伸缩尺子，直到另一端的尺度与物体的另一端对齐。
读取固定尺子上与伸缩尺子上尺度对应位置的数值，这就是物体的长度。
如果固定尺子上有多个刻度，需要将它们相加得到最终的尺寸。
4.测量物体的宽度：与测量长度的方法类似，首先将测微尺的固定尺子靠近物体的一边，使测量头与物体紧密接触。
然后，通过伸缩尺子移动固定尺子，直到另一边的尺度与物体的另一边对齐。
读取固定尺子上与伸缩尺子上尺度对应位置的数值，这就是物体的宽度。
5.测量物体的深度：要测量物体的深度，首先需要将测微尺置于物体的表面上。
然后，从物体的表面开始，将测微尺的测量头插入物体，直到达到所需的深度。
读取伸缩尺子上与固定尺子尺度对应的数值，这就是物体的深度。
6.注意事项：在使用测微尺时，需要注意以下几点：首先，要保持测微尺的平衡，避免偏斜或倾斜。
其次，读取测量结果时，要注意对准尺度的刻度线，以避免读取错误的数值。
此外，使用测微尺时应轻拿轻放，避免将其弄折或弯曲。
总结：测微尺是一种精确测量长度、宽度、深度等尺寸的工具。
使用它需要先选择合适的尺度，然后将测微尺固定尺子靠近物体，通过伸缩尺子的移动来对齐另一端，最后读取与固定尺子尺度对应的数值。
在使用测微尺时要注意保持平衡、准确读取和轻拿轻放。
测微尺的使用方法
精品课件
(4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。
例如，在10×物镜下，目镜测微尺的10格等长于台式测微 尺的10格，即目镜测微尺每小格的长度为10 m。一般情况下， 当目镜为10×时，若物镜为4×，目镜测微尺每小格的长度为 24 m；若物镜为l0×，目镜测微尺每小格的长度为10 m；若 物镜为40×，目镜测微尺每小格的长度为2.5 m；若物镜为 100×，目镜测微尺每小格的长度为1m。
度：
物微尺格数
• 目10微μ尺m 每格所代表的实际长度=
×
目微尺格数
• 5、将制作的鸭跖草临时装片置于载物台上，测定细胞的
大小（包括长径和短径）。
精品课件
精品课件
精品课件
• (目1镜)取测下微接目尺目镜放镜人测，接旋微目下镜尺目的的镜中上标隔的板定目上透，镜使，有将
刻度一面朝下，再旋上目透镜，并装入镜 筒内。
• (2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上， 使有刻度的一面朝上，同观察标本一样， 使具有刻度的小圆圈位于视野中央。
• (3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物 镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测 微尺的刻度与物镜测微尺的刻度相平行， 并使两尺的左边第一精品条课件 线相重合，再向右
测微尺的使用
精品课件
原理：
采用刻有一定刻度的测微尺来测量，先用绝对长 度的物镜测微尺来校正不表示绝对长度的目镜测微尺， 计算后者每格所代表的实际长度，然后放上待测的标本， 用目镜测微尺测定标本上的结构占目镜测微尺的格数， 就可计算该细胞的大小。
精品课件
测微尺的构造
目镜测微尺 是一块圆形玻片，通常是将5mm 划分为50格，实际每格等于100μm。用前 必须用物镜测微尺来标定。 物镜测微尺 一块特制的载玻片，其中 央有一小圆圈。圆圈内刻有分度，将长1mm 的直线等分为100小格，每小格等于10μm。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺与镜台测微尺的构造与使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小就是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2.器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1.目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数与镜台测微尺的格数。
显微测微尺的使用
显微测微尺的使用
1.准备工作
首先，需要将显微测微尺正确地安装在显微镜上。
将测微头安装在显微镜的视场中心上方，并通过调节螺丝固定好。
然后，将表尺的滑块平行地插入测微头的槽中，并确保能够自由滑动。
2.调节显微镜
将要测量的物体放置在显微镜的平台上，将显微镜调节至合适的放大倍数，以便能够清晰地观察物体的细节。
3.观察测量
通过显微镜观察待测物体，并使用测微尺进行测量。
一般情况下，显微镜的目镜底部会有一个刻度，可以使用它来测量物体的粗略尺寸。
4.使用测微尺测量
调节显微镜的瞄准线与物体一致，滑动表尺滑块使其与物体接触。
然后通过目镜观察，调节显微镜的焦距以使测微尺上的刻度线清晰可见，并且需要观察物体上的两个刻度线完全对齐。
此时，目镜底部的刻度线所指示的数值即为物体的精确尺寸。
5.测量示例
当需要测量对象是平面的时候，可以直接将测微尺平行于物体的边缘进行测量。
当需要测量曲线的尺寸时，可以将测微尺沿着曲线放置，并利用多个位置的测量结果进行平均。
6.测量精度
7.注意事项
在使用显微测微尺时，需要注意以下几点：
-避免用力过大，以防刮伤或损坏物体；
-需要以平行于表面的方式测量，以保证测量结果的准确性；
-测量结束后，及时将测微尺从显微镜上取下，以免影响下次使用。
显微测微尺的使用方法相对简单，但需要一定的实际操作经验以获得准确的测量结果。
因此，在进行实际测量之前，建议用户先进行一些练习以熟悉操作技巧。
此外，还可以根据具体情况选择不同型号和精度的显微测微尺，以满足不同测量需求。
实验二用光学仪器测量放大率和微小长度
实验二 用光学仪器测量放大率和微小长度实验目的１．熟悉显微镜和望远镜的构造及其放大原理。
２．学会测定显微镜和望远镜放大率的方法。
３．掌握显微镜的正确使用方法；学会利用显微镜测量微小长度。
４．理解光学仪器分辨本领的物理意义。
实验仪器读数显微镜，望远镜，测微目镜，目镜测微尺，标准石英尺，十字叉丝光阑，圆孔光阑，准直光阑，分辨率板，辅助显微镜，米尺，标尺，待测样品等。
实验原理１．测定显微镜和望远镜的放大率在前面的基础知识中，我们已经对显微镜和望远镜的光学系统有所了解，在用显微镜或望远镜观察物体时，一般因视角均甚小，因此视角之比可用其正切之比来代替，于是，显微镜和望远镜的放大率可近似地写成eo tg tg M αα= （１）显微镜的放大率测定显微镜放大率最简便的方法是按图5—2—1来完成的。
现以显微镜为例，设长为0l 的目的物PQ 直接置于观察者的明视距离处，其视角为0α，从显微镜中最后看到虚像""Q P 亦在明视距离处，其长度为l −，视角为e α−，于是 00l l tg tg M e ==αα （5－2－1） 因此，如用一刻度尺作目的物，取其一段分度长为0l ，把观察到的尺的像投影到尺面上，设被投影后像在刻度尺上的长度是l ，就可求得显微镜的放大率。
（２）望远镜的放大率当望远镜对无穷远调焦时，望远镜筒的长度（即物镜与目镜之间的距离）就可认为是''0e f f +，这时如将望远镜的物镜卸下，在它原来的位置放一长度为1l 的目的物125——图−p(十字叉丝光阑)；于是，在离目镜d 处，得到该物经目镜所成的实像。
设其像长为2l −，则根据透镜成像公式有d f f l le /)()/(''021+=− （5－2－2）及'''0111e e f f f d =++ （5－2－3） 将（５－２－２）和（５－２－３）两式消去d ，得21''0l l f f M e =−= （5－2－4） 由（5－2－4）式可知，只要测出光阑的长度1l 及其像长2l ，即可算出望远镜的放大率。
实验二 测微尺的使用
一、实验目的
观察不同组织的细胞形态，了解它们与功 能的关系 熟练掌握测微镜的使用 观测不同细胞的形态大小
二、实验原理
细胞种类繁多，形态、大小差别较大， 从形态上动物卵细胞和植物的基本组织细 胞是球形，或近球形的。 细胞的形态与其功能相适应。细胞的功 能和形态可以通过显微镜观察和描述，而 细胞的大小是通过测量工具——测微尺， 来获得较准确的测量结果。
三、实验用品
1.
2.
3.
4.
0.5﹪蕃红或1／3000中性红溶液 香柏油，二甲苯 兔的肝、肾、卵细胞永久制片 蚕豆根尖切片，洋葱新鲜材料
பைடு நூலகம்
四、实验步骤
（一）、台微尺和目微尺的校对
1. 卸下目镜，拧开后面的透镜，将目微尺装 入其焦面上，使刻度向下。 2. 将台微尺置于在舞台上，使刻度向上。 3. 调焦至能看清台微尺刻度线。 4. 移动台微尺，并转动目微尺，使两个测微 尺的左边第一条刻度线完全重合，然后向 右边找完全重合的刻度线。分别记录两重 合线间台微尺刻度数n和目测微尺刻度m， 并查出台微尺的实际刻度值a（一般为 0.01mm）。
3.大肠杆菌标本示范，注意细胞形状、大小及核物 质等情况。
4.细胞大小的测量 ： 对于圆形、椭圆形或正方形细胞，他们的直 径、长、宽可以用目微尺进行测量，对于长方形 的细胞来说，算出体积要有一厚度的问题，它是 不能用目微尺测量的，而需要用显微镜调焦轮上 的标尺。具体方法如下： 1）将微调“0”刻度与基部镜臂上刻度对准。 2）转动粗调看清细胞的伤上端面或下端面；然后 顺时针或逆时针转微调看清细胞下端面或上端面， 记下微调转过的刻度数L,则厚度为：h = L · b
微生物大小和数量的测定
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微生物大小和数量的测定
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血球计数板计数
微生物大小和数量的测定
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计数时，通常数五个中格总菌数，然后求得每 个中格平均值，然后再换算成lml菌液中总菌数。
假如是25个中方格计数板, 1mL菌液中总菌数=A/5×25×104×B=50000A·B（个 ） A为五个中方格中总菌数，B为菌液稀释倍数.
镜测微尺轻轻放在目镜隔板上，使有刻度一面朝下。将 镜台测微尺放在显微镜载物台上，使有刻度一面朝上。 先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺刻度后， 转动目镜，使目镜测微尺刻度与镜台测微尺刻度相平行 ，并使两尺左边一条线重合，向右寻找另外一条两尺相 重合直线。
2．标定公式： 计算两刻度间目镜测微尺格数和镜台测微尺格数。因 为镜台测微尺刻度每格长10µm，所以可得：
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假如是16个中方格计数板， 1mL菌液中总菌数=A/5×16×104×B=3A·B（个）
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（三）器材 1．菌种 酿酒酵母 2．仪器或其它用具 血球计数板，显微镜，盖玻片，无
菌毛细滴管。 （四）操作步骤 l．菌悬液制备 以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当菌悬液。 2．镜检计数室 在加样前，先对计数室进行镜检。若有污物，则需清洗， 吹干后才能进行计数。 3．加样品 将清洁干燥血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌毛细 滴管将摇匀酿酒酵母菌悬液由盖玻片边缘凹槽滴加,菌 液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，普通计数室均 能充满菌液。 取样时先要摇匀菌液；加样时计数室不可有气泡产生。
镜台测微尺玻片很薄，如需标定油镜头时， 要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头。
思索题 为何不一样放大倍数目镜和物镜必须分别进行标 定？
微生物的大小测定
•微生物的大小测定
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2、物镜测微尺:
• 物镜测微尺是一块中央部分 刻有准确等分线载玻片。每一刻 度间距为10um即把1mm等分为 100格，是专门为校正目镜测微 尺实际数值用。
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三、材料与仪器
• 1、啤酒酵母 • 2、显微镜、物镜测微尺、
目镜测微尺 • 3、无菌水
•微生物的大小测定
• 2)将“水浸片”标本置于载物台上，先用 低倍镜观察到目标后，转换高倍镜测量 酵母大小，杆菌要测长度与宽度，球菌 测直径，普通在测微生物细胞大小时， 通常测量10—20个菌体，求出其平均值。
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(3)测量结果统计：
• 在高倍镜下：
• 目镜测微尺——格=物镜测微尺——格
• 目镜测微尺1格=
•微生物的大小测定
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•目镜测微尺安装方法 • 目镜测微尺
•一
•镜台测微尺及其中央部分放大
•目镜测微尺
•微生物的大小测定
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镜台测微尺校准目镜测微尺时情况
•微生物的大小测定
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2、微生物大小测定：
• 1）在载玻片上滴上美兰染色液，按无菌 操作，挑取啤酒酵母均匀地涂片，然后 盖上盖玻片。
1、目镜测微尺：
目镜测微尺是一块能够放入接目镜内
特定圆形玻璃片。玻片中央是一个细长带 刻度尺，等分成50或100小格，每个等分线 间距为0.1mm，测量时将其放在接目镜隔板 上。所以，目镜测微尺只是测量显微镜放 大后物像。因为不一样显微镜放大倍数不 一样，故目镜测微尺每格实际代表长度随 显微镜不一样而不一样。所以在使用前必 须用物镜测微尺校正，以求得在一定接物 镜及目镜等光学系统下，目镜测微尺每格 所代表实际长度。
实验二：微生物细胞大小与数量的测定
实验二：微生物细胞大小与数量的测定一、实验目的与要求：（1）了解显微镜测定微生物大小与血球计数板测定微生物数量的原理。
（2）学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、物镜测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术。
（3）了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算。
二、实验原理1.微生物大小测定原理微生物细胞的大小，是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图20-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，图 20-1目镜测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
2.血球计数板测定微生物数量的原理镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质常不易分辨。
菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板；一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。
目微尺的使用
本次课的学习内容
• 1、利用目微尺和台微尺测定生物 饵料的大小
1、利用目微尺和台微尺测定生物饵料的大小
• （1）目微尺的结构 • （2）台微尺的结构 • （3）用目微尺和台微尺测定生物饵料大小的原
理 • （4）学生利用目微尺、台微尺和显微镜测定单
胞藻的大小和卤虫卵的卵径
16×10=160放大倍数
目微尺与台微尺完全重叠， 严重影响两尺格数的读取（NO）
刻度线平行不相接，无法看出目 微尺与台微尺哪条线重叠(NO) 16×10=160放大倍数
• 然后从左到右寻找第二个完全重合的刻度。并计 数两重合线段之间目测微尺和台测微尺的格数。 由于台测微尺的刻度是镜台上的实际长度（10微 米），故可通过下列公式计算出当前放大倍数下 目测微尺每格的测量长度：
• 用台测微尺进行校正，以求得在特定的放大倍数 下，目测微尺每一格线所代表的真实长度。
64放大倍数
160放大倍数
640放大倍数
1600放大倍数
• 因目微尺测量的生物是经物镜放大后的像，而它 每格所代表的实际长度随物镜的放大率而变。某 一放大倍数下，测量生物大小时，需要先用台微 尺来标定目微尺每格所代表的实际长度，然后再 用以测定生物大小。
• 1600放大倍数下目 微尺一格代表1µm
64放大倍数（25µm）
160放大倍数(10µm)
640放大倍数(2.5µm)
1600放大倍数(1µm)
②测量
• 任务一：标定4倍物镜、10倍物镜、40倍物镜、 100倍油镜下，目微尺每格代表多少微米。
• 记录两重合线之间目微尺和台微尺的格数，计算 目微尺每格代表多少微米。
调节调焦旋钮和光栅，直至 看清楚台测微尺的刻度线。
目镜测微尺物镜测微尺显微镜
实验八
微生物细胞大小的测定
典型大肠杆菌的大小：0.5×2um 酵母菌的大小：1-5 × 5-20um 霉菌菌丝的直径：2-10um 病毒的尺的构造、掌握其使用和计算方法。 学习并掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理
微生物细胞的大小是微生物基本的形 态特征，也是分类鉴定的依据之一。 其大小的测量需要在显微镜下借助于 测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微 尺。
×10
×40
10um
目镜测微尺的构造和使用：
目镜测微尺是一块可被放入接目镜内的有精确的等分刻度的圆形小 玻片。测量时需将其放入接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大 后的细胞物象。由于在使用不同的放大倍数时，细胞物象的大小不同， 故目镜测微尺在不同放大倍率下每格实际代表的长度也随之变化，因 此，需用物镜测微尺来校正在不同放大倍率下目镜测微尺每格所代表 的实际长度。然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计 算出细胞的实际大小。
三、实验材料
酵母菌悬液（市售的干酵母粉） 目镜测微尺，物镜测微尺 、显微镜、吸 管、接种环、载玻片、吸水纸、番红染 色液
四、实验步骤
（—）装目镜测微尺
（二）校正目镜测微尺
1.将物镜测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上 2.先用低倍镜观察，将目镜测微尺刻度与物镜测微尺的 刻度平行。使两尺的第一条刻度线相重合，再寻找两尺的另一 条重合的刻度线，分别记录两重合线之间物镜测微尺和目镜测 微尺所占的格数，由公式计算出目镜测微尺每格所代表的长度。 3.用同样的方法换成高倍镜或油镜进行校正，记录并计
显微镜测微尺使用和计算方法
显微镜测微尺使用方法
显微测微尺是用来测量标本物体大小、长短的工具。
它分为目镜和物镜测微尺两种。
目镜测微尺观察到的标本大小，必须通过物镜测微尺测得的数据换算后，才是标本的真实大小。
一、目镜测微尺是一圆形玻片，内有一把小尺，通常为5mm长，分为50小格。
二、物镜测微尺是一特制的载玻片，中央有一小圆圈，圈内有一长度为1mm（1000微米）的小尺，它分为100小格，每小格为10微米。
三、使用方法：
1、取下目镜，旋下顶端透镜，将目镜测微尺放入（将有刻度一面朝下），再旋紧顶端透镜并放入筒内。
2、将物镜测微尺有刻度的一面置于显微镜载物台上。
观察寻找载物台上的物镜测微尺，找出后将目镜测微尺与物镜测微尺一端重叠对齐，再看目镜测微尺占满物镜测微尺几小格，即可换算出标本究竟大小多少。
3、如目镜测微尺50小格占满物镜测微尺68小格（即为680微米），其计算方法是：680微米/目镜50小格=13.6微米，即为目镜测微尺每小格的长度为13.6微米。
4、如要更换物镜倍数，还要重新校正换算。
5、目镜测微尺放入目镜后，应在显微镜手把上标明此镜7× 10× 20× 40×等放大倍数时，其每小格目镜测微尺的长度。
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四、其他 观察细胞形态
观察兔不同组织细胞间隙、细胞形状、细胞核及核仁 形状与数目、细胞质的形态结构
观察蚕豆根尖纵切面，观察生长区与成熟区细胞异同 观察大肠杆菌细胞性状、大小及核物质
求核质比NP
NP=Vn/(Vc-Vn) 兔肾细胞 洋葱内表皮细胞
X = n·a /m 改换物镜后，需重新标定目镜测微尺！
2.目微尺测细胞长宽
将各种细胞制片置于载物台上，测定细胞的 大小并记录
3.测量细胞的厚度： 显微镜微调焦轮上的标尺
1.将微调“O”刻度与基部镜臂上刻度线对准 转动粗调看清细胞的上端面或下端面 2.顺时针或逆时针旋转微调，看清细胞的下 端面或上端面，计下微调旋过的刻度数L，则 厚度为:h=L*b
专用于校正目镜测微尺每格长度的。
B.目镜测微尺：放在目镜筒内的标尺，固定 式目微尺为圆形玻璃片，直径20-21mm,其上 标有刻度，分直线式与网格式，前者测长度 后者计数或测面积。
在使用前必须用镜台测微尺进行校正。
C.镜台标准推动器上的纵横游标尺:计算标 本移动的距离和确定标本的位置。游标尺由 主标尺A和副标尺B组成。副标尺的分度为 主标尺分度的9/10。使用时先看到标尺的0 点位置，再看主副标尺刻度线的重合点即可 读出准物的厚度。 在调上下厚度时读出数值，一般有100个刻度， 每一刻度1-2um。
2.用目微尺测细胞长宽
1.目微尺的校对
① 将目镜微尺放于目镜内
拿出显微镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜 测微尺放入接目镜的中隔板上，使有刻度一面朝 下，再旋上目透镜，并装入镜筒内
②将镜台微尺放在显微镜的载物台上
使有刻度的一面朝上，同观察标本一样，使具 有刻度的小圆圈位于视野中央
③先用低倍镜观察，对准焦距，看清物镜测 微尺的刻度
④小心转动目镜测微尺，移动镜台微尺使两尺 平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度 重合处。
⑤记录起点线到重合线之间的镜台微尺的刻度 数（格数）n和目镜微尺刻度数m ，并查出台 微尺的实际刻度值a(一般为0.01mm)该放大系统 下目微尺每格所代表的实际长度X(mm)
二、我的目标：
1.了解不同测微尺的用途 2.熟练使用目微尺测细胞长宽， 使用微调焦轮的标尺测细胞厚度
三、我的方案
1.比较几种测微尺，了解其原理与用途
A.镜台测微尺：是中央部分刻有刻度线的特制载 玻片，一般全长1mm，通常其是中央部分刻有精 确等分线的载玻片，一般将1mm等分为100格， 每格长度0.01mm（10um)。