家畜布鲁氏菌病的血清学检测
新疆且末县若羌县家畜布鲁氏菌病血清学调查
２ ０ Ｏ ２
２ ０ Ｏ ２ ● ３ ０ ４
２ ｏ １ ０ ３ ５ ２ ｏ ０ ３ ２ ０ ０ ０ ２ Ｏ ５ ７１ Ｏ４ ５ ２ ｏ ９ ０ ５ ５ ７ １９ ２ ９
０ ０ ０
２ Ｏ０ １Ｏ０ ０ Ｏ ０ ８ ｏ ９
理 。 果见 表 １ 结 。
１ ． 被检血清 ．１ ２
我们从且末县和若羌县 。 有代表性的
表 １ 两县 １２ 份血 清进行 布病 血清 学检查 情 况 ４５
ｊ
上述两县 ２０ 年 到 ２０ 年 布病各项检疫和免疫 ０３ ０５
收稿 日期 ：０ ７ １— ９ ２０ —０ ２
任务完成情况见表 ２ 和表 ３ 。
本 次调查 是 在血 清学 检测 。 菌分 离培 养 的基 础上 细 对 巴音 郭 楞 蒙 古 自治 州且 末 县 和若 羌 县 重 点 １ ０个 乡 镇 ２０ 年 到 ２ ｏ ０３ ０５年家 畜布病 进行 调查 和采 样 。 中检 其 菌没 有分 离 到 布鲁 氏菌 ， 测 血清 。 均 阳性 率 上述 各 检 平 县 分 别为 ０ ％ ０１ ． 和 ． ５ ％。调查证 实布 病在 且末 县 和若 羌 县部分地方确实存在， 但是感染程度较低。
维普资讯
２ ０年３ ０ ８ 月
．
第 １ 总第 １ 期） 期（ ３ ８
葶食家畜（ 季刊）
新疆且末县 若羌县 家畜布鲁 氏菌病血清学调查
多里坤 ・ 尔沙发 ， 努 麦吉提 Ｉ ， 热合木 江 莫合塔 尔・ ， 阿不力孜 ２热孜 万古丽 ・ 克依木 ２ （ ．新疆维吾尔 自治区动物 防疫监督总站 ， １ 新疆 乌鲁木齐 ８０ ６ ） ３ ０ ３
０ ２ ４ ２ ００ ９ ６ ２ ００ １５ １４ ４ ０ ０ ６ ７ ０ ９ ５６ ． ２０ ． ６ ６ ７ ０ ６ ５ ９ ７ ０ ０ ３ ０ １ ０ ３ ０ ２０ ．５ ３ ２ ２ ０ ５ ５ ０ ４ ５ ７ ０ ０ １ ６ ０ ９ ７ ０ ００ ０ ５ ． ０ ８ ９ ２ ０ ０ ８ ０ ３ ８ ０ ０ ０ ０ １５ １ ０ ５ １ ０ １ ００ １０ ９ ０ ５ ０ ０ １２ ０ ９ ９ ０ ． ２ ２ ． ０ ４ ０ ０ ５ ９ ２ ０ ０ ９ ０ ６
布鲁氏菌病的特异性抗原检测与诊断方法研究
布鲁氏菌病的特异性抗原检测与诊断方法研究布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的人畜共患感染疾病。
该疾病在全球范围内广泛分布，并且一直是重要的公共卫生问题之一。
为了有效的控制和治疗这一疾病，准确的检测和诊断方法显得尤为关键。
本文将介绍布鲁氏菌病的特异性抗原检测与诊断方法的研究进展。
布鲁氏菌病的特异性抗原检测是诊断布鲁氏菌感染的重要手段之一。
目前常用的特异性抗原检测方法包括血清学检测、分子生物学检测和免疫学检测。
血清学检测是最常用的方法之一，其基于人体对布鲁氏菌感染后产生的免疫反应。
血清学检测方法包括血凝试验、补体结合试验、乳集素凝集试验等。
这些方法通过检测患者血清中的特异性抗原抗体来确认感染情况。
然而，血清学检测方法存在一些局限性，例如同种血症和感染初期可能无法检测到特异性抗体。
因此，结合其他特异性抗原检测方法可以提高准确性和敏感性。
分子生物学检测是一种快速、准确的特异性抗原检测方法。
其基于布鲁氏菌的DNA或RNA序列的特异性。
目前常用的分子生物学检测方法有PCR技术和实时荧光定量PCR技术。
这些方法具有高度特异性和敏感性，能够检测到极低浓度的布鲁氏菌。
此外，分子生物学检测方法还可以鉴定布鲁氏菌的亚种和分型，对流行病学研究和溯源具有重要意义。
免疫学检测方法是利用免疫反应来检测布鲁氏菌的特异性抗原。
目前常用的免疫学检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹（Western blot）和免疫荧光分析（IFA）等。
这些方法通过检测患者体液或组织中相应的抗原来确定感染情况。
免疫学检测方法具有较高的敏感性和特异性，可以作为疫情监测和诊断的有力工具。
除以上常用的特异性抗原检测方法外，近年来还出现了一些新的检测方法。
例如，质谱分析技术可以通过检测细菌特异蛋白质的质谱图谱来进行检测，具有较高的快速性和准确性。
同时，免疫芯片技术和纳米生物传感技术也被应用于布鲁氏菌病的特异性抗原检测，这些新技术在提高检测效果和降低成本方面具有潜力。
动物感染布鲁氏杆菌病的实验室检测诊断方法
畜 牧 兽 医2021年第11期新农民动物感染布鲁氏杆菌病的实验室检测诊断方法宁 霞（甘肃省陇南市两当县畜牧兽医站，甘肃 两当 742400）摘要：布鲁氏杆菌病是一种流行性动物疾病，具有一定的传染性和危害性。
这就需要相关人员结合布鲁氏杆菌的病原特点、病理特征等进行分析与研究，采用科学合理的实验室检测诊断方法进行诊断，进而制定出针对性的预防措施，最大程度上降低动物布鲁氏杆菌病的发病。
本文对此进行了简要介绍，希望在动物布鲁氏杆菌病的诊断与预防方面起到一定的帮助。
关键词：动物布鲁氏杆菌病；检测；诊断动物布鲁氏杆菌病是一种常见的二类动物疫病，主要是由布鲁氏杆菌引发，这种病具有较强的潜伏期和高度的传染性。
尤其是羊、牛等家畜类，对于布鲁氏杆菌病具有较差的抗病机能。
该病的临床表现主要体现在母畜易流产、易发生子宫内膜炎、睾丸炎、久配不孕等。
随着畜牧业的不断发展，动物布鲁氏菌病的发病几率显著增加。
这就需要相关人员加强检测诊断，积极预防，避免布鲁氏杆菌病的大范围传播。
1 布鲁氏杆菌病的发病特点布鲁氏杆菌是一种革兰氏阴性菌，其菌种主要包括六种，即羊、牛、猪、鼠、绵阳及犬布氏杆菌。
但是动物布鲁氏杆菌病主要以羊、牛、猪较为普遍，在这三种疾病中，以羊布鲁氏杆菌病最为常见[1]。
布鲁氏杆菌病具有较强的潜伏性，不仅能够在土壤、水、皮毛等存活，而且还能够存活于部分食品中。
但是高温或者消毒剂能够在一定程度上杀死布鲁氏杆菌。
常见的消毒剂有福尔马林、生石灰水等。
布鲁氏杆菌病的发生与季节变化无关，而是呈现出局域性的传染流行。
一旦牛、羊等感染布鲁氏杆菌，其流产胎儿、胎衣、羊水、粪便、精液等都会存在大量的病菌，这些病菌可以通过消化道、呼吸道等进行直接性的接触传感，也会进一步将所接触到的饲料、土壤或者水源等加以污染，进而传染给其它的动物群体。
布鲁氏杆菌的潜伏期或长或短，长则达到半年，短则表现为十几天。
大部分动物的感染均为隐性感染，其明显症状就是流产。
布鲁氏菌病血清学诊断方法及评价
论与我们 的Ｐ Ｒ Ｔ 是有高度的一致性的。并且该方法的使用不仅对 于 早期 的抗体 产 生 高敏 感 ，对 于后 期 的 治疗 中也表 现 不俗 。特别 是 在 猪 布 病 的 试 验 检疫 时 ，Ｒ Ｂ Ｐ Ｔ 得 出 的结 论 是 与 Ｓ Ａ Ｔ 有着 高 达 ９ ９ ． ４ ４ ％的概 率 的 ，这说 明对于 Ｒ Ｂ Ｐ Ｔ 的使 用是 ￣ Ｌ Ｓ Ａ Ｔ 更 优 秀的 检测
要 可分 为 三种 不 同 的试 验方 法 ，环 状 、絮状 以及 琼 脂扩 散试 验 ，
１ 试 管凝 集试验
在１ ８ ９ ６ 年 我 们 的Ｄ ｕ ｒ ｈ ａ ｍ开 始对 于 细 菌凝 集 反 应 进 行 深 入 研 究 ，试 管 凝 集 试 验 随 着 多 年 的 积 累 被 多 次 的 研 究 和 检 测 布 鲁 氏 菌 病 的参 数 。试 管 凝集 试 验 的又 被 称 为 为Ｓ Ａ Ｔ，是 被 大量 采 用 的 项 检 测 手 段 。 这 种 研 究 方 法 主要 是对 诊 断 布 病 的 一 种 试 验 方 式 。经 过 多年 的实 验 积 累 ，Ｓ Ａ Ｔ 被 不断 的采 纳 ，因为 其 试验 的稳 定 性 ，也 是 一 种高 敏 感 的一 项 选 择 。它 通 过相 关 的 实验 可 以检 测 出我 们 血 清 中 的 存 在 的抗 布 鲁 氏菌 ，一 般 主 要 表 现 为 三 个 免 疫 球 蛋 白抗 体 ，这 三 种 包 括 Ｉ ｇ Ｇ，Ｉ ｇ Ｍ以及 Ｉ ｇ Ａ。通 过 检 测这 三 项 矿 体 ，我 们 的Ｓ Ａ Ｔ 对Ｉ ｇ Ｍ 表 现 出较 强 的 敏感 性 ，在 布鲁 氏菌 病 的早 期 诊 断 中 ，我们 一 般 在 用Ｓ Ａ Ｔ 检 测 是会 进 行 多 次 的实 验 ，由 于检 测 次 数 的增 多 ，我们 可 以 发 现它 的凝 集 价 也会 急 剧 的上 升 ，这 对 于 我 们 精确 的诊 断有 着 很 大 的帮 助 ，这种 凝集 价 可 以保 持 在一 年 的 时 间 ，在 这之 后 它 会 有所 减 少 。在 Ｓ Ａ Ｔ 检 测 中 ，对 于 家 畜和 人 的 检 测 是相 一 致 的 ， 由于操 作 上 并 不 复杂 ，而 且 判 断结 果 也 比较 方 便 ，因 此 ，采 用 Ｓ Ａ Ｔ 是有 较 高 的诊 断价 值 的体 现 的 ，当然 ，我 们
布鲁氏菌病诊断标准
布鲁氏菌病诊断标准
布鲁氏菌病诊断标准如下：
(一) 流行病学：发病前病人与家畜或畜产品，布氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区的居民，或与菌苗生产、使用和研究密切联系者。
(二) 临床表现：出现数日乃至数周发热，多汗，肌肉和关节酸痛，乏力兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征。
(三) 实验室检查：布病玻片或虎红平板凝集反应阳性或可疑，或皮肤过敏试验后24、48小时分别观察一次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上(或4.0cm²以上)
(四) 分离细菌：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物中分离到布氏菌。
(五) 血清学检查：标准试管凝集试验(SAT)滴度为1：100及以上，对半年内有布氏菌苗接触史者，SAT滴度虽达1：100及以上，过2——4周后应再检查，滴度升高4倍及以上，或用补体结合试验(CFT)检查，CFT滴度1：10及以上;抗人免疫球蛋白试验(Coomb'S)滴度1：400及以上。
诊断疑似病例：具备(一)、(二)、(三)者。
诊断确诊病例：疑似病例加(四)或(五)中任何一项者。
布鲁氏菌病的实验室检查
王月
牛种
绵羊附睾种 Brucella
沙林鼠种
犬种
羊种 猪种
标本的采集、保存及运输
1） 血清学诊断需要的标本类型为人及疑似动物 血清。
2） 使用负压采血管或注射器进行采集。
3） 分离到的血清存放到灭菌后的血清管内。
4） 两周内进行实验的血清可4℃冷藏保存。
降低
血清的反复冻融会引起布病抗体效价的
5） 检测后的血清-25℃冷冻保存。
6） 使用冷藏箱进行长距离运输。
注意：采集血清需使用红色或者黄色盖子的负压采 血管，其他颜色的采血管会引起RBPT假阳性。
阴性
阳性
阴阳性血清对照同时成立，本次实验成立。
可编辑
加样枪
吸头
• 比浊管配制
“++++”液体完全透明，菌体呈伞状沉淀或块状颗粒状沉淀，呈100%凝 集。
“+++”液体近于完全透明，菌体呈伞状沉淀，呈75%凝集。 “++”液体略微透明，菌体呈较薄伞状沉淀，呈50%凝集。 “+”液体不透明，管底有不明显的伞状沉淀，呈25%凝集。 “-”液体不透明，无伞状沉淀。
双向血培养瓶 平板
可编辑
牛布鲁氏菌病血清学检测报告
１ ． １ 被检血清 采 自 农户、规模场（ 户） 、贩运户的牛血清
１ ８ ４ １ ５ 头份，分离血清 ，． ２ ０ ￣ Ｃ保存备用。 １ ． ２ 检 测试 剂 虎红 平 板诊 断 抗 原 、试管 凝 集抗 原 、 阴 、阳性血清 ，虎红平 板凝集 试验（ Ｒ Ｂ Ｐ Ｔ ） 抗 原购 自青岛 易 邦生物 工程 有 限公司 ，批 号２ ０ １ １ ０ ４ ２ ６ ；试 管凝集试 验
本 次牛布鲁 氏菌病 血清 学检 测结 果表 明 ，２ ０ １ ０ 年大 通 县年 布病 感 染抗 体 阳性 率 为０ ． ２ ５ ％，２ ０ １ １ 年 阳性 率 为
２ 检测方法
２ ． １ 虎红平板 试验方 法 参照国标（ ＧＢ ／ Ｔ １ ８ ６ ４ ６ — ２ ０ ０ ２ ） 执
０ ． １ ８ ％，２ ０ １ ２ 年 阳性率 为０ ． １ ４ ％：牛布 病 阳性率逐 年有所
可疑 反应 的奶 牛经 ３ 周后 ，重新 采血 检验 ，如 仍 为可
疑，在判 为阳性 。 ４ 结果
（ 详见表ｌ 、表 ２ 、表３ ）。
表 １ 不 同年 份 牛布病 检测 结 果 （ 头 、％）
风 险因素，笔者于２ ０ １ ０ 年３ 月至２ ０ １ ２ 年ｌ Ｏ 月进 行了牛布病 感染抗体的检测 ，现 就其 结果报告如下：
布 氏杆菌病 （ Ｂ ｒ ｕ ｅ ｌ ｌ ｏ ｓ ｉ ｓ 简称布 病） 是 由布 氏杆菌 引起 的人畜共 患的一种 急性或慢 行传 染病 ，本病 一年 四季均
可 发病 ，临床 上 以母 畜流 产 、公 以上的凝集现象时判为阳性血清 ， １ ： ５ ０ 稀释 ，标记 出现“ ＋＋ ” 以上 的凝 集现 象时判为可疑 ，
山东畜牧 兽医
布鲁氏菌病检测技术
布鲁氏菌病检测技术布鲁氏菌病检测技术1.概况布鲁氏菌病(简称布病)，是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患的传染病。
临床主要特征是母畜流产、乳腺炎、不育和各种组织(如睾丸、关节)的炎症。
人类感染布病后，病程长，反复发作，长期不愈。
布病几乎遍及世界各地。
凡有牲畜的地区都有布病流行。
据不完全统计，在160个国家和地区中就有123个国家和地区有布病发生。
我国多见于内蒙古、东北，西北等牧区。
在北方农区也有散发，常呈地地方性流行。
在不良环境，如抗生素的影响下，本菌易发生变异，通常变异形成的布鲁氏菌可在机体内长期存在。
该菌对热抵抗力不强，63℃经7～10 min可被杀死，在鲜乳中可存活2天到18个月，在冻肉中可存活14～47天，在干燥土壤和胎儿体内可分别存活37天和6个月。
对常用消毒药敏感，如0.1％升汞数分钟，1％来苏儿或2％福尔马林15 min可将其杀死。
日光下曝晒4 h 可杀死本菌。
人和多种动物对布鲁氏菌易感。
动物中羊、牛、猪的易感性最强。
母畜比公畜，成年畜比幼年畜发病多。
在母畜中，第一次妊娠母畜发病较多。
带菌动物，尤其是病畜、流产胎儿、胎衣是主要传染源。
消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途径，也可通过损伤的皮肤、粘膜等感染。
常呈地方性流行。
人主要通过皮肤、粘膜和呼吸道感染。
本病一年四季均可发病。
流行区在发病高峰季节(春末夏初)可呈点状暴发流行。
患病与职业有密切关系，如：兽医、畜牧工作者、屠宰工人、皮毛工等感染机会较高。
人类布鲁氏菌病的预防，首先要注意职业性感染，凡在动物养殖区、屠宰区、畜产品加工厂的工作者以及兽医、实验室工作人员等，必须严守防护制度(即穿着防护服装，做好消毒工作)，尤其在仔畜大批生产季节。
更要特别注意。
病畜乳肉食品必须灭菌后食用。
必要时可用疫苗接种，接种前应行变态反应试验。
阴性反应者才能接种。
2.实验室监测技术概述(据布鲁氏菌病防治技术规范)2.1检测方法血清学实验或细菌分离。
初筛试验选用虎红平板凝集试验(RBPT)或乳牛布病全乳环状试验(MRT)(见GB/T 18646)。
家畜布鲁氏菌病血清学平板试验(PAT)
家畜布鲁氏菌病血清学平板试验（PAT）一、应备有下列材料：1.受检血清：受检血清必须新鲜,无溶血现象、腐败现象、气味。
2.在实验前血清必须置于温室中，使其达到20℃左右。
3.抗原：由兽医生物药品厂生产供应。
本抗原由加热杀死的布鲁氏菌菌体经染色制备而成的淡蓝色悬浮液。
抗原本身出现凝集者应废弃。
使用前应充分振荡，并使其温度达到20℃左右。
4.阴、阳性血清：由兽医生物药品厂生产供应，本方法所用的阴、阳性血清与试管凝集试验法相同。
二、操作方法：1.备一方形洁净的玻璃板：划成25个方格，横数5格，纵数5格，每格四平方公分，第一列各格写下血清号码。
2.用0.2毫升灭菌吸管按下列剂量加受检血清于任何一行（横格）的各格中：第一格0.08毫升，第二格0.04毫升，第三格0.02毫升，第四格0.01毫升。
（如下表）血清号第一格第二格第三格第四格血清量（毫升）1 0.08 0.04 0.02 0.012 0.08 0.04 0.02 0.013 0.08 0.04 0.02 0.014 0.08 0.04 0.02 0.01由于本试验所需血清量较少，因此，在操作过程中要求严格，应尽可能减少误差，最好滴出血清前用滤纸片擦去吸管表面沾附的血清。
3.加平板反应抗原原液0.03毫升于上述各血清量中，并用牙签或细铁丝混匀，使抗原和血清推开，面积直径约2—3公分的圆形。
由血清量最少的一格（即第四格）混起，每份血清用一根牙签，用过的牙签要放固定容器中，工作完毕后集中烧毁。
若用细铁丝作混合，每份血清混匀后应用酒精棉花擦净，然后再作另一份血清的混合。
4.混合完毕，将玻璃板置于酒精灯火焰或凝集反应箱上，均匀加温，使达到30℃左右，并轻轻摇动玻板，使血清与抗原混合液呈缓慢的旋转运动，以保证充分混合。
5—8分钟内记录反应结果。
5.每次试验用1—2份已知阴性血清和1—2份阳性血清作平板凝集反应，以资对照。
6.按下列标准用加号记录反应强度“＃”出现大的凝集片或小的颗粒物，液体完全透明，即100%凝集。
布鲁氏菌病血清学检测方法优缺点对比
布鲁氏菌病血清学检测方法优缺点对比王 刚1，范伟兴2，刘 坤2，田丽华3，温建新1（1. 青岛农业大学动物医学院，山东青岛 266109；2. 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032；3. 青岛西海岸新区动物疫病预防与控制中心，山东青岛 266400）摘 要：布鲁氏菌病（简称布病）严重危害畜牧养殖业安全和人类健康，而有效的检测方法能够为布病的预防、检测和净化提供技术支持。
目前针对布病的血清学检测方法主要包括：布病虎红平板凝集试验（RBT）、试管凝集试验（SAT）、全乳环状实验（MRT）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光偏振测定法（FPA）、补体结合试验（CFT）以及琼脂扩散试验（NH-GD）等。
不同的血清学检测方法各有优缺点：RBT操作简便，敏感性较高，但环境会对检测结果产生一定影响；ELISA敏感性较高，可一次性检测多个样本，但对仪器要求较高；FPA短时间内能够检测大量样品，操作简单，特异性和敏感性与ELISA相似，但需要专业的荧光偏振仪器；SAT特异性较强，但敏感性不高，操作步骤繁琐；CFT的特异性和敏感性都高于SAT，但试验较为繁琐，耗时长；MRT一般只用于牛奶样本检测，无需采血，特异性强，但对牛奶的质量有一定要求；NH-GD对疫苗免疫样本和野毒感染样本具有鉴别诊断能力，但抗原纯度要求高。
因此，RBT、MRT、ELISA、FAP和NH-GD更适合用于布病初筛，而SAT和CFT更加适用于布病复核。
未来应探索更多的血清学检测方法，如荧光微球法、半抗原鉴别诊断方法等，以便为布病检测提供更优选择。
关键词：布鲁氏菌病；血清学；检测方法；优缺点对比中图分类号：S851.3 文献标识码：A 文章编号：1005-944X（2021）05-0072-04DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2021.05.016Comparison on the Serological Detection Methods for BrucellosisWang Gang1，Fan Weixing2，Liu Kun2，Tian Lihua3，Wen Jianxin1（1. School of Veterinary Medicine，Qingdao Agricultural University，Qingdao，Shandong 266109，China；2. China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong 266032，China；3. Qingdao West-Coast Economic New Area Center for Animal Disease Prevention and Control，Qingdao，Shandong 266400，China）Abstract：The animal husbandry safety and human health have been seriously endangered by brucellosis，against which，the prevention，detection and purification could be technically supported by an effective detection method. Current serological detection methods mainly include rose-bengal plate agglutination test（RBT），standard-tube agglutination test（SAT），whole milk ring test（MRT），enzyme-linked immunosorbent test（ELISA），fluorescence polarization Assay（FPA），complement fixation test（CFT）and native hapten-gel diffusion test（NH-GD），which are with different advantages and disadvantages as follows：RBT is user-friendly with high sensitivity，but is subject to environment to some extent；ELISA can detect several samples at one time with high sensitivity，but advanced device will be required；FPA can detect a large number of samples in a short time with similar specificity and sensitivity as ELISA，but a specific fluorescence polarization instrument will be required；SAT is with good specificity but lower sensitivity and complicated operation steps；CFT is with higher specificity and sensitivity compared to SAT，but is收稿日期：2021-02-07 修回日期：2021-02-26基金项目：山东省现代农业产业技术体系特种经济动物创新团队项目（SDAIT-21）通信作者：温建新。
布病检测标准
动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18646—20021范围本标准规定了动物布鲁氏菌病的诊断技术。
本标准规定的虎红平板凝集试验、乳牛全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试验和乳牛场布病的监测及诊断泌乳母牛布病的初筛试验；试管凝集试验和补体结合试验适用于诊断羊种、牛种和猪种布病感染的家畜。
本标准规定的试管凝集试验不适用于犬种和绵羊副睾种布病感染家畜的检疫。
2虎红平板凝集试验2.1材料准备2.1.1抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。
2.1.2受检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。
2.1.3洁净的玻璃板，其上划分成4cm2的方格。
2.1.4吸管或分装器，适于滴加0.03mL。
2.1.5牙签或火柴杆，供搅拌用。
2.2操作方法2.2.1将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应血清0.03mL。
2.2.2在受检血清旁滴加抗原0.03mL。
2.2.3用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。
2.2.4每次试验应设阴、阳性血清对照。
2.3判定2.3.1在阴、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。
2.3.2受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(—)。
3乳牛布病全乳环状试验3.1材料准备3.1.1布病全乳环状抗原由制标单位提供，按说明书使用。
3.1.2乳样3.1.2.1受检乳样须为新鲜的全乳。
3.1.2.2采乳样时应将母畜的乳房用温水洗净、擦干，然后将乳液挤入洁净的器皿中。
3.1.2.3采集的乳样夏季时应于当日内检查；保存于2℃时，7d内仍可使用。
3.2操作方法3.2.1取乳样lml，加于灭菌凝集试验管内。
3.2.2取充分振荡混合均匀的全乳环状抗原1滴(约50ul)加人乳样中充分混匀。
3.2.3置37℃一38℃水浴中60min。
3.2.4加温后取出试管勿使振荡，立即进行判定。
3.3判定标准分为：a)强阳性反应(+++)，乳柱上层乳脂形成明显红色的环带，乳柱白色，临界分明；b)阳性反应(++)，乳脂层的环带呈红色，但不显著，乳柱略带颜色；c)弱阳性反应(+)，乳脂层的环带颜色较浅，但比乳柱颜色略深；d)疑似反应(±)，乳脂层的环带颜色不明显，与乳柱分界不清，乳柱不褪色；e)阴性反应(—)，乳柱上层无任何变化，乳柱颜色均匀。
动物布鲁氏菌病诊断技术 GB
动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18646—20021 范围本标准规定了动物布鲁氏菌病的诊断技术。
本标准规定的虎红平板凝集试验、乳牛全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试验和乳牛场布病的监测及诊断泌乳母牛布病的初筛试验；试管凝集试验和补体结合试验适用于诊断羊种、牛种和猪种布病感染的家畜。
本标准规定的试管凝集试验不适用于犬种和绵羊副睾种布病感染家畜的检疫。
2 虎红平板凝集试验2.1 材料准备2.1.1 抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。
2.1.2 受检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。
2.1.3 洁净的玻璃板，其上划分成4cm2的方格。
2.1.4 吸管或分装器，适于滴加0.03mL。
2.1.5 牙签或火柴杆，供搅拌用。
2.2 操作方法2.2.1 将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应血清0.03mL。
2.2.2 在受检血清旁滴加抗原0.03mL。
2.2.3 用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。
2.2.4 每次试验应设阴、阳性血清对照。
2.3 判定2.3.1 在阴、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。
2.3.2 受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(—)。
3 乳牛布病全乳环状试验3.1 材料准备3.1.1 布病全乳环状抗原由制标单位提供，按说明书使用。
3.1.2 乳样3.1.2.1 受检乳样须为新鲜的全乳。
3.1.2.2 采乳样时应将母畜的乳房用温水洗净、擦干，然后将乳液挤入洁净的器皿中。
3.1.2.3 采集的乳样夏季时应于当日内检查；保存于2℃时，7d内仍可使用。
3.2 操作方法3.2.1 取乳样lml，加于灭菌凝集试验管内。
3.2.2 取充分振荡混合均匀的全乳环状抗原1滴(约50ul)加人乳样中充分混匀。
3.2.3 置37℃一38℃水浴中60min。
3.2.4 加温后取出试管勿使振荡，立即进行判定。
布鲁氏菌诊断的金标准
布鲁氏菌诊断的金标准
摘要：
一、布鲁氏菌诊断简介
二、布鲁氏菌诊断的金标准
三、金标准的重要性
四、结论
正文：
布鲁氏菌诊断的金标准
布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的传染病，常见于畜牧业发达的地区。
诊断布鲁氏菌病的方法有很多，但金标准一直是血清学检测。
血清学检测是通过检测患者血清中的布鲁氏菌抗体，来判断患者是否感染了布鲁氏菌。
这种方法具有较高的灵敏度和特异性，能够准确地诊断出患者是否感染了布鲁氏菌，因此被认为是布鲁氏菌诊断的金标准。
金标准的重要性
金标准是医学诊断中非常重要的一个概念，它指的是一个诊断方法在灵敏度、特异性、准确性和可重复性等方面的综合表现。
在布鲁氏菌病的诊断中，血清学检测作为金标准，具有其他诊断方法无法比拟的优势。
首先，血清学检测具有较高的灵敏度和特异性，能够准确地诊断出患者是否感染了布鲁氏菌。
其次，血清学检测操作简单、快速，能够满足临床对快速诊断的需求。
最后，血清学检测适用于不同年龄段和不同病程的患者，具有广泛的应用范围。
结论
总的来说，血清学检测作为布鲁氏菌诊断的金标准，在诊断布鲁氏菌病方面具有不可替代的优势。
然而，血清学检测也存在一些局限性，如对抗原的质量和检测方法的选择要求较高，需要专业人员进行操作等。
家畜布鲁氏菌病血清学调查
中国畜禽种业2019.03作者简介：李尤龙（1972，7-），男，云南省罗平县人，大专，兽医师，主要从事畜牧兽医工作。
家畜布鲁氏菌病血清学调查李尤龙1杨艳明2李登峰3（1，云南省曲靖市罗平县大水井乡农业综合服务中心655800；2，云南省曲靖市罗平县畜禽改良工作站655800；3，云南省曲靖市罗平县动物疫病预防控制中心655800）摘要：为深入了解云南省曲靖市罗平县家畜（猪、牛、羊）布鲁氏菌病的防控成效，于2018年8～11月从罗平县所属的13个乡、镇（街道）共采集家畜血清3089份（牛血清150份、猪血清751份、羊血清2188份）进行布病感染情况血清学检测。
采用虎红平板凝集试验(RBT)进行初筛，然后进行竞争酶联免疫吸附试验确诊。
结果显示，3089份血清全部为阴性，调查数据表明，罗平县家畜布鲁氏菌病的防控取得了一定成效。
关键词：家畜；布鲁氏菌病；血清学调查；罗平县布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌属细菌感染导致人畜共患的常见传染病，在全世界范围内严重威胁人类健康，影响畜牧业发展。
世界动物卫生组织（OIE ）将其列为法定报告的传染病，我国规定布病为多种动物共患的二类动物疫病。
因此，开展家畜布病的血清学调查具有重要意义。
1材料与方法1.1样本来源、采样要求和采样比例对去年监测出阳性畜的场（户）100%采样监测，对引入饲养期限不足半年的牲畜实行100%采样监测，对养牛20头以上、羊20只以上、猪50头以上的规模场户按5%比例采集血清（种公畜、母畜、育肥畜比例为1:3:1），对监测有阳性畜的养殖场（户、企业）实行100%采样复检。
羊共调查13个乡（镇、街道）105个行政村280个自然村，10个规模场、570户散养户，调查羊35634只，共采集羊血清2188份；猪共调查13个乡（镇、街道）48个行政村73个自然村，31个规模场，66户散养户，调查猪21318头，共采集猪血清751份，牛共调查13个乡（镇、街道）16个行政村20个自然村，3个规模场、17户散养户，调查牛11856头，共采集牛血清150份。
兽医实验室实用布鲁氏菌病检测方法
布鲁 氏菌病 ，又称布病 、布 氏杆菌病 、布鲁 氏杆菌病 ，是 由布鲁氏菌属细菌引起的多种家畜和
人 的细 菌 ｆ 生 共 患传染 病 ，临床上 以母 畜流产 、胎 盘
不下 ， 公畜睾丸炎 、附睾炎 ，人波状热为特征 ，严 重危害畜牧业持续发展和人类健康。世界动物卫生 组织 （ Ｏ Ｉ Ｅ） 将其列为Ｂ 类动物疫病 ，我国将其列 为二类动物疫病。为有效控制布鲁氏菌病在我国的
８ ３ ０ ０ ０ ９ ）
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
摘要 ：布鲁 氏菌病是 国家二类动物疫病 ，２ ０ ０ ４ 年将布病纳入 国家重大动物疫病监测计划 ，每年５ 月和 １ １ 月对乳 用牛羊及 重点地 区牛羊进行 两次集中监 测，布 病检 测工作主要在 兽 医实验室完成。本文对适合兽 医实验室操作的布鲁氏茵检 测方法
业
２ ０ １ ３ 年 第ｓ 期
兽医实验室实用布鲁氏菌病检测方法
石 琴 ，袁立 岗 ，梁俊 明 ，蒲敬伟 ，杨红卫。
（ １ ． 新疆 生产 建设兵 团农 十二 师畜牧 兽 医工作站 ，新疆 乌鲁木 齐 ８ ３ ０ ０ ０ ９ ；
２ ． 新疆生产建设兵团畜牧兽 医工作 总站 ，新疆 鸟鲁木齐
三级 （ Ａ Ｂ Ｓ Ｌ 一 ３ ）或 者 四级 （ Ａ Ｂ Ｓ Ｌ 一 ４）实验 室认 可 证 书 的 实 验 室进 行 实 验 活 动 ，而 县市 级 兽 医 实 验 室一 般都 是Ａ Ｂ Ｓ Ｌ — ｌ 或Ａ Ｂ Ｓ Ｌ 一 ２ ，因此不 能进行 布 氏 杆 菌 的实验活 动 。
１ ． ２ Ｐ ＣＲ 技术
本文对 兽 医实验 室常用 和实 用 的布 鲁 氏菌病监 测方 法 的原 理及优 缺点 进行 了总结 。
用于布鲁氏菌种属的区分鉴别还可以区ｆ ｆ Ｊ － Ａ １ ９ 疫苗株
畜间布鲁氏菌病的血清学检测方法
2021年第1期 吉林畜牧兽医·经验交流·JingYan JiaoLiu畜间布鲁氏菌病的血清学检测方法白 翠1，马晓媛1，王 楠1，曹东阳1，胡泽宇1，李海燕2，郑 聪3，刁鹏翔41.吉林省动物疫病预防控制中心，吉林长春 130062；2.吉林省通化市二道江区畜牧兽医总站，吉林通化 134000；3.吉林省吉林市龙潭区江北乡畜牧兽医站，吉林吉林市 132000；4.吉林省吉林市昌邑区两家子乡畜牧兽医站，吉林吉林市 132000布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌引起的人畜共患的传染、变态反应性疾病。
病原体可以通过体表皮肤黏膜、呼吸道、消化道进入机体。
人感染布病主要是与职业、饮食和生活习惯有关。
由于布鲁氏菌感染一周后可出现特异性血清抗体，因此，国内外均用血清学试验检测该病。
方法主要有虎红平板凝集、试管凝集试验、胶体金免疫层析试验和酶联免疫吸附试验。
1 虎红平板凝集试验虎红平板凝集试验操作简单，价格便宜，但有时会产生假阳性和假阴性，适合大量样品的初筛。
1.1 材料准备1.1.1 虎红平板凝集抗原、标准的阳性和阴性血清，按说明书使用。
1.1.2 被检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。
1.1.3 洁净的玻璃板，其上划分成4 cm2 的方格。
1.2 操作方法1.2.1 试验前，将血清和抗原在室温恢复30 min。
1.2.2 在玻璃板上加入25 µL的被检血清。
1.2.3 被检血清旁加入等量的抗原。
1.2.4 用牙签类小棒混合均匀，在4 min内观察结果。
1.3 结果判定1.3.1 在阴阳对照成立的条件下，试验成立。
1.3.2 被检血清在4 min内出现肉眼可见凝集现象，为阳性（+）， 无凝集现象，呈均匀粉红为阴性（-）。
2 试管凝集试验操作时间比虎红凝集试验长，比较繁琐，但特异性较好，实用性也比较强，多用于复核。
2.1 操作过程2.1.1 血清的稀释牛、马、骆驼一般从1:50开始，稀释4个滴度；猪、狗和羊从1:25开始稀释，同样是4个稀释度。
布鲁氏菌的血清学检测方法
布鲁氏菌的血清学检测方法布鲁氏菌病（简称布病）是一种人兽共患的传染病，世界范围内流行。
布病给人造成了大量损失和痛苦。
近年由于布病的散发病例的增多，患者多无明确接触史，临床症状又不典型，因此其实验室检测至关重要。
目前布氏菌的实验室检测主要分三类：布氏菌细菌学检测、血清学检测和分子生物学检测。
细菌学检测周期长、阳性率低、感染风险高等特点，分子生物学对仪器、人员、技术的要求较高使得这两类技术在临床诊断应用上不是很普遍，应用最多的还是布氏菌的血清学检测。
本文现就布氏菌的血清学的检测进行如下综述。
布氏菌血清学方法可以分为：凝集法、补体结合法、酶联免疫吸附试验法、荧光偏振法、胶体金层析法等。
其中凝集法是通过特异性抗体与颗粒性抗原结合产生凝集的血清学实验，现应用最多的为虎红平板凝集实验、试管凝集实验、二巯基乙醇试管凝集实验、抗人球蛋白抗体实验等。
虎红平板凝集实验（RBPA）其抗原系用抗原性良好的牛种布氏菌株在适宜培养基上培养收获菌体, 经加热灭活, 离心后用虎红染料染色, 悬浮于乳酸缓冲液（PH3.6-3.7）制成。
它能抑制非特异性反应的IgM和增强特异性IgG 的活性, 其反应敏感稳定, 特异性优于试管凝集实验。
因此PBPA在很多国家推广使用, 是我国常规的诊断方法之一。
RBPA操作简单，不需要大型精密的仪器，适合基层医疗机构和检测点应用。
因有很高的灵敏性且能在短时间内完成，RBPA常用于初筛实验。
其有很高的准确性，特别是当检测1:4稀释血清标本阳性时其诊断的特异性更高【1】。
但RBPA也有局限性，纤维蛋白原可与虎红染料发生非特异性结合形成假阳性【2】，急性病人早期，体内产生的抗体以IgM为主，RBPA可能检测为阴性。
试管凝集实验(SAT)又称莱特试验是1897年由Wright发明，其方法简便，特异性强，可半定量检布鲁氏菌抗体滴度，因此有很高的诊断价值，至今在临床上广泛使用。
我国布病诊断标准中当SAT滴度≥1：100可确诊是活动性布病。
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ｌ ｆ ｕ ｉ ｄ ［ Ｊ ］ － Ｊ Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ Ｓ ｃ ｉ ，２ ０ ０ ５，６ （ ８ ） ：７ ８ ７ — ７ ９ ２ ． ［ ４ 】Ｋ ａ ｊ ｉ ｋ ａ ｗ ａ Ｈ，Ｖａ ｌ ｄ ｅ ｓ Ｃ，Ｈｉ ｌ ｌ ｍａ ｎ Ｋ，ｅ ｔ ａ １ ． Ｍｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｅ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｃ ｏ ｕ ｐ ｌ ｅ ｄ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｎ — ｓ ｉ ｎ ｋ ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｉ ｎ ｒ ｕ ｍ ｉ ｎ ａ ｌ ｌ ｆ ｕ ｉ ｄ ［ Ｊ ］ ． Ｌ ｅ ｔ ｔ ｅ ｒ ｓ ｉ ｎ ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，２ ０ ０ ３ ，３ ６（ ６） ：３ ５ ４ — ３ ５ ７ ．
“
２ 实验结果
通 过用 虎 红平 板凝 集试 验对 ２ ９ ０ 份 猪 、牛 、羊 血清 样 品进行 检
测 ，受检血清在４ ｍ ｉ ｎ 液体均匀混浊，元凝集现象，全部为阴性。
３ 讨论
（ １ ）本次 检测 无 阳性 牲畜 ，为 本病 的 防治提 供 了依据 。但 随 着 市 场 流通 的 活跃 ，特别 是 种畜 的购入 频 繁 ，因 此 ，每 年都 要 检
布 鲁 氏 菌病 是 由布 鲁 氏菌 引起 的 人 、畜 共 患 传 染 病 。 在 家 畜 中 ，牛 、羊 、猪 最 常发 生 ，且 可 由牛 、羊 、猪传 染 人 和其 他 家 畜 。其 特 征 是雌 雄 动 物生 殖 器 官 和胎 膜发 炎 ，引起 流 产 、不 育 和 各 种 组 织 的局 部 病 灶 ，雄 性 动物 则 出 现睾 丸 肿胀 、睾 丸炎 。本 病 广泛分布于世界各地 ，我 国目前在人 、畜 问仍有发生 ，给畜牧业 和人 类 的健康 带 来严 重危 害 。 近 年来 ，为 了 掌握 景 东 彝族 自 治 县现 阶 段畜 间布 鲁 氏菌 病 疫 源 和疫 病 流行 规 律 ，及 时发 现疫 情 隐 患 ，有 针对 性 地 开展 布 鲁 氏 菌 病 预 防控 制 工 作 。我 们 对 辖 区 内猪 、牛 、羊开 展 抽 样检 测 。其 中２ ０ １ ４ 年从 全 县 １ ３ 个 乡镇 采 集血 清 ２ ９ ０ 份 （ 猪１ ２ ６ 份 、牛６ ５ 份 、猪 ９ ９ 份 ）。监 测 时 间 猪 、羊 在５ 月 龄 以上 ，牛在 ８ 月 龄 以 上 ，怀 孕母 畜则 在 第 １ 胎 产后 半 个 月 至 １ 个月 ；本 次用 布 鲁 氏 菌病 常用 的方 法 虎 红平 板 凝集 试 验进 行检 测 。 （ ７ ）静置 ３— ４ ｍｉ ｎ ，再 拿起 玻 板 轻轻 转 动 ，按 下列 标 准记 录 反应 结果 ： ＋ ＋ ＋ ＋ ” 出现 大 的 凝 集块 ，液 体 完 全清 亮 透 明 ，即 １ ０ ０ ％凝 集； “ ＋ ＋ ＋ ”有 明显凝 集 片和 颗粒 ，液 体几 乎完 全透 明 ，￣ １ １ ７ ５ ％凝 集； “ ＋ ＋ ”可 以看 见颗 粒 ，液体 不 甚透 明 ，１ ￣ ｐ ５ ｏ ％凝集 ； “ ＋ ”仅 仅 可 以看 到颗 粒 ，但 液 体 混 浊 ， ￣ Ｐ ２ ５ ％凝集 ； 一液体 均 匀 混浊 ， 无凝 集现 象 。 １ ． ３ 结 果判 定 受检 血清 在４ ｍ ｉ ｎ 出现 肉眼可 以看 见凝 集现 象者判 为 阳性 。
［ １ 】 Ｗｕ ｅ ｂ ｂ ｌ ｅ ｓ Ｄ Ｊ ，Ｈａ ｙ ｈ ｏ Ｅ Ｋ． Ａｔ ｍｏ ｓ ｐ ｈ ｅ ｒ ｉ ｃ ｍｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ ｇ ｌ ｏ ｂ ａ ｌ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ［ Ｊ ］ ． Ｅ ａ ｒ ｔ ｈ Ｓ ｅ ｉ Ｒ ｅ ｖ ，２ ０ ０ ２ ， （ ５ ７） ：１ ７ ７ — ２ １ ０ ．
［ ２ ］ Ｔ ｈ ａ ｕ ｅ ｒ Ｒ Ｋ． Ｂ ｉ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ ｍｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｏ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｉ ｓ ：ａ ｔ ｒ ｉ ｂ ｕ ｔ ｅ ｔ ｏ Ｍａ ｒ ｊ ｏ ｙ ｒ Ｓ ｔ ｅ ｐ ｈ ｅ ｎ ｓ ｏ ｎ ． １ ９ ９ ８ Ｍａ ｒ ｉ ｏ ｙ ｒ Ｓ ｔ ｅ ｐ ｈ ｅ ｎ ｓ ｏ ｎ Ｐ ｒ ｉ ｚ ｅ Ｌ ｅ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ ［ Ｊ ］ ． Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， １ ９ ９ ８ ，（ １ ４ ４） ：２ ３ ７ ７ — ２ ４ ０ ６ ． ［ ３ ］ Ｈｕ Ｗ Ｌ，Ｇｕ ｏ Ｙ Ｑ，Ｌ ｉ ｕ Ｊ Ｘ，ｅ ｔ ａ １ ． Ｔ ｅ ａ ｓ ａ ｐ ｏ ｎ ｉ ｎ ｓ ａ ｆ ｆ ｅ ｅ ｔ ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ
１ 材料与 方法
１ ． １ 材料
（ １ ） 待 检血 清样 品存放 于 一 ２ Ｏ ｃ 冰柜内。 测 才 能掌握 疫 情动 态 。 （ ２） 玻璃 板 、刻 度 吸管 、牙 签 。 （ ２ ）加强 检疫 。引种 时检疫 ，引入后 隔离 观 察一 个月 ，确 认 （ ３） 布鲁 氏菌凝 集抗 原 、布 氏杆 菌 标 准阳性 血 清 、布 氏杆 菌 健 康后 方能 合 群 。
上 。
（ ３）定期 预 防 注射 。加 强疫 苗注 射 ，特别 是 种 畜 的 疫 苗 注 射 ，每 年注 射 。 （ ４ ）严格 消毒 。种 畜场 严格 按 消毒程 序进 行 消毒 ，粪便 作 发 酵 处理 。
［ ２ ］ 蔡 宝祥 ，沈正 达． 家 畜传染病 学【 Ｍ 】 ． 农业 出版社 ，１ ９ ８ ４ ．
一
离 得 到 的乙 酸生 成 菌数 量 和对 其认 识 有 限等 原 因 ，此方 法 也 无法 用 于 实 际操 作 ；去 除原 虫 可 以 降低 Ｃ Ｈ 产 量 ，通 过减 少 与 原 虫共 生 的产 甲烷 菌数 量来 实 现 ，但 目前 的去 原虫 技术 ，常 常存 在 对其 他 瘤 胃微 生 物或 动 物本 身 有 害 ，至今 还 没有 一种 能 应 用于 实 际生 产 的 去原 虫 技 术 ；离 子 载 体 型抗 生 素 也能 降 低 Ｃ Ｈ 的合 成 ，但 因 其 在体 内残 留 问题 ，在 生 产 当 中也遭 到 质疑 。因此 ，需要 对 产 甲 烷 菌 和其 他 微 生 物 的关 系 以及 Ｃ Ｈ 的合 成 机 理更 加 深 入 的研 究 了 解 ，利 用瘤 胃基 因 组技 术 和新 的 “ 组 学 ”技 术 ，不 断地 开 发 研究 降低 瘤 胃ｃ Ｈ 排放 的新 方法 。 参 考 文 献
中国畜牧 兽医文摘
２ ０ １ ５ 年
３ １ 卷
第７ 期
基 础 研 究 Leabharlann 家畜布鲁 氏菌病的血清学检测
孙 萍 毛德荣
６ ７ ６ ２ ０ ０ ） （ 云南省景东彝族 自治县 畜牧 兽医局动物疫病预 防控制 中心 ，云南景 东
［ 摘 要］ ２ ０ １ ４ 年从全县１ ３ 个 乡镇采集血清２ ９ ０ 份 （ 猪１ ２ ６ 份、牛６ ５ 份 、猪 ９ ９ 份 ），用布鲁 氏菌病常用的方法虎红平板凝集试验进 行检 测 。结 果 全部 为 阴性 ，为 防治 该病 提供 科 学依据 。 ［ 关键 词］猪 牛 羊 布 鲁 氏杆 菌病 检 测
标 准 阴性 血 清 、待检 血清 （ 恢 复 至常 温 ）、生 理 盐水 。 １ ． ２ 试 验 方 法 （ １ ） 取１ 个 洁净玻 片 ，用 蜡 笔划 成４ ｃ ｍ 的 方格 ，编 号
（ ２） 各方 格 分别 加待 检 血清 ０ ． ０ ３ １ ｍ。 （ ３） 对 照 ：阳性 一 阳性 血 清 ；阴性 一 阴性血 清 。 参考文献 （ ４） 用牙 签 混匀 ，摊 开 直径 ｌ ｃ ｍ 左右。 ［ １ ］ 吴 清民 ，苏敬 良． 兽医传染病学［ Ｍ ］ ． 北 京 ：中国农业 大学出版社 ， ２ ０ ０１ ． （ ５）将 凝 集 抗 原 摇 匀 ，垂 直 滴 一 滴 （ ０ ． ３ ｍ１ ）于 各 格 血 清
【 ５ ］ Ｗａ ｌ ｌ ａ ｃ ｅ Ｒ Ｊ ，Ｗ ｏ ｏ ｄ Ｔ Ａ，Ｒｏ ｗ ｅ Ａ，ｅ ｔ ａ １ ． Ｅ ｎ ｃ ａ ｐ ｓ ｕ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｆ ｕ ｍ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ａ ｓ ａ ｍｅ ａ ｎ ｓ ｏ ｆ ｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｉ ｎ ｇ ｒ ｕ ｍ ｉ ｎ ａ ｌ ｍｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｅ ｅ ｍｉ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ［ Ｊ ］ ． Ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｏ ｎ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ Ｓ ｅ ｒ ｉ ｅ ｓ ，２ ０ ０ ６， （ １ ２ ９ ３） ：１ ４ ８ — １ ５ １ ． ・５ ５・
（ ６） 用 牙签 类小 棒搅 动 血清 和抗 原使 之混 合 。 ３ ． ３ 植物提取物 关 于植 物 的 提 取 物 调控 反 刍 动 物 瘤 胃发酵 及 降 低 Ｃ Ｈ 排 放 是 目前 广 大学 者 研究 的热 点 。大 量 体 内试 验 和体 外 试验 表 明 植物 提 取 物会 影 响瘤 胃ｃ Ｈ 的生成 。 反 刍动 物 Ｅ ｔ 粮 中 添加 未 皂 化 的脂 肪 能 间接 或 直 接 的抑 制 Ｃ Ｈ 生 成 ，间接 作 用包 括 降 低不 饱 和 脂肪 酸 双 键 、降 低 饲料 摄 入量 、 抑 制 原 虫 及 增 加 丙 酸 产 量 ；直 接 作 用 及 脂 肪 酸 对 产 甲烷 菌 的 抑 制 作 用 。Ｍｃ ｇ ｉ ｎ ｎ 等 研 究 发现 牛 日粮 中添 加 向 日葵 油能 降低 乙酸 浓 度提高丙酸浓度 ，降低乙酸与丙酸的 比例。并且油脂对瘤胃Ｃ Ｈ 生 成 的 抑制 作 用 与 饲 料 组成 有 关 ，Ｍａ ｃ ｈ ｍｕ ｅ ｌ ｌ ｅ ｒ 研究 发现 ，与 粗 料 相 比 ，在 精 料 中添 加 椰 子 油对 Ｃ Ｈ 排 放 的抑 制 效 果 更好 。植 物 提 取 物 包括 皂 角 苷 、单 宁 、精 油 等 对 瘤 胃Ｃ Ｈ 产 生 有 显著 的抑 制 作 用 。 皂苷 主要 通 过 对 原 虫 的抑 制 作 用来 调控 反 刍 动 物 Ｃ Ｈ 的产 量 。单 宁对 产 甲烷 菌 具有 抑 制 作用 及 对 瘤 胃纤 维 降解 具 有促 进 作 用 ，故 富含 缩 合 单 宁 的 植 物能 降 低 绵 羊 和 牛瘤 胃Ｃ Ｈ 生成 ， 日粮 中添加缩合单宁能减少 山羊Ｃ Ｈ 的排放 。Ｈ ｕ 等体外培养使用高剂 量 的茶 皂苷 使 原虫数 量 下 降７ ９ ％，Ｃ Ｈ 。 产量 下 降２ ６ ％。 直 以来 ，科 研工 作 者 们一 直 在 不 断地 探 索 寻找 能有 效 降 低 瘤 胃Ｃ Ｈ 生 成 的 方 法 。 到 目前 为 止 ，已有 较 大 的 研究 进 展 ，根 据 Ｃ Ｈ 的 合成 机 理 ，发 现通 过 很多 途径 能抑 制并 降 低Ｃ Ｈ 的排 放 ，但 同 时很 多 研究 结 果 也 多少 存 在局 限性 ，因而 无 法应 用 到 实 际生 产 当中。如甲烷 卤化物可 以直接抑制Ｃ Ｈ 生成 ，但是由于其生物安 全性 差 或 抑制 时间 较短 ，不 适合 在 生 产 实际 中使 用 ；乙 酸生 成 菌 能与产 甲烷菌竞争氢离 子 ，使Ｃ Ｈ 产量 降低 ，但 是由于学者们分