六章物料处理与培养基制备-资料
培养基的配制-PPT
摆斜面：
◇ 成扎摆放，不需将每支试管单独摆放 ◇ 最好待培养基冷至60℃时摆斜面，以免形 成大量冷凝水
无菌检查：
将灭菌的培养基放在37℃温箱中培养24-48小 时，以检查灭菌是否彻底。
二 消毒与灭菌
实验目的
1、了解掌握常用消毒、灭菌方法的原理。 2、学习掌握干热灭菌和压力蒸汽灭菌操作步骤。
实验原理 干热法
压力蒸汽灭菌
实验内容及实验步骤 (continued)
1、检查水位，放入物品。
2、加盖、拧紧 对称用力 3、加热升温 4、排冷空气 等压力升至0.5kg/cm2时，打开排气 阀，排净冷空气。
5、升温、保压 等锅内压力升至所需数值（通常为
1.03kg/cm2），保持压力20-30分钟。
6、降压、取物
硝酸钾
1g
磷酸氢二钾 0.5 g
NaCl
0.5 g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁 0.01克
琼脂
15-20g
水
ml
pH
7.2-7.4
马铃薯蔗糖琼脂培养基：
把马铃薯洗净去皮，取200克切成小 块，加水1000毫升，煮沸半小时后， 补足水分。在滤液中加入15克琼脂， 煮沸溶解后加蔗糖20克补足水分 pH值调到7.2～7.4
99 mL无菌水 装三角瓶 6 瓶 9 mL无菌水 试管装 12 支 1 mL 吸管 15 支 牛肉膏蛋白胨固体培养基 斜面 5支
牛肉膏蛋白胨培养基配方：
牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 pH
3g 10g 5g 15-20g 1000ml 7.4-7.6
淀粉琼脂培养基（高氏培养基） ：
可溶性淀粉 20 g
分装：
操作步骤 (continued)
培养基及其制备汇总
一、按营养物质来源
3、半合成培养基 是一种既含有天然成分又含有纯化学 试 剂的培养基。又称半合成培养基。 琼脂未经处理的组合培养基也视为半 组 合培养基。 优缺点： 成分精确性、重演性、价格、 配制等
二、按培养基物理状态
1 、液体培养基： 呈液体状态的培养基。 用于： 大规模工业生产； 实验室摇瓶试 验； 微生物生理代谢研究。
快者为速效碳源，慢者为迟效碳源。
二、氮源利用及与碳源利用的关系
不同氮源的利用速度也不同。
如：铵盐比硝基氮更容易利用。
氨及铵盐等氮源的利用速度常随碳源的 利用速度而变。
糖代谢中间产物是氨基酸的前体。
氨浓度过高或过低，特别是过高，对某 些产物（如：青霉素）的形成不利。
三、碳氮比例的调节
碳氮比能直接影响微生物的生长和发酵 产品的积累。
五、前体物质
影响前体物质效力的因素
菌种的特性与菌龄(Cell age) 前体物质的投入量(Inoculation concentration)
青霉素产量（单位/ml) ７７５０ 青霉素Ｇ比例（％） 57.3 0.1
苯乙酸用量（％）
0.2
0.3 0.4
８５１５
９６３０ ９２００
73.0
90.6 95.6
二、按培养基物理状态
2 、固体培养基： 用于菌种培养、分离、保存，育种。 A.固化培养基： 液体培养基中加入适量凝固剂， 如：斜面、平板； B.天然固体培养基： 天然固态基质直接配置。 如：孢子培养，药用、食用真菌生产。
二、按培养基物理状态
3 、半固体培养基： 介于固态和液态之间（加0.5%左右 琼脂）的培养基。 用于菌种鉴定、细菌运动性观察和 噬菌体效价测定；厌氧菌培养、保藏。
《培养基及其配制》课件
添加抗生素或抑菌剂，选择性培养特定的微生。
3 固体培养基
用于在培养皿中培养微生物，便于观察和分离。
培养基的消毒方法
1 高温灭菌
2 化学消毒
通过高温蒸汽或干热处理， 将细菌、病毒等微生物杀 灭。
使用化学物质如酒精、次 氯酸钠等消毒培养基。
3 辐射消毒
利用紫外线或电离辐射对 培养基进行消毒处理。
3 研究工具
培养基在微生物学和细胞 学等领域中广泛应用，是 研究的重要工具。
培养基的配制方法
1
添加营养物质
2
根据细胞需要，在基质中添加有机或无
机营养物质。
3
消毒处理
4
通过高温、辐射等方法对培养基进行消 毒，以杀灭潜在的微生物。
选择基质
根据实验需求选择适当的基质作为培养 基的基础配方。
调整pH值
使用酸碱溶液调整培养基的pH值。
培养基的主要组分及其功能
营养物质
提供细胞生长所需的碳水化合物、氮源和无机盐 等。
生长因子
促进细胞分裂和增殖，维持细胞的正常功能。
胺基酸
作为蛋白质的组成单元，参与细胞代谢。
染色剂
用于观察和分析细胞的形态和结构。
常用培养基类型及适用领域
1 富养基
提供丰富的营养物质和生长因子，适用于细胞的扩增和生物制剂的生产。
《培养基及其配制》PPT 课件
欢迎来到《培养基及其配制》的PPT课件！本课件将带你深入了解培养基的定 义、配制方法以及常用类型和适用领域。让我们开始学习吧！
培养基的定义和作用
1 定义明确
了解培养基的具体定义和 主要作用，为后续内容提 供基础。
2 支撑细胞生长
培养基为细胞提供营养和 环境条件，促进其正常生 长和分裂。
《培养基的制备》课件
在制备培养基时，需要将 培养基中的气泡排除，以 确保培养基的质量。
3 除菌
必须对培养基进行严格的 除菌处理，以避免外源性 的微生物污染。
6. 结语
培养基的重要性
培养基是细胞培养和微生物研究的基础，对于科学 研究和产业应用具有重要意义。
经验总结
制备培养基时要注意操作规范，保持实验环境的清 洁，确保培养基的质量。
4. 培养基的贮存
1
贮存时间
不同类型的培养基有不同的贮存期限，要根据需要及时更新。
2
贮存温度
培养基应该在指定的温度下储存，避免因温度过高或过低而导致变质。
3
细菌培养
使用培养基时，必须遵循无菌操作，确保细菌的纯度和培养环境的卫生。
5. 培养基的常见问题
1 氧化
2 消泡
培养基暴露在空气中会发 生氧化反应，影响培养效 果，需在贮存时防止氧化。
《培养基的制备》PPT课 件
这是一个关于培养基制备的PPT课件，课件内容包括前言、培养基的组成、培 养基的配制、培养基的贮存、培养基的常见问题以及结语。
1. 前言
培养基是一种用于细菌、真菌和细胞培养的人工培养环境。它提供了细胞生长所需的营养物质和调节因子。
2. 培养基的组成
基Hale Waihona Puke 成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
辅助成分
提供额外的营养物质和调节剂，如洋菜、琼脂和血清等。
酸碱度调节剂
控制培养基的酸碱度，维持适宜的生长环境。
3. 培养基的配制
1
操作步骤
按照特定的步骤和顺序，将不同成分加
器材准备
2
入适量的溶液中，并进行搅拌和消毒处 理。
准备好所需的培养皿、量杯、瓶子、搅
实验六、培养基的制备及常用器皿的准备共18页文档
2g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 60g 30g 20g 1000ml
建议每班集中配1000ml， 然后均分到各组。
煮沸后倒入无塞三角瓶中，加棉塞灭菌。
四、实验方法和步骤
2、无菌水的制备（稀释用）
取 9 ml 蒸 馏 水 于 试 管 （ 18×180mm） 中 ， 塞 棉塞，报纸包扎后湿热灭菌。
三、实 验 器 材
1、培养基：营养琼脂培养基、改良查氏培养基。 2、器皿：移液管、培养皿、试管、三角瓶、搪瓷 缸、量筒等。 3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱。 4、其他：报纸、纱布、棉花、棉线绳。
实验所需物品
综合性实验每排5人一组，每组请备齐下列物品： 1、洗干净的培养皿10个。 2、洗干净的试管10个。 3、洗干净的无塞三角瓶2个，具塞三角瓶2个。 4、培养皿桶1个。 5、1-2ml刻度吸管3支。 6、洗耳球1个、玻璃棒1支。 7、搪瓷量杯1个。 8、量筒1个。 ➢ 纱布、棉花、棉绳、培养基、天平等在最后一排实验台
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取90ml蒸馏水于具塞三角瓶中。
手提小型高压蒸汽灭菌
立式高压蒸汽灭菌
四、实验方法和步骤
四、实验方法和步骤
4、常用器皿准备（干热灭菌）
a. 刻度吸管的包装 b. 培养皿的包装
电热鼓风干燥箱（干热灭菌用）
五、 作 业 题
1、高压蒸汽灭菌和干热灭菌各适用于哪 些物品？ பைடு நூலகம்、两种灭菌技术应注意哪些关键操作？ 3、培养皿等干热灭菌前包扎的目的？
一、实验目的及要求
1、学会培养基的制备和常用器皿的准备 方法。 2、学会高压蒸汽灭菌及干热灭菌方法。
二、实 验 原理
培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。 培养基的种类很多，使用的原料也各有差异。但 从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所需的 C源、N源、无机盐、生长因子以及水等。另外， 培养基中一般含有适宜的pH值，一定的氧化还原 电位及合适的渗透压。 任何一种培养基制成后应及时的灭菌，以备培养 菌使用，一般培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌。
培养基的制备的原理
培养基的制备的原理
培养基的制备是为了提供细胞或微生物生长所需的营养物质和理想的生长环境。
其制备原理包括以下几个方面：
1. 选择合适的基质：基质是培养基的重要组成部分，常用的基质包括蔗糖、葡萄糖、有机氮源、盐类等。
选择合适的基质可以提供必要的能量和营养物质，促进细胞或微生物的生长。
2. 调节pH值：细胞或微生物对pH值敏感，所以在制备培养
基时需要调节pH值至适宜的范围。
常用的pH调节剂有盐酸
和氢氧化钠。
3. 添加生长因子：某些细胞或微生物只能在特定的生长因子存在下生长。
因此，需要根据不同物种的需求，在培养基中添加所需的生长因子，如维生素、氨基酸等。
4. 控制温度：细胞或微生物的生长受温度的影响，因此在培养基制备过程中，需要根据不同物种的需求，控制培养基的温度，以提供适宜的生长环境。
5. 灭菌处理：在制备培养基之前，需要对培养基进行灭菌处理，以杀死其中的有害微生物，确保培养基的纯净度。
总之，培养基的制备依靠选择适宜的基质、调节pH值、添加
生长因子、控制温度以及进行灭菌处理等方法，以提供细胞或微生物适宜的营养和生长环境。
物料处理与培养基制备
根据原料淀粉的性质和水解使用的催化剂(catalyst)的 不同
酸解法（acid hydrolysis process) 水解的方法 酶解法( enzymatic hydrolysis process)
• 1、糖液葡萄糖含量：20%
• 2、 糖液洁净，呈杏黄色或黄绿色
• 3、 透光率：90%以上
• 4、 糖液不含糊精(dextrin)
• 5、 糖液不能变质
• 6、转化率：90%左右
•
转化率=
•
水解糖液数量（升）含糖量（%） 100%
• 投入淀粉量（公斤） 原料淀粉中含纯淀粉% 1.11
一、淀粉水解糖制备的方法
涨缩式糖蜜连续稀释器
通过器径的改变而使 物料的流动状态发生改变， 从而促进物料的均匀混合
例2 淀粉水解糖的制备
淀粉颗粒呈白色，不溶于冷水和有机溶剂，其内部呈复 杂的结晶组织
意义：很多微生物都不能直接利用淀粉(amylum) ，因为它们 不含淀粉酶和糖化酶。因此，在发酵生产之前，必须将淀粉 水解为葡萄糖，才能供发酵使用。
优点：可采用粗原料淀粉，淀粉浓度（13Be'）较酸 法（10Be' ）高，生产易控制。时间短，淀粉水解副 反应少。
二 淀粉酸水解的原理
淀 直链淀粉(amylose)：- 1，4葡萄糖苷键缩合，聚合度小。 粉 支链淀粉(amylopectin)： -1，4键、- 1，6键，聚合度大。 淀粉水解过程的变化：
被粉碎
剪切破碎：物料受到剪切力的作用而被破
碎
劈裂粉碎：物料被刀形面劈开而使物料破
碎
(3)粉碎设备
培养基的配制过程
培养基的配制过程
培养基的配制过程
培养基是实验中常用的培养材料，其质量和性能对试验数据的准确性有很大的影响。
合理配制培养基，是保证实验质量和可靠性的重要一步。
以下分步介绍培养基配制过程。
第一步，准备原料。
准备所需培养基原料，包括氮来源、碳来源、催化剂、维生素、矿物质和无机盐。
这些原料及添加量应按照培养基配方要求准备好。
第二步，蒸馏水灭菌。
所有材料，包括悬浮成分在内的所有培养基，都应使用蒸馏水加热灭菌。
第三步，全部成分混合。
将所有成分混合搅拌均匀，直到培养基完全溶解，形成无色透明液体。
第四步，灭菌处理。
将混合后的培养基放入灭菌器中，以121℃、
15psi的压力对培养基进行30-60分钟的高温杀菌处理。
第五步，检测培养基。
检测培养基的 pH 值，通常可用 pH 计或试纸检测。
第六步，培养基存储。
将灭菌后的培养基储存在4℃的冰箱内，以避免受到可能的污染。
以上就是培养基的配制过程，它可以有效地确保培养基的质量和可靠
性，从而确保实验效果的准确性。
正确的配制培养基非常重要，只有这样才能确保实验的可靠性和准确性。
培养基制作流程
培养基制作流程
培养基制作是微生物学实验室中常见的操作之一，以下是一个常用的培养基制作流程：
1.准备所需的原料和仪器设备：包括葡萄糖、琼脂、氨基酸、
无菌试剂瓶、试剂架、电子天平、移液器、自动移液器、电磁加热板等。
2.称取原料：按照特定的配方，按照一定比例称取所需的原料。
3.混合溶解：将称取好的原料放入无菌试剂瓶中，加入适量的
蒸馏水，混合搅拌溶解。
4.调节pH：使用pH计测量溶液的pH值，根据实验需要，调
节溶液的pH值。
5.均匀加热：将配制的溶液倒入适量的琼脂培养基瓶或琼脂平
板上，放入电热器或电磁加热板上，用适当的温度加热，直至琼脂完全融化。
6.灭菌：将加热好的培养基进行灭菌处理，常用的灭菌方法包
括高压蒸汽灭菌和滤过灭菌。
7.培养基包装：将灭菌后的培养基倒入装有无菌琼脂培养皿中，使用无菌包装袋密封或使用密封无菌瓶盖。
8.质量控制：对制作好的培养基进行质量控制，如检测无菌性、
水分含量、pH值等。
以上是一个常规的培养基制作流程，根据实验的具体要求和不同的培养基种类，操作步骤和原料配方可能会有所不同。
培养基制备方法
培养基制备方法
引言
本文档旨在介绍培养基制备的一种简单而有效的方法。
培养基是用于细菌、真菌或细胞培养的基础营养液，对于科研实验以及生物制药等领域起着至关重要的作用。
材料与设备
以下是本方法制备培养基所需的主要材料和设备：
- 蔗糖：用作能源供应
- 酵母提取物：提供必要的氮源
- 高锰酸钾：用于抑制细菌污染
- 磷酸二氢钾：提供磷源
- 硫酸镁：提供镁离子
- 氯化钙：提供钙离子
- 水
- 烧杯和容量瓶：用于容量的测量和混合
制备方法
按照以下步骤制备培养基：
1. 首先，将适量的水加入烧杯中。
2. 将蔗糖、酵母提取物、高锰酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁和氯
化钙按照给定比例加入烧杯中。
3. 充分搅拌混合，确保所有成分均匀分散。
4. 用过滤器或无菌操作，将培养基转移至无菌容量瓶中。
5. 根据需要，调整pH 值，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
6. 用无菌蒸馏水将容量瓶中的培养基补满至标定线。
7. 密封，通过高压灭菌器（autoclave）高压灭菌，确保培养基
无细菌污染。
8. 灭菌后，将培养基冷却至室温后即可使用。
结论
通过上述简单的步骤，我们可以制备出一种基础的培养基，适
用于细菌、真菌或细胞的培养。
当然，根据不同的应用和研究需求，
可以调整配方和浓度以满足特定要求。
培养基的制备对于科研实验和生物制药至关重要，因此我们建议严格按照无菌操作以及实验室安全规范来执行制备过程。
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粉质原料的蒸煮糖化设备的特点、原理、结构与工艺操
作
2020/5/13
第一节 固体物料的处理与粉碎设备
一、固体物料的筛选除杂设备 （一）谷物原料粗选设备
• 三层孔径不同筛面 • 振动筛的轴转速：350-450r/min，偏心
距25-30mm。 • 风速: 进口4-6m/s，出口4-7m/s
2020/5/13
二、固体物料粉碎设备
粉碎目的：加快物料蒸煮、液化、糖化、发酵 的反应速度。
粉碎方法： 1）湿粉碎,2）干粉碎 干粉碎分为： a、挤压,b、冲击,c、磨碎,d、剪切,e、劈碎
2020/5/13
1、锤式粉碎机
1）原理 由于转盘高速旋转，使得 锤刀获得猛烈的冲击力 ，把物料粉碎。
2）两个关键部件 锤刀， 筛网
(二)大麦的精选及分级设备
1、大麦精选机 原理：利用杂粒与大
麦长度不同的特点 进行分离
(1）碟片式精选机
主要构件:由一组两侧开有 许多袋孔的同轴碟片组成
2020/5/13
2020/5/13
2）滚筒精选机
主要 构件： 是一个 内表面 开有袋 孔的旋 转圆筒
2020/5/13
2 大麦分级设备
1）平板 分级筛 由三种不同规 格筛孔的筛面 组成
真空冷却器的原理构造和计算
原理:物料在一定真空度下蒸发部分水 ，需要汽化潜热，取自料液本身，因而 料液很快被冷却到真空相应的温度，称 为真空冷却。
欲保持真空冷却器中真空度，一般要 借助于水力喷射泵或蒸汽喷射泵，连续 地抽去真空冷却器中的二次蒸汽。
2020/5/13
冷粉浆
粉浆
热热粉粉浆浆
3、汽液分离器
• 操作要求： （1）分离出二次蒸
汽 （2）装料率为50%
2020/5/13
4、真空冷却器
冷水入口
料液入口
• 优点：蒸煮醪在骤
然冷却下，形成结
晶状的小粒。 糊化醪冷却温度
料液出口
水池
:100℃→60℃
真空度：70-80kPa
• 冷水池入口
2020/5/13
操作过程：长圆筒与封头焊成， 粉浆由罐底进料口压入，用活汽加 热蒸煮
，加热达要求的物料经罐顶出料 口流出入后熟罐，物料出口管伸入 罐内
300-400mm（使罐内留有一定 的空间）从罐中部6引出部分糊化 醪去制备液体曲。
2020/5/13
2.连续式蒸煮罐
它由三层直径不同的套 管组成。内层和中层管 蒸汽 上都钻有很多小孔，各 层套管用法兰连接。粉 浆流过中层管，高压加 热蒸汽从内外两层管的 小孔内喷出，使热粉浆加 热，这种形式汽液接触 均匀，加热较全面，可 在很短时间内使粉浆达 到规定的蒸煮温度。
生产能力
G=Bq（kg/h）
2020/5/13
(2）圆筒分级筛筒筛面分段布置不同孔径
生产能力 G=qПDLΨ（kg/h）
两种分级设备的比较：圆筒分级筛设备较简单、ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ机传 动较方便，但筛面利用率较小。
2020/5/13
二、固体物料粉碎设备
粉碎目的：加快物料蒸煮、液化、糖化 、发酵的反应速度。
2020/5/13
2020/5/13
(3）错板式糖蜜稀释器
主体:立式圆筒 特点：圆筒内有10-15块 档板成600角设置
2020/5/13
4）胀缩式糖蜜稀释器
主体： 立式变径圆筒 特点： 中间几次突然收缩直径
2020/5/13
5）变管径式糖蜜稀释器
主体：立式变径圆筒 特点： 由几种不同管径的 直管段连接而成
2020/5/13
2020/5/13
2020/5/13
振动筛的作用：麦芽经第一 对辊筒粉碎后，由振动筛筛选 分离出皮壳从筛面上排出，细 粉从筛下送出，还需要再粉碎 的物料进入第二对辊继续粉碎。
四辊：第一对是光 辊，第二对为丝辊两对辊筒， 一组筛子，麦芽经第一对辊粉 碎后，由筛 分装置分离出皮壳 排出，粉粒再进入第二对辊筒 进一步粉碎。
1 大 麦 粗 选 机
2020/5/13
2 、磁力除铁器 方法：
采用永久磁钢磁选
(1)固定型磁钢装置
2020/5/13
(2)永磁滚筒
磁铁滚筒由 转动的外筒 和其中固定 不动的磁铁 芯组成
2020/5/13
(二)大麦的精选及分级设备
1、大麦精选机 原理：利用杂粒与大麦长
度不同的特点进行分离
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第六章 物料处理与培养基制备
2020/5/13
计划
➢ 授课时间
2学时
➢ 单元目标与要求
➢ 掌握固体物料处理与粉碎设备的结构、液体培养基的 制备及杀菌设备的结构原理与工艺操作。
➢ 授课内容
➢ 固体物料的处理与粉碎设备，液体培养基的制备及杀 菌设备。
➢ 重点和难点：
➢ 锤式与辊式粉碎设备的特点、原理、结构与计算。淀
第二节 液体培养基的制备及杀菌设备 一、糖蜜原料的稀释与澄清 1、间歇式稀释设备 为敞口容器
2020/5/13
2、糖蜜连续稀释器
主体：圆筒水平管 特点：管内装有若 干隔板和筛板，将其 分成若干空段，以改 善糖液的流动形式， 使糖蜜与水很好地混 合。
2020/5/13
(2）立式糖蜜稀释器
主体： 立式圆筒 特点：圆筒部分 有7-8板半圆形 缺口的隔板左右 交替配置
二、淀粉质原料的蒸煮糖化设备
（一）蒸煮目的 1、破坏淀粉颗粒的外皮，使其内容物流出，呈溶解状
态变成可溶性淀粉，便于糖化剂作用。 2、灭菌。 (二)蒸煮和糖化 1.连续蒸煮有低温长时间的罐式连续蒸煮，中温的柱式
连续蒸煮和高温短时间的管式连续蒸煮。 2. 对连续糖化的要求主要是使糊化醪与曲液充分混合，
3）产能力
Q = kD1Lρ (kg/h）
4）功率消耗
N = kD21Ln （kW）
2020/5/13
1、辊式粉碎机
原理 利用两辊筒相对转动把物料压碎 麦芽粉碎要求 大米粉碎要求
2020/5/13
(1）两辊式粉碎机
2020/5/13
3）多辊粉碎 特点: 多辊、振动筛
以2.5~6m/s,相向运动，有一定的速度差，作用是提高对物料的剪切力， 增加破碎度；辊一个用螺栓固定在机架上，一个可以移动 .
在一定温度下维持一定时间，并保持流动状态，以便 于酶的作用。
2020/5/13
罐式连续蒸煮糖化的特点：
１、采用喷射加热器连续加热，节 省
２、操作容易控制； ３、设备结构简单，为大中型工厂
广泛采用； ４、采用真空冷却器冷却，提高效
率，降低费用。
2020/5/13
1、连续式蒸煮罐
结构主体:圆筒与封头焊成 易损部件:下封头 罐径： D/H = 3-5 罐数：4-6个