20学时微生物实验讲义
微生物学实验讲义
实验二实验器具的灭菌一、实验目的1.学习并初步掌握和各种实验器具的包扎及高压蒸汽灭菌的方法。
2.了解其他灭菌方法。
二、基本原理高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
其基本原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加，在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃，在此温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
三、器材1、高压蒸汽灭菌锅2、牛皮纸3、棉绳4、仪器和其他用具四、操作步骤1、包扎将各种实验器具进行合理规范包扎后，要用牛皮纸覆盖，最后用棉绳系紧。
2、加热烧开待高压锅内的水烧开，将包扎好的器具放入锅内的桶内，最后放入高压锅。
3、升压完全排除锅内空气后，关闭放弃阀，待压力上升到0.1MPa时，开始计时，维持压力0.1~0.15MPa 20分钟。
4、减压，取出器具到达保压时间后，即可切断电源，压力降到0.5MPa时，可缓慢放出蒸汽，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。
当压力降到零后，才能开盖。
五、思考题（1）、你认为那些环节会影响高压灭菌的效果？如果影响，请简述其中最关节的环节是什麽？实验三牛肉膏蛋白胨培养基的配制—、目的要求1、明确培养基的配制原理2、通过对基础培养基的配制，掌握培植基的一般方法和步骤。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏 3.0g蛋白胨10.0gNaCI 5.0g水1000mIpH 7.4～7.6三、器材1、溶液和试剂牛肉膏，蛋白胨，NaCI,琼脂，1 moI/L NaOH, 1 moI/L HCI。
2、仪器和其他用品试管，三角瓶，烧杯，量筒，破棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH试纸（pH5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
四、操作步骤1、称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨，NaCI放入烧杯中。
微生物学实验ppt课件
器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等，不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落，了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌 落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖，通过提供适宜的细胞环境， 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需 求、代谢产物等，进行进一步的分类 鉴定。
《微生物学》讲义
微生物学第一章第一章绪言一、一、微生物概述1、1、什么是微生物微生物(microbe，microorganism)通常是描述一切不借助显微镜用肉眼看不见的微小生物。
这类微生物包括病毒、细菌、古菌、真菌、原生动物和某些藻类。
微生物是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。
因此，微生物通常包括病毒、亚病毒（类病毒、拟病毒、朊病毒）、具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌（酵母、霉菌、蕈菌等）、原生动物和单细胞藻类，它们的大小和特征见表1.1所示。
但是有些例外，如许多真菌的子实体、蘑菇等常肉眼可见；相同的，某些藻类能生长几米长。
一般来说微生物可以认为是相当简单的生物，大多数的细菌、原生动物、某些藻类和真菌是单细胞的微生物，即使为多细胞的微生物，也没有许多的细胞类型。
病毒甚至没有细胞，只有蛋白质外壳包围着的遗传物质，且不能独立存活。
表1.1 微生物形态、大小和细胞类型2、2、生物中哪些是微生物物生非细胞生物病毒、亚病毒细胞生物原核生物真细菌、古细菌真核生物生动物真菌、单细胞藻类、原3、3、微生物的特点a a 个体微小，结构简单在形态上，个体微小，肉眼看不见，需用显微镜观察，细胞大小以微米和纳米计量。
b b 繁殖快生长繁殖快，在实验室培养条件下细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代。
c c 代谢类型多，活性强。
d d 分布广泛有高等生物的地方均有微生物生活，动植物不能生活的极端环境也有微生物存在。
e e 数量多在局部环境中数量众多，如每克土壤含微生物几千万至几亿个。
f f 易变异相对于高等生物而言，较容易发生变异。
在所有生物类群中，已知微生物种类的数量仅次于被子植物和昆虫。
微生物种内的遗传多样性非常丰富。
所以微生物是很好的研究对象，具有广泛的用途。
二、二、微生物学的重要性微生物与人类生活所有方面紧密联系，下面仅列出几个：1、1、环境微生物在碳循环、氮循环和磷循环(地球化学循环)中承担主要作用，构成生物体的所有基本成分。
医学微生物学实验课件
《医学微生物学实验课件》xx年xx月xx日contents •实验一：细菌的分离与培养•实验二：细菌的形态学观察•实验三：细菌的生化试验•实验四：病毒的分离与鉴定•实验五：抗体的制备与检测•实验六：微生物的耐药性测定目录01实验一：细菌的分离与培养掌握细菌分离与培养的基本方法和技能。
学习如何进行细菌的分离、纯化及培养。
了解细菌的生长繁殖及代谢过程。
实验目的实验原理01细菌分离培养是微生物学实验的基本技术之一，通过分离培养可以将混合菌群中的单一菌种分离出来，以便进行鉴定和研究。
02细菌的生长繁殖是微生物学研究的重要内容，通过观察细菌的生长曲线可以了解其生长规律和繁殖方式。
03细菌的代谢过程是微生物学研究的另一个重要方面，通过观察细菌的代谢过程可以了解其代谢类型和能量产生方式。
1. 准备实验器材：培养皿、接种环、培养基、显微镜等。
2. 将培养基倒入培养皿中，用接种环取菌种划线接种于培养基上。
3. 将接种后的培养皿放入恒温器中进行培养。
4. 观察记录细菌的生长情况，包括菌落的形态、大小、颜色等。
5. 进行菌种的纯化及鉴定，包括革兰氏染色、生化反应等。
实验步骤02实验二：细菌的形态学观察实验目的掌握细菌的基本形态学特征。
学习使用显微镜观察细菌的方法。
了解不同类型细菌的形态学特点。
细菌是一种单细胞微生物，具有多种形态，如球形、杆状、螺旋形等。
显微镜是观察细菌形态学特征的重要工具，通过观察不同倍数下的细菌形态，可以识别和区分不同类型的细菌。
细菌的形态学特征与其分类、致病性及对药物的敏感性有关。
实验原理实验步骤2. 将细菌样本涂抹在载玻片上，用盖玻片轻轻盖上。
3. 将载玻片放置在显微镜载物台上，调整焦距，使细菌形态清晰可见。
5. 清洗载玻片和盖玻片，并妥善保存。
4. 观察不同倍数下的细菌形态，记录其特征。
1. 准备实验材料：显微镜、细菌样本、显微镜油、擦镜纸等。
03实验三：细菌的生化试验实验目的掌握细菌生化试验的原理和方法。
生物技术微生物学实验讲义
实验一革兰氏染色实验一、目的要求1、学习并初步掌握革兰氏染色法2、了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。
二、基本原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884年由丹麦医师Gram创立的。
革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。
细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。
革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic dye）初染液；媒染剂（mordant）；脱色剂（decolorising agent）和复染液（counterstain）。
碱性染料初染液的作用象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫（crystal violet）。
媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落，碘（iodine）是常用的媒染剂。
脱色剂是将被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95％的酒精（ethanol）。
复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染液，复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色，从而将细胞区分成G+和G-两大类群，常用的复染液是番红。
微生物学实验讲义全
微生物学实验讲义全实验四显微测微技术及细菌运动性观察一、目的要求1．了解测微尺的构造和使用，学会测量微生物细胞大小的方法。
2．学习悬滴法观察细菌运动性技术二、实验原理(一) 显微测微技术微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
其大小的测量需在显微镜下用目镜测微尺来进行，但由于测量的是放大后的图像，故目镜测微尺在不同放大倍率下每格实际代表的长度也随之变化，因此，需用物镜测微尺来校正在不同放大倍率下目镜测微尺每格所代表的实际长度。
物镜测微尺是中央刻有精确刻度的载玻片，一般是将1 mm等分为100格，每格长0.01 mm，即10 pm，它不直接用于测量细胞大小，而是用于校正目镜测微尺的每格的相对长度。
目镜测微尺是一个可放人接目镜的直径均为1.75 mm的圆形玻片，其中央有精确的等分刻度(有50格和100格两种)测量时，需将其放人接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象。
(二) 细菌运动性在显微镜下观察细菌的运动性，也可以初步判断细菌是否有鞭毛。
通常使用压滴法或悬滴法观察细菌的运动性。
观察时，要适当减弱光线，增加反差，如果光线很强，细菌和周围的液体就难以辨别。
三、实验器材1．活材料：培养12-16h的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母2．试剂：香柏油、二甲苯、凡士林等。
3．器材：目镜测微尺，物镜测微尺、凹载玻片、盖玻片、镊子、接种环、滴管、擦镜纸、显微镜。
四、操作步骤(—) 显微测微技术1．装目镜测微尺：取出接目镜，把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的隔板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插人镜筒内。
2．校正目镜测微尺(1) 将物镜测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上(2) 先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺刻度与物镜测微尺的刻度平行。
利用移动器移动物镜测微尺，使两尺的第一条刻度线相重合，再向右寻找另外两条重合的刻度线，分别数出两重合线之间物镜测微尺和目镜测微尺所占的格数，由下列公式算出目镜测微尺每格所代表的长度。
微生物实验课讲解共59页文档
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
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30、风俗可以造就法律，也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
微生物实验课讲解
谢谢！
36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
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26、我们像鹰一样，生来就是自由的 ，但是 为了生 存，我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子，然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索
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27、法律如果不讲道理，即使延续时 间再长 ，也还 是没有 制约力 的。— —爱·科 克
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28、好法律是由坏风俗创造出来的。 ——马 克罗维 乌斯
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29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中，哪 里没有 法律， 那里就 没有自 由。— —洛克
微生物实验讲义
微生物学实验讲义绪论实验课的目的与要求1.普通微生物学实验的目的掌握微生物的基本操作技能, 了解微生物学的基本知识；加深对课堂理论的理解。
同时培养同学认真观察思索、分析解决问题的能力和严肃认真的科学态度。
2.普通微生物学实验课的要求a、实验预习了解实验的目的和原理, 做到每一步实验都心中有数。
b、实验观察和记录微生物实验的连续性较强, 实验中也较常出现突发情况, 所以要求同学认真细致观察, 如实记录。
c、实验结果要求同学实事求是地填写实验结果, 交给老师评阅。
d、爱护公共财物并维护公共秩序:公用的仪器药品用后放回原处。
对精密仪器（显微镜、天平）细心维护, 轻拿轻放。
从冰箱或温箱取放物品时要随时关门。
对消耗性的材料、用品、药品要厉行节约（擦镜纸、滤纸条等）。
3.实验室规则微生物实验不同于动、植物实验, 我们会经常接触到一些致病菌或条件致病菌, 所以希望大家严格遵守无菌操作, 为保证自身及他人的健康, 以防污染或感染。
a、实验室的整洁非必需书、物品请勿带入实验室, 不得在室内吸烟、进食, 实验后收拾、擦净桌子。
b、实验时的需小心如遇到盛菌试管打破或皮肤破伤要及时处理。
c、实验培养的材料标明自己的组别、处理方式, 放入教师指定地点培养。
d、实验后的灭菌所用物品可进行3%来苏水浸泡消毒或高压灭菌。
e、实验前后工作之前先洗手, 工作后用肥皂洗手。
f、离开实验室一定关闭、水、电、门、窗。
第一部分微生物的染色与形态结构的观察基本原理: 虽然可以用相差显微镜等直接观察微生物的形态特征, 但其应用有局限性；用电子显微镜可以观察到微生物的各种形态结构, 但因其价格昂贵、设备条件要求高、操作也较复杂, 应用上也受一定限制。
所以, 一般实验室仍常用普通光学显微镜来进行微生物形态学特征的观察。
然而, 微生物（尤其是细菌）细胞小而透明, 当把细菌悬浮于水滴内, 用光学显微镜观察时, 由于菌体和背景没有显著的明暗差, 因而难以看清它们的形态, 更不易识别其结构, 所以, 用普通光学显微镜观察细菌时, 往往要先将细菌进行染色, 借助于颜色的反衬作用, 可以更清楚地观察到细菌的形状及其某些细胞结构。
《医学微生物学》理论教学大纲.doc
《医学微生物学》课程代码：总学时：64学时（其中理论讲授：40学时，实验：20学时）总学分：课程类别：必修开课对象：医学类专业（本科）一、课程性质《医学微生物学》是医学教学基础课程之一，是研究与医学有关的病原微生物的生物学形状、感染与免疫的机理以及特异性诊断和防治的学科。
其基本理论包括细菌学部分、病毒学部分和真菌学部分。
二、教学目的和要求通过本课程的学习，使学生掌握细菌学部分、病毒学部分和真菌学部分的基础理论、基础知识和基本技能，为进一步学习基础医学、临床医学及有关课程和对微生物所致疾病的诊断、预防及治疗奠定基础。
三、有关教学方法和教学手段的原则性建议1、教学中要认真贯彻执行社会主义、爱国主义教育，坚持用辨证唯物论的观点，对学生进行基础理论、基本知识、基本技能的训练，同时要有目的、有重点地介绍本学科国内外研究的动态、方向和新成就，以扩大学生的知识面。
2、要以微生物研究的方法贯穿实验教学全过程，通过操作或演示，使学生了解微生物研究的过去、现在和将来发展的方向，要对学生进行实验结果分析、资料总结方面的训练，以培养独立思考、分析和工作的能力。
四、教学大纲的使用说明1、本大纲的内容是以陆德源主编《医学微生物》（第五版）教材的章节顺序编写，分为细菌学、真菌学和病毒学等三篇，共35章，总学时为64学时，其中理论与实验之比为2:1,实验考核2学时。
2、在授课过程中，教师可根据不同章节内容，采用不同教学方式传授，或以讲授为主、或携领式指导学生自学、或以实验带理论等多种灵活形式进行教学，以调动学生学习的主观能动性。
3、本大纲是我教研室教师在多年教学中共同努力工作的结晶，在大纲编写之际，我们对所有帮助过我们的各位教授（师）表示深切的谢意。
大纲正文五、教学内容及学时分配绪论学时：1学时（讲课1学时）【目的要求】掌握微生物的定义、微生物的种类（包括非细胞型微生物、原核细胞型微生物和真核细胞型微生物等三型八大类）。
掌握医学微生物与人类的关系。
《微生物实验》全套教学课件
各类微生物的形态与 结构
微生物的分类与命名
实验室安全与操作规范
实验室安全制度及应急措施 实验废弃物处理与环保要求
实验操作规范及注意事项
常用仪器设备及使用方法
01
02
03
04
显微镜的使用与维护
培养基的制备与灭菌方法
接种与分离纯化技术
微生物计数与生长测定方法
实验数据处理与分析方法
• 实验数据的记录与整理 • 数据统计分析与图表制作 • 实验报告撰写与学术交流技巧 • 以上内容涵盖了微生物实验的基础知识、实验技能、数据处
03
酶联免疫吸附试验的操作步骤
详细阐述酶联免疫吸附试验的实验果判定等。
其他免疫学技术在微生物实验中的应用
01
02
03
04
免疫印迹技术
介绍Western blot等免疫印 迹技术在微生物蛋白质检测和
分析中的应用。
免疫沉淀技术
探讨免疫共沉淀等技术在研究 微生物蛋白质相互作用中的应
详细阐述免疫荧光技术的实验步骤，包括样品的 制备、荧光素标记抗体的选择和使用、荧光信号 的观察和记录等。
酶联免疫吸附试验原理与操作
01
酶联免疫吸附试验的基本原理
解释抗原或抗体与固相载体结合后，通过酶标记的抗体或抗原与待测物
结合，加入底物后产生颜色反应的检测原理。
02
酶联免疫吸附试验的类型
介绍双抗体夹心法、间接法、竞争法等不同类型的酶联免疫吸附试验。
定期观察真菌在培养基上的生长情况 ，记录菌落形态、颜色、质地等特征 ，并观察菌丝、孢子等微观结构。
接种与培养
采用无菌操作技术，将待观察的真菌 接种到培养基上，置于适宜的温度和 湿度条件下进行培养。
微生物学实验讲义
实验一玻璃器皿的洗涤、包扎与灭菌一、目的要求1、熟悉微生物实验所需的各种常用器皿名称和规格；2、掌握对各种器皿清洗方法；3、掌握玻璃器皿的干热灭菌操作过程；4、了解手提式高压蒸汽灭菌锅的结构、使用方法和操作要点。
二、基本原理为了保证实验顺利进行，要求把实验用器皿清洗干净。
保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎。
试管和三角瓶要做棉塞。
这些工作看来很普通，如操作不当或不按规定要求去做，会导致实验的失败。
因此应看作是微生物实验的基本操作。
灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生物的营养体，包括芽胞和孢子。
灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。
本实验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。
加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。
通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。
细胞内的蛋白质凝固变性与其自身含水量有关，含水量越高，其凝固所需要的温度越低。
在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时湿热的穿透力强；湿热的蒸汽有潜热存在，从而增加灭菌效力。
三、实验器材1、吸管，试管，三角瓶，试管刷，棉花，报纸、包扎绳、去污粉等；2、手提式高压蒸汽灭菌锅。
四、实验步骤1、玻璃器皿的洗涤清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，因此，玻璃器皿的清洗是实验前的一项重要准备工作。
1）不能用有腐蚀作用的化学试剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦拭玻璃器皿；新的玻璃器皿应用酸性溶液（2%的盐酸溶液）浸泡数小时，再用自来水冲洗干净。
2）用过的器皿应立即洗涤。
3）强酸，强碱，琼脂等能腐蚀，阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须到在废物缸内。
一般的器皿都可用去污粉，肥皂或配成5%的热肥皂水来清洗。
油脂很重的器皿应先将油脂擦去。
沾有煤膏，焦油及树脂一类物质，可用浓硫酸或40% 氢氧化钠或用洗液浸泡；沾有蜡或油漆物，可加热使之熔融后揩去，或用有机溶剂（苯，二甲苯，汽油，丙酮，松节油等）揩去。
2024版微生物学实验课件
微生物的保存方法
了解如何保存纯化后的微 生物菌种，如斜面保存法、 冷冻保存法等。
10
微生物计数与测定技术
微生物计数方法
学习如何对微生物进行计数，包括直接计数法和间接计数法。
微生物大小测定
掌握测定微生物大小的方法，如显微镜测微尺的使用等。
2024/1/30
数据整理
对实验数据进行分类、归纳和整理， 以便于后续的数据分析和处理。
数据表格化
将实验数据以表格形式呈现，清晰 展示数据之间的关系和变化趋势。
18
实验结果分析与讨论技巧
结果分析
根据实验目的和假设，对实验数 据进行统计学分析，得出实验结
果。
结果讨论
结合相关理论知识和已有研究， 对实验结果进行深入讨论，解释
微生物学实验课件
2024/1/30
1
contents
目录
2024/1/30
• 微生物学实验概述 • 微生物学实验基本操作 • 常见微生物学实验项目 • 微生物学实验数据分析与处理 • 微生物学实验室建设与管理 • 微生物学实验发展趋势与展望
2
01
微生物学实验概述
2024/1/30
3
微生物学实验目的与意义
实验现象和原因。
误差分析
对实验过程中可能出现的误差进 行分析，评估实验结果的可靠性
和准确性。
2024/1/30
19
实验报告撰写要求及范例
撰写要求
实验报告应结构清晰、逻辑严谨、数据准确、分析深 入、结论明确。
报告范例
提供优秀的实验报告范例，供学生参考和学习，帮助 学生掌握实验报告的撰写方法和技巧。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
20学时微生物实验讲义D者，必须将长发挽在背后。
实验台上除了记录本和笔(记录笔和记号笔)以外，不准堆放任何个人物品。
3．认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。
4．实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。
5．实验时小心仔细，全部操作应严格按照操作规程进行，禁止用嘴吸取菌液或试剂，万一遇有盛菌试管或瓶不慎打破、皮肤破伤等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。
6．实验过程中，切勿使乙醇(酒精)乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。
如遇火险，应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。
必要时用灭火器。
7．使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。
显微镜的目镜在使用前后必须用浸有乙醇(酒精)的透镜纸擦净。
对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后仍放回原处，严禁将药匙交叉使用。
8．每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥，将实验室收拾整齐，擦净桌面，如有菌液污染桌面或其他地方时，可用3%来苏尔液或5%石炭酸液覆盖半小时后擦去，如系芽孢杆菌，应适当延长消毒时间。
凡带菌之工具(如吸管、玻璃刮棒等)在洗涤前须浸泡在3%来苏尔液中进行消毒。
9．每次实验需进行培养的材料，应标明自己的组别及处理方法，放于教师指定的地点进行培养。
实验室中的菌种和物品等，未经教师许可，不得携出室外。
10．每次实验的结果，应以实事求是的科学态度填入报告表格中，力求简明准确，认真回答思考题，并及时汇交教师批阅。
11．离开实验室前将手洗净，注意关闭门窗、灯、火、煤气等。
实验一培养基的配制一、实验目的学会一般培养基的制备原理、方法。
二、实验原理培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质用人工方法配制而成的机制。
其中含有水分、碳水化合物、含氮化合物、无机盐及各种必要的维生素。
培养基可以为微生物的生长提供能源、组成菌体细胞的原理及调节代谢活动。
由于不同微生物的营养类型不同，对营养物质的要求也各不相同，因此，需要配制不同种类的培养基。
一般培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基，培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用马铃薯培养基，培养酵母常用麦芽汁培养基。
培养基除了要满足微生物生长所需要的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的其他生活条件，如适宜的酸碱度、渗透压等，因此，根据不同种类微生物的要求，应将培养基调节到一定的pH范围，如细菌培养基中性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌培养基偏酸。
根据研究的不同，可以将培养基制成固体、半固体和液体三种形式，固体培养基的成分与液体相同，仅在液体培养基中加入凝固剂作为支持物，通常加入 1.5%-2%的琼脂，半固体加入0.3%-0.5%琼脂作为支持物，有时也可以用明胶或是硅胶作为凝固剂。
三、实验材料（以牛肉膏蛋白胨培养基为例）（1）溶液和试剂牛肉膏，蛋白胨，NaCl，琼脂，1mol/LnaOH，1mol/LHCl。
（2）仪器或其他用具试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH试纸（pH5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳/皮筋，纱布等。
四、操作步骤（1）称量：按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏，蛋白胨，NaCl放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
蛋白胨很易吸湿，在称取时动作要迅速。
（2）溶化：在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热，或在磁力搅拌器上加热溶解。
将药品完全溶解后，补充水到所需要的总体积，如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
在制备用三角瓶盛固体培养基时，一般也可先将一定量的液体培养基分装于三角瓶中，然后按1.5%～2.0%的量将琼脂直接分别加入各三角瓶中，不必加热溶化，而是灭菌和加热溶化同时进行，节省时间。
在琼脂溶化过程中，应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。
同时，需不断地搅拌，以防琼脂培糊底烧焦。
配制培养基时，不可用铜或铁锅加热溶化，以免离子进入培养基中。
（3）调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH,边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达7.6。
反之，用1mol/LHCl进行调节。
对于有些要求pH较精确的微生物，其pH的调节可用酸度计进行。
pH 不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
配制pH低的琼脂培养基时，若预先调好pH并在高压蒸气下灭菌，则琼脂因水解而不能凝固。
（4）过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利某些实验结果的观察。
一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去。
（5）分装（如图1.1）按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶中。
①液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
分装三角瓶的量则根据需要而定，一般以不超过三角瓶容积的一半为宜，如果是用于振荡培养用，则根据通气量的要求酌情减少；有的液体培养基在灭菌后，需要补加一定量的其他无菌成分，如抗生素等，则装量一定要准确。
图1.1 分装培养基图示及将试管包扎成捆②固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面。
分装三角瓶的量以不超过三角瓶容积的一半为宜。
③半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
分装过程中，注意不要使培养基沾在管（瓶）口上，以免沾污棉塞而引起污染。
（6）加塞①包扎：加塞后，将全部试管用麻绳/皮筋捆好，再外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿塞，其外再用一道麻绳/皮筋扎好。
用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
（有条件的实验室，可用市售的铝箔代替牛皮纸，省去用绳扎，而且效果好。
）②灭菌：将上述培养基以0.103Mpa,121℃，20min高压蒸气灭菌。
a)搁置斜面（如图1.2）：将灭菌的试管培养基冷却至50℃左右（以防斜面上冷凝水太多），将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
图1.2 斜面的摆法b)无菌检查：将灭菌培养基放入37℃的温室中培养24～28h，以检查灭菌是否彻底。
阿斯毕无氮培养基甘露醇（或蔗糖、葡萄糖）10gKH2PO40.2gMgSO4.7H2O0.2gNaCl0.2gCaSO4.2H2O0.1gCaCO35g琼脂20g水1000mlPH7.0~7.2121℃灭菌20分钟PDA培养基马铃薯培养基（PDA）：葡萄糖20g马铃薯200g将马铃薯削皮，切成1*1厘米的丁块，加水煮到水沸腾20min，纱布过滤留取汁液，将汁液加入培养基中即可。
琼脂20g水1000mlPH自然121℃灭菌20分钟五、思考题：（1）写出你所制备的培养基的配方，并分析其中所含物质对微生物生命活动所起的作用。
（2）培养微生物能否用同一种培养基？细菌、放线菌、霉菌的培养基有何异同？（3）培养基为什么要调节pH值？所有微生物培养基最适pH值是否相同？实验二高压蒸汽灭菌一、目的要求1．了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围。
2．学习高压蒸汽灭菌的操作方法。
二、基本原理高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。
待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低，二是湿热的穿透力比干热大；三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100℃时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。
这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力。
在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压，所以，当水蒸汽中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。
实验室中常用的高压蒸汽灭菌锅有立式、卧式和手提式等几种，其构造如图。
本实验介绍手提式和立式高压蒸汽灭菌锅的使用方法。
三、实验材料阿斯毕无氮培养基，无菌水，枪头，培养皿，试管，立式高压蒸汽菌锅等。
四、操作步骤1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。
再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。
待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
本实验用1．05kg/cm2，121．3℃，20分钟灭菌。
5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。
6．将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。
五、思考题：（1）高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽？（2）灭菌完毕后，为什么要待压力降到0时才能打开排气阀，开盖取物？（3）如何检查灭菌后的培养基是无菌的？实验三土壤自生固氮菌的分离和纯化一、实验目的：1、学习微生物的纯系分离、培养方法；2、掌握稀释分离、划线分离、涂抹分离纯化微生物的方法。
二、基本原理：为了生产和科学的需要，往往需要从自然界混杂的微生物群中分离单一的菌种，这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物分离。
为了获得某种微生物的纯培养，可采用下列两种方法：一种是提供有利于该微生物生长繁殖的最适培养基及培养条件。
如要从土壤中分离自生固氮菌，则培养基中是不能含有N源，这种培养基就比较适合能利用空气中N的微生物。
另一2种方法是在培养基中加入某种化学物质，以抑制人们不需要的微生物的生长繁殖。
分离土壤中的真菌，往往在分离真菌的马丁培养基中加入适当的孟加拉红、链霉素和金霉素等化学药品，目的在于抑制细菌的生长，这样更有利于获得纯培养。
土壤中微生物数量众多，在肥沃土壤中固氮菌数量也很多，自然界中多数氮素养料是有微生物固氮的结果，固氮菌一般可分为自生固氮菌和共生固氮菌两类。