艾滋病检测质量管理工作指南

艾滋病检测质量管理工作指南前言为了认真贯彻1997年9月中华人民共和国卫生部颁布的《全国艾滋病检测工作规范》（下称“规范”），不断提高艾滋病检测工作质量，最大限度地防止误检和漏检，保证我国HIV抗体初筛和确认实验室检测结果的正确性和准确性，避免实验室交叉感染，更好地发挥HIV检测在艾滋病防治工作中的作用，需要建立一个全面的质量管理体系。

为了帮助各级艾滋病实验室做好室内质控工作，并帮助省级艾滋病确认中心开展本地区内HIV抗体检测的质量评价工作，特制定《艾滋病检测质量管理工作指南》（下称“工作指南”），主要内容包括HIV实验室检测的质量保证（Quality Assurance，QA），质量控制（Quality Control，QC）和质量评价（External Quality Assessment，EQA）。

质量保证、质量控制和质量评价是HIV测定的重要部分。

在全面质量管理体系中，实验室内质量控制是一个重要的环节，是保证高质量操作必不可少的措施。

HIV检测的室间质量评价又是使全面质量保证体系标准化、法制化的一个途径。

因此建立运行良好的质量管理体系是保证全国高质量艾滋病检测实验室工作的重要因素。

本工作指南是在质量管理方面履行《规范》的具体实施办法，适用于我国境内按《规范》程序批准的所有各级艾滋病检测实验室。

各级卫生行政部门负责辖区内艾滋病检测实验室实施本工作指南的监督工作。

一质量保证（QA）（一）定义质量保证是指从接收检验标本起，到实验室发出报告止，为确保实验室最终报告结果的正确性所进行的全过程，包括采取各种行政和技术上的措施和方法。

质量保证是确保实验结果质量的基本条件，其实施程度直接影响试验结果和最后报告的每个参数。

质量保证取决于良好的质量控制程序，并经良好的质量评价程序加艾滋铺检测质量管理工作指南以鉴定。

因此，要求所有的实验室工作人员有责任时刻注意解决影响实验结果的每个环节上可能出现的问题。

（二）实验室质量保证1.行政支持HIV初筛和确认实验室的质量保证是整个艾滋病检测工作的组成部分。

要实施全面质量保证，除了各级卫生行政部门加强监督，责成专门机构负责日常管理工作外，应要求实验室所在单位加强自身管理，保证实验室主要负责人和检测人员相对稳定，并给予人力和物力的支持。

2.实验室规范化HIV初筛实验室和确认实验室的设置及其建筑、设施、设备必须符合《规范》要求。

3.人员培训及其评价实验室人员必须接受过HIV初筛和确认实验室的业务培训并获得合格证书才能上岗操作。

各级实验人员应该通过定期和不定期的业务学习和在岗培训，从不同渠道不断地提高自己的检验水平。

在开展质控前，每个实验室检验人员都应对质控的重要性、基础知识和一般方法有较充分的了解，并在质控的实际过程中不断进行培训提高。

实验室主管必须具有较高的质量意识，领导整个实验室工作人员参加质量管理工作，并对实验室检验人员定期作出评价，包括工作的准确性、工作效率、执行安全条例和规章制度、职业道德、出勤率以及上岗资格等。

4.标本的采集、运送和处理标本的采集、运送和处理必需符合《规范》要求。

5.检测结果的判定及其程序参见《规范》第3-6页。

6.检验方法、仪器和试剂盒的选择实验室检验应使用最可靠的测定方法，检测仪器须经严格选择和科学的评价。

在我国防疫系统、临床检测以及采供血系统中使用的HIV检测试剂（国产和进口）均必须是经过国家药品监督管理局批准和中国药品生物制品检定所批批检合格的诊断试剂盒，各HIV检测实验室在使用试剂时，应优先选择经过临床评估质量优良的试剂盒。

7.设备维修与校准实验室中的设备必须定期进行维修与校准，并制定设备维修与校准的制度。

（1）ELISA洗板机与酶标读数仪是检测HIV的最常用和最重要的仪器，应该设立预防性的维护制度，以保证仪器的正常工作。

推荐方法如下：每天：每次操作要按要求设立对照。

核对酶标仪滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。

每周：清洗仪器表面，保护光学零件，不沾灰尘。

每月：洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。

这是保证各孔洗涤均衡一致的前提。

每年：检查、清洗滤光片，如果滤光片出现破裂或霉点则要更换，根据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的所用波长吸光度的精密度进行校验，测定20次，计算精密度。

精密度应该控制在厂家说明书中所规定的范围（建议请厂方代表校验）。

校验结果要有记录，保留测定原始结果。

根据实际使用情况更换主要设备（如洗板机、全自动免疫分析系统）内的所有液体装置和管子（要求厂方代表维修）。

（2）移液器（包括单头和多头移液器）是实验室中重要的基本器具，一年至少应该标定或校准二次，若发现移液器有异常情况，应该立即进行标定。

移液器标定方法包括吸取有色榕液进行光谱分析、吸取蒸馏水称量校准、吸取放射性同位素计数校准，以及使用配套校准盒等等。

特别要注意使用多头移液器时，必须保证每一个加样头都能够连续和准确的加样。

移液器的精密度可根据生产移液器厂家说明书中所规定的范围进行校准。

推荐在检测过程中，每个加样工序使用专用的移液器。

范例：用蒸馏水称量标定移液器方法（参考芬兰Labsystems移液器标定方案）在一室温为22℃的小型工作室（无风）中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待标定的移液器吸取蒸馏水（隔夜存放）加入小三角烧瓶内底部，每次称重后计量，去皮重后再加蒸馏水，连续加蒸馏水10次。

加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同，见下表，移液器标定合格后，在移液器上贴上合格标签，标明日期。

在移液器标定记录中填写移液器规格、编码、10次标定称量、标定日期和标定人签名。

移液器10次标定称量在所要求的重量范围内为合格移液器：不合格移液器要根据移液器生产厂家所推荐的方法进行校准。

芬兰Labsystems移液器标定方案移液器规格0.5 - 10μl5 - 40μl40 - 200μl200 - 1000μl1 - 5 ml2 - 10 ml标定使用蒸馏水量2μl10μl70μl300μl2000μl3500μl要求重量范围1.75 -2.25mg9.8 - 10.2 mg69.4 - 70.6 mg298.0 - 302.0 mg1990.0 - 2010.0 mg3485.0 - 3515.0 mg（3）定期检查室内普通冰箱和孵育箱的温度并作好记录，- 20℃和- 70℃冰箱必须每天检查和记录。

（4）定期检查其他相关的仪器设备。

8.文件和文件管理（1）建立标准操作程序文件（SOP）SOP是书面质量体系中的一个很重要的部分。

SOP是指导完成筛查（检测）工作的一整套书面操作指南，因而任何实验室应就本实验室所有重要工作制定相应的SOP。

每一种检测项目都应该备有一份SOP，其中包含有详细的操作程序例如实验室实验条件（温度等）、仪器的使用和维护、试剂、质控品、校准品的使用等SOP （设备和试剂盒说明书作为附录），以避免或减少因不同的操作者所引起的误差。

SOP由各岗位工作人员起萃，实验室负责人审定。

实验人员在操作时应该严格按照SOP进行，实验室主管应该督查实验人员执行SOP。

必要时，SOP 中的内容如说明书或相关内容应该在实验室主管的领导下进行修订，每年至少修订一次。

修订后的SOP按审批程序批准后使用。

SOP正规编写通常包括以下内容：1）清楚、简洁的标题和统一的SOP编号2）SOP编写和修改日期3）编写和修订SOP的人员姓名4）方法目的和原理5）相应的职业规范6）检测设备和试剂7）参考其他包含相关步骤的SOP8）健康和安全操作指南（参考传染性标本处理和废物安全处理SOP）9）每一操作步骤和质控步骤用编号描述10）结果的讨论和报告以及出现问题时所采取的措施11）附录，包括相关的附加文件如标准表格、设备和试剂盒说明书等。

例1一般日常检测（60人次），应该考虑使用以下相应的SOP（1）标本的接收和处理（2）进行检测（3）洗板器的使用（4）酶标仪的使用（5）结果的报告（6）阳性血样的追踪和处理（7）实验室的清理和消毒例2对特殊检测（>60人次），实验室SOP应该考虑包括以下附加内容（1）待检标本的类型（2）所有检测试剂的配制（3）必要的核对和记录步骤（4）检测前标本的处理（5）试剂盒对照和外部对照标本的应用（6）使用的检测设备（7）应用的方法（8）实验记录中检测数据的记录（9）读取结果的方法（10）初检阳性标本的复测（11）最终结果的计算（12）结果的使用（13）下一检测工作的准备（14）检测结束后的清洁处理（2）建立实验原始记录表每次实验前，应该根据本实验的要求，设计一份操作的原始记录表，在表中分别标明空白对照、阳性对照、阴性对照以及各待检样品的确切位置，以便于指导实验人员加样。

要注明试剂盒来源、测定方法（包括反应时间和温度等）、批号、失效期；操作人员和复核人员姓名、操作日期。

（3）建立HIV抗体检测程序见《规范》第3-6页。

（4）填写检测结果表HIV抗体初筛阳性送检化验单和HIV抗体检测确认报告单见《规范》第16和17页。

（5）建立标本的登记记录实验室收到标本后，有关参数应该及时登记在标本的登记记录中，包括受检者的姓名或代号、试管编号、性别、年龄、职业、送检单位、人群类别、检验结果（包括初筛、复检、确证）、送检日期、报告日期、备注（必要时记录通信地址）。

（6）建立HIV阳性标本的保存记录记录中填写阳性标本血清/血浆的储存量、标本储存温度、标本储存起始时间以及标本保管人姓名。

所有经确认的阳性标本，包括实验室留存的标本，应送省级HIV抗体确认中心或省级卫生行政部门指定的单位保存，不得擅自处理。

（7）建立实验室安全措施参见《规范》附件一，第9页。

（8）文件存档原始记录包括实验原始记录表、打印数据、膜反应条带或其照片、检测记录表、标本登记记录、标本保存记录以及仪器设备维修和校准记录等重要记录都应该妥善存档保存15年以上。

推荐同时使用计算机保存各种文件和记录。

内含病人姓名的所有工作记录一定要保密，参见《规范》第8页.二.质量控制（QC）（一）定义质量控制是指为确保实验工作正常进行而在每一次实验过程中必须采取的各种措施。

质量控制也是实施实验室质量保证的一部分，它表明每一步操作产生可信的结果。

质量控制具体内容是指将控制品（内部对照或外部对照）和检测标本一起实验操作，从控制值了解分析过程的质量情况。

为便于观测和概括，又使用了一些统计学方法进行归纳和分析。

质量控制的最终结果可以了解本次实验是否有效，所有试验条件是否正常，以及所有试验结果是否可靠。

检测HIV抗体后能提供准确的检验报告，是每一个从事HIV抗体检验的实验室的最高宗旨。

而为了达到这一目的，建立一个良好的质量控制程序是十分重要的。