生物制药工艺学思考题及答案完整版
生物制药工艺学（葛驰宇）课后习题参考答案
课后习题参考答案模块一生物制药基础理论任务一生物制药概述一、名词解释1．生物药物：是指利用生物体、生物组织、体液或其代谢产物（初级代谢产物和次级代谢产物），综合应用化学、生物化学、生物学、医学、药学、工程学等学科的原理与方法加工制成的一类用于疾病的预防、治疗和诊断的物质。
2．生物制药：是指以生物体为原料或借助生物过程，在人为设定的条件下生产各种生物药物的技术。
二、填空题1．化学药物、生物药物、中草药；2．二、三三、问答题1．生物制药的特点是什么？答：（1）药理学特性：生物药物在人体中具有相对较高的相容性和针对性。
.治疗的针对性强，疗效高；营养价值高，毒副作用小；免疫性副作用常有发生；（2）原料的生物学特性：天然来源的原料中药理学活性成分含量低，杂质多；来源广泛，多种多样；原料容易腐蚀变质；（3）生产制备过程的特殊性；（4）检测的特殊性；（5）剂型要求的特殊性。
2．按照生物药物的化学本质和化学特性分类，可将生物药物分为哪些类别？答：按照生物药物的化学本质和化学特性分类，可将生物药物分为氨基酸类药物、多肽和蛋白质类药物、酶类药物、核酸类药物、多糖类药物、脂类药物、维生素与辅酶、其他类。
3. 简述生物制药工业的发展历史及现状。
答：学生可自己从学术网站、报刊杂志等渠道获取相应信息。
任务二生物制药工艺基本技术一、名词解释1．MTT：即四甲基偶氮唑盐比色法，是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。
其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物，当有活细胞存在时，线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲瓒（Formazan）结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜（DMSO）溶解，用酶联免疫检测仪在570 nm波长处测定其吸光度值，该值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性。
2．发酵：指人们借助微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体本身、或者直接代谢产物或次级代谢产物的过程。
生物制药工艺学习题(含复习资料
生物制药工艺学习题集（含答案）第一章生物药物概述一、填空：1、我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中药2、现代生物药物已形成四大类型，包括基因重组多肽和蛋白质、基因药物、天然生化药物、合成与部分合成的生物药物3、请写出下列药物英文的中文全称：（）干扰素、()白介素、（）集落刺激因子、（）促红细胞生成素、（）表皮生长因子、（）神经生长因子、（）重组人生长激素、（）胰岛素、（）人绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素、超氧化物歧化酶、组织纤溶酶原激活物4、常用的β-内酰胺类抗生素有青霉素、头孢菌素；氨基糖苷类抗生素有链霉素；大环内酯类抗生素有红霉素；四环类抗生素有土霉素；多肽类抗生素有杆菌肽；多烯类抗生素有两性霉B；蒽环类抗生素有阿霉素5、嵌合抗体是指用人源抗体恒定区替换鼠源抗体恒定区，保留抗体可变区；人源化抗体是指抗体可变区中仅（决定簇互补区）为鼠源，其（骨架区）及恒定区均来自人源。
6、基因工程技术中常用的基因载体有质粒、噬菌体（）、黏粒（）、病毒载体等。
二、选择题：1、以下能用重组技术生产的药物为（B）A、维生素B、生长素C、肝素D、链霉素2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物（C）A、洛伐他汀B、干扰素C、肝素D、细胞色素C3、能用于防治血栓的酶类药物有（D）A、 B、胰岛素 C、天冬酰胺酶 D、尿激酶4、环孢菌素是微生物产生的（A）A、免疫抑制剂B、酶类药物C、酶抑制剂D、大环内酯类抗生素5、下列属于多肽激素类生物药物的是（D）A、 B、四氢叶酸 C、透明质酸 D、降钙素6、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是（D）A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸，使之和人胰岛素序列一致B. 将A21位替换成甘氨酸，B链末端增加两个精氨酸，使之在4溶液中可溶C. 将B29位赖氨酸用长链脂肪酸修饰，改变其皮下扩散和吸收速度D. 将人胰岛素B28位与B29位氨基酸互换，使之不易形成六聚体三、名词解释：1、药物 ()：用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理功能、促进机体康复保健的物质，有4大类：预防药、治疗药、诊断药和康复保健药2、生物药物（）：是以生物体、生物组织或其成份为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物3、基因药物（）：是以基因物质（或及其衍生物）作为治疗的物质基础，包括基因治疗用的重组目的片段、重组疫苗、反义药物和核酶等4、反义药物：是以人工合成的十至几十个反义寡核苷酸序列，它能与模板或互补形成稳定的双链结构，抑制靶基因的转录和翻译，从而达到抗肿瘤和抗病毒作用5、生物制品（）：是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品6、干涉（，）：是指在生物体细胞内，引起同源的特异性降解，因而抑制相应基因表达的过程7、( ) ：是一种小分子（~21-25核苷酸），由（Ⅲ家族中对双链具有特异性的酶）加工而成。
生物技术制药课后思考题 (2)
生物技术制药课后思考题1. 什么是生物技术制药？生物技术制药是利用生物技术手段，通过生物材料（如细胞、微生物、酶等）进行药物的研发、生产和应用的一种新型药物生产技术。
该技术利用生物工程、分子生物学、细胞生物学等学科的知识，将生物体内的特定基因或蛋白质进行分离、克隆和重组，进而生产出具有特定药理作用的药物。
2. 生物技术制药的优势有哪些？生物技术制药相对于传统的化学合成药物有以下优势：2.1 高效性和特异性生物技术制药可以通过定向克隆和重组技术，针对特定疾病靶点设计并制备药物。
由于药物的结构和功能可精确控制，因此在治疗效果上具有更高的效率和特异性。
2.2 可重复性和稳定性利用生物技术制药生产的药物，可以通过生物体系的复制和扩增得到，具有较高的生产稳定性。
与传统化学合成药物相比，生物技术制药的药物生产过程更为可控，能够保证批次之间的一致性和质量稳定性。
2.3 安全性和可调控性生物技术制药所使用的生物体或细胞经过严格筛选和检测，可以保证药物的可靠性和安全性。
此外，由于药物的来源可以通过基因工程技术进行调整和干预，使药物的生产和效果在一定程度上可调控。
2.4 可持续发展和生态友好相对于化学合成药物，生物技术制药的生产过程更为环保和持续。
生物技术制药利用生物材料进行生产，可以减少对环境的污染并节约资源。
3. 生物技术制药在医药领域中的应用有哪些？生物技术制药在医药领域中有广泛的应用，包括但不限于以下几个方面：3.1 蛋白质药物生物技术制药主要以重组蛋白质药物为主。
这些药物通过基因工程技术将目标蛋白的基因引入到特定的宿主细胞中，通过表达和纯化等工艺步骤获得目标蛋白质药物。
常见的蛋白质药物包括生长激素、胰岛素、抗体药物等。
3.2 基因治疗基因治疗是一种通过修复或改变人体基因来治疗疾病的方法。
生物技术制药可以通过基因工程技术向患者体内导入特定基因，从而纠正基因缺陷或提高免疫系统的活性，达到治疗效果。
3.3 细胞疗法细胞疗法是一种利用活体细胞来治疗疾病的方法。
生物技术制药课后思考题
第一章：绪论思考题1.什么是生物技术？生物技术所包含的内容及定义。
答：1）生物技术又称生物工程，指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。
2）包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、抗体工程、糖链工程、海洋生物技术及生物转化等。
（具体定义见P1）。
2.生物技术药物的概念及分类。
答：1）指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物，主要是重组蛋白或核酸类药物。
2）a.按照用途：预防、诊断、治疗；b.按作用类型：细胞因子类、激素类、酶类、疫苗、单克隆抗体类、反义核酸、RNA干扰类、基因治疗药物；c.按照生化特性：多肽类、蛋白质类、核酸类、聚乙二醇化多肽或蛋白质。
3.生物技术药物在理化性质、药理学与作用、生产制备和质量控制方面的特性。
答：1）理化性质（从药物多是蛋白质或核酸出发）：a.相对分子质量大；b.结构复杂；c.稳定性差；2）药理学作用：a.活性与作用机制明确；b.作用针对性强；c.毒性低；d.体内半衰期短；e.有种属特异性；f.可产生免疫原性；3）生产制备特性：a.药物分子在原料中含量低；b.原料中常存在降解目标产物的杂质；c.制备工艺条件温和；d.分离纯化困难；e.产品易受有害物质污染；4）质量控制特性：a.质量标准内容的特殊性；b.制造项下的特殊规定；c.检定项下的特殊规定。
4.生物技术制药的概念和主要研究内容与任务。
答：1）指利用基因工程、细胞工程等生物技术的原理和方法，来研究、开发和生产预防、治疗和诊断疾病的药物的一门科学。
2）主要研究内容与任务：a.生物制药技术的研究、开发与应用；b.利用生物技术研究、开发和生产药物。
第二章：基因工程制药思考题1.简述基因工程制药的基本原理和基本流程。
答：1）利用重组DNA技术将外源基因导入到宿主菌或宿主细胞进行大规模培养和诱导表达以获取蛋白质药物的过程称为基因工程制药。
生物制药工艺学习题集及答案
发酵工艺学（2）习题集第一章生物药物概述1、生物药物、抗生素、生化药品、生物制品、基因工程药物的概念(1)、生物药物：指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，利用生物体、生物组织、体液或其代谢产物，综合应用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理与方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。
(2)、抗生素：抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的有机物质。
(3)、生化药品：利用生理学和生物化学的理论、方法及研究成果直接从生物体分离或利用微生物合成，或用现代生物技术制备的一类用于预防、治疗、诊断疾病，有目的的调节人体生理机能的生化物质。
(4)、生物制品：是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。
各种疫苗、抗血清、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、诊断试剂。
(5)、基因工程药物：采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多糖和蛋白质类药物。
2、生物药物的分类。
（1）、按照药物的化学本质和化学特性可分为：氨基酸类药物及其衍生物、多肽和蛋白质类药物、酶类药物、核酸及其降解物和衍生物、多糖类药物、脂类药物、维生素。
（2）、按原料来源可分为：人体组织来源的生物药物、动物组织来源的生物药物、微生物来源的生物药物、植物来源的生物药物、海洋生物来源的生物药物。
（3）、按功能和用途可分为：治疗药物、预防药物、诊断药物。
3、生物药物的特性。
药理学特性：（1）治疗的针对性强治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。
如细胞色素c为呼吸链的一个重要成员，用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病，效果显著。
（2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质，因此具有高效的药理活性（3）毒副作用小，营养价值高（4）生物副作用常有发生在生产、制备中的特殊性：（1）原料中的有效物质含量低：杂质种类、含量高，提取、纯化工艺复杂。
生物制药工艺学思考题及答案
抗生素发酵生产工艺1.青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义？青霉素是发现最早, 最卓越的一种B-内酰胺类抗生素, 它是抗生素工业的首要产品, 青霉素是各种半合成抗生素的原料。
青霉素的缺陷是对酸不稳定, 不能口服, 排泄快, 对革兰氏阴性菌无效。
青霉素通过扩环后, 形成头孢菌素母核, 成为半合成头孢菌素的原料。
2.如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制？青霉素在深层培养条件下, 经历7个不同的时期, 每个时期有其菌体形态特性, 在规定期间取样, 通过显镜检查这些形态变化, 用于工程控制。
第一期: 分生孢子萌发, 形成芽管, 原生质未分化, 具有小泡。
第二期: 菌丝繁殖, 原生质体具有嗜碱性, 类脂肪小颗粒。
第三期: 形成脂肪包含体, 积累储蓄物, 没有空洞, 嗜碱性很强。
第四期: 脂肪包含体形成小滴并减少, 中小空泡, 原生质体嗜碱性减弱, 开始产生抗生素。
第五期: 形成大空泡, 有中性染色大颗粒, 菌丝呈桶状。
脂肪包含体消失, 青霉素产量提高。
第六期: 出现个别自溶细胞, 细胞内无颗粒, 仍然桶状, 释放游离氨, pH上升。
第七期：菌丝完全自溶, 仅有空细胞壁。
一到四期为菌丝生长期, 三期的菌体适宜为种子。
四到五期为生产期, 生产能力最强, 通过工艺措施, 延长此期, 获得高产。
在第六期到来之前发束发酵。
3.青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？控制原理: 发酵过程需连续流加葡萄糖, 硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐, 补糖率是最关键的控制指标, 不同时期分段控制。
在青霉素的生产中, 及时调节各个因素减少对产量的影响, 如培养基, 补充碳源, 氮源, 无机盐流加控制, 添加前体等；控制适宜的温度和ph, 菌体浓度。
最后要注意消沫, 影响呼吸代谢。
4.青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？青霉素不稳定, 发酵液预解决、提取和精制过程要条件温和、快速, 防止降解。
提炼工艺涉及如下单元操作:①预解决与过滤: 在于浓缩青霉素, 除去大部分杂质, 改变发酵液的流变学特性, 便于后续的分离纯化过程。
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二、选择题：
1、以下能用重组 DNA 技术生产的药物为 A、维生素 B、生长素 C、肝素
2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物
D、链霉素
（B） （C
）
A、洛伐他汀 B、干扰素 C、肝素
D、细胞色素 C
3、能用于防治血栓的酶类药物有
四、问答题 1、 基因重组药物与基因药物有什么区别？ 1. 答：基因重组药物是指应用重组 DNA 技术（包括基因工程技术和蛋白质工程技术）制
2
造的重组多肽、蛋白质类药物和疫苗、单克隆抗体与细胞因子等，药物的化学成分属 于多肽或蛋白质；基因药物是以基因物质（RNA 或 DNA 及其衍生物）作为治疗的物 质基础，包括基因治疗用的重组目的 DNA 片段、重组疫苗、反义药物和核酶等，药物 的化学成分为核酸或其衍生物。 2、 生物药物有那些作用特点？ 2.答：1）药理学特性有：药理活性高；治疗针对性强；毒副作用较少，营养价值高； 生理副作用常有发生等。2）理化特性有：生物材料中的有效物质含量低，杂质种类多 且含量相对较高；生物活性物质组成结构复杂，稳定性差；生物材料易染菌，腐败； 生物药物制剂有特殊要求。 3.基因工程药物主要有哪几类？试举例说明。 3. 答：基因工程药物是指应用基因工程或蛋白质工程技术制造的重组活性多肽、蛋白质及 其修饰物，包括：1）重组细胞因子类：如干扰素（IFN）、白介素（IL）和肿瘤坏死因子 （TNF）；2）重组生长因子类：如表皮生长因子（EGF）、神经生长因子（NGF），以及促 进造血系统的生长因子：如促红细胞生成素（EPO）、集落刺激因子等（CSF）；3）重组多 肽与蛋白质类激素：如重组人胰岛素（rhInsulin）、重组人生长激素等（rhGH）；4）心血 管病治疗剂及酶制剂：如水蛭素、tPA（组织纤溶酶原激活物）、天冬酰胺酶、超氧化物歧 化酶（SOD）等。5）重组疫苗及单抗制品：如重组乙肝表面抗原疫苗（酵母）、肿瘤疫苗 等
生物制药工艺学_吴晓英_思考题
生物制药工艺学思考题总论部分：一、简述生物制药工艺学的性质与任务。
二、谈谈生物制药工业的重点研究方向。
三、谈谈生物药物的特点。
四、简述生物药物的研究发展趋势。
五、简述生物材料的来源。
六、简述生物活性物质的存在特点。
七、生物活性物质主要有哪些提取方法？举例说明萃取技术的应用八、生物活性物质有哪些主要的浓缩、干燥方法？九、生物大分子分离纯化的主要原理。
十、生物大分子常用的纯度鉴定方法有哪些？十一、已经上市或研究热点的基因工程药物主要有哪些？十二、简述酶工程技术、细胞工程技术和基因工程技术等现代生物技术在生物制药工业中的应用。
十三、名词解释：提取，萃取，浓缩，干燥，均一性，上游工艺，下游工艺, 单克隆抗体，PCR，生物合成技术，半合成药物抗生素部分：一、抗生素的定义、常用分类法、应用。
二、评价医用抗生素应包括哪些主要要求。
三、抗生素工业生产的主要方法，抗生素发酵生产的特点。
四、简述抗生素发酵中温度、pH、溶氧、基质浓度、菌体浓度、二氧化碳和泡沫等因素的影响及控制。
五、发酵生产庆大霉素的工艺路线及注意问题。
手性药物部分：一、什么是手性？什么是手性药物？二、手性药物的主要制备技术？三、用于制备手性药物的主要的生物催化反应包括哪些？多肽类和蛋白类药物：一、了解多肽药物的分类与重要的多肽类药物（包括名称，来源，作用与用途）。
二、了解胸腺素组分5的性质和工艺路线。
三、了解蛋白类药物的分类与重要的蛋白类药物（包括名称，来源，作用与用途）。
四、了解白蛋白的制备工艺要点。
五、了解胰岛素的结构与性质、作用与用途、提取法制备胰岛素的生产工艺要点、以及基因工程技术生产人胰岛素的途径。
酶类药物：一、酶类药物的分类与重要的酶类药物的名称、来源、作用与用途及对酶类药物的要求。
二、了解L-天门冬酰胺酶和超氧化物歧化酶的性质、作用、工艺路线和工艺要点。
三、了解尿激酶、溶菌酶的性质、作用与与用途及制备途径。
糖类：一、糖类药物的分类、生理功能。
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生物制药工艺学思考题及答案HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】抗生素发酵生产工艺1. 青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义？青霉素是发现最早，最卓越的一种B-内酰胺类抗生素，它是抗生素工业的首要产品，青霉素是各种半合成抗生素的原料。
青霉素的缺点是对酸不稳定，不能口服，排泄快，对革兰氏阴性菌无效。
青霉素经过扩环后，形成头孢菌素母核，成为半合成头孢菌素的原料。
2. 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制？青霉素在深层培养条件下，经历7个不同的时期，每个时期有其菌体形态特性，在规定时间取样，通过显镜检查这些形态变化，用于工程控制。
第一期：分生孢子萌发，形成芽管，原生质未分化，具有小泡。
第二期：菌丝繁殖，原生质体具有嗜碱性，类脂肪小颗粒。
第三期：形成脂肪包含体，积累储蓄物，没有空洞，嗜碱性很强。
第四期：脂肪包含体形成小滴并减少，中小空泡，原生质体嗜碱性减弱，开始产生抗生素。
第五期：形成大空泡，有中性染色大颗粒，菌丝呈桶状。
脂肪包含体消失，青霉素产量提高。
第六期：出现个别自溶细胞，细胞内无颗粒，仍然桶状，释放游离氨，pH上升。
第七期：菌丝完全自溶，仅有空细胞壁。
一到四期为菌丝生长期，三期的菌体适宜为种子。
四到五期为生产期，生产能力最强，通过工艺措施，延长此期，获得高产。
在第六期到来之前发束发酵。
3. 青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标，不同时期分段控制。
在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，菌体浓度。
最后要注意消沫，影响呼吸代谢。
4. 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。
提炼工艺包括如下单元操作：①预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。
②萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。
③脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。
④结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐可直接结晶析出。
氨基酸发酵工艺1. 如何对谷氨酸发酵工艺过程进行调控？发酵过程流加铵盐、尿素、氨水等氮源，补充NH4+；生物素适量控制在2-5μg/L；pH控制在中性或微碱性；供氧充足；磷酸盐适量。
2. 氨基酸生产菌有什么特性，为什么L-谷氨酸发酵微生物的优良菌株多在棒状杆菌属、小短杆菌属、节杆菌属和短杆菌属中。
具有下述共同特性：①细胞形态为短杆至棒状；②无鞭毛，不运动；③不形成芽孢；④革兰氏阳性；⑤生物素缺陷型；⑥三羧酸循环、戊糖磷酸途径突变；⑦在通气培养条件下产生大量L-谷氨酸。
3. 生物素在谷氨酸发酵过程中的作用是什么？生物素是不饱和脂肪酸合成过程中所需的乙酰CoA的辅酶。
生物素缺陷型菌种因不能合成生物素，从而抑制了不饱和脂肪酸的合成。
而不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。
因此，磷脂的合成量也相应减少，这就会导致细胞膜结构不完整，提高细胞膜对谷氨酸的通透性，解除其对谷氨酸脱氢酶的抑制，源源不断生产谷氨酸。
维生素发酵生产工艺1. 比较分析现行维生素C的两种生产工艺过程及本质区别，有什么优势？现行的维生素c生产工艺过程有：莱氏化学合成法和两步发酵法。
莱氏化学合成法：D-葡萄糖为原料，进过催化氢化生成D-山梨醇，然后生物氧化转变为L-山梨糖，酸性液中丙酮化，对α-β-二仲醇进行保护。
L-山梨糖高锰酸钾在碱性溶液中氧化为二丙酮-2-酮-L-古龙酸，除去丙酮，内酯化和烯醇化得到L-抗坏血酸。
整个合成过程必须保持第4位碳原子的构型不变。
两部发酵法：①催化氢化：催化氢化D-葡萄糖，控制压力，在氢做还原剂、镍做催化剂的条件下，将醛基还原成醇基，从而制备D-山梨醇。
②第一部发酵：D-山梨醇C2位羟基氧化为羰基，其他基团不变，微生物转化得L-山梨糖。
③第二部发酵：L-山梨糖到2-酮基-L-古龙酸需要将C1位醇基氧化为羧基，保持其他基团不发生变化。
其中两步发酵法更具有优势。
原因如下：①以生物氧化代替化学氧化简化了生产工艺。
②省略了丙酮化反应步骤，节省了丙酮、硫酸等大量化工原料和其防爆设备，节约了成本，有利于安全生产。
③三废和污染较小。
④提高了生产能力。
2.维生素C的生产工艺中，手性中心是如何实现的？维生素C分子中含有两个手性碳原子，故有四个光学异构体。
其中L(+)-抗坏血酸括性最高，D（-）-异抗坏血酸活性仅为其20％，工业上将其作为食品抗氧剂。
D(-)-抗坏血酸和L(+)-异抗坏血酸几乎无活性。
3. 在未来，一步发酵能取代两部发酵，成为维生素生产的主流工艺吗，为什么？一步法发酵对工业菌株的山梨醇/糖旁路代谢途径进行敲除。
与原始菌株比较，发现单菌发酵24h后，培养基中剩余的山梨醇糖含量基本保持恒定，NSR缺失株相对于原始菌株残糖量提高了%。
基因工程制药工艺1. 工程菌与宿主菌对培养基要求有何不同，为什么？碳源：大肠杆菌以蛋白胨等蛋白质的降解物作为碳源；酵母利用葡萄糖、半乳糖等单糖类物质为碳源。
氮源：不同工程菌对氮源利用能力差异大，具有很高的选择性。
大肠杆菌利用酵母粉等大分子有机氮源；酵母利用氨基酸为氮源。
选择剂：基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择剂；基因工程酵母菌常用氨基酸营养缺陷型。
2. 影响工程菌培养工艺的主要参数是什么如何优化控制温度：生长与生产温度不一致。
较高温度表达量大，易形成包涵体。
策略：较低温度下有利于表达可溶性蛋白质。
对于热敏感的蛋白质，高温会降解破坏。
策略：生产期可采用先高温，然后低温，变温表达，避免蛋白质降解。
pH：了解发酵过程中各个阶段的适宜pH以后，进一步设法控制pH在合适的范围内。
分阶段控制pH：根据试验结果来确定生长最适pH和产物最适pH，以达到最佳生产。
溶解氧：从供应量和需要量（菌体生长、质粒稳定性、产物积累）二个方面考虑，使之需氧不超过设备的供氧能力，在临界溶解氧浓度之上。
3. 诱导物对生长和产物合成有何影响，为什么？诱导物用来诱导表达型工程菌。
在细胞生长到一定阶段，必需添加诱导物，以解除目标基因的抑制状态，活化基因，进行转录和翻译，生成产物。
适宜的诱导时间非常重要。
诱导物的浓度及其发酵温度会影响表达量和产物存在形式。
化学诱导型启动子：lzc、tac、T7等，诱导时间为对数生长期。
温度诱导型启动子：PL 、PR等，诱导时间为对数期或稍后一些。
基因工程制药工艺1. 什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。
工程菌构建的基本过程如下：目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质）酶切：在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。
（DNA+缓冲液+限制性内切酶；37℃，1小时；加热、加EDTA终止；电泳检查酶切完整性）链接：DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。
（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；16-26℃，数小时；70℃加热10min终止反应）转化：把外源基因导入宿主细胞的过程。
（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）2. 目标基因克隆的主要方法有哪些？分析其特点及其适用范围①PCR扩增。
优点：简便快速，高效，数kb单基因克隆。
缺点：DNA聚合酶活性和保真性限制。
（94℃变性→55℃退火→72℃延伸→94℃变性……）②文库筛选。
优点：长片段，无碱基错误，位置序列基因克隆。
缺点：繁琐，过程复杂，耗时，昂贵。
③化学合成：简便，准确，已知序列基因克隆，引物合成。
缺点：受合成仪性能限制，长度很短。
3. 大肠杆菌中高效表达蛋白药物着重设计哪几个方面？为了确保工程菌构建的有效性，必须遵循GMP及其有关生物制品研究技术指导原则，做好菌种的记录和管理。
①表达载体，详细记录表达载体，包括基因的来源、克隆和鉴定，表达载体的构建、结构和遗传特性。
②宿主细胞:详细记录宿主细胞的资料，包括细胞株系名称、来源、传代历史、鉴定结果及基本生物学特性等。
③目标基因序列:目标基因的序列包括插入基因和表达载体两端控制区的核苷酸序列，以及所有与表达有关的序列，做到序列清楚。
重组人干扰素生产工艺1. 重组人干扰素生产工艺路线有哪几条，有何缺点？①体外诱生干扰素制备工艺：仙台病毒诱导人白细胞：血浆→人白细胞（病毒诱导）→分离纯化→人白干扰素。
缺点：产量低，1g IFNα需要105L人血白细胞，来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵，潜在的血源性病毒污染的可能性。
②Namalva细胞培养（病毒培养）→合成干扰素→分离纯化→多压型混合干扰素。
优点：首次实现大规模商业化生产，用细胞培养8000L。
缺点：活性低，退出临床应用。
③工程菌构建→发酵培养→包涵体→复性→重组人干扰素。
工艺特点：发酵过程，随后变性、复性过程。
缺点：生物合成、纯化及制剂阶段均使用了一些动物或人血液提取成分，仍然没有摆脱潜在的传播血源性疾病的危险。
④工程ＣＨＯ细胞系构建→细胞培养→收集培养液→分离纯化→重组人干扰素。
工艺特点：分泌表达，产量低，成本高，过程控制严格。
可以做到无血清培养。
⑤基因工程假单胞杆菌发酵生产工艺。
工艺特点：发酵周期短：几个小时，无需变性、复性过程，获得有活性产品，纯化过程：淘汰抗体亲和层析，制剂中采用非人血清白蛋白新型保护剂，使得整个制造过程中不使用任何血液提取成分。
2. 重组人干扰素发酵工段的关键控制点是什么，如何实现最优化过程控制？①摇瓶培养：摇瓶培养：30℃，，250rpm，16-20h；②种子罐培养：接种：接入50L种子罐，接种量10%培养：30℃，控制：级联调节通气量和搅拌转速。
3. 干扰素纯化工艺的原理是什么？基于蛋白质的电荷性除去杂质，准确控制缓冲液和上样液的pH及电导值，纯化干扰素4. 干扰素纯化工艺过程中各工段的目的是什么？①溶解粗干扰素：配置缓冲液（超纯水，磷酸缓冲液，μm滤器和10ku超滤系统，百级层流下收集），冷却至2-10℃。
在均浆器中完全溶解粗干扰素。
②等点沉淀与疏水层析：磷酸调节至，沉淀杂蛋白，离心收集上清液（含有人干扰素）。
用NaOH调节上清液，并用5M NaCl调节溶液电导值180ms/cm，上样，进行疏水层析，利用干扰素的疏水性进行吸附。