植物胚培养

幼胚培养：在无菌的条件下，将未成熟胚分离 出来，进行培养发育，以至形成幼苗的过程。
1933年Tukey进行桃、梨 幼胚培养获得成功
1、幼胚培养过程：
取子房 常规表面消毒 解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整
幼胚。 固体培养基培养
植物胚胎发生过程： 原胚－球形胚－心型胚－鱼雷胚－子叶胚
胚发育视频
➢ 渗透压的保持对于幼胚培养相当重要。 最适蔗糖浓度随着胚的发育时期而降低。
C、植物激素的作用：
➢ 成熟胚一般不需要外源激素即可萌发。但 激素能促进休眠胚的萌发。
➢ 幼胚需要外源激素，应保持外源激素与内 源激素的平衡。过低则不能促进生长，过 高则易导致幼胚脱分化形成愈伤。
D、天然提取物及某些蛋白制品
3、胚柄
A 在幼胚培养中，带有胚柄结构有利于幼胚 的生长。 B 但一般较难与胚一起分离出来。
4、幼胚的发育方式：
（1）胚性发育:幼胚接种培养基,发育成成熟胚.
（2）早熟发育:幼胚接种培养基,不进行胚性发育,
萌发成幼苗.
（3）产生愈伤组织:幼胚接种培养基,发生细胞增
殖,形成愈伤组织.
黄瓜杂种幼胎培养 黄瓜杂种幼胎
柑橘：珠心组织 发生多个不定胚。
植物具有多胚现象，不定胚使合子胚发育受阻， 影响杂交育种效率，合子胚分离培养，提高育种效率。
5.诱导胚状体及胚性愈伤组织
利用幼胚等离体培养，产生次生胚状体，和胚性 愈伤组织。
6.种子生活力测定
魔芋胚状体
木本植物种子，层积处理后，胚离体培养，测定
生活力。
；
胚状体与合子胚的比较:
二、 胚培养的意义
1.克服远缘杂种的不育性
远缘杂交，在杂种幼胚发生败育之前取出， 进行离体培养，获得杂种植株。
2.打破种子休眠
山楂：自然条件9个月萌发，
胚培养48小时萌发。
在休眠期，取出，离体培养，产生植物。
3.提高种子发芽率
植物胚珠发育不完全，发芽率极低，胚培养， 提高发芽率
4.克服珠心胚的干扰
胚的发育程度与胚的萌发 成活率呈正相关
球
形
球
胚
形
前 期
胚
胚的剥离以受精后
35天左右为宜.
心
型 胚 前
鱼 ห้องสมุดไป่ตู้ 胚
心型胚、鱼雷胚较好
期
2、影响胚培养的因素
（1）培养基
A、无机盐： a 幼胚培养有MS、B5等培养基，可
使K+、Ca2+水平稍高。
B、碳水化合物：
➢ 糖的作用： 调节渗透压；碳源；防止幼胚早萌。
银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用 （1934）；曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能 很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚) （1941）。
此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、 水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。
（2）环境条件
A、温度： 多数为25-30℃，因植物种类有所差别。
B、光照： 一般认为黑暗或弱光条件较为合适。
牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖
牡丹成熟胚的离体培养
以‘凤丹白’成熟胚为外植体 结果表明： （1）打破成熟胚休眠最适宜的预处理是4℃沙藏。 （2）成苗培养时的最佳的培养基是MS＋6-
BA0.2mg/L＋IBA1.0mg/L。 （3）最适宜的生根培养基是MS＋IAA1.0mg/L 。
二、幼胚培养方法：
3.成熟胚培养的程序
（1）选果实或种子作为外植体 （2）表面消毒 （3）无菌条件下切开果实，取出种子 （4）胚的剥离
（5）培养基培养：MS、White培养基。
4.成熟胚培养条件下
（1）因成熟胚本身含有较多的营养条件，对培 养基要求不高
（2）只含有大量元素和糖的培养基上，便可萌 发成苗
（3）多数植物成熟胚的生长以12h/天光照为宜。
第一节 胚培养的类型和意义
一、植物胚培养的类型
胚培养主要包括成熟胚 培养、幼胚培养两类。
培养类型
成熟胚培养 幼胚培养
1. 成熟胚培养
成熟胚分离出来，进行培养
玉米成熟胚的培养
霍山石斛的胚
2.幼胚培养
剥离的胚胎培养
包括
受精后的胚珠培养
也可以对未受精的胚珠 或子房进行培养，获得单倍体
受精后的子房培养
胚状体可以制成人 工种子，便于运输
和保存!
质量
合子胚 萌发率高，质量好
胚状体 萌发率低，质量差
来源 受精卵
胚\体细胞
胚柄 形态
变异率
有，明显 固定，体积相对较小
低
即使有也不明显
复杂，常有两个以上的子 叶，体积较大
高
人工种子视频
第二节 胚培养的方法
主要介绍
成熟胚培养方法 幼胚培养方法 胚乳培养方法 胚珠培养方法 子房培养方法
第六章 植物胚培养
植物胚培养 是指在无菌条件下，对植物的胚 及胚器官如子房、胚珠和胚乳进行离体培养 的技术。
1904年Hanning进行萝卜 和辣根菜成熟胚培养
胚培养的类型和意义
本章内容
胚培养的方法
常见植物胚的培养
本章教学目的与要求
(1)了解植物胚培养的类型 (2)掌握胚培养的方法和操作步骤 (3)了解常见植物胚培养的技术
黄瓜杂种幼胎培养苗
三、胚乳培养
胚乳培养是指将胚乳从母体上 分离出来，在无菌的环境条件 下培养，使其生长发育形成幼 苗的过程。
1、胚乳培养过程
胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳 培养:White或MS诱导培养基---25-27℃--暗或弱
光 发育:诱导形成愈伤组织----再分化形成胚状体或
胚的发育
一、成熟胚培养方法
1.成熟胚培养： 在无菌的条件下，采用人工的方法将成熟胚分
离出来，进行培养，让其进一步生长发育，以至 形成幼苗的过程。
1890年营养液研究离体胚培养
18世纪,胚种植在土壤中,萌发.
1904年Hanning进行萝卜 和辣根菜成熟胚培养
2.成熟胚培养的目的
（1）研究种子萌发时胚乳与胚的关系 （2）胚乳对幼苗初期生长的营养作用 （3）研究成熟胚生长发育过程的形态建成 （4）各种生长物质对形态建成的影响 （5）打破种子休眠，缩短育种周期
不定芽---生根培养----植株。
胚乳培养过程
胚乳
愈伤组织
形态发生
胚状体发育成苗
不定芽苗
2、胚乳培养基与培养条件 培养基 培养条件
3、胚乳再生植株的染色体倍数
稳定型：三倍体 畸变型：除少数是三倍体，多数是由多种倍性
细胞组成的嵌合体
4、胚乳培养的应用
（1）胚乳培养可得到三倍体植株，产生无 籽果实。或加倍形成六倍体植株进行育种。 （2）胚乳培养可得到倍性不同的愈伤组织， 可分离和筛选各种类型的非整倍体植株。